manual de técnicas analíticas

5/20/2018 Manual de T cnicas Anal ticas

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DETERMINACIN DE LA DEMANDA QUMICA DE OXGENO EN AGUASNATURALES, RESIDUALES Y RESIDUALES TRATADAS NMX-AA-030-

SCFI-2001.

OBJETIVO

Determinar la demanda qumica de oxgeno (DQO) en aguas naturales, residuales

y residuales tratadas.

REACTIVOS

1 cido sulfrico concentrado (H2SO4)2 Dicromato de potasio (K2Cr2O7)3 Sulfato mercrico (HgSO4)

4 Sulfato de plata (Ag2SO4)5 Biftalato de potasio patrn primario (HOOCC6H4COOK)

PREPARACIN DE SOLUCIONES

Disolucin estandar de dicromato de potasio (A)Pesar aproximadamente 10 g de dicromato de potasio previamente secado a 103C por 2 h, pesar con precisin 5.108 g y aadirlos a 250 mL de agua y adicionar83.5 mL de cido sulfrico concentrado y aproximadamente 16.65 g de sulfatomercrico, disolver y enfriar a temperatura ambiente. Aforar a 500 mL con agua.

Dilucin de la muestra (B)Hacer una dilucin de 1:250, 1:100, 1:50 y 1:25

Disolucin de sulfato de plata en cido sulfrico (C)Pesar aproximadamente y con precisin 7.5 g de sulfato de plata y disolver en 500mL de cido sulfrico concentrado El sulfato de plata requiere un tiempoaproximado de dos das para su completa disolucin. La disolucin formada debemantenerse en la obscuridad para evitar su descomposicin.

Disolucin estndar de biftalato de potasio para curva de calibracinPesar 0.5g de biftalato de potasio, secar 2h a 120C. Pesar con precisin 0.2125g de biftalato de potasio, disolver en 250 mL de agua y aforar a 500 mL.


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RECOLECCIN, PRESERVACIN Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS

La muestra se debe analizar inmediatamente despus de su toma, en casocontrario debe conservarse en refrigeracin a 4C, adems de la adicin de cidosulfrico hasta pH < 2.

El tiempo mximo de almacenamiento previo al anlisis es de 28 das.

EQUIPO Y MATERIALES

Estufa de conveccinEspectrofotmetroTubos de ensaye con roscaPipetas de 10 mL, 1mLVasos de precipitadoPropipeta

Esptula

Curva de calibracin

BLANCO: 1.5 mL de dicromato de potasio, 2.5 mL de agua y 3.5 mal de disulfaode plata.

Tubo ppm (mg/L) Biftalato depotasio (mL)

Agua (mL)

1 900 6.75 0.752 800 6.00 1.5

3 600 4.5 3.004 500 3.75 3.755 300 2.25 5.256 200 1.5 6.007 100 0.75 6.758 50 0.375 7.125

PROCEDIMIENTO

Precalentar a 150oC el digestor de DQO, colocar en los tubos de reaccin 1,5 mL

de la disolucin de digestin (A), tomar cuidadosamente 2,5 mL de muestrapreviamente homogeneizada (B) y colocar dentro de los tubos de reaccin, aadircuidadosamente 3,5 mL de la disolucin de digestin respectiva (C), cerrarinmediatamente para evitar que se escapen los vapores, asegurarse de que estnhermticamente cerrados. Suavemente invertir los tubos varias veces destapandodespus de cada inversin para liberar la presin.


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Colocar 2,5 mL de agua en un tubo para la determinacin del blanco de reactivos.

Colocar todos los tubos en el digestor previamente calentado a 150C por 2 h;retirar los tubos del digestor y dejar que los tubos se enfren a temperaturaambiente, permitiendo que cualquier precipitado se sedimente.

Medir la absorbancia a 620 nm en el espectrofotmetro, previamente calibrado.


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DETERMINACIN DE NITRGENO TOTAL KJELDAHL EN AGUASNATURALES, RESIDUALES Y RESIDUALES NMX-AA-026-SCFI-2010.

OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIN.

Determinacin de nitrgeno Kjeldahl total en aguas naturales, residuales yresiduales tratadas.

REACTIVOS

Tetraborato de sodio decahidratado (Na2B4O7 10H2O)Hidrxido de sodio (NaOH)

cido sulfrico concentrado (H2SO4)cido brico (H3BO3)

Idicador de rojo de metiloIndicador de azul de metilenoAlcohol etlico (CH3CH2OH)Sulfato de cobre (II) anhidro (CuSO4)Sulfato de potasio (K2SO4)Tiosulfato de sodio pentahidratado (Na2S2O35H2O)Carbonato de sodio anhidro (Na2CO3), patrn primarioCloruro de amonio (NH4Cl) patrn primario.

cido sulfmico (H2NSO3H)Naranja de metilo, sal sdica (C14H14N3NaO3S)

NOTA 1: Se puede sustituir el cido sulfmico por otra sal orgnica que contenganitrgeno.

PREPARACIN DISOLUCIN.

Disolucin indicadora de cido brico. Secar aproximadamente 30 g de cidobrico en un desecador que contenga slica gel como desecante por 24 h. Pesaraproximadamente 20,0 g de cido brico seco disolver en 500 mL agua, agregar

10 mL de la mezcla de indicadores y diluir a 1 L. Guardar la disolucin en unenvase de plstico o en un contenedor libre de boro, preparar mensualmente.

Disolucin de tetraborato de sodio (0,025M). Pesar aproximadamente pero conprecisin 9,50 g de tetraborato de sodio decahidratado en 50 mL de agua y llevara 1 L con agua.


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Disolucin amortiguadora de boratos. Aada 88 mL de la disolucin de NaOH 0,1M a 500 mL de disolucin de tetraborato de sodio 0,025 M y diluir a 1 L con agua.

Disolucin de hidrxido de sodio (0,1 M). Pesar aproximadamente 4,0 g dehidrxido de sodio y disolver en 500 mL de agua, dejar enfriar a temperatura

ambiente y llevar a 1 L.

Disolucin de cido sulfrico (0,03 M). Preparar una disolucin de cido sulfricodiluyendo 3 mL en 1 L de agua.

Disolucin valorada de cido sulfrico (0,006 M). Diluir 200 mL de la disolucin decido sulfrico 0,03 M en 1 L de agua. Titular la disolucin de cido sulfricoobtenida con una disolucin de 30 mL de agua libre de dixido de carbono y 0,0318 g 0,000 5 g de carbonato de sodio anhidro, previamente secado por 1 h a 140

C 2 C, y 2 gotas del indicador anaranjado de metilo; titular esta disolucin conel cido sulfrico hasta que el indicador vire de amarillo a canela.Calcular la concentracin de masa exacta de la disolucin (1 mL = 0,28 mg de N-amoniacal orgnico).

Mezcla de indicadores. Pesar aproximadamente 200,0 mg de indicador rojo demetilo diluir a 100 mL con alcohol etlico, pesar aproximadamente 100,0 mg deindicador azul de metileno y diluir a 50 mL con alcohol etlico, mezclar las dosdisoluciones en un frasco de vidrio. Preparar mensualmente.

Reactivo para la digestin. Pesar aproximadamente y con precisin 134,0 g desulfato de potasio y 7,3 g de sulfato de cobre (II) anhidro, disolver en 800 mL deagua destilada, agregar cuidadosamente 134 mL de cido sulfrico concentrado,dejar enfriar a temperatura ambiente y diluir la mezcla a 1 L con agua. Almacenarla disolucin a una temperatura de 20C para evitar la cristalizacin.

Disolucin reactivo de hidrxido - tiosulfato de sodio. Pesar aproximadamente500,0 g de hidrxido de sodio y 25,0 g de tiosulfato de sodio pentahidratadodisolver en agua y llevar a 1 L.

Disolucin de hidrxido de sodio (6 M). Pesar aproximadamente 240,0 g dehidrxido de sodio y llevar a 1 L con agua libre de amoniaco.

Disolucin de nitrgeno amoniacal (1 mL = 1,0 mg de nitrgeno amoniacal), pesaraproximadamente 3,819 g de cloruro de amonio y aforar a 1 L con agua.


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Disolucin de nitrgeno orgnico (0,07 M N-Org). Pesar aproximadamente 6,93 g 0,2 g de cido sulfmico disolver y diluir a 1 L con agua.

Disolucin de hidrxido de sodio para neutralizacin ( 12,5 M). Pesaraproximadamente 500,0 g 0,5 g de hidrxido de sodio disolver en agua; dejar

enfriar hasta temperatura ambiente y diluir a 1 L con agua.

Disolucin de cido sulfrico para neutralizacin (5 M). Tomar 500,0 mL de cidosulfrico concentrado disolver en agua; dejar enfriar hasta temperatura ambiente ydiluir a 1 L con agua.

Disolucin de anaranjado de metilo. Pesar 0,05 g 0,005 g del reactivoanaranjado de metilo y diluir a 100 mL con agua.

EQUIPO Y MATERIALES

1 Para determinacin de nitrgeno tipo Kjeldahl que consta de: Digestor consistema de extraccin de humos y destilador con sistema de condensacin paramantener la temperatura por abajo de 29C.2 Potencimetro para medicin de pH reproducible hasta 0,02 unidades de pH,con compensador de la temperatura y sus respectivos electrodos.3 Balanza analtica con precisin de 0,1 mg4 Balanza granataria con precisin de 0,1 g

5 Matraz tipo Kjeldahl de 800 mL6 Bureta7 Frasco de polietileno o vidrio con tapa de 2 L de capacidad.


Deben tomarse un mnimo de 2,0 L de muestra en un envase de polietileno.Pueden utilizarse muestras compuestas o simples.

Debe preservarse la muestra con cido sulfrico (1:1) a un pH de 1,5 a 2,0.Posteriormente mantener a 4C hasta su anlisis.


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PROCEDIMIENTO

1 Limpiar el equipo de destilacin antes de utilizarlo, destilando una mezcla (1:1)agua-disolucin hidrxido - tiosulfato de sodio hasta que el destilado est libre deamonio. Repetir esta operacin cada vez que el equipo se vaya a utilizar, si no se

emplea en intervalos de menos de 4 h tambin se requiere realizar esta operacin.

Nitrgeno amoniacal

2 Determinar el volumen de la muestra de acuerdo a la tabla 1, si es necesario,ajustar el volumen aproximadamente 500 mL y neutralizar a pH 7, con hidroxidode sodio 12.5 M o cido sulfrico 5 M. Colocar la muestra medida en un matrazKjeldahl de 800 mL.

1 Tomar una muestra dependiendo de las concentraciones esperadas, de acuerdoa la tabla 1 diluir con agua hasta 500 mL. Preparar un blanco con 500 mL de aguay darle el mismo tratamiento que a la muestra como sigue:

2 Aadir 25 mL de la disolucin amortiguadora de boratos y ajustar el pH a 9,5con disolucin de hidrxido de sodio 6 M utilizando potencimetro o papelindicador para verificar. Transferir la disolucin a un matraz Kjeldahl y aadir unascuentas de vidrio o perlas de ebullicin.

3 Conectar el matraz Kjeldahl al bulbo del aparato de destilacin, destilar lamuestra cuidando que la temperatura del condensador no pase de 29C.

4 Recolectar el condensado en un recipiente que contenga 50 mL de la disolucinindicadora de cido brico, sumergiendo la punta del condensador o unaextensin del mismo por debajo de la superficie del lquido.


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5 La destilacin se completa cuando se hayan recolectado 300 mL de destiladoaproximadamente, incluyendo los 50 mL de la disolucin indicadora de cidobrico.

