laporan ernawati 1 uji reaksi terhadap asam amino.docx

Upload: nanaernawati

Post on 09-Oct-2015

58 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA 1REAKSI UJI TERHADAP ASAM AMINO

DISUSUN OLEH :ERNAWATI06121010036

DOSEN PENGASUH :DRS. MADE SUKARYAWAN, M.SI.DESI, S.PD., MT.

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIAJURUSAN PENDIDIKAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAMFAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKANUNIVERSITAS SRIWIJAYA2014

I. NOMOR PERCOBAAN : 1

II. NAMA PERCOBAAN : Reaksi Uji Terhadap Asam Amino

III. TUJUAN PERCOBAAN : Untuk mengidentifikasi atau menguji gugus fungsi yang terdapat dalam suatu asam amino melalui reaksi dengan reagen tertentu.

IV. LANDASAN TEORIWHO (World Health Organization) mengungkapkan bahwa protein yang berasal dari hewan seperti susu, daging, telur, keju, dan unggas mengandung asam amino dalam kadar yang cukup. Sedangkan protein yang berada dalam kandungan sayur-sayuran memiliki kadar yang terbatas.Ikan sebagai salah satu bahan pangan yang sangat di butuhkan memiliki daya cerna protein yang cukup tinggi yaitu sekitar 90%. Protein yang dikandung ikan ternyata sudah dapat memenuhi dua pertiga kebutuhan manusia. Kandungan protein pada ikan relatif cukup besar, sekitar 15-25% setiap 100 gram. Selain itu, kandungan protein ikan terdiri dari berbagai asam amino yang hampir seluruhnya di butuhkan oleh manusia.Sehari-hari individu biasa mengonsumsi berbagai jenis protein. Protein yang di dapatkan melalui makanan terkadang masuk bersamaan dengan karbohidrat dan nutrisi lainnya. Banyaka ahli gizi yang menyarankan jika anda menginginkan kondisi mental puncak, maka ada baiknya mengkonsumsi sepertiga protein terlebih dahulu sebelum memakan yang lain.Asam amino merupakan unit pembangun protein yang dihubungkan melalui ikatan peptida pada setiap ujungnya. Protein tersusun dari atom C, H, O, dan N, serta kadang-kadang P dan S. Dari keseluruhan asam amino yang terdapat di alam hanya 20 asam amino yang yang biasa dijumpai pada protein.Fungsi Asam Amino antara lain :1. Penyusun protein, termasuk enzim.2. Kerangka dasar sejumlah senyawa penting dalam metabolisme (terutama vitamin, hormon, dan asam nukleat)3. Pengikat logam penting yang di perlukan dalam reaksi enzimatik (kofaktor).Asam amino di dapatkan dari sumber-sumber protein. Protein adalah senyawa organik yang terdiri dari satu atau lebih asam amino. Protein yang di dapatkan melalui makanan sehari-hari di urai dalam pencernaan dalam bentuk asam amino.Setiap sel hidup mengandung protein. Protein senyawa organik essensial bagi mahluk hidup dan konsentrasinya paling tinggi di dalam jaringan otot hewan. Protein merupakan bahan essensial yang menunjang kehidupan. Kulit, tulang, otot, darah, hormon, enzim dan organ-organ dalam semuanya tersusun dari protein.Dari struktur umumnya, asam amino mempunyai dua gugus pada tiap molekulnya, yaitu gugus amino dan gugus karboksil, yang digambarkan sebagai struktur ion dipolar. Gugus amino dan gugus karboksil pada asam amino menunjukkan sifat-sifat spesifiknya. Karena asam amino mengandung kedua gugus tersebut, senyawa ini akan memberikan reaksi kimia yang yang mencirikan gugus-gugusnya. Sebagai contoh adalah reaksi asetilasi dan esterifikasi. Asam amino juga bersifat amfoter, yaitu dapat bersifat sebagai asam dan memberikan proton kepada basa kuat, atau dapat bersifat sebagai basa dan menerima proton dari basa kuat.Semua asam amino yang ditemukan pada protein mempunyai ciri yang sama, gugus karboksil dan amino diikat pada atom karbon yang sama. Masing-masing berbeda satu dengan yang lain pada gugus R-nya, yang bervariasi dalam struktur, ukuran, muatan listrik, dan kelarutan dalam air. Beberapa asam amino mempunyai reaksi yang spesifik yang melibatkan gugus R-nya.Melalui reaksi hidrolisis protein telah didapatkan 20 macam asam amino yang dibagi berdasarkan gugus R-nya, berikut dijabarkan penggolongan tersebut : Asam amino non-polar dengan gugus R yang hidrofobik, antara lain Alanin, Valin, Leusin, Isoleusin, Prolin, Fenilalanin, Triptofan dan Metionin. Golongan kedua yaitu asam amino polar tanpa muatan pada gugus R yang beranggotakan Lisin, Serin, Treonin, Sistein, Tirosin, Asparagin dan Glutamin. Golongan ketiga yaitu asam amino yang bermuatan positif pada gugus R golongan keempat yaitu asam amino yang bermuatan negatif pada gugus R.Dari ke-20 asam amino yang ada, dijumpai delapan macam asam amino esensial yaitu valin, leusin, Isoleusin, metionin, Fenilalanin, Triptofan, Treonin, dan Lisin. Asam amino essensial ini tidak bisa disintesis sendiri oleh tubuh manusia sehingga harus didapatkan dari luar seperti makanan dan zat nutrisi lainnya.Asam amino berfungsi untuk meningkatkan kewaspadaan, mengurangi kesalahan, dan memacu kegesitan pikiran.Terdapat 20 asam amino yang terbagi menjadi dua kelompok, asam amino non-enensial dan asam amino esensial. 12 jenis asam amino non-enensial di produksi oleh tubuh. Sedangkan 8 sisanya, berupa asam amino esensial yang harus didapatkan melalui makanan.

