BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Anggota dari famili Enterobacteriaceae adalah bakteri Gram negatif

fakultatif anaerobik berbentuk batang yang dapat bersifat motil atau non motil;

strain bakteri motil mempunyai flagella peritrik. Semua spesies berkembang

biak pada media buatan dan mengubah glukosa, dimana mereka membentuk

asam atau asam dan gas. Bakteri-bakteri tersebut juga memproduksi enzim

katalase. Dengan beberapa pengecualian pada genus Erwinia, anggota dari

Enterobacteriaceae mereduksi nitrat menjadi nitrit. Komposisi antigeniknya

tendiri dari sebuah mozaik hubungan serologik yang saling mengisi diantara

beberapa genus. Famili ini termasuk saprofit, parasit hewan dan beberapa

parasit tanaman. Pengkajian homologi DNA telah menunjukkan bahwa

kebanyakan spesies dalam genus Enterobacteriaceae setidaknya 20 % saling

berhubungan satu dengan yang lain dan dengan tipe spesiesnya, yaltu

Escherichia coli. Hampir semua spesies mempunyai antigen enterobakterial.

Hanya sejumlah kecil genus yang mempunyai spesies yang menyebabkan

penyakit pada hewan. Bakteri-bakteri tersebut adalah Enterobacter,

Escherichia, Klebsiela, Proteus, Salmonella, Seratia dan Yersinia.

API-20E test kit untuk identifikasi bakteri enterik menyediakan cara

mudah untuk menyuntik dan membaca tes yang relevan kepada anggota

Enterobacteriaceae keluarga dan organisme terkait. Sebuah strip plastik isinya

dua tabung mini uji diinokulasi dengan suspensi garam dari kultur murni.

Proses ini juga rehydrates media dessicated di setiap tabung. Beberapa tabung

terisi penuh dan beberapa tabung yang dilapis dengan minyak mineral

sehingga reaksi anaerobik dapat dilakukan.

Identifikasi dengan Metode Analytical Profile Index (API) 20A Metode

API 20A ini terdiri dari 21 macam uji biokimia yang digunakan untuk

mengidentifikasi spesies dari bakteri anaerob. Uji biokimia terdiri dari uji

indol; urease; fermentasi glukosa, manitol, sakrosa, laktosa, maltosa, salisin,

xylose, arabinosa, gliserol, selobiosa, manosa, melezitosa, rafinosa, sorbitol,

1

ramnosa, trehalose; hidrolisis gelatin; hidrolisis esculin (ß-glucosidase);

katalase.

1.2 Rumusan Masalah

1. Pengertian Analytical Profile Index?

2. Prinsip Kerja dari Analytical Profile Index?

3. Apa Saja Peringatan dan Pencegahan dari Analytical Profile Index?

4. Bagaimana Kondisi Penyimpanan Analytical Profile Index?

5. Petunjuk Penggunaan Analytical Profile Index?

6. Bagaimana Pembacaan dan Interpretasi Hasil dari Analytical Profile

Index?

