IQS-CROMA PNT-A-xxxx tR-96

413

lliSTRUMENTOS y EQUIPOS

Balanza analiacutetica con precisi(m de plusmnOI mg

Columnas cromatograacutelicas IIPIC de fase inversa

Cromatoacutegrafo de HPLC con detector lJV

Sislema de integracioacuten cromatogrMica y tratamiento de datos Gynkosoft

Jeringa de inyeccioacuten de vidrio para HPLC de lOO ~L

Medidor de pH

Sistema de filtracioacuten al vado

REACTIVOS Y PATRONES

Acctonitrilo (Cl-l~CN) calidad HPLe

Agua (1120) calidad MilliQ

fosnlto Monopotaacutesico (KHraquoO) Puriacutesimo PANREAC

Trictilarnina (C2IlJCNIJll Pura de FEROSA

Aacutecido Fosfoacuterico (HmiddotIP01) 85 en peso Puriacutesimo PANREAC

AccIona Puriacutesima PANREAC

Ftalato de Dimetilo Puriacutesimo PANREAC

(3-Naftol Puriacutesimo PANREAC a-Nafldamina Pura de FEROSA

PROCEDIMIENTO

l Preparacioacuten de patrones

l l Preparaciuacuten del palroacuten madre (p 1)

IQS-CROMA PNT-A-xxxx lR-96

51 ]

Se pesan (con precisiuacuten de plusmnO I mg) las siguientes cantidades de los reactivos cuyas

calida(ks se describieron anteriormente las sustancias liacutequidas se toman en volumen con

pipeta volumeacutetrica de doble aforo

Acetona 1000 mI

Flalato de Dimctilo 050 mI

r~-Nanol ~O() mg a-Natlilamina ISO mg

Se enrasan estas cantidades en matraz volumeacutetrico a 100 mI con Acetonitrilo Pt

12 Preparacioacuten del patroacuten madre (PI )

Este patroacuten se prepara en aquellas ocasIOnes en las cuales la columna no separa los

compuestos del patroacuten madre PI a las condiciones de aplicacioacuten del test

Se toman los liacutequidos con pipeta volumeacutetrica de doble aforo y se pesan los soacutelidos con

precisioacuten de plusmn O I mg

Acctona IOno mI

a-Naftilamina ISO mg

Se ~nrasa In anterior eacutel 1no mI en malraz volumeacutetrico con Acetonitrilo PI

11 Preparacioacuten de las mezclas ele prueba (PA) y (Pn)

iexcl partir de PI se preparan p y JI IOO() mi dc PI (tomados con pipeta volum~trica de

dohk aforo) se diluyen a lOO mI con una mezcla de CHCN H ~O (-Hl W vv)-fase moacutevil

1-(1) IO ()O mI dc PI (lomados Clln pipeta volumeacutetrica d~ doble aforo) sc diluyen a 1100 mi

con 1I11ltl mezcla de CII CN Tampoacuten FllSlilto (40 uacuteO vv)-Iase moacutevil 2-(PiexclJ

IQS-CROMA PNT-Aacute-xxxx lR-96

613

14 Preparacioacuten de las mezclas ele prueba (P A) Y (PB)

A partir de P 1 se preparan P y Po 1000 mi de P I (tomados con pipeta volumeacutetrica de

doble aforo) se diluyen a lOO mi con una macla de CII JCNH 20 (4060 vv)-fase moacutevil 1shy

(P)

IO()O mI de PI (tomados con pipeta volumeacutetrica de dohle aforo) se di luyen a 100 111 con

una mezcla de CII CN Tampoacuten fos fato (4060 vv)-fase moacutevil 2- (PB)

las mezclas de enrase se preparan comhinando 40 volumenes de Acetonitri lo con 60

volumenes de Agua o tampoacuten Fosfato seguacuten sea el caso

15 preparacioacuten de las t~lses moacuteviles

La fase moacutevil I es Acdonitrilo-Agua con una composicioacuten de 4060 vv

La fase moacutevil 2 es Acetonitrilo-Tampoacuten Fostato de composicioacuten 4060 vv El Tampoacuten

Fosfato tiene una concentracioacuten de 0025 M en Fosfato (como KH 2POiexcl) y de 0030 M en

Trietilamina y se prepara pesando las siguientes cantidades

Fosfato Diaacutecido de Potasio (KI1 2JgtOJ 1110 mg

1450 mg

Lo anmiddotterior se diluye a 10 litro con agua MilliQ y se lleva hasta pll = 3 (lO con aacutecido

Fosfoacuterico (1110-1) lid X5deg1 (n peso Esta solucioacuten puede guardarse en la nevera pero se

dehe siempre filtrar antes de lIsarla con filtro de OLIS ~lm

IQS-CROMA PNT-A-xxxx IR-96

713

2 Condiciones cromto~raacuteficas

Equipo de cromatografiacutea II PIC con dos canales para solventes

Volumen de inyecciuacuten 20 pI

Columna A examinar (fase inversa)

temperatura de columna 15(

Detecciuacuten UV J =- 254 nm

Composicioacuten de la fase moacutevil 1 CH 1CN-H20 (40 60 vv)

Composicioacuten dc la fase moacutevit 2 (11 leN-Tampoacuten Iosfato (4060 vv)

Flujo de la fase moacutevil 100 mllmin

Presioacuten Variable seguacuten la columna ensayada

l Conelicinnes de inte~raciOacuten~

Las condiciones de integracioacuten cromatograacutefica del sistema de tratamiento de datos

(Gynkosoti) se indican en los anexos nl y n2 especialmente en lo que se refiere al

DET-File (archivo ltle integraciuacuten y al PRM-Fi1e (archivo de int~)rmc) l

4 Aplicacioacuten de la mezcla ele prueba (P)

Para aplicar la mezcla de prueba es necesario llevar a cabo las siguientes operaciones

-Colocar en los recipientes de solventes de las dos liacuteneas a usar agua MilliQ (que se cambia

cada diacutea) y cctonitrilo gradn IIPI ( desgasillcar los solventes de la fase moacutevil en caso ltk

que el cromatoacutegrafo no cuente con desgasificador incorporado

La desgasitlcacioacuten se puede ellctuar con I [clio o en un bantilden de ultrasomdus

IQS-(ROllA PNT-A-xxx )R-

~13

bull Poner en marcha el instnunellto Bombas detector y otros elementos cou que cuellte el

lTomatoacutegrafo

bull Fijar la longitud de onda de detetcioacuten

bull Abrir la purga y purgar dos liacutellcas asiacute

lJlla de ellas COll agua MilliQ (l()()~ de Aglla a traveacutes de la liacutenea) hasta que la presioacuten se

estabilice y se evidencie que sale agua por la salida de la purga otra liacutenea con Acetonitrilo

(100 de Acetonitrilo en la liacutellea) hasta qlle se estabilice la presioacuten y se Ilote que sale

Acetonitrilo por la salida de la purga

-eITar la purga

bull Verificar que d hllcle de inyctciuacutell es el adecuado limpiar el inyector primero con 500 mi

de agua Mil1iQ y luego COll 500 mi de Acetonitrilo usando para ello una jeringa de plaacutestico

de 1000 Inl

bull Instalar la coh~mna que se va a probar y fijar la temperatura de trabajo

Establecer las tondiciones al1ltcuadas de composicioacuten de fase moacutevil (t~lse moacutevil 1) y aumentar

el flujo ltle la misma desde O hasta 100 mVmin alimentando 010 mVmin cada vez y dejando

que la presioacuten se estahilice despneacutes de caela illcremcnlo

Esperar a que el irlstnunellto esteacute estable en lo que se refiere a la temperatura el flujo de la

fase moacutevil y la presiuacutelI

bull Establecer las condiciolles del sisterna de integracioacuten y tratamiellto de datos ltJynkoson (ver

alH OS )

bull Hacer dos inyecciones sucesivas de la mezcla de pmeha 1

middot1 11 caso dl qm haya S()lapallli(~lltl) dl picos eH la iIlylCliuacuten all1lrinr tIl10lICeS ilIYt ltar dos

veces la rnczca (k prlllha 1)

1QS-C lU )l1A PNT-A-xxx 11~-96

913

En aquellas columnas que presenten colas especialmente en el pico de la amina es necesario

cambiar de fase moacutevil para ello se ejecutan los siguientes pasos

bull Bajar el flujo de la fase moacutevil hasta O mlmin en decrementos sucesivos de 010 mlmin

bull En la liacutenea donde estaacute el agua M iIIiQ (tic la fase moacutevil anterior) colocar el Tampoacuten Fosfato

I

bull Abrir la pllfga y purgar este canal (corno se describe antes) hasta que por la salida de la

pllfga se IIOIe qlle sale solllciuacutel aacuteeia (lo que se detecta lIsalldo papellflcdidor de plI)

Cerrar la purga

bull Restahlecer las condiciones lk t()IIPosiciuacutelI de Iiexclse lIIuacutevil (fase lJIuacutevil 2) y ltId flujo de fase

moacutevil (COIIIO se illdiea con allterioridad l

Esperar hata alcanzar la estabilidad del instl1Hncllto

bull Inyectar dos veces sucesivamente la mezcla de pmeba PB

bull Para las columnas lt-lile muestren solapeacuteUniento de picos realizar dos inyecciones sucesivas

de la mezcla de pmeba PB

bull Generar los infOlmes tal COlllO se establece en el anexo n2

5 R~sllllados

u software de integracioacuten SllIllillistra 111 illtonllc que adclIIs llel cromatograll1a incluye

valores para los siglliclItes paraacutemetros d~ cada pico

IQS-CROMA PNT-A-xxx lR-96

10 13

Ndeg del pico

Tiempo muerto t 1) (min)

riempo de retencioacuten (min)

Nombre del pico

Tipo de pico scguacuten la integracioacuten

Aacuterea de pico (mvmin)

Altura de pico (mv)

Anchura de pico a la mitad de h1 altura (min) I

Nuacutemcro de platos tcuacutericos por columna

Resolucioacuten

Asimetriacutea de pico

Factor de capacidad

OBSERVACIONES

Es necesario calcular ademaacutes el nuacutemero de platosmetro la selectividad (a) en caso de que

no haya solapamiento de picos y la altura de plato reducida (h) de la fonna indicada en las

definiciones

Si se trata de hacerle un scguimiento a la columna durante su vida uacutetil es indispensable

comparar los datos ohtenidos con aquellos dados por la aplicacioacuten del test antes del inicio

dduso de la columna

IQS-CROMA PNT-A-xxx lR-96

1113

ANEXOS

N 1 Archivo DET (integracioacuten) del Gynkosoft

N2 Archivo PRM (infornle) del Gynkosoft

N~ Cromatograma de la mezcla ele prueba P A en la fase moacutevil 1 y con la columna

Lichrospher

N4 Cromatograma de la mezcla de prueha PA en la fase moacutevil 2 y con la columna

Lichrospher

Archivo DET (integracitln de los picos) del sistema de tratamiento de

datos

Number of entries 5 File title DETHP

No Time Parameter Name Parameter Value

1 0000 Minimum Area 0000000 2 0000 Minimum Width 0000000 3 0000 Minimum Height 1000000 4 0000 Inhibit Integration On 5 1000 Inhibit Integratlon Off

Archivo PRM (informe) del sistema de tratamiento de datos

File title testPRMHPI050

Signa 1 name Time window from Signal window from Report unidentified peak s Dead time Relative area threshold