Asam Amino esensial yang tidak di produksi oleh tubuh, antara lain sebagai berikut:1. Triptofan; merupakan asam amino esensial, ini merupakan beberapa sumber di dapatkan dari karbonhidrat. Triptofan terdapat pada telur, daging, susu skim,pisang, susu, dan keju.2. Treonin: terdapat pada bahan pangan berupa susu, daging, ikan ,dan bici wijen.3. Metionin: bersifat esencial. Oleh sebab itu, harus di ambil dari bahan pangan. Sumber utama metionin hdala buah-buahan, daging (ayam, sapi, ikan,susu (susu murni, beberapa jenis keju), saturan (bayam, bawang putih, jagung), serta kacang-kacangan (kapri, pistacio, kacang mete, kacang merah, tahu tempe).4. Lisin; terdapat dalam protein kedelai,bici polong-polongan, dan ikan. Rata-rata kebutuhan lisin per hari adalah 1-1,5 g.5. Leusin; banyak tersedia pada makanan yang tinggi protein, seperti daging, susu, beras merah dan kacang kedelai. Pada produk-produk susu kedelai juga banyak di temui kandungan leusin.6. Isoleusin;satu dari asam amino penyusun protein yang dikode oleh DNA. Rumus kimianya sama dengan leusin tetapi susunan atom-atomnya berbeda. Ini berakibat pada sifat yang berbeda. Isoleusina bersifat hidrofobik (tidak larut dalam air) dan esensial bagi manusia. Walaupun berdasarkan strukturnya ada empat kemungkinan stereoisomer seperti treonin, isoleusina alam hanya tersedia dalam satu bentuk saja (lihat boks).7. Fenilalanin; merupakan asm amino esensial yang menjadi bahan baku bagi pembentukan katekolamin. Katekolamin ini di kenal sebagai peningkat kewaspadaan penting bagi tranmisi impuls saraf. Fenilalamin terdapat pada daging ayam, sapai, ikan, telur, dan kedelai.8. Valin; terdapat pada produk-produk peternakan seperti daging, telar, susu dan keju. Selain itu, asam amino esensial ini terdapat pada bici-bijian yang mengandung minyak seperti kacang tanah, wijen, dan gentil).Asam Amino non-essensial yang diproduksi tubuh antara lain:1. Tirosin; pertama kali di temukan dalam keju. Pada manusia, asam amino ini tidak bersifat esencial, tapi pembentukanya menggunakan bahan baku fenilalanin oleh enzim phehidroksilase. Menurut penelitian yang dilakukan oleh institut penelitian kesehatan Lingkungan Amerika Serikat tahun 1988, tirosin berfungsi pula sebagia obat stimulan dan penenang yang eektif untuk meningkatkan kinerja mental dan fisik di bawah tekanan, tanpa efek samping. Tirosin terkandung dalam hati ayam, keju, alpukat, pisang, ragi, ikan dan daging.2. Sistein; sekalipun asam amino bukan esensial kandungan atom sistein hampir sama dengan metionin. Sistein juga di temukan pada bahan pangan seperti cabai, bawang putih, bawang bombai, brokoli, haver, dan inti bulis gandum.3. Serin; pertama kali di isolasi dari protein serat sutra pada tahun 1865.4. Prolin; fungsi terpentingnya di ketahui sebagai komponen protein.5. Glisin; secara umum, protein itu sendiri tidak banyak mengandung glisin (kecuali pada kolagen yang mengandung glisin dari dua per tiga kandungannya). Tubuh manusia memproduksi glisin dalam jumlah yang mencukupi.6. Asam glutamat; karena ion glutamat yang dapat merangsang beberapa type saraf yang ada pada lidah manusia, glutamat di manfaatkan dalam industri penyedap rasa. Dalam keseharian di dapati dalam bentuk garam turunan yang di sebut sebagai monosodium glutamat atau MSG.7. Asam aspartat; sering pula di sebut aspartat. Fungsinya di ketahui sebagia pembangkit neurotransmiter di otak dan saraf otot. Aspartat juga dimungkinkan berperan dalam daya tahan terhadap kepenatan.8. Ariginin; sekalipun bersifat non-esensial bagi manusia dan mamalia