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Material de apoyo de la materia
Procesar Técnicas Bacteriológicas Básicas
JUSTIFICACIÓNJUSTIFICACIÓN
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• El contenido incluye tanto material El contenido incluye tanto material visual como escrito para ayudar a la visual como escrito para ayudar a la comprensión del tema.comprensión del tema.
Historia de la microbiologíaHistoria de la microbiología
CREADOR DE LA MICROSCOPÍA BIOLÓGICA
Examinó todos los órganosDel cuerpo; describió en laPiel la capa de células que Llevan su nombre y losGlomérulos renales.
Tallado de lentes perfecto
Amplificaciones de200 veces
Envió sus observaciones en Más de 200 cartas hacia la
Sociedad Real de Londres de1673 a la fecha de su muerte
La lente estaba montada en 2placas de metal. La muestra seColocaba en un cilindro corto.
Repitió los experimentos de NeedhamPero con modificaciones. Selló hermé-
Ticamente a la flama y tapó con corchoImpermeable.
Schulze pasaba aire a través de solucionesÁcidas a matraces donde tenía caldo hervido
Schwann filtraba el aire en tubos al rojo vivoY lo hacía llegar al caldo hervido.
En ninguno de los 2 casosaparecieron microbios.
demostró que el polvo transporta losmicrobios y que si éste está ausente el caldo
nutritivo se mantenía libre decrecimiento microbiano
Demostró que incluso la filtración poralgodón No era necesaria para impedir la contaminación por microorganismos
Teoría microbianaDe la fermentación
Fenómeno del “cuajado” de la leche y la producción de bebidas alcohólicas.
Berzelius, Liebig, Wöhler y otros químicos distinguidos del siglo pasado interpretaron la transformación del azúcar a ácido láctico o a etílico y CO2 como un fenómeno puramente químico.
PASTEUR en 1857 observó la formación de ácido láctico a partir de azúcar, a merced de bacterias.
Pasteur contribuyó a resolver el problema demostrando que era posible eliminar las bacterias calentando las soluciones azucaradas iniciales hasta una temperatura elevada
TEORÍA MICROBIANA DELA ENFERMEDAD
Fracástoro en 1546describió 3 formas de
Transmisión de enfermedad
-Por contacto directo-Por contacto con
objetos contaminados-Contagio a distancia
Bacillus
anthracis
ELEMENTO DE MICROBIOLOGIA GENERALELEMENTO DE MICROBIOLOGIA GENERALL.E.HAWKERL.E.HAWKEREDITORIAL ACRIBIAEDITORIAL ACRIBIAESPAÑA, 1964ESPAÑA, 1964PAG. 512-620PAG. 512-620
MICROBIOLOGIA GENERALMICROBIOLOGIA GENERALWILLIAM G. WALTERWILLIAM G. WALTEREDITORIAL CONTINENTALEDITORIAL CONTINENTALESPAÑA, 1972ESPAÑA, 1972PAG. 36PAG. 36
BIOLOGIA 1BIOLOGIA 1ALEJANDRO LIMONALEJANDRO LIMONSANTILLANASANTILLANAMEXICO, 1999MEXICO, 1999PAG. 7-27PAG. 7-27
BIBLIOTECA SALVAT DE GRANDES TEMASBIBLIOTECA SALVAT DE GRANDES TEMAS La vida microscópica.La vida microscópica.Salvat editores, s.a. Salvat editores, s.a. Barcelona, EspañaBarcelona, EspañaPágs. 48 – 87.Págs. 48 – 87.
http://es.wikipedia.org/wiki/Microbiolog%C3%ADahttp://es.wikipedia.org/wiki/Microbiolog%C3%ADa
1872: Inoculó rebanadas de patata con mezcla de microorganismos. Y observó colonias de color preciso e independiente.
Agregó gelatina a un caldo nutritivo caliente y vació la solución en recipientes aplanados de cristal estéril, en donde se enfriaron y solidificaron.
En 1883 empleó por primera vez el agar.
El agar es un polisacárido extraído de varias algas marinas, que es digerido por pocos microorganismos.
Creó la placa o caja de petri
Método de Coloración en 1884
Tratamiento o prevenciónde la infección.
Las enfermedades sepresentan
una sola vez y despuésPresenta inmunidad.
Jenner, médico inglésdesarrolló un método
de inmunizaciónconocido como
vacunación
Las personas que habían sufrido la reacciónPresentaron inmunidad a la viruela
Pasteur en 1881 elaboró métodosPara inmunización contra el cólera
De las aves y el carbunco
VACUNA ATENUADAVACUNA ATENUADA
Metchnikoff llamó fagocitos a lasCélulas amiboides y propuso que la
Inmunidad a la enfermedad Infecciosa proviene
De la acción deCélulas semejantes
Behring y Kitasato
Demostraron en 1890 la existenciaDe la antitoxina
TRATAMIENTO DE LA SÍFILISTRATAMIENTO DE LA SÍFILIS
Intento de tratar las infecciones por medio de substancias químicas que matan o alteran el crecimiento de los microorganismos patógenos pero que no lesionan o dañan al huésped.
Domagk, aproximadamente 30 años después ensayó la actividad antibacteriana de varias substancias químicas del tipo sulfonamida.
Descubrió que el Prontosil era activo contra los Streptococcus.
Fisiología y Genética de los Fisiología y Genética de los MicrobiosMicrobios
FERMENTACIÓN
Al degradar un sustratocomo el azúcar, se for-man varios productos
terminales
Productos terminales:Alcohol etílico, ácidos
láctico, succínico, acético,Butírico y Bióxido de
Carbono
Beadle yTatum
Informaron que laNeurospora, erainducida rapida-
mente a la mutación
Algunos mutantesMostraron capacidadsintética y metabólica
distinta de su orga-nismo de origen.
Tatum yJoshua Lederberg
Descubrieron métodosde desencadenar
los cambios genéticosde las bacterias
El receptor adquirióciertas características
del donador.
ELEMENTO DE MICROBIOLOGIA GENERALELEMENTO DE MICROBIOLOGIA GENERALL.E.HAWKERL.E.HAWKEREDITORIAL ACRIBIAEDITORIAL ACRIBIAESPAÑA, 1964ESPAÑA, 1964PAG. 512-620PAG. 512-620
MICROBIOLOGIA GENERALMICROBIOLOGIA GENERALWILLIAM G. WALTERWILLIAM G. WALTEREDITORIAL CONTINENTALEDITORIAL CONTINENTALESPAÑA, 1972ESPAÑA, 1972PAG. 36PAG. 36
BIOLOGIA 1BIOLOGIA 1ALEJANDRO LIMONALEJANDRO LIMONSANTILLANASANTILLANAMEXICO, 1999MEXICO, 1999PAG. 7-27PAG. 7-27
BIBLIOTECA SALVAT DE GRANDES TEMASBIBLIOTECA SALVAT DE GRANDES TEMAS La vida microscópica.La vida microscópica.Salvat editores, s.a. Salvat editores, s.a. Barcelona, EspañaBarcelona, EspañaPágs. 48 – 87.Págs. 48 – 87.
http://es.wikipedia.org/wiki/Microbiolog%C3%ADahttp://es.wikipedia.org/wiki/Microbiolog%C3%ADa
TAXONOMÍATAXONOMÍABACTERIANABACTERIANA
CLASIFICACIÓNCLASIFICACIÓN NOMENCLATURANOMENCLATURA IDENTIFICACIÓNIDENTIFICACIÓN
EspecieGéneroFamiliaOrdenClase
DivisiónReino
Nomenclatura BINOMINAL(“Dos nombres”)
Género y especie derivados dellatín o del griego. Por ejemplo:
Streptococcus pneumoniaeS. pyogenes
Características Fenotípicas:Morfología MacroscópicaMorfología Microscópica
Características de TinciónRequerimientos medioambientales
Requerimientos nutricionalesPerfiles de Resistencia
Propiedades AntigénicasPropiedades subcelulares
Características Genotípicas:
Relación de la composición debases del DNA.
Análisis de la secuencia de basesde los ácidos nucleicos
(DNA y RNA)
• CLASIFICACIÓN DE CARLOS LINNEO
REINO MONERA REINO PROTISTA REINO ANIMALIAREINO PLANTASREINO FUNGI
• CELULAS PROCARIOTAS
SIN MEMBRANA CELULAR
• CELULAS EUCARIOTAS
CON MEMBRANACELULAR
• ORGANISMOSCON NUCLEOSEUCARIOTICOSDISPERSOS EN
UNA PARED
• ORGANISMOSMULTICELULARES
CON CELULAS EUCARIOTICASY CON PARED
• ORGANISMOS CONMULTICELULARES
CON CELULASEUCARIOTICASY SIN PARED
CELULAR
La posibilidad que se pueda La posibilidad que se pueda derivar diferencia sobre las derivar diferencia sobre las relaciones filogenitas entre las relaciones filogenitas entre las bacterias se refleja en la bacterias se refleja en la organización de la edición mas organización de la edición mas reciente de bergey´s manual of reciente de bergey´s manual of “systematic bactereogoly” “systematic bactereogoly” publicado en cuatro volúmenes publicado en cuatro volúmenes desde 1984 hasta 1989 desde 1984 hasta 1989 publicado originalmente en publicado originalmente en 1926 este es un esfuerzo por 1926 este es un esfuerzo por calificar a las bacterias calificar a las bacterias conocidas y hacer accesible esta conocidas y hacer accesible esta información bajo la forma de información bajo la forma de una clave.una clave.
En 1980 el “international committee on En 1980 el “international committee on systematic bacteriology” publico una lista systematic bacteriology” publico una lista aprobada de bacterias esta lista remplaza a una aprobada de bacterias esta lista remplaza a una primera que había crecido con mas de 30,000 primera que había crecido con mas de 30,000 nombres desde el 1 de enero de 1980 solo la nombres desde el 1 de enero de 1980 solo la nueva lista se considera valida y los nombres nueva lista se considera valida y los nombres descartados, la edición de nuevos y otros descartados, la edición de nuevos y otros cambios requieren de su publicación en el cambios requieren de su publicación en el “international journal of systematic bacteriogoly”“international journal of systematic bacteriogoly”
Volumen 1. bacterias Gram. negativas de Volumen 1. bacterias Gram. negativas de importancia medica y comercial :Espiroquetas, importancia medica y comercial :Espiroquetas, bacterias espirales y curvas, Bacilos Gram. bacterias espirales y curvas, Bacilos Gram. negativos aeróbicos y facultativos aeróbicos, negativos aeróbicos y facultativos aeróbicos, anaeróbicos obligados Gram. negativos, cocos anaeróbicos obligados Gram. negativos, cocos Gram. negativo aerobios y anaerobios y Gram. negativo aerobios y anaerobios y ricketsia,micoplasmas.ricketsia,micoplasmas.
Volumen 2 .Bacterias Gram. positivas de Volumen 2 .Bacterias Gram. positivas de importancia medica y comercial: Cocos Gram. importancia medica y comercial: Cocos Gram. positivos, bacilos Gram. positivos formadores de positivos, bacilos Gram. positivos formadores de esporas y no esporulados y los atinomicetos no esporas y no esporulados y los atinomicetos no filamentosos.filamentosos.
Volumen 3 .bacterias Gram. negativas Volumen 3 .bacterias Gram. negativas restantes : Bacterias fototroficas, móviles, restantes : Bacterias fototroficas, móviles, encapsuladas y apendiculadas: siano encapsuladas y apendiculadas: siano bacterias, bacterias litotroficas y las bacterias, bacterias litotroficas y las bacterias archebacteria bacterias archebacteria (metanogenas,halófilas extremas y las (metanogenas,halófilas extremas y las termoacidófilas).termoacidófilas).
Volumen 4. Actinomicetos filamentosos y Volumen 4. Actinomicetos filamentosos y bacterias afinesbacterias afines
CLASIFICACIÓN DEL MANUAL DE BACTERIOLOGÍA CLASIFICACIÓN DEL MANUAL DE BACTERIOLOGÍA SISTEMÁTICA DE BERGEYSISTEMÁTICA DE BERGEY
VOLUMEN I VOLUMEN II VOLUMEN III VOLUMEN IV
Bacterias gramnegativas de importancia médica y comercial: espiroquetas, bacterias espirales y curvas, bacilos gram- aeróbicos, anaerobios obligados gram-, cocos gram- aerobios y anaerobios, micoplasmas.
Bacterias grampositivas de importancia médica y comercial: cocos gram+, bacilos gram+ formadores de esporas y no esporulados y los actinomicetos no filamentosos
Bacterias gramnegativas restantes: bacterias fototróficas, móviles, encapsuladas y apendiculadas, cianobacterias, bacterias litotróficas y las bacterias archebacteria (metanógenas, halófilas extremas y las termoacidófilas)
Actinomicetos filamentosos y bacterias afines.
22
• CELULA PROCARIOTA
• CELULA EUCARIOTA
• PLEOMORFISMO BACTERIANO
33
CELULA
CELULA EUCARIOTA
CELULA PROCARIOTA
GRAMPOSITIVAS
GRAM NEGATIVAS
ANIMAL VEGETAL
44 2727
CUERPOS CROMATICOS
RIBOSOMAS
NUCLEOIDE
PELOS
PAREDCELULAR
ESPORAS
FLAGELOS
SUSTANCIALAXA
CAPSULA
MICROCAPSULA
CELULA PROCARIOTA
55
ORGANELOS
PARED CELULAR:
Las bacterias gram negativas presentan pared mas delgada que las gram positivas.
Estructura fuerte y rígida que protege a la célula, tiene un espesor de 10-25 micras.
MICROCAPSULA:
Capa compuesta de proteínas, polisacáridos y lípidos; se localizan en las bacterias gram negativas se le conoce también como AG. SOMATICOS O ENDOTOXINAS.
CAPSULA:
Estructura gruesa viscosa gelatinosa.
Compuesta por polisacáridos y ácidos urónicos.
forman colonias lisas, brillantes y húmedas.
SUSTANCIA LAXA:
Semejante a la capsula.
Gram negativas: polisacáridos.
Gram positiva: polipéptidos.
66
ORGANELOS
FLAGELOS: Son apéndices delgados en espiral se encuentran en casi todas las bacterias en movimiento Su diámetro es de 0.01-0.05 micras y su longitud mayor de 70 micras. Compuestos por Flagelina; su origen es el Blefaroplasto y su crecimiento es de 0.5 micras por minuto.Pueden ser : Monotricos, Multitricos, Lofotricos y Peritricos.
PELOS O PILUS: Compuestos por Pilina, se encuentran en las gram negativas.Diámetro de 0.003-0.007 micras con longitud de 0.5-6 micras.Intervienen en la reproducción sexual bacteriana y presentan de 100-400 pelos.
ESPORAS: Solamente la contiene la familia Bacilacea, producen Eudoesporas. Son resistentes a agentes químicos y físicos.
77
CONCEPTOCONCEPTO GRAM GRAM
POSITIVASPOSITIVAS
GRAM NEGATIVASGRAM NEGATIVAS
AMINOACIDOSAMINOACIDOS 3-43-4 GRAN CANTIDADGRAN CANTIDAD
A. MURAMICOA. MURAMICO PRESENTEPRESENTE PRESENTEPRESENTE
LIPIDOSLIPIDOS 0-2%0-2% 10-20%10-20%
POLISACARIDOSPOLISACARIDOS 35-60%35-60% 15-20%15-20%
ACIDO TEICOICOACIDO TEICOICO PRESENTEPRESENTE AUSENTEAUSENTE
LIPOPOLISACARIDOSLIPOPOLISACARIDOS AUSENTEAUSENTE PRESENTEPRESENTE
FLAGELOFLAGELO AUSENTEAUSENTE PRESENTEPRESENTE
PARED CELULAR
Estructura de las células ProcariotaEstructura de las células Procariota
Un único cromosoma circular, desprotegido. No exíste membrana nuclear.
Se compone de fosfolípidos y proteínas y, no contiene esteroles. No poseen mitocondrias. Las enzimas de transporte se localizan en la membrana. Barrera osmótica, regula el transporte de los productos celulaes.
Estructura rígida protege a la célula. Dependiendo de su resistencia las bacterias se pueden clasificar en Gram+o-
Envoltura polisacárida que interviene de manera decisiva para evitar la fagocitosis bacteriana y contribuye a la adherencia de las bacterias a los tejidos o dispositivos artificiales.
Su formación permite a ciertos microorganismos sobrevivir en condiciones ambientales extraordinariamente duras.
Los pili son estructuras cortas intervienen en la adherencia de las bacterias a las células del huésped o facilitan el intercambio de ADN.Los flagelos ayudan a la movilidad bacteriana
88
NUCLEO
VACUOLA
MEMBRANACITOPLASMICA
LISOSOMAS
MITOCONDRIAS
RETICULOENDOPLASMICO
PAREDCELULAR
CELULAEUCARIOTA
3434
ORGANELOS
NUCLEO: Contiene la información genética (ADN y RNA), cubierto por proteínas (Histonas). Contiene una capa doble externa (Capa Nuclear).
RETICULO ENDOPLASMICO: Retículo endoplasmico liso (Complejo de Golgi). Retículo endoplasmico rugoso: transporta y sintetiza proteínas al complejo de Golgi.
MITOCONDRIAS: Contribuyen al sistema de transporte electrónico respiratorio (fuente principal de la célula). Contiene su propio ADN
LISOSOMAS: Degradan macromoléculas y los microorganismos.
MEMBRANA CITOPLASMICA: Regula el transporte de las macromoléculas dentro y fuera de la célula. Rodea al citoplasma, es una estructura lipoproteína.
PARED CELULAR: Constituye una barrera externa rígida que protege a la célula. Compuesta por polisacáridos.
VACUOLA: Almacena las proteínas.
N
Estructura de las células EucariotaEstructura de las células Eucariota
La información genética de la célula, el ADN, está disperso en numerosos cromosomasSe extiende a través del citoplasma celular y se divide en 2 tipos:Liso y Rugoso. El rugoso participa en la síntesis de proteínas.El complejo de Golgi se encuentra en el REL que se encarga del transporte de proteínas.
Estructuras envueltas por membranas, contienen su propio ADN, representa la fuente principal de energía de la célulaLas enzimas hidrolíticas para la degradación de las macromoléculas y los microorganismos se encuentran dentro de éstas células, envueltas por membranas.
De estructura lipoprotéica, rodea el citoplasma celular y regula el transporte de las macromoléculas dentro y fuera de la bacteria.
Constrituye una barrera externa rígida que, en el caso de las eucariotas, suele estar compuesta por polisacáridos del tipo de la celulosa o de la quitina.
