LABORATORIO DE BIOQUIMICA

GRUPO JUEVES

Laboratorio No. 2: Determinación de pH en soluciones fisiológicas y

preparación de solución amortiguadora de fosfato salino (PBS).

Cristhian Martin Forero Vargas 2131314

Mauricio Rivera Quintero 2121315

Grupo: jueves Puesto: Mesón 2 Grupo 1 Fecha: 30 octubre 2014

INTRODUCCION:

En esta práctica, se trabajó con soluciones amortiguadoras o buffer cuya función

es la de mantener el pH constante dentro de una solución en la que se esté

trabajando y además se miraron sustancias del cuerpo como amortiguadores

(plasma sanguíneo, otros).

Los tampones o buffer son usados para para evitar que ocurran otras reacciones

no deseadas.

OBJETIVOS:

Prepara soluciones amortiguadoras con un pH determinado.

Observar cambios de pH en algunas soluciones tras agregarles acidos o

bases.

Determinar la capacidad de algunas sustancias del cuerpo humano en

soportar cambios de pH

METODOLOGIA:

Experimento #1: Medidas de pH en soluciones.

Plasma: se tomó el plasma sanguíneo de las muestra entregada por el profesor y

se transfirió a un tubo falcón, se midió el pH con ayuda de tiras de papel indicador

y el pHmetro.

Orina: se tomó la muestra de orina entregada por el profesor y se midió el pH

solo con papel indicador.

Leche: se tomó la bolsa de leche que se trajó al laboratorio y se trasfirieron 20mL

aproximadamente a un vaso de precipitado de 50mL y se procedió a medir el pH

con papel indicador.

Luego se registraron los resultados nuestros y de los compañeros de mesón en

una tabla para su posterior análisis y comparación.

Experimento #2: El plasma sanguíneo como amortiguador.

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-Al plasma sanguíneo previamente se trasfirió al tubo falcón, se midió con papel

indicador y se registró el pH inicial.

- Agregamos 0.5 mL de solución 0.1M de HCl se midió con papel indicador y se

registró el pH.

- Agregamos 0.5 mL de solución 0.1M de NaOH se midió con papel indicador y se

registró el pH.

- Agregamos 5 mL de agua destilada se midió y se registró el pH.

Experimento #3: Solución no amortiguadora.

-En un vaso de precipitado pequeño, agregamos 40 mL de agua destilada,

medimos con papel indicador.

-Se agregó 0.5 mL de solución 0.1M de NaOH y se mide el pH, se repite con HCl

0.1M.

Experimento #4: Amortiguador no fisiológico.

-Por grupo de mesón se le peso y agrego los distintos reactivos, hasta conseguir

una solución con pH 7.4, luego se revisó los cambios de pH con ayuda del

pHmetro repitiendo el procedimiento del segundo experimento.

RESULTADOS

EXPERIMENTO 1 (medidas de pH en soluciones)

Al medir el pH con con las tiras del papel indicador:

Leche: pH 7

Orina: pH 6

Plasma con EDTA: pH 8.5

Al medir el pH con pH metro

Plasma sanguíneo: pH 7.432

EXPERIMENTO 2 (El plasma sanguíneo como amortiguador)

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pH inicial del plasma sanguíneo: 8.5

pH final 1 (más 0.5 ml de HCL 0.1M): 5.5

pH final 2 (más 0.5 ml de NAOH 0.1 M): 6

pH final 3: (más 5 ml de agua destilada): 5

EXPERIMENTO 3 (solución no amortiguadora)

pH inicial de agua destilada: 6.5

pH final 1 (más 0.5 ml de NAOH o01 M): 7.5

pH final 2 (más 0.5 ml de HCL 0.1 M): 4

EXPERIMENTO 4 (Amortiguador no fisiológico)

pH inicial: 7.4

pH final 1 (más 250 ml HCL): 7.273

pH final 2 (más 250 ml NAOH): 7.277

pH final 3 (más 5 ml Agua): 7.300

DISCUSION DE RESULTADOS

Experimento 1

ORINA: La medición del pH de la orina sirve para verificar si hay cambios en los niveles de acidez en el cuerpo; se realiza generalmente para pacientes con riesgo de presentar

pHmetro

pH orina pH LECHE pH PLASMA pH PLASMA

2,1 6 7 8 7,432

2,2 7 6 8 7,699

2,3 7 9 10 7,375

PAPEL INDICADORMESON 2

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cálculos renales. Los valores normales fluctúan entre 4.6 y 8.0 en el pH (estos valores pueden variar según el método de cada laboratorio)

El pH de las orinas analizadas se encontró entre neutro (pH: 7) y ligeramente acido (pH: 6, lo cual estaría entre los rangos normales de la orina según los valores establecidos. Además de que no se observó una variabilidad destacable entre las 3 muestras.

