L’appropriatezza dell’utilizzo dei

COLLIRI BIOLOGICI

nelle patologie oculari Alessandria 18/11/2016

La Membrana Amniotica P. E. Indemini, A. Sava

Banca delle Membrane Amniotiche della Regione Piemonte S.C. Oculistica

A.S.O. Santa Croce e Carle Cuneo

La membrana amniotica è un tessuto umano, lamina sottile di aspetto traslucido e consistenza elastica prelevato dalla placenta umana e impiegato a scopo di innesto

E’ costituita da due strati: -Epitelio monostratificato, ectodermico, cellule epiteliali colonnari e la sua membrana basale (fasci di fibrille di collagene di tipo IV, proteoglicani, eparansolfati, fibronectina) -Stroma mesenchimale (fibrille di collagene di tipo I e III, fibroblasti, fibronectina) avascolare

S

E+MB

esame istologico

Lato stromale

Lato epiteliale

L’epitelio fa da “guida” nei processi riparatori fattori antinfiammatori la MB provvede ad una nuova membrana basale Lo stroma ha azione antinfiammatoria, anticicatriziale, antiangiogenetica

• Riparative, riepitelizzante

• Antiflogistiche • Antalgiche • Antiangiogenetiche • Anticicatriziali • Batteriostatiche • Non immunogenica

E-MB

S

Sede delle proprietà

Contiene collagene IV (variante a catena ⟨ 2 e ⟨ 5), collagene VII, laminina, fibronectina, fibroblasti, materiale spongioso verso il corion, materiale acellulare

Invest OphthalmolVis Sci.2006 May;47(5)Resch et al

• In alcune situazioni si comporta come LAC terapeutica • Sostituto temporaneo della MB epiteliale

Contiene fattori di crescita EGF epidermal growth factor, bFGF basic fibroblastic growth

factor, HGF hepatocyte growth factor, KGF keratinocyte growth factor, TGF-ß1 transforming growth factor-beta, stimolano l’epitelio

Proprietà trofiche

• è un potente stimolatore della produzione di matrice extracellulare

• promuove o diminuisce l’adesione cellulare in modo dipendente dal tipo di cellula

In generale l’eccesso di produzione di TGF- ß provoca

fibrosi, formazione di tessuto cicatriziale e neovasi L’azione antifibrotica si esprime con l’inibizione dell’espressione dei recettori per il TGF- ß da parte dei cheratociti

TGF- ß

Barriera tra stroma ed epitelio

riduzione delle cellule infiammatorie che invadono lo stroma corneale attraverso il film lacrimale

inibizione della produzione citochine infiammatorie IL-8 da parte dei cheratociti stromali in risposta ai mediatori dell’infiammazione

inibizione produzione IL-1α e β (contiene IL-1ra antagonista dei recettori IL-1)

Exp Eye Res.2005 May;80 Kamiya

Br J Ophthalmol.2001 Apr;85 Solomon et al

Proprietà antinfiammatoria

La neovascolarizzazione è un meccanismo patogenetico complesso.

Fattori stimolanti la migrazione di neovasi (infezioni , distrofie, degenerazioni, mal autoimmuni)

Superficiale, stromale, profonda Mediatori vasogenici Citochine angiogenetiche VEGF

La proprietà antiangiogenetica sarebbe da attribuire allo stroma avascolare della m.a.

JVK et al Cornea(1995) AA Blanco et al BJO(1999)

Proprietà antiangiogenetiche

1-CNT Centro Nazionale Trapianti 2-CIRT C. Interregionali Trapianti

3-CRRT Centro Regionale RiferimentoTrapianti

Banca delle Membrane Amniotiche della Regione Piemonte

Direttore Dr. Guido Caramello

Responsabile Medico Dr.ssa P. E. Indemini Responsabile Biologo Dr.ssa A. Sava

Istituita con delibera Regionale nel marzo 2003

Sede: ASO S Croce e Carle Cuneo

Iniziativa promossa dal Rotary Club di Cuneo

Banche di MA in Italia

• Mestre: giugno 1999 NITp • Roma: 2001 OCST • Bologna: 2002 AIRT • Treviso: 2002 NITp • Lucca: 2003 AIRT • Cosenza: 2004 OCST • Cuneo: 2004 AIRT • L’Aquila: 2004 OCST • Fabriano: giugno 2007 NITp