1010
VIBRIO
BACILO COCO
ESPIROQUETA
ESPIRILO
PLEOMORFISMOBACTERIANO
1111
MORFOLOGÍA Y AGRUPACIONESMORFOLOGÍA Y AGRUPACIONES
Bibliografia:Bibliografia:
*Jawetz, Melnick, Aderberg*Jawetz, Melnick, Aderberg ““microbiologia medica”microbiologia medica” Edit. Mainsal Edit. Mainsal modernomoderno pp. 105-108pp. 105-108
Carpenter Philip L.Carpenter Philip L. ““microbiologia”microbiologia” Edit. Interamericana Mexico 1969Edit. Interamericana Mexico 1969 Pp. 46-51Pp. 46-51
www. Mecobiologis medica.com.mxwww. Mecobiologis medica.com.mx
CELULAS INDIVIDUALESCOLONIAS BACTERIANAS
TAMAÑO COLOR FORMA ELEVACION SUPERFICIE
•Puntiforme
•Circular
•Irregular
•Filamentosa
•Rizoide
•Plana
•Elevada
•Convexa
•Pulvinada
•umbonada
•Lisa
•Rugosa
Mm lactosa+ lactosa-
ASPECTO BORDES LUZ REFLEJADA LUZ TRANSMITIDA
•Fusiforme
•Húmedo
•Seco
•Liso
•Ondulado
•Lobulado
•Filamentoso
•Desgastado
•Estriado
•Brillante•Mate
•Opaca•Traslucida o transparente
CONSISTENCIA
•Suave
•Dura
CONSISTENCIA PIGMENTACION HEMOLISIS OLOR
Degradacion de alimentos
Destrucción de eritrocitos
Solamente en colonias
DESARROLLO EN CALDO DESARROLLO EN CALDO NUTRITIVONUTRITIVO
Escaso
Moderado
Abundante
DistribuciónUniformemente distribuido (turbidez)
Desarrollo confinado (nata o pelusa)
Pútrido
A frutas o aromático
Imperceptible
Olor
Desarrollo que se acumula como sedimento
CALDO NUTRITIVO CRECIMIENTO
SUPERFICIAL
DESARROLLO EN AGAR DESARROLLO EN AGAR (INCLINADO) POR ESTRÍAS(INCLINADO) POR ESTRÍAS
Escaso
Moderado
Abundante
Margen o borde de desarrollo
UniformePresentando varias irregularidades
Consistencia de la masa desarrollada
Mantecosa
Mantequilla
Fácilmente removibles con una aguja de siembras
Cromogénesis o pigmentación
ColoreadasSin color
DESARROLLO EN GELATINA DESARROLLO EN GELATINA POR PICADURAPOR PICADURA
Desarrollo (sin licuefacción) Licuefacción de la gelatina
Se puede presentar desde arriba suavemente o adquirir aspectos variados de embudos al licuar la gelatina.
A lo largo de la línea de inoculación. El desarrollo puede estar limitado a la zona de la picadura o puede haberse expandido.
A1 B1 C1 D1 E1
A2 B2 C2 D2 E2
LICUEFACCION
A1.CATRERIFORME
B1.CALCIFORME
C1.INFUNDIBULIFORME
D1.ESTIPILIFORME
E1.ESTRATIFORME
LINEA DE PICADURA
A2.FILIFORME
B2.GRANULOSA
C2.PAPILIFORMA
D2.VELTOSA
E2.ARBORESENTE
Bibliografias:
•Preescott, harley klein; microbiologia ; editorial Mc- Graw- Hill- interamericana ;4ª edicion ; pp. 108- 111
•George a. wistreich y max d. lechtman; practicas de laboratorio en microbiologia; edit. Limusa, mexico, 1978; 2º edicion ; pp. 23-26
•Martn frobisher y robert fuert ; microbiologia medica ; edit. Interamericana ; pp. 174-197
•Jawetz, melnick y adelberg; microbiologia medica ; 14º edicion ; pp. 60-65
•Patrick r. murray, george s. kobayashi y michael a. dfaller; microbiologia medica ; 2º edicion ; editorial harcourt brace; pp. 84- 93
Metabolismo MicrobianoMetabolismo Microbiano
Enzimas quedegradan
la glucosa haciaunidades utilizables.
Enzimas queconstruyenbloques deestructura
celular a partirde estas
unidades.
Enzimas quedisponen losbloques deestructura
organizando losorgánulos
bacterianos
1. La forma la que el organismo obtiene el carbono para la construcción de la masa celular:Autótrofo. El carbono se obtiene del dióxido de carbono (CO2). Heterótrofo. El carbono se obtiene de compuestos orgánicos. Mixótrofo. El carbono se obtiene tanto de compuestos orgánicos como fijando el dióxido de carbono. 2. La forma en la que organismo obtiene los equivalentes reductores para la conservación de energía o en las reacciones biosintéticas:Litotrofo. Los equivalentes reductores se obtienen de compuestos inorgánicos. Organotrofo. Los equivalentes reductores se obtienen de compuestos orgánicos. 3. La forma en la que el organismo obtiene la energía para vivir y crecer:Quimiotrofo. La energía se obtiene de compuestos químicos externos. Fototrofo. La energía se obtiene de la luz.
NUTRICIÓN MICROBIANA
Hidrólisis de Alimentos Complejos
Proteínas, polisacáridos,Grasas y otros componentesEstructurales de gran tamaño
son transformados en suspartes constituyentes
Por IntroducciónDe agua en los
Sitios de desdoblamientoDe las grandes moléculascon lo que se liberan lasMoléculas integrantes.
Hidrólisis de proteínasda origen a:PeptonasProteosas AminoácidosPéptidos
Transporte Activo
Ocurre en la PARED CELULAR
Capacidad del microorganismopara acumular sustancias en el
interior de la célula enconcentración mayor de la queaparece en el medio ambiente.
El fenómeno de transporte necesitaenergía y es catalizado por:
Enzimas:Permeasas
Son producidas sólo cuandohay determinado sustrato.
El microorganismode este tipo sueledescribirse comocríptico respecto
al citrato.
Hay m.o quecarecen
de las enzimasmetabólicas
perotienen el
transporte
Tipos Nutricionales de Bacterias
Heterotróficos Fotosintéticos
Heterotróficos quimiosintéticos
Cuando el fosfato se encuentraa nivel de alta energía, puede
transferirse a difosfato deadenosina (ADP) o adenosi-
monofosfato (AMP) para formar,respectivamente adenosintri-
fosfato (ATP) o ADP.
Para utilizar la glucosa útil de laliberación de energía,se necesitóATP para que la molécula fuera
lo suficientemente reactiva.
Vía de Embden Meyerhof
-Respiración aeróbica y anaeróbica-Aerobios y anaerobios facultativos
Glucosa + 2 ADP + 2P+ 2 NAD+ 2piruvato+ 2 ATP + 2 NADH+ 2H+
Ciclo de PentosafosfatoAporta esqueletos de carbono para los nucleótidos, diversos carbohidratos y energía para generar ATP de la siguiente forma:
5. Además de su utilidadEn el metabolismo energético,El NADPH generado participa
Decisivamente en la síntesis deÁcidos grasos y en la direcciónde numerosos intermediariosdel ciclo hacia la síntesis de
nucleótidos.
4.El ciclo de pentosa-fosfato constituye un
sistema eficaz deobtener energía
3.Este ciclo constituyeun mecanismo esencial
para el aprovecha-miento de las pentosas
como fuentes deCarbono y energía
de las bacterias
2.El ciclo de pentosa-fosfato facilita también
el crecimientoaerobio sin laparticipación
de las enzimasdel ciclo de Krebs.
1.Cubre la demandapara la síntesis de
NADPH ynucleótidos.
VIA DE LA PENTOSA FOSFATO
1.-Opera de forma aeróbica o anaeróbica
3 glucosa 6-fosfato + 6NADP + 3H2O 2 fructosa 6-fosfato gliceraldehido3-fosfato + 3CO2+ 6NADPH + 6H+
El NADPH actúa como fuente de electrones para reducción de moléculas durante la biosíntesis.
-La eritrosa4-fosfato se utiliza para sintetizar aminoácidos aromáticos.-La ribosa 5-fosfato es un componente fundamental de los ácidos nucleicos-La ribulosa1,5-bisfosfatoes el principal aceptor de CO2 en la fotosíntesis
Importancia de la vía de la pentosas fosfato
Vía de Entner-DoudoroffAlgunas bacterias Gram-
emplean ésta Vía en lugar dela glucólisis.
Se trata de una manipulaciónMicrobiana estricta de
Glucosa-6-Fosfato que implicaLa producción de
Ácido 6-fosfoglucónico
Exíste una deshidratasa queElimina el agua en presencia de
Hierro ferroso y forma Ácido2-ceto-3-3desoxi-6-fosfoglucónico
Muchas bacterias utilizan estaVía alternativa para metabolizar
El gluconato, el manonato, elGlucuronato y otros compuestos
Relacionados, pero no para degra-dar las hexosas.
VÍA DE ENTNER-DOUDOROFF
-Esta vía esta presente generalmente en Psaeudomonas, Rhizobium, AzotobacterAgrobacteriumy otros gramnegativos.
-Pocos grampositivos tienen esta vía.
-Se degrada la glucosa a piruvatoproduciendo 1 ATP, 1 NADPH y 1 NADH por molécula de glucosa metabolizada.
Vía de Fosfocetolasa
Mecanismo estrictamente microbiano
Fermentación de la Glucosa
Se produce:
-Lactato-Acetato o etanol
-Anhídrido Carbónico
PENTOSAS Lactato y acetato
CARECEN DE:
Fosfofructoquinasa.
El gliceraldehído se convierte enPiruvato y se reduce a lactato.
La reacción de piruvato haciaLactato consume 2 protones de
NADH quedando otros cuatro queParticipan en las conversiones de
Acetaldehído y etanol.
Ciclo del Ácido Tricarboxílico
Vía Metabólica más importantede los seres vivos que facilita
el consumo de oxígeno.
AportaEnergía
AportaSustratos
IntermediosPara la
biosíntesis.
CICLO DE LOS ÁCIDOS TRICARBOXILICOS (TCA), CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO O CICLO DE KREBS
-El sustrato es el Acetil-CoA(molécula rica en energía)
-Acetil-CoA 2CO2+ 3NADH + 1FADH2+ 1 GTP
1 NADH= 3 ATP
1 FADH2= 2 ATP
1 GTP= 1 ATP
RESPIRACIÓN ANAERÓBICA
Es el proceso anaeróbico productor de energía en el que el aceptor de electrones de la cadena transportadora de electrones es una molécula inorgánica oxidada diferente al O2
Los principales aceptores de electrones son: el nitrato, el sulfato y el CO2
Bibliografías:
http://es.wikipedia.org/wiki/Bacteria
Romero Cabello Raúl Microbiología y Parasitología HumanaPanamericanaMéxico 1999pág. 214-219
Jawetz, Melnick, Mellor.Microbiología medicaMosbyEspaña 1996Pag.190-202
Curva de crecimiento bacteriano
La curva de Crecimiento es una representación grafica del Análisis de las Fases que presentan las Bacterias al crecer y Desarrollarse en medios adecuados.
Estas curvas son afectadas por distintos factores como la temperatura y el pH.
Curva de crecimiento bacteriano
Fase de Rezago (A) Es el periodo en el cual la bacteria se
adapta al medio, no se incrementa (multiplica), es la fase donde hay mas fase actividad metabólica.
Fase de Aceleración (B) Es la fase donde comienza a nutrirse la
bacteria y a reproducirse de una forma acelerada
Fase Exponencial (C) Es el periodo en el cual las bacterias se
encuentra en un estado de crecimiento (nutrición y reproducción) constante
Fase de Retrazo (D) Es el lapso en el cual los nutrientes
comienzan a agotarse, su reproducción es decreciente pero sin cesar completamente la reproducción.
Fase Estacionaria (E) En esta fase el numero de bacterias se
mantiene estable (sola algunas se reproducen) se empiezan acumular desechos y cada vez se agotan mas los nutrientes
Declinación o Muerte (F) Se produce el agotamiento de nutrientes y
la acumulación de desechos provoca la muerte de las bacterias
CURVA DECRECIMIENTOBACTERIANO
Fase de Rezago:
AdaptaciónAl nuevo
Ambiente.Se formanenzimas y
metabolitos.
FaseEstacionaria
Máxima:
Agotamiento denutrientes y
acumulación deproductos
tóxicos.Equilibriode vida y muerte
Fase deDeclinación(muerte):
Muerte celularSostenida.La tasa deMortalidadAumenta.
FaseExponencial:
Crecimientosostenido.
Éste continuahasta la ago-
tación denutrientes.
Bibliografía Jawetz,
Melnick y Adelberg
Microbiología Medica
Edit: Mainsal Moderno
pp.:57-59
Gerhardt Pet alManual of Methods for General BacteriologyEdit American Society for Microbiology
Koneman
Allen, Dowell, Sommers Diagnostico MicrobiológicoEdit Panamericanapp.:212-213
Control bacteriano
Temperatura de crecimiento MINIMA OPTIMA MAXIMA Pseudomonas gelatica 0 20-25 30-37 Pseudomonas pisi 7 28 37 Bacillus subtilis 8 28-40 50-55 Escherichia coli 8 37 47 Clostridium tetani 14 37 43 Neisseria gonorrheae 30 37 40 Lactobacillus del bruckii 20 50 55 Bacillus stearothermophilus 33-37 50-65 70
FACTORES QUE MODIFICAN
LA MUERTE DE MICROORGANISMOS
POR CALOR
TEMPERATURA NUMERO DE MICROORGANISMOS ESPECIES MEDIO pH
LA TEMPERATURA RIGE:
VELOCIDAD DE CRECIMIENTO
MULTIPLICACION(REPRODUCCION)
MUERTE DELOS
MICROORGANISMOS
CLASIFICACION DE LAS BACTERIAS SEGÚN SU TEMPERATURA DE CRECIMIENTO
CLASIFICACION:
PSICROFILAS MESOFILAS TERMOFILAS
A. Crecimiento adecuadamente B. Temperatura optima de crecimiento C. Temperatura optima a 0ºC (tiempo de generación menor de menor de 45ºC. (Muchas especies de crecimiento mayor 48 horas no crecen a menos de 10ºC o de 45ºC en términos AA. No adecuadamente a 0ºC incluso a 52ºC) generales crecen a 55ºC. (Los termófilos obligatorios no crecen a 37ºC o menos en tanto que los facultativos lo hacen.
PRESION OSMOTICA
SOLUCIONES:
ISOTONICAS HIPERTONICAS HIPOTONICAS
EFECTOS DE TEMPERATURAS BAJAS
LAS TEMPERATURAS BAJAS NO MATAN A LAS BACTERIAS
SINO QUE
SE INTERRUMPE LA MULTIPLICACIONSE CONSERVA EN ESTADO DE
INACTIVIDAD
LA MULTIPLICACION SE REANUDA SI LAS TEMPERATURAS
SE NORMALIZAN
LAS BACTERIAS SOPORTAN LAS TEMPERATURAS MUY BAJAS A LAS
MENORES DE SU MINIMACRECIMIENTO
CONCENTRACION DE HIDROGENO PH EJEMPLOS
N/1 = 10-0 0 JUGO DE LIMON N/10 = 10-1 1 pH 2.3 N/100 = 10-2 2N/1000 = 10-3 3N/10000 = 10-4 4N/100000 = 10-5 5N/1000000 = 10-6 6 ACIDO LECHE: pH 6.6
N/10000000 = 10-7 7 NEUTRO SANGRE: pH 7.3
N/100000000 = 10-8 8 ALCALINO BICARBONATO SODICO (N/10):
N/1000000000 = 10-9 9 pH 8.4
N/10000000000 = 10-10 10 CAMBIO DE COLOR DE LA
N/100000000000 = 10-11 11 FENOLFRATEINA pH 9.2
N/1000000000000 = 10-12 12 N/10000000000000 = 10-13 13 AGUA DE CAL VIVA: pH 12.3
N/100000000000000 = 10-14 14
VIBRACIONESSONORAS
ALTERACIONESDE LAS
CELULAS
ROTURADE
PAREDES
TRANSTORNOSEN EL
CONTENIDOCELULAR
DESINTEGRACIONTOTAL
EFECTOS
O
ATMOSFERA ADECUADA
ES LA PRESENCIAO AUSENCIADE OXIGENO
A) AEROBIOS OBLIGADOS
B) ANAEROBIOSOBLIGADOS
C) ANAEROBIOSFACULTATIVOS
RADIACION
MUERTE MUTACION
ALTERACIONESGENETICAS
CARÁCTERLOGARITMICO
EFECTOS
TIENEN CAUSAN
ESTERILIZACION
AGENTES FISICOS
CALOR SECO(180ºc Y 1H, 2H a160ºC)
-FLAMA DIRECTA-AIRE CALIENTE-HORNO
CALOR HUMEDO(121-132ºC X 15MIN + PRESION)
-EBULLICION-VAPOR FLUENTE-PASTEURIZACION
-ULTRAPASTEURIZACION-AUTOCLAVE, RECIPIENTES
RADIACION IONIZANTE•RAYOS X
•ALFA•GAMA•BETA
RADIACIONES NO IONIZANTESRADIACION ULTRAVIOLETA
ACTUA AL NIVEL DE LA TIMINAFILTRACION
AGENTES QUIMICOS
LIQUIDOSFORMALDEHIDO
(37%)GLUTARALDEHIDO
(2%)ALCOHOLESALDEHIDOSBIGUANIDASBISFENOLES
LIBERADORES DE ALOGENOSDERIVADOS DE METALES
PESADOSPEROXIGENOS
FENOLESCOMPUENTOS DE AMONIO
CUATERNARIO
GASESOXIDO DE ETILENO
(500mg/c 60ºC)
CLASIFICACION DE AGENTES ESTERILIZANTES
CALOR HUMEDO -PASTEURIZACION
-EBULLICION
-VAPOR DE LA PRESION ATMOSFERICA
-VAPOR CON PRESION
CALOR SECO -FLAMEADO
-INCINERACION
-AIRE CALIENTE
FILTRACION -BUJIAS (TIERRA DE DIATOMEAS, PORCELANA)
-LAMINAS DE ASBESTO
-DISCOS DE MEMBRANAS
RADIACION NO IONIZANTE IONIZANTE
-RAYOS -RAYOS GAMMA
ULTRAVIOLETA -ELECTRONES
-RAYOS INFRARROJOS DE ALTA
ENERGIA
AGENTES FISICOS
DEFINICIONES DE ESTERILIZACION Y DESINFECCION Antisepsia: Uso De Agentes Químicos Sobre Piel O Tejido Vivo Para Eliminar Los Microorganismos
Antiséptico: Sustancia Química Utilizada De Forma Tópica En Las Superficies Corporales
Aséptico: Material o sitio anatómico libre de microorganismos
Bactericida: método químico utilizado para anular la capacidad de multiplicación de un microorganismo
Bacteriostático: inhibición temporal del metabolismo de bacterias
Desinfectante: son agentes químicos que destruyen microorganismos patógenos en materiales inertes
Esporicida: acción de destrucción de las esporas de las bacterias
Fungicida: es la acción de matar hongos microscópicos
Germicida: es la acción de matar a los microorganismos o gérmenes
Inefectividad: capacidad que tienen algunos microorganismos de penetrar al huésped
Pasterización: elevación de la temperatura de los líquidos a 60ºC durante 30 seg. Y después bajarla bruscamente
Séptico: contaminación de algún cuerpo vivo o inerte por microorganismos o sus producto. Ultrapasteurización: Elevación de la temperatura a 80° C durante un minuto y después bajarla
bruscamente
Control BacterianoControl BacterianoA. Biocida
inactiva microorganismos
B. BacteriostáticoInhibe temporalmente el
crecimiento de m.o.