6 Retirar el matraz colector y titular con solucin de cido sulfrico 0,006 M hasta

el vire del indicador de verde esmeralda a morado. Registrar el volumen gastadode cido como volumen A.

Nitrgeno orgnico

1 Enfriar el residuo contenido en el matraz Kjeldahl.

2 Digestin: Adicionar cuidadosamente 50 mL de reactivo para la digestin almatraz Kjeldahl y mezclar perfectamente. Aadir unas cuentas de vidrio o piedras

de ebullicin. Mezclar y conectar al equipo Kjeldahl; permitir la ebullicin de lamuestra hasta que el volumen de la disolucin se reduzca aproximadamente a unvolumen de 25 mL a 50 mL y se observe gran desprendimiento de vaporesblancos (estos vapores pueden oscurecerse cuando la muestra presenta grandescantidades de materia orgnica). Si la muestra contiene una cantidad apreciablede material suspendido, aadir 50 mL adicionales de reactivo de digestin

3 Continuar la digestin durante 30 min ms. En este perodo, la disolucin cambiade turbia hasta ser transparente e incolora o con una ligera coloracin amarilloplido. Durante la digestin el matraz Kjeldahl debe permanecer inclinado. Enfriar

el matraz y su contenido, diluir a 300 mL con agua y mezclar.

4 Cuidadosamente aadir 50 mL de la disolucin de hidrxido-tiosulfato de sodio,para formar una capa alcalina en el fondo del matraz, agitar hasta asegurarse queest completamente mezclado, el pH de la disolucin debe ser mayor a 11,0.

5 Conectar el matraz Kjeldahl al condensador, destilar la muestra cuidando que latemperatura del condensador no pase de 29 C.

6 Recolectar el condensado en un recipiente que contenga 50 mL de la disolucinindicadora de cido brico, sumergiendo la punta del condensador o unaextensin del mismo por debajo de la superficie del lquido.

7 Retirar el matraz colector y titular con disolucin de cido sulfrico 0,006 M hastaque la disolucin vire de color verde esmeralda a morado. Registrar el volumengastado de cido como volumen C.


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BlancoLlevar un blanco durante todos los pasos del mtodo.

CLCULOS

Calcular la concentracin de masa de nitrgeno amoniacal, en mg/L en la muestracomo se indica a continuacin:

( ) () ()(NH3-N) es la concentracin de masa de nitrgeno amoniacal;VA son los mL de cido sulfrico gastados en la titulacin de la muestra;VB son los mL de cido sulfrico gastados en el blanco;c(H2SO4) es la concentracin del cido sulfrico en mol/L;Vm son los mL de muestra, yAr(N) masa atmica del nitrgeno.

Calcular la concentracin de masa de nitrgeno orgnico, en mg/L en la muestracomo se indica a continuacin:

( ) () ()Donde:es la concentracin de masa de nitrgeno orgnico;VC son los mL de cido sulfrico gastados en la titulacin de la muestra;VB son los mL de cido sulfrico gastados en el blanco;

c(H2SO4) es la concentracin del cido sulfrico en mol/L;Vm son los mL de muestra, yAr(N) masa atmica del nitrgeno.

Calcular la concentracin de masa de nitrgeno total Kjeldahl, en mg/L en lamuestra como se indica a continuacin:

() ()Donde:

(NTK) es la concentracin de masa de nitrgeno total Kjeldahl;(N-NH3) es la concentracin de masa de nitrgeno amoniacal, y(NOrg) es la concentracin de masa de nitrgeno orgnico.


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ANLISIS DE AGUA - DETERMINACIN DE SLIDOS Y SALESDISUELTAS EN AGUAS NATURALES, RESIDUALES Y RESIDUALES

TRATADAS - NMX-AA-034-2012.

OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIN

Establece el mtodo de anlisis para la determinacin de slidos y sales disueltasen aguas naturales, residuales y residuales tratadas.

EQUIPO Y MATERIALES

Equipo

1. Bomba de vaco

2. Estufa elctrica, para operar de 103C a 105C3. Balanza analtica con precisin de 0,1 mg4. Mufla elctrica para operar a 500C 50C

Material

1. Cpsulas de evaporacin adecuadas al volumen de la muestra2. Desecador, provisto con un desecante que contenga un indicador colorido dehumedad3. Crisol Gooch de poro fino con adaptador de hule para el equipo de filtracin4. Matraz Kitazato de 1 L a 2 L de capacidad5. Filtro de fibra de vidrio de tamao adecuado al crisol Gooch utilizado con unaporosidad de 2 m o menor6. Pinzas para crisol7. Guantes para proteccin al calor8. Careta para proteccin al calor

REACTIVOS Y PREPARACION DE DISOLUCIONES

Cloruro de sodioCarbonato de calcio

Almidn en polvo

Disolucin estndar para muestras de control. Agregar la cantidad necesaria dealmidn, Cloruro de Sodio y Carbonato de Calcio de acuerdo con la concentracin


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deseada de slidos en las muestras de control y diluir a 1 L. Este patrn debeprepararse cada vez que se realice el mtodo.

RECOLECCIN, PRESERVACIN Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS1. Deben tomarse un mnimo de 500 mL de muestra en envases de polietileno y

taparse inmediatamente despus de la colecta. Pueden utilizarse muestrascompuestas o simples.2. No se requiere de ningn tratamiento especfico en campo.3. Debe preservarse la muestra a 4C hasta su anlisis.4. El tiempo mximo de almacenamiento previo al anlisis es de 7 das. Sinembargo, se recomienda realizar el anlisis dentro de las 24 h posteriores a sucolecta. Las muestras deben estar a temperatura ambiente al momento delanlisis.

PROCEDIMIENTO

Preparacin de cpsulas de porcelana

1. Las cpsulas se introducen a la mufla a una temperatura de 550C 50C,durante 20 min como mnimo. Despus de este tiempo transferirlas a la estufa a103C - 105C aproximadamente 20 min.2. Sacar y enfriar a temperatura ambiente dentro de un desecador.3. Pesar las cpsulas y registrar los datos.

4. Repetir el ciclo hasta alcanzar el peso constante, el cual se obtendr hasta queno haya una variacin en el peso mayor a 0,5 mg. Registrar como peso G.

Preparacin de crisoles Gooch

1. Introducir el filtro de fibra de vidrio en el crisol con la cara rugosa hacia arriba,mojar el filtro con agua para asegurar que se adhiera al fondo del crisol.2. Los crisoles se introducen a la mufla a una temperatura de 550C 50C,durante 20 min como mnimo. Despus de este tiempo transferirlos a la estufa a

103C - 105C aproximadamente 20 min.3. Sacar y enfriar a temperatura ambiente dentro de un desecador.4. Pesar los crisoles y repetir el ciclo hasta alcanzar el peso constante, el cual seobtiene hasta que no haya una variacin en el peso mayor a 0,5 mg. Registrarcomo G3.


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Preparacin de la muestra

1. Sacar las muestras del sistema de refrigeracin y permitir que alcancen latemperatura ambiente. Agitar las muestras para asegurar la homogeneizacin dela muestra.

Medicin para slidos totales (ST) y slidos totales voltiles (SVT)

- Determinacin para slidos totales (ST):

1. En funcin de la cantidad de slidos probables tomar una cantidad de muestraque contenga como mnimo 25 mg/L de slidos totales, generalmente 100 mL demuestra es un volumen adecuado.2. Transferir la muestra a la cpsula de porcelana que previamente ha sido puesta

a peso constante.3. Llevar a sequedad la muestra en la estufa a 103C-105C.4. Enfriar en desecador hasta temperatura ambiente y determinar su peso hastaalcanzar peso constante. Registrar como peso G1.

Determinacin para slidos totales voltiles(SVT):

5. Introducir la cpsula conteniendo el residuo a la mufla a 550C 50C durante15 min a 20 min, transferir la cpsula a la estufa a 103C - 105Caproximadamente 20 min, sacar la cpsula, enfriar a temperatura ambiente en

desecador y determinar su peso hasta alcanzar peso constante. Registrar comopeso G2.6. Cuando se determinen muestras por duplicado o triplicado, los resultados comomximo pueden tener una variacin del 5 por ciento del promedio de losresultados.

Slidos suspendidos totales (SST) y slidos suspendidos totales (SST)

Determinacin de los slidos suspendidos totales (SST):

1. Medir con una probeta, un volumen adecuado de la cantidad seleccionada demuestra previamente homogeneizada la cual depende de la concentracinesperada de slidos suspendidos.2. Filtrar la muestra a travs del crisol Gooch preparado anteriormente aplicandovaco, lavar el disco tres veces con 10 mL de agua, dejando que el agua drenetotalmente en cada lavado.


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3. Suspender el vaco y secar el crisol en la estufa a una temperatura de 103C a105C durante 1 h aproximadamente. Sacar el crisol, dejar enfriar en undesecador a temperatura ambiente y determinar su peso hasta alcanzar pesoconstante registrar como peso G4.

Determinacin de slidos suspendidos totales (SST):

4. Introducir el crisol que contiene el residuo y el disco a la mufla, a unatemperatura de 550C 50C durante 15 min a 20 min. Sacar el crisol, de la muflae introducirlo a la estufa a una temperatura de 103C -105C durante 20 minaproximadamente. Sacar y enfriar a temperatura ambiente en desecador ydeterminar su peso hasta alcanzar peso constante. Registrar como peso G5.

Sales disueltas totales (SDT)

La determinacin de las sales disueltas totales es por diferencia entre los slidostotales menos slidos suspendidos totales.

CLCULOS

Calcular el contenido de slidos totales (ST) de las muestras como sigue:

V

GGST

1000*1

donde:ST son los slidos totales, en mg/L;G1 es el peso de la cpsula con el residuo, despus de la evaporacin, en mg;G es el peso de la cpsula vaca, en mg a peso constante, yV es el volumen de muestra, en mL.

Calcular el contenido de slidos totales voltiles (SVT) de las muestras comosigue:

V

GGSVT

1000*21

donde:SVT es la materia orgnica total, en mg/L;G2 es el peso de la cpsula con el residuo, despus de la calcinacin, en mg, y


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V es el volumen de muestra, en mL.

Calcular el contenido de slidos suspendidos totales de las muestras como sigue:

V

GGSST

1000*34

donde:SST son los slidos suspendidos totales, en mg/L;G3 es el peso del crisol con el disco a peso constante, en mg;G4 es el peso del crisol con el disco y el residuo seco, en mg, yV es el volumen de muestra, en mL.

Calcular el contenido de slidos suspendidos totales de las muestras como sigue:

V

GGSST

1000*54

donde:SST son los slidos suspendidos totales, en mg/L;G5 es el peso del crisol con el residuo, despus de la calcinacin, en mg;V es el volumen de muestra, en mL.

Calcular el contenido de sales disueltas totales de las muestras como sigue:

SSTSTSDT

donde:SDT son las sales disueltas totales, en mg/LST son los slidos totales, en mg/LSST son los slidos suspendidos totales, en mg/L

Reportar los valores obtenidos de la muestra control junto con los resultados del

anlisis.

Reportar los resultados, en mg/L.


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DETERMINACIN DE METALES PORABSORCIN ATMICA EN AGUASNATURALES, POTABLES, RESIDUALES Y RESIDUALES TRATADAS -NMX-

AA-051-2001.

OBJETIVO

Establece el mtodo de espectrofotometra de absorcin atmica para ladeterminacin de metales disueltos, totales, suspendidos y recuperables en aguasnaturales, potables, residuales y residuales tratadas.

