LAPORAN SEMENTARAPRAKTIKUM KIMIA ORGANIK III

Nama: 1.NIM : 2.NIM : 3.NIM :

Hari/Tanggal Praktikum:Golongan/Kelompok:Judul Percobaan: Kinetika Reaksi Hidrolisis dengan Enzim LipaseAsisten Pembimbing:

I. TUJUAN PERCOBAAN1. Mempelajari aktivitas lipase dalam hidrolisis minyak sawit2. Menentukan aktivitas spesifik dan parameter kinetika reaksi enzimatis lipase

II. BAHAN DAN ALATBahan yang digunakan : minyak kelapa sawit, akuades, n-heksana, enzim lipase, methanol, indikator fenolphtalein, larutan NaOH 0,05M.

Alat yang digunakan : labu takar 10mL, botol flacon 50mL, magnetic stitrrer, labu Erlenmeyer 100mL, pipet tetes, gelas beaker, gelas ukur, timbangan analitik.

III. CARA KERJAA. Penentuan aktivitas spesifik enzim lipase

Aduk larutan dengan magnetic stirrer/shaker incubator selama 1 jam pada suhu 37-40 C.Tambahkan 0,2 gram enzim lipase ke dalam salah satu botol.Pindahkan campuran masing-masing ke botol flacon 50mL.Siapkan 2 labu takar 10mL, masing-masing diisi 1 gram minyak kelapa sawit, 1L akuades, dan n-heksana sehingga volume total 10mL.

Tentukan kandungan asam lemak bebas campuran hasil reaksi dan control, berikut aktivitas enzim dalam reaksi (U) dan aktivitas spesifik enzim lipase (U/g)Lakukan titrasi untuk menentukan asam lemak bebas dengan menggunakan larutan NaOH 0,05M.Tambahkan 10mL methanol dan 2-3 tetes indikator fenolphtalein ke dalam labu Erlenmeyer.Dekantasi semua cairan dari botol flacon ke labu Erlenmeyer 100mL.

B. Kinetika reaksi enzim lipase

Siapkan seri reaksi enzimatis hidrolisis minyak sawit dengan variasi jumlah minyak sawit ( 1; 0,8; 0,6; 0,4; dan 0 gram) dalam labu takar 10 mL.

Aduk larutan dengan magnetic stirrer/shaker incubator selama 1 jam pada suhu 37-40 C.Pindahkan masing-masing campuran ke botol flacon dan tambahkan masing-masing 0,5 gram lipase.Tambahkan n-heksana sampai batas labu takar.

Lakukan titrasi untuk menentukan asam lemak bebas dengan menggunakan larutan NaOH 0,05 M.Tambahkan 10mL methanol dan 2-3 tetes indikator fenolphtalein ke dalam labu Erlenmeyer.Dekantasi semua cairan dari botol flacon ke labu Erlenmeyer 100mL.

Buat kurva Lineveaver-Burk reaksi hidrolisis. Tentukan nilai Km dan Vmaks reaksi hidrolisis.Tentukan laju hidrolisis (V) sebagai perubahan konsentrasi produk per menit (mol/menit). Gunakan data berat molekul rata-rata asam lemak minyak sawit dari perhitungan berdasarkan komposisi asam lemak minyak sawit dari literatute.Tentukan jumlah asam lemak bebas hasil hidrolisis untuk masing-masing variasi.

IV. HASIL PERCOBAANBerat hasil : Volume hasil : Bentuk : Warna :Bau:Titik lebur:

Yogyakarta,MengetahuiAsisten PembimbingPraktikan1.

2.

3.