J. AntibióticosDestruyen bacterias
selectivamente
C. BactericidaPropiedad para matar
bacterias.
E. DesinfectantesMata bacterias en
superficies u objetos.
I. Conservación
G. AntisépticoElimina los m.o. en
tejidos vivos.
D. EsterilizaciónRemueve todo tipo de
vida microbiana.
H. AsépticoAusencia de m.o.
patógenos
F. SépticoPresencia de m.o.
en tejido vivo
Efectos de los agentes físicos Efectos de los agentes físicos sobre la vida microbiana.sobre la vida microbiana.
CALOR
Método más simplepara esterilizar
material
Tiempo deesterilización:
121ºC15 libras de presión
15 minutos
RADIACIÓN
La luz ultravioleta y las radiaciones ionizantes tienen aplicaciones como esterilizantes
Efecto de la temperatura sobre Efecto de la temperatura sobre los microorganismoslos microorganismos
Temperatura mínimaDe crecimiento
Temperatura óptimaDe crecimiento
Temperatura máximaDe crecimiento
PUNTOS CARDINALES
Clasificación de los microorganismos según Clasificación de los microorganismos según su temperatura de crecimientosu temperatura de crecimiento
Psicrófilas
Termófilas
Mesófilas
Termodúricas
Temp. mínima Temp. máxima Temp. óptima
A 5ºC de lamáxima
35 – 45 ºC
75 - 80ºC
-5 ºC
20 - 35ºC
35 - 45ºC
40 ºC
30 ºC
52 ºC
105 ºCo más
Bacterias de Gran Resistenciaal calor. Los que forman endosporas
Factores que modifican la Factores que modifican la muerte de los microorganismosmuerte de los microorganismos
Inactiva temporalmentea las bacterias y su
crecimiento
Acción mortal del calor:-Naturalización de proteínas
-Inactivación de enzimas esenciales
MATABACTERIAS
Después el creci-miento se reanu-da con rapidez.
Factores que modifican la Factores que modifican la muerte de los microorganismosmuerte de los microorganismos
VibracionesVibracionessonorassonoras
RadiacionesRadiaciones
PresiónPresiónosmóticaosmótica
La luz ultravioleta
tiene eficacia contra bacterias.
Radiaciones Germicidas
Esterilización y desinfecciónEsterilización y desinfección
Proceso Físico o químico que destruye o remueve completamente todo tipo de vida microbiana, incluyendo esporas.
Eliminación de microorganismos en objetos o superficies.
Tipos de EsterilizaciónTipos de Esterilización
CALOR HÚMEDO CALOR SECO FILTRACIÓN AGENTES QUÍMICOS
Tipos de desinfectantes químicosTipos de desinfectantes químicos
Alcoholes
Aldehídos
Biguanidas
Bisfenoles
Liberadores dehalógeno
Derivados de metalespesados
Peroxígenos
Fenoles
Esterilizantes de Fasede vapor
COMPUESTOS DEAMONIO CUATERNARIO
(QAC)
BIBLIOGRAFÍA:BIBLIOGRAFÍA:
**ROMERO CABELLO RAUL.“MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA ROMERO CABELLO RAUL.“MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA HUMANA”.EDIT. PANAMERICANA. MÉXICO 1999.Pp. 216-229HUMANA”.EDIT. PANAMERICANA. MÉXICO 1999.Pp. 216-229
**MURRAY P.R.,LAWRENCE D.W.“MICROBIOLOGÍA MÉDICA”MURRAY P.R.,LAWRENCE D.W.“MICROBIOLOGÍA MÉDICA”
EDIT. MOSBY.ESPAÑA 1996. Pp. 59-73EDIT. MOSBY.ESPAÑA 1996. Pp. 59-73
**CARPENTER PHILIP. “MIROBIOLOGIA”. EDITORIAL “MIROBIOLOGIA”. EDITORIAL INTERAMERICANA. MEKICO 1969. Pp. 80-90INTERAMERICANA. MEKICO 1969. Pp. 80-90
MEDIOS DE CULTIVOMEDIOS DE CULTIVO
Cultivo:Cultivo: Es la propagación artificial
de microorganismos, células o tejidos.
Medio de cultivo: Medio de cultivo: Sustrato o solución de
nutrientes en que se cultivan microorganismos en el
laboratorio.
PROTEÍNASPROTEÍNAS.- Suministro de .- Suministro de peptonas como polipéptidos, peptonas como polipéptidos, dipéptido y aminoácidos.dipéptido y aminoácidos.
CARBOHIDRATOSCARBOHIDRATOS.- Suministro .- Suministro de carbono para la síntesis.de carbono para la síntesis.
FACTORES ACCESORIOS DE FACTORES ACCESORIOS DE CRECIMIENTOCRECIMIENTO.- Entre ellos están las .- Entre ellos están las vitaminas del complejo “B”, suero, vitaminas del complejo “B”, suero, sangre, yema de huevo, etc. sangre, yema de huevo, etc.
SALES MINERALESSALES MINERALES.- Potasio (K), .- Potasio (K), Sodio (Na), Calcio (Ca), etc.Sodio (Na), Calcio (Ca), etc.
ATMOSFERAATMOSFERA.- Con oxígeno (aerobios .- Con oxígeno (aerobios obligados), sin oxígeno (anaerobios obligados), sin oxígeno (anaerobios obligados) , con o sin oxígeno obligados) , con o sin oxígeno (anaerobios facultativos).(anaerobios facultativos).
PRESIÓN OSMÓTICAPRESIÓN OSMÓTICA.- Pueden ocurrir .- Pueden ocurrir plasmoptisis (destrucción de células) plasmoptisis (destrucción de células) o plasmolisis ( en soluciones o plasmolisis ( en soluciones hipertónicas por salida de agua.hipertónicas por salida de agua.
TEMPERATURATEMPERATURA.- Para la mayoría .- Para la mayoría de las bacterias patógenas es de de las bacterias patógenas es de 37ºC , los limites se encuentran 37ºC , los limites se encuentran entre los 15º y 40ºC.entre los 15º y 40ºC.
LUZLUZ.- La mayoría se desarrollan .- La mayoría se desarrollan en ausencia de luz. en ausencia de luz.
REACCIONREACCION.- La mayoría crece en un .- La mayoría crece en un medio ligeramente alcalino (pH = medio ligeramente alcalino (pH = 7.2-7.6). Algunas como 7.2-7.6). Algunas como VibrioVibrio cholerascholeras necesitan un medio mas necesitan un medio mas alcalino (pH =9.6)alcalino (pH =9.6)
INCUBACIONINCUBACION.- Generalmente se .- Generalmente se incuban a 35ºC y se examinan por 1ª incuban a 35ºC y se examinan por 1ª vez después de 18-24 horas. El COvez después de 18-24 horas. El CO2 2 añadido incrementa el crecimiento y añadido incrementa el crecimiento y debe utilizarse siempre que sea debe utilizarse siempre que sea necesario.necesario.
Clasificación de Clasificación de medios de cultivo.medios de cultivo.
Medios simples.Medios simples.
Es aquel donde crece todo tipo de Es aquel donde crece todo tipo de bacterias.bacterias.
•Agar nutritivoAgar nutritivoConsiste en extractos de carne, peptona y agua. Es empleado como Consiste en extractos de carne, peptona y agua. Es empleado como base en la elaboración se medios mas complejos. Adecuado para el base en la elaboración se medios mas complejos. Adecuado para el cultivo de microorganismos poco exigentes. Se emplea en bacteriología cultivo de microorganismos poco exigentes. Se emplea en bacteriología sanitaria, medica e industrial.sanitaria, medica e industrial.
•Agua pectonadaAgua pectonadaCompuesta por proteasas, peptona, polipéptidos y aminoácidos. Compuesta por proteasas, peptona, polipéptidos y aminoácidos. Suministra netabolitos nitrogenados.Suministra netabolitos nitrogenados.
Estimulan el crecimiento de microorganismos especialmente Estimulan el crecimiento de microorganismos especialmente enterobacterias.enterobacterias.
•Caldo NutritivoCaldo NutritivoExtracto acuoso de carne. Las proteínas son remplazadas por peptona al Extracto acuoso de carne. Las proteínas son remplazadas por peptona al 1% y se añade NaCl al 0.5% se usa generalmente para enterobacterias.1% y se añade NaCl al 0.5% se usa generalmente para enterobacterias.
Medios de transporteMedios de transporte
Se utiliza cuando la muestra no va a ser tomada en el laboratorio.
•Solución salina glicerinada amortiguada.Solución salina glicerinada amortiguada.Transporte de muestras de heces por infección por: Salmonella o Transporte de muestras de heces por infección por: Salmonella o Shigella.Shigella.
•Cary Blair.Cary Blair.Es especialmente útil para la búsqueda de Vibrio spp. a partir de Es especialmente útil para la búsqueda de Vibrio spp. a partir de muestras fecales y rectales.muestras fecales y rectales.
•Stuart.Stuart.Presentan la habilidad de los microorganismos de tipo Gonococo y Presentan la habilidad de los microorganismos de tipo Gonococo y enterobacterias hasta por 24 horas.enterobacterias hasta por 24 horas.
•Transgrow. Transgrow. Medio de transporte y crecimiento de Neisseria gonorrhoeae y Neisseria gonorrhoeae y Neisseria meningitidisNeisseria meningitidis
Medios EnriquecidosMedios Enriquecidos
Son medios básicos que han sido complementados con líquidos
corporales como el suero, sangre, vitaminas, amino ácidos, proteínas, etc.
• Agar sangre.Agar sangre. Nos sirve para el aislamiento, cultivo y actividad hemolítica de Nos sirve para el aislamiento, cultivo y actividad hemolítica de
gérmenes difíciles como: gérmenes difíciles como: Streptococcus pyogenes.
• Agar Chocolate.Agar Chocolate.Suministran substratos para el crecimiento de Haemophilus sp.
• Caldo Selenito Cistina.Caldo Selenito Cistina. Medio utilizado para el enriquecimiento selectivo de Salmonella
sp. a partir de muestras de alimentos, productos lácteos y otros
materiales de importancia sanitaria.• Medio de Bordet- Gengou. Medio de Bordet- Gengou. Se emplea en el aislamiento y crecimiento de Bordetella pertussis
• Medio de Loeffler.Medio de Loeffler. Medio rico en nutrientes crecen bacilos diftéricos y gérmenes de Medio rico en nutrientes crecen bacilos diftéricos y gérmenes de
difícil desarrollo como Moraxella Lacunata.difícil desarrollo como Moraxella Lacunata.
• Agua con suero Hiss.Agua con suero Hiss. Se utiliza para microorganismos que prefieren suero como Se utiliza para microorganismos que prefieren suero como
substrato.substrato.
• Medio de Robertson con carne.Medio de Robertson con carne. Para el cultivo de microorganismos anaerobios.Para el cultivo de microorganismos anaerobios.
Medios especiales y/o Medios especiales y/o selectivosselectivos
Deben su importancia al hecho de que Deben su importancia al hecho de que contienen substancias que impiden el contienen substancias que impiden el
desarrollo de cualquier bacteria que no desarrollo de cualquier bacteria que no sea la que esta bajo investigación, se sea la que esta bajo investigación, se
emplean diferentes substancias. emplean diferentes substancias.
Ejemplos de sustancias.Ejemplos de sustancias.
Las sales biliares en un medio impide el Las sales biliares en un medio impide el desarrollo de los m.o. entéricos.desarrollo de los m.o. entéricos.
El verde de Malaquita es inhibidor de los El verde de Malaquita es inhibidor de los m.o. que pertenecen al grupo m.o. que pertenecen al grupo Mycobacteriaceae.Mycobacteriaceae.
El pH ácido permite el desarrollo de El pH ácido permite el desarrollo de hongos, pero inhibe las bacterias.hongos, pero inhibe las bacterias.
Medio de Mac-Conkey.- Se utiliza para Medio de Mac-Conkey.- Se utiliza para aislar e identificar Salmonella, Shigellas y aislar e identificar Salmonella, Shigellas y coliformes, además pseudomonas y coliformes, además pseudomonas y aeromonas, también Streptococcus fecalis aeromonas, también Streptococcus fecalis y Estafilococos.y Estafilococos.
Agar SS.- Cultivo de Salmonella y Agar SS.- Cultivo de Salmonella y Shigellae.Shigellae.
Medio con Telurita.- Identificación de Medio con Telurita.- Identificación de Corynebacterium.Corynebacterium.
Medio de Sabouraud.- Cultivo y desarrollo Medio de Sabouraud.- Cultivo y desarrollo de hongos .de hongos .
Medio de Löwenstein-Jensen.- Medio de Löwenstein-Jensen.- Identificación de microbacteriaceaeIdentificación de microbacteriaceae
Medio de selenita F. – Cultivo y desarrollo Medio de selenita F. – Cultivo y desarrollo de Salmonellae y Shigellae.de Salmonellae y Shigellae.
Medio de TCBS. Aislar y cultivar especies Medio de TCBS. Aislar y cultivar especies diversas de Vibrio especialmente diversas de Vibrio especialmente VibrioVibrio choleraecholerae
Infusión corazón-cerebro.-Permite el Infusión corazón-cerebro.-Permite el desarrollo de m.o. delicados y difíciles, desarrollo de m.o. delicados y difíciles, tales como Estreptococos y tales como Estreptococos y meningococosmeningococos
Agar y caldo de soya con triptona.- Se Agar y caldo de soya con triptona.- Se utilizan en el cultivo de m.o. anaerobios , utilizan en el cultivo de m.o. anaerobios , Vibrios y Bacteroides.Vibrios y Bacteroides.
Medio de Thayer Martin.- Desarrollo de Medio de Thayer Martin.- Desarrollo de Neisseria, Gonococos y Meningococos. Neisseria, Gonococos y Meningococos.
Medios diferenciales
Son aquellos que contienen sustancias nutritivas o inhibidores que permiten poner
en manifiesto algunas actividades metabólicas del microorganismo que es
diferente a otros.
Agar con Citrato.- Se utilizan en la Agar con Citrato.- Se utilizan en la diferenciación de bacterias entericas diferenciación de bacterias entericas Gram. (-) y coliformes aislados de agua.Gram. (-) y coliformes aislados de agua.
Medio SIM.- Diferenciación e identificación Medio SIM.- Diferenciación e identificación de enterobacterias.de enterobacterias.
Rojo de Metileno.- Para indicar la Rojo de Metileno.- Para indicar la presencia y degradación de Peptona-presencia y degradación de Peptona-fosfato de glucosa (reacción acida)fosfato de glucosa (reacción acida)
Medio MIO.- Se observa la producción de Medio MIO.- Se observa la producción de indol, movilidad y ornitina.indol, movilidad y ornitina.
Medio LIA.- Descarboxilación de la Lisina Medio LIA.- Descarboxilación de la Lisina y Ornitina.y Ornitina.
Medio Kligler.- Fermentación de los Hidratos de carbono, H2S y gas.
Caldo Urea.- Producción de Ureasa.Caldo Urea.- Producción de Ureasa.
Medios diferenciales Medios diferenciales ligeramente selectivosligeramente selectivos
Son medios en los cuales se han adicionado Son medios en los cuales se han adicionado en concentraciones definidas en concentraciones definidas (generalmente bajas) sustancias como (generalmente bajas) sustancias como cristal violeta, Fucsina, Azul de metileno, cristal violeta, Fucsina, Azul de metileno, eosina, sales biliares, etc. Que inhiben el eosina, sales biliares, etc. Que inhiben el crecimiento de los m.o. Gram. (+) y crecimiento de los m.o. Gram. (+) y algunos Gram. (-).algunos Gram. (-).
ENDO.- Aislamiento diferencial de ENDO.- Aislamiento diferencial de coliformes y otras entero bacterias.coliformes y otras entero bacterias.
EMB.- Aislamiento y diferenciación de EMB.- Aislamiento y diferenciación de coliformes de otras enterobacterias de coliformes de otras enterobacterias de interés medio y sanitario.interés medio y sanitario.
El Agar McConkey.- Se utiliza para aislar e El Agar McConkey.- Se utiliza para aislar e identificar Salmonella, Shigellas y identificar Salmonella, Shigellas y coliformes a partir de heces fecales, coliformes a partir de heces fecales, orinas, etc.orinas, etc.
Agar Tergitol 7.- Para la detección de Agar Tergitol 7.- Para la detección de organismos coliformesorganismos coliformes
Medios diferenciales altamente Medios diferenciales altamente selectivos.selectivos.
Estos limitan o suprimen el crecimiento de Estos limitan o suprimen el crecimiento de los microorganismos de flora normal.los microorganismos de flora normal.
Base de Agar de Casman.- Cultivo de Base de Agar de Casman.- Cultivo de neisseria gonorrhoeae.neisseria gonorrhoeae.
Agar para Salmonella y Shigella (SS).Agar para Salmonella y Shigella (SS).
Agar Xilosa, Lisina, Desoxicolato (XLD).- Agar Xilosa, Lisina, Desoxicolato (XLD).- Aislar Shigella, Salmonella y Arizona.Aislar Shigella, Salmonella y Arizona.
Agar Verde Brillante.- Aísla SalmonellaAgar Verde Brillante.- Aísla Salmonella
Agar Sulfito de Bismuto.- Agar Sulfito de Bismuto.- SalmonellaSalmonella typhityphi
Agar Sal y Manitol.- Aislamiento de Agar Sal y Manitol.- Aislamiento de EstafilococosEstafilococos
Agar Biggy.- Aislamiento de Agar Biggy.- Aislamiento de CandidaCandida albicans.albicans.