SIBO

Compiti della banca

• Selezione donatrice

• Prelievo della placenta

• Processazione del tessuto

• Certificazione idoneità

donatrice e tessuto

• Congelamento

• Conservazione

• Distribuzione

• Archiviazione (30 anni)

• Raccolta del follow up

• Ostetricia e ginecologia Selezione della donatrice Prelievo della placenta Ricevimento dei referti Valutazione idoneità donatrice

• Oculistica Valutazione placenta (es. Ispettivo) Processazione (linee guida) Congelamento e quarantena Scongelamento Distribuzione ai centri richiedenti (anche fuori regione) Archiviazione (30 anni) Gestione eventi avversi Follow up a 1 mese

• Laboratorio analisi Esami sierologici (donatrice) Esami microbiologici (placenta, membrane amniotiche)

• Anatomia patologica Esame istologico

• Ematologia Criocongelamento Scongelamento

• Criobanca Crioconservazione Carico e scarico dei patch di MA

Prelievi di placenta

2004: 41 2005: 56 2006: 31 2007: 8 2008: 41 2009: 36 2010: 17 2011: 2 2012: 0 2013: 7 2014: 9 2015: 12 2016 in corso: 8 268 totale

.0

37.5

75.0

112.5

150.0

20042005200620072008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016

68

145 149 133

164 164

135 123 133

110

83 87 70

41 56

31

8

41 36 17

2 0 7 9 12 8

Membrane distribuite

2004: 68 2005: 145 2006: 149 2007: 133 2008: 164 2009: 164 2010: 135 2011: 123 2012: 133 2013: 110 2014: 83 2015: 87 2016 in corso: 70 1564 totale

.035.771.4

107.1142.9178.6214.3

2004 2006 2008 2010 2012 2014 2016

68

145 149 133

164 164 135 123 133

110 83 87

70 41 56

31 8

41 36 17

2 0 7 9 12 8

Centri di innesto

ALESSANDRIA ASO SS. Antonio e Biagio e Cesare Arrigo

AOSTA Ospedale Regionale di Aosta

ASTI Presidio ospedaliero di Asti

BIELLA Ospedale degli Infermi

BORGOMANERO (NO) Ospedale SS. Trinita’

CASALE M.TO Ospedale S. Spirito

CIRIE' Stab. Osp.

CUNEO S. Croce e Carle

IVREA Ospedale Civile

NOVARA Ospedale Maggiore della Carita’

PINEROLO Ospedale Civile "E. Agnelli"

TORINO Oftalmico

TORINO Ospedale Regina Margherita, Mauriziano, Gradenigo

TORINO S. Caterina da Siena, MariaP. Hospital, S.Sapientiae

VERCELLI Ospedale S. Andrea

CARMAGNOLA Centro LISA

MELEGNANO Ospedale Vizzolo - Predabissi

Centri di innesto

GENOVA Ospedale San Martino - Clinica Oculistica

SARZANA Osp S Bartolomeo

RAPALLO ASL 4 Chiavarese

FARA NOVARESE CdiC I Cedri

SAVIGLIANO Ospedale Maggiore SSAnnunziata

ARONA Ospedale SS Trinità

BRA CdiC Città di Bra

NOVI LIGURE Ospedale S Giacommo

ALBENGA Ospedale S Maria Misericordia

LA SPEZIA Ospedale Civile Alma Mater

ACQUI TERME Ospedale Civile

LAVAGNA ASL 4 Chiavarese

BANCHETTE Centro Medico Aurora

• Finalità riparative: 95 % • Finalità antalgiche: 80 % • Finalità sostitutive: 75 % • Indicazioni particolari: 15%

– 90% causticazioni acute (p.antiinfiammatorie) – 50% ricostruzioni – 50% glaucoma (p.anticicatriziali)

Banca delle Membrane Amniotiche della Regione Piemonte

• Azione riepitelizzante: – Ulcere – Sindrome sicca – Difetti epiteliali

persistenti

• Azione anticicatriziale – Causticazioni – Pterigio – Chirurgia del glaucoma

• Azione antidolorifica

– Cheratopatia bollosa

• Azione antiflogistica

– Sindrome sicca

– Ulcere

Indicazioni

• Ulcera (non settica, su lembi,…)

