histologia - introdução - 1

1

Prof. Vanessa C. de Almeida

[email protected]

Histologia(Introdução)

UEPB O que é Histologia?

Etimologia - do grego hystos =tecido + logos = estudo

• É o estudo dos tecidosbiológicos, sua formação,estrutura e função. É uma dasdisciplinas fundamentais doscursos das áreas de saúde ebiológicas.

Termos da Histologia

• Arranjo histológico – forma como o tecido se apresenta. Como estão organizadas suas estruturas celulares e/ou extracelulares;

Ex.: Arranjo do tecido epitélial – células justapostas e poliedricas com pouco material

extra celular;

Considerações Gerais

• Tecido adulto

- Conjunto de células diferenciadas;- Um tecido é um conjunto de células que desempenham uma determinada função num organismo.

• Tecido Embrionário

- Células totipotentes

- Poder de diferenciação p/ qualquer tecido

Mesoderme - se multiplica ese diferencia originando porexemplo, o esqueleto, osmúsculos, tecido conjuntivo eos sistemas circulatórios,excretor e reprodutor.

Ectoderme - epiderme,cérebro, medula e nervos

Endoderme - órgãos do aparelho digestivo, revestimento interno do sistema respiratório, fígado, pâncreas

Células geneticamente idênticas

Células distintas na forma e função

TECIDOS(Células com morfologia e função semelhantes)

diferenciação celular

agrupamento

2

Histologia Humana

• Epitelial;

• Conjuntivo;

- Cartilaginoso;

- Ósseo;

- Adiposo;- Sanguíneo*;

- Linfático*;

• Nervoso;

• Muscular

• Principais características dos 4 tipos básicos de tecidos

Histologia Humana

Tipos de Tecidos

Como é preparado o

material de estudo das

aulas práticas?

Procedimentos básicos em

histologia• Estudo das células

– “in vivo”– “in vitro”– em cortes histológicos

•• Preparação dos tecidosPreparação dos tecidos– Bloco de tecido– Fixação– Impregnação– Micrótomo – 5 a 10 µm– Montagem– Coloração

• Corantes básicos: Eosina• Corantes ácidos: Hematoxilina

• Preparação dos tecidos– Colheita do material - é a obtenção da peça, porbiópsia ou necropsia.

3

– Fixação– Tratamento que visa impedir a destruição das células porsuas próprias enzimas (autólise), ou bactérias. A fixaçãovisa ainda endurecer os tecidos, tornando-os maisresistentes e favoráveis às próximas etapas da técnica

histológica.A fixação pode ser feita por processos físicos ou químicos.A fixação química, mais usada em Histologia é o formol eo líquido de Bouin (uma mistura de formol, ácido pícrico eácido acético).

Fixador: Formol, líquido de Bouin, etc.

Água e etanol (50%) Água e etanol (75%) Água e etanol (100%)Água e etanol (80%)

– Desidratação– Visa retirar a água dos tecidos, a fim de permitir aimpregnação da peça com parafina. Para isto, a peça ésubmetida a banhos sucessivos em álcoois de teorcrescente (ex.: álcool a 70%, 80%, 90% e 100%).

Etanol e xilol (75%) Etanol e xilol (100%)Etanol e xilol (80%)Etanol e xilol (50%)

– Diafanização– Visa impregnar a peça com um solvente de parafina. Omais usado é o xilol.

Xilol e parafina/resina (75%)




– Impregnação– Tem a finalidade de permitir a obtenção de cortessuficientemente finos para serem observados aomicroscópio. Para isso os tecidos devem ser submetidos abanhos de parafina a 60°C, no interior da estufa. Em estadolíquido, a parafina penetra nos tecidos, dando-lhes, depoisde solidificada, certa dureza.

– Inclusão– É a passagem da peça que estava na estufa para umrecipiente retangular (forma) contendo parafina fundida que,depois de solidificada à temperatura ambiente, dá origem aochamado “blocobloco dede parafinaparafina”.