Agar Tech.- Incrementa y promueve la Agar Tech.- Incrementa y promueve la formación de formación de PiocianinaPiocianina por Pseudomonas.por Pseudomonas.
Medios de azúcar y Medios de azúcar y bioquímicas.bioquímicas.
Estos sirven para hacer pruebas Estos sirven para hacer pruebas bioquímicas a base de CHS.bioquímicas a base de CHS.
TSI.- Agar de hierro y triple azúcar para TSI.- Agar de hierro y triple azúcar para enterobacterias.enterobacterias.
MIO.- Triticasa, L-Ornitina e indicador.MIO.- Triticasa, L-Ornitina e indicador.
LIA.- Agar Lisina Fierro.LIA.- Agar Lisina Fierro.
Citrato de Simons.Citrato de Simons.
Caldo de Urea.Caldo de Urea.
Rojo de metilo.Rojo de metilo.
Medio de SIMMedio de SIM
Bibliografia
•http://www.britanialab.com.ar/espanol/catalogo_r.html•Bioxon Medios de cultivo
Técnicas de Técnicas de aislamiento de aislamiento de
cultivocultivoSiembra en estría Siembra en estría
cruzada, masiva, difusión cruzada, masiva, difusión y subcultivo de colonias.y subcultivo de colonias.
Siembra en estría cruzadaSiembra en estría cruzada Lo que haces toma un inoculo con el asa y en un solo extremo de la Lo que haces toma un inoculo con el asa y en un solo extremo de la
caja (petri) empiezas hacer varias "rayas" o estrías sin separar el caja (petri) empiezas hacer varias "rayas" o estrías sin separar el asa, y sin volver a pasar por el lugar ya inoculado, posteriormente asa, y sin volver a pasar por el lugar ya inoculado, posteriormente flameas el asa hasta que de un color rojo incandescente, enfrías la flameas el asa hasta que de un color rojo incandescente, enfrías la asa en un extremo del agar, posteriormente del ultimo extremo de la asa en un extremo del agar, posteriormente del ultimo extremo de la anterior estría, vuelves hacer "rayas" o estrías, repitiendo esto anterior estría, vuelves hacer "rayas" o estrías, repitiendo esto hasta que formes en la caja (petri) en los costados una formación hasta que formes en la caja (petri) en los costados una formación de 4 estrías, para que al ultimo hagas una forma de S en medio de de 4 estrías, para que al ultimo hagas una forma de S en medio de la placa, evitando que toque las demás estrías ya realizadas.la placa, evitando que toque las demás estrías ya realizadas.
siembra masivasiembra masiva siembra masiva o por cuadrantes (agotamiento o siembra masiva o por cuadrantes (agotamiento o
estría cruzada que es la que conoces como estría cruzada que es la que conoces como rombitos).La técnica es muy sencilla solo que hay rombitos).La técnica es muy sencilla solo que hay que tener un poco de practica para no rasgar el agar que tener un poco de practica para no rasgar el agar y que los cultivos no se contaminen. te darás cuenta y que los cultivos no se contaminen. te darás cuenta que tus colonias están aisladas cuando las que tus colonias están aisladas cuando las morfologías coloniales se presentan como bolitas (si morfologías coloniales se presentan como bolitas (si es de un cultivo puro no debe haber diferencias entre es de un cultivo puro no debe haber diferencias entre estas , si es un cultivo mixto deben observase estas , si es un cultivo mixto deben observase diferencias ya sea en color, forma, tamaño, diferencias ya sea en color, forma, tamaño, consistencia, etc.)consistencia, etc.)
Difusión Difusión Difusión: el inoculo lo viertes sobre la placa de agar ya Difusión: el inoculo lo viertes sobre la placa de agar ya
solidificado, y lo único que haces es esparcirlo sobre toda solidificado, y lo único que haces es esparcirlo sobre toda la superficie del agar, lo puedes hacer con ayuda de una la superficie del agar, lo puedes hacer con ayuda de una varillada de vidrio acodada, ésta la flameas antes de varillada de vidrio acodada, ésta la flameas antes de ponerla en contacto con el medio.ponerla en contacto con el medio. Se pasa una porción de Se pasa una porción de la muestra a la superficie de un medio de cultivo hecho a la muestra a la superficie de un medio de cultivo hecho a base de agar y se siembra en el medio ya sea por estrías o base de agar y se siembra en el medio ya sea por estrías o por difusión. Esta operación hace posible adelgazar la por difusión. Esta operación hace posible adelgazar la muestra de tal manera que en la superficie del agar muestra de tal manera que en la superficie del agar quedan las bacterias separadas unas de otrasquedan las bacterias separadas unas de otras
Subcultivos de coloniasSubcultivos de colonias Los subcultivos de colonias son pruebas bioquimicas Los subcultivos de colonias son pruebas bioquimicas
consisten en distintos test químicos aplicados a consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos, los cuales, conocida su reacción, medios biológicos, los cuales, conocida su reacción, nos permiten identificar distintos microorganismos nos permiten identificar distintos microorganismos presentes.presentes.
Su sistema de funcionamiento generalmente consiste Su sistema de funcionamiento generalmente consiste en determinar la actividad de una via metabólica a en determinar la actividad de una via metabólica a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer incorpora o no.cultivo y que la bacteria al crecer incorpora o no.
Para realizar las pruebas bioquímicas se dispone de Para realizar las pruebas bioquímicas se dispone de multiples medios, los cuales se deben aplicar de multiples medios, los cuales se deben aplicar de acuerdo a las exigencias del microorganismo en acuerdo a las exigencias del microorganismo en estudio.estudio.
Morfología Morfología bacteriana bacteriana
microscópicamicroscópica
Morfologia:Morfologia:
Disciplina que se encarga del Disciplina que se encarga del estudio de la forma y estructura estudio de la forma y estructura de un organismode un organismo
TAMAÑO
Morfología bacteriana
microscopio
Tinciones
gram
Ziehl- nelssen
(+)-violeta
(-)-rosa
BAAR(+)
BAAR(-)
forma
estructura
tamaño
Tamaño:Tamaño:
1 micra de diámetro y 0.2 a 3.4 micras de 1 micra de diámetro y 0.2 a 3.4 micras de largo.largo.
bacterias
FormaForma
La forma de las bacterias es muy variada y, a menudo, una misma especie adopta distintos tipos morfológicos, lo que se conoce como La forma de las bacterias es muy variada y, a menudo, una misma especie adopta distintos tipos morfológicos, lo que se conoce como pleomorfismo.pleomorfismo. Formas básicasFormas básicas
Forma esférica
Por ejemplo:
*neumococos
Forma cilíndrica
Por ejemplo:
*Escherichia coli
Forma espiral
Por ejemplo:
*Treponema
pallidum
OtrosOtros
Estructuras constantesEstructuras constantes
*El citoplasma bacteriano es un gel de alta presión osmótica. Al microscopioelectrónico muestra un aspecto finamente granular.
*El nucleoide se destaca en microfotografías por su aspecto hipolúcido. En el se organiza el material genético de la bacteria.
*La membrana citoplasmática, mejor llamada membrana celular, es la fina membrana que protege el citoplasma.
*La pared celular es el soporte físico de la célula y la estructura más externa cuando no existe cápsula.
°Pared celular en bacterias Gram (+):El péptidoglicano se dispone en varias capas lo que le otorga grosor a la pared.Atraviesan el peptidoglicano polisacáridos ácidos, denominados ácidos teicoicos.
°Pared celular en bacterias Gram (-):Su pared celular es más delgada, pero más compleja que la de los Gram (-).
Estructuras accesoriasEstructuras accesorias
Flagelos: Los flagelos son apéndices filamentosos, helicoidales, que se emplean en la movilidad bacteriana.
Fimbrias: Las fimbrias, también llamadas pili, son microfibrillas parecidas a pelos,que rodean en número de 100-200 .Se observan sólo al microscopio electrónico.Esporas: Son el medio de protección al frío, calor, y otros factores del medio ambiente que pueden dañar su interior
BIBLIOGRAFÍASBIBLIOGRAFÍAS Bacteriología clínica Bacteriología clínica
STRUTHERS,J.K,WESTRAN,R.P.STRUTHERS,J.K,WESTRAN,R.P.1 EDICION 20051 EDICION 2005 BARCELONA .BARCELONA . PP.47-51 PP.47-51 Manual procedimientos bacteriológicos en infecciones Manual procedimientos bacteriológicos en infecciones
intrahospitalariasintrahospitalariasSerie de normas técnicas num.28Serie de normas técnicas num.28Rosa sacsaquispe contrerasRosa sacsaquispe contreraspp.32-46pp.32-46 www.med.uchile.cl/apuntes/archivos/2006/medicina/cap2_
morfologia_y_estructura_bacteriana.pdf
Tinciones microbianasTinciones microbianas
Sin colorantes(Examen en Fresco)
Se utiliza un solo colorante(Con tinta china)
Se utilizan varios colorantes combinados.
Los ejemplos clásicos sería la tinción de GRAM o la de Ziehl-Neelsen
Colorantes.Colorantes.Mecanismos de coloración.Mecanismos de coloración.
Tinción Gram.Tinción Gram.Tinción Negativa.Tinción Negativa.
Tinción Ácido-Resistente.Tinción Ácido-Resistente.Tinción de Esporas.Tinción de Esporas.Tinción de Cápsula.Tinción de Cápsula.
Tinte o colorante = cromóforo + Tinte o colorante = cromóforo + auxócromoauxócromo
CROMÓFORO:CROMÓFORO: grupo que provee las grupo que provee las propiedades de propiedades de
color.color.
AUXÓCROMO:AUXÓCROMO: grupo químico que se grupo químico que se ioniza con el cromóforo y forma sales ioniza con el cromóforo y forma sales que se pegan a las fibras y tejidos.que se pegan a las fibras y tejidos.
BÁSICOSBÁSICOS: : tienen carga tienen carga catiónica.catiónica.
La porción del La porción del cromóforocromóforo tiene carga tiene carga positiva, poseen gran afinidad por lospositiva, poseen gran afinidad por los componentes celulares.componentes celulares. Estos tintes son los más utilizados debido aEstos tintes son los más utilizados debido a que las bacterias tienen una superficie conque las bacterias tienen una superficie con carga negativa.carga negativa.Ejemplo: Ejemplo: AZUL DE METILENOAZUL DE METILENO, , CRISTAL VIOLETACRISTAL VIOLETA Y Y
CARBOL FUCSINACARBOL FUCSINA..
Si la porción coloreada actúa como base, se pueden obtener en forma de cloruros.
Se emplea para colorear material ácido. Ejem: núcleos, algunos gránulos y otras
Sustancias ácidas.
Tienen carga aniónica. Tienen carga aniónica. La porción del cromógeno es La porción del cromógeno es
negativa y tienen gran afinidad negativa y tienen gran afinidad por los componentes celulares por los componentes celulares positivos.positivos.
Las sales de sodio, potasio, calcio Las sales de sodio, potasio, calcio o amoniaco de ácidos con color o amoniaco de ácidos con color son ionizados para producir un son ionizados para producir un cromógeno con carga negativa.cromógeno con carga negativa.
Si la porción coloreada actúa como ácido, se obtiene en forma de sales de sodio. Se emplean para colorear material básico.
Ejemplo: citoplasma.
MECANISMOS DE COLORACIÓN
MÉTODOSMÉTODOS
FÍSICOS QUÍMICOS
ADSORCIÓN ABSORCIÓN CAPILARIDAD OSMOSIS
AFINIDAD DECOLORANTES BÁSICOS. AFINIDAD DE COLORANTESÁCIDOS.
COLORANTES SIMPLESCOLORANTES SIMPLES.- Es una solución del colorante. Por lo regular en alcohol o agua.UTILIDADUTILIDAD.-Para apreciar la forma, disposición y el tamaño relativo de la bacteria.No muestran detalles finos de la estructura interna.
♫ Utilizado para observar el tamaño, Utilizado para observar el tamaño, arreglo y forma.arreglo y forma.
♫ Se utiliza un solo tinte.Se utiliza un solo tinte.♫ Tinción directa: se tiñe a la bacteria.Tinción directa: se tiñe a la bacteria.♫ Tinción negativa: tiñe Tinción negativa: tiñe
el fondo pero no ael fondo pero no a
la bacteria.la bacteria.
Es una gran herramienta para separar yEs una gran herramienta para separar y
clasificar los microorganismos observados clasificar los microorganismos observados dede
acuerdo a sus característicasacuerdo a sus características Es mayormente utilizada para visualizar lasEs mayormente utilizada para visualizar las
estructuras como flagelos, cápsulas yestructuras como flagelos, cápsulas y
esporas.esporas. Para ser clasificado como tinción diferencial Para ser clasificado como tinción diferencial
debe tener un colorante primario y un debe tener un colorante primario y un colorante secundario o de contraste.colorante secundario o de contraste.
Ejemplo:Ejemplo: TINCIÓN GRAMTINCIÓN GRAM
Tinciones diferencialesTinciones diferenciales
Tinción de GramTinción de Gram Ácido-alcohol Ácido-alcohol resistenteresistente
cocos y bacilos cocos y bacilos bacilosbacilos GRAM(+) GRAM(-)GRAM(+) GRAM(-) ÁCIDO ALCOHOL ÁCIDOÁCIDO ALCOHOL ÁCIDO ALCOHOLALCOHOL
RESISTENTES RESISTENTESRESISTENTES RESISTENTES
(+) (-)(+) (-)
PREPARACIÓN DEL FROTISPREPARACIÓN DEL FROTIS Prepara el frotisPrepara el frotis Medio líquidoMedio líquido. Se coloca una . Se coloca una
porción del cultivo con el “loop” en porción del cultivo con el “loop” en la laminilla. (Agitar)la laminilla. (Agitar)
Medio sólidoMedio sólido. Se coloca una . Se coloca una gotitagotita de agua destilada en la laminilla y se de agua destilada en la laminilla y se diluye la porción de cultivo en ella. diluye la porción de cultivo en ella. (Se esparce bien).(Se esparce bien).
Secar a temperatura ambiente.Secar a temperatura ambiente. Fijación por calor.Fijación por calor. Limpiar la laminilla con papel de Limpiar la laminilla con papel de
lentes.lentes.
PREPARACIÓN PREPARACIÓN
DE UN DE UN
FROTIS BACTERIANO…FROTIS BACTERIANO…
FROTIS BACTERIANO
Tinción GRAMTinción GRAM TINTE PRIMARIOTINTE PRIMARIO: : Cristal violetaCristal violeta, tiñe la , tiñe la
bacteria de color violetabacteria de color violeta AGENTE MORDIENTEAGENTE MORDIENTE: : LugolLugol, forma un , forma un
complejo insoluble con cristal violeta. Ayuda a complejo insoluble con cristal violeta. Ayuda a adherir el tiente a la célula. Ayuda a resistir la adherir el tiente a la célula. Ayuda a resistir la decoloración.decoloración.
AGENTE DECOLORIZANTEAGENTE DECOLORIZANTE: : Alcohol acetona o Alcohol acetona o alcoholalcohol, el cual sirve como solvente de lípidos y , el cual sirve como solvente de lípidos y agente deshidratante de proteínas.agente deshidratante de proteínas.
CONTRATINTECONTRATINTE: : SafraninaSafranina que tiñe de rojo a la que tiñe de rojo a la bacteria. bacteria.
Preparación de la tinción GramPreparación de la tinción Gram
Preparación del frotis.Preparación del frotis. Cristal violeta (30 segundos-1 minuto)Cristal violeta (30 segundos-1 minuto) Lavar con agua.Lavar con agua. Lugol (1 minuto).Lugol (1 minuto). Lavar con agua.Lavar con agua. Alcohol acetona.Alcohol acetona. Lavar con agua.Lavar con agua. Safranina (45 segundos).Safranina (45 segundos). Lavar con agua.Lavar con agua. Secar con “bibolous paper”Secar con “bibolous paper”
Tinción de GramTinción de Gram
Frotis Cristal violetaSe enjuaga
YodoSe enjuagaAlcohol acetona
Se enjuaga
Se enjuaga Safranina y se enjuaga
Secar
Se enjuaga
Clasificación de las bacterias Clasificación de las bacterias en base a la tinción de Gramen base a la tinción de Gram
Cocos o Cocos o cocos cocos oo
BacilosBacilos bacilosbacilos
Gram (+)Gram (+) Gram Gram (-)(-)
Tinción Ácido-ResistenteTinción Ácido-Resistente
Las familias Las familias MycobacteriaeMycobacteriae y y
NocardiaceaeNocardiaceae son ácido resistente. son ácido resistente. Los microorganismos ácido-Los microorganismos ácido-
resistentes se caracterizan por tener resistentes se caracterizan por tener una pared celular gruesa de cera una pared celular gruesa de cera (lipoidal) que contiene ácido micólico.(lipoidal) que contiene ácido micólico.
Los organismos que son decolorizados Los organismos que son decolorizados por el alcohol no son ácido resistente.por el alcohol no son ácido resistente.
Tinción Ácido-ResistenteTinción Ácido-Resistente
o Tinte primario: CARBOLFUCSINA tinte (5%). Tinte primario: CARBOLFUCSINA tinte (5%). Puede penetrar la pared.Puede penetrar la pared.
o Agente decolorizante – alcohol ácido Agente decolorizante – alcohol ácido (3% HCl + 95% alcohol etílico)-(3% HCl + 95% alcohol etílico)-
o Contratinte: Azul de metileno – se utiliza Contratinte: Azul de metileno – se utiliza
para teñir de azul las bacterias quepara teñir de azul las bacterias que
quedaron incoloras.quedaron incoloras.
Preparación de la tinción ácido -resistentePreparación de la tinción ácido -resistente Preparar un frotis.Preparar un frotis. Carbol fucsina (3 minutos). Utilizar unCarbol fucsina (3 minutos). Utilizar un papel toalla bien impregnado delpapel toalla bien impregnado del reactivo.reactivo. Lavar con agua.Lavar con agua. Decolorizar con alcohol acido.Decolorizar con alcohol acido. Lavar con agua.Lavar con agua. Azul de metileno por 2 minutos.Azul de metileno por 2 minutos. Lavar con agua.Lavar con agua. Secar con “bibolous paper”Secar con “bibolous paper”
Tinción ácido-alcohol resistenteTinción ácido-alcohol resistente
Frotis Carbol fucsina
Emision de vapores
Se lava con aguaAlcohol acidoSe lava con agua
Azul demetilen
o
Se lava con aguaSe deja secar
Tinción de esporas Tinción de esporas Método de Schaffer-FultonMétodo de Schaffer-Fulton
Célula vegetativa – forma metabólicamenteCélula vegetativa – forma metabólicamente
activa = bacterias.activa = bacterias.
