Méh akut kontakt toxicitási Méh akut kontakt toxicitási tesztteszt

214-es számú OECD teszt214-es számú OECD teszt

Készítette:Veres RitaKészítette:Veres Rita

TartalomTartalom A méh jellemzéseA méh jellemzése Teszt jellemzéseTeszt jellemzése Méhek begyűjtéseMéhek begyűjtése Vizsgálati dobozok követelményeiVizsgálati dobozok követelményei Méhek etetéseMéhek etetése Teszt előkészítéseTeszt előkészítése A teszt folyamataA teszt folyamata A teszt kiértékeléseA teszt kiértékelése Vizsgálati jelentés tartalmaVizsgálati jelentés tartalma

A méh jellemzéseA méh jellemzéseA méhek a hártyásszárnyúak rendjébe tartoznak, közeli A méhek a hártyásszárnyúak rendjébe tartoznak, közeli rokonságban állnak a darazsakkal és a hangyákkal. rokonságban állnak a darazsakkal és a hangyákkal. Megközelítőleg 20 000 fajt ismerünk. Az Antarktiszt Megközelítőleg 20 000 fajt ismerünk. Az Antarktiszt kivéve valamennyi kontinensen megtalálhatóak.kivéve valamennyi kontinensen megtalálhatóak.A legkisebb méh 2,1mm hosszú, míg a legnagyobb A legkisebb méh 2,1mm hosszú, míg a legnagyobb 39mm.39mm.A méhek nektár és pollenA méhek nektár és pollen fogyasztására adaptálódtak, fogyasztására adaptálódtak, ebből nyerik az energiát és a ebből nyerik az energiát és a fehérjéket, a pollenek többségével fehérjéket, a pollenek többségével lárváikat táplálják.lárváikat táplálják.

Teszt jellemzéseTeszt jellemzése

Az akut toxicitási teszt peszticidek, növényvédő szerek Az akut toxicitási teszt peszticidek, növényvédő szerek és egyéb vegyi anyagok hatását vizsgálja felnőtt és egyéb vegyi anyagok hatását vizsgálja felnőtt dolgozó méhek esetében.dolgozó méhek esetében.A mérés végpontja a méhek letalitása, illetve túlélése. A mérés végpontja a méhek letalitása, illetve túlélése. Akkor nyilvánítható halottnak egy méh, ha teljesen Akkor nyilvánítható halottnak egy méh, ha teljesen mozdulatlan.mozdulatlan.A teszt időtartama 48 óra. Ha a teszt során a halálozási A teszt időtartama 48 óra. Ha a teszt során a halálozási ráta nagyobb, mint 10%, akkor a teszt ráta nagyobb, mint 10%, akkor a teszt meghosszabbítható, maximum 96 órásra.meghosszabbítható, maximum 96 órásra.

Méhek begyűjtése 1Méhek begyűjtése 1 Ugyanahhoz a fajhoz tartozó fiatal, Ugyanahhoz a fajhoz tartozó fiatal,

kifejlett dolgozó méheket kell kifejlett dolgozó méheket kell gyűjteni.gyűjteni.

Hasonló korú, megfelelően táplált, Hasonló korú, megfelelően táplált, egészséges, betegségtől menetes, egészséges, betegségtől menetes, ismert előéletű és fiziológiai ismert előéletű és fiziológiai állapotú méheket kell begyűjteni.állapotú méheket kell begyűjteni.

A méheket a felhasználás reggelén A méheket a felhasználás reggelén kell begyűjteni, illetve előző este, kell begyűjteni, illetve előző este, ebben az esetben a következő napig ebben az esetben a következő napig vizsgálati körülményeknek vizsgálati körülményeknek megfelelően kell tartani őket.megfelelően kell tartani őket.

Méhek begyűjtése 2Méhek begyűjtése 2 Kora tavasszal, ill. késő ősszel kerülni Kora tavasszal, ill. késő ősszel kerülni

kell a begyűjtést, mert ez idő alatt a kell a begyűjtést, mert ez idő alatt a méhek fiziológiája változik. Ebben az méhek fiziológiája változik. Ebben az időszakban végzett vizsgálatokhoz a a időszakban végzett vizsgálatokhoz a a méheket inkubátorban kell nevelni, méheket inkubátorban kell nevelni, „méh kenyérrel” és cukoroldattal kell „méh kenyérrel” és cukoroldattal kell etetni. A méh kenyér porcukorból és etetni. A méh kenyér porcukorból és mézből gyúrt cukorlepény.mézből gyúrt cukorlepény.