AD-5 0000 AUTO On

14 min 00

to to

10000 AUTO

[min]

DE COLOMBIAI IIVERSIDAO NACIONAL

ANEXO Ndeg4 Graacuteficas de linealidad factores de respuesta y sensibilidad

del test de verificacioacuten

LINEALIDAD NoftalDoo

rt1 _ JIIi~

~E~Ego 1000 2000 3000 000 6000

-(ng) 1IonW6go Urpoacute HP-IOSO 021611 OOOIl2I(m) r CUldrado 09997fi

LINEALIDAD

Jllinl

~I=C 5 t2 t2 S8o 200 400 SOO eoo 1000 1200 1400

-Cnll 1IonW6go Urpoacute HP lOS) =022346 OOU2I(m ) r cuadrldo 5 O QQ984

LINEALIDAD Al1lrcello

15 -emiddot

tc1o fI) 100 160 200 260

-CnfII QonohgroU - lClIIO ir t H227 bull OJCl)t~lNw)

wldndo O~16b

LINEALIDAD

-emiddot

t==~fGlo 200 400 EDO ~ t 000

-toIIl Qunotoacutegrolo u HP-IOIiO =(21il10middot O0622(n-A) r wadrdo Ogoo(tQ

LINEALIDAD

Fenlreno rI~

-emiddotminl

~Lc=tE2EIo 100 200 m 400 ltXJ

-CnfII ~o UrpoacutedDlP-tOliO bullbullbull ( 1237S bull 0 14014( ) r OJldrado =O~

SUSTANCIA rCLWgtRADO

tw=TALENO 088815

BFENILO 08_0

F1UORENO 088884

FENANrRENO 088884

ANTAACEHO 088155

1

LINEALIDAD Nlllaleno

rf1 Ir_Imun)

~tjiquestGg1 o 1 OOJ 2000 3 OOJ 4 OOJ 6 OOJ _ (n

Qanortlglfo UIID HP-IOQO ()I(J

= O 1le08 O001IiO(m) cuidrldo 099948

LINEALIDAD Ruarono

n9

LINEALIDAD M ceno

rf11 _( min)

LINEALIDAD Blerilo

n8

O 7oo 400 ID) eoo 1 000 1700 ~-===1-111Qumoblgrlfo l rlID HP-IOQO [W)

u =o 1~18 003 (m) r cuadrado =O09Q53

LINEALIDAD

_~JnIacutenj

~I- C31O O 100 200 300 00 eoo-In

QomoI6gnfoU HP-tOIIO ()I(J 6 bull bull 074l1lgtI bull o 06101(m) r cudrldo =O 099U~

middot~Etc==1o 76 liJ 1li 100 176 1ampJ 116 200 225 260-~olr--ICOOIWJ lO 0501840 O16171(m ) r cuadrdo =OgQ6()t

SUSTANCIA r

NAFTALENO 08ee48

BFENIlO 088853

FlUORENO 088845

FENANTRENO 088818

NlTRACENO 088804

IQS-CROMA PNT-A-xxxx lR-96

51 ]

Se pesan (con precisiuacuten de plusmnO I mg) las siguientes cantidades de los reactivos cuyas

calida(ks se describieron anteriormente las sustancias liacutequidas se toman en volumen con

pipeta volumeacutetrica de doble aforo

Acetona 1000 mI

Flalato de Dimctilo 050 mI

r~-Nanol ~O() mg a-Natlilamina ISO mg

Se enrasan estas cantidades en matraz volumeacutetrico a 100 mI con Acetonitrilo Pt

12 Preparacioacuten del patroacuten madre (PI )

Este patroacuten se prepara en aquellas ocasIOnes en las cuales la columna no separa los

compuestos del patroacuten madre PI a las condiciones de aplicacioacuten del test

Se toman los liacutequidos con pipeta volumeacutetrica de doble aforo y se pesan los soacutelidos con

precisioacuten de plusmn O I mg

Acctona IOno mI

a-Naftilamina ISO mg

Se ~nrasa In anterior eacutel 1no mI en malraz volumeacutetrico con Acetonitrilo PI

11 Preparacioacuten de las mezclas ele prueba (PA) y (Pn)

iexcl partir de PI se preparan p y JI IOO() mi dc PI (tomados con pipeta volum~trica de

dohk aforo) se diluyen a lOO mI con una mezcla de CHCN H ~O (-Hl W vv)-fase moacutevil

1-(1) IO ()O mI dc PI (lomados Clln pipeta volumeacutetrica d~ doble aforo) sc diluyen a 1100 mi

con 1I11ltl mezcla de CII CN Tampoacuten FllSlilto (40 uacuteO vv)-Iase moacutevil 2-(PiexclJ

IQS-CROMA PNT-Aacute-xxxx lR-96

613

14 Preparacioacuten de las mezclas ele prueba (P A) Y (PB)

A partir de P 1 se preparan P y Po 1000 mi de P I (tomados con pipeta volumeacutetrica de

doble aforo) se diluyen a lOO mi con una macla de CII JCNH 20 (4060 vv)-fase moacutevil 1shy

(P)

IO()O mI de PI (tomados con pipeta volumeacutetrica de dohle aforo) se di luyen a 100 111 con

una mezcla de CII CN Tampoacuten fos fato (4060 vv)-fase moacutevil 2- (PB)

las mezclas de enrase se preparan comhinando 40 volumenes de Acetonitri lo con 60

volumenes de Agua o tampoacuten Fosfato seguacuten sea el caso

15 preparacioacuten de las t~lses moacuteviles

La fase moacutevil I es Acdonitrilo-Agua con una composicioacuten de 4060 vv

La fase moacutevil 2 es Acetonitrilo-Tampoacuten Fostato de composicioacuten 4060 vv El Tampoacuten

Fosfato tiene una concentracioacuten de 0025 M en Fosfato (como KH 2POiexcl) y de 0030 M en

Trietilamina y se prepara pesando las siguientes cantidades

Fosfato Diaacutecido de Potasio (KI1 2JgtOJ 1110 mg

1450 mg

Lo anmiddotterior se diluye a 10 litro con agua MilliQ y se lleva hasta pll = 3 (lO con aacutecido

Fosfoacuterico (1110-1) lid X5deg1 (n peso Esta solucioacuten puede guardarse en la nevera pero se

dehe siempre filtrar antes de lIsarla con filtro de OLIS ~lm

IQS-CROMA PNT-A-xxxx IR-96

713

2 Condiciones cromto~raacuteficas

Equipo de cromatografiacutea II PIC con dos canales para solventes

Volumen de inyecciuacuten 20 pI

Columna A examinar (fase inversa)

temperatura de columna 15(

Detecciuacuten UV J =- 254 nm

Composicioacuten de la fase moacutevil 1 CH 1CN-H20 (40 60 vv)

Composicioacuten dc la fase moacutevit 2 (11 leN-Tampoacuten Iosfato (4060 vv)

Flujo de la fase moacutevil 100 mllmin

Presioacuten Variable seguacuten la columna ensayada

l Conelicinnes de inte~raciOacuten~

Las condiciones de integracioacuten cromatograacutefica del sistema de tratamiento de datos

(Gynkosoti) se indican en los anexos nl y n2 especialmente en lo que se refiere al

DET-File (archivo ltle integraciuacuten y al PRM-Fi1e (archivo de int~)rmc) l

4 Aplicacioacuten de la mezcla ele prueba (P)

Para aplicar la mezcla de prueba es necesario llevar a cabo las siguientes operaciones

-Colocar en los recipientes de solventes de las dos liacuteneas a usar agua MilliQ (que se cambia

cada diacutea) y cctonitrilo gradn IIPI ( desgasillcar los solventes de la fase moacutevil en caso ltk

que el cromatoacutegrafo no cuente con desgasificador incorporado

La desgasitlcacioacuten se puede ellctuar con I [clio o en un bantilden de ultrasomdus

IQS-(ROllA PNT-A-xxx )R-

~13

bull Poner en marcha el instnunellto Bombas detector y otros elementos cou que cuellte el

lTomatoacutegrafo

bull Fijar la longitud de onda de detetcioacuten

bull Abrir la purga y purgar dos liacutellcas asiacute

lJlla de ellas COll agua MilliQ (l()()~ de Aglla a traveacutes de la liacutenea) hasta que la presioacuten se

estabilice y se evidencie que sale agua por la salida de la purga otra liacutenea con Acetonitrilo

(100 de Acetonitrilo en la liacutellea) hasta qlle se estabilice la presioacuten y se Ilote que sale

Acetonitrilo por la salida de la purga

-eITar la purga

bull Verificar que d hllcle de inyctciuacutell es el adecuado limpiar el inyector primero con 500 mi

de agua Mil1iQ y luego COll 500 mi de Acetonitrilo usando para ello una jeringa de plaacutestico

de 1000 Inl

bull Instalar la coh~mna que se va a probar y fijar la temperatura de trabajo

Establecer las tondiciones al1ltcuadas de composicioacuten de fase moacutevil (t~lse moacutevil 1) y aumentar

el flujo ltle la misma desde O hasta 100 mVmin alimentando 010 mVmin cada vez y dejando

que la presioacuten se estahilice despneacutes de caela illcremcnlo

Esperar a que el irlstnunellto esteacute estable en lo que se refiere a la temperatura el flujo de la

fase moacutevil y la presiuacutelI

bull Establecer las condiciolles del sisterna de integracioacuten y tratamiellto de datos ltJynkoson (ver

alH OS )

bull Hacer dos inyecciones sucesivas de la mezcla de pmeha 1

middot1 11 caso dl qm haya S()lapallli(~lltl) dl picos eH la iIlylCliuacuten all1lrinr tIl10lICeS ilIYt ltar dos

veces la rnczca (k prlllha 1)

1QS-C lU )l1A PNT-A-xxx 11~-96

913

En aquellas columnas que presenten colas especialmente en el pico de la amina es necesario

cambiar de fase moacutevil para ello se ejecutan los siguientes pasos

bull Bajar el flujo de la fase moacutevil hasta O mlmin en decrementos sucesivos de 010 mlmin

bull En la liacutenea donde estaacute el agua M iIIiQ (tic la fase moacutevil anterior) colocar el Tampoacuten Fosfato

I

bull Abrir la pllfga y purgar este canal (corno se describe antes) hasta que por la salida de la

pllfga se IIOIe qlle sale solllciuacutel aacuteeia (lo que se detecta lIsalldo papellflcdidor de plI)

Cerrar la purga

bull Restahlecer las condiciones lk t()IIPosiciuacutelI de Iiexclse lIIuacutevil (fase lJIuacutevil 2) y ltId flujo de fase

moacutevil (COIIIO se illdiea con allterioridad l

Esperar hata alcanzar la estabilidad del instl1Hncllto

bull Inyectar dos veces sucesivamente la mezcla de pmeba PB

bull Para las columnas lt-lile muestren solapeacuteUniento de picos realizar dos inyecciones sucesivas

de la mezcla de pmeba PB

bull Generar los infOlmes tal COlllO se establece en el anexo n2

5 R~sllllados

u software de integracioacuten SllIllillistra 111 illtonllc que adclIIs llel cromatograll1a incluye

valores para los siglliclItes paraacutemetros d~ cada pico

IQS-CROMA PNT-A-xxx lR-96

10 13

Ndeg del pico

Tiempo muerto t 1) (min)

riempo de retencioacuten (min)

Nombre del pico

Tipo de pico scguacuten la integracioacuten

Aacuterea de pico (mvmin)

Altura de pico (mv)