Esporas – forma metabólicamente inactiva yEsporas – forma metabólicamente inactiva y
altamente resistente.altamente resistente.
Los miembros del género anaerobioLos miembros del género anaerobio
Clostridium, Desulfotomaculum y BacillusClostridium, Desulfotomaculum y Bacillus
pueden existir metabólicamente activos opueden existir metabólicamente activos o
inactivos. inactivos.
Tinción de esporas Tinción de esporas Método de Schaffer-FultonMétodo de Schaffer-Fulton
Tinte primario: Verde malaquita.Tinte primario: Verde malaquita.
Requiere calor para la penetraciónRequiere calor para la penetración
de este tinte.de este tinte. Agente decolorizante: Agua-Agente decolorizante: Agua-
remueve el exceso de tinte,remueve el exceso de tinte,
decoloriza la célula.decoloriza la célula. Contratinte: Safranina – TiñeContratinte: Safranina – Tiñe
las células vegetativas.las células vegetativas.
Tinción de esporas Tinción de esporas Método de Schaffer-FultonMétodo de Schaffer-Fulton
o Preparar el frotis.Preparar el frotis.
Verde malaquita (2 – 3 minutos)Verde malaquita (2 – 3 minutos)
en calor.en calor.o Dejar enfriar la laminilla y Dejar enfriar la laminilla y
enjuagar con agua y agregar enjuagar con agua y agregar Safranina (30 segundos).Safranina (30 segundos).
o Lavar con agua.Lavar con agua.o Secar con “bibulous paper”Secar con “bibulous paper”
Tinción de esporas Tinción de esporas Método de Schaffer-Método de Schaffer-
FultonFulton
Frotis Verde de malaquitaSe enjuaga
SafraninaSe enjuagaSecar
Se enjuagaSe enjuagaSe enjuaga
Secar
Verde de malaquita
Método de Bartholomew y Método de Bartholomew y MittwerMittwer
1.1. Fijar la extensión pasándola por una Fijar la extensión pasándola por una llama.llama.
2.2. Teñir durante 10 minutos con verde Teñir durante 10 minutos con verde malaquita saturada en agua sin calor.malaquita saturada en agua sin calor.
3.3. Enjuagar durante 10 segundos debajo Enjuagar durante 10 segundos debajo del grifo.del grifo.
4.4. Agregar el contratinte que es la Agregar el contratinte que es la Safranina acuosa al 0.25% durante 15 Safranina acuosa al 0.25% durante 15 segundos.segundos.
5.5. Enjuagar y secar.Enjuagar y secar.Las esporas se tiñen de verde el resto de Las esporas se tiñen de verde el resto de las células de rojo.las células de rojo.
Método de Bartholomew y MittwerMétodo de Bartholomew y Mittwer
Fijar a calorVerde de malaquita Se enjuaga (10 min)
Safranina acuosaSe enjuagaSecar
Tinción de cápsulaTinción de cápsula
Cápsula – estructura gelatinosa Cápsula – estructura gelatinosa secretada por algunas bacterias.secretada por algunas bacterias.
Las células que tienen cápsula son Las células que tienen cápsula son virulentas y causan enfermedades virulentas y causan enfermedades ya que protegen a la célula de la ya que protegen a la célula de la acción fagocítica del hospedero.acción fagocítica del hospedero.
La mayoría de las cápsulas están La mayoría de las cápsulas están compuestas de polisacáridos, por compuestas de polisacáridos, por lo que son solubles en agua.lo que son solubles en agua.
Método de MuirMétodo de Muir
1.1. Preparar una película delgada y uniforme Preparar una película delgada y uniforme de la bacteria. Cubrir con una tira de papel de la bacteria. Cubrir con una tira de papel de filtrar e inundar con fucsina fenicada de filtrar e inundar con fucsina fenicada de Ziehl-Neelsen. Calentar hasta que se de Ziehl-Neelsen. Calentar hasta que se evapore durante 30 segundos.evapore durante 30 segundos.
2.2. Enjuagar con alcohol, luego con agua.Enjuagar con alcohol, luego con agua.3.3. Añadir el mordiente ac. tanico durante 15 Añadir el mordiente ac. tanico durante 15
ó 30 seg. Y lavar.ó 30 seg. Y lavar.4.4. Decolorar con alcohol hasta que esté de Decolorar con alcohol hasta que esté de
color rosa.color rosa.5.5. Lavar con agua.Lavar con agua.6.6. Agregar el contratinte (azul de metileno) Agregar el contratinte (azul de metileno)
por 30 seg.por 30 seg.7.7. Permitir que se seque al aire y examinar.Permitir que se seque al aire y examinar.
Método de MuirMétodo de Muir Es un método de coloración de la cápsula Es un método de coloración de la cápsula
bacterianabacteriana
Colorante primarioColorante primario: Fucsina Fenicada: Fucsina Fenicada
DecoloranteDecolorante: Agua: Agua
Mordiente: Mordiente: Ácido tánicoÁcido tánico
Contratinte: Contratinte: Azul metilenoAzul metileno
Método de MuirMétodo de Muir
Fucsina fenicadaEmisión de vapores
Se lava con alcohol y luego con aguaMordiente Ac. tánico
Enjuagar
Se decolora hasta
que quede rosa
Contratinte azul de metileno Se deja secar
Tinción de cápsula por Tinción de cápsula por el método de Hissel método de Hiss
Tinte primario – Cristal Violeta 1% - tiñeTinte primario – Cristal Violeta 1% - tiñe todo el frotis color oscuro o fuscina basica.todo el frotis color oscuro o fuscina basica.
Decolorizante y Contratinte – Sulfato de CobreDecolorizante y Contratinte – Sulfato de Cobre 20% - se usa para enjuagar el tinte primario.20% - se usa para enjuagar el tinte primario.
No se enjuaga con agua porque la cápsula esNo se enjuaga con agua porque la cápsula es soluble en agua. – función de decolorizante.soluble en agua. – función de decolorizante.
El CuSOEl CuSO44 es absorbido en el material de la es absorbido en el material de la cápsula que ha sido decolorizada – función decápsula que ha sido decolorizada – función de contratinte.contratinte.
Preparación de Tinción de Preparación de Tinción de Cápsula método de HissCápsula método de Hiss
o Preparación de un frotis cargado.Preparación de un frotis cargado.
o Dejar secar a temperatura ambiente.Dejar secar a temperatura ambiente.
o Cristal violeta 1% (5 – 7 minutos)Cristal violeta 1% (5 – 7 minutos)
o Enjuagar con CuSO4Enjuagar con CuSO4
o Secar con “bibulous paper”Secar con “bibulous paper”
Método de HissMétodo de Hiss1.1. Hacer crecer los organismos en Hacer crecer los organismos en
líquido ascítico o en medio sérico, líquido ascítico o en medio sérico, mezclar con una gota de suero y mezclar con una gota de suero y preparar sus extensiones.preparar sus extensiones.
2.2. Secar las extensiones al aire y fijar Secar las extensiones al aire y fijar por calor.por calor.
3.3. Teñir con cristal violeta o fuscina Teñir con cristal violeta o fuscina basica durante unos segundos, basica durante unos segundos, calentando, hasta que aparezca la calentando, hasta que aparezca la coloración.coloración.
4.4. Lavar con una solución de sulfato de Lavar con una solución de sulfato de cobre al 20%.cobre al 20%.
5.5. Secar con papel secante y examinar.Secar con papel secante y examinar.
Método de HissMétodo de HissSolucionesSoluciones
Fucsina básica (con un 90% Fucsina básica (con un 90% de colorante) de 0.15 a 0.3 gde colorante) de 0.15 a 0.3 g
Violeta cristal (85% de Violeta cristal (85% de colorante) 0.5 a 0.1 gcolorante) 0.5 a 0.1 g
Agua destilada 100mlAgua destilada 100ml
Sulfato de cobre al 20%Sulfato de cobre al 20%
Método de HissMétodo de Hiss
Extensión del frotis
Fijar con calorSulfato de
cobre al 20%
Deja secar
Violeta cristal
BIBLIOGRAFIABIBLIOGRAFIAMICROBIOLOGIAMICROBIOLOGIAPrescott HarleyPrescott HarleyEditorial MC-Graw-HillEditorial MC-Graw-HillInteramericanaInteramericana4edición4edición
MICROBIOLOGIA MEDICAMICROBIOLOGIA MEDICAPatrick R. MuradPatrick R. MuradMichael A. DpallerMichael A. Dpaller2° edición2° ediciónEditorial Harcourt BraceEditorial Harcourt Brace
MICROBIOLOGIAMICROBIOLOGIAMart FrobisherMart FrobisherRobert FuertRobert FuertEditorial PanamericanaEditorial PanamericanaMéxico D.F.México D.F.
Las vías respiratorias Las vías respiratorias altasaltas
El sector alto comprende: la boca, la nariz, El sector alto comprende: la boca, la nariz, fosas nasales, los senos paranasales y la fosas nasales, los senos paranasales y la
faringe junto con las amígdalas, el oído medio faringe junto con las amígdalas, el oído medio y la epiglotis.y la epiglotis.
Flora normal de las vías Flora normal de las vías respiratorias altasrespiratorias altas
En el individuo normal únicamente las vías En el individuo normal únicamente las vías respiratorias altas (fosas nasales y faringe) están respiratorias altas (fosas nasales y faringe) están colonizados por flora normal. Los senos colonizados por flora normal. Los senos paranasales y el oído medio son estériles.paranasales y el oído medio son estériles.
La boca: se localizan La boca: se localizan Streptococcus salivarius,Streptococcus salivarius,
Streptococcus mutans,Streptococcus mutans, PeptostreptococcusPeptostreptococcus y y LactobacillusLactobacillus principalmente. principalmente.
Las fosas nasales: aquí Las fosas nasales: aquí se encuentran se encuentran microorganismos característicos de la piel microorganismos característicos de la piel como como StaphylococcusStaphylococcus epidermidisepidermidis y y especies de especies de Corynebacterium. Corynebacterium.
También están presentes: También están presentes: Peptostreptococcus Peptostreptococcus spp.spp., , Bifidobacterium sppBifidobacterium spp. y . y Actinomyces sppActinomyces spp. . Los bacilos que se encuentran, generalmente Los bacilos que se encuentran, generalmente son son Fusobacterium sppFusobacterium spp. y . y Bacteroides sppBacteroides spp. .
Suelen encontrarse especies no patógenas de Suelen encontrarse especies no patógenas de NeisseriaNeisseria y y StreptococcusStreptococcus β-hemolíticos no β-hemolíticos no pertenecientes al grupo A, y no causan daños pertenecientes al grupo A, y no causan daños en individuos sanos que sólo son portadores.en individuos sanos que sólo son portadores.
La faringe: en la faringe la flora normal está compuesta principalmente por Streptococcus α-hemolíticos o Streptococcus viridans; además diferentes especies de Lactobacillus, Propionibacterium, Corynebacterium y Moraxella catarrhalis.
Flora patógena de las vías Flora patógena de las vías altasaltas
El aparato respiratorio se divide en dos sectores anatómicos : alto yEl aparato respiratorio se divide en dos sectores anatómicos : alto y
Bajo. Las vías respiratorias patógenas superiores se extienden desde Bajo. Las vías respiratorias patógenas superiores se extienden desde los orificios desde los orificios nasales hacia la laringe y comprende la los orificios desde los orificios nasales hacia la laringe y comprende la
nasofaringe, y la orofaringe, a los senos para nasales, trompa de nasofaringe, y la orofaringe, a los senos para nasales, trompa de Eustaquio y el oído medio.Eustaquio y el oído medio.
Bacterias patógenas de las vías Bacterias patógenas de las vías respiratorias altasrespiratorias altas
Los microorganismos que se aíslan con mayor frecuencia de procesos Los microorganismos que se aíslan con mayor frecuencia de procesos infecciosos de vías respiratorias son:infecciosos de vías respiratorias son:
Streptococcus ß- hemolíticos (S. pyogenes, S. agalactiae)Streptococcus ß- hemolíticos (S. pyogenes, S. agalactiae) Staphylococcus aureus.Staphylococcus aureus. Neisseria meningitidis Neisseria meningitidis Pseudomonas aeruginosa. Pseudomonas aeruginosa. Klebsiella pneumoniae.Klebsiella pneumoniae. Haemophilus influenza tipo B.Haemophilus influenza tipo B. Escherichia coliEscherichia coli
Vías respiratorias bajasVías respiratorias bajas
Las vías respiratorias bajas o inferiores Las vías respiratorias bajas o inferiores son: la son: la laringe, la tráquea, los bronquios, laringe, la tráquea, los bronquios, los alvéolos y los pulmones.los alvéolos y los pulmones.
Flora normal de las vías Flora normal de las vías respiratorias bajasrespiratorias bajas
Las vías respiratorias bajas esta constituida por:Las vías respiratorias bajas esta constituida por: bronquios bronquios PulmonesPulmones
El cual se hallan de provistos El cual se hallan de provistos
de flora microbiana estable.de flora microbiana estable.
Vías respiratorias bajas Vías respiratorias bajas (flora normal)(flora normal)
La Flora normal en vías respiratorias bajas con La Flora normal en vías respiratorias bajas con frecuencia esta constituida por bacterias frecuencia esta constituida por bacterias raramente patógenas como;raramente patógenas como;
Estreptococos no hemolíticos.Estreptococos no hemolíticos. Micrococcus Micrococcus CoryunebacteriumCoryunebacterium Staphylococcus coagulasa negativaStaphylococcus coagulasa negativa Lactobacillus Lactobacillus Espiroquetas Espiroquetas
Flora patógena de las vías Flora patógena de las vías respiratorias bajasrespiratorias bajas
Existen microorganismos patógenos que Existen microorganismos patógenos que atacan principalmente los pulmones y son atacan principalmente los pulmones y son causantes de enfermedades graves; algunas causantes de enfermedades graves; algunas bacterias son: bacterias son: Pseudomonas aeruginosaPseudomonas aeruginosa, , Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus, , Haemophilus influenzaeHaemophilus influenzae y y Burkholderia cepaciaBurkholderia cepacia. .
Además también Además también S. pneumoniaeS. pneumoniae, , Aspergillus fumigatusAspergillus fumigatus, , A.flavusA.flavus y y Candida Candida albicans albicans son bacterias patógenas, aunque son bacterias patógenas, aunque esta última es un hongo.esta última es un hongo.
Flora normal y patógena del tracto Flora normal y patógena del tracto GenitourinarioGenitourinario
FLORA NORMAL Y FLORA NORMAL Y PATOGENA:PATOGENA:
Se denominaSe denomina flora normal flora normal al conjunto de al conjunto de microorganismos que viven de forma habitual en un microorganismos que viven de forma habitual en un cuerpo sano. Estos se incluyen en la participación de cuerpo sano. Estos se incluyen en la participación de los procesos de digestión de alimentos y de síntesis los procesos de digestión de alimentos y de síntesis de vitaminas en el intestino, la producción del pH de vitaminas en el intestino, la producción del pH ácido de la vagina o la ácido de la vagina o la protección competitiva protección competitiva frente frente a patógenos. a patógenos. ..Los tratamientos con antibióticos de amplio espectro o Los tratamientos con antibióticos de amplio espectro o la acción antiséptica de algunos productos de limpieza la acción antiséptica de algunos productos de limpieza (jabones, por ejemplo) pueden alterar la flora normal (jabones, por ejemplo) pueden alterar la flora normal lo que, en ocasiones, deja la puerta abierta para el lo que, en ocasiones, deja la puerta abierta para el desarrollo de procesos infecciosos oportunistas que desarrollo de procesos infecciosos oportunistas que pueden llegar a ser graves.pueden llegar a ser graves.
FLORA PATOGENA:FLORA PATOGENA:
- Escherichia coli- Proteus- Pseudomonas aeruginosa- Streptococcus pyogenes- Staphylococcus aureus- Enterococos
FLORA PATÓGENA:FLORA PATÓGENA:- Mycobacterium tuberculosis- Salmonella sp- Serratia- Herellea- Klebsiella- Enterobacter- Staphylococcus epidermis-Streptococcus sobre todo alfa hemoliticos- Enterococcus feacalis- Proteus- Staphylococcus saprophyticus- Neisseriae- Haemophylus - Corynebacterium
- Gardenella- Enterobacter- Escherichia coli- Aeruginosa- Streptococcus pyogenes- Staphylococcus aureus- Providencia- Acinetobacter- Pseudomonas- Enterococos- Staphylococos coagulasa negativa- Levaduras- Corinebacterias- Bacilos gramnegativos- En pacientes con sondas permanentespuede aparecer candida en la orina
Enfermedades producidas Enfermedades producidas La infección genitourinaria se La infección genitourinaria se
define como la presencia de define como la presencia de gérmenes en los órganos gérmenes en los órganos reproductores y excretores. reproductores y excretores. Ejemplos:Ejemplos:
CistitisCistitis DismenorreaDismenorrea GonorreaGonorrea ProstatitisProstatitis vulvovaginitis vulvovaginitis
BACTERIAS GRAM BACTERIAS GRAM POSITIVASPOSITIVAS
Se denominan Se denominan bacterias Gram bacterias Gram positivaspositivas a aquellas bacterias que a aquellas bacterias que
se tiñen de azul oscuro o se tiñen de azul oscuro o violeta por la tinción de gram: de violeta por la tinción de gram: de
aquí el nombre de "Gram positivas"aquí el nombre de "Gram positivas"
Esta característica está íntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular por lo que refleja un tipo natural de organización bacteriana
La envoltura celular de las bacterias Gram positivas comprende la membrana citoplasmática y una pared celular compuesta por una gruesa capa de peptidoglucano , que rodea a la anterior.
Incluyen especies tanto móviles (vía flagelos) como inmóviles con forma de bacilo (bacillus clostridium , corynebacterium ,lactobacillus ,listeria ) o coco (staphylococcus , streptococcus); con gruesas paredes celulares o sin ellas (micoplasma).
La Familia Micrococcaceae comprende cocos Grampositivos, no exigentes, catalasa positivos, conagrupación en racimos, aerobios o anaerobiosfacultativos.
La familia Comprende 3 Géneros:
MicrococcusStaphylococcusPlanococcus
Los micrococos son células esféricas dispuestas en masas irregulares, racimos, tétradas o paquetes. Son Gram Positivas, aerobios, y catalasa Positivos.