7. Bagaimana Cara Kontrol Kualitas Analytical Profile Index?

8. Apa Saja Keterbatasan Metode Analytical Profile Index?

9. Pembuangan Limbah dari Analytical Profile Index?

10. Apa saja fitur dan keuntungan dari Analytical Profile Index?

11. Apa gold standard dari Analytical Profile Index?

1.3 Tujuan

1. Untuk mengetahui Pengertian Analytical Profile Index

2. Untuk mengetahui Prinsip Kerja dari Analytical Profile Index

3. Untuk mengetahui Apa Saja Peringatan dan Pencegahan dari Analytical

Profile Index

4. Untuk mengetahui Bagaimana Kondisi Penyimpanan Analytical Profile

Index

5. Untuk mengetahui Petunjuk Penggunaan Analytical Profile Index

6. Untuk mengetahui Bagaimana Pembacaan dan Interpretasi Hasil dari

Analytical Profile Index

7. Untuk mengetahui Bagaimana Cara Kontrol Kualitas Analytical Profile

Index

8. Untuk mengetahui Apa Saja Keterbatasan Metode Analytical Profile Index

9. Untuk mengetahui Pembuangan Limbah dari Analytical Profile Index

10. Untuk mengetahui fitur dan keuntungan dari Analytical Profile Index

11. Untuk mengetahui gold standard dari Analytical Profile Index

2

BAB II

PEMBAHASAN

2.1 Pengertian

Analytical Profile Index (API) Sistem identifikasi untuk

Enterobacteriaceae dan batang Gram-negatif non-kritis lainnya. API 20 E

adalah sistem identifikasi standar untuk Enterobacteriaceae dan non-rewel,

Gram negative batang yang menggunakan 21 miniatur biokimia tes dan

database. Daftar lengkap mereka organisme bahwa adalah mungkin untuk

mengidentifikasi dengan sistem ini adalah diberikan dalam Tabel Identifikasi

pada akhir paket ini masukkan.

2.2 Prinsip

API 20 E jalur terdiri dari 20 microtubes mengandung substrat

dehidrasi. Tes ini diinokulasi dengan suspensi bakteri yang reconstitutes

media. Selama inkubasi, metabolisme menghasilkan perubahan warna yang

baik spontan atau dapat diketahui dengan penambahan reagen. Reaksi dibaca

sesuai dengan Tabel Reading dan identifikasi diperoleh dengan mengacu pada

Indeks Profil analitis atau menggunakan perangkat lunak identifikasi

2.3 Isi Kit API 20E

Kit untuk 25 tes (ref. 20 100)

- 25 API 20 strip E

- 25 kotak inkubasi

- 25 lembar hasil

- 1 clip seal

- 1 paket insert

Kit untuk 100 tes (ref. 20 160)

- 100 API 20 strip E (4X25 strip)

- 100 kotak inkubasi

- 100 lembar hasil

- 1 clip seal

- 1 paket insert

3

API 20E yang disajikan di sini adalah panel biokimia untuk

identifikasi dan diferensiasi anggota keluarga Enterobacteriaceae. Panel

API lainnya untuk kelompok lain bakteri, seperti stafilokokus dan

streptokokus, juga tersedia dalam format yang sama, tetapi tidak termasuk

dalam presentasi ini. Dalam API 20E untuk identifikasi anggota keluarga

Enterobateriaceae, strip plastik memegang dua puluh ruang mini-tes berisi

media dehidrasi memiliki komposisi kimia yang ditentukan untuk setiap

tes. Ini termasuk:

1. ONPG : Tes untuk  enzim -galactosidase oleh hidrolisis

substrat o -nitrophenyl-  -D-galactopyranoside

2. ADH : dekarboksilasi dari asam amino arginin oleh dihydrolase

arginin

3. LDC : decarboxylations dari asam amino lisin dekarboksilase

lisin oleh

4. ODC : decarboxylations dari ornithine dekarboksilase asam

amino yang oleh ornithine

5. CIT : pemanfaatan sitrat sebagai sumber karbon tunggal

6. H 2 S : produksi hidrogen sulfida

7. URE : tes untuk enzim urease

8. TDA : deteksi deaminase enzim triptofan

9. IND : produksi indol dari triptofan oleh tryptophanase

enzim. Indole terdeteksi dengan penambahan reagen Kovac ini.

10. VP : tes Voges Proskauer-untuk deteksi asetoin (asetil

methylcarbinol) yang dihasilkan oleh fermentasi glukosa oleh bakteri

memanfaatkan jalur butilena glikol

11. GEL : tes untuk produksi enzim gelatinase yang mencairkan

gelatin

12. Glu : fermentasi glukosa (gula heksosa)

13. MAN : fermentasi mannose (gula heksosa)

14. INO : fermentasi inositol (polyalcohol siklik)

15. SOR : fermentasi sorbitol (gula alkohol)

4

16. RHA : fermentasi rhamnose (metil gula pentosa)

17. SAC : fermentasi sukrosa (disakarida)

18. MEL : fermentasi melibiose (disakarida)

19. AMY : fermentasi amygdalin (glikosida)

20. ARA : fermentasi arabinosa (gula pentosa)

Komposisi Strip API 20E

Komposisi API 20 E strip diberikan dalam Membaca Tabel paket insert

ini.