lain, tetapi ariginin dapat di katakan sebagai asam amino setengah esensial karena produksinya sangat bergantung pada tingkat perkembangan dan kondisi kesehatan. Pada anak-anak, ariginin sangatlah penting. Pangan sumber utama ariginin ditemukan pada produk-produk peternakan seperti daging, susu, telur, dan berbagai olahannya. Sedangkan dari produk tumbuhan, ariginin banyak ditemukan pada cokelat dan biji kacang tanah.9. Alanin; ditemukan dalam bahan pangan bentuk lain seperti daging, ikan, susu, telur, dan kacang-kacangan.10. Histidin; bagi manusia, histidin merupakan asam amino yang esensial bagi anak-anak.11. Glutamin; merupakan asam amino yang dikenal pula dengan sebutan asam glumatik. Asam amino ini berfungsi sebagai bahan bakar otak yang mengontrol kelebihan amonia yang terbentuk dalam tubuh akibat proses biokimia. Secara alami, glutamin di temukan dalam gandum dan kedelai.12. Asparagin; di perlukan oleh sistem saraf untuk menjaga kesetimbangan dan di perlukan pula dalam transformasi asam amino. Asparagin di temukan pula pada daging (segala macam sumber), telur dan susu (serta produk turunanya).Reaksi Uji Asam AminoUji MillonPereaksi Millon adalah larutan merkuro dan merkuri nitrat dalam asam nitrat. Apabila pereaksi ini ditambahkan ke dalam larutan protein yang mengandung asam amino dengan rantai samping gugus fenolik, akan menghasilkan endapan putih yang dapat berubah menjadi merah oleh pemanasan. Tetapi khusus untuk proteosa dan pepton secara langsung akan menghasilkan larutan berwarna merah. Endapan yang terbentuk berupa garam kompleks dari tirosin yang ternitrasi. Jika larutan protein yang dianalisis ada dalam sussana basa, maka terlebih dahulu harus dinetralisasi dengan asam, karena dalam basa ion merkuri dalam pereaksi akan mengendap sebagai Hg(OH)2. Pada penetralan ini digunakan asam selain HCl, karena ion Cl- dapat bereaksi dengan asam nitrat menghasilkan radikal klor (Cl.). Radikal klor dapat merusak kompleks berwarna. Pada dasarnya reaksi ini positif untuk fenol-fenol, karena terbentuknya senyawa merkuri dengan gugus hidroksi fenil yang berwarna. Protein yang mengandung tirosin akan memberikan hasil yang positif. Uji NinhidrinApabila ninhidrin (triketohidrin) dipanaskan bersama asam amino, maka akan terbentuk kompleks berwarna biru. Kompleks berwarna biru dihasilkan dari reaksi ninhdrin dengan hasil reduksinya, yaitu hidrindantin dan amonia. Asam amino dapat ditentukan secara kuantitatif dengan jalan mengamati intensitas warna yang terbentuk sebanding dengan konsentrasi asam amino tersebut. Pada reaksi ini, dilepaskan CO2 dan NH4 sehingga asam amino asam amino dapat ditentukan secara kuantitatif dengan mengukur jumlah CO2 dan NH3 yang dilepaskan. Prolin dan hidroksi prolin menghasilkan kompleks yang berbeda warnanya dengan asam amino lainya. Kompleks berwarna yang terbentuk mengandung dua molekul ninhidrin yang bereaksi dengan amonia yang dilepaskan pada oksidasi asam amino. Keseluruhan reaksi asam amino dengan ninhidrin adalah sebagai berikut:a. Dekarboksilasi oksidatif dari asam amino dan produksi ninhidrin tereduksi, amoniak dan dioksida,b. Reaksi ninhidrin tereduksi dengan molekul ninhidrin yang lain dengan molekul amoniak yang dihasilkan,c. Pembentukan kompleks berwarna biru.Reaksi Hopkins-ColeReagen yang digunakan dalam uji hopkins-Cole mengandung asam glioksilat (CHO.COOH). Karena triptofan berkondensasi dengan aldehid dalam suasana asam sulfat dan membentuk kompleks berwarna. Pereaksi ini dibuat dari asam oksalat dengan serbuk magnesium dalam air COOH serbuk COOH