Son cocos Gram + se agrupan formando pares o racimos, anaerobias facultativasno presentan esporasla mayoría de las especies no presentan cápsulametabolismo fermentativoinmóvilesCatalasa Positiva
BibliografíasBibliografíasMicrobiología Medica
Romero CabelloEditorial PanamericanaMéxico, 2000
Microbiología Medica Jawetz E. MlnickEditorial El manual moderno1998
MicrobiologíaTay LaraEditorial Mendez1993
Microbiología MedicaMurray P. DrewEditorial Mosby1996
http://www.monografias.com/trabajos15/micrococcaceae/micrococcaceae.shtml
http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp10.pdf
http://www.docencia.izt.uam.mx/smk/233155/material_adicional/bacteria4.ppt.com
ESTAFILOCOCOS
TAXONOMÍA
REINO: PROCARIOTAEDIVISIÓN: FIRMICOTESCLASE: FIRMIBACTERIA
ORDEN: MICROCOCALESFAMILIA: MICROCOCCACEA
GENERO: STAPHYLOCOCCUS Ó MICROCOCCUS
ESPECIE: AUREUS, PYOGENES, EPIDERMIS
ESTAFILOCOCOS
SON PRODUCENSUS CONDICIONES PARA CRECER
SONGRAM(+)
NO MOTILES
CELULAS ESFERICASNO FORMAN ESPORAS
MIDEN 1 um DE DIAMETRO
SE DISTRIBUYEN EN CUMULOS
IRREGULARES:RACIMO DE UVAS
EN CULTIVOS SE ENCUENTRAN:COCOS AISLADOS
PARESTETRADASCADENAS
AL ENVEJECER MUCHAS SE VUELVEN GRAM(-)
AEROBIAS YMICROAEROFILAS
REDONDASLISAS
ELEVADASRESPLANDECIENTES
LAS COLONIAS SON
SAL Y MANITOL
AGAR SANGREMEDIOS BACTERIOFAGOS
S. AUREUSFORMA
COLONIASCOLOR
GRIS A AMARILLO ODORADO INTENSO
SUS COLONIAS SONGRISES A BLANCAS
S.EPIDERMIDIS
CATALASA
ACIDO LACTICOPERO NO
GAS
PRODUCEN
CARBOHIDRATOS
FERMENTAN
CLASIFICACION
S. epidermidis
HAY TRE ESPECIES DE ESTAFILOCOCOS:
S. aureus
S. saprophtrycus
Fibrinolisina
Penicilasa
Nucleasa
Lipasas
Hialurinasa
Catalasa
EnzimasEstafilococócicas
ENZIMAS
CATALASA
COAGULASA
OTRAS ENZIMAS
LOS ESTAFILOCOCOS LA PRODUCEN, CONVIERTENAL PEROXIDO DE HIDROGENO
EN AGUA Y OXIGENO
S.AUREUS LA PRODUCE, COAGULA EL PLASMA OXALATADOO CITRATO EN PRESENCIA DE UN FACTOR CONTENIDO
EN MUCHOS SUEROS
HIALURONIDASA Y ESTAFILOCINASA
TOXINAS
EXOTOXINAS
LEUCOCIDINA
T.EXFOLIATIVA
T. SINDROME DE CHOQUE TOXICO
PRODUCEN NECROSIS DE LA PIEL, CONTIENENHIDROLISINAS SOLUBLES SE SEPARAN POR
ELECTROFORESIS
TOXINA DE S. AUREUS. MATA A LOS LEUCOCITOS
TOXINA DE S. AUREUS CONSTITUIDAPOR DOS PROTEINAS QUE PRODUCEN
DESCAMACION
PRODUCE FIEBRE, CHOQUE Y ERUPCION CUTANEAY DESCAMACION
PATOGENIA
S. AUREUS
MIEMBRO DE
FLORA NORMAL DE LA PIEL, DE VIASRESPIRATORIAS Y GASTROINTESTINALES DEL HOMBRE
SE ENCUENTRAN EN
ROPAS PERSONALES, ROPAS DE CAMA Y OTROS FORMES DE LOS AMBIENTES HUMANOS
LAS CEPAS INVASORAS Y PATOGENAS PRODUCEN
COAGULASA Y PIGMENTO AMARILLO Y
SON HEMOLITICAS
LAS NO INVASORAS Y NO PATOGENAS
TIENDEN A SER NEGATIVOS A LACOAGULASA
Y NO HEMOLITICOS
PATOGENIA DE LAS INFECCIONES
LAS PERSONAS MAS SUCEPTIBLES SON
LOS PORTADORES SON EL DEPOSITOO RESERVORIO
PARA LA DISEMIANCION DE INFECCIONES
NEONATOS
PACIENTESQUIRURGICOS
QUEMADOS
ENFERMEDADGRANULOMATOSA
CRONICA
PRODUCEN
INFECCION CUTANEA
OSTEOMIELITIS Y ENTERITIS
NEUMONIA
EXUDADOSFARNGEOS
MUESTRAS DE SANGRE CULTIVADA
EN AGAR SANGRE
CULTIVOS AISLADOS EN BUSCA DE LA PRODUCCION DE
COAGULASA
DIAGNOSTICO
BIBLIOGRAFIABIBLIOGRAFIA
• MICROBIOLOGIA MEDICAVOLK+BENJAMIN+KADNER+PARSONS3ª EDICIONINTERAMERICANA+Mc Graw- HillMEXICO DFPP 368-389
• DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICOKONEMAN WELMER, ALLEN, DOWELL.SOMMERSARGENTINAEDIT MEDICA PANAMERICANA19851ª EDICIONPP 291-312• WWW.CUATROMEDICOS.COM/TEMAS/COCOS _ POSITIVOS/BACTERILGIA.HTM
Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus
Staphylococcus aureus
ESTRUCTURAMICROBIANBA
CAPSULA PEPTIDOGLUCANO PROTEINA A ACIDO TEICOICO MEMBRANA
CITOPLASMICA
Inhibe la opsonizacion y la fagocitosis.
Protege la destrucción leucocitaria medida
Por C
Estabilidad osmóticaEstimula la producción
De pirogenosEndogenos
Inhibe la fagocitosis y laquimiotaxis
Inhibe la opsonizacionY la fagocitosis.
Quimiotaxis de losLeucocitos.
Efecto
Regula la concentraciónCationica en la
Membrana celular.Receptor de
Bacteriófagos.Lugar de adherencia
para los receptores deLa superficie mucosa
Barrera osmótica.Regula el transporte
dentro y Fuera de la célula.
Lugar donde se encuentran las
Enzimas biosinteticas y Respiratorias.
ESTRUCURA ESTRUCURA MICROBIANA DEL S. MICROBIANA DEL S. aureusaureus
CÁPSULACÁPSULA
PEPTIDOGLUCANOPEPTIDOGLUCANO
PROTEÍNA APROTEÍNA A
ÁCIDO TEICOICOÁCIDO TEICOICO
MEMBRANA MEMBRANA CITOPLASMICACITOPLASMICA
CITOPLASMACITOPLASMA
PRODUCTOS EXTACELULARES O ENZIMAS
CATALASA COAGULASA
HIALURONIDASA FIBRINOLISINA
LIPASAS NUCLEASA
PENICILASAOTROS PRODUCTOS: DE LIMO,CAPSULA Y PARED CELULAR.
ECUACION DE LA ECUACION DE LA CATALASA:CATALASA:
2H2H22OO2 2 2H 2H22O + 0O + 022
Diagnóstico de laboratorioDiagnóstico de laboratorio
Bibliografías Bibliografías Romero Cabello RaúlRomero Cabello Raúl
Microbiología y parasitología humanaMicrobiología y parasitología humana
Edit. PanamericanaEdit. Panamericana
México 1999México 1999
Pág. 567-568Pág. 567-568
Jawetz, Melnick, AbelbergJawetz, Melnick, Abelberg
Microbiología MédicaMicrobiología Médica
Edit. Manual ModernoEdit. Manual Moderno
México 2002México 2002
Pág. 219-224, 737Pág. 219-224, 737
Murray P. RMurray P. R
Microbiología MédicaMicrobiología Médica
Edit. MosbyEdit. Mosby
Pág.234-236Pág.234-236
España 1996España 1996
StreptococcusStreptococcus
REINO: PROCARIOTAE
DIVISIÓN: FIRMICOTES
CLASE: FIRMIBACTERIA
ORDEN: MICROCOCALES
FAMILIA: STREPTOCOCCACEAE
GÉNEROS: STREPTOCOCCUS
PEDIOCOCCUS AEROCOCCUS
PLANOCOCCUS
TAXONOMIATAXONOMIA
FORMA E IDENTIFICACION
SON
COCOS INDIVIDUALES
ESFERICOS U OVOIDES
SE DISPONEN EN CADENAS
CELULAS GRAM (+)
NO MOVILES
ANAEROBIOS OBLIGADOS
ANAEROBIOS AEROTOLERANTES
MIDEN 0.5-1.20 um DE DIAMETRO
CRECEN EN
FORMAN
SE CULTIVAN EN
MEDIOS SÓLIDOS
MIDEN DE 1 A 2 MILIMETROS DEDIAMETRO
COLONIAS DISCOIDALES
LAS CEPAS DEL GRUPO ADAN LUGAR A COLONIAS
MUCOIDES
AGAR SANGRE
SU ENERGIA ESOBTENIDA DE
SU CRECIMIENTOES POBRE EN
SU TEMPERATURA PARA CRECER ES
AZUCARES
MEDIOS SÓLIDOSCOMO EN CALDO
ESTREPTOCOCOSHEMOLITICOS
37º C
ENTEROCOCOSGRUPO D15 Y 45º C
ESTRUCTURA ANTIGENICA
ANTIGENO ESPECIFICO PROTEINA M SUBSTANCIA T NUCLEOPROTEINAS
PROPORCIONA
INTERFIERE EN
PRESENTE EN
ES
SU ESPECIFICIDAD ES DETERMINADAPOR
DETERMINA
DIFERENCIA
ES
DENOMINADA
FORMAN
ESTREPTOCOCOS GRUPO B
ESTREPTOCOCOS GRUPO A
AMINOAZUCAR
LA BASE PARA EL AGRUPAMIENTO SEROLOGICO
ESTREPTOCOCOS GRUPO C
ESTREPTOCOCOS GRUPO D
ESTREPTOCOCOS GRUPO F
SUBSTANCIA RELACIONADA CON LA VIRULENCIA DE
ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO A
M.O. QUE PRODUCEN COLONIAS ENMARAÑADAS
O COLONIAS MUCOIDES
LA INESTION DE ESTREPTOCOCOSVIRULENTOS
POR CELULAS FAGOCITARIAS
ESPECIFICIDAD DEL TIPO DE ESTREPTOCOCOSDEL GRUPO A
ANTIGENO NO SE RELACIONA
CON LA VIRULENCIA DE LOS
ESTREPTOCOCOS, ES TERMO
Y ACIDO LABIL
ALGUNOS TIPOS DE ESTREPTOCOCOS POR
AGLUTINACION CONANTISUEROSESPECIFICOS
SUBSTANCIA P
LA MAYORIA DEL CUERPO
CELULARDEL
ESTREPTOCOCO
ESTREPTOCOCOS GRUPO B
ESTREPTOCOCOS GRUPO A
AMINOAZUCAR
ESTREPTOCOCOS GRUPO C
ESTREPTOCOCOS GRUPO D
ESTREPTOCOCOS GRUPO F
RAMNOSA N-ACETILGLUCOSAMINA
RAMNOSA N-ACETILGALACTOSAMINA
POLISACARIDO DE GLUCOSAMINA-RAMNOSA
ACIDO TEICOICO GLICEROL
GLUCOPIRANOSIL N-ACETILGALACTOSAMINA
TOXINAS
TOXINAERITROGENA
HEMOLISINASDIFOSFOPIRIDI
NNUCLEOTIDASA
ES
PROVOCA
ELABORADA POR
SOLUBLE Y DESTRUIDAMEDIANTE LA EBULLICION
DURANTE UNA HORA
EL EXANTEMA QUE SE PRESENTA EN LA ESCARLATINA
ESTEPTOCOCOS LISOGENOS
ROMPIMIENTOCOMPLETO
DE ERITROCITOSCON LALIBERACION DE LA
HEMOGLOBINA
LISIS INCOMPLETADE ERITROCITOSCON FORMACIONDE UN PIGMENTO
VERDE
ESTREPTOLISINAS
ALFA HEMOLISISB-HEMOLISIS
GRUPO A PRODUCE
OS
ELABORADA POR
RELACIONADACON
ESTREPTOCOCOS
LA CAPACIDAD DELM.O.
PARA MATARA LOS LEUCOCITOS
HIALURONIDASA ESTREPTODORNASA
ESTEPTOCINASA
ENZIMAS
ES
CONSTITUYENTE DE
FAVORECE
SON
ENZIMA QUE DESDOBLAAL ACIDO HIALURONICO
SUBSTANCIAINTRACELULAR DELTEJIDO CONJUNTIVO
DISEMINACIONDE LOS
M.O.INFECTANTES
ANTIGENICAS YESPECIFICAS PARA
CADA BACTERIAO TEJIDO DEL
CUAL SE OBTENGAN
LLAMADA
DESPOLIMERIZA
SE DETERMINA
DESOXIRRIBONUCLEASAESTREPTOCOCICA
DNA
MIDIENDO LA DISMINUCION
DE LA VISCOCIDAD DE SOLUCIONES
CONOCIDAS DE DNA
LLAMADA
PRODUCIDA POR
PROVOCA
ADMINISTRADA PARA
FIBRINOLISINA
CEPAS DE ESTREPTOCOCOS B-HEMOLITICOS
TRASFORMACIONDEL PLASMINOGENO
EN PLASMINA
TRATAMIENTODE EMBOLIAS PULMONARES
Y DE TROMBOSISVENOSAS
CLASIFICACION
SE BASA EN
MORFOLOGIA COLONIAL Y HEMOLISIS EN LASPLACAS DE AGAR SANGRE
PRUEBAS BIOQUIMICAS Y RESISTENCIA A FACTORES FISICOSY QUIMICOS
ESPECIFICIDAD SEROLOGICA DE SUBSTANCIAESPECIFICA DEL GRUPO Y OTROS ANTIGENOS CAPSULARES O DE
LA PARED CELULAR
CARACTERISTICAS ECOLOGICAS
POR MOTIVOS DE CONVIVENCIA
ESTREPTOCOCOSBETA HEMOLITICOS
ESTREPTOCOCOS NO
BETA HEMOLITICOS
PEPTOESTREPTOCOCOS
ESTREPTOCOCOS BETA HEMOLITICOS
PRODUCENELABORANSE CLASIFICAN
EN
HEMOLISINASCARBOHIDRATOS
ESPECIFICOS DEL GRUPO
GRUPO A GRUPO B GRUPO C Y G GRUPO D GRUPO E,F,H Y
K-U
S.PYOGENESESEL PRINCIPAL
PATOGENOPARA ELHOMBRE
SENCIBLES A BACITRACINA
SE PRESENTA EN LA
FARINGE CAUSANDOSINUSITIS
BACTERIEMIAO ENDOCARDITIS
OCURREN EN ANIMALESS. AGALACTIAE
ES MIEMBRO NORMAL DE
LA FLORANORMAL
DEL APARATOGENITAL
FEMENINO, CAUSASEPSIS
NEONATAL Y MENINGITIS
ENTEROCOCOS:S. FAECALISDIS
S.FACCIUM SE
DESARROLLAN EN MEDIOS
CONCONCENTRACIONES
DE NaCl
NO ENTEROCOCOS:
S.BOVISS.EQUINUSPROVOCAN
INFECCIONESEN VÍAS
URINARIASO ENDOCARDITIS
ABARCA
ESTREPTOCOCOS NO BETA HEMOLITICOS
PRESENTAN
LOS MIEMBROS SON
S. PNEUMONIAENEUMOCOCO
ESTREPTOCOCO VIRIDANS
SOLUBLES EN BILIS
S.SALIVALISS.SANGUIS
S.MITISS.MUTANS
HEMOLISIS ALFA
SONINCLUYE
PEPTOESTREPTOCOCOS
SE DESARROLLAN EN
PRODUCEN
SON PARTE DE
CONDICIONESANAEROBIAS O
MICROAEROFILAS
HEMOLISIS VARIABLES
FLORA NORMALDEL APARATO GENITAL
FEMENINO
PATOGENIA Y DATOS CLINICOS
SON
ENFERMEDAD ATRIBUIBLE A LA
INVASION
ENFERMEDAD ATRIBUIBLE AL
GRUPO Y A SUS PRODUCTOS
ENDOCARDITISINFECCIOSA
ENFERMEDADESPOSETREPTOCOCICAS
S.PYOGENES:LA INFECCIONSE EXTIENDE
A LACIRCULACIONSANGUINEA Y
PRESENTA:ERISIPELA
FIEBRE PUERPERALINFECCION
GENERALIZADA
FARINGITISESTREPTOCOCICA:
LOS ESTREPTOCOCOS VIRULENTOSDEL GRUPO ASE ADHIERENAL EPITELIO
DE LA FARINGEPOR MEDIODEL ACIDO
LIPOTEICOICO
PIODERMAESTREPTOCOCICA:
INFECCION DE LAS CAPAS SUPERFICIALES EN NIÑOS
CONOCIDA COMOIMPETIGO
ENDOCARDITISAGUDA:
NEUMOCOCOS U OTRAS BACTERIAS
SE DEPOSITANSOBRE VALVULAS
CARDIACAS O CON DEFORMACIONES
ENDOCARDITISSUBAGUDA:
AFECTA VALVULASANORMALES
CARACTERIZADA POR FIEBRE
ANEMIABAZO CRECIDO
GLOMERULONEFRITISAGUDA:
SE PRESENTA ENPERSONAS 3 SEMANAS
DESPUES DE LA INFECCION
FIEBRE REUMATICA:ES SECUELA MAS GRAVE
DE INFECCIONESLOS SINTOMAS SON:
FIEBREMALESTAR
POLICARDITIS MIGRATORIA NO
SUPURADA
PUEBAS DIAGNOSTICAS DE LABORATORIO
MUESTRAS FROTIS CULTIVOSPUEBAS
SEROLOGICAS
LAS MUESTRASSE OBTIENEN
DEPENDIENDODE LA INFECCION
FROTIS DE GARGANTA
PUSSANGRE PARA
CULTIVOEL SUERO SIRVE
PARA LA DETERMINACIONDE ANTICUERPOS
COCOS AISLADOSO EN PARES
MAS QUE CADENASDEFINDAS
EXUDADOS PURULENTOS PLACAS DE
AGAR SANGRE
EN OCASIONES SON COCOS GRAM(-)DEBIDO A QUE M.O. YA NO SON
VIABLES Y HAN PERDIDOSU CAPACIDAD DE RETENER COLORANTE
AZUL Y DE SER GRAM(+)
LOS HEMOCULTIVOS DESARROLLAN
ESTREPTOCOCOS HEMOLITICOSDEL GRUPO A
ELISA
METODOS ENZIMATICOS O QUIMICOS
EJEMPLOS
HECHOS A PARTIRDE LAS MUESTRAS
SE CULTIVAN ENHAY
COMO
MUESTRAN
TRATAMIENTO
ESTRREPTOCOCOS BETA HEMOLITICOS GRUPO A
PENICILINA GERITROMOCINATETRACILINAS
ESTREPTOCOCOS ALFA HEMOLITICOSY ENTEROCOCOS
PUEBAS DESENCIBILIDAD
A LOS ANTIBIOTICOS
SON SENCIBLESA
SE DETERMINANPOR
EPIDEMIOLOGIA, PREVENCION Y CONTROL
SE DISEMINANPOR
GOTAS DEL APARATORESPIRATORIO
O DE LA PIEL
SE CONTAMINANPOR
SECRECIONES NASALESEL PAPEL DE LA CAMA
CONTAMINADAUTENCILIOS
O ROPA
SE PREVIENENPOR
LA ADMINSTRACIONDE AGENTES
ANTIMICROBIANOSEN
INTERVENCIONESQUIRURGICAS
SE CONTROLA POR
HALLAZGO Y TERAPEUTICAANTIMICROBIANA INTENSIVA
TEMPRANA DE LAS INFECCIONESRESPIRATORIAS Y CUTANEAS
QUIMIOPROFILAXISANTIESTREpTOCOCICA EN
PERSONAS QUE HAN SUFRIDO UN ATAQUE DE FIEBRE REUMATICA