Reagen Dan Bahan Yang Dibutuhkan Tapi Tidak Disediakan

Reagen :

API NaCl 0,85% Medium, 5 ml atau (Ref 20 230.) atau API Suspension

Medium, 5 ml (Ref. 20 150)

Kit API 20 E reagen (Ref. 20 120) ataureagen individu:

- TDA (. Ref 70 402)

- JAMES (Ref. 70 542)

- VP 1 + VP 2 (Ref. 70 422)

- NIT 1 + 2 NIT (Ref. 70 442)

Zn reagen (Ref. 70 380)

Oksidase (. Ref 55 635 *)

Referensi tidak dijual di negara-negara tertentu: menggunakanreagen

setara.

Minyak Mineral (. Ref 70 100)

API 20 E Analytical Index Profil (. Ref 20 190) atau perangkat lunak

identifikasi (berkonsultasi bioMerieux)

Bahan:

- Pipet atau PSIpettes

- Pelindung Ampule

- Rak Ampule

- Peralatan laboratorium mikrobiologi Umum

-

5

Reagen Lain Yang Mungkin Dapat Digunakan :

- API dari Medium (Ref. 50 110):Uji untuk penentuan fermentasi atau

oksidatifmetabolisme.

- API M Medium (Ref. 50 120):Pengujian motilitas bakteri anaerob

fakultatif.

2.4 Peringatan Dan Pencegahan

1. Untuk digunakan diagnostik in vitro dan mikrobiologi control.

2. Hanya untuk penggunaan profesional.

3. Kit ini berisi produk-produk yang berasal dari hewan. Bersertifikat

pengetahuan tentang asal dan / atau negara sanitasi dari hewan tidak benar-

benar menjamin tidak adanya agen patogen menular. Oleh karena itu

direkomendasikan bahwa produk ini diperlakukan sebagai berpotensi

menular, dan ditangani mengamati biasa. Tindakan pengamanan (tidak

menelan atau menghirup).

4. Semua spesimen, budaya mikroba dan diinokulasi produk harus

dipertimbangkan menular dan ditangani tepat. Teknik aseptik dan tindakan

pencegahan yang biasa untuk menangani kelompok bakteri yang diteliti

harus mengamati seluruh prosedur ini. Lihat "NCCLS M29-A,

Perlindungan Tenaga Kerja Laboratorium dari Instrumen hayati dan

Penyakit Infeksi Ditularkan oleh darah, Cairan Tubuh, dan jaringan;

Disetujui Pedoman - Desember 1997 "Untuk tambahan, tindakan

pencegahan penanganan, lihat "Biosafety di Mikrobiologi dan Biomedis

Laboratorium, HHS Publikasi No (CDC) 93-8395, 3rd Edition (Mei

1993)", atau peraturan yang sedang digunakan di setiap negara.

5. Jangan menggunakan reagen melewati tanggal kedaluwarsa.

6. Sebelum digunakan, periksa bahwa kemasan dari berbagai komponen

utuh.

7. Jangan gunakan strip yang telah rusak: cupules cacat, pengering sachet

terbuka, ...

6

8. Data kinerja disajikan diperoleh dengan menggunakan prosedur yang

ditunjukkan dalam paket insert ini. Apa saja perubahan atau modifikasi

dalam prosedur dapat mempengaruhi hasil.

9. Interpretasi hasil tes harus dibuat mengambil mempertimbangkan riwayat

pasien, sumber spesimen, morfologi kolonial dan mikroskopis dari saring

dan, jika perlu, hasil dari setiap tes lainnya dilakukan, khususnya

kerentanan antimikroba pola.

2.5 Kondisi Penyimpanan

Strip disediakan dalam kantong aluminium dengan sachet pengering.

