laporan 2 probis - prinka apriati p - 10613037

7/25/2019 Laporan 2 Probis - Prinka Apriati P - 10613037

1/5

Kultur Jaringan Organ Jantung dan Hati Mencit (Musmusculus)

Prinka Apriati Penesa 10613037

Schl ! "i!e Sciences and #echnlg$% &nstitut #eknlgi 'andung (')Jalan anesha * 10 'andung +013, &ndnesiae-.ail/ inkakanag.ail*c.

Abstract Kultur jaringan merupakan metode untuk mempelajari perilaku sel hewan yangdilakukan secara in vitro dengan lingkungan yang kondisi normalnya disimulasikan dalam suatumedia tumbuh yang terdiri dari bahan kimia, faktor pertumbuhan dan komponen serum. Kulturjaringan hati dan jantung merupakan teknik yang memanfaatkan sifat unipotensi sel. Keberhasilandari kultur sel ini bergantung pada medium dan pengerjaan yang aseptik. Medium yang digunakanadalah medium yang berisi dengan DMEM dan antibiotik dan diinkubasi pada suhu 3 o!. Mediumkultur diganti selama " hari sekali atau saat warna medium telah berubah. Kultur jaringan dapatdinyatakan berhasil ketika sel berhasil membelah yang ditandai dengan adanya koloni sel yangmenumpuk. #elain itu juga dapat diindikasikan tidak adanya mikroba$mikroba lain yang masukseperti kontaminasi jamur maupun bakteri yang dapat mengganggu pertumbuhan sel. Kulturjaringan diaplikasikan pada beberapa bidang antara lain, bidang biologi seluler, farmakologi,virologi, biokimia, dan produksi berbagai bahan biologis.

KeywordsKultur aringan% in 2itr% antung Mus musculus% hati Mus musculus

Pendahuluan

Kultur aringan (tissue culture) perta.a kali digunakan pada aal a4ad ,0 se4agai suatu

.etde untuk .e.pelaari perilaku sel hean $ang 4e4as dari pengaruh 2ariasi siste.ik$ang dapat ti.4ul saat hean dala. keadaan h.estasis ataupun dala. pengaruhperc4aan atau perlakuan (5reshne$% ,00)* 'idang 4iteknlgi se.akin 4erke.4ang.en$e4a4kan kegiatan kultur sel .enadi ikut .eluas* i dala. teknik kultur aringan%kndisi lingkungan nr.al disi.ulasikan pada .edia tu.4uh $ang terdiri dari 4ahan ki.ia%!aktr pertu.4uhan dan k.pnen seru.* Jaringan $ang akan dikultur dapat dia4il secaraen8i.atis .aupun .ekanis (Priser$ant% ,003)* #eknik kultur aringan dilakukan untuk.enga.ati perilaku sel secara in 2itr* Prinsip dasar teknik kultur aringan adalah.e.pertahankan kehidupan sel di .edia selain di dala. tu4uh rganis.e dan lingkungandi4uat sede.ikian rupa agar .irip dengan lingkungan asaln$a* #ingkat ke4erhasilan dariteknik ini dapat dilihat dari 4e4erapa para.eter diantaran$a adalah persentase kn9uen%2ia4ilitas sel% a4nr.alitas sel% dan lain-lain* Secara u.u. terdapat tiga .aca. teknik dalan.elakukan kultur aringan% $aitu/ kultur rgan (organ culture)% kultur aringan (e%plant

culture)% dan kultur sel (cell culture)* Padahal se4enarn$a% 4atasan .engenai kultur rganadalah kultur dari rgan utuh atau se4agian rgan secara histlgis seperti haln$a in vivo,sedangkan kultur aringan atau kultur sel .erupakan kultur dispersi sel (sel $ang telahdipisahkan) $ang 4erasal atau $ang didapat dari aringan riginal setelah terle4ih dahulu.engala.i pe.isahan (disagregasi) secara .ekanis% atau ki.iai (en8i.atis)* #eknik kultur

aringan ini .e.iliki 4e4erapa .an!aat diantaran$a dapat digunakan se4agai 4ahan dasaruntuk .e.pelaari tksisitas 4ahan ki.ia tertentu% .ekanis.e dan !ungsi sel% reka$asagenetika% prduksi hr.n% prduksi 2aksin% dipergunakan untuk .enunang penelitianpen$akit-pen$akit teruta.a 2irus dengan .engkulti2asi 2irus% dan lain-lain (Jusu!% ,00:)*

Seklah &l.u dan #eknlgi Ha$ati ///

1


2/5

#uuan dari perc4aan ini adalah untuk .enga.ati pertu.4uhan kultur aringan pada hean.encit (Mus musculus) sela.a 6 hari*

Bahan dan Metode

Pembuatan Kultur Primer

Perc4aan dilakukan dengan .elakukan pe.tngan rgan dari hean $ang di4edah dandi4ersihkan dengan larutan P'S steril 10 kali* Ke.udian eksplan di4uat dengan cara.e.tng rgan $ang akan dikultus se4esar (; 1 ..,) .enggunakan scalpel di dala..ediu. seru. !ree (M


