Universidad Nacional Autónoma de México

Colegio de Ciencias y HumanidadesPlantel Sur

Práctica 2. Acción de la amilasa sobre el almidón

Equipo: 1Autores

Medina Mateos Andrea Alejandra Silva de Paz Daniel Fernando

Valdivia Díaz Lissette Vilchis Conde José Manuel

Práctica 2. Acción de la amilasa sobre el almidón

Preguntas generadoras:

¿Cómo actúa la amilasa sobre el almidón?

¿Cómo está formado el almidón químicamente?

¿Qué es la amilasa desde el punto de vista químico?

¿Cuál es papel que desempeña el almidón en los animales?

¿Por qué es necesario para los animales que la amilasa actúe sobre el

almidón?

Hipótesis

Nuestra suposición para esta práctica es que en cada uno de los tubos veremos

diferentes resultados como producto de los indicadores. Creemos que en donde

podremos observar un cambio importante es en el tubo con amilasa+ Lugol+

Benedict dado que con el Benedict se podrá detectar la presencia de azúcares

simples (el producto que esperamos con la digestión del almidón).

Objetivos

Identificar la acción de la amilasa de la saliva sobre el almidón

Identificar los productos de la acción de la amilasa sobre el almidón

Caracterizar la digestión enzimática realizada por la secreción de las glándulas

IntroducciónLas enzimas son catalizadores que aceleran la velocidad de las reacciones

metabólicas

Para el proceso de digestión, las biomoléculas ingeridas en la dieta deben ser

degradadas a sus componentes más sencillos para ser absorbidas a nivel del tubo

digestivo y así llegar al lugar correspondiente a nivel celular.

La digestión de los carbohidratos comienza en la boca, donde los alimentos se

mezclan con la Amilasa salival que degrada los enlaces del almidón liberándose

Maltosa, Glucosa y dextrinas de almidón que poseen todos los enlaces. La acción

de las enzimas, por sus características físico-químicas, puede afectarse por las

condiciones presentes en el lugar de acción de éstas. Entre los principales

factores que pueden modificar la acción enzimática tenemos:

. La temperatura:

. El pH:

. Inductores e inhibidores:

Los inhibidores tienen gran utilidad en bioquímica, ya que ayudan a

determinar la especificidad de la enzima por el sustrato, la naturaleza de los

grupos funcionales en el mantenimiento de la estructura activa de la

enzima. Estos compuestos no son alterados químicamente por la enzima.

De acuerdo al tipo de inhibición que ejerzan éstas sustancias, se han

clasificado en :

Inhibidores Reversibles.

Inhibidores Irreversibles

El almidón es una mezcla de dos polisacáridos, amilasa (10-20%) y amilopectina (80-90%), ambos formados por unidades de glucosa (Cox y Nelson, 2006). La amilasa posee una estructura lineal, mientras que la amilopectina es ramificada. El almidón está presente en el trigo, la patata, el arroz, el maíz, etc., constituyendo la reserva de energía de la mayoría de vegetales, y es la principal fuente de energía de los alimentos que comemos. Para que el cuerpo humano pueda aprovechar la glucosa del almidón es preciso degradarlo previamente. La saliva humana contiene entre 0 y 3 mg/ml de una enzima llamada amilasa, capaz de romper los enlaces que unen las moléculas de glucosa en el almidón

Método

A. Obtención de la enzima amilasa

Después de enjuagar la boca, mastica un trozo de papel filtro para estimular la

salivación. Los líquidos segregados se van pasando a un embudo que tenga un

papel filtro, el filtrado se coloca en un tubo de ensayo hasta obtener 1 ml.

La saliva así obtenida se diluye empleando 1ml de saliva y 10 ml de agua

destilada, así se obtiene la preparación de enzima base.

Se prepara una solución al 2% de almidón, para lo cual se pesan 2 g de almidón y

se disuelven en 100 ml de agua destilada

Se colocan 2 ml de agua destilada en un tubo de ensayo se le agregan 2 ml de la

solución de almidón al 2% y 2 ml de la solución base de la enzima. En otro tubo se

colocan 2 ml de agua destilada y se le agregan 2 ml de la solución de almidón al

2%.

Los tubos se colocan en baño maría a 37° C, durante 15 minutos dejando que la

amilasa vaya hidrolizando al almidón

Una vez transcurridos los 15 minutos se sacarán los tubos del baño maría y se

harán las pruebas del Lugol y Benedict

B. Reacciones de Lugol para almidón y Benedict

La prueba del yodo o el Lugol permite identificar la presencia de almidón, con este

reactivo se obtiene un color azul-violeta característico. Toma 1 ml de la disolución

de cada uno de los tubos y añade unas gotas de Lugol a cada una de ellas. Si no

existe la hidrólisis del almidón la prueba será positiva.