ERRADICACION DE LOS ESTREOTOCOCOS DEL GRUPO A DE LOS PORTADORES
CONTROL DE POLVO ,VENTILACIONFILTRACION DEL AIRE, LUZ ULTRAVIOLETA
Y PULVERIZACIONESCON AEROSOLES
Bibliografías Bibliografías Romero Cabello RaúlRomero Cabello Raúl
Microbiología y parasitología humanaMicrobiología y parasitología humana
Edit. PanamericanaEdit. Panamericana
México 1999México 1999
Pág. 567-568Pág. 567-568
Jawetz, Melnick, AbelbergJawetz, Melnick, Abelberg
Microbiología MédicaMicrobiología Médica
Edit. Manual ModernoEdit. Manual Moderno
México 2002México 2002
Pág. 219-224, 737Pág. 219-224, 737
Murray P. RMurray P. R
Microbiología MédicaMicrobiología Médica
Edit. MosbyEdit. Mosby
Pág.234-236Pág.234-236
España 1996España 1996
Streptococcus pneumoniaeStreptococcus pneumoniae
Reino: EubacteriaReino: Eubacteria
Phylum: FirmicutesPhylum: Firmicutes
Clase: BacilliClase: Bacilli
Orden: LactobacillalesOrden: Lactobacillales
Familia: SterotococcaceaeFamilia: Sterotococcaceae
Género: Género: StreptococcusStreptococcus
Especie: Especie: pneumoniaepneumoniae
(neumococo)
Streptococcus pneumoniae
STREPTOCOCCUS PNEUMONIAENEUMOCOCO
SON
DIPLOCOCOSGRAM(+)
AGRUPADOSEN CADENAS
UNA CAPSULAFORMADA POR
POLISACARIDOS
LISADOS PORAGENTES
TENSIOACTIVOS
APARATO RESPIRATORIOSUPERIOR
DEL HOMBRE
NEUMONIASINUSITIS
OTITISMENINGITIS
POSEEN CAUSAN
SUELEN SER HABITAN
MORFOLOGIA E IDENTIFICACION
SON FORMANSU ENERGIA LA
OBTINEN DE
TIPICOS DIPLOCOCOSLANCEOLADOS
GRAM(+) COLONIASPEQUEÑAS YREDONDAS
CUPULIFORMES
CULTIVOSJOVENES
PRODUCEN HEMOLISISALFA
NO MOVILES
SE CONSERVAN EN
NO ESPOROGENOS
SENCIBLES A LISIS
CARECENDE CITOCROMOS
Y CATALASA
LA FERMENTACIONDE LA
GLUCOSA
•Gram positiva
•Mide de 1,2-1,8 µm de longitud
•Presenta una forma oval o esférica y el extremo distal lanceolado
•Es inmóvil
•No forma endosporas
•Puede formar una capsula de gran espesor
•No forma esporas ni flagelos
•Generalmente, se presenta en forma de diplococo, por lo que inicialmente fue denominado Diplococcus pneumoniae (aunque pueden inducir la formación de cadenas)
•Se presenta particularmente en ancianos, niños y personas inmunodeprimidas
•El hábitat natural de neumococo es la nasofaringe humana
•La colonización puede tener lugar durante los primeros días de vida
CARACTERISTICAS GENERALES
SinusitisSinusitis
PeritonitisPeritonitis
Neumonía lobar Neumonía lobar agudaaguda
BronconeumoníaBronconeumonía
OtitisOtitis
MeningitisMeningitis
SepticemiasSepticemias
INFECCIONES Y PROCESOS INVASIVOS SEVEROS
Miden 1 mmMiden 1 mm
ElevadasElevadas
LisasLisas
CircularesCirculares
Borde continuoBorde continuo
MucosasMucosas
RugosasRugosas
UmbilicalesUmbilicales
MORFOLOGIA COLONIAL
•Microorganismo microaerófilo
•Son aerobias y anaerobias facultativa
•Temperatura de crecimiento 37ºC
•pH de crecimiento 7.4 a 7.8
•No produce gases
•El ácido láctico inhibe su crecimiento
•Catalasa negativo
•Principal producto resultante de la fermentación de carbohidratos
METABOLISMO
Estructura antigénicaEstructura antigénica
Productos extracelularesProductos extracelulares
Productos ExtracelularesProductos Extracelulares
ACCIÓN PATOGENAACCIÓN PATOGENA
Inhalación de la bacteria.
Colonización de la faringe y la laringe.
Por microaspiracion llega a los pulmones
Al llegar a los pulmones empieza su patología
Inhalación del neumococo Arribo de pulmones Multiplicación en los alvéolos Proceso inflamatorio Exudación Fibrina Eritrocitos Edema Infiltrado celular Consolidación en zonas pulmonares Fagocitosis resolución lenta
DIAGNOSTICO DE LABORATORIODIAGNOSTICO DE LABORATORIO
MUESTRASMUESTRAS
ESPUTOESPUTO PUS PUS SANGRESANGRE PUNCION TRANSTRAQUEAL PUNCION TRANSTRAQUEAL
O TRANSPULMONARO TRANSPULMONAR LIQUIDO SEROSOLIQUIDO SEROSO TEJIDOS CORPORALESTEJIDOS CORPORALES LIQUIDO LIQUIDO
CEFALORRAQUIDEOCEFALORRAQUIDEO
DIAGNOSTICO DEL LABORATORIO
SE EXTRAE SANGRE PARACULTIVO Y SE OBTIENE
ESPUTO,
FROTIS PRUEBA DE HINCHAZON DE LAS CAPSULAS
CULTIVO
HECHOS POR ESPUTO ROJO
HERRUMBROSO,TEÑIDOS
POR TECNICADE GRAM
HECHO POR MEDIO DE ESPUTO
EMULSIONADOY MEZCLADO
CON ANTISUEROY EXUDADOPERITONEAL
SE CULTIVAN EN AGARSANGRE
EL ESPUTO SE EXAMINA POR
FROTISFROTIS
PARES DE COCOSPARES DE COCOS FORMA LANCEONADAFORMA LANCEONADA CADENAS CORTASCADENAS CORTAS GRAM POSITIVOSGRAM POSITIVOS
CULTIVOCULTIVO
AGAR -SANGREAGAR -SANGRE HEMOCULTIVOHEMOCULTIVO INCUBACION EN COINCUBACION EN CO22
CALDO AGAR SOYA TRIPTICASACALDO AGAR SOYA TRIPTICASA SOLUBILIDAD POR BILISSOLUBILIDAD POR BILIS FERMENTACION DE LA INULINAFERMENTACION DE LA INULINA SENSIBILIDAD A LA OPTOQUINASENSIBILIDAD A LA OPTOQUINA
PRUEBAS PARA DETECCION DE ANTIGENOSPRUEBAS PARA DETECCION DE ANTIGENOS
TECNICA DE ELISATECNICA DE ELISA PRUEBAS DE AGLUTINACION PRUEBAS DE AGLUTINACION FAGOCITOSIS O HINCHAMIENTO DE LA CAPSULAFAGOCITOSIS O HINCHAMIENTO DE LA CAPSULA PRUEBA DE QUELLUNGPRUEBA DE QUELLUNG RADIOINMUNOANALISISRADIOINMUNOANALISIS PRUEBAS DE PRECIPITACIONPRUEBAS DE PRECIPITACION PRUEBAS DE SUBCULTIVOPRUEBAS DE SUBCULTIVO
ANTICUERPOS FLUORESCENTESANTICUERPOS FLUORESCENTES PRUEBAS INMUNOSEROLOGICASPRUEBAS INMUNOSEROLOGICAS PRUEBA CUTANEA DE FRANCISPRUEBA CUTANEA DE FRANCIS
VIRULENCIA EN RATONVIRULENCIA EN RATON
MANIFESTACIONES CLINICAS MANIFESTACIONES CLINICAS
Las manifestaciones clínicas de Las manifestaciones clínicas de neumonías varían según la edad, neumonías varían según la edad, extensión de la enfermedad y la extensión de la enfermedad y la incubación será entre 1 y 3 días con un incubación será entre 1 y 3 días con un inicio brusco.inicio brusco.
Manifestaciones clinicasManifestaciones clinicas
VómitosVómitos Decaimiento CefaleaDecaimiento Cefalea
EscalofríosEscalofríos Tos con DolorTos con Dolor expectoración toráxicoexpectoración toráxico
Manifestaciones clínicasManifestaciones clínicas
Fiebre ApneaFiebre Apnea
IrritabilidadIrritabilidad PalidezPalidez
Manifestaciones clínicasManifestaciones clínicas
Cianosis Rechazo alimentarioCianosis Rechazo alimentario
Retracción de músculos AnorexiaRetracción de músculos Anorexia
MECANISMOS DE TRANSMISIONMECANISMOS DE TRANSMISION
Al contacto directo con gotitas de saliva infectadas.Al contacto directo con gotitas de saliva infectadas. Al toser.Al toser. Al estornudar.Al estornudar. A través de besos.A través de besos. Usar objetos contaminados (vasos, cubiertos, botes de agua etc.)Usar objetos contaminados (vasos, cubiertos, botes de agua etc.) Por las manos, cuando el portador no tiene perfecta higiene en ellas.Por las manos, cuando el portador no tiene perfecta higiene en ellas.
FUENTES DE INFECCIONFUENTES DE INFECCION
LLugares donde hay muchos niños.ugares donde hay muchos niños. Guarderías.Guarderías. Jardines infantiles.Jardines infantiles. Escuelas primarias.Escuelas primarias. Hospitales.Hospitales. Casas hogares.Casas hogares. Asilos.Asilos. Lugares de hacinamiento y pobreza.Lugares de hacinamiento y pobreza.
PROFILAXISPROFILAXIS
Enseñe a sus niños a lavarse las manos regularmente con agua y Enseñe a sus niños a lavarse las manos regularmente con agua y jabón. Esto ayuda a evitar la diseminación de la infección.jabón. Esto ayuda a evitar la diseminación de la infección.
Evite el polvo, humo del tabaco y otras sustancias que pueden Evite el polvo, humo del tabaco y otras sustancias que pueden interferir con la respiración y que hacen a los niños más propensos interferir con la respiración y que hacen a los niños más propensos a enfermarse.a enfermarse.
Vacunarse a base de polisacáridos específicos contra el Vacunarse a base de polisacáridos específicos contra el neumococo.neumococo.
BIBLIOGRAFIABIBLIOGRAFIA
ROMERO CABELLO RAULROMERO CABELLO RAULMICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA HUMANAMICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA HUMANAEDITORIAL PANAMERICANAEDITORIAL PANAMERICANAMEXICO 1999MEXICO 1999PAG 271-276PAG 271-276
JAWETZ, MELNICK, ADELBERGJAWETZ, MELNICK, ADELBERGMICROBIOLOGA MEDICAMICROBIOLOGA MEDICAEDITORIAL MAINSAL MODERNOEDITORIAL MAINSAL MODERNOMEXICO 2002MEXICO 2002PAG 221PAG 221
DAVIS, DULBECCO, EISEN, GINSBERG, WOODDAVIS, DULBECCO, EISEN, GINSBERG, WOODTRATADO DE MICROBIOLOGIATRATADO DE MICROBIOLOGIAEDITORIAL SALVATEDITORIAL SALVATESPAÑA 1979ESPAÑA 1979PAG 489PAG 489
Familia Bacillaceae
1 318
BACILOS GRAMPOSITIVOS FORMADORES DE ESPORAS: BACILLUS Y CLOSTRIDIUM.
SON
BACILIOS UBICUOS DEBIDO A QUE FORMAN ESPORAS; PUEDEN SOBREVIVIR EN EL AMBIENTE POR MUCHOS AÑOS .
EL GENERO BACILLUS EL GENERO CLOSTRIDIUM
ES
AEROBIO ANAEROBIO OBLIGADO
SUS ESPECIES DE IMPORTANCIA MEDICA
SON
CLOSTRIDIUM TETANICLOSTRIDIUM BOTULINUM
CLOSTRIDIUM PERFRINGENSCLOSTRIDIUM DIFFICILE
BACILLUS ANTHRACTIS BACILLUS CEREUS
CRECEN EN
GELOSA SANGRE AGAR SANGRE
FORMA COLONIAL
SON REDONDAS Y TIENEN FORMA DE VIDRIO DESPULIDO, O BIEN DE PINO INVERTIDO
COLONIAS GRANDES ELEVADAS CON BORDES ENTEROS
Generalidades de la familia bacillaceae
Provienen del suelo, agua, aire y vegetales
Resisten cambios del medio ambiente, calor del suelo, y ciertos desinfectantes químicos
Sobreviven mucho tiempo
Son anaerobias y aerobias facultativos o anaerobios estrictos
Son bacilos gram +
Son bacilos rectos que miden de 0.3-2.2 / 1.2- 7.0 micras
Forman esporas termo resistentes
Pueden ser centrales subterminales o terminales
Son móviles la mayoría
Bacillus anthracis
Género Bacillus
34 Especies
Género Bacillus
1 323
Bacillus anthracis
ENFERMEDAD CAUSANTE
CARBUNCO ES EL PRINCIPAL PATOGENO DEL GENERO
LAS CELULAS MIDEN 1x 3 A 4 NMLAS ESPORAS SE ENCUENTRA EN
EL CENTRO DE ESTOS BACILOS INMOVILES
ESTAN DISPUESTAS EN CADENAS LARGAS
CARACTERISTICASDEL CRECIMIENTO
UTILIZAN FUENTES DE CARBONO E HIDROGENO SENCILLASSOPORTAN EL CALOR Y DIVERSOS DESINFECTANTES QUIMI-
COS DURANTE PERIODOS MODERADOS
PATOGENIA
LOS BACILOS SE PROPAGAN POR VIA LINFATICAA LA SANGRE; MULTIPLICANDO SE LIBREMENTE
LAS BACTERIAS EN LA MISMAOTRO TIPO DE CARBUNCO ES EL PULMONAR QUE
ES POR LA ASPIRACION DE ESPORAS A LOS PUL-MONES O GLANGIOS LINFATICOS
TRAQUEOBRONQUIALES
LAS QUE OCASIONAN:
Ántrax
Bacillus anthracis
Principales antígenos de B.anthracis
B. anthracis B. cereus
Movilidad - +
Liq. de gelatina + +
Hidrólisis del almidón
+ +
Red. De nitrato + +
Reacción de Voges- Proskauer
+ +
Ac. De arabinosa
- -
Ac. De glucosa + +
Características diferenciales
Epidemiología Presente en suelo y en la vegetación Esporas
Sin necesidadde reproducirseÁntraxÁntrax
Inoculación
Inhalación
Ingestión
Patogenia
Virulencia
Presencia de Cápsula Producción de toxinas
Se recoge del líquido edematoso
Compuesta de ácido glutámico
AntifagocíticaCombinación de toxinas:
muerte
Síndromes clínicos
Síndromes Clínicos
Ántrax cutáneo
Síndromes Clínicos Ántrax cutáneo:
1. Desarrolla de una pápula2. Úlcera rodeada por vesículas3. Escara necrótica4. Edema Masivo
MORTALIDAD: 20%
Síndromes Clínicos
Ántrax por inhalación: 1. Imita al principio una enfermedad
respiratoria vírica. 2. Progresa con rapidez hacia la
afectación pulmonar difusa. 3. Insuficiencia respiratoria MORTALIDAD: Mortalidad alta, incluso
en casos con el tratamiento adecuado.
Síndromes Clínicos Ántrax gastrointestinal 1. Adenopatías mesentéricas. 2. Hemorragias 3. Ascitis MORTALIDAD: Elevada. Pero muy poco
frecuente en humanos.
1 334
Bacillus anthracis
Bacillus anthracis
PUS, SANGRE, ESPUTO, PAPULAS O ULCERAS CUTANEAS
MUESTRAS
SE CULTIVAN EN:
GELOSA SANGRECARACTERISTICAS
SON REDONDAS Y TIENEN APARIENCIA DE “VIDRIO DESPULIDO” A LA LUZ TRASMITIDA
LICUAN LA GELATINA Y EL CRECIMIENTO EN GELATINA SEMBRADA POR PICADURA TIENE
LA APARIENCIA DE “PINO INVERTIDO.
DIAGNÓSTICODE LABORATORIO
Examen microscópico
Cultivo de muestras delas pápulas o úlceras
Cutáneas.
Se observan en el tejido:grandes Bacilos gram+
sin esporas.
Tinción medianteAnticuerpos
específicos confluorosceína
Diagnóstico de Laboratorio B. anthracis crece en medios de laboratorio no
selectivos con producción de colonias adherentes que proliferan con rapidez y no son hemolíticas.