3/5

Gambar 1 Hasil kultur aringan antung sela.a 3 hari pada per4esaran 100 kali

Gambar ! Hasil kultur aringan hati sela.a 3 hari pada per4esaran 100 kali

Seklah &l.u dan #eknlgi Ha$ati ///

3


4/5

#erdapat e.pat enis teknik kultur (?aput% 1@@6) kultur rgan% kultur eksplan dan kulturorganotypicseperti $ang ditunukan ga.4ar di4aah ini

Gambar "* Jenis-enis #eknik Kultur

Organ e.4rinik .aupun ptngan aringan deasa dapat dikultur dengan teknik kulturrgan* Kultur rgan digunakan untuk .elakukan histlgi tetapi di4utuhkan ketera.pilantinggi dala. .e.4uatn$a* Sedangkan kultur eksplan $ang 4ersu.4er dari ptngan

aringan tidak terlalu diperlukan ketera.pilan $ang tinggi* Kultur eksplan digunakan untuk.enga.ati sitlgi dan .arker* Sednagkan untuk penguian kadar lga.% 4iki.ia%.lekuler i.unlgi digunakan teknik kultur sel $ang 4ersu.4er dari aringan $anteragregasi% cell line% .aupun kultur pri.er*

Karakter u.u. sel hean $ang 4iasa dikulturMenurut ?aput (1@@6) 4edasarkan .r!lgin$a terdapat tiga enis karakter u.u. selhean $ang dapat dikultur $aitu/

1* Epithelial$like% sel $ang .ene.pel pada su4strat% terlihat sangat tipis dan 4er4entuk segi

li.a,* &ymphoblast$like% sel $ang tidak .ene.pel pada su4strat secara nr.al tetapi

.erupakan suatu suspensi dengan 4entuk $ang 4ulat3* 'ibroblast$like% sel $ang .ene.pel pada su4strat dan 4er4entuk panang dan 4iplar%

terkadang 4er4entuk .elingkar pada kultur $ang padat

Sedangkan .enurut ($an% ,00:) 4erdasarkan siste. pertu.4uhann$a karakter sel ter4agi.enadi dua $aitu anchorage$independent dan anchorage$dependent* Sel $angpertu.4uhann$a tidak .ene.pel pada su4strat dala. kndisi nr.al% seperti haln$a seldarah .e.iliki karakter anchorage$independent* Sedangkan karakter anchorage$dependent$aitu sel $ang pertu.4uhann$a harus .ene.pel pada su4strat seperti sel-sel tt*Pada praktiku. kali ini digunakan 4er4agai reagen $ang dapat .endukung ke4erhasilankultur aringan* Seru. $ang tediri atas larutan 5'S (5etal '2ine Seru.) dan M


5/5

.e.utus ikatan peptida agar sel terlepas dari su4strat* "alu% larutan P'S $ang terdiri dariK?l% a?l% dan gara.-gara. lainn$a $ang 4er!ungsi se4agai pelarut en8i. tripsin* Se4elu..elakukan kultur% 4agian dari hean $ang ingin dikultur harus disterilisasi terle4ih dahuludengan cara autkla!% pe.anasan atau diBlter agar 4ersih dari knta.inasi* Ke.udiansetelah itu dilakukan pe.4uatan eksplan% penana.an eksplan hingga penga.atan sepertipada .etde kera* Apa4ila .ediu. se4elu.n$a telah kn9uen (penuh) pindahkan kultur ke.ediu. 4aru dengan cara tripsinasi (prses pe.4erian en8i. tripsin) agar sel atau aringanterlepas dari su4strat% ke.udian hentikan tripsinasi dengan larutan P'S agar sel atau

aringan terse4ut dapat ke.4ali .ene.pel dengan .ediu. untuk tu.4uh*

Kesim#ulan

Kultur aringan antung dan hati 4erhasil dilakukan tanpa adan$a knta.inasi* iperleh sel-sel 4aru $ang ter4entuk dari pe.4elahan ptngan aringan antung dan hati .encit (Mus.usculus) $ang dikultur* #eknik Kultur aringan hean $ang digunakan .erupakan teknikkultur aringan eksplan $aitu .engkultur aringan antung dan hati hean .encit (Mus.usculus)*

$eferensi

1 ?aput% J*% "* 1@@6* Sa!et$ Prcedures* &n 5reshne$% *&*% 5reshne$% M**% eds*% ?ulture !&..rtali8ed ?ells* e Drk% Eile$-"iss% pp* ,-1*J* Mather and * 'arnes% Ani.al ?ell ?ultureMethds% Flu.e 7* Acade.ic Press% San ieg% 1@@:*

, 5reshne$ &* ?ulture ! ani.al cells/ A .anual ! 4asic techniGue*

laporan 2 probis - prinka apriati p - 10613037

Documents