– Microtomia– É a etapa em que se obtém delgadas fatias de peçasincluídas na parafina, através de um aparelho chamadomicrótomo, que possui navalha de aço. A espessura doscortes geralmente varia de 5 a 10 um (micrômetros). (1um = 0,001 mm)

4

– Extensão - Montagem da lâmina

– Os cortes provenientes da microtomia são “enrugados”.Para desfazer estas rugas, são esticados num banho deágua a 58°C, e “pescados” com uma lâmina. Leva-seentão, à estufa a 37°C, por 2 horas, para que se dê acolagem do corte à lâmina, pela coagulação da gelatinacontida na água quente.

- Coloração- Tem a finalidade de dar contraste aos componentes dos tecidos, tornando-os visíveis e destacados uns dos outros.

a) Eliminação da parafina - banhos sucessivos em xilol.b) Hidratação - é executada quando o corante utilizado é solúvel em água.c) Coloração - os corantes são compostos químicos com

determinados radicais ácidos ou básicos que possuem cor, e apresentam afinidade com estruturas básicas ou ácidas dos tecidos. Usa-se hematoxilinahematoxilina, corante básico, que se liga aos radicais ácidos dos tecidos, e eosinaeosina, corante ácido que tem afinidade por radicais básicos dos tecidos.

ColoraçãoOs componentes que se combinamcombinam comcom corantescorantes ácidosácidos sãochamados acidófilosacidófilos e os componentes que se combinamcombinamcomcom corantescorantes básicosbásicos são chamados basófilosbasófilos.

Por exemplo, os núcleos das célulasnúcleos das células, onde predominam substâncias ácidasácidas (DNA), são basófilosbasófilos, ou seja, coram-se pela hematoxilinahematoxilina

(corante básico de cor roxa); por sua vez, o citoplasma, onde predominam substâncias básicassubstâncias básicas (proteínas estruturais), é acidófiloacidófilo, corando-se pela

eosinaeosina (corante ácido de cor rosa).

Corantes básicos: Hematoxilina

Corantes ácidos: Eosina

- Montagem- É a etapa final da técnica histológica, e consiste na colagemda lamínula sobre o corte, com bálsamo do Canadá, que éinsolúvel em água. A lamínula impede que haja hidratação docorte pela umidade do ar ambiente, permitindo então queestas lâminas se mantenham estáveis por tempo indefinido.

Fotomicrografia de cortes histológicos corados por HE – Hematoxilina-Eosina.

Como iremos interpretar

as imagens visualizadas?

5

“Os cegos e o elefante”

Poema de Sake

“Eram seis homens do Industão,de saber muito inclinados,que o elefante foram ver,(apesar de todos cegos)a fim de que, através da observação,pudessem satisfazer suas mentes.

O primeiro acercou-se do elefanteE, acontecendo tocarO forte e vasto flanco,Logo começou a exclamar:“Abençoai-me! Mas o elefantea uma parede muito se parece.”

O segundo, sentindo a presa,Gritou: “Oh, o que temos cá tãoRedondo, liso e agudo?Para mim está claro,Esta maravilha de elefanteÉ muito parecida com uma lança.”

Os demais versos narram a experiênciados outros quatro cegos e, como cada umtocasse diferente parte do corpo doanimal, seu conceito de um elefantediferia muito do outro companheiro.

“Eles eram como jovens microscopistasque estudam cortes simplese imaginam o “todo” a partir de partes simplescom muitas falsas concepções.Especialmente se nunca aprenderamA raciocinar em três dimensões.”

6

Interpretação de cortes histológicos

� Para que se tenha uma noção exata da formatridimensional do objeto, deve-se fazer uma série decortes seriados e reconstruir mentalmente a formado objeto pela sobreposição de imagens.

� Costuma-se obter cortes do objeto em diferentesplanos para se ter dados adicionais sobre a suaestrutura microscópica.

Prof. Vanessa C. de Almeida

[email protected]

FIM...

UEPB

histologia - introdução - 1

Documents