Setelah dibuka (*), kantong harus kembali disegel menggunakan klip segel

(disertakan dalam kit) untuk melestarikan sisa strip dengan sachet pengering:

menempatkan ujung terbuka kantong sepanjang segel dan hati-hati klem

antara dua bagian. Strip kemudian dapat disimpan sampai 10 bulan setelah

kantong telah dibuka, pada 2-8 ° C (atau sampai tanggal kadaluarsa yang

tertera pada kemasan, jika ini datang sebelum).

(*) Direkomendasikan metode untuk membuka kantong : gunting

untuk membuka kantong di bawah segel sambil memegang pouch tegak,

untuk menghindari kerusakan pengering yang sachet.

Spesimen (Pengumpulan dan Persiapan)

API 20 E tidak digunakan secara langsung dengan klinis atau lainnya

spesimen. Mikroorganisme untuk diidentifikasi pertama harus diisolasi pada

medium kultur disesuaikan dengan budaya Enterobacteriaceae dan / atau

non-kritis Gram negatif batang, menurut teknik mikrobiologi standar.

2.6 Petunjuk Penggunaan

1) Uji oksidase

Tes oksidase harus dilakukan sesuai dengan instruksi pabrik

untuk digunakan. Hasilnya harus dicatat pada lembar hasil karena

merupakan bagian integral dari profil akhir (uji identifikasi 21).

7

Persiapan strip

1. Siapkan kotak inkubasi (tray dan tutup) dan mendistribusikan sekitar 5

ml air suling atau air demineral [atau air tanpa aditif atau bahan kimia

yang mungkin release gas (misalnya, Cl2, CO2, dll)] ke honeycombed

sumur dari baki untuk menciptakan suasana lembab.

2. Catat referensi ketegangan pada flap memanjang dari tray. (Jangan

mencatat referensi di tutup karena mungkin salah tempat selama

prosedur.)

3. Hapus strip dari kemasannya.

4. Tempatkan strip di kotak inkubasi.

Catatan :

API 20 E hanya boleh digunakan denganEnterobacteriaceae dan

atau non-kritis Gram negatifbatang. Organisme rewel setelah menuntut

gizipersyaratan dan membutuhkan penanganan yang tepattindakan

pencegahan (yaitu, Brucella dan Francisella) tidaktermasuk dalam API 20

E basis data. Prosedur alternatifharus digunakan untuk mengecualikan atau

mengkonfirmasi kehadiran mereka.

2) Persiapan inokulum

1. Buka ampul API NaCl 0,85% Sedang (5 ml) atauampul API Suspension

Menengah (5 ml) sebagaiditunjukkan dalam paragraf "Peringatan dan

Tindakan Pencegahan"paket menyisipkan untuk produk ini, atau

menggunakan tabung setiapmengandung 5 ml saline steril atau air

suling steril,tanpa aditif.

2. Menggunakan pipet atau PSIpette, menghapus wellisolated

tunggalkoloni dari piring isolasi. Inidianjurkan untuk menggunakan

budaya muda (18-24 jam).

3. Hati-hati emulsi untuk mencapai bakteri homogensuspensi. Suspensi ini

harus digunakan segera setelahpersiapan.

8

9

Catatan :

Sebagian besar spesies Vibrio adalah halophilous. Jika Vibrio

adalahdicurigai, menangguhkan bakteri dalam API NaCl 0,85%Menengah.

3) Inokulasi strip

1. Menggunakan pipet yang sama, isi kedua tabung dan beberapates CIT,

VP dan GEL dengan bakterisuspensi.

2. Isi hanya tabung (dan tidak pasangan) dari tes lainnya.

3. Buat anaerobiosis dalam tes ADH, LDC, ODC, H2Sdan URE dengan

overlay dengan minyak mineral.

