2013

Taxonomia Se ubica según la 9° edición del Manual de

Determinaciones de Bergey´s en:

GRUPO 5: Bacilos Gram negativos anaerobios facultativos

Subgrupo 1: Flia Enterobacteriaceae

Subgrupo 2: Flia Vibrionaceae

Subgrupo 3: Flia Pasteurellaceae

Género: Actinobacilus

Género: Haemophilus

Género Pasteurella

Características del Género Son bacterias cocobacilares Gram (-)

Inmóviles, no esporulados

Anaerobios Facultativos

Metabolismo Oxidativo o Fermentativo

Requieren de una atmosfera 5-10 %

Temperatura Optima 35-37° C

pH optimo 7,4-7,8

Ocasionalmente forman cortos filamentos, “bacilos pleomórficos”

Son exigentes en su requerimiento nutricionales

Hábitat-reservorio Nasofaringe único nicho ecológico

Forma parte de la flora naso-oro-faríngea normal, H. influenzae, H. parainfluenzae, y particularmente las formas no capsuladas

Algunos biotipos son pobladores del tracto genital

Dentro del género Haemophilus: La especies H. influenzae capsuladas (a, b, c, d, e y f)

Serotipo b (Hib), más virulenta

Otros Haemophylus:H. parainfluenzae

H. aphrophilus

H. paraprhophilus

H. aegyptus

H. ducreyi

H. haemolyticus

H. parahaemolyticus

H. segnis

Morfología de las colonias Son pequeñas y translúcidas (Agar Chocolate)

Característico olor a madriguera de ratón por la producción de Indol

El Agar de Levinthal (contiene eritrocitos de caballo) diferencia las cepas capsuladas mucoides y brillantes de 3-4 mm de diámetrono de las no capsuladas pequeñas (rocío) ásperas y rugosas con un diámetro 0,5-1,5 mm.

Morfología de las colonias

Agar Chocolate

Medios de cultivos La mayoría de las especies requieren hemina (factor X)

o NAD (factor V) o ambos

Crecen bien en Agar Chocolate, algunas en Agar Sangre de oveja al 5%

Estructura Antigénica Posee en sus envolturas 3 factores antigénicos

importantes:

Polisacárido capsular ( 6 tipos a, b, c, d, e, f)

LPS (endotoxina)

Proteína de membrana externa (proteasa Ig A)

Patogenia Los pilis y las adhesinas: colonización de bucofaringe. Los componentes de la pared celular bacteriana (lipopolisacárido

y glicopéptidos de bajo peso molecular): alteran la función ciliar causando daño al epitelio respiratorio.

Se translocan a través de las células epiteliales y transendoteliales: ingresando al torrente circulatorio.

En ausencia de Ac opsonizantes: bacteriemia y diseminación a meninges u otros focos distales.

Principal factor de virulencia de H. influenzae tipo b: capsula antifagocitica contiene polirribosol-ribitol-fostatO (PRP)

Riesgo de Meningitis y epiglotitis es mayor en pacientes carente de Ac frente al PRP, reducción del complemento y esplectomia.

Proteasas de Ig A1: facilitan la colonización de las superficies mucosas al interferir con la inmunidad humoral.

FisiopatologíaColonización de Nasofaringe (Hib)

Infección Respiratoria

Bacteriemia

Diseminación con localización secundaria

Barrera Hemato-encefálica

Meningitis

Sistema Osteoarticular

Pulmón

Pericardio

Haemophilus Influenzae Encapsulado Tipo b es el agente etiológico

más común de meningitis bacteriana en niños de 1 mes a 4 años de edad

Colonización Nasofaríngea en huéspedes susceptibles, invasión del torrente circulatorio y posterior siembra en las meninges

Asociado a infecciones como epiglotitis, celulitis, artritis séptica y neumonía

Haemophilus Influenzae No Encapsulado Menos invasivo, capaz de generar respuesta

inflamatoria cuando queda atrapado en un sitio luminal adyacente a la flora respiratoria normal, como oído medio, senos para nasales o los bronquiolos produciendo:

Bronquitis Crónica

Otitis media

Sinusitis

Neumonía

Identificación Hay características principales para la identificación

de las especies:

a. La necesidad del factor V

b. Requerimiento del factor X para el desarrollo

Fenómeno de Sateletismo

Pruebas bioquímicas diferenciales:

Producción de Indol, Ureasa, Ornitina Descarboxilasa (Biotifipicación del H. influenzae)

Identificación de Género

Biotipificación de H. influenzae Las diferentes cepas pueden ser identificadas

empleando las siguientes pruebas bioquímicas:

Fenómeno de Sateletismo

Requerimiento de Factores

H.influenzae

S. aureus

Muestra Clínica

LCR (centrifugado),orina, y suero Otras muestras: esputo, sangre

sobrenadante sedimento

Diag. Presuntivo rápido: (Ag soluble): CIE, Kit para H.i, S. neumoniae y N. meningitidis

Coloración de Gram, Test de Quellung, Coaglutinacion

Examen directo: coloración de Gram: bacilos Gram (-) pleomorficos

Agar Sangre, Agar Chocolate + 0,5-1% extracto de levadura

sembrar

Incubar 37° C, 24 hs 5-10% CO2 y humedad

Obs. Macroscópica: 1) colonias mucoides de 3-4 mm (capsuladas)2) colonias rugosas 0,5-1,5 mm (no capsuladas)

Obs. Microscópica: bacilos o cocobacilos pleomorficos Gram (-)

Diagnostico Presuntivo

Catalasa (+)Oxidasa (+)Requerimiento de factores X, V (ambos)Fenómeno de sateletismo

Diagnostico Confirmatorio: serología contra Ag capsular: a, b, c, d, e y f

Antibiograma

Epidemiología Mecanismo de Transmisión: por vía inhalatoria a partir

de los casos activos, de los convalecientes o portadores

Fuente de Infección: Hombre. La incidencia del estado portador es alrededor del 70% en niños pequeños y el 35% en adultos

Distribución Geográfica: las infecciones ocurren en todo el mundo sobre todo en los países de bajos recursos

Epidemiología en Argentina

Introducción de la Vacuna contra el haemophylus influenzae serotipo b

Resistencia a los ATB La resistencia a antibióticos ha incrementado , entre las

cepas de H. influenzae, mayormente en términos de resistencia a la ampicilina mediada por ß-lactamasas.

Por lo general, aquellas cepas resistentes a la ampicilina son también resistentes al cloranfenicol

Son susceptibles a las Cefalosporina de 3° generación: ceftriaxona, cefotaxime, ceftizoxima, ceftazidima

En la actualidad la mejor opción amoxicilina-clavulánico o ampicilina-sulbactama

También se utiliza trimetroprima-sulfametoxazol, Ciprofloxacina, Azitromicina

MUCHAS GRACIAS…