Anchura de pico a la mitad de h1 altura (min) I

Nuacutemcro de platos tcuacutericos por columna

Resolucioacuten

Asimetriacutea de pico

Factor de capacidad

OBSERVACIONES

Es necesario calcular ademaacutes el nuacutemero de platosmetro la selectividad (a) en caso de que

no haya solapamiento de picos y la altura de plato reducida (h) de la fonna indicada en las

definiciones

Si se trata de hacerle un scguimiento a la columna durante su vida uacutetil es indispensable

comparar los datos ohtenidos con aquellos dados por la aplicacioacuten del test antes del inicio

dduso de la columna

IQS-CROMA PNT-A-xxx lR-96

1113

ANEXOS

N 1 Archivo DET (integracioacuten) del Gynkosoft

N2 Archivo PRM (infornle) del Gynkosoft

N~ Cromatograma de la mezcla ele prueba P A en la fase moacutevil 1 y con la columna

Lichrospher

N4 Cromatograma de la mezcla de prueha PA en la fase moacutevil 2 y con la columna

Lichrospher

Archivo DET (integracitln de los picos) del sistema de tratamiento de

datos

Number of entries 5 File title DETHP

No Time Parameter Name Parameter Value

1 0000 Minimum Area 0000000 2 0000 Minimum Width 0000000 3 0000 Minimum Height 1000000 4 0000 Inhibit Integration On 5 1000 Inhibit Integratlon Off

Archivo PRM (informe) del sistema de tratamiento de datos

File title testPRMHPI050

Signa 1 name Time window from Signal window from Report unidentified peak s Dead time Relative area threshold

AD-5 0000 AUTO On

14 min 00

to to

10000 AUTO

[min]

DE COLOMBIAI IIVERSIDAO NACIONAL

ANEXO Ndeg4 Graacuteficas de linealidad factores de respuesta y sensibilidad

del test de verificacioacuten

LINEALIDAD NoftalDoo

rt1 _ JIIi~

~E~Ego 1000 2000 3000 000 6000

-(ng) 1IonW6go Urpoacute HP-IOSO 021611 OOOIl2I(m) r CUldrado 09997fi

LINEALIDAD

Jllinl

~I=C 5 t2 t2 S8o 200 400 SOO eoo 1000 1200 1400

-Cnll 1IonW6go Urpoacute HP lOS) =022346 OOU2I(m ) r cuadrldo 5 O QQ984

LINEALIDAD Al1lrcello

15 -emiddot

tc1o fI) 100 160 200 260

-CnfII QonohgroU - lClIIO ir t H227 bull OJCl)t~lNw)

wldndo O~16b

LINEALIDAD

-emiddot

t==~fGlo 200 400 EDO ~ t 000

-toIIl Qunotoacutegrolo u HP-IOIiO =(21il10middot O0622(n-A) r wadrdo Ogoo(tQ

LINEALIDAD

Fenlreno rI~

-emiddotminl

~Lc=tE2EIo 100 200 m 400 ltXJ

-CnfII ~o UrpoacutedDlP-tOliO bullbullbull ( 1237S bull 0 14014( ) r OJldrado =O~

SUSTANCIA rCLWgtRADO

tw=TALENO 088815

BFENILO 08_0

F1UORENO 088884

FENANrRENO 088884

ANTAACEHO 088155

1

LINEALIDAD Nlllaleno

rf1 Ir_Imun)

~tjiquestGg1 o 1 OOJ 2000 3 OOJ 4 OOJ 6 OOJ _ (n

Qanortlglfo UIID HP-IOQO ()I(J

= O 1le08 O001IiO(m) cuidrldo 099948

LINEALIDAD Ruarono

n9

LINEALIDAD M ceno

rf11 _( min)

LINEALIDAD Blerilo

n8

O 7oo 400 ID) eoo 1 000 1700 ~-===1-111Qumoblgrlfo l rlID HP-IOQO [W)

u =o 1~18 003 (m) r cuadrado =O09Q53

LINEALIDAD

_~JnIacutenj

~I- C31O O 100 200 300 00 eoo-In

QomoI6gnfoU HP-tOIIO ()I(J 6 bull bull 074l1lgtI bull o 06101(m) r cudrldo =O 099U~

middot~Etc==1o 76 liJ 1li 100 176 1ampJ 116 200 225 260-~olr--ICOOIWJ lO 0501840 O16171(m ) r cuadrdo =OgQ6()t

SUSTANCIA r

NAFTALENO 08ee48

BFENIlO 088853

FlUORENO 088845

FENANTRENO 088818

NlTRACENO 088804

IQS-CROMA PNT-Aacute-xxxx lR-96

613

14 Preparacioacuten de las mezclas ele prueba (P A) Y (PB)

A partir de P 1 se preparan P y Po 1000 mi de P I (tomados con pipeta volumeacutetrica de

doble aforo) se diluyen a lOO mi con una macla de CII JCNH 20 (4060 vv)-fase moacutevil 1shy

(P)

IO()O mI de PI (tomados con pipeta volumeacutetrica de dohle aforo) se di luyen a 100 111 con

una mezcla de CII CN Tampoacuten fos fato (4060 vv)-fase moacutevil 2- (PB)

las mezclas de enrase se preparan comhinando 40 volumenes de Acetonitri lo con 60

volumenes de Agua o tampoacuten Fosfato seguacuten sea el caso

15 preparacioacuten de las t~lses moacuteviles

La fase moacutevil I es Acdonitrilo-Agua con una composicioacuten de 4060 vv

La fase moacutevil 2 es Acetonitrilo-Tampoacuten Fostato de composicioacuten 4060 vv El Tampoacuten

Fosfato tiene una concentracioacuten de 0025 M en Fosfato (como KH 2POiexcl) y de 0030 M en

Trietilamina y se prepara pesando las siguientes cantidades

Fosfato Diaacutecido de Potasio (KI1 2JgtOJ 1110 mg

1450 mg

Lo anmiddotterior se diluye a 10 litro con agua MilliQ y se lleva hasta pll = 3 (lO con aacutecido

Fosfoacuterico (1110-1) lid X5deg1 (n peso Esta solucioacuten puede guardarse en la nevera pero se

dehe siempre filtrar antes de lIsarla con filtro de OLIS ~lm

IQS-CROMA PNT-A-xxxx IR-96

713

2 Condiciones cromto~raacuteficas

Equipo de cromatografiacutea II PIC con dos canales para solventes

Volumen de inyecciuacuten 20 pI

Columna A examinar (fase inversa)

temperatura de columna 15(

Detecciuacuten UV J =- 254 nm

Composicioacuten de la fase moacutevil 1 CH 1CN-H20 (40 60 vv)

Composicioacuten dc la fase moacutevit 2 (11 leN-Tampoacuten Iosfato (4060 vv)

Flujo de la fase moacutevil 100 mllmin

Presioacuten Variable seguacuten la columna ensayada

l Conelicinnes de inte~raciOacuten~

Las condiciones de integracioacuten cromatograacutefica del sistema de tratamiento de datos

(Gynkosoti) se indican en los anexos nl y n2 especialmente en lo que se refiere al

DET-File (archivo ltle integraciuacuten y al PRM-Fi1e (archivo de int~)rmc) l

4 Aplicacioacuten de la mezcla ele prueba (P)

Para aplicar la mezcla de prueba es necesario llevar a cabo las siguientes operaciones

-Colocar en los recipientes de solventes de las dos liacuteneas a usar agua MilliQ (que se cambia

cada diacutea) y cctonitrilo gradn IIPI ( desgasillcar los solventes de la fase moacutevil en caso ltk

que el cromatoacutegrafo no cuente con desgasificador incorporado

La desgasitlcacioacuten se puede ellctuar con I [clio o en un bantilden de ultrasomdus

IQS-(ROllA PNT-A-xxx )R-

~13

bull Poner en marcha el instnunellto Bombas detector y otros elementos cou que cuellte el

lTomatoacutegrafo

bull Fijar la longitud de onda de detetcioacuten

bull Abrir la purga y purgar dos liacutellcas asiacute

lJlla de ellas COll agua MilliQ (l()()~ de Aglla a traveacutes de la liacutenea) hasta que la presioacuten se

estabilice y se evidencie que sale agua por la salida de la purga otra liacutenea con Acetonitrilo

(100 de Acetonitrilo en la liacutellea) hasta qlle se estabilice la presioacuten y se Ilote que sale

Acetonitrilo por la salida de la purga

-eITar la purga

bull Verificar que d hllcle de inyctciuacutell es el adecuado limpiar el inyector primero con 500 mi

de agua Mil1iQ y luego COll 500 mi de Acetonitrilo usando para ello una jeringa de plaacutestico

de 1000 Inl

bull Instalar la coh~mna que se va a probar y fijar la temperatura de trabajo

Establecer las tondiciones al1ltcuadas de composicioacuten de fase moacutevil (t~lse moacutevil 1) y aumentar

el flujo ltle la misma desde O hasta 100 mVmin alimentando 010 mVmin cada vez y dejando

que la presioacuten se estahilice despneacutes de caela illcremcnlo

Esperar a que el irlstnunellto esteacute estable en lo que se refiere a la temperatura el flujo de la

fase moacutevil y la presiuacutelI

bull Establecer las condiciolles del sisterna de integracioacuten y tratamiellto de datos ltJynkoson (ver

alH OS )

bull Hacer dos inyecciones sucesivas de la mezcla de pmeha 1

middot1 11 caso dl qm haya S()lapallli(~lltl) dl picos eH la iIlylCliuacuten all1lrinr tIl10lICeS ilIYt ltar dos

veces la rnczca (k prlllha 1)

1QS-C lU )l1A PNT-A-xxx 11~-96

913

En aquellas columnas que presenten colas especialmente en el pico de la amina es necesario

cambiar de fase moacutevil para ello se ejecutan los siguientes pasos

bull Bajar el flujo de la fase moacutevil hasta O mlmin en decrementos sucesivos de 010 mlmin

bull En la liacutenea donde estaacute el agua M iIIiQ (tic la fase moacutevil anterior) colocar el Tampoacuten Fosfato

I

bull Abrir la pllfga y purgar este canal (corno se describe antes) hasta que por la salida de la

pllfga se IIOIe qlle sale solllciuacutel aacuteeia (lo que se detecta lIsalldo papellflcdidor de plI)

Cerrar la purga

bull Restahlecer las condiciones lk t()IIPosiciuacutelI de Iiexclse lIIuacutevil (fase lJIuacutevil 2) y ltId flujo de fase

moacutevil (COIIIO se illdiea con allterioridad l

Esperar hata alcanzar la estabilidad del instl1Hncllto

bull Inyectar dos veces sucesivamente la mezcla de pmeba PB

bull Para las columnas lt-lile muestren solapeacuteUniento de picos realizar dos inyecciones sucesivas

de la mezcla de pmeba PB

bull Generar los infOlmes tal COlllO se establece en el anexo n2

5 R~sllllados

u software de integracioacuten SllIllillistra 111 illtonllc que adclIIs llel cromatograll1a incluye

valores para los siglliclItes paraacutemetros d~ cada pico

IQS-CROMA PNT-A-xxx lR-96

10 13

Ndeg del pico

Tiempo muerto t 1) (min)

riempo de retencioacuten (min)

Nombre del pico

Tipo de pico scguacuten la integracioacuten

Aacuterea de pico (mvmin)

Altura de pico (mv)