4. Tutup kotak inkubasi.

5. Inkubasi pada 36 ° C ± 2 ° C selama 18-24 jam.

2.7 Pembacaan dan Interpretasi Hasil

1) Membaca strip

a. Setelah masa inkubasi, membaca strip dengan mengacuTabel

Reading.

b. Jika 3 atau lebih tes (tes Glu + atau -) positif, catatsemua reaksi

spontan pada lembar hasil dankemudian mengungkapkan tes yang

membutuhkan penambahanreagen:

10

- TDA Test: tambahkan 1 tetes reagen TDA. Sebuah

kemerahanwarna coklat menunjukkan reaksi positif untuk

menjadidicatat pada lembar hasil.

- IND Test: tambahkan 1 tetes reagen JAMES. Sebuah warna

pinkdikembangkan di seluruh cupule menunjukkan positifReaksi

dicatat pada lembar hasil.

- VP Test: tambahkan 1 tetes setiap 1 VP dan VP 2 reagen.Tunggu

minimal 10 menit. Sebuah warna pink atau merah

menunjukkanreaksi positif dicatat pada lembar hasil.Jika warna

sedikit merah muda muncul setelah 10 menit, yangReaksi harus

dianggap negatif.

Catatan:

Tes produksi indole harus dilakukanterakhir sejak reaksi ini

melepaskan produk gas yangmengganggu interpretasi tes lain padaStrip.

Inkubasi plastik tutup tidak harus digantisetelah penambahan reagen.

• Jika jumlah tes positif (termasuk tes GLU)sebelum menambahkan

reagen kurang dari 3:

- Inkubasi ulang strip untuk lebih 24 jam (± 2 jam) tanpa

menambahkan reagen apapun.

- Mengungkapkan tes yang membutuhkan penambahan reagen(lihat

paragraf sebelumnya).

- Untuk melengkapi identifikasi, mungkin perlu untukmelakukan tes

tambahan (lihat Identifikasiayat).

2) Interpretasi Hasil

Identifikasi diperoleh dengan profil numerik.

1) Penentuan profil numerik:

Pada lembar hasil, tes dipisahkan menjadi kelompok-

kelompok3 dan nilai 1, 2 atau 4 diindikasikan untuk setiap.

Olehmenambahkan bersama-sama nilai-nilai yang sesuai dengan

positifReaksi dalam setiap kelompok, 7-digit nomor profil

11

adalahdiperoleh untuk 20 tes dari API 20 E Strip. Reaksi oksidase

merupakan tes 21 dan memilikinilai 4 jika hasilnya positif.

2) Identifikasi :

Hal ini dilakukan dengan menggunakan database (V4.0)

Dengan Indeks Profil Analytical:

- Carilah profil numerik dalam daftar profil.

Dengan perangkat lunak identifikasi:

- Masukkan profil numerik 7-digit manual melaluiKeyboard.

Dalam beberapa kasus, profil 7-digit tidak diskriminatifcukup dan

tes tambahan berikut harusterbawa :

Pengurangan nitrat untuk nitrit (NO2) dan gas N2 (N2) : tambahkan 1

tetes setiap NIT 1 dan 2 NIT reagen ke Glu tabung. Tunggu 2-5 menit.

Sebuah warna merah menunjukkan reaksi positif (NO2). Reaksi

negatif (kuning) mungkin karena pengurangan untuk nitrogen (karena

kadang-kadang dibuktikan dengan gelembung gas): menambahkan 2

sampai 3 mg Zn reagen untuk tabung Glu. Setelah 5 menit, jika tabung

tetap kuning ini menunjukkan reaksi positif (N2) untuk dicatat pada

lembar hasil. Jika tes ternyata orangered, ini adalah reaksi negatif:

nitrat masih ada di tabung telah berkurang oleh Zinc. Reaksi ini

berguna ketika pengujian Gram-negatif, oksidase batang positif.

12

Catatan :

Untuk alasan yang sama seperti tes indol (lihat di "Membaca strip"),

nitrat Tes pengurangan harus dilakukan terakhir.

- Motilitas (MOB): Inokulasikan ampul API M Medium (lihat paket

insert).