EQUIPO Y MATERIALES

Equipo

1. Balanza analtica con precisin de 0,1 mg.2. Espectrofotmetro de absorcin atmica (EAA). Con haz sencillo o doble,monocromador, detector, fotomultiplicador ajustable al ancho de banda espectral,intervalo de longitud de onda que contenga las longitudes de los analtos aanalizar y provisto de una interfase con registrador o un adecuado sistema dedatos.3. Generador de hidruros.4. Vapor fro.5. Horno de grafito. Equipo capaz de programar las temperaturas, tiempos y flujosde gas inerte y alterno en los pasos para atomizar la muestra, debe contar con un

sistema de enfriamiento para controlar la temperatura del horno.6. Lmparas de: Aluminio, antimonio, arsnico, bario, berilio, bismuto, calcio,cadmio, cesio, cobalto, cobre, cromo, estao, estroncio, hierro, iridio, magnesio,manganeso, mercurio, molibdeno, litio, nquel, oro, osmio, plata, platino, plomo,potasio, podio, rubidio, selenio, silicio, sodio, titanio, vanadio, zinc (adems deotros elementos de inters en el anlisis de aguas).7. Horno de microondas, y/o autoclave, y/o placa de calentamiento.8. Quemadores de 10 cm de 1 ranura, de 10 cm de 3 ranuras y para xido nitrosode 5 cm o los recomendados por el fabricante del equipo.9. Celda de cuarzo cilndrica para el generador de hidruros o la recomendada porel fabricante del equipo.


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Materiales

1. Los contenedores de las muestras deben lavarse con disolucin de detergenteno inico, libre de metales, enjuagarse con agua, remojarse en cido toda lanoche y volver a enjuagarse con agua libre de metales y dejar secar (con cuidado

especial para el anlisis de trazas).2. En los casos de que se presenten adherencias en el material debe dejarseremojando de 12 h a 24 h con HNO3 (1:5), HCl (1:5) o con agua regia (3 partes deHCl concentrado + 1 parte de HNO3 concentrado) a 70C, despus debe serenjuagado con agua libre de metales.3. En los casos de que el material presente grasas, enjuagar con acetona y/ohexano.4. Papel filtro nmero 40 (o equivalente).5. Pipetas volumtricas tipo A o micropipetas calibradas.

6. Cajas de petri.7. Tubos de grafito y accesorios (especficos para el horno de grafito utilizado).8. Material de consumo que necesite el espectrofotmetro en flama y/o hornony/ogenerador de hidruros y/o vapor fro.9. Membranas de filtracin de 0,45 micras.

REACTIVOS

1. cido clorhdrico concentrado (HCl)2. cido ntrico concentrado (HNO3)

3. cido sulfrico concentrado (H2SO4)4. Disolucin de borohidruro de sodio (NaBH4) en hidrxido de sodio (NaOH) a laconcentracin especificada por el fabricante del equipo. Esta disolucin debeprepararse justo antes de realizar el anlisis.5. Aire comprimido libre de agua y aceite6. Acetileno grado absorcin atmica7. Argn grado alta pureza o absorcin atmica8. Nitrgeno grado alta pureza o absorcin atmica9. xido nitroso grado alta pureza o absorcin atmica10. Disolucin patrn (certificada y/o preparada en el laboratorio 1 g/L 1g/Kg) de:aluminio, antimonio, arsnico, bario, berilio, bismuto, calcio, cadmio, cesio,cobalto, cobre, cromo, estao, estroncio, hierro, iridio, magnesio, manganeso,mercurio, molibdeno, litio, nquel, oro, osmio, plata, platino, plomo, potasio, rodio,rubidio, selenio, slice, sodio, titanio, vanadio, zinc (adems de otros elementos deinters en el anlisis de aguas).NOTA.- Consultar el apndice normativo C.


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PREPARACION DE DISOLUCIONES

1. Disolucin patrn intermedia: Preparar las disoluciones patrn de acuerdo almtodo tomando una alcuota adecuada de la disolucin patrn certificada.

2. Disoluciones patrn: Demostrar el intervalo lineal con un mnimo de 4disoluciones y un blanco que estn dentro del intervalo de trabajo.

3. Disolucin patrn para la matriz adicionada: La concentracin depende delmetal a analizar y de la tcnica utilizada, se debe preparar a partir de la disolucinpatrn intermedia.

7 RECOLECCIN, PRESERVACIN Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS

Debe tomarse un mnimo de 500 mL de muestra para metales genricos en sumayora, en un envase de polietileno o polipropileno. Para la determinacin demercurio, arsnico o selenio se necesitan 250 mL en envases separados llenandohasta el tope.

PROCEDIMIENTO1. Realizar tres lecturas independientes (por lo menos) para cada muestra, blanco,patrn, etc.

Las muestras de aguas residuales, requieren en general, un tratamiento previoantes del anlisis. Los metales totales incluyen las combinaciones de carcterorgnico e inorgnico, tanto disueltos como en partculas. Las muestras incoloras,transparentes con una turbiedad < 1 UNT, pueden analizarse directamente sindigestin. En caso de agua potable habr que concentrar para algunos metales.

2. Preparacin de la muestra para determinacin de metales disueltos ysuspendidos.

2.1 Para la determinacin de metales disueltos, la muestra debe filtrarse en elmomento de su coleccin y/o en el laboratorio a travs de una membrana de porode 0,45 micras. Hacer un blanco utilizando una membrana similar, lavada conagua para asegurarse que est libre de contaminacin. Preacondicionar lamembrana enjuagndola con cido ntrico (1 %) y dndole un enjuague con aguatipo I antes de utilizarla.


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2.2 Para la muestra de metales suspendidos, registrar el volumen demuestrafiltrada e incluir una membrana en la determinacin del blanco. Antes defiltrar, centrifugar las muestras con un alto contenido de turbiedad en tubos deplstico de alta densidad o TFE lavados con cido. Agitar y filtrar a una presin de70 Kpa a 130 Kpa.

2.3 Despus de la filtracin, acidificar el filtrado a un pH de 2 con cido ntricoconcentrado y analizar directamente.

2.4 La membrana para anlisis de metales suspendidos debe guardarse en unacaja de petri lavada, enjuagada con disolucin cida y seca, si la filtracin serealiza en campo.

2.5 Si durante el traslado de la muestra o durante el almacenamiento se forma un

precipitado, ste debe redisolverse.

2.6 Para la digestin de la muestra en parrilla de calentamiento y en vaso abiertotransferir la membrana a un vaso de precipitados de 150 mL y aadir 4 mL decido ntrico concentrado. Incluir un filtro para la determinacin del blanco. Cubrircon vidrio de reloj y calentar. El cido caliente disuelve la membrana rpidamente.Incrementar la temperatura para la digestin del material.

2.7 Calentar casi a sequedad evitando que hierva la muestra, enfriar y lavar elvidrio de reloj con agua y aadir otros 3 mL de cido ntrico concentrado.

Cubrir y continuar calentando hasta digestin completa, generalmente es cuandoadquiere una apariencia cristalina o no cambia con la adicin del cido.

2.8 Evaporar casi a sequedad (aproximadamente 2 mL), enfriar y lavar el vidrio dereloj con agua, aadir 10 mL de cido clorhdrico (1:1) y 15 mL de agua por cada100 mL de dilucin y calentar por otros 15 min para redisolver precipitados que sehallan formado. Los puntos 2.6, 2.7 y 2.8 pueden variar si se utilizan otras fuentesde energa (autoclaves u hornos de microondas).

2.9 Enfriar, lavar las paredes del vaso y vidrio reloj con agua y filtrar para removerel material insoluble que pueda tapar el nebulizador. Ajustar el volumen basado enla concentracin esperada de los analitos. La muestra est lista para su anlisis.

3 Preparacin de la muestra para la determinacin de metales totales pordigestin en parrilla de calentamiento y en vaso abierto en aguas naturales,potables y residuales.


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3.1 Homogeneizar perfectamente la muestra, verificando que no existan slidosadheridos en el fondo del contenedor. Inmediatamente despus tomar unaalcuota de 50 mL a 100 mL dependiendo de la naturaleza de la muestra, ytransferir a un vaso de precipitados para digestin.

3.2 Aadir 3 mL de cido ntrico concentrado y calentar en una placa, evaporar,cuidando que no hierva, hasta aproximadamente de 2 mL a 5 mL de muestra yenfriar.

3.3 Adicionar 5 mL de cido ntrico concentrado, cubrir con un vidrio de reloj ypasar nuevamente la muestra a la placa de calentamiento. Incrementar latemperatura de calentamiento hasta que exista reflujo de vapores. Continuarcalentando y en caso de ser necesario, agregar mayor cantidad de cido ntricoconcentrado y continuar la digestin.

Cuando la digestin es completa (cuando la muestra tenga apariencia cristalinaconstante) retirar la muestra y enfriar.La digestin puede realizarse en placa trmica y en recipientes de tefln cerradosusando como fuente de energa autoclave u horno de microondas.

NOTA.- Consultar el apndice normativo E.

3. 4 Por cada 100 mL de volumen de disolucin final adicionar 10 mL de cidoclorhdrico (1:1) y 15 mL de agua, calentar la muestra sin llegar a ebullicin porespacio de 15 min para disolver precipitados o residuos resultantes de la

evaporacin y llevar al aforo correspondiente (de 50 mL a 100 mL).

Enfriar, lavar las paredes del vaso y vidrio de reloj con agua y filtrar para removerel material insoluble que pueda tapar el nebulizador. Ajustar el volumen basado enla concentracin esperada de los analitos. La muestra est lista para su anlisis.Las concentraciones deben reportarse como metales totales.

Este procedimiento puede variar en la determinacin de arsnico, antimonio,mercurio y selenio entre otros.

4 Anlisis por aspiracin directa.4.1 Calibrar el espectrofotmetro de absorcin atmica de acuerdo a lo indicadomanual del fabricante.4.2 Obtener una grfica con los valores de la curva de calibracin y realizar losclculos cuantitativos. Analizar el lote de muestras.


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4.3 Anlisis de metales en aguas a nivel de trazas por aspiracin directa puedehacerse por extraccin con solvente (MIBK).

NOTA.- Consultar el apndice normativo F.

5 Anlisis por horno de grafito.5.1 Calibrar el espectrofotmetro de absorcin atmica, con el aditamento hornode grafito de acuerdo a lo indicado en el inciso 9.3.3 o manual del fabricante.Inyectar la cantidad recomendada por el fabricante en el tubo de grafito del blancode reactivos y la disolucin de trabajo ms concentrada para optimizar elprograma del horno.

5.2 Obtener una grfica con los valores de la curva de calibracin y realizar losclculos cuantitativos.

5.3 Analizar el lote de muestras.

6 Anlisis por generador de hidruros.

En forma directa para aguas naturales y potables (transparentes) y/o despusdeprevia digestin para aguas residuales.6.1 Calibrar el espectrofotmetro de absorcin atmica con el aditamentogenerador de hidruros de acuerdo a lo indicado en el inciso 9.3.2. o manual delfabricante.



7 Anlisis por vapor fro.Para anlisis con cloruro estaoso7.1 Calibrar el espectrofotmetro de absorcin atmica con el aditamento paravapor fro

7.2 Estndares, blanco y muestras deben ser tratados con cido ntrico y cidosulfrico en presencia de permanganato de potasio para oxidar todo el mercuriopresente a forma de Hg2+El exceso de permanganato de potasio es reducido con cloruro de hidroxilamina.