Anchura de pico a la mitad de h1 altura (min) I

Nuacutemcro de platos tcuacutericos por columna

Resolucioacuten

Asimetriacutea de pico

Factor de capacidad

OBSERVACIONES

Es necesario calcular ademaacutes el nuacutemero de platosmetro la selectividad (a) en caso de que

no haya solapamiento de picos y la altura de plato reducida (h) de la fonna indicada en las

definiciones

Si se trata de hacerle un scguimiento a la columna durante su vida uacutetil es indispensable

comparar los datos ohtenidos con aquellos dados por la aplicacioacuten del test antes del inicio

dduso de la columna

IQS-CROMA PNT-A-xxx lR-96

1113

ANEXOS

N 1 Archivo DET (integracioacuten) del Gynkosoft

N2 Archivo PRM (infornle) del Gynkosoft

N~ Cromatograma de la mezcla ele prueba P A en la fase moacutevil 1 y con la columna

Lichrospher

N4 Cromatograma de la mezcla de prueha PA en la fase moacutevil 2 y con la columna

Lichrospher

Archivo DET (integracitln de los picos) del sistema de tratamiento de

datos

Number of entries 5 File title DETHP

No Time Parameter Name Parameter Value

1 0000 Minimum Area 0000000 2 0000 Minimum Width 0000000 3 0000 Minimum Height 1000000 4 0000 Inhibit Integration On 5 1000 Inhibit Integratlon Off

Archivo PRM (informe) del sistema de tratamiento de datos

File title testPRMHPI050

Signa 1 name Time window from Signal window from Report unidentified peak s Dead time Relative area threshold

AD-5 0000 AUTO On

14 min 00

to to

10000 AUTO

[min]

DE COLOMBIAI IIVERSIDAO NACIONAL

ANEXO Ndeg4 Graacuteficas de linealidad factores de respuesta y sensibilidad

del test de verificacioacuten

LINEALIDAD NoftalDoo

rt1 _ JIIi~

~E~Ego 1000 2000 3000 000 6000

-(ng) 1IonW6go Urpoacute HP-IOSO 021611 OOOIl2I(m) r CUldrado 09997fi

LINEALIDAD

Jllinl

~I=C 5 t2 t2 S8o 200 400 SOO eoo 1000 1200 1400

-Cnll 1IonW6go Urpoacute HP lOS) =022346 OOU2I(m ) r cuadrldo 5 O QQ984

LINEALIDAD Al1lrcello

15 -emiddot

tc1o fI) 100 160 200 260

-CnfII QonohgroU - lClIIO ir t H227 bull OJCl)t~lNw)

wldndo O~16b

LINEALIDAD

-emiddot

t==~fGlo 200 400 EDO ~ t 000

-toIIl Qunotoacutegrolo u HP-IOIiO =(21il10middot O0622(n-A) r wadrdo Ogoo(tQ

LINEALIDAD

Fenlreno rI~

-emiddotminl

~Lc=tE2EIo 100 200 m 400 ltXJ

-CnfII ~o UrpoacutedDlP-tOliO bullbullbull ( 1237S bull 0 14014( ) r OJldrado =O~

SUSTANCIA rCLWgtRADO

tw=TALENO 088815

BFENILO 08_0

F1UORENO 088884

FENANrRENO 088884

ANTAACEHO 088155

1

LINEALIDAD Nlllaleno

rf1 Ir_Imun)

~tjiquestGg1 o 1 OOJ 2000 3 OOJ 4 OOJ 6 OOJ _ (n

Qanortlglfo UIID HP-IOQO ()I(J

= O 1le08 O001IiO(m) cuidrldo 099948

LINEALIDAD Ruarono

n9

LINEALIDAD M ceno

rf11 _( min)

LINEALIDAD Blerilo

n8

O 7oo 400 ID) eoo 1 000 1700 ~-===1-111Qumoblgrlfo l rlID HP-IOQO [W)

u =o 1~18 003 (m) r cuadrado =O09Q53

LINEALIDAD

_~JnIacutenj

~I- C31O O 100 200 300 00 eoo-In

QomoI6gnfoU HP-tOIIO ()I(J 6 bull bull 074l1lgtI bull o 06101(m) r cudrldo =O 099U~

middot~Etc==1o 76 liJ 1li 100 176 1ampJ 116 200 225 260-~olr--ICOOIWJ lO 0501840 O16171(m ) r cuadrdo =OgQ6()t

SUSTANCIA r

NAFTALENO 08ee48

BFENIlO 088853

FlUORENO 088845

FENANTRENO 088818

NlTRACENO 088804

IQS-CROMA PNT-A-xxxx IR-96

713

2 Condiciones cromto~raacuteficas

Equipo de cromatografiacutea II PIC con dos canales para solventes

Volumen de inyecciuacuten 20 pI

Columna A examinar (fase inversa)

temperatura de columna 15(

Detecciuacuten UV J =- 254 nm

Composicioacuten de la fase moacutevil 1 CH 1CN-H20 (40 60 vv)

Composicioacuten dc la fase moacutevit 2 (11 leN-Tampoacuten Iosfato (4060 vv)

Flujo de la fase moacutevil 100 mllmin

Presioacuten Variable seguacuten la columna ensayada

l Conelicinnes de inte~raciOacuten~

Las condiciones de integracioacuten cromatograacutefica del sistema de tratamiento de datos

(Gynkosoti) se indican en los anexos nl y n2 especialmente en lo que se refiere al

DET-File (archivo ltle integraciuacuten y al PRM-Fi1e (archivo de int~)rmc) l

4 Aplicacioacuten de la mezcla ele prueba (P)

Para aplicar la mezcla de prueba es necesario llevar a cabo las siguientes operaciones

-Colocar en los recipientes de solventes de las dos liacuteneas a usar agua MilliQ (que se cambia

cada diacutea) y cctonitrilo gradn IIPI ( desgasillcar los solventes de la fase moacutevil en caso ltk

que el cromatoacutegrafo no cuente con desgasificador incorporado

La desgasitlcacioacuten se puede ellctuar con I [clio o en un bantilden de ultrasomdus

IQS-(ROllA PNT-A-xxx )R-

~13

bull Poner en marcha el instnunellto Bombas detector y otros elementos cou que cuellte el

lTomatoacutegrafo

bull Fijar la longitud de onda de detetcioacuten

bull Abrir la purga y purgar dos liacutellcas asiacute

lJlla de ellas COll agua MilliQ (l()()~ de Aglla a traveacutes de la liacutenea) hasta que la presioacuten se

estabilice y se evidencie que sale agua por la salida de la purga otra liacutenea con Acetonitrilo

(100 de Acetonitrilo en la liacutellea) hasta qlle se estabilice la presioacuten y se Ilote que sale

Acetonitrilo por la salida de la purga

-eITar la purga

bull Verificar que d hllcle de inyctciuacutell es el adecuado limpiar el inyector primero con 500 mi

de agua Mil1iQ y luego COll 500 mi de Acetonitrilo usando para ello una jeringa de plaacutestico

de 1000 Inl

bull Instalar la coh~mna que se va a probar y fijar la temperatura de trabajo

Establecer las tondiciones al1ltcuadas de composicioacuten de fase moacutevil (t~lse moacutevil 1) y aumentar

el flujo ltle la misma desde O hasta 100 mVmin alimentando 010 mVmin cada vez y dejando

que la presioacuten se estahilice despneacutes de caela illcremcnlo

Esperar a que el irlstnunellto esteacute estable en lo que se refiere a la temperatura el flujo de la

fase moacutevil y la presiuacutelI

bull Establecer las condiciolles del sisterna de integracioacuten y tratamiellto de datos ltJynkoson (ver

alH OS )

bull Hacer dos inyecciones sucesivas de la mezcla de pmeha 1

middot1 11 caso dl qm haya S()lapallli(~lltl) dl picos eH la iIlylCliuacuten all1lrinr tIl10lICeS ilIYt ltar dos

veces la rnczca (k prlllha 1)

1QS-C lU )l1A PNT-A-xxx 11~-96

913

En aquellas columnas que presenten colas especialmente en el pico de la amina es necesario

cambiar de fase moacutevil para ello se ejecutan los siguientes pasos

bull Bajar el flujo de la fase moacutevil hasta O mlmin en decrementos sucesivos de 010 mlmin

bull En la liacutenea donde estaacute el agua M iIIiQ (tic la fase moacutevil anterior) colocar el Tampoacuten Fosfato

I

bull Abrir la pllfga y purgar este canal (corno se describe antes) hasta que por la salida de la

pllfga se IIOIe qlle sale solllciuacutel aacuteeia (lo que se detecta lIsalldo papellflcdidor de plI)

Cerrar la purga

bull Restahlecer las condiciones lk t()IIPosiciuacutelI de Iiexclse lIIuacutevil (fase lJIuacutevil 2) y ltId flujo de fase

moacutevil (COIIIO se illdiea con allterioridad l

Esperar hata alcanzar la estabilidad del instl1Hncllto

bull Inyectar dos veces sucesivamente la mezcla de pmeba PB

bull Para las columnas lt-lile muestren solapeacuteUniento de picos realizar dos inyecciones sucesivas

de la mezcla de pmeba PB

bull Generar los infOlmes tal COlllO se establece en el anexo n2

5 R~sllllados

u software de integracioacuten SllIllillistra 111 illtonllc que adclIIs llel cromatograll1a incluye

valores para los siglliclItes paraacutemetros d~ cada pico

IQS-CROMA PNT-A-xxx lR-96

10 13

Ndeg del pico

Tiempo muerto t 1) (min)

riempo de retencioacuten (min)

Nombre del pico

Tipo de pico scguacuten la integracioacuten

Aacuterea de pico (mvmin)

Altura de pico (mv)

Anchura de pico a la mitad de h1 altura (min) I

Nuacutemcro de platos tcuacutericos por columna

Resolucioacuten

Asimetriacutea de pico

Factor de capacidad

OBSERVACIONES

Es necesario calcular ademaacutes el nuacutemero de platosmetro la selectividad (a) en caso de que

no haya solapamiento de picos y la altura de plato reducida (h) de la fonna indicada en las

definiciones

Si se trata de hacerle un scguimiento a la columna durante su vida uacutetil es indispensable

comparar los datos ohtenidos con aquellos dados por la aplicacioacuten del test antes del inicio

dduso de la columna

IQS-CROMA PNT-A-xxx lR-96

1113

ANEXOS

N 1 Archivo DET (integracioacuten) del Gynkosoft

N2 Archivo PRM (infornle) del Gynkosoft

N~ Cromatograma de la mezcla ele prueba P A en la fase moacutevil 1 y con la columna

Lichrospher

N4 Cromatograma de la mezcla de prueha PA en la fase moacutevil 2 y con la columna

Lichrospher

Archivo DET (integracitln de los picos) del sistema de tratamiento de

datos

Number of entries 5 File title DETHP

No Time Parameter Name Parameter Value

1 0000 Minimum Area 0000000 2 0000 Minimum Width 0000000 3 0000 Minimum Height 1000000 4 0000 Inhibit Integration On 5 1000 Inhibit Integratlon Off

Archivo PRM (informe) del sistema de tratamiento de datos

File title testPRMHPI050

Signa 1 name Time window from Signal window from Report unidentified peak s Dead time Relative area threshold

AD-5 0000 AUTO On

14 min 00

to to

10000 AUTO

[min]