Vegyi anyagokkal (pl. antibiotikummal) Vegyi anyagokkal (pl. antibiotikummal) kezelt méhek esetében a kezelés végétől kezelt méhek esetében a kezelés végétől számított 4 hétig nem használhatóak fel számított 4 hétig nem használhatóak fel toxikológiai vizsgálatokra.toxikológiai vizsgálatokra.

Vizsgálati dobozok követelményeiVizsgálati dobozok követelményei A teszt során a méheket vizsgálati dobozokban A teszt során a méheket vizsgálati dobozokban

tartják.tartják. A vizsgálati doboz legyen könnyen tisztítható, jól A vizsgálati doboz legyen könnyen tisztítható, jól

szellőző.szellőző. A doboz készülhet rozsdamentes acélból, dróthálóból, A doboz készülhet rozsdamentes acélból, dróthálóból,

műanyagból, és fából is.műanyagból, és fából is. A teszt során egy dobozban 10 méh tartható.A teszt során egy dobozban 10 méh tartható. A doboz méretét úgy kell meghatározni, hogy a A doboz méretét úgy kell meghatározni, hogy a

méheknek elegendő hely legyen.méheknek elegendő hely legyen.

Méhek etetése Méhek etetése

A méheket a vizsgálat alatt A méheket a vizsgálat alatt 500 g/l koncentrációjú 500 g/l koncentrációjú cukoroldattal lehet etetni.cukoroldattal lehet etetni.

Az etetés egy „etetővel” Az etetés egy „etetővel” végezhető. Az etető egy végezhető. Az etető egy üvegcső, mely kb. 50mm üvegcső, mely kb. 50mm hosszú, 10mm széles, az egyik hosszú, 10mm széles, az egyik vége leszűkített, kb. 2 mm vége leszűkített, kb. 2 mm átmérőjű.átmérőjű.

A teszt előkészítéseA teszt előkészítése A vegyi anyag különböző dózisait el kell készíteni.A vegyi anyag különböző dózisait el kell készíteni. A vizsgálat során minden egyes dózis esetében teszt A vizsgálat során minden egyes dózis esetében teszt

és kontrollcsoportot kell alkalmazni, 3-3 párhuzamost és kontrollcsoportot kell alkalmazni, 3-3 párhuzamost kell mérni.kell mérni.

Oldószer, ill. nedvesítőszer alkalmazása esetén Oldószer, ill. nedvesítőszer alkalmazása esetén további kontroll méréseket kell végezni, vizsgálni további kontroll méréseket kell végezni, vizsgálni kell, hogy ezen szerek milyen hatással vannak a kell, hogy ezen szerek milyen hatással vannak a méhekre.méhekre.

A vegyi anyag alkalmazása előtt a befogott méheket A vegyi anyag alkalmazása előtt a befogott méheket szén-dioxiddal, vagy nitrogénnel el kell kábítaniszén-dioxiddal, vagy nitrogénnel el kell kábítani

A teszt folyamata 1A teszt folyamata 1

Vizsgálati körülmények:Vizsgálati körülmények:2525 ± ± 2°C-os sötét helyen kell tartani a méheket, 2°C-os sötét helyen kell tartani a méheket, fontos a relatív páratartalom (50-70%), melyet a fontos a relatív páratartalom (50-70%), melyet a vizsgálat során fel kell jegyezi.vizsgálat során fel kell jegyezi.

Dózisok felvitele:Dózisok felvitele:11μμl előre meghatározott l előre meghatározott koncentrációjú oldatot koncentrációjú oldatot applikátorral kell felvinni a méh applikátorral kell felvinni a méh potrohának háti oldalára.potrohának háti oldalára.

A teszt folyamata 2A teszt folyamata 2

Időtartam:Időtartam:48 óra, illetve hosszabbított vizsgálat esetében 96 óra.48 óra, illetve hosszabbított vizsgálat esetében 96 óra.

A mortalitást fel kell jegyezni a vizsgálat kezdetétől A mortalitást fel kell jegyezni a vizsgálat kezdetétől számítva 4., 24.,48. órában, illetve hosszabbított számítva 4., 24.,48. órában, illetve hosszabbított mérés esetén 72.,96. órában.mérés esetén 72.,96. órában.

Észrevételek feljegyzése:Észrevételek feljegyzése:normálistól eltérő viselkedés.normálistól eltérő viselkedés.