- Pertumbuhan pada media agar MacConkey (McC): a Streak Plate agar

MacConkey (lihat paket insert).

- Oksidasi glukosa (OF-O): Inokulasikan ampul API darimedia (lihat

paket insert).

- Fermentasi glukosa (OF-F): Inokulasikan ampul API dari media (lihat

paket insert).

Ini tes tambahan, ditunjukkan dalam pendahuluanBagian (Profil

coding) dari Profil Analytical Index, mungkin digunakan untuk

membentuk profil 9 digit. Identifikasi kemudian diperoleh dengan

menggunakan software identifikasi.

5

315 173 (57) Enterobacter gergoviae

Pemeriksaan lebih lanjut dapat diusulkan dalam kasus

rendahdiskriminasi. Mengacu pada perangkat lunak identifikasi atau

Indeks Profil analitis.

13

2.8 Kontrol Kualitas

Media, strip, dan reagen yang sistematis kualitas dikendalikan pada

berbagai tahap pembuatan . Bagi para pengguna yang ingin melakukan tes

kontrol kualitas mereka sendiri dengan strip, lebih baik menggunakan strain :

1. Escherichia coli ATCC 25922 atau salah satu strain berikut

2. Stenotrophomonas maltophilia ATCC 51331

3. Enterobacter cloacae ATCC 13047

4. Proteus mirabilis ATCC 35659

5. Klebsiella pneumoniae ssp pneumoniae ATCC 35657

ATCC: American Type Culture Collection, 10801 Universitas Boulevard,

Manassas, VA 20110-2209, USA.

• The N2 (+) negara dapat diamati untuk strain ATCC 13047 dan strain

ATCC 25922.

o Profil diperoleh setelah 24-48 jam inkubasi untuk strain ATCC 51331,

menggunakan koloni tumbuh di Trypticase kedelai agar + darah.

o Profil diperoleh setelah 18-24 jam inkubasi untuk strain lainnya,

menggunakan koloni tumbuh di Trypticase kedelai agar + darah.

o suspensi bakteri disiapkan dalam API NaCl 0,85% Medium.

• Ini adalah tanggung jawab pengguna untuk melakukan Quality Control

sesuai dengan peraturan yang berlaku setempat.

2.9 Keterbatasan Metode

• API 20 Sistem E dimaksudkan untuk identifikasi Enterobacteriaceae

nonfastidious, batang gram negatif termasuk dalam database (lihat Tabel

Identifikasi pada akhir paket ini menyisipkan). Hal ini tidak dapat

14

digunakan untuk mengidentifikasi lain mikroorganisme atau untuk

mengecualikan kehadiran mereka.

• Perbedaan sehubungan dengan metode konvensional dapat diamati

karena berbeda prinsip-prinsip reaksi yang digunakan dalam teknik API.

Selain itu, variasi substrat ada yang juga memperhitungkan perbedaan

persentase.

• Pada kesempatan langka, reaksi glukosa untuk organisme seperti

Klebsiella atau Proteus dapat kembali dari positif menjadi negatif, di

mana misalnya warna hijau kebiruan adalah dilihat. Reaksi ini akan

disimpan sebagai negatif reaksi. Kejadian tersebut tercermin dalam

persentase yang ditunjukkan dalam Tabel Identifikasi.

• Jika Salmonella atau Shigella diidentifikasi, serologi identifikasi harus

dilakukan untuk mengkonfirmasi bakteri yang identifikasi.

• Yang digunakan harus murni organime tunggal.

Range Hasil Yang Diharapkan

Konsultasikan Identifikasi Tabel pada akhir paket inimasukkan untuk

rentang hasil yang diharapkan dari untuk berbagaireaksi biokimia.

Kinerja

• Enterobacteriaceae:

5515 strain pengumpulan dan strain berbagai asal-usulmilik spesies yang

termasuk dalam database yangdiuji:

- 92,80% dari strain diidentifikasi dengan benar(dengan atau tanpa tes

tambahan).

- 4,61% dari strain yang tidak teridentifikasi.