DE COLOMBIAI IIVERSIDAO NACIONAL

ANEXO Ndeg4 Graacuteficas de linealidad factores de respuesta y sensibilidad

del test de verificacioacuten

LINEALIDAD NoftalDoo

rt1 _ JIIi~

~E~Ego 1000 2000 3000 000 6000

-(ng) 1IonW6go Urpoacute HP-IOSO 021611 OOOIl2I(m) r CUldrado 09997fi

LINEALIDAD

Jllinl

~I=C 5 t2 t2 S8o 200 400 SOO eoo 1000 1200 1400

-Cnll 1IonW6go Urpoacute HP lOS) =022346 OOU2I(m ) r cuadrldo 5 O QQ984

LINEALIDAD Al1lrcello

15 -emiddot

tc1o fI) 100 160 200 260

-CnfII QonohgroU - lClIIO ir t H227 bull OJCl)t~lNw)

wldndo O~16b

LINEALIDAD

-emiddot

t==~fGlo 200 400 EDO ~ t 000

-toIIl Qunotoacutegrolo u HP-IOIiO =(21il10middot O0622(n-A) r wadrdo Ogoo(tQ

LINEALIDAD

Fenlreno rI~

-emiddotminl

~Lc=tE2EIo 100 200 m 400 ltXJ

-CnfII ~o UrpoacutedDlP-tOliO bullbullbull ( 1237S bull 0 14014( ) r OJldrado =O~

SUSTANCIA rCLWgtRADO

tw=TALENO 088815

BFENILO 08_0

F1UORENO 088884

FENANrRENO 088884

ANTAACEHO 088155

1

LINEALIDAD Nlllaleno

rf1 Ir_Imun)

~tjiquestGg1 o 1 OOJ 2000 3 OOJ 4 OOJ 6 OOJ _ (n

Qanortlglfo UIID HP-IOQO ()I(J

= O 1le08 O001IiO(m) cuidrldo 099948

LINEALIDAD Ruarono

n9

LINEALIDAD M ceno

rf11 _( min)

LINEALIDAD Blerilo

n8

O 7oo 400 ID) eoo 1 000 1700 ~-===1-111Qumoblgrlfo l rlID HP-IOQO [W)

u =o 1~18 003 (m) r cuadrado =O09Q53

LINEALIDAD

_~JnIacutenj

~I- C31O O 100 200 300 00 eoo-In

QomoI6gnfoU HP-tOIIO ()I(J 6 bull bull 074l1lgtI bull o 06101(m) r cudrldo =O 099U~

middot~Etc==1o 76 liJ 1li 100 176 1ampJ 116 200 225 260-~olr--ICOOIWJ lO 0501840 O16171(m ) r cuadrdo =OgQ6()t

SUSTANCIA r

NAFTALENO 08ee48

BFENIlO 088853

FlUORENO 088845

FENANTRENO 088818

NlTRACENO 088804

IQS-(ROllA PNT-A-xxx )R-

~13

bull Poner en marcha el instnunellto Bombas detector y otros elementos cou que cuellte el

lTomatoacutegrafo

bull Fijar la longitud de onda de detetcioacuten

bull Abrir la purga y purgar dos liacutellcas asiacute

lJlla de ellas COll agua MilliQ (l()()~ de Aglla a traveacutes de la liacutenea) hasta que la presioacuten se

estabilice y se evidencie que sale agua por la salida de la purga otra liacutenea con Acetonitrilo

(100 de Acetonitrilo en la liacutellea) hasta qlle se estabilice la presioacuten y se Ilote que sale

Acetonitrilo por la salida de la purga

-eITar la purga

bull Verificar que d hllcle de inyctciuacutell es el adecuado limpiar el inyector primero con 500 mi

de agua Mil1iQ y luego COll 500 mi de Acetonitrilo usando para ello una jeringa de plaacutestico

de 1000 Inl

bull Instalar la coh~mna que se va a probar y fijar la temperatura de trabajo

Establecer las tondiciones al1ltcuadas de composicioacuten de fase moacutevil (t~lse moacutevil 1) y aumentar

el flujo ltle la misma desde O hasta 100 mVmin alimentando 010 mVmin cada vez y dejando

que la presioacuten se estahilice despneacutes de caela illcremcnlo

Esperar a que el irlstnunellto esteacute estable en lo que se refiere a la temperatura el flujo de la

fase moacutevil y la presiuacutelI

bull Establecer las condiciolles del sisterna de integracioacuten y tratamiellto de datos ltJynkoson (ver

alH OS )

bull Hacer dos inyecciones sucesivas de la mezcla de pmeha 1

middot1 11 caso dl qm haya S()lapallli(~lltl) dl picos eH la iIlylCliuacuten all1lrinr tIl10lICeS ilIYt ltar dos

veces la rnczca (k prlllha 1)

1QS-C lU )l1A PNT-A-xxx 11~-96

913

En aquellas columnas que presenten colas especialmente en el pico de la amina es necesario

cambiar de fase moacutevil para ello se ejecutan los siguientes pasos

bull Bajar el flujo de la fase moacutevil hasta O mlmin en decrementos sucesivos de 010 mlmin

bull En la liacutenea donde estaacute el agua M iIIiQ (tic la fase moacutevil anterior) colocar el Tampoacuten Fosfato

I

bull Abrir la pllfga y purgar este canal (corno se describe antes) hasta que por la salida de la

pllfga se IIOIe qlle sale solllciuacutel aacuteeia (lo que se detecta lIsalldo papellflcdidor de plI)

Cerrar la purga

bull Restahlecer las condiciones lk t()IIPosiciuacutelI de Iiexclse lIIuacutevil (fase lJIuacutevil 2) y ltId flujo de fase

moacutevil (COIIIO se illdiea con allterioridad l

Esperar hata alcanzar la estabilidad del instl1Hncllto

bull Inyectar dos veces sucesivamente la mezcla de pmeba PB

bull Para las columnas lt-lile muestren solapeacuteUniento de picos realizar dos inyecciones sucesivas

de la mezcla de pmeba PB

bull Generar los infOlmes tal COlllO se establece en el anexo n2

5 R~sllllados

u software de integracioacuten SllIllillistra 111 illtonllc que adclIIs llel cromatograll1a incluye

valores para los siglliclItes paraacutemetros d~ cada pico

IQS-CROMA PNT-A-xxx lR-96

10 13

Ndeg del pico

Tiempo muerto t 1) (min)

riempo de retencioacuten (min)

Nombre del pico

Tipo de pico scguacuten la integracioacuten

Aacuterea de pico (mvmin)

Altura de pico (mv)

Anchura de pico a la mitad de h1 altura (min) I

Nuacutemcro de platos tcuacutericos por columna

Resolucioacuten

Asimetriacutea de pico

Factor de capacidad

OBSERVACIONES

Es necesario calcular ademaacutes el nuacutemero de platosmetro la selectividad (a) en caso de que

no haya solapamiento de picos y la altura de plato reducida (h) de la fonna indicada en las

definiciones

Si se trata de hacerle un scguimiento a la columna durante su vida uacutetil es indispensable

comparar los datos ohtenidos con aquellos dados por la aplicacioacuten del test antes del inicio

dduso de la columna

IQS-CROMA PNT-A-xxx lR-96

1113

ANEXOS

N 1 Archivo DET (integracioacuten) del Gynkosoft

N2 Archivo PRM (infornle) del Gynkosoft

N~ Cromatograma de la mezcla ele prueba P A en la fase moacutevil 1 y con la columna

Lichrospher

N4 Cromatograma de la mezcla de prueha PA en la fase moacutevil 2 y con la columna

Lichrospher

Archivo DET (integracitln de los picos) del sistema de tratamiento de

datos

Number of entries 5 File title DETHP

No Time Parameter Name Parameter Value

1 0000 Minimum Area 0000000 2 0000 Minimum Width 0000000 3 0000 Minimum Height 1000000 4 0000 Inhibit Integration On 5 1000 Inhibit Integratlon Off

Archivo PRM (informe) del sistema de tratamiento de datos

File title testPRMHPI050

Signa 1 name Time window from Signal window from Report unidentified peak s Dead time Relative area threshold

AD-5 0000 AUTO On

14 min 00

to to

10000 AUTO

[min]

DE COLOMBIAI IIVERSIDAO NACIONAL

ANEXO Ndeg4 Graacuteficas de linealidad factores de respuesta y sensibilidad

del test de verificacioacuten

LINEALIDAD NoftalDoo

rt1 _ JIIi~

~E~Ego 1000 2000 3000 000 6000

-(ng) 1IonW6go Urpoacute HP-IOSO 021611 OOOIl2I(m) r CUldrado 09997fi

LINEALIDAD

Jllinl

~I=C 5 t2 t2 S8o 200 400 SOO eoo 1000 1200 1400

-Cnll 1IonW6go Urpoacute HP lOS) =022346 OOU2I(m ) r cuadrldo 5 O QQ984

LINEALIDAD Al1lrcello

15 -emiddot

tc1o fI) 100 160 200 260

-CnfII QonohgroU - lClIIO ir t H227 bull OJCl)t~lNw)

wldndo O~16b

LINEALIDAD

-emiddot

t==~fGlo 200 400 EDO ~ t 000

-toIIl Qunotoacutegrolo u HP-IOIiO =(21il10middot O0622(n-A) r wadrdo Ogoo(tQ

LINEALIDAD

Fenlreno rI~

-emiddotminl

~Lc=tE2EIo 100 200 m 400 ltXJ

-CnfII ~o UrpoacutedDlP-tOliO bullbullbull ( 1237S bull 0 14014( ) r OJldrado =O~

SUSTANCIA rCLWgtRADO

tw=TALENO 088815

BFENILO 08_0

F1UORENO 088884

FENANrRENO 088884

ANTAACEHO 088155

1

LINEALIDAD Nlllaleno

rf1 Ir_Imun)

~tjiquestGg1 o 1 OOJ 2000 3 OOJ 4 OOJ 6 OOJ _ (n

Qanortlglfo UIID HP-IOQO ()I(J

= O 1le08 O001IiO(m) cuidrldo 099948

LINEALIDAD Ruarono

n9

LINEALIDAD M ceno

rf11 _( min)

LINEALIDAD Blerilo

n8

O 7oo 400 ID) eoo 1 000 1700 ~-===1-111Qumoblgrlfo l rlID HP-IOQO [W)

u =o 1~18 003 (m) r cuadrado =O09Q53

LINEALIDAD

_~JnIacutenj

~I- C31O O 100 200 300 00 eoo-In

QomoI6gnfoU HP-tOIIO ()I(J 6 bull bull 074l1lgtI bull o 06101(m) r cudrldo =O 099U~

middot~Etc==1o 76 liJ 1li 100 176 1ampJ 116 200 225 260-~olr--ICOOIWJ lO 0501840 O16171(m ) r cuadrdo =OgQ6()t

SUSTANCIA r

NAFTALENO 08ee48

BFENIlO 088853

FlUORENO 088845

FENANTRENO 088818

NlTRACENO 088804

1QS-C lU )l1A PNT-A-xxx 11~-96

913

En aquellas columnas que presenten colas especialmente en el pico de la amina es necesario

cambiar de fase moacutevil para ello se ejecutan los siguientes pasos

bull Bajar el flujo de la fase moacutevil hasta O mlmin en decrementos sucesivos de 010 mlmin

bull En la liacutenea donde estaacute el agua M iIIiQ (tic la fase moacutevil anterior) colocar el Tampoacuten Fosfato

I

bull Abrir la pllfga y purgar este canal (corno se describe antes) hasta que por la salida de la

pllfga se IIOIe qlle sale solllciuacutel aacuteeia (lo que se detecta lIsalldo papellflcdidor de plI)