COOH Mg COOHSetelah dicampur dengan pereaksi Hopkins-Cole. Asam sulfat dituangkan perlahan-lahan sehingga membentuk lapisan dibawah larutan protein. Beberapa saat kemudian akan terjadi cincin ungu pada batas antara kedua lapisan tersebut. Pada dasarnya reaksi ini memberi hasil positif khas untuk gugus indol dalam protein

V. ALAT DAN BAHAN:ALAT : Tabung Reaksi Rak Tabung Reaksi Beker Gelas Gelas Ukur Pipet Tetes Pembakar Bunsen Penjepit tabung reaksi Erlenmeyer

BAHAN : Reagen Millon Reagen Ninhidrin Lisin 1%-10% Histidin 3% Tyrosin 3% Putih Telur 1% - 10% Kuning Telur 1% - 10% Glysin 1%-10% Aquades VI. PROSEDUR PERCOBAAN1. Uji Millon ditambahkan 5 tetes reagen millon ke dalam 3 ml larutan protein dipanaskan campuran baik-baik. Jika reagen yang digunakan terlalu banyak, maka warna akan hilang pada pemanasan.

2. Uji Ninhidrin ditambahkan 0,5 ml larutan ninhidrin 0,1 % ke dalam 3 ml larutan protein dipanaskan hingga mendidih.

VII. Hasil PengamatanI. Uji Millona). Larutan LysinNo.Cara KerjaPengamatan

13 ml lysin1% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)lysin (tidak berwarna) + reagen millon (tidak berwarna) Larutan tidak berwarna larutan tidak berwarna

23 ml lysine 2% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)lysin (tidak berwarna) + reagen m illon (tidak berwarna) Larutan tidak berwarna larutan tidak berwarna

33 ml lysine 3% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)lysin (tidak berwarna) + reagen millon (tidak berwarna) Larutan tidak berwarna larutan tidak berwarna

43 ml lysine 4% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)lysin (tidak berwarna) + reagen millon (tidak berwarna) Larutan tidak berwarna larutan tidak berwarna

53 ml lysine 5% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)lysin (tidak berwarna) + reagen millon (tidak berwarna) Larutan tidak berwarna larutan tidak berwarna

63 ml lysine 6% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)lysin (tidak berwarna) + reagen millon (tidak berwarna) Larutan tidak berwarna larutan tidak berwarna

73 ml lysine 7% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)lysin (tidak berwarna) + reagen millon (tidak berwarna) Larutan tidak berwarna larutan tidak berwarna

83 ml lysine 8% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)lysin (tidak berwarna) + reagen millon (tidak berwarna) Larutan tidak berwarna larutan tidak berwarna

93 ml lysine 9% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)lysin (tidak berwarna) + reagen millon (tidak berwarna) Larutan tidak berwarna larutan tidak berwarna

103 ml lysine 10% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)lysin (tidak berwarna) + reagen millon (tidak berwarna) Larutan tidak berwarna larutan tidak berwarna

b). Larutan Putih TelurNo.Cara KerjaPengamatan

13 ml Putih Telur 1% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)putih telur (tidak berwarna) + millon (tidak berwarna) Larutan bening + endapan larutan bening + endapan merah