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El mercurio metlico se reduce con cloruro estanoso y el vapor atmico delmercurio es llevado por medio del sistema aereador a la celda de absorcin paraser detectado.Para el anlisis con boro hidruro de sodio.Los estndares, blanco y muestras, ms un oxidante se conectan al sistema de

vapor fro para ser detectados, ver manual de fabricante.

NOTA.- Consultar el apndice normativo G.



CLCULOS

1. Realizar las grficas de la curvas de calibracin de cada uno de los metales deacuerdo a las concentraciones esperadas de la muestra.2. Calcular la concentracin de la muestra por medio de la ecuacin de la rectaque se obtiene de las curvas de calibracin para cada metal empleando lasiguiente ecuacin:Ecuacin 1:

bmXY

donde:

Y es la absorbancia de la muestra ya procesada;m es la pendiente (coeficiente de absortividad), yb es la ordenada al origen.Despejar X que debe ser la concentracin de la muestra procesada y tomar encuenta los factores de dilucin que se realicen en cada uno de los metales segnla tcnica utilizada, y se debe obtener la concentracin del metal en la muestra.


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DETERMINACIN DE FSFORO TOTALEN AGUAS NATURALES,RESIDUALES Y RESIDUALES TRATADAS NMX-AA-029-2001

OBJETIVO

Establece dos mtodos de anlisis para la determinacin de fsforo total en aguasresiduales, naturales y residuales tratadas.

REACTIVOS Y PATRONESGenerales

1. Fosfato monobsico de potasio anhidro (KH2PO4)2. Disolucin madre de fosfato. Pesar aproximadamente y con precisin 219,5 mgde fosato monobsico de potasio anhidro previamente secado a 105C durante

dos horas, aforar con agua a 1 L; 1,0 mL = 50,0 g de P como PO43. Fenolftalena4. cido sulfrico concentrado (H2SO4)5. Persulfato de amonio [(NH4)2S2O8] o persulfato de potasio (K2S2O8)6. Hidrxido de sodio (NaOH)7. Disolucin de cido fuerte. Cuidadosamente adicionar 300 mL de cido sulfricoconcentrado a aproximadamente 600 mL de agua. Dejar enfriar y agregar 4 mLde cido ntrico concentrado y aforar a 1L con agua.

Mtodo cloruro estanoso

1. cido ntrico concentrado(HNO3)2. Glicerol (C3H8O3)3. Cloruro estanoso dihidratado (SnCl22H2O)4. Heptamolibdato de amonio tetrahidratado [(NH4)6Mo7O244H2O]5. Disolucin de cido fuerte: Cuidadosamente adicionar 300 mL de cido sulfricoconcentrado a aproximadamente 600 mL de agua. Dejar enfriar y agregar 4 mL decido ntrico concentrado y aforar a 1L con agua.6. Disolucin de cloruro estanoso: Pesar aproximadamente y con precisin 2,5 gde cloruro estanoso dihidratado y disolver en 100 mL de glicerol. Calentar enbao de agua y agitar con una varilla de vidrio. El reactivo es estable y no requierede la adicin de conservadores o almacenamiento especial.7. Disolucin de heptamolibdato de amonio tetrahidratado: Disolver 25 g deheptamolibdato de amonio tetrahidratado en 75 mL de agua. Con mucho cuidadoagregar 280 mL de cido sulfrico a 400 mL de agua, enfriar y adicionar alheptamolibdato de amonio tetrahidratado y diluir a 1 L.


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4.3 Mtodo vanadomolibdofosfrico:

1. Carbn activado libre de fosfatos2. cido clorhdrico concentrado (HCl)3. Metavanadato de amonio (NH4VO3)

4. Hidrxido de sodio (NaOH)5. cido clorhdrico (1:1). Agregar cuidadosamente 100 mL de cido clorhdricoconcentrado a 100 mL de agua, lentamente.La concentracin del cido no es crtica para la determinacin, pero serecomienda una6. Disolucin A. Pesar aproximadamente y con precisin 25,0 g de heptamolibdatode amonio), y diluir en 300 mL de agua.7. Disolucin B. Pesar aproximadamente y con precisin 1,25 g de metavanadatode amonio y diluir en 300 mL de agua destilada, calentar hasta ebullicin. Enfriar y

aadir 330 mL de cido clorhdrico concentrado. Dejar enfriar a temperaturaambiente.8. Disolucin reactivo vanado-molibdato: Adicionar la disolucin A a la disolucinB, mezclar y aforar a 1 L.9. Disolucin de hidrxido de sodio (1N). Pesar aproximadamente y con precisin40 g de hidrxido de sodio y diluir con 500 mL de agua, agitar y dejar enfriar,agregar ms agua y en cada ocasin agitar y dejar enfriar hasta que el volumenfinal sea de 1 L.

Equipo

1. Balanza analtica con precisin de 0,1 mg.2. Placa de calentamiento: Una superficie de 30 cm X 50 cm es adecuada.3. Autoclave: Puede utilizarse un autoclave capaz de alcanzar de 98 kPa a137 kPa en lugar de la placa de calentamiento.4. Espectrofotmetro: Para utilizarse de 190 nm a 900 nm y equipado con celda de1 cm de paso ptico de luz.

Materiales

Embudo de filtracin y papel filtro cualitativo Whatman 42 o equivalente.


1. Tomar un mnimo de 500 mL de muestra en envases de plstico. Puedenutilizarse muestras compuestas o simples.


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2. Si la muestra solamente es analizada para determinar la forma de fsforodisuelto, filtrar la muestra inmediatamente despus de la colecta a travs de unpapel filtro de poro fino.3. Conservar en refrigeracin a 4C.4. El tiempo mximo de almacenamiento previo al anlisis es de 28 das.

PROCEDIMIENTO

Digestin de la muestra

Preparacin de la muestra por medio de la digestin con persulfato:

1. Usar 50 mL o la porcin adecuada de la muestra bien mezclada. Adicionar unagota de fenolftalena. Si aparece un color rojo, adicionar gota a gota cido sulfrico

hasta que desaparezca el color. Posteriormente adicionar 1 mL de disolucin decido fuerte y 0,4 g de persulfato de amonio o 0,5 g persulfato de potasio.

2. Calentar hasta que rompa la ebullicin y mantenerla sobre la placa decalentamiento, por 30 min o 40 min o hasta que el volumen final alcanzado sea de10 mL. Los compuestos organofosforados pueden requerir de 1,5 h a 2 h para sudigestin completa. Enfriar, diluir a 30 mL con agua, adicionar una gota defenolftalena, y neutralizar hasta desvanecer a un color rosa plido con ladisolucin de hidrxido de sodio. Alternativamente, calentar por 30 min en unautoclave u olla de presin de 98 kPa a 137 kPa. Enfriar, aadir una gota de

fenolftalena y neutralizar hasta desvanecer a un color rosa plido con ladisolucin de hidrxido de sodio. Aforar a 100 mL con agua destilada. En algunasmuestras puede formarse un precipitado en esta fase, pero no se debe filtrar.Mezclar bien para cualquier subdivisin de la muestra. El precipitado(posiblemente de fosfato de calcio se redisuelve bajo condiciones cidas de laprueba colorimtrica para determinar fsforo.

Mtodo cloruro estanoso

1 Ajustar el pH de la muestra. A 100 mL de muestra que contenga no ms de 200g P y libre de color y turbidez adicionar 1 gota de fenolftalena. Si la disolucintiene un color rosado, adicionar unas cuantas gotas de disolucin de cido fuertepara neutralizar.

2 Desarrollo del color en la muestra. Adicionar, agitando fuertemente despus decada adicin, 4,0 mL de disolucin de heptamolibdato de amonio tetrahidratado y0,5 mL (10 gotas) de disolucin de cloruro estanoso. La intensidad del color


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depende de la temperatura ambiente de la disolucin final, incrementndose staalrededor de 1 % por cada grado centigrado ms de temperatura ambiente. Por loque es importante realizar las mediciones a la misma temperatura.

3. Medicin de color. El tiempo en el cual se realiza la medicin es importante

para tener un buen resultado, la medicin debe de efectuarse despus de 10 minde haber desarrollado el color, pero antes de 12 min, utilizar el mismo intervalo detiempo para todas las mediciones, medir la intensidad de colorespectrofotomtricamente a 690 nm y comparar contra la curva de calibracin,utilizar como blanco agua.

NOTA.- Es necesario tener un blanco de agua y un blanco de reactivos. Debido aque el color se desarrolla primero de manera progresiva y posteriormente sedesvanece, mantener siempre condiciones iguales de tiempos de desarrollo de

color y medicin para muestras y estndares. Preparar al menos un estndar porcada lote de muestras o una cada da que se realiza la prueba. La curva decalibracin es lineal en un intervalo de concentraciones de 0,3 mg/L a 2,0 mg/L.

3 Mtodo cido vanadomolibdofosfrico

1. Ajustar el pH de la muestra. Si la muestra tiene un pH mayor a 10, adicionar unagota de fenolftalena a 50,0 mL de la muestra y despus eliminar el color rosa conuna disolucin de cido clorhdrico (1:1), antes de diluir a 100 mL.

2. Remocin del color de las muestras. Remover el exceso de color en lasmuestras por medio de la adicin de 200 mg de carbn activado a una muestra de50 mL en un matraz Erlenmeyer y agitar por 5 min, posteriormente filtrar pararemover el carbn activado. Comprobar los fosfatos de cada lote de carbnactivado.3. Desarrollo del color en la muestra. Tomar una alcuota que contenga de 0,05mg a 1,0 mg de fsforo, en un matraz volumtrico de 50 mL. Aadir 10 mL de ladisolucin reactivo vanado-molibdato y diluir hasta la marca con agua. Preparar unblanco usando una cantidad de agua equivalente a la alcuota de la muestra.Despus de 10 min o ms, medir la absorbancia de una muestra contra un blancoa una longitud de onda de 400 nm a 490 nm, dependiendo de la sensibilidaddeseada. Los intervalos de concentracin para diferentes longitudes de onda son:

TABLA 1.- Longitud de onda


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El color es estable por das y su intensidad no se ve afectada por las variacionesde la temperatura ambiente.

CLCULOS

1. Calcular la concentracin de la muestra por medio de la ecuacin obtenida de lacurva de calibracin y que es representada por la siguiente ecuacin:

bmXY

donde:m es la pendiente;b es la ordenada al origen;Y es la absorbancia, yX es la concentracin (mg P/L).

2. En caso de haber dilucin de la muestra a lo largo del desarrollo del mtodo(digestin y alcuota de muestra), utilizar la siguiente ecuacin:mg P/L = concentracin x Factor de dilucin3. Reportar los resultados en mg P/L con dos dcimas, con la precisincorrespondiente.


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ANLISIS DE AGUA - DETERMINACIN DE CLORO TOTALMTODO

IODOMTRICO NMX-AA-100-SCFI-2008


Esta norma mexicana especifica un mtodo de tipo volumtrico para ladeterminacin del cloro total en agua.El mtodo es aplicable a concentraciones, expresadas en cloro (Cl2),comprendidas entre de 0.71 mg/L a 15 mg/L.

REACTIVOSDurante el anlisis, se deben utilizar reactivos de calidad analtica y el aguaespecificada en el apartado.