Cerrar la purga

bull Restahlecer las condiciones lk t()IIPosiciuacutelI de Iiexclse lIIuacutevil (fase lJIuacutevil 2) y ltId flujo de fase

moacutevil (COIIIO se illdiea con allterioridad l

Esperar hata alcanzar la estabilidad del instl1Hncllto

bull Inyectar dos veces sucesivamente la mezcla de pmeba PB

bull Para las columnas lt-lile muestren solapeacuteUniento de picos realizar dos inyecciones sucesivas

de la mezcla de pmeba PB

bull Generar los infOlmes tal COlllO se establece en el anexo n2

5 R~sllllados

u software de integracioacuten SllIllillistra 111 illtonllc que adclIIs llel cromatograll1a incluye

valores para los siglliclItes paraacutemetros d~ cada pico

IQS-CROMA PNT-A-xxx lR-96

10 13

Ndeg del pico

Tiempo muerto t 1) (min)

riempo de retencioacuten (min)

Nombre del pico

Tipo de pico scguacuten la integracioacuten

Aacuterea de pico (mvmin)

Altura de pico (mv)

Anchura de pico a la mitad de h1 altura (min) I

Nuacutemcro de platos tcuacutericos por columna

Resolucioacuten

Asimetriacutea de pico

Factor de capacidad

OBSERVACIONES

Es necesario calcular ademaacutes el nuacutemero de platosmetro la selectividad (a) en caso de que

no haya solapamiento de picos y la altura de plato reducida (h) de la fonna indicada en las

definiciones

Si se trata de hacerle un scguimiento a la columna durante su vida uacutetil es indispensable

comparar los datos ohtenidos con aquellos dados por la aplicacioacuten del test antes del inicio

dduso de la columna

IQS-CROMA PNT-A-xxx lR-96

1113

ANEXOS

N 1 Archivo DET (integracioacuten) del Gynkosoft

N2 Archivo PRM (infornle) del Gynkosoft

N~ Cromatograma de la mezcla ele prueba P A en la fase moacutevil 1 y con la columna

Lichrospher

N4 Cromatograma de la mezcla de prueha PA en la fase moacutevil 2 y con la columna

Lichrospher

Archivo DET (integracitln de los picos) del sistema de tratamiento de

datos

Number of entries 5 File title DETHP

No Time Parameter Name Parameter Value

1 0000 Minimum Area 0000000 2 0000 Minimum Width 0000000 3 0000 Minimum Height 1000000 4 0000 Inhibit Integration On 5 1000 Inhibit Integratlon Off

Archivo PRM (informe) del sistema de tratamiento de datos

File title testPRMHPI050

Signa 1 name Time window from Signal window from Report unidentified peak s Dead time Relative area threshold

AD-5 0000 AUTO On

14 min 00

to to

10000 AUTO

[min]

DE COLOMBIAI IIVERSIDAO NACIONAL

ANEXO Ndeg4 Graacuteficas de linealidad factores de respuesta y sensibilidad

del test de verificacioacuten

LINEALIDAD NoftalDoo

rt1 _ JIIi~

~E~Ego 1000 2000 3000 000 6000

-(ng) 1IonW6go Urpoacute HP-IOSO 021611 OOOIl2I(m) r CUldrado 09997fi

LINEALIDAD

Jllinl

~I=C 5 t2 t2 S8o 200 400 SOO eoo 1000 1200 1400

-Cnll 1IonW6go Urpoacute HP lOS) =022346 OOU2I(m ) r cuadrldo 5 O QQ984

LINEALIDAD Al1lrcello

15 -emiddot

tc1o fI) 100 160 200 260

-CnfII QonohgroU - lClIIO ir t H227 bull OJCl)t~lNw)

wldndo O~16b

LINEALIDAD

-emiddot

t==~fGlo 200 400 EDO ~ t 000

-toIIl Qunotoacutegrolo u HP-IOIiO =(21il10middot O0622(n-A) r wadrdo Ogoo(tQ

LINEALIDAD

Fenlreno rI~

-emiddotminl

~Lc=tE2EIo 100 200 m 400 ltXJ

-CnfII ~o UrpoacutedDlP-tOliO bullbullbull ( 1237S bull 0 14014( ) r OJldrado =O~

SUSTANCIA rCLWgtRADO

tw=TALENO 088815

BFENILO 08_0

F1UORENO 088884

FENANrRENO 088884

ANTAACEHO 088155

1

LINEALIDAD Nlllaleno

rf1 Ir_Imun)

~tjiquestGg1 o 1 OOJ 2000 3 OOJ 4 OOJ 6 OOJ _ (n

Qanortlglfo UIID HP-IOQO ()I(J

= O 1le08 O001IiO(m) cuidrldo 099948

LINEALIDAD Ruarono

n9

LINEALIDAD M ceno

rf11 _( min)

LINEALIDAD Blerilo

n8

O 7oo 400 ID) eoo 1 000 1700 ~-===1-111Qumoblgrlfo l rlID HP-IOQO [W)

u =o 1~18 003 (m) r cuadrado =O09Q53

LINEALIDAD

_~JnIacutenj

~I- C31O O 100 200 300 00 eoo-In

QomoI6gnfoU HP-tOIIO ()I(J 6 bull bull 074l1lgtI bull o 06101(m) r cudrldo =O 099U~

middot~Etc==1o 76 liJ 1li 100 176 1ampJ 116 200 225 260-~olr--ICOOIWJ lO 0501840 O16171(m ) r cuadrdo =OgQ6()t

SUSTANCIA r

NAFTALENO 08ee48

BFENIlO 088853

FlUORENO 088845

FENANTRENO 088818

NlTRACENO 088804

IQS-CROMA PNT-A-xxx lR-96

10 13

Ndeg del pico

Tiempo muerto t 1) (min)

riempo de retencioacuten (min)

Nombre del pico

Tipo de pico scguacuten la integracioacuten

Aacuterea de pico (mvmin)

Altura de pico (mv)

Anchura de pico a la mitad de h1 altura (min) I

Nuacutemcro de platos tcuacutericos por columna

Resolucioacuten

Asimetriacutea de pico

Factor de capacidad

OBSERVACIONES

Es necesario calcular ademaacutes el nuacutemero de platosmetro la selectividad (a) en caso de que

no haya solapamiento de picos y la altura de plato reducida (h) de la fonna indicada en las

definiciones

Si se trata de hacerle un scguimiento a la columna durante su vida uacutetil es indispensable

comparar los datos ohtenidos con aquellos dados por la aplicacioacuten del test antes del inicio

dduso de la columna

IQS-CROMA PNT-A-xxx lR-96

1113

ANEXOS

N 1 Archivo DET (integracioacuten) del Gynkosoft

N2 Archivo PRM (infornle) del Gynkosoft

N~ Cromatograma de la mezcla ele prueba P A en la fase moacutevil 1 y con la columna

Lichrospher

N4 Cromatograma de la mezcla de prueha PA en la fase moacutevil 2 y con la columna

Lichrospher

Archivo DET (integracitln de los picos) del sistema de tratamiento de

datos

Number of entries 5 File title DETHP

No Time Parameter Name Parameter Value

1 0000 Minimum Area 0000000 2 0000 Minimum Width 0000000 3 0000 Minimum Height 1000000 4 0000 Inhibit Integration On 5 1000 Inhibit Integratlon Off

Archivo PRM (informe) del sistema de tratamiento de datos

File title testPRMHPI050

Signa 1 name Time window from Signal window from Report unidentified peak s Dead time Relative area threshold

AD-5 0000 AUTO On

14 min 00

to to

10000 AUTO

[min]

DE COLOMBIAI IIVERSIDAO NACIONAL

ANEXO Ndeg4 Graacuteficas de linealidad factores de respuesta y sensibilidad

del test de verificacioacuten

LINEALIDAD NoftalDoo

rt1 _ JIIi~

~E~Ego 1000 2000 3000 000 6000

-(ng) 1IonW6go Urpoacute HP-IOSO 021611 OOOIl2I(m) r CUldrado 09997fi

LINEALIDAD

Jllinl

~I=C 5 t2 t2 S8o 200 400 SOO eoo 1000 1200 1400

-Cnll 1IonW6go Urpoacute HP lOS) =022346 OOU2I(m ) r cuadrldo 5 O QQ984

LINEALIDAD Al1lrcello

15 -emiddot

tc1o fI) 100 160 200 260

-CnfII QonohgroU - lClIIO ir t H227 bull OJCl)t~lNw)

wldndo O~16b

LINEALIDAD

-emiddot

t==~fGlo 200 400 EDO ~ t 000

-toIIl Qunotoacutegrolo u HP-IOIiO =(21il10middot O0622(n-A) r wadrdo Ogoo(tQ

LINEALIDAD

Fenlreno rI~

-emiddotminl

~Lc=tE2EIo 100 200 m 400 ltXJ

-CnfII ~o UrpoacutedDlP-tOliO bullbullbull ( 1237S bull 0 14014( ) r OJldrado =O~

SUSTANCIA rCLWgtRADO

tw=TALENO 088815

BFENILO 08_0

F1UORENO 088884

FENANrRENO 088884

ANTAACEHO 088155

1

LINEALIDAD Nlllaleno

rf1 Ir_Imun)

~tjiquestGg1 o 1 OOJ 2000 3 OOJ 4 OOJ 6 OOJ _ (n

Qanortlglfo UIID HP-IOQO ()I(J

= O 1le08 O001IiO(m) cuidrldo 099948

LINEALIDAD Ruarono

n9

LINEALIDAD M ceno

rf11 _( min)

LINEALIDAD Blerilo

n8

O 7oo 400 ID) eoo 1 000 1700 ~-===1-111Qumoblgrlfo l rlID HP-IOQO [W)

u =o 1~18 003 (m) r cuadrado =O09Q53

LINEALIDAD

_~JnIacutenj

~I- C31O O 100 200 300 00 eoo-In

QomoI6gnfoU HP-tOIIO ()I(J 6 bull bull 074l1lgtI bull o 06101(m) r cudrldo =O 099U~

middot~Etc==1o 76 liJ 1li 100 176 1ampJ 116 200 225 260-~olr--ICOOIWJ lO 0501840 O16171(m ) r cuadrdo =OgQ6()t

SUSTANCIA r

NAFTALENO 08ee48

BFENIlO 088853

FlUORENO 088845

FENANTRENO 088818

NlTRACENO 088804

IQS-CROMA PNT-A-xxx lR-96

1113

ANEXOS

N 1 Archivo DET (integracioacuten) del Gynkosoft

N2 Archivo PRM (infornle) del Gynkosoft

N~ Cromatograma de la mezcla ele prueba P A en la fase moacutevil 1 y con la columna

Lichrospher

N4 Cromatograma de la mezcla de prueha PA en la fase moacutevil 2 y con la columna

Lichrospher

Archivo DET (integracitln de los picos) del sistema de tratamiento de

datos

Number of entries 5 File title DETHP

No Time Parameter Name Parameter Value

1 0000 Minimum Area 0000000 2 0000 Minimum Width 0000000 3 0000 Minimum Height 1000000 4 0000 Inhibit Integration On 5 1000 Inhibit Integratlon Off

Archivo PRM (informe) del sistema de tratamiento de datos

File title testPRMHPI050

Signa 1 name Time window from Signal window from Report unidentified peak s Dead time Relative area threshold