La prueba de Benedict permite identificar a los azucares reductores. Toma 1 ml de

cada uno de las disoluciones de los tubos y agrégales 1 ml del reactivo de

Benedict, enseguida coloca ambos tubos en baño María, si existe hidrólisis del

almidón se formará un precipitado rojo ladrillo que indica la presencia de azúcares

como la glucosa y la maltosa

Resultados

Tubo Coloración

Amilasa+ Benedict Azul

Amilasa+ Lugol Café

Almidón+ Lugol Azul fuerte

Almidón+ Benedict Azul

Amilasa+ Almidón+ Benedict+ Baño María Rojo ladrillo

Amilasa+ Almidón+ Lugol+ Baño María Café

Muestra de los tubos 1,3y 5 de izquierda a derecha

Proceso de Baño María (Tubo 6)

Tubos ordenados de Izquierda a derecha en orden

Discusión de resultados

Tubo 1: En el tubo 1 solo se observó la coloración del Benedict sobre la

amilasa dado que no existe reaccion alguna

Tubo 2: En el tubo 2 se observó un color café, característico del Lugol dado

que no existe reacción alguna debido a que el Lugol identifica al almidón

Tubo 3: En el tubo 3 se observó el cambio de coloración del lugol+ Almidón a

un color azul-violeta, ello indica una muestra positiva a la presencia del almidón

Tubo 4: En el tubo 4 se observó un color azul caracteristico del reactivo de

Benedict dado que no existe identificación de azúcares simples.

Tubo 5: En el tubo 5 pudimos observar la reacción esperada en la cual en

presencia de amilasa, el almidón inicia su degradación en azúcares simples, esto

se verá reflejado en la tonalidad rojo ladrillo obtenida al agregar el reactivo de

Benedict y tras el baño María.

Tubo 6: En el tubo 6 no vimos cambio en la coloración del lugol ya que no

existe la presencia de almidón ya que ha reaccionado la amilasa.

Replanteamiento de la hipótesis

Después de la hipótesis y predicciones dadas:

“Nuestra suposición para esta práctica es que en cada uno de los tubos veremos

diferentes resultados como producto de los indicadores. Creemos que en donde

podremos observar un cambio importante es en el tubo con amilasa+ Lugol+

Benedict dado que con el Benedict se podrá detectar la presencia de azúcares

simples (el producto que esperamos con la digestión del almidón).”

Podemos decir que nuestra predicción no estaba tan errada pero en cuanto ha

contenido pudimos ver que en verdad los tubos muestra nos indican coloraciones

diversas y en la degradación de almidón observamos además un cambio en la

textura de la mezcla. Otro detalle a destacar es nuestra omisión del detalle de la

temperatura a la cual reaccionaría la enzima al simular la temperatura corporal.

Conclusión

Llegamos a la conclusión de que la enzima amilasa degrada al almidón bajo

ciertas condiciones como lo es la temperatura corporal así como el tiempo de

reacción ya que va degradando de poco en poco al almidón en azúcares simples.

Con ello podemos concluir que la digestión química de los nutrientes es específica

y pudimos observar mediante los reactivos (Benedict y Lugol) como en un

momento dado el almidón estaba presente en la solución y al agregarles saliva

(amilasa) este iba descomponiéndose a manera tal de lograr que el Benedict

identificara monómeros.

Conceptos clave Enzima: Moléculas proteínicas que sirven como catalizadores de reacciones químicas Digestión: Proceso de captura, trituración, descomposición y absorción de nutrientes que inician como alimento. Digestión química: Proceso por el cual se descomponen polímeros en monómeros Degradación: Proceso de ruptura de enlaces de polímeros para formar monómeros. Secreciones de glándulas del aparato digestivo: Se refiere a las enzimas secretadas por glándulas como el páncreas y el hígado que ayudan a la degradación de nutrientes, estos pueden ser enzimas o co-enzimas. Reacciones químicas en el interior del cuerpo: Azúcares simples: Serie de Glúcidos compuestos por unidades simple de un tamaño menor que al unirse forman azúcares complejas Azúcares complejos: Cadenas de azúcares simples unidas por enlaces, un ejemplo de estas es el almidón Polímeros: Cadenas de aminoácidos formado de monómeros mediante enlaces. Son moléculas de mayor tamaño Monómeros: Molécula diminuta de aminoácidos que al unirse forman polímeros.

Bibliografía PAPIME, ELABORACIÓN DE UN MODELO CONSTRUCTIVISTA DE

ESTRATEGIAS DE APRENDIZAJE BASADAS EN IDEAS PREVIAS PARA LA ENSEÑANZA DE LOS CONCEPTOS BÁSICOS DE LAS ASIGNATURA DE BIOLOGÍA III, México, UNAM

http://mazinger.sisib.uchile.cl/repositorio/lb/ciencias_quimicas_y_farmaceuticas/schmidth02/parte07/01.html

Curtis, Helena, Barnes N. Sue, Biologia, Madrid, España, Editorial Panamericana, 8ª edición, 2003, pp. 70-100.