1. Agua, exenta de cloro y de sustancias reductoras.2. Ioduro de potasio (KI), cristales.3. cido fosfrico, disolucin, c (H3PO4) 0.87 mol/L.Se disuelven en agua 64 mL de cido fosfrico ( = 1.69 g/mL), se deja enfriar yse afora a 1 000 mL.4. Iodato de potasio, disolucin patrn de referencia, c (1/6 KIO3) = 10 mmol/L.Se pesan, con una precisin de 1 mg, 0,360 g de iodato de potasio seco. Sedisuelven en agua y se afora a 1 000 mL en un matraz aforado.5. Tiosulfato de sodio, disolucin valorada, c (Na2S2O3 .5H2O) 10 mmol/L.

5.1. Preparacin. Se disuelven aproximadamente 2,48 g de tiosulfato de sodio enaproximadamente 250 mL de agua y se afora en un matraz aforado de 1 000 mL.5.2. Valoracin. Se valora la disolucin diariamente o inmediatamente antes deusarse de la manera siguiente:Tomar 200 mL de agua en un matraz Erlenmeyer de 500 mL. Se aadeaproximadamente 1 g de ioduro de potasio y se agregan por medio de una pipeta,10.0 mL de disolucin de tiosulfato de sodio. Para su valoracin, se adicionan 2mL de cido fosfrico y 1 mL de disolucin de almidn. Se titula inmediatamentecon la disolucin patrn de referencia de iodato de potasio hasta la aparicin de uncolor azul que persista durante al menos 30 s. Se anota el volumen de iodatoconsumido.La concentracin obtenida, c1, expresada en milimoles por litro, de la disolucinde tiosulfato de sodio, que viene dada por la ecuacin:


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DondeC2 es la concentracin, expresada en milimoles por litro, de la disolucin patrn dereferencia de iodato de potasio, [c (1/6 KIO3) = 10 mmol/L];V1 es el volumen, en mililitros, de la disolucin de tiosulfato de sodio utilizado parala valoracin (V1 = 10 mL)V2 es el volumen, en mililitros, de la disolucin patrn de iodato de referenciautilizado en la valoracin.6. Almidn, disolucin de 5 g/L o indicador comercial de concentracin similar.Disolver 0,5 g de almidn agregndolo lentamente y con agitacin en 100 mL deagua hirviendo, Preservar con 125 mg de acido saliclico, 400 mg de cloruro dezinc o una combinacin de 400 mg de propionato de sodio y 200 mg de azida desodio.

EQUIPOS Y MATERIALES

Material de uso habitual en laboratorios yBureta, provista de punta fina que permita la dosificacin de aproximadamente 30gotas/mL, capaz de medir hasta 25 mL y graduada en divisiones de 0.1 mL.

MUESTRAS Y MUESTREOMantener las muestras almacenadas en la oscuridad.

PROCEDIMIENTO1. Volumen de muestraSe inicia la determinacin inmediatamente despus de la toma de muestras. En

todo momento debe evitarse la exposicin a la luz, la agitacin y el calor.Se toma un volumen de muestra no superior a 200 mL y que contengan no ms de0.21 mmol/L (15 mg/L) de cloro total. Si la concentracin de cloro total que seespera sobrepasa este valor, se diluye la muestra con agua y se toma una porcinde muestra cuyo volumen no exceda los 200 mL.

2. DeterminacinSe introduce la muestra (1) en un matraz Erlenmeyer de 500 mL. Se adicionan, eneste orden, aproximadamente 1 g de ioduro de potasio, 2 mL de cido fosfrico y,con ayuda de una pipeta, 10,0 mL (V4) de la disolucin patrn valorada detiosulfato de sodio y a continuacin 1 mL de la disolucin de almidn.PRECAUCION - Debe observarse estrictamente el orden en el que se aaden losreactivos, de lo contrario pueden producirse reacciones no estequiomtricas delhipoclorito con el tiosulfato de sodio.Se valora inmediatamente con la disolucin patrn de referencia de iodato depotasio hasta la aparicin de un color azul que persista al menos durante 30 s. Seanota el volumen (V3) de disolucin de iodato de potasio consumido.


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EXPRESIN DE RESULTADOS

1. Mtodo de clculoLa concentracin de cloro total, c (Cl2), expresada en milimoles por litro, vienedada por la ecuacin

() c1, es la concentracin obtenida de la disolucin patrn valorada de tiosulfato desodio, expresada en milimoles por litro;c2 viene definida en el apartado 5.2;V0 es el volumen de la muestra, en mililitros, antes de la dilucin (si la hubo);V3 es el volumen, en mililitros, de la disolucin patrn de referencia de iodato depotasio utilizado en la valoracin;

V4 es el volumen, en mililitros, de la disolucin patrn valorada de tiosulfato desodio utilizado en la valoracin efectuada conforme a 8.2 (V4 = 10 mL).

La concentracin en cantidad de materia puede convertirse en concentracinmsica, (Cl2), expresada en miligramos por litro, por medio de la ecuacin:Donde () ( )M es la masa molecular, expresada en gramos por mol, del cloro (M = 70.91g/mol).


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CALIDAD DEL AGUA DETERMINACION DEL NUMERO MAS

PROBABLE (NMP) DE COLIFORMES TOTALES, COLIFORMES

FECALES (TERMOTOLERANTES) Y Escherichia coli PRESUNTIVA,

(NMX-AA-042-1987)

El mtodo se basa en la inoculacin de alcuotas de la muestra, diluida o sin diluir,en una serie de tubos de un medio de cultivo lquido conteniendo lactosa. Lostubos se examinan a las 24 y 48 horas de incubacin de 35 o 37C. Cada uno delos que muestran turbidez con produccin de gas se resiembra en un medioconfirmativo ms selectivo y, cuando se busca E. coli presuntiva, en un medio enel que se pueda demostrar la produccin de indel.

Mediante tablas estadsticas se lleva acabo l clculo del nmero ms probable(NMP) de organismos coliformes, organismos coliformes termo tolerantes y E.Coli que pueda estar presente en 100 cm 3 de muestra, a partir de los nmeros delos tubos que dan resultados confirmativos positivos.

PRESERVACIN DE LA MUESTRA.

El anlisis bacteriolgico de la muestra debe practicarse inmediatamente despusde su recoleccin. Es por ello que se recomienda que de no efectuarse as elanlisis, se inicie dentro de las dos horas prximas a la recoleccin de la muestray en ningn caso, este lapso debe exceder de 24 horas para agua potable y de 6horas para otros tipos de agua para que sea vlido el resultado del anlisis.Durante el perodo que transcurra del muestreo al anlisis, se debe conservar lamuestra a 4C, con objeto de inhibir la actividad bacteriana para no obtenerresultados falsos o dudosos.

APARATOS Y EQUIPO

Aparte de los equipos que se suministran estriles, el material de vidrio y el restodel equipo deben esterilizarse.

Incubadora capaz de mantener una temperatura de 35 + 1C o 37 1C y 44 0.5C.

Estufa capaz de mantener una temperatura de 180 a 200C.

Autoclave u olla de presin o con manmetro.

Potencimetro.

Balanza analtica con sensibilidad de 0.0001 g.

Pipetas serolgicas.


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Pipeteros de aluminio o acero inoxidable; se pueden sustituir con papel aluminio opapel Kraft.

Tubos de ensaye de cristal refractario de 15mm x 150 mm con tapn de baquelita,aluminio o algodn.

Frascos muestreadores, de vidrio resistente o cristal refractario de 125 cm contapn de cristal esmerilado.

Tubos de fermentacin (Durham).

Asas de inoculacin.

Material comn de laboratorio.

REACTIVOS.

Los reactivos que a continuacin se mencionan, deben ser grado analtico amenos que se indique otra cosa. Cuando se especifique el uso de agua se debeentender agua destilada in-vitro o agua des-ionizada libre de sustancias quepueden inhibir el crecimiento bacteriano en las condiciones de prueba.

Caldo lauriltriptosa (medio selectivo)

Debido a que se trata de un medio de doble concentracin, se debern aadir 71.2g del polvo del medio en un litro de agua , procediendo despus a esterilizar unavez distribuido el medio en tubos.

Caldo de lactosa

Debido a que se trata de un medio de doble concentracin, se debern aadir 26 gdel polvo del medio en un litro de agua, procediendo despus a esterilizar una vezdistribuido el medio en tubos.

Caldo lactosa verde bilis brillante (medio confirmativo)

Se debern aadir 40 g del polvo del medio en un litro de agua, procediendodespus a esterilizar una vez distribuido 10 ml del medio en tubos.

Medio EC

Se debern aadir 37 g del polvo del medio en un litro de agua, procediendodespus a esterilizar una vez distribuido 10 ml del medio en tubos.

Agua de triptona:

Triptona 20.0gCloruro de sodio (NaCl) 5.0g


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Agua para llevar a 1 L

Disolver los componentes en agua y ajustar a pH. 7.5 distribuir en volmenes de5mlY colocar en autoclave a 115C durante 10 min.

Reactivo de Kovacs para indol:

Reactivo de oxidasa para la prueba de oxidasa:

Clorhidrato de tetrametil-p-fenilendiamina 0.1g para10 ml

Este reactivo no es estable y debe prepararse para usarse en pequeascantidades cada vez que sea necesario.

Solucin amortiguadora de fosfato:

Fosfato monobsico de potasio (KH2PO4)0.0425gCloruro de magnesio(MgCl2) 0.19 g

Agua para llevar a 1 L

PREPARACIN DEL MATERIAL.

Para la preparacin de los reactivos, las condiciones de esterilizacin deben ser 121Cy 0.098066 Mpa (1 kg/cm) de presin manomtrica durante 15 minutos. Los tubos defermentacin (Durham) no deben contener burbujas de aire despus de laesterilizacin.

PROCEDIMIENTO

Pruebas presuntivas.

Preparacin de la muestra e inoculacin del medio en uno de los mediosselectivos.

Antes del examen, mezclar perfectamente la muestra agitndola vigorosamentepara lograr una distribucin uniforme de los microorganismos y, dependiendo de lanaturaleza del agua y el contenido bacteriano esperado, hacer las dilucionesnecesarias en esta etapa.

Utilizar series que constan de por lo menos tres diluciones: 10 ml, 1ml bien1mly 0.01ml.Por cada dilucin debe haber 3 5 tubos. Inocular con un volumen mnimo de 5 mlde muestra.


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Incubar los tubos inoculados de 35Ca 38C durante 48horas.

Examen de los tubos

Examinar los cultivos de los tubos despus de un perodo de incubacin de 18 a 24horas y considerar como resultados positivos a aquellos que muestren turbidez debidaal crecimiento bacteriano y formacin de gas en los tubos internos invertidos(Durham) junto con produccin de cido si el medio de aislamiento contiene unindicador de pH. Reincubar aquellos tubos que no muestran alguno o todos estoscambios y examinarlos nuevamente para detectar reaccionan positivas a las 48 horas.

Pruebas confirmativas.

Resembrar a partir de cada tubo de medio de aislamiento que muestro un resultadopositivo en uno o ms tubos de medio confirmativo para detectar la produccin de gase indol.

Para confirmar la presencia de organismos coliformes, incubar un tubo de positivo deCaldo

Lactosa Verde Brillante o Caldo EC a 37C y examinarlo para ver si hay produccin

de gas dentro de un perodo de 48 horas.

Para confirmar la presencia de organismos coliformes termotolerantes, incubar otrotubo con Caldo Bilis Lactosa Verde Brillante o Caldo EC a 44C durante 24horas paraver si hay produccin de gas.

Para confirmar la presencia de E. coli. Presuntiva, incubar un tubo con agua detriptonapara detectar la formacin de indol a 44C durante 24 horas. Despus aadir de 0.2 a0.3 ml de reactivo de Kovacs.

El desarrollo de un anillo de color rojo despus de agitar suavemente denota lapresencia de indol.