• Rischio di perforazione

• Microperforazioni

• Cheratopatia bollosa

• Cheratopatia a bandelletta (EDTA)

• Difetti epiteliali persistenti

• Causticazioni acute ed esiti • Ricostruzioni congiuntivali

– congiuntivocalasi, neoplasie, traumi, simblefaron…

• Sindrome sicca • Erosioni congiuntivali • Pre o post KP • Deficit limbare parziale….

Prima del trapianto corneale

by Dr. U. De Sanctis

Dopo trapianto di cornea

Ulcera corneale

Neovascolarizzazione corneale

• Come graft temporaneo • Sopprime l’infiammazione • la M.A. si dissolve o viene rimossa dopo healing (funziona come una LAC

terapeutica)

• Come graft permanente • Per la ricostruzione della superficie corneale (la M.A. non si dissolve, si integra,

rimpiazza la MB) • Per la ricostruzione della superficie congiuntivale • Per il rinforzo della capsula del Tenone • In associazione a MMC (per il controllo di una severa infiammazione)

• Per l’espansione in vivo di cells staminali – Incoraggianti risultati negli umani

• Autologo Pellegrini et al 1997, Tsai et al 2000 • Allogenico Koizumi et al 2001

• Studi in vitro come supporto terapeutico (netilmicina) Mencucci R. et al, Cornea, 2006 May; 25(4) Koizumi et al, Graefes Arch Clin EXP Ophthalmol 2006 Apr 16

Distacco Digestione Integrazione

Innesto monostrato L’epitelio scompare in una settimana e compare un nuovo epitelio corneale sotto la membrana amniotica La lamina basale e lo stroma scompaiono in 2-5 settimane Innesto multistrato Si integra e dà spessore (non si dissolve), reintegra l’integrità stromale rimpiazzando la membrana basale e lo stroma vascolare

Mastropasqua e coll

Destino della MA

Maggiore distribuzione e impiego clinico • Dermatologia: ulcere distrofiche • Chirurgia plastica e ricostruttiva: esiti chirurgia neoplasie • Odontostomatologia: implantologia • Centro ustioni • Amniocoll

Banca dei tessuti e Bioconservatorio della Regione Piemonte

Amniocoll • Estratto di membrana amniotica in

sospensione acquosa, conservata a -80°

• Fattori di crescita, no chirurgia, sicura, ripetibile, difetti corneali superficiali

• FL-, diminuzione delle CK19+ cells, riduzione della sintomatologia

• Banca delle Cornee dell’Emilia Romagna, sede di Imola (brevetto)

• Distribuita ai centri che ne fanno richiesta in aliquote destinate ad un ricevente (tracciabilità!)

• Importante deficit della superficie corneale con

grave sindrome sicca ed esposizione

• Grave ischemia o necrosi dello stroma

• Perdita severa o totale delle cellule staminali

limbari (LSCD)

J.CellPhysiol.2005 Mar;202

Non indicata

Lesione epiteliale senza danno alla membrana basale guarigione precoce

Lesione epiteliale + danno M.B. guarigione, ritardata adesione epitelio-stroma

Lesione epiteliale con deficit parziale o completo del limbus corneale congiuntivalizzazione progressiva neovascolarizzazione corneale,erosioni ricorrenti, ulcere,infiammazione cr

Lesioni della congiuntiva cicatrizzazione, simblefaron, anomalie del film lacrimale

EJ Holland et al, Cornea(1996) BJ Cho et al, Cornea (1999)

• Correzione della patologia sottostante

• Colliri biologici

• Riduzione dell’infiammazione: M.A.

• Rimozione del tessuto infiammatorio e cicatriziale

• Promozione dei meccanismi di guarigione: M.A., siero autologo, fattori di crescita

• Sostituzione dei substrati: M.A.

• Trattamento dell’occhio secco

• Innesti epiteliali: autologhi/omologhi, congiuntivo/limbari

• Tarsorrafia • Cheratoplastica perforante/lamellare

grazie