- 2,59% dari strain yang salah diidentifikasi.

• Non-kritis Gram negatif batang kecil lainnya:

2386 strain pengumpulan dan strain berbagai asal-usul milik spesies

yang termasuk dalam database yangdiuji:

- 90,32% dari strain diidentifikasi dengan benar(dengan atau tanpa tes

tambahan).

15

- 6.16% dari strain yang tidak teridentifikasi.

- 3,52% dari strain yang salah diidentifikasi.

2.10 Pembuangan Limbah

Ini adalah tanggung jawab masing-masing laboratorium untuk

menangani limbah dan limbah yang dihasilkan sesuai dengan jenis dan

derajat bahayanyauntuk perawatan dan membuangnya (atautelah digunakan

dan dibuang) sesuai dengan setiap peraturan yang berlaku.

16

Membaca Tabel

(1) A kuning sangat pucat juga harus dipertimbangkan positif.

17

(2) Sebuah warna oranye setelah 36-48 jam inkubasi harus dianggap negatif.

(3) Reading dibuat dalam cupule (aerobik).

(4) Fermentasi dimulai di bagian bawah tabung, oksidasi dimulai di cupule

tersebut.

(5) Sebuah warna sedikit merah muda setelah 10 menit harus dianggap negatif.

• Kuantitas menunjukkan dapat disesuaikan tergantung pada titer dari bahan

baku yang digunakan.

• cupules tertentu mengandung produk hewani, terutama peptones.

2.11 Fitur dan Keuntungan

1. Strip API® memberikan identifikasi akurat berdasarkan database yang

luas dan standar, sistem tes mudah digunakan. Kit termasuk strip yang

berisi hingga 20 tes biokimia mini. Semua yang cepat, aman dan mudah

untuk dilakukan.

2. Ekonomis untuk menjalankan dan user-friendly, strip API memiliki rak

panjang, memungkinkan setiap laboratorium untuk menjaga alat tes di

tangan.

18

3. APIweb ™ adalah produk perangkat lunak yang berisi semua database

API untuk interpretasi otomatis yang dapat diandalkan hasil Strip API -

bila digunakan pada setiap workstation PC yang kompatibel.

4. APIweb cepat dan mudah digunakan - kunci dalam profil biokimia atau

numerik strip untuk mendapatkan identifikasi organisme. Perangkat

lunak ini memberikan laporan rinci yang ditampilkan pada layar dan

dapat dicetak 

2.12 Gold Standard

1. FERMENTASI KARBOHIDRAT

Mempelajari kemampuan mikroorganisme dalam

memfermentasikan karbohidrat untuk mengasilkan asam atau gas

Indikator yang digunakan :

BCP (Brom Cresol Purple)

Hasil pengamatan :

Warna asal : Ungu

Positif : Kuning

Negatif : Tetap ungu

Positif Gas : Tabung Durham + gelembung udara

2. UJI INDOL

Menentukan kemampuan bakteri dalam memecah asam amino.

Reagen penambahan :

Kovack’s

Hasil Pengamatan :

19

Positif : Terbentuk Cincin Merah

Negatif : Tidak Terbentuk Cincin Merah

3. UJI METHYL RED

Menentukan mikroorganisme yang mampu mengoksidasi

glukosa dengan menghasilkan asam dengan konsentrasi tinggi dan

mempunyai stabilitas terhadap hasul akhir tersebut, membedakan

E. coli dan E. arogenes.

Reagen penambahan :

Methyl Red

Hasil Pengamatan :

Positif : Merah

Negatif : Kuning

4. UJI VOGES PROSKAUAER

Membedakan bakteri usus seperti E. coli, E. aerogenes dan

Klebsiella pneumoniae.

Reagen Penambahan :

1 : 1

KOH 40% : α-naftol

Hasil Pengamatan :

20

Positif : Merah

Negatif : Bening/Putih/Kuning

5. UJI PENGGUNAAN SITRAT

Membedakan bakteri usus berdasarkan kemampuan untuk

memfermentasikan sitrat sebagai satu-satunya sumber karbon.