NOTA: La deteccin de E. coli presuntiva se considera una evidencia satisfactoria decontaminacin fecal. Sin embargo, pueden efectuarse mayores pruebas para laconfirmacin de E. coli si se considera necesario.

Prueba de oxidasa

Llevar a cabo la prueba con subcultivos puros de los organismos fermentadoresde lactosa, crecidos en medio de agar nutritivo considerar concentracin sencilla ysimple, como sigue:


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-Colocar de 2 a 3 gotas de reactivo de oxidasa recientemente preparado en unpapel filtro estril en una caja de Petri.

-Con una varilla de vidrio colocar parte del cultivo en el papel filtro preparado.

-Considerar la aparicin de color azul marino purpreo en un lapso de 10segundos como una reaccin positiva.

CALCULOS

A partir del nmero de tubos que dan reacciones positivas en los medios deaislamiento y confirmativo, calcular por referencia a las tablas estadsticas (vertabla) el nmero ms probable de organismos coliformes, organismos coliformestermo tolerantes y E. coli presuntiva en 100 cm3 de la muestra. Cuando seemplean de dilucin para hacerlo equivalente.

En caso de no encontrar en las tablas la combinacin de tubos adecuada, emplearpara los clculos la siguiente ecuacin:

Indice del NMP y lmite confiable de 95% para varias combinaciones de resultadospositivos y negativos cuando se usan: 3 tubos con porciones de 1 cm3 y 3 conporciones de 0.1 cm3.


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REPORTE DE LA PRUEBA

El reporte de la prueba debe hacer referencia a esta norma y dar toda lainformacinrelevante, incluyendo

a.. Todos los detalles necesarios para la identificacin completa de la muestra.

b. La tcnica y medio de cultivo empleados.

c. El tiempo, temperatura y condiciones de la incubacin.

d. Cualquier suceso particular observado en el curso del anlisis y cualquieroperacinno especificada en el mtodo o considerada opcional que pueda haber influido enlos resultados.


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NMX-AA-005-SCFI-2013ANLISIS DE AGUA MEDICIN DE GRASAS Y ACEITES

RECUPERABLES EN AGUAS NATURALES, RESIDUALES YRESIDUALES TRATADAS

Este mtodo se basa en la adsorcin de grasas y aceites en tierra de diatomeas,los cuales son extrados en un Soxhlet empleando hexano como disolvente. Unavez terminada la extraccin se evapora el hexano y se pesa el residuo que haquedado en el recipiente; siendo este valor el contenido de grasas y aceites.

REACTIVOS Y PATRONES

Todos los productos qumicos usados en este mtodo deben ser grado reactivo, amenos que se indique otro grado.

Cuando se indique agua debe entenderse agua que cumpla con las siguientescaractersticas: a) resistividad, megohm-cm a 25C: 0,2 mnimo; b) Conductividad,S/cm a 25C: 5,0 mximo y c) pH: 5,0 a 8,0.

- cido Clorhdrico concentrado(HCl);- Hexano (C6H14);- cido Sulfrico concentrado (H2SO4);- Suspensin de tierra de diatomeas-slice o tierra Slice de aproximadamente10 g/L de agua;- cido Clorhdrico (1:1): Mezclar volmenes iguales de Acido Clorhdrico

concentrado y agua.- Acido Sulfrico (1:1): Mezclar volmenes iguales de Acido Sulfrico concentradoy agua,- Aceite de referencia: Pesar aproximadamente y con precisin la cantidadrequerida de una mezcla de aceite de referencia (mezcla de mineral SAE20 yvegetal mixto) acorde a la cantidad esperada de grasas y aceites en la muestra yagregar la mezcla a 1 L de agua.

MATERIALES

- Cartuchos de extraccin de celulosa para Soxhlet;

- Papel filtro con tamao de poro fino;- Embudo Bchner, y Desecador.

EQUIPO

- Equipo de extraccin Soxhlet;- Bomba de vaco u otra fuente de vaco;- Estufa elctrica capaz de mantener 103C;


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- Estufa elctrica de vaco capaz de mantener 80C;- Balanza analtica con precisin de 0,1 mg, y- Equipo de filtracin a vaco.


De la superficie del cuerpo de agua colectar un volumen de aproximadamente 1 Lde muestra en un frasco de vidrio de boca ancha y tapa de cubierta depolitetrafluoroetileno, poliamida, PVC polietileno o metlica. Ya que pueden ocurrirprdidas de grasas y aceites por el equipo de muestreo, no se permite la colectade una muestra compuesta.

Dado que la muestra entera se ocupa en esta prueba, no se pueden tomaralcuotas de la muestra para realizar otro tipo de anlisis.

En caso de existir la presencia de aceites emulsionados en el agua a muestrear, la

muestra se toma de 20 cm a 30 cm de profundidad, cuando no haya muchaturbulencia para asegurar una mayor representatividad.

La muestra debe preservarse por acidificacin con cido clorhdrico 1:1 a un valorde pH menor a 2 y refrigerarlas a 4C.El tiempo mximo de almacenamientoprevio al anlisis es de 28 das.

PROCEDIMIENTO

Medir el pH de las muestras el cual debe ser menor de 2, si no tiene este valoracidifique con cido clorhdrico 1:1 cido sulfrico 1:1.

Para muestras con un pH menor de 8 unidades generalmente es suficiente conadicionar 5 ml de cido clorhdrico 1:1 2 mL de cido sulfrico 1:1.

Preparar los matraces de extraccin introducindolos a la estufa a unatemperatura de 103C - 105C a peso constante, enfriar en desecador y pesarlos.

Preparar el material filtrante colocando un papel filtro en el embudo Bchner,colocar el embudo en un matraz Kitazato y agregar 100 mL de la suspensin detierra de diatomeas-slice sobre el filtro, aplicar vaco y lavar con 100 mL de agua.

Transferir el total de la muestra acidificada al embudo Bchner preparadoaplicando vaco hasta que cese el paso de agua. Medir el volumen de la muestra.

Con ayuda de unas pinzas, transferir el material filtrante a un cartucho deextraccin.

Limpiar las paredes internas del embudo y el frasco contenedor de la muestra, ascomo la parte interna de la tapa del frasco con trozos de papel filtro previamente


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impregnados de disolvente (hexano) tener cuidado en remover la pelcula de grasay los slidos impregnados sobre las paredes; colocar los trozos de papel en elmismo cartucho.

Secar el cartucho en una estufa a 103C - 105C por un perodo de 30 min.

Transcurrido este perodo colocar en el equipo Soxhlet.Adicionar el volumen adecuado de hexano al matraz de extraccin previamentepuesto a peso constante y preparar el equipo Soxhlet. Evitar tocar con las manosel cartucho y el matraz de extraccin, para ello utilizar pinzas guantes de ltex.

Colocar el equipo de extraccin sobre la parrilla de calentamiento, controlar latemperatura del reflujo y extraer a una velocidad de 20 ciclos/hora durante unperodo de 4 h.

Una vez terminada la extraccin retirar el matraz del equipo Soxhlet, y evaporar el

disolvente.El matraz de extraccin libre de disolvente se coloca en el desecador hasta quealcance la temperatura ambiente.

Pesar el matraz de extraccin y determinar la concentracin de grasas y aceitesrecuperables.

Analizar un blanco de reactivo bajo las mismas condiciones de la muestra.

CLCULOS

Calcular las grasas y aceites recuperables (G y A) en la muestra usando lasiguiente ecuacin:

G y A (mg/L)= (A - B) / V

Donde:

A es el peso final del matraz de extraccin (mg);B es el peso inicial del matraz de extraccin (mg), yV es el volumen de la muestra, en litros.

Restar al resultado obtenido de la muestra el valor del blanco de reactivo.

Reportar los resultados del anlisis en mg/L.


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NMX-AA-113-SCFI-2012ANLISIS DE AGUA MEDICIN DEL NMERO DEHUEVOS DE HELMINTO EN AGUAS RESIDUALES Y

RESIDUALES TRATADAS POR OBSERVACIN

MICROSCPICA

Esta norma mexicana establece el mtodo para la deteccin y enumeracin dehuevos de helminto en aguas residuales y lodos, con el fin de evaluar la calidaddel agua y la eficiencia de los sistemas de tratamiento de la misma.

Esta norma mexicana es aplicable para la evaluacin de la calidad del aguaresidual cruda y tratada.

MUESTREO

El muestreo constituye una parte integral y fundamental de cualquier programa deevaluacin de la calidad del agua, por lo cual, ste debe efectuarse como semenciona a continuacin y de acuerdo a lo establecido en las normas mexicanas .

Preparar garrafones de plstico inerte de 8 L, previamente desinfectados conhipoclorito de sodio al 10 % (NaClO).

Lavarlos con agua potable a chorro y enjuagarlos varias veces con aguadestilada.

Se toman muestras de 5 L (volumen total), en estos garrafones de plstico inerte,los cuales deben ser cerrados y sellados.

REACTIVOS Y MATERIALES

Reactivos (grado analtico)

- cido sulfrico (H2SO4);- Alcohol etlico (C2H5OH);- Agua destilada;- Cloruro de sodio (NaCl);

- ter etlico;- Formaldehdo al 4 %;- Hipoclorito de sodio (NaClO) o de calcio aproximadamente al 6 % (no aplicagrado analtico), y- Sulfato de zinc heptahidratado (ZnSO).4.7H2O


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Materiales

- Aplicadores de madera;- Barras magnticas;- Bulbo de goma;

- Esptula;- Garrafones de plstico inerte con paredes lisas y transparentes de 5 Ldecapacidad;- Gradillas para tubos de centrfuga de 50 ml;- Guantes de ltex;- Mascarilla contra gases y vapores;- Matraz Kitazato;- Pipetas de 10 ml de plstico;- Probetas graduadas de 50 ml y de 1 000 ml;- Recipientes de plstico inerte con paredes lisas y transparentes de 1 000 ml a2 000 ml de capacidad;- Tamiz de 150-170 mde poro;- Tubos de centrfuga de 200 ml, 450 ml o de mayor volumen segn sea lacapacidad mxima de la centrfuga;- Vasos de precipitados de 1 000 ml.- celda de Sedgwich-Rafter o cmara de conteo de Doncaster ocmara de Neubauer o alguna cmara de conteo celularequivalente, y- densmetro (hidrmetro), con intervalo de medicin de 1,0 g/mL a1,4 g/mL; o picnmetro.

APARATOS

- Agitador de tubos, con control de velocidad y adaptable a diversos tubos;- Balanza granataria;- Balanza analtica;- Bomba de vaco con control de velocidad de succin;- Campana de extraccin;;- Centrfuga. Capaz de mantener los intervalos de operacin de 1 000 r/min a3 000 r/min o su equivalente eng;- Incubadora;- Microscopio ptico. Equipado para hacer iluminacin campo claro (Kheler),con

aumento de 10 a 100x y platina mvil (opcional);- Parrilla con agitacin magntica, y- Refrigerador.

PREPARACIN Y ACONDICIONAMIENTO DE LA MUESTRA

Preparar los garrafones desinfectados previamente con una de hipoclorito desodio o de calcio comercial aproximadamente al 6 % (NaClO Ca(ClO)2).


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Lavar los garrafones de plstico rgido con agua y enjuagarlos varias veces conagua destilada.Se toman muestras de aproximadamente 5 L, en estos garrafones, los cualesdeben tener tapa hermtica.Las muestras deben mantenerse a una temperatura de 4C 2C hasta su llegada

al laboratorio.La muestra debe procesarse dentro de las 48 h despus de su toma, o en casocontrario, debe fijarse con 10 ml de formaldehdo al 4 %, o bien, preservarse enrefrigeracin para realizar su anlisis antes de 2 meses.