Un pH alto en la orina puede deberse a:

Que los riñones no eliminan apropiadamente los ácidos (Acidosis tubular del riñón, también conocida como acidosis tubular renal)

Insuficiencia renal Infección urinaria

Un pH bajo en la orina puede deberse a:

Cetoacidosis diabética Demasiado ácido en los líquidos corporales (acidosis metabólica), como

la cetoacidosis diabética Inanición

LECHE: El pH de la leche es ligeramente ácido (pH comprendido entre 6,6 y 6,8). Otra propiedad química importante es la acidez, o cantidad de ácido láctico que contiene, que suele estar en torno al 0,15-0,16 %.

La leche analizada en la práctica de laboratorio arrojo valores de pH ligeramente variados ya que se trabajó con distintas marcas de leche, lo cual pudo intervenir en este aspecto; se observó que el grupo 2.1 obtuvo valores de pH neutro; para el grupo 2.2 el pH fue ligeramente ácido y para el grupo 2.3 el pH encontrado resulto ser alcalino.

PLASMA SANGUINEO: La sangre es ligeramente alcalina (pH de 7'35 a 7'45), el incremento de la concentración de bióxido de carbono aumenta la acidez de la sangre, lo que a su vez hace disminuir la capacidad de la hemoglobina para acarrear el oxígeno, o sea, que en parte de la capacidad de que la hemoglobina se combine con el oxígeno está regulada por la cantidad presente de bióxido de carbono.

En las muestras analizadas en el laboratorio con el pH metro se observaron valores de pH entre 7.3 y 7.7, lo que mostro la alcalinidad de la sangre; en los valores obtenidos con los indicadores se observó una alta variabilidad posiblemente por la interpretación de los rangos de pH o porque cada muestra fue medida con un papel cuya rueda era diferente.

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EXPERIMENTO 2

El plasma sanguíneo como amortiguador: en una solución amortiguadora el cambio de pH no se da de manera brusca a diferencia que si fuese una solución no amortiguadora.

EXPERIMENTO 3

El agua destilada como una sustancia no amortiguadora refleja valores altamente variables (cambios bruscos) en el cambio de pH.

EXPERIMENTO 4

Al tratarse de una solución amortiguadora, se mantiene el pH con minúsculas alteraciones

tal y como se observa en el experimento de laboratorio; ya que una sustancia

amortiguadora mantiene el pH en un rango cerca del valor de pKa, esto quiere decir que

frente a un agregado de ácido o álcali el pH de la solución se mantendrá cercano al valor

de pKa.

se adicionó

pH inicial 8,5 PLASMA

pH final 1 5,5 HCL

pH final 2 6 NAOH

pH final 3 5 AGUA DESTILADA

PLASMA SANGUINEO

se adicionó

pH inicial 6,5 AGUA DESTILADA

pH final 1 7,5 NAOH

pH final 2 4 HCL

AGUA DESTILADA

se adicionó

pH inicial 7,4

pH final 1 7,273 HCL

pH final 2 7,277 NAOH

pH final 3 7,3 AGUA DESTILADA

AGUA DESTILADA

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BIBLIOGRAFIA:

1. GerberGS, Brendler CB. Evaluation of the urologic patient: history,

physical examination, and urinalysis. In: Wein AJ, Kavoussi LR,

Novick AC, et al., eds. Campbell-Walsh Urology. 10th ed.

Philadelphia, Pa: Elsevier Saunders; 2011:chap 3.

2. MURRAY, Robert K. (2010) BIOQUIMICA Harper, Bioquimica

ilustrada 28° ED. Editorial MCGraw-Hill.