天然生薬を主成分とする合剤が線虫Caenorhabditis elegans に与える影響

2006 年 9 月 14 日

中平啓介・長谷川浩一 *・三輪さつき・三輪錠司（中部大応用生物・中部大生物機能開発研・京大院農 *）

日本線虫学会 　第 14 回大会

천연생약을 주성분으로 하는 합제(KGN)가 선충(Caenorhabditis elegans)에 미치는 영향

일본선충학회 제14회 대회

Keisuke Nakahira, Koichi Hasegawa*, Satsuki Miwa, Joji Miwa

(College of Bioscience and Biotechnology, Chubu University,

*Graduate School of Agriculture, Kyoto University공동연구)

A joint agent (KGN) with natural raw medicine as the main component

内容成分내용성분

含有率함유율

50粒(1日推奨摂取量 )中の含有率

50알(1일권장섭취량)중의 함유율

45%

10%

10%

10%

10%

5%

5%

5%

8.4375g

1.875g

1.875g

1.875g

1.875g

0.9375g

0.9375g

0.9375g

KIPPO Science Limited(http://www.kippos.net/)

エゾウコギ (ウコギ科ウコギ根皮 )

タイム (シソ科タチジャコウソウの開花期の全草 )

ローズマリー (シソ科マンネンロウの葉や枝 )

ウコン (ショウガ科ウコンの根茎 )

フェンネル (セリ科ウイキョウの果実 )

葡萄種子 (ブドウ科ブドウの種子 )

浦公英 (キク科タンポポの全草 )

シルク

가시오갈피

타임thyme(꿀풀과의 다년초의 개화기의 전초)

로즈마리rosemary

울금

회향풀fennel(회향의 과실)

포도종자

민들레뿌리

명주silk

天然生薬を主成分とする合剤 (KGN)

1

천연생약을 주성분으로 하는 합제(KGN)

倍地条件Culture conditions

・pH

pH6…リン酸バッファー

pH7... 上記バッファーを KOHで調整

・濃度Control 及び

1日に 20 粒摂取した場合と

1日に 40 粒摂取した場合

(1 日の推奨摂取量は 50 粒 )

・ pH2 通り× 濃度 3通り、合計 6つのパターン

2

인산 완충기

control 그리고

1일에 20알 섭취했을 경우

1일에 40알 섭취했을 경우

(1일 권장 섭취량은 50알)

pH 2패턴×농도 3패턴,합계 6패턴

상기 완충기를 KOH로 조절

배지 조건

100

80

60

40

20

5 9 25211 13 17

Control pH6KGN20 粒 pH6KGN40 粒 pH6Control pH7KGN20 粒 pH7KGN40 粒 pH7

生存率（％）Survival rate

3

Life span of C. elegans

線虫への寿命効果선충에 대한 수명효과

생존율(%)

Average life 平均寿命

16

14

12

10

8

6

4

2

0Cont.pH6

Cont.pH7

KGN20 粒pH6

KGN40 粒 pH6

KGN20 粒 pH7

KGN40 粒 pH7

Life span of C. elegans

線虫への寿命効果

4

선충에 대한 수명효과

평균 수명

前回からの改善点Points of improvement from previous time

FUdR(5-fluoro-2’ -deoxyuridine) を加えるFUdR(5-fluoro-2’-deoxyuridine) 을 더함

보다 고농도로 행하다

より高濃度で行う

산란을 억제하여 이동에 의한 스트레스를 감소

産卵を抑えるとこで移動によるストレスを軽減

배지 제작이 곤란하므로 용해 후, 정지 또는 원심에 의한 추출액을 이용한다

培地作製困難な為溶解後、静地または遠心により抽出液を用いた

체중50kg의 사람의 1일 권장 섭취량···50알

体重 50kg の人の 1日推奨摂取量・・・50粒

50L에 50알, 즉 1000ml의 1알

50L に 50 粒、つまり 1000ml の 1粒

×500인 경우, 1000ml의 500알

×500 の場合、1000ml に 500 粒

5

지난번부터 개선점

Survival rate of C. elegans by concentration

100

120

80

60

40

20

05 9 25 29211 13 17

Days

KGNx500KGNx250KGNx50KGNx5Control

Survival rate生存率（％）

濃度別による線虫の生存曲線

6

농도별 선충의 생존곡선

생존율(%)

コントロールと比較したときの寿命伸び率 (%)Rate of life extension compared to the control (%)

KGNx500 21.8 28.1 3.5 16.4 13.7 16.7±0.092

30.1 35.6 32.9±0.039

1.6 14 4.4 28.1 26 14.8±0.121

19.4 25.6 -0.9 20.5 19.9 16.9±0.103

KGNx250

KGNx50

KGNx5

1 回目1st 2nd 3rd 4th 4th Centrifugation Average

2 回目 3回目 4回目 4回目遠心 平均

7

control와 비교 했을 때의 수명 연장율(%)

ATP活性 (ATP activity)

SOD活性 (SODactivity)

H₂O₂uric acid

O₂+H₂O₂

2O₂

2O₂

xanthineO₂

XO

NO³

NO

+発色基質(Tetrazolium)

SOD

N N

SNO

COON

S

N N

SNO

O²

S

ATPO²

AMPCO²

ルシフェラーゼルシフェリン オキシルシフェリンLuciferin Oxy luciferinLuciferase

生理活性測定Measurement of physiological activity

8

생리활성측정

ATP활성

SOD활성

루시페린 루시페라아제 옥시 루시페린

발색기질

Measurement of ATP activityATP 活性測定 (KGN 24h 処理 )

Control KGNx50 KGNx250

10

8

6

4

2

0

ATP activity

(nmol/mg Protein)

9

ATP활성측정(KGN 24h 처리)

Measurement of ATP activitySOD活性測定 (KGN 24h 処理 )

Control KGNx50 KGNx250

50

40

30

20

10

0

SOD activity

(Units/mg Protein)

10

SOD활성측정(KGN 24h 처리)

KGN処理することにより、

寿命の延長

最大で約 35%の伸び率が確認できた

生理活性の変化

ATP活性の向上 SOD合成を抑える

線虫への負担の軽減

+

1

2

Summaryまとめ

11

정리

KGN처리하면,

수명연장

생리활성의 변화

ATP활성의 향상 SOD합성을 억제

최대 약 35%의 연장율이 확인됨

선충에의 부담을 경감

KIPPO Science Ltd. の尹正万 (ユン・ジョンマン )氏と田中雅氏にKGNに関する資料及び研究試料を提供して頂きました。ここに感謝致します。

Acknowledgments謝辞

12

KIPPO Science Ltd.의 윤정만 씨와 다나카 미야비 씨에게 KGN에 관한 자료 및 연구 자료를 제공받았습니다.

여기에 감사드립니다.

사사