PROCEDIMIENTO

Preparacin de soluciones

Disolucin de sulfato de zinc (ZnSO) 4 con gravedad especfica de 1,3Disolver 800 g de sulfato de zinc heptahidratado (ZnSO4.7HO) en 1 000 ml deagua destilada; mezclar en la parrilla magntica hasta homogeneizar totalmente.Medir ladensidad con el densmetro. Ajustar la densidad a 1,3 agregando sulfato de zinc oagua destilada, segn sea el caso.

Disolucin de alcohol-cido.Homogeneizar 650 ml de cido sulfrico (H2SO4) 0,1 N, con 350 ml de alcoholetlico. Almacenar la solucin en un recipiente hermtico.

Durante el procesado de la muestra se debe utilizar lentes de seguridad,guantes de ltex y cubre boca para evitar cualquier riesgo de infeccin.

Se debe lavar y desinfectar el rea de trabajo, as como el material utilizadopor el analista, antes y despus del ensayo.

Cuando se efecte la agitacin de las soluciones con ter, sta se debe realizar ensitios ventilados o dentro de la campana de extraccin, y considerar suinflamabilidad. Evitar el contacto con los ojos, piel o ropa, ya que es un reactivosumamente txico.

Concentracin y separacin de los huevos de helminto

La recuperacin de los huevos de helminto de la muestra se debe realizarefectuandolos siguientes pasos:

a) Dejar reposar la muestra al menos 3 h o toda la noche o centrifugar a 400 gde3 min a 5 min.

b) Aspirar por vaco o por decantacin lenta sin agitar cuidando siempre laintegridad del sedimento, desechar el sobrenadante.


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Filtrar el sedimento en el tamiz de 150-170 m de poro.Lavar el tamiz con 5 L de agua (potable o destilada), y recuperar el agua delavado junto con el sedimento filtrado.

c) Colocar el filtrado y el agua de enjuague en el garrafn donde originalmente se

encontraba la muestra o en los recipientes utilizados en la centrifugacin.d) Dejar reposar la muestra al menos 3 h o centrifugar a 400 gde 3 min a 5 min.e) Aspirar con cuidado el sobrenadante al mximo y desecharlo.Depositar el sedimento en los recipientes para la centrfuga.Enjuagar 3 veces el garrafn perfectamente con poca agua potable o destilada, ycolocar en los recipientes para centrifugacin.

f) Centrifugar a 400 gde 3 min a 5 min.

g) Decantar nuevamente el sobrenadante por vaco. Asegurarse que en el fondo

del recipiente exista el paquete slido; en caso contrario, centrifugar nuevamente.Resuspender el paquete en 150 ml de la solucin de sulfato de zinc (ZnSO4).Homogeneizar el paquete con el agitador de tubos o con un aplicador de madera.

h) Centrifugar a 1000 g de 3 min a 5 min, y recuperar el sobrenadantevertindolo en un recipiente de plstico de 2 000 ml.Diluir cuando menos en 1 000 ml de agua destilada, y dejar sedimentar almenos 3 h, o centrifugar a 400 gde 3 min a 5 min.

i) Decantar o aspirar por vaco con cuidado todo el sobrenadante, y resuspenderel paquete slido por agitacin, utilizando poca agua destilada.

Verter la suspensin resultante en un tubo de centrfuga de 200 ml, incluyendo elagua de enjuague del recipiente y centrifugar a 400 gdurante 3 min.

j) Decantar o aspirar por vacio el sobrenadante y resuspender el paquete slidocon agua destilada en un tubo de 50 ml y centrifugar a 480 gdurante 3 min.

k) Decantar o aspirar por vacio el sobrenadante por vaco y resuspender elpaquete slido en 15 ml de la solucin de alcohol-cido por medio de un agitadorde tubos, y agregar 10 ml de acetato de etilo.

Agitar suavemente y de vez en cuando destapar cuidadosamente los tubos paradejar escapar el gas que se desprenda. Por seguridad realizar en sitios ventilados

utilizando la mascarilla o en la campana de extraccin.Centrifugar una ltima vez a 660gdurante 3 min.

m) Aspirar el sobrenadante, dejando menos de 1 ml del mismo y evitando laprdida del paquete slido; homogeneizar el paquete, y proceder a lacuantificacin. Por seguridad realizar en sitios ventilados utilizando la mascarilla oen la campana de extraccin.

Cuantificacin de los huevos de helminto


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a) Para evitar la superposicin de las estructuras y de residuos no eliminados,repartir la muestra en volmenes de 0,1 ml a 1,0 ml, con el fin de facilitar lalectura.

b) Distribuir cada uno en una celda de Sedgwich-Rafter, o bien, en una cmara de

conteo de Doncaster o cmara Neubauer.c) Identificar visualmente una a una las estructuras, anotando los generos

identificadas con ayuda de la figura 1.

EXPRESIN DE RESULTADOS

Clculos

Para determinar las revoluciones por minuto (rev/min) de la centrifuga, se utiliza lafrmula siguiente:

donde:

ges la fuerza relativa de la centrifugacin;K es laconstante cuyo valor es 89,456, yr es el radio de la centrifuga en centmetros (cm).

La frmula para calcularges la siguiente:

() Expresar el resultado en nmero de huevecillos por litro, tomando enconsideracin la expresin en clculos, o bien expresar el nmero de huevoscontados y el volumen analizado:

donde:

H es el nmero de huevos ledos en la muestra;HL es el nmero de huevos por litro, y5 es el volumen de la muestra.


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Interferencias

La sobreposicin de estructuras y/o detritus no eliminado en el sedimento, puededificultar su lectura. En tal caso, es importante dividir el volumen en las alcuotasque se consideren necesarias. La falta de experiencia en la identificacin de

especies es tambin un elemento decisivo en el conteo y sobreconteo.

FIGURA 1.- Especies de huevos de helminto

INFORME DE LA PRUEBA

El informe de la prueba debe incluir lo siguiente:- Todos los detalles necesarios para la identificacin completa de la muestra;

- Los resultados, expresados de acuerdo con lo establecido en el punto 10, y- Cualquier suceso particular observado durante el curso del anlisis, as comocualquier operacin no especificada en el mtodo, o considerada opcional, quepueda haber influido en los resultados.


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Materia Flotante

Todo aquel material que quede retenido en una malla entre 2,8 mm y 3,3 mm.deabertura.

RECOLECCIN DE MUESTRAS

Debe tomarse un mnimo de 3 L de muestra, la cual debe ser simple y tomadadirectamente de la descarga. El procedimiento debe realizarse en campo, lamuestra no debe preservarse.

MATERIALES

- Malla de acero inoxidable con abertura entre 2,8 mm y 3,3 mm;

- Recipiente de boca ancha no menor de 7 cm de dimetro, con un volumen que seencuentre entre 3 L y 5 L;

- Agitador de vidrio con gendarme, y

- Esptula.

PROCEDIMIENTO

Verter aproximadamente 3/4 partes de la muestra a travs de la malla, teniendo cuidado

de que la materia flotante que sobrenada, quede retenida en dicha malla.

Arrastrar con agitador de vidrio una esptula hacia la malla toda aquella materia flotanteque quedara sobre la superficie de la muestra que se est vertiendo o aquella adherida alas paredes del recipiente.

Interpretacin

Inmediatamente despus de filtrar la muestra, se procede al examen de la malla.

El informe depende de la presencia o ausencia de materia flotante retenida en la malla.Reportar como ausencia de materia flotante, si al examinar la malla no se observa asimple vista ninguna partcula retenida. Reportar como presencia de materia flotante, si alrevisar visualmente la malla se encuentran partculas retenidas.

NMX-AA-006-SCFI-2010

DETERMINACIN DE MATERIA FLOTANTE EN AGURESIDUALES Y RESIDUALES TRATADAS.


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NMX-AA-028-SCFI-2001DETERMINACIN DE LA DEMANDA BIOQUMICA DE OXGENOEN AGUAS NATURALES, RESIDUALES (DBO) Y RESIDUALES

TRATADAS


Esta norma mexicana establece el mtodo de anlisis para la determinacin de lademanda bioqumica de oxgeno (DBO) en aguas naturales, residuales yresiduales tratadas.

NOTA. Se determina la cantidad de oxgeno utilizada por una poblacinmicrobiana heterognea para transformar la materia orgnica, en un periodo deincubacin de 5 das a 20C.

REACTIVOS Y PATRONES

Todos los productos qumicos usados en este mtodo deben ser grado reactivo, amenos que se indique otro grado.

Agua: Debe entenderse agua que cumpla con las siguientes caractersticas:

a) Resistividad, megohm-cm a 25C: 0,2 min.;b) Conductividad, S/cm a 25C: 5,0 mx., yc) pH: 5,0 a 8,0.

Fosfato monobsico de potasio (KH2PO4)

Fosfato dibsico de potasio (K2HPO)Fosfato dibsico de sodio heptahidratado (Na4O)Cloruro de amonio (NHCl)4Sulfato de magnesio heptahidratado (MgSO)Cloruro de calcio anhidro (CaCl)Cloruro frrico hexahidratado (FeCl2)

cido sulfrico concentrado (H2SO4)Hidrxido de sodio (NaOH)Sulfito de sodio (Na2SO)2-cloro-6 (triclorometil) piridinaGlucosa grado patrn primario

cido glutmico grado patrn primariocido clorhdrico (HCl)Acido ntrico (HNO3)

Disolucin amortiguadora de fosfato.Pesar aproximadamente 8,5 g de fosfato monobsico de potasio, 21,75 g defosfato dibsico de potasio, 33,4 g de sosfato dibsico de sodio heptahidratado y1,7 g de cloruro de amonio , disolver en 500 mL de agua y aforar a 1 L. El pH de la


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disolucin debe ser de 7,2. Desechar el reactivo (o cualquiera de los siguientesreactivos) si hay algn signo de crecimiento biolgico en el frasco dealmacenamiento.

Disolucin de sulfato de magnesio

Pesar aproximadamente 22,5 g de sulfato de magnesio heptahidratado , disolveren agua y diluir a 1 L.

Disolucin de cloruro de calcio.Pesar aproximadamente 27,5 g de cloruro de calcio anhidro, disolver en agua ydiluir a 1 L.

Disolucin de cloruro frrico.Pesar aproximadamente 0,25 g de cloruro frrico hexahidratado, disolver en aguay diluir a 1 L.

Disolucin de cido sulfrico (0,1N).Agregar aproximadamente 2,8 mL de cido sulfrico concentrado a 500 mL deagua, mezclar bien y diluir hasta 1 L.

Disolucin de hidrxido de sodio (0,1N).Pesar aproximadamente 4,0 g de hidrxido de sodio , disolver en agua y diluir a 1L.

Disolucin de sulfito de sodio.Pesar aproximadamente 1,575 g de sulfito de sodio disolver en agua y diluir a 1 L.Esta disolucin no es estable; por lo que debe prepararse diariamente.

Disolucin patrn de glucosa-cido glutmico.Secar glucosa y cido glutmico a 103C durante una hora. Pesaraproximadamente y con precisin 150,0 mg de glucosa y 150,0 mg de cidoglutmico, diluir en agua y aforar a 1 L. Preparar inmediatamente antes de usarla.Esta disolucin tiene una DBO de 198 mg/L.