AD-5 0000 AUTO On

14 min 00

to to

10000 AUTO

[min]

DE COLOMBIAI IIVERSIDAO NACIONAL

ANEXO Ndeg4 Graacuteficas de linealidad factores de respuesta y sensibilidad

del test de verificacioacuten

LINEALIDAD NoftalDoo

rt1 _ JIIi~

~E~Ego 1000 2000 3000 000 6000

-(ng) 1IonW6go Urpoacute HP-IOSO 021611 OOOIl2I(m) r CUldrado 09997fi

LINEALIDAD

Jllinl

~I=C 5 t2 t2 S8o 200 400 SOO eoo 1000 1200 1400

-Cnll 1IonW6go Urpoacute HP lOS) =022346 OOU2I(m ) r cuadrldo 5 O QQ984

LINEALIDAD Al1lrcello

15 -emiddot

tc1o fI) 100 160 200 260

-CnfII QonohgroU - lClIIO ir t H227 bull OJCl)t~lNw)

wldndo O~16b

LINEALIDAD

-emiddot

t==~fGlo 200 400 EDO ~ t 000

-toIIl Qunotoacutegrolo u HP-IOIiO =(21il10middot O0622(n-A) r wadrdo Ogoo(tQ

LINEALIDAD

Fenlreno rI~

-emiddotminl

~Lc=tE2EIo 100 200 m 400 ltXJ

-CnfII ~o UrpoacutedDlP-tOliO bullbullbull ( 1237S bull 0 14014( ) r OJldrado =O~

SUSTANCIA rCLWgtRADO

tw=TALENO 088815

BFENILO 08_0

F1UORENO 088884

FENANrRENO 088884

ANTAACEHO 088155

1

LINEALIDAD Nlllaleno

rf1 Ir_Imun)

~tjiquestGg1 o 1 OOJ 2000 3 OOJ 4 OOJ 6 OOJ _ (n

Qanortlglfo UIID HP-IOQO ()I(J

= O 1le08 O001IiO(m) cuidrldo 099948

LINEALIDAD Ruarono

n9

LINEALIDAD M ceno

rf11 _( min)

LINEALIDAD Blerilo

n8

O 7oo 400 ID) eoo 1 000 1700 ~-===1-111Qumoblgrlfo l rlID HP-IOQO [W)

u =o 1~18 003 (m) r cuadrado =O09Q53

LINEALIDAD

_~JnIacutenj

~I- C31O O 100 200 300 00 eoo-In

QomoI6gnfoU HP-tOIIO ()I(J 6 bull bull 074l1lgtI bull o 06101(m) r cudrldo =O 099U~

middot~Etc==1o 76 liJ 1li 100 176 1ampJ 116 200 225 260-~olr--ICOOIWJ lO 0501840 O16171(m ) r cuadrdo =OgQ6()t

SUSTANCIA r

NAFTALENO 08ee48

BFENIlO 088853

FlUORENO 088845

FENANTRENO 088818

NlTRACENO 088804

Archivo DET (integracitln de los picos) del sistema de tratamiento de

datos

Number of entries 5 File title DETHP

No Time Parameter Name Parameter Value

1 0000 Minimum Area 0000000 2 0000 Minimum Width 0000000 3 0000 Minimum Height 1000000 4 0000 Inhibit Integration On 5 1000 Inhibit Integratlon Off

Archivo PRM (informe) del sistema de tratamiento de datos

File title testPRMHPI050

Signa 1 name Time window from Signal window from Report unidentified peak s Dead time Relative area threshold

AD-5 0000 AUTO On

14 min 00

to to

10000 AUTO

[min]

DE COLOMBIAI IIVERSIDAO NACIONAL

ANEXO Ndeg4 Graacuteficas de linealidad factores de respuesta y sensibilidad

del test de verificacioacuten

LINEALIDAD NoftalDoo

rt1 _ JIIi~

~E~Ego 1000 2000 3000 000 6000

-(ng) 1IonW6go Urpoacute HP-IOSO 021611 OOOIl2I(m) r CUldrado 09997fi

LINEALIDAD

Jllinl

~I=C 5 t2 t2 S8o 200 400 SOO eoo 1000 1200 1400

-Cnll 1IonW6go Urpoacute HP lOS) =022346 OOU2I(m ) r cuadrldo 5 O QQ984

LINEALIDAD Al1lrcello

15 -emiddot

tc1o fI) 100 160 200 260

-CnfII QonohgroU - lClIIO ir t H227 bull OJCl)t~lNw)

wldndo O~16b

LINEALIDAD

-emiddot

t==~fGlo 200 400 EDO ~ t 000

-toIIl Qunotoacutegrolo u HP-IOIiO =(21il10middot O0622(n-A) r wadrdo Ogoo(tQ

LINEALIDAD

Fenlreno rI~

-emiddotminl

~Lc=tE2EIo 100 200 m 400 ltXJ

-CnfII ~o UrpoacutedDlP-tOliO bullbullbull ( 1237S bull 0 14014( ) r OJldrado =O~

SUSTANCIA rCLWgtRADO

tw=TALENO 088815

BFENILO 08_0

F1UORENO 088884

FENANrRENO 088884

ANTAACEHO 088155

1

LINEALIDAD Nlllaleno

rf1 Ir_Imun)

~tjiquestGg1 o 1 OOJ 2000 3 OOJ 4 OOJ 6 OOJ _ (n

Qanortlglfo UIID HP-IOQO ()I(J

= O 1le08 O001IiO(m) cuidrldo 099948

LINEALIDAD Ruarono

n9

LINEALIDAD M ceno

rf11 _( min)

LINEALIDAD Blerilo

n8

O 7oo 400 ID) eoo 1 000 1700 ~-===1-111Qumoblgrlfo l rlID HP-IOQO [W)

u =o 1~18 003 (m) r cuadrado =O09Q53

LINEALIDAD

_~JnIacutenj

~I- C31O O 100 200 300 00 eoo-In

QomoI6gnfoU HP-tOIIO ()I(J 6 bull bull 074l1lgtI bull o 06101(m) r cudrldo =O 099U~

middot~Etc==1o 76 liJ 1li 100 176 1ampJ 116 200 225 260-~olr--ICOOIWJ lO 0501840 O16171(m ) r cuadrdo =OgQ6()t

SUSTANCIA r

NAFTALENO 08ee48

BFENIlO 088853

FlUORENO 088845

FENANTRENO 088818

NlTRACENO 088804

ANEXO Ndeg4 Graacuteficas de linealidad factores de respuesta y sensibilidad

del test de verificacioacuten

LINEALIDAD NoftalDoo

rt1 _ JIIi~

~E~Ego 1000 2000 3000 000 6000

-(ng) 1IonW6go Urpoacute HP-IOSO 021611 OOOIl2I(m) r CUldrado 09997fi

LINEALIDAD

Jllinl

~I=C 5 t2 t2 S8o 200 400 SOO eoo 1000 1200 1400

-Cnll 1IonW6go Urpoacute HP lOS) =022346 OOU2I(m ) r cuadrldo 5 O QQ984

LINEALIDAD Al1lrcello

15 -emiddot

tc1o fI) 100 160 200 260

-CnfII QonohgroU - lClIIO ir t H227 bull OJCl)t~lNw)

wldndo O~16b

LINEALIDAD

-emiddot

t==~fGlo 200 400 EDO ~ t 000

-toIIl Qunotoacutegrolo u HP-IOIiO =(21il10middot O0622(n-A) r wadrdo Ogoo(tQ

LINEALIDAD

Fenlreno rI~

-emiddotminl

~Lc=tE2EIo 100 200 m 400 ltXJ

-CnfII ~o UrpoacutedDlP-tOliO bullbullbull ( 1237S bull 0 14014( ) r OJldrado =O~

SUSTANCIA rCLWgtRADO

tw=TALENO 088815

BFENILO 08_0

F1UORENO 088884

FENANrRENO 088884

ANTAACEHO 088155

1

LINEALIDAD Nlllaleno

rf1 Ir_Imun)

~tjiquestGg1 o 1 OOJ 2000 3 OOJ 4 OOJ 6 OOJ _ (n

Qanortlglfo UIID HP-IOQO ()I(J

= O 1le08 O001IiO(m) cuidrldo 099948

LINEALIDAD Ruarono

n9

LINEALIDAD M ceno

rf11 _( min)

LINEALIDAD Blerilo

n8

O 7oo 400 ID) eoo 1 000 1700 ~-===1-111Qumoblgrlfo l rlID HP-IOQO [W)

u =o 1~18 003 (m) r cuadrado =O09Q53

LINEALIDAD

_~JnIacutenj

~I- C31O O 100 200 300 00 eoo-In

QomoI6gnfoU HP-tOIIO ()I(J 6 bull bull 074l1lgtI bull o 06101(m) r cudrldo =O 099U~

middot~Etc==1o 76 liJ 1li 100 176 1ampJ 116 200 225 260-~olr--ICOOIWJ lO 0501840 O16171(m ) r cuadrdo =OgQ6()t

SUSTANCIA r

NAFTALENO 08ee48

BFENIlO 088853

FlUORENO 088845

FENANTRENO 088818

NlTRACENO 088804

LINEALIDAD NoftalDoo

rt1 _ JIIi~

~E~Ego 1000 2000 3000 000 6000

-(ng) 1IonW6go Urpoacute HP-IOSO 021611 OOOIl2I(m) r CUldrado 09997fi

LINEALIDAD

Jllinl

~I=C 5 t2 t2 S8o 200 400 SOO eoo 1000 1200 1400

-Cnll 1IonW6go Urpoacute HP lOS) =022346 OOU2I(m ) r cuadrldo 5 O QQ984

LINEALIDAD Al1lrcello

15 -emiddot

tc1o fI) 100 160 200 260

-CnfII QonohgroU - lClIIO ir t H227 bull OJCl)t~lNw)

wldndo O~16b

LINEALIDAD

-emiddot

t==~fGlo 200 400 EDO ~ t 000

-toIIl Qunotoacutegrolo u HP-IOIiO =(21il10middot O0622(n-A) r wadrdo Ogoo(tQ

LINEALIDAD

Fenlreno rI~

-emiddotminl

~Lc=tE2EIo 100 200 m 400 ltXJ

-CnfII ~o UrpoacutedDlP-tOliO bullbullbull ( 1237S bull 0 14014( ) r OJldrado =O~

SUSTANCIA rCLWgtRADO

tw=TALENO 088815

BFENILO 08_0

F1UORENO 088884

FENANrRENO 088884

ANTAACEHO 088155

1

LINEALIDAD Nlllaleno

rf1 Ir_Imun)

~tjiquestGg1 o 1 OOJ 2000 3 OOJ 4 OOJ 6 OOJ _ (n

Qanortlglfo UIID HP-IOQO ()I(J

= O 1le08 O001IiO(m) cuidrldo 099948

LINEALIDAD Ruarono

n9

LINEALIDAD M ceno

rf11 _( min)

LINEALIDAD Blerilo

n8

O 7oo 400 ID) eoo 1 000 1700 ~-===1-111Qumoblgrlfo l rlID HP-IOQO [W)

u =o 1~18 003 (m) r cuadrado =O09Q53

LINEALIDAD

_~JnIacutenj

~I- C31O O 100 200 300 00 eoo-In

QomoI6gnfoU HP-tOIIO ()I(J 6 bull bull 074l1lgtI bull o 06101(m) r cudrldo =O 099U~

middot~Etc==1o 76 liJ 1li 100 176 1ampJ 116 200 225 260-~olr--ICOOIWJ lO 0501840 O16171(m ) r cuadrdo =OgQ6()t