23 ml Putih Telur 2% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)putih telur (tidak berwarna) + millon (tidak berwarna) Larutan bening + endapan larutan bening + endapan merah

33 ml Putih Telur 3% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)putih telur (tidak berwarna) + millon (tidak berwarna) Larutan bening +endapan larutan bening + endapan merah

43 ml Putih Telur 4% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)putih telur (tidak berwarna) + millon (tidak berwarna) Larutan bening + endapan larutan bening + endapan merah

53 ml Putih Telur 5% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)putih telur (tidak berwarna) + millon (tidak berwarna) Larutan bening +endapan larutan bening + endapan merah

63 ml Putih Telur 6% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)putih telur (tidak berwarna) + millon (tidak berwarna) Larutan bening + endapan larutan bening + endapan merah

73 ml Putih Telur 7% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)putih telur (tidak berwarna) + millon (tidak berwarna) Larutan bening + endapan larutan bening + endapan merah

83 ml Putih Telur 8% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)putih telur (tidak berwarna) + millon (tidak berwarna) Larutan bening + endapan larutan bening + endapan merah

93 ml Putih Telur 9% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)putih telur (tidak berwarna) + millon (tidak berwarna) Larutan bening + endapan larutan bening + endapan merah

103 ml Putih Telur 10% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)putih telur (tidak berwarna) + millon (tidak berwarna) Larutan bening + endapan larutan bening + endapan merah

c) Larutan Kuning TelurNo.Cara KerjaPengamatan

13 ml Kuning Telur1% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)kuning telur (keruh) + millon (tidak berwarna) larutan keruh Larutan bening dengan endapan endapan merah

23 ml Kuning Telur 2% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)kuning telur (keruh) + millon (tidak berwarna) larutan keruh Larutan bening dengan endapan endapan merah

33 ml Kuning Telur 3% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)kuning telur (keruh) + millon (tidak berwarna) larutan keruh Larutan bening dengan endapan endapan merah

43 ml Kuning Telur 4% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)kuning telur (keruh) + millon (tidak berwarna) larutan keruh Larutan bening dengan endapan endapan merah

53 ml Kuning Telur 5% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)kuning telur (keruh) + millon (tidak berwarna) larutan keruh Larutan bening dengan endapan endapan merah

63 ml Kuning Telur 6% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)kuning telur (keruh) + millon (tidak berwarna) larutan keruh Larutan bening dengan endapan endapan merah

73 ml Kuning Telur 7% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)kuning telur (keruh) + millon (tidak berwarna) larutan keruh Larutan bening dengan endapan endapan merah

83 ml Kuning Telur 8% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)kuning telur (keruh) + millon (tidak berwarna) larutan keruh Larutan bening dengan endapan endapan merah

93 ml Kuning Telur 9% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)kuning telur (keruh) + millon (tidak berwarna) larutan keruh Larutan bening dengan endapan endapan merah

103 ml Kuning Telur 10% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)kuning telur (keruh) + millon (tidak berwarna) larutan keruh Larutan bening dengan endapan endapan merah

d). Tyrosin 3 % dan Histidin 3%NoCara KerjaPengamatan

13 ml tyrosin 3% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)Tyrosin (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan tidak berwarna Larutan Merah bata

23 histidin 3% + 5 tetes reagen millon (dipanaskan)Histidin (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan tidak berwarna larutan bening

II. Uji Ninhidrina). Larutan GlysinNo.Cara KerjaPengamatan

13 ml glysin1% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan glysin (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan tidak berwarna larutan ungu muda

23 ml glysine 2% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan glysin (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan tidak berwarna larutan ungu muda

33 ml glysine 3% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan glysin (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan tidak berwarna larutan ungu muda

43 ml glysine 4% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan glysin (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan tidak berwarna larutan ungu muda

53 ml glysine 5% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan glysin (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan tidak berwarna larutan ungu muda

63 ml glysine 6% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan glysin (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan tidak berwarna larutan ungu muda

73 ml glysine 7% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan glysin (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan tidak berwarna larutan ungu muda

83 ml glysine 8% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan glysin (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan tidak berwarna larutan ungu muda

93 ml glysine 9% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan glysin (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan tidak berwarna larutan ungu muda

103 ml glysine 10% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan glysin (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan tidak berwarna larutan ungu muda

b). Larutan Putih TelurNo.Cara KerjaPengamatan

13 ml putih telur1% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan putih telur (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu

23 ml putih telur 2% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan putih telur (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu

33 ml putih telur 3% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan putih telur (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu

43 ml putih telur 4% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan putih telur (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu

53 ml putih telur 5% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan putih telur (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu

63 ml putih telur 6% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan putih telur (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu

73 ml putih telur 7% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan putih telur (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu

83 ml putih telur 8% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan putih telur (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu

93 ml putih telur 9% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan putih telur (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu

103 ml putih telur 10% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan putih telur (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu

c). Larutan Kuning TelurNo.Cara KerjaPengamatan

13 ml Kuning Telur1% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan kuning telur (keruh) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu + endapan

23 ml Kuning Telur 2% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan kuning telur (keruh) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu + endapan

33 ml Kuning Telur 3% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan kuning telur (keruh) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu + endapan

43 ml Kuning Telur 4% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan kuning telur (keruh) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu + endapan

53 ml Kuning Telur 5% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan kuning telur (keruh) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu + endapan

63 ml Kuning Telur 6% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan kuning telur (keruh) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu + endapan

73 ml Kuning Telur 7% + 5 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan kuning telur (keruh) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu + endapan

83 ml Kuning Telur 8% + 10 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan kuning telur (keruh) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu + endapan

93 ml Kuning Telur 9% + 10 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan kuning telur (keruh) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu + endapan

103 ml Kuning Telur 10% + 10 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Larutan kuning telur (keruh) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan putih keruh larutan ungu + endapan

d). Tyrosin 3 % dan Histidin 3%NoCara KerjaPengamatan

13 ml tyrosin 3% + 10 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Tyrosin (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan tidak berwarna Larutan ungu

23 histidin 3% + 10 tetes reagen ninhidrin (dipanaskan)Histidin (tidak berwarna) + reagen ninhidrin (tidak berwarna) larutan tidak berwarna Larutan ungu

VII. PERSAMAAN REAKSIUji Millon

Reaksi positif terhadap asam amino tyrosin :

Reaksi negative pada asam amino lysin :

+ Hg Tidak bereaksi

(Lysine)

+ Hg Tidak bereaksi

Uji Ninhidrin

Reaksi Positif terhadap asam amino:

Reaksi positif asam amino glisin:

VIII. PEMBAHASAN Pada percobaan kali ini, yaitu membahas mengenai uji asam amino dengan reaksi reagen millon, dan reagen ninhidrin. Asam amino yang diuji terdiri dari lysin, tyrosin, dan histidin serta larutan protein yaitu menggunakan larutan kuning telur dan putih telur.Percobaan pertama yang kami lakukan adalah uji asam amino dengan menggunakan pereaksi Millon atau sering disebut uji Millon. Pereaksi Millon adalah larutan merkuro dan merkuri nitrat dalam asam nitrat, bila direaksikan dengan senyawa yang mengandung gugus fenol akan membentuk endapan merah dengan pemanasan. Pada pengujian asam amino dengan uji Millon, larutan protein ( putih telur dan kuning telur) ditambahkan dengan reagen Millon. Penambahan reagen Millon ini menyebabkan terbentuknya endapan putih yang kemudian berubah menjadi endapan merah. Hal ini membuktikan dalam larutan larutan putih telur dan kunging telur tersebut positif mengandung tirosin.Endapan putih yang terbentuk setelah penambahan reagen Millon pada larutan protein tersebut berasal dari endapan merkuri, dimana pada awalnya Hg yang terlarut di dalam HNO3 teroksidasi menjadi Hg+. Ion Hg + ini selanjutnya membentuk garam dengan gugus karboksil dari tirosinKetika dipanaskan endapan putih tersebut berubah menjadi endapan merah. Hal ini terjadi karena asam nitrat yang semula berfungsi sebagai pelarut mengoksidasi Hg + menjadi Hg2+. Bersamaan dengan hal tersebut, asam amino tirosin ternitrasi. Kemudian terjadi reaksi pembentukan HgO yang berwarna merahUntuk membuktikan bahwa dalam larutan putih telur dan kuning telur terdapat asam amino tyrosin, maka dilakukan uji terhadap beberapa asam amino standar yang ada di laboratorium. Asam amino standar yang digunakan adalah lysin, histidin, dan tyrosin. Pada pengujian dengan lysin dan histidin tidak terbentuk endapan merah. Hal ini disebabkan karena pada keempat asam amino tersebut tidak mengandung gugus fenol dengan demikian asam amino tersebut merupakan reaksi negative terhadap uji millon. Pada pengujian dengan tyrosin, setelah penambahan reagen Millon dan pemanasan endapan merah yang dapat membuktikan bahwa dalam putih telur dan kunign telur terdapat asam amino tyrosin. Pada percobaan yang kedua, yaitu uji asam amino dengan menggunakan reagen ninhidrin, perlakuannya hampir sama dengan uji millon, hanya saja dengan menggunakan volume reagen ninhidrin lebih banyak dari millon. Uji ninhidrin dipergunakan untuk identifikasi asam -amino dan peptida yang memiliki gugus -amino bebas. Ninhidrin jika ditambahkan dengan asam amino dan dipanaskan akan membentuk kompleks berwarna kompleks berwarna ungu yang dihasilkan dari reaksi ninhdrin dengan hasil reduksinya, yaitu hidrindantin dan ammonia.Pada pengujian larutan putih telur dan kuning telur, menunjukkan uji positif terhadap uji ninhidrin. Hal ini ditunjukkan dengan terbentuknya larutan berwarna ungu ketika larutan tersebut ditambahkan dengan ninhidrin dan dipanaskan. Hal serupa juga terjadi pada pengujian tyrosin, glysin, dan hystidin, ketika ditambahkan dengan ninhidrin dan kemudian dipanaskan, asam-asam amino tersebut membentuk larutan berwarna ungu. Hal ini menunjukkan bahwa pada asam-asam amino tersebut terdapat -amino bebas.