La consistencia pegajosa de las colonias y el aspecto microscópico de cadenas serpinginosas de bacilos (“Cabeza de medusa”).Apoya a la distinción de entre B. anthracis y otras especies Bacillus.
Cloranfenicol Tetraciclina
Penicilina
TRATAMIENTO
Tratamiento
PROFILAXIS
VACUNACIÓN DEPERSONAS Y
REBAÑOS
Evitar trabajarCon pieles o lana
Provenientes de paísesEndémicos de Ántrax
DISPOSICIÓN DEANIMALES MUERTOS
POR CARBUNCO
1 339
Bacillus cereus(ENVENENAMIENTO ALIMENTARIO)
TIENE 2 FORMAS DISTINTAS
TIPO EMETICOEnterotoxina termoestable
CAUSADO POR:
PLATILLOS DE ARROZ
COMIENZA
UNA A SEIS HORAS DESPUESDE INGERIR EL ALIMENTO
CONTAMINADO
TIPO DIARREICOEnterotoxina termolábil
PLATILLOS DE CARNE, SALSASO JALEA
TIENE UN PERIODO DE INCUBA-CION DE 1 A 24 HORAS
Bacillus cereus(ENVENENAMIENTO ALIMENTARIO)
Antígenos de virulencia de B. cereus
1 341
Bacillus cereus(ENVENENAMIENTO ALIMENTARIO)
BACILLUS CEREUS(ENVENENAMIENTO ALIMENTARIO)
MATERIAS FECALES
SE INOCULA A PARTIR DE:
RESTOS DE ALIMENTOSCONTAMINADOS.
CRECE EN :
AGAR MANITOL
LAS COLONIAS APARECEN RODEADAS DE UN HALO DE PRECIPITACIÓN BLANCO SOBRE FONDOLAS COLONIAS APARECEN RODEADAS DE UN HALO DE PRECIPITACIÓN BLANCO SOBRE FONDO ROSA-ROJO-VIOLETA, LAS QUE FERMENTAN EL MANITOL DE COLOR AMARILLO, A LAS 24 HORASROSA-ROJO-VIOLETA, LAS QUE FERMENTAN EL MANITOL DE COLOR AMARILLO, A LAS 24 HORAS LAS COLONIAS SON CIRCULARES Y LISAS, A LAS 48 HORAS GRANDES Y RUGOSAS CON ESTRÍA LAS COLONIAS SON CIRCULARES Y LISAS, A LAS 48 HORAS GRANDES Y RUGOSAS CON ESTRÍA
SUS CARACTERISTICAS SON:
Tratamiento
1 343
BIBLIOGRAFIA MICROBIOLOGIA MEDICAErnest Jawetz- Joshep Melnick – Janets Butel
MICROBIOLOGIA MEDICAMurray – Kobayashi – Pfaller - Rosental.Segunda edición, editorial harcourt bracepp 327-329 http:/www.wikipedia.com/bacterias
Género Clostridium
Características
Microorganismo Enfermedad
C. perfringens Bacteriemia, mionecrosis (gangrena gaseosa); infecciones de tejidos blandos (p. ej. Celulitis, fascitis); intoxicacion alimentaria; enteritis necrotizante
C. tetani Tetanos
C. botulinum Botulismo transmitido por alimentos, botulismo infantil, botuilismo en las heridas
Enfermedad
Patogenia
Enfermedad Patología
Gangrena gaseosa Produce una gran infección y una gran intoxicación
Tétanos Produce una mínima infección y una gran intoxicación
Botulismo Produce una gran intoxicación sin producir infección
Clostridium botulinum
Familia bacillaceae
Genero: clostridium
Bacilos grampositivos; formas en huso en palillo de tambor o en raqueta de tenis
Forman esporas; Termorresistentes; localizados central, subterminal o terminalmente: de forma ovalada o redonda
Anaerobios a aerobios facultativos
Catalasa negativa
Formación de capsula variable.
Motivilidad variable
Reducción de nitrato variable
O-F glucosa: fermentativos (F) o inertes (-)
Generalidades
Clostridium botulinum
Antígenos: Termoestables y Termolabiles
Grupos serologicos: A,B,C1,C2,D,E,F,G,
A , B , E Y FCAUSANTES DEL BOTULISMO
EN LOS SERES HUMANOS
1 352
Clostridium botulinumSE DISTINGEN POR:
EL TIPO ANTIGENICO DE LA TOXINA QUE PRODUCENCAUSA:
EL BOTULISMO, ES DE DISTRIBUCION MUNDIAL SE LE ENCUENTRA EN EL SUELO Y OCASIONALMENTE EN HECES DE ANIMALES
TOXINA
SE HAN IDENTIFI-CADO 8 VARIEDA-DES DE LA TOXINA
A-HAB Y E SON LAS
QUE SE RELACIO-NAN CON ENFER-MEDADES EN EL
HUMANO
PATOGENIA
AUNQUE LOS TIPOS A Y B DECLOSTRIDIUM HANSIDO INVOLUCRADOS EN CASOS
RAROS DE HERIDAS INFECTADAS. BOTULISMO NO ES UNA INFECCION SI NO
UNA INTOXICACION
PRUEBAS DIAGNOSTICAS
PUEDE IDENTIFICARSE ELTIPO ANTIGENICO DE LA TOXINA POR NEUTRA-
LIZACION CON ANTITOXINA ESPECIFICAPOLIVALENTE (DE ORIGEN EQUINO) A,
B, E,: UN VIAL INTRAVENOSO Y UN VIAL INTRAMUSCULAR.
SINTOMATOLOGIA
TRANSTORNOS VISUALES INCAPACIDAD PARA DEGLUTIR
DIFICULTAR PARA HABLARLA MUERTE SE PRESENTA
POR PARALISIS RESPIRATIRIA O POR PARO CARDIACO
Las esporas botulínicas se pueden encontrar en el suelo
Por medio de transmisión de los alimentos como el pescado y miel contaminada con esporas
EPIDEMIOLOGIA
GRAM + EN CULTIVOSJOVENES
GRAM – EN CULTIVOS
VIEJOS
PUEDEN RESIDIREN EL INTESTINO
COMO BIOTANORMAL
CLOSTRIDIUM BOTULINUM(BOTULISMO)
CLOSTRIDIUM PERFRINGENS(GANGRENA GASEOSA)
CLOSTRIDIUM TETANI(TETANOS)
PRINCIPAL HABITAT EL
SUELO
ANAEROBIOSESTRICTOS
ESPORAS OVOIDES O ESFERICAS
MAS DE 300ESPECIES
CARACTERISTICASGENERALES
(CLOSTRIDIUM)
CATALASANEGATIVACATALASANEGATIVA
FLAGELOSPERITRICOSFLAGELOS
PERITRICOS
COLONIAS:PEQUEÑAS
TRANSLUCIDASBORDE FILAMENTOSO
COLONIAS:PEQUEÑAS
TRANSLUCIDASBORDE FILAMENTOSO
COLONIAS:CENTRO OPACOCOLOR BLANCO
GRISACEO
COLONIAS:CENTRO OPACOCOLOR BLANCO
GRISACEO
ESPORAS OVALESSUBTERMINALESO TERMINALES
ESPORAS OVALESSUBTERMINALESO TERMINALES
MOVILESMOVILES
AISLADOS EN PAREJASO CADENAS CORTAS
AISLADOS EN PAREJASO CADENAS CORTAS
GRAM POSITIVOSGRAM POSITIVOS
BACILOS4-8 MICRAS
POR 0.8 MICRAS
BACILOS4-8 MICRAS
POR 0.8 MICRAS
CLOSTRIDIUM BOTULINUM
CLOSTRIDIUM BOTULINUM
FERMENTADORESPOSITIVOS
FERMENTADORESPOSITIVOS
TEMPERATURA DECRECIMIENTO
20-30 °C
TEMPERATURA DECRECIMIENTO
20-30 °C
DIGESTION DE CARNE,ALBUMINA DE HUEVO
Y LECHE
DIGESTION DE CARNE,ALBUMINA DE HUEVO
Y LECHE
ACIDO DEGLUCOSAACIDO DEGLUCOSA
PRODUCEN GAS YACIDO SULFHIDRICO
POSITIVOS
PRODUCEN GAS YACIDO SULFHIDRICO
POSITIVOS
ANAEROBIOESTRICTO
ANAEROBIOESTRICTO
LICUAN SUERO COAGULADO
Y GELATINA
LICUAN SUERO COAGULADO
Y GELATINA
pH DE CRECIMIENTO7.2-7.4
pH DE CRECIMIENTO7.2-7.4
METABOLISMOMETABOLISMO
ASPECTOSANTIGENICOS
A Y B:RELACIONADOS CON VARIOS ALIMENTOS.
C:C ALFA Y C BETA.PRODUCE “CUELLO BLANDO” EN AVES.
D:BOTULISMO EN MAMIFEROS.
E:PRODUCTOS DE PESCA.
F:ENFERMEDAD HUMANA.
G:TOXINA TERMOESTABLE.
A, B, E Y F: TOXINAS TERMOLABILES A LAS QUE EL HOMBRE ESSUSCEPTIBLE.
Toxina
Patogenia
PATOGENIA
CLASICO O TRANSMITIDO POR ALIMENTOS
INFANTIL
DE HERIDAS
• Debilidad y mareo después de 1 o 2 días
• Visión borrosa y sequedad
• Dolor oro faríngeo
• Estreñimiento y dolor abdominal
• Estreñimiento
• Muertes
• Falta de desarrollo
• Los síntomas intestinales son menos llamativos
• Debilidad y mareo después de 4 días o más
• Dolor oro faríngeo
SINTOMATOLOGIA
Manifestaciones clínicas
Debilidad Midriasis
Vértigos Dificultad para deglutir
Sequedad de boca y faringe
Dificultad para hablar
Nauseas Retención urinaria
Vomito Debilidad muscular descendente y generalizada
Visión borrosa Parálisis respiratorio
DIAGNOSTICO
• Cultivar C. botulinum en medios anaerobios enriquecidos con nutrientes para permitir la germinación de las esporas termoresistentes
• Las muestras de heces fecales y suero deben analizarse mediante bioensayo en el ratón
• La demostración de la toxina en los alimentos
¤ ANTITOXINA BOTULINICA al aparecer los primeros síntomas
TRATAMIENTO
FUENTES DE INFECCION
SUELO
INSTESTINO DE HERBIVOROS
MECANISMOS DE TRANSMISION
INGESTION DE ALIMENTOS CONTAMINADOS
PROFILAXIS PREPARACION EN ENVASADOS:
ES MUY COMÚN EL USO DE NITRITO DE SODIO (INHIBE LA MULTIPLICACION DE LAS BACTERIAS ANAEROBIAS EN ALIMENTOS).
EVITAR LA GERMINACION DE LAS ESPORAS MANTENIENDO LOS ALIMENTOS A PH ACIDO O ALMACENANDOLOS A 4° C
DESTRUCCION DE LA TOXINA PREFORMADA EN LOS ALIMENTOS CALENTANDOLOS 20 MIN. A 80° C
LA INMUNIZACION CON TOXOIDE POLIVALENTE SOLO ESTÁ INDICADO EN LAS PERSONAS DE ALTO RIESGO.
• JAWETZ, MELNIC ADELBERGMICROBIOLOGIA MEDICA
MANUAL MODERNOMEXICO 2002
PÁGS. 224-230
• MURRAY P. R., LAWRENCE D. W.MICROBIOLOGIA MEDICA
MOSBYESPAÑA 1996
PÁGS. 185, 193-196
• ROMERO CABELLO RAULMICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA
PANAMERICANAMEXICO 1999
PÁGS. 368-371
Bibliografias
Clostridium tetani
Clostridium tetaniReino: Bacteria
División: Firmicutes
Clase: Clostridia
Orden: Clostridiales
Familia: Clostridiaceae
Género: Clostridium
Especie: C. tetani
1 370
CLOSTRIDIUM TETANI(TETANOS)
DATOS CLINICOS
EL PERIODO DE INCUBACION PUEDE VARIAR DESDE 4 A 5
DIAS.LA ENFERMEDAD ESTA
CARACTERIZADAPOR CONTRACCIONES
TONICAS CONVULSIVAS DE LOS MUSCULOS VOLUNTARIOS.
CAUSA:
TETANOS ES DE DISTRIBUCION MUNDIAL EN EL SUELO Y EN LAS HECES DE CABALLO
TOXINA
PRODUCEN LA TETANOSPASMINA Y LA LIBERAN PRINCIPALMENTE CUANDO SE LISAN. ESTA INHIBE
LA LIBERACION DE ACETILCOLINAINTERFIRIENDO CON LA TRANSMI-
SION NEURO MUSCULAR
PATOGENIA
NO ES UN MICROORGANISMO INVASIVO LA INFECCION PERMANECE
ESTRICTAMENTE LOCALIZADA EN EL AREA DE TEJIDO MUERTO EN EL
CUAL SE HAN INTRODUCIDOESPORAS
LA PREVALENCIA DEPENDE
1.-INMUNIZACION ACTVA CON TOXOIDES
2.-TRATAMIENTO ADECUADO DE LAS HERIDAS CONTAMINADAS
CON TIERRA3.-EMPLEO PROFILACTICO
DE ANTITOXINA4.-ADMINISTRACION DE
PENICILINA
DIAGNOSTICO
PUEDE SER AISLADO EN CULTIVO ANAE-ROBIO DE LOS TEJIDOS DE LA HERIDA
CONTAMINADA .LA COMPROBACION DEL AISLAMIENTO SE
BASA EN LA PRODUCCION DE TOXINA Y SU NEUTRALIZACION POR LA ANTI-
TOXINA ESPECIFICA
Características generales
• Bacilos Grampositivos• De 2-5 / 5 micras• Solos, en parejas, o cadenas• Moviles por flagelos peritricos• Producen esporas redondas terminales • Las colonias son de 5 mm de diametro• Brillantes• Traslucidas • Gris amarillas •Bordes iregulares de tipo rizoide
Metabolismo
Aspectos antigenicos
Toxina
Patogenia
Manifestaciones clinicas
Diagnostico
• Examen directo• Cultivo positivo en un 30% de los casos• Pruebas serológicas
Tratamiento
• Antitoxina• Desbridacion• Lavado enérgico de la herida• Penicilina
Fuentes de infección
• Suelo y de heces de animales • Via de entrada:• Heridas•Fracturas • Quemaduras• Cordon umbilical• Utero (posparto)• Mordedura de animales• Ulceras de cubito
Profilaxis
•Toxoide tetánico • DPT a los 2, 4 y 6 meses de edad
• Refuerzo periódico en población de riesgo cada 5 años, población general cada 10 años.
1 381
BIBLIOGRAFIA MICROBIOLOGIA MEDICAErnest Jawetz- Joshep Melnick – Janets Butel
MICROBIOLOGIA MEDICAMurray – Kobayashi – Pfaller - Rosental.Segunda edición, editorial harcourt bracepp 327-329 http:/www.wikipedia.com/bacterias
Clostridium perfringens
383
Características Generales
384
Clostridium perfringens
Bacilo Gram positivo. Puede alcanzar una medida 2.5x8 micras. Es uno de los pocos
clostridios inmóviles.
Se encuentra en los intestinos de los seres
humanos y aves y mamíferos.
Se destruye con temperaturas
superiores a 121°.
Produce toxinas que pueden causar enfermedades como
la enteritis necrótica y Gangrena gaseosa.
Esta n los alimentos (sobre todo en las carnes que no
están bien cocinadas
Se encuentra en el suelo y en el agua
Flagelos peritricos
Producen esporas
ovaladas o
esféric as
Anaerobios estrictos
Algunos facultativamente microaerofilicos (crecen en atmósfera con baja concentración de oxigeno).
Fermentadores positivos
Producen ácido y gas
Acción peptolitica
Temperatura de crecimiento 37ºC
pH de crecimiento 7-7.4
Catalasa negativa
Metabolismo
Aspectos Antigénicos
Antígeno H (flagelar), que es un antígeno proteico, generalmente difásico.
Antígeno capsular, con una única especificidad
antigénica, denominada Vi.
Antígeno O (somático), que es el lipopolisacárido de la pared celular.
Productos ExtracelularesProductos Extracelulares
Toxina mu (DNAaSa)Toxina O (teta)
Colagenaza Proteinaza Hialuronidasa
388
ToxinasToxinas
Toxina Alfa Toxina Beta
Es una lecitinasa o mejor una fosfolipasa C que tiene efecto letal y
necrosante debido a que rompe la lecitina
de la membrana celular.
Rompe la membrana de los eritrocitos, es
hemolítica.
Es producida por el C. perfringens tipo C
solamente es causa de necrosis de tejidos por un mecanismo no muy
claro es causante enteritis necrosante.
389
Puede distinguirse de 3 formas clínicas de esta
infección:
La infección de
tejidos
La inflamación de
tejidos
La necrosis de
tejidos
Es la forma grave del paciente,
además de las manifestacione
s de inflamación,
dolor intenso y secreción
serosa
La herida se encuentra
contaminada por esta
bacteria se observa
inflamación y hay secreción
purulenta.
Se encuentra la bacteria
presente y se puede
observar y cultivar pero
no manifestacione
s de inflamación.
Patogenia
Sintomas
390
• Calambres abdominales• Diarrea •Fiebre intensa• Periodo de 8 a 22 hrs.• Estado totémico• Produce gastroenteritis aguda• Crepitación (gas intratisular)• Descargas sanguinolentas fétidas
Diagnóstico
Tratamiento
392
• Heridas • Fracturas• Abortos •Hernia estrangulada• Obstrucción intestinal
Mecanismos de infección
• Suelo• Heces de animales• Incubación de 1 a 5 días
Fuentes de infección
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Se realizar limpieza de heridas infectadas con Se realizar limpieza de heridas infectadas con tierra y excremento de vacas.tierra y excremento de vacas.
Cuidado adecuado de las heridasCuidado adecuado de las heridas
Utilización profiláctica y prudente de los Utilización profiláctica y prudente de los antibióticos antibióticos
No ingerir en restaurantes de comidas rápidasNo ingerir en restaurantes de comidas rápidas
Profilaxia
Bibliografía
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Microbiología MedicaMurray R.P; Drew EW, L.W. KobayashiEDITORIAL The C. V. Mosby Co.USA 1990PAG. 180-184
Manual de microbiología ClínicaTurnbull, P.C.V. & J.M.Kramer.EDITORIAL American SocietyWashinton D.C.,1991PAG. 296-333
MicrobiologíaSwarts, N.M4th ed.D.B. Davis EdiciónUSA PAG. 625-631