Indikator :

BTB (Brom Thymol Blue)

Hasil Pengamatan :

Positif : Biru

Negatif : Hijau

21

6. UJI TRIPLE SUGAR IRON AGAR/H2S

Membedakan Enterobacteriaceae dan kelompok lain dari basil usus.

Hasil Pengamatan :

1. Lereng : Merah, Dasar : Kuning, Hanya memfermentasi

glukosa.

2. Lereng : Kuning, Dasar : Kuning, Hanya memfermentasi

Laktosa/Sukrosa

3. Lereng : Merah, Dasar : Merah, Tidak memfermentasi ketiga

macam gula.

4. Endapan hitam di bagian dasar : Pembentukan H2S

7. UJI OKSIDASE

Menentukan bakteri yang mempunyai aktivitas sitokrom oksidase.

Hasil Pengamatan :

Menggunakan Strip Oksidase

Positif : Ungu

Negatif : Tidak Berubah Warna

22

8. UJI KATALASE

Menentukan kemampuan bakteri dalam menguraikan H2O2

oleh enzim katalase. Membedakan bakteri Staphylococcus sp. dan

Streptococcus sp.

Reagen yang digunakan : H2O2 3%

Hasil Pengamatan :

Positif : Gelembung udara

Negatif : Tidak ada gelembung udara

9. UJI UREASE

Menentukan mikroorganisme yang mampu menguraikan urea

oleh enzim urease.

Bentuk : Media agar miring

Hasil Pengamatan :

Positif : Pink

Negatif : Putih/Kuning

23

10.UJI REDUKSI NITRAT

Menentukan kemampuan beberapa mikroorganisme dalam

mereduksi nitrat menjadi nitrit.

Bentuk : Cair

Hasil Pengamatan :

Positif nitrat : Hitam

Negatif nitrat : Tidak Berubah

Positif gas : ada gelembung udara.

24

BAB III

PENUTUP

3.1 Kesimpulan

Analytical Profile Index (API) Sistem identifikasi untuk

Enterobacteriaceae dan batang Gram-negatif non-kritis lainnya. API 20 E

adalah sistem identifikasi standar untuk Enterobacteriaceae dan non-rewel,

Gram negative batang yang menggunakan 21 miniatur biokimia tes dan

database. Daftar lengkap mereka organisme bahwa adalah mungkin untuk

mengidentifikasi dengan sistem ini adalah diberikan dalam Tabel Identifikasi

pada akhir paket ini masukkan.

API-20E test kit untuk identifikasi bakteri enterik menyediakan cara

mudah untuk menyuntik dan membaca tes yang relevan kepada anggota

Enterobacteriaceae keluarga dan organisme terkait. Sebuah strip plastik isinya

dua tabung mini uji diinokulasi dengan suspensi garam dari kultur murni.

Proses ini juga rehydrates media dessicated di setiap tabung. Beberapa tabung

terisi penuh dan beberapa tabung yang dilapis dengan minyak mineral

sehingga reaksi anaerobik dapat dilakukan.

25

DAFTAR PUSTAKA

1. Manual Book API 20E REF 20 100/20 160, 07584D-GB-2002/10 Identification system for Enterobacteriaceae and other non-fastidious Gram-negative rods

2. Jump up^ http://patft.uspto.gov/netacgi/nph-Parser?Sect1=PTO1&Sect2=HITOFF&d=PALL&p=1&u=%2Fnetahtml%2FPTO%2Fsrchnum.htm&r=1&f=G&l=50&s1=3936356.PN.&OS=PN/3936356&RS=PN/3936356

3. API 20E Jump up^ http://www.biomerieux-diagnostics.com/servlet/srt/bio/clinical-diagnostics/dynPage?doc=CNL_PRD_CPL_G_PRD_CLN_11

4. Aktivitas Biokimia MikroorganismeTim Mikrobiologi Analis Kesehatan Tangerang Poltekkes Banten 2015

26