IX. KESIMPULANDari percobaan yang telah di lakukan dapat disimpulkan bahwa:1. Pada uji Millon, reaksi positif jika terbentuk endapan merah bata akibat kandungan gugus hidrosil fenil oleh asam amino.2. Reaksi positif pada uji millon ditunjukkan oleh larutan kuning telur, putih telur dan tyrosin.3. Lisin dan histidin bereaksi negatif dengan reagen millon.4. Uji Ninhidrin merupakan uji warna pada protein dengan membentuk larutan berwarna ungu akibat adanya gugus amino bebas.5. Larutan protein (putih telur dan kuning telur ) dan glysin mengandung gugus amino bebas sehingga memberikan warna ungu pada larutan.6. Larutan protein (putih telur, kuning telur ) dan glysin bereaksi positif terhadap reagen ninhidrin.

DAFTAR PUSTAKA

Anonim. 2010. Asam Amino. http://id.wikipedia.org/wiki/Asam_amino. diakses tanggal 21 Agustus 2014, pukul 18.58

Anonim.2012. Laporan Tetap Praktikum Biokimia .http://ruanglingkupgurukimia. blogspot.com/2012/05/laporan-tetap-praktikumbiokimia-i.html, diakses tanggal 21 agustus 2014, pukul 19.25

Tim Dosen Kimia, 2009, Penuntun Praktikum Biokimia Umum, Universitas Hasanuddin, Makassar.

LAMPIRAN IPERTANYAAN

1. Uji Millon Apa yang terjadi jika garam merkuri ditambahkan kedalam protein?Jawab: Jika garam merkuri ditambahkan ke dalam protein, maka akan terbentuk endapan putih dan dapat berubah menjadi merah bata setelah pemanasan. Mengapa larutan albumin terkoagulasi?Jawab: Larutan albumin terkoagulasi, karena larutan albumin dipanaskan ada suhu 50o C lebih dan pada suhu inilah protein terkoagulasi. Larutan protein yang mana yang memberikan uji negatif ? Mengapa?Jawab:Larutan yang memberikan uji negatif adalah larutan lysin dan histidin karena pada asam-asam amino ini tidak terdapat gugus hidroksifenil, sehingga larutan yang dihasilkan tetap bening tanpa adanya endapan merah bata.

2. Uji Ninhidrin Warna apa yang terbentuk?Jawab: Warna yang terbentuk pada uji positif adalah warna ungu Gugus apa yang memberikan uji positif ?Jawab: Gugus yang memberikan uji positif adalah amino bebas seperti glysin, larutan putih telur, larutan kuning telur dan histidin.

LAMPIRAN IIGAMBAR ALAT

Pipet tetes Beaker Gelas

Tabung Reaksi

Gelas Ukur Batang pengadukCorong pemisah Erlenmeyer