SUSTANCIA r

NAFTALENO 08ee48

BFENIlO 088853

FlUORENO 088845

FENANTRENO 088818

NlTRACENO 088804

1

LINEALIDAD Nlllaleno

rf1 Ir_Imun)

~tjiquestGg1 o 1 OOJ 2000 3 OOJ 4 OOJ 6 OOJ _ (n

Qanortlglfo UIID HP-IOQO ()I(J

= O 1le08 O001IiO(m) cuidrldo 099948

LINEALIDAD Ruarono

n9

LINEALIDAD M ceno

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LINEALIDAD Blerilo

n8

O 7oo 400 ID) eoo 1 000 1700 ~-===1-111Qumoblgrlfo l rlID HP-IOQO [W)

u =o 1~18 003 (m) r cuadrado =O09Q53

LINEALIDAD

_~JnIacutenj

~I- C31O O 100 200 300 00 eoo-In

QomoI6gnfoU HP-tOIIO ()I(J 6 bull bull 074l1lgtI bull o 06101(m) r cudrldo =O 099U~

middot~Etc==1o 76 liJ 1li 100 176 1ampJ 116 200 225 260-~olr--ICOOIWJ lO 0501840 O16171(m ) r cuadrdo =OgQ6()t

SUSTANCIA r

NAFTALENO 08ee48

BFENIlO 088853

FlUORENO 088845

FENANTRENO 088818

NlTRACENO 088804

LINEALIDAD

Nn 1113

-(-nWtI

~C-==~1o o 1(0) 2ClXI xnJ axl

~OlfIf-I08O-~ - Q00738 bull 00136 ( ) f QJIrao O~

LINEALIDAD Fluono

1115 - min)

~z- C==1 o 200 00 8lO ero 1000 1200

_ (no

~oLlHP-IQ80161 ADf bull 011616 0030161 (m) r Uldfldo amp OgQjQ6

LINEALIDAD Amro

1117 _ min)

~tL= ==5-61 O ~ 100 16lJ 200

DumoltlgQ llHP-lntilde~ 02(6600031 (m) r tuodlodo bull 011amp 7

LINEALIDAD ElIDO

rM4 -(_1MIl

~I~ == == 61O 200 00 ID IJX) 1 000

DanoIi9n U If-I080-ka Q0Q628 OOOON () r cuadrado r O~

LINEALIDAD

F1reno 1118

-(-nWtI

~C=z1O 100 200 S)) 00

QonwIvofo U-If-I080--tlf bullbullbull Q1Oamp O 10162 () r odAdo O~18

8USTANCIA rCUADIW)O

NAfTAlENO OtteH BFENllQ 011I83~

FlUORENO 01112 FEHANTRENO 081118

NfrRACEHO 0811841 - shy

LINEALIDAD

Naftaleno rl19

_(momin)

ti=laquo --==1o 1 000 2 000 3000 HXXl 6()()

onr6galo Updo PE _2~l e 6 s OOt t60 OCXXl96 (mlu) r cuadrado =O99Q90

I

LINEALIDAD

Ruareno rn1

_(_minI

Iiquest-==7C=1O O 200 ~oo IlOO eoo 1000 1 200 1~oo

(nal onr6galoUpdoPE_ Z PElc 16eI -o~3 O0132Q (milsoa) r cUildrado 0 0tlt972

LINEALIDAD

- ( moI)

lt~==sectet300 trJ 100 160 200 700

onr6gralOUrPdoPE-__iitfr16 Q 16613middot 006Iti8() f cudndo s 099732

LINEALIDAD Elfenilo

rl20 - (momin)

~EiC=gj O 200 ~OO IlOO eoo I 000 1 200

-(ntlonr6galoUIuidoPE __ z PE~C 76

bullbull QOI6Q7 0011amp1 (m) cuadrado O9Qg4g

LINEALIDAD Fenreno

rPl2 _(nrrin)

~Ei==5tJO O 100 200 3lO ero 100

CnmoItIgnIo UrPdo PE-_~~C 76 hQ067~~ 0-() r ruadrado =09997

SUSTANCIA rCUADRADO

r---NtildeAFlAlENO 0118880

BFENllO oe8848 FlUORENO 088812

FENANTRENO

088841

AHTRACENO 088132

LINEALIDAD NIflIIIeno

N25 _Inun)

~Iiquest--5 j o 1000 2000 3000 4000 6000

(ng) Cngtmootg1I0 Lrdo PE - lil MJ = -O036IloI bull 000884 (moSi) r cUildrado == 0 QG621

LINEALIDAD

FJaeno N27

-(-1

~I====== t TIo 200 8)() 8)() 1000 1200 1400

QanoI6gr1lo UIfIo PE-lil NJ-~ OCQiI82 000217 (mbullbull) r cudrado =0996(6

LINEALIDAD

raceno

_ ( 1 W29

~E~g1Jo 8) 100 160 100 200 ~

QanoI6grolo U PE- 1il Nl bullbull =QCltl379 bull 021874 (mo) r wldfado O9te73

LINEALIDAD 8Iferilo N26

(mIIIw)

~ti=ordfordfo 200 400 810 810 1000 -(na)

cr0llllll6g1lfo UqiexcladD PE-757 IgtD = - 00097 bull 003745 (m) rcuaa~ao = 099840

LINEALIDAD

Fnbeno

-1--11 -=1~~===

O 100 200 300 400 ~o

-010IIII CO~ PE-nl NJ ~bullbull - 002282 bull OOGl8Gft () r wlIIdJ bull OM43

shySUSTANCIA rCUADRADO

NAFTALENO 088821

BFENllO 088810

FlUORENO 0811808

FENANTRENO 018M3

ANTRACENOshy 0811813

LINEALIDAD NIflIIIeno

N25 _Inun)

~Iiquest--5 j o 1000 2000 3000 4000 6000

(ng) Cngtmootg1I0 Lrdo PE - lil MJ = -O036IloI bull 000884 (moSi) r cUildrado == 0 QG621

LINEALIDAD

FJaeno N27

-(-1

~I====== t TIo 200 8)() 8)() 1000 1200 1400

QanoI6gr1lo UIfIo PE-lil NJ-~ OCQiI82 000217 (mbullbull) r cudrado =0996(6

LINEALIDAD

raceno

_ ( 1 W29

~E~g1Jo 8) 100 160 100 200 ~

QanoI6grolo U PE- 1il Nl bullbull =QCltl379 bull 021874 (mo) r wldfado O9te73

LINEALIDAD 8Iferilo N26

(mIIIw)

~ti=ordfordfo 200 400 810 810 1000 -(na)

cr0llllll6g1lfo UqiexcladD PE-757 IgtD = - 00097 bull 003745 (m) rcuaa~ao = 099840

LINEALIDAD

Fnbeno

-1--11 -=1~~===

O 100 200 300 400 ~o

-010IIII CO~ PE-nl NJ ~bullbull - 002282 bull OOGl8Gft () r wlIIdJ bull OM43

shySUSTANCIA rCUADRADO

NAFTALENO 088821

BFENllO 088810

FlUORENO 0811808

FENANTRENO 018M3

ANTRACENOshy 0811813

LINEALIDAD

-(-middotriol

~E22itfJO 1000 lOOO ~OOO 4000 6 GW

-(na)tnmII6pllo U KMlt-IOOA_ 440 bullbullbull Q271jj - 0 021~() r wadfado O9Q9U

LINEALIDAD

fu 1113

-e

~C02J o 200 00 600 800 000 1200 0100

cornov JqUIII) ICM(-_A

__ 44

_ =00086 -010413 (_10 culdr8Ctl =09110152

LINEALIDAD MlrllCeflo

d35 -~min)

~I=cf1rl o o al 100 160 00 260

-Inlll ~rlIKNK-IOOA bullbullbullbull 440

r bull c OBCOo 07 t2(f1 2 (muI) r cu bullbullado a OOO8n

LINEALIDAD EIf1o

R32 _ min)

i~bh==fJ o 200 400 SlO ero 1000 200

(nalCrornoI6grllo lIda KNK-laquoJOA _ bullbull 440 0 642~8- 01I016(m ) r cuadrldo O~3

LINEALIDAD Fenantreoo

rn4 (vmn)

~Iiquest1TI1o 100 200 3gt0 400 ~

--(na)0 190 UcpdD KNlt~A _ bullbull laquoO ~ = 034613 - 028337 (m) 1ruadlaOo 099845

SUSTANCIA rCUADRADO

NAFTALENO 0811814

r--- BFENllO oe8843 FlUORENO 082

fENNolTRENO 088845

ANTRACENO 0t8872

LINEALIDAD

_ (nI

~t~==f9deg 1000 2000 ~ooo 4000 5000 -toal

QaMl6grlfo UoIoIltNlt-7fi1 Kl Ir = Q40872 bull C()()SI6(moA) r OIdrldo = OQ9719

LINEAlIDAD AuattllO

NI9 -( 1

t--=-= j7~1O O 200 400 8)) 8)) 1000 1200 1400

-toal QaMl6grIfo U IltNlt-717 Kl Irbullbull Qtl361G O02Il83(moA) r cuadrado lt= OgQg2f1

_~__--ll

I

bullLINEALIDAD

- 0)

~ttCc~deg0 50 100 150 200 760

bull 111~6glfo U KNK-161 Ngt - r 0116U 01676 (mo )

1 f cUAdrado O99)f)T

LINEALIDAD Bifenio NI8

_(n

t~~1JO 200 400 8)) ampXl 1 000 - 200-a-lfoU IltNlt-717 gtC)

Irbullbull Q 16Z11 bull OOS72 () cuadrldD OM66

LINEALIDAD

~C~=IdegO 100 200 _~ 400 8))

~6grlfoUdoKNI(751Kl roo O~7 Ooe1l13(m) r cUldrdo O~

I

SUSTANCIA rCUAORADO

NAFlIllEHO oaana BFENILO 088855

FlUORENO 0811825

FENAHTRENO 088854

ANTRACENO 088857

LINEALIDAD

_ (nI

~t~==f9deg 1000 2000 ~ooo 4000 5000 -toal

QaMl6grlfo UoIoIltNlt-7fi1 Kl Ir = Q40872 bull C()()SI6(moA) r OIdrldo = OQ9719

LINEAlIDAD AuattllO

NI9 -( 1

t--=-= j7~1O O 200 400 8)) 8)) 1000 1200 1400

-toal QaMl6grIfo U IltNlt-717 Kl Irbullbull Qtl361G O02Il83(moA) r cuadrado lt= OgQg2f1

_~__--ll

I

bullLINEALIDAD

- 0)

~ttCc~deg0 50 100 150 200 760

bull 111~6glfo U KNK-161 Ngt - r 0116U 01676 (mo )

1 f cUAdrado O99)f)T

LINEALIDAD Bifenio NI8

_(n

t~~1JO 200 400 8)) ampXl 1 000 - 200-a-lfoU IltNlt-717 gtC)

Irbullbull Q 16Z11 bull OOS72 () cuadrldD OM66

LINEALIDAD

~C~=IdegO 100 200 _~ 400 8))

~6grlfoUdoKNI(751Kl roo O~7 Ooe1l13(m) r cUldrdo O~

I

SUSTANCIA rCUAORADO

NAFlIllEHO oaana BFENILO 088855

FlUORENO 0811825

FENAHTRENO 088854

ANTRACENO 088857