A teszt kiértékelése 1A teszt kiértékelése 1 A mortalitási adatokból dózis-hatás görbék készítésével meg A mortalitási adatokból dózis-hatás görbék készítésével meg

lehet határozni a 24 és 48 órás LDlehet határozni a 24 és 48 órás LD5050 értékeket, illetve értékeket, illetve meghosszabbított mérés esetében a 72 és 96 órás LDmeghosszabbított mérés esetében a 72 és 96 órás LD5050 értéket. értéket.

A mérési időpontokban következő képlettel kiszámítható a A mérési időpontokban következő képlettel kiszámítható a halálozási ráta: H=100*(Nhalálozási ráta: H=100*(Nkk-N-Nmintaminta)/N)/Nkk,,ahol:Nahol:Nkk: a kontrollban életben maradt méhek száma (db),: a kontrollban életben maradt méhek száma (db),NNmintaminta: a mérendő mintában életben maradt méhek száma (db): a mérendő mintában életben maradt méhek száma (db)

A halálozási rátát a koncentráció logaritmusának A halálozási rátát a koncentráció logaritmusának függvényében ábrázoljuk, majd a grafikonról leolvasható az függvényében ábrázoljuk, majd a grafikonról leolvasható az adott időponthoz tartozó LDadott időponthoz tartozó LD5050 érték. érték.

A teszt kiértékelése 2A teszt kiértékelése 2 A dózis-válasz görbéről leolvasható az LDA dózis-válasz görbéről leolvasható az LD5050 érték, érték,

melynek mértékegysége melynek mértékegysége μμg vizsgált anyag/méh. g vizsgált anyag/méh.

ED20 ED50 μg/méh

Hal

áloz

ási r

áta

%

log vegyi anyag koncentráció

Vizsgálati jelentés tartalmaVizsgálati jelentés tartalma Vizsgált anyag jellemzői (fizikai-kémiai Vizsgált anyag jellemzői (fizikai-kémiai

tulajdonságok)tulajdonságok) Méhek jellemzői (tudományos név, származás, Méhek jellemzői (tudományos név, származás,

életkor, befogás módszere, időpontja)életkor, befogás módszere, időpontja) Vizsgálati körülmények (hőmérséklet, relatív Vizsgálati körülmények (hőmérséklet, relatív

páratartalom, elhelyezési páratartalom, elhelyezési körülmények, ketrec jellemzői, körülmények, ketrec jellemzői, vizsgálat időpontja,vizsgálat időpontja, eredmények, dózis-válasz görbék, eredmények, dózis-válasz görbék, LD LD5050 értékek, megfigyelések) értékek, megfigyelések)

Források:Források: WikipédiaWikipédia

http://http://hu.wikipedia.orghu.wikipedia.org//wikiwiki/M%C3%A9hek/M%C3%A9hek OECD OECD Guideline for Testing of Chemichals 214Guideline for Testing of Chemichals 214

Honeybees, Acute Contact Toxicity TestHoneybees, Acute Contact Toxicity Testhttp://http://lysander.sourceoecd.orglysander.sourceoecd.org//vlvl=24528214/cl=17/=24528214/cl=17/nwnw=1/=1/rpsvrpsv//cgi-bincgi-bin//fulltextew.plfulltextew.pl??prpsvprpsv=/=/ijij//oecdjournalsoecdjournals/1607310x/v1n2/s15/p1.idx/1607310x/v1n2/s15/p1.idx

Képek forrása:Képek forrása: http://http://members.iif.humembers.iif.hu//visontayvisontay//ponticulusponticulus/rovatok/errata//rovatok/errata/

csakanycsakany__mmm.htmlmmm.html http://tudatos.blogter.hu/359175/http://tudatos.blogter.hu/359175/

a_mehek_kommunikaciojaa_mehek_kommunikacioja http://www.origo.hu/tudomany/20081028-allatvilag-http://www.origo.hu/tudomany/20081028-allatvilag-

negyig-tudnak-szamolni-a-mehek.htmlnegyig-tudnak-szamolni-a-mehek.html http://www.biokontroll.hu/cms/index.php?http://www.biokontroll.hu/cms/index.php?

option=com_content&view=article&id=442:a-fhordas-option=com_content&view=article&id=442:a-fhordas-eltt&catid=109:bioallatoktartasa&Itemid=43&lang=hueltt&catid=109:bioallatoktartasa&Itemid=43&lang=hu

http://www.meheshetek.blogol.hu/http://www.meheshetek.blogol.hu/ http://www.mezvilag.hu/kepgaleria.htmlhttp://www.mezvilag.hu/kepgaleria.html