Disolucin de cloruro de amonio.Pesar aproximadamente 1,15 g de cloruro de amonio y disolver en 500 mL deagua, ajustar el pH a 7,2 con disolucin de hidrxido de sodio y aforar a 1 L. Ladisolucin contiene 0,3 mg N/mL.

EQUIPO Y MATERIALES

Equipo de aireacin con difusor

Incubadora: Controlado por termostato a 20C 1C. Eliminar toda la luz paraevitar la posibilidad de produccin fotosinttica de oxgeno disuelto.


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Balanza analtica con precisin de 0,1 mg

Medidor de oxgeno disuelto

Limpieza del material.

Todo el material usado en la determinacin debe ser exclusivo para esteprocedimiento. Para el lavado del material remojar durante 1 h en una disolucinde cido sulfrico al 10 % y enjuagar con agua. Los detergentes con base deamoniaco no deben usarse para la limpieza del material.Los contenedores de las muestras deben lavarse con disolucin de detergente noinico, libre de metales, enjuagarse con agua, remojarse en cido toda la nochey volver a enjuagarse con agua libre de metales.

Para el material de cuarzo, politetrafloroetileno o material de vidrio debe dejarseremojando de 12 h a 24 h con HNO (1:1), HCl (1:1) o con agua regia (3 partes de

HCl concentrado + 1 parte de HNO3 concentrado) solo en los casos que presentematerial adherido, despus debe ser enjuagado con agua libre de metales. En loscasos de que el material presente grasas, enjuagar con acetona y/o hexano.

Botellas Winkler de vidrio para incubacin con capacidad de 300 mL de aforo totaly con boca estrecha, reborde y tapn de vidrio esmerilado, de forma cnica.

Contratapa de politetrafloroetileno u otro material plstico para botella Winkler

Bureta

RECOLECCIN, PRESERVACIN Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRASEn el caso de aguas naturales debe tomarse un mnimo de 1 L de muestra en unenvase de polietileno o vidrio. En el caso de aguas residuales (DBO mayores a 50mg/L) deben tomarse mnimo 100 mL. Pueden utilizarse muestras simples ocompuestas.

No se debe agregar ningn preservador a las muestras. Solo deben conservarse a4C hasta su anlisis.

El tiempo mximo de almacenamiento previo al anlisis es de 24 h.

PROCEDIMIENTO

Preparacin de agua para dilucin

Colocar el volumen requerido de agua en un frasco y aadir por cada litro deagua


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1 mL de cada una de las siguientes disoluciones: disolucin de sulfato demagnesio, disolucin de cloruro de calcio, disolucin de cloruro frrico y disolucinamortiguadora de fosfatos . Preparar el agua de dilucin diariamente.

Analizar y almacenar el agua de dilucin como se describe en los incisos 10.2 y

10.3,de tal forma que siempre tenga a mano agua de calidad garantizada. Antes deusar elagua de dilucin debe ponerse a una temperatura aproximada de 20C. Saturarconoxgeno aireando con aire filtrado, libre de materia orgnica durante 1 h por lomenos.

Si la muestra presenta alto contenido de biocidas como cloro o se sabe de su bajocontenido de materia orgnica, es necesario inocular la muestra.

Si se requiere, sembrar el agua de dilucin.Control del agua de dilucin

Utilizar este procedimiento como una comprobacin aproximada de la calidad delagua de dilucin. Si la disminucin de oxgeno disuelto del agua excede de 0,2mg/L, obtener agua de mejor calidad mejorando la purificacin o usar agua de otrafuente. Alternativamente si se requiere inhibir la nitrificacin, almacenar el agua dedilucin sembrada en una habitacin oscura a temperatura ambiente hasta que lacaptacin de oxgeno disuelto se haya reducido lo suficiente para cumplir loscriterios de comprobacin del agua de dilucin. No se recomienda su

almacenamiento cuando la DBO se va a determinar sin inhibir la nitrificacin yaque pueden desarrollarse microorganismos nitrificantes durante ese tiempo. Si elagua de dilucin no ha sido almacenada para mejorar su calidad, aadir suficienteinculo como para un consumo de OD de 0,05 mg/L a 0,1 mg/L en cinco das a20C. Al Incubar en un frasco Winkler lleno de agua de dilucin durante cinco dasa 20C, el consumo no debe ser mayor a 0,2 mg/L y preferiblemente no menor a0,1 mg/L.

Control de la glucosa-cido glutmico

Comprobar en cada lote analtico la calidad del agua de dilucin, laefectividad del inculo y la tcnica analtica mediante determinaciones de la DBOen muestras estndar de concentracin conocida. Utilizar la disolucin deglucosa-cido glutmico como disolucin madre de control. La glucosa tieneuna tasa excepcionalmente alta y variable de oxidacin, pero cuando se utiliza concido glutmico, dicha tasa se estabiliza y es similar a la obtenida en muchasaguas residuales municipales. Alternativamente, si un agua residual particularcontiene un componente principal identificable que contribuya a la DBO en lugarde la glucosa-cido glutmico. Determinar la DBO, utilizar este compuesto de una


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disolucin al 2 % de la disolucin de control patrn de glucosa-cido glutmicoutilizando las tcnicas mencionadas.

Fuente de la siembra

Es necesario contar con una poblacin de microorganismos capaces de oxidar lamateria orgnica biodegradable de la muestra. El agua residual domstica, losefluentes no clorados o sin desinfeccin, los efluentes de las plantas detratamiento de desechos biolgicos y las aguas superficiales que reciben lasdescargas de aguas residuales que contienen poblaciones microbianassatisfactorias. Algunas muestras no contienen una poblacin microbiana suficiente(por ejemplo, algunos residuos industriales no tratados, residuos desinfectados,residuos de alta temperatura o con valores de pH extremos).

Para tales residuos, sembrar el agua de dilucin aadiendo una poblacin demicroorganismos. La mejor siembra es la que proviene del efluente de un sistema

de tratamiento biolgico de aguas residuales. Cuando se usa como siembra elefluente de tratamiento biolgico de sistema de aguas residuales se recomienda lainhibicin de la nitrificacin. Cuando no se disponga de sta, utilizar elsobrenadante del agua residual domstica despus de dejarlo reposar atemperatura ambiente durante al menos 1 h, pero no ms de 36 h. Determinar si lapoblacin existente es satisfactoria haciendo la prueba de la siembra en unamuestra para DBO. El incremento del valor de la DBO indica una siembra exitosa.

Control del inculo

Determinar la DBO del material de siembra como para cualquier otra muestra.

Esto esuna siembra control. A partir de este valor y de uno conocido de la dilucin delmaterialde siembra (en el agua de dilucin) determinar el consumo de OD de la siembra.Lo ideal es hacer disoluciones tales de la siembra que la mayor cantidad de losresultados presenten una disminucin de al menos el 50 % del OD. Larepresentacin de la disminucin del OD (mg/L) con respecto a los mililitros desiembra, tiene que ser una lnea recta cuya pendiente corresponde a ladisminucin de OD por mililitro del inculo. La interseccin del eje de las abscisas(OD) representa el consumo del oxgeno causado por el agua de dilucin y debeser inferior a 0,1 mg/L . Para determinar el consumo de OD de una muestra, seresta el consumo de OD de la siembra, del consumo de OD total. La captacin deOD total del agua de dilucin sembrada debe oscilar entre 0,6 mg/L y 1,0 mg/L.

Pre-tratamiento de la muestra

Muestras con pH cidos o bsicos

Neutralizar las muestras a un pH entre 6,5 y 7,5 con cido sulfrico o hidrxido desodio de concentracin tal que la cantidad de reactivo no diluya la muestra en ms


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del 0,5 %. El pH del agua de dilucin sembrada no debe verse afectado por ladilucin de la muestra.

Muestras que contienen cloro residual

Si es posible, evitar las muestras que contengan cloro residual, tomndolas antesdel proceso de cloracin. Si la muestra ha sido clorada pero no hay residuodetectable de cloro, sembrar el agua de dilucin. Si hay cloro residual, eliminar elcloro de la muestra y sembrar con inculo . No se deben analizar las muestrascloradas sin sembrar el agua de dilucin. En algunas muestras, el clorodesaparece en el lapso de 1 h a 2 h despus de su exposicin a la luz. Esto sueleocurrir durante el transporte o la manipulacin de la muestra. Para las muestras enlas que el residuo de cloro no se disipe en un tiempo razonablemente corto,eliminar el cloro residual aadiendo disolucin de sulfito de sodio.

Determinar el volumen requerido de disolucin de sulfito de sodio cuantificando el

cloro residual total. Aadir a la muestra neutralizada el volumen relativo de ladisolucin de sulfito de sodio determinada por la prueba anterior, mezclar ydespus de 10 min a 20 min, comprobar el cloro residual de la muestra.

La determinacin de cloro residual se realiza de acuerdo a lo establecido en lanorma mexicana NMX-AA-100.

Tcnica de dilucin

Las diluciones que dan lugar a un OD residual mayor de 1 mg/L y una captacinde OD de al menos 2 mg/L despus de 5 das de incubacin, producen los

resultados ms confiables. Hacer varias diluciones (al menos 3) por duplicado dela muestra preparada para obtener una captacin de OD en dicho intervalo. Laexperimentacin con una muestra concreta permite el uso de un nmero menor dediluciones. Un anlisis ms rpido tal como la DQO, presenta una correlacinaproximada con la DBO y sirve como una gua para seleccionar las diluciones. Enausencia de datos previos, utilizar las siguientes diluciones: de 0 % a 1 % para losresiduos industriales fuertes, de 1 % a 5 % para las aguas residualessedimentadas y crudas, del 5 % al 25 % para el efluente tratado biolgicamentey del 25 % al 100 % para las aguas superficiales contaminadas.

Diluciones preparadas directamente en frascos tipo Winkler. Utilizando una pipetavolumtrica, aadir el volumen de muestra deseado a frascos Winkler individualesde 300 mL. Aadir cantidades adecuadas del material de siembra a los frascostipo Winkler o al agua de dilucin. Llenar los frascos con suficiente agua dedilucin, sembrada si es necesario, de forma que la insercin del tapn desplacetodo el aire, sin dejar burbujas.No realizar diluciones mayores de 1:300 (1 mL de la muestra en un frasco).

Determinar el OD inicial en uno de los frascos de cada una de las diferentesdiluciones. En los frascos de los duplicados de cada una de las diluciones, Ajustar


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hermticamente el tapn, poner un sello hidralico y la contratapa e incubardurante 5 das a 20C.

Determinacin del OD inicial

Mtodo yodomtricoLa determinacin del OD inicial se realiza por medio del mtodo yodomtrico deazida modificado, de acuerdo a lo establecido en la norma mexicana NMX-AA-012-SCFI (ver Referencia)

Mtodo electromtrico

La determinacin del OD inicial se realiza por medio del mtodoelectromtrico con electrodo de membrana, de acuerdo a lo establecido en lanorma mexicana NMXAA-012-SCFI.

Los aceites, grasas o cualquier sustancia que se adhiera a la membrana puedeser causa de baja respuesta en el electrodo.

Blanco del agua de dilucin.

Emplear un blanco del agua de dilucin como un control aproximado de la calidaddel agua de dilucin no sembrada y de la limpieza de los frascos de incubacin.Junto con cada lote de muestras, incubar un frasco de agua de dilucin nosembrada. Determinar el OD inicial y final como se especifica en los incisos 10.7 y10.10. El consumo de OD no debe ser mayor de 0,2 mg/L y preferentemente no

menor a 0,1 g/L.Incubacin

manual de técnicas analíticas

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