Seminarski radTema:

Uloga citohroma P450 u metabolizmu herbicida

Novi Sad,2014.

Uvod Šta su herbicidi?

Herbicidi su različita hemijska jedinjenja, pretežno organskog porekla, namenjena za uništavanje biljaka

Kako se dele herbicidi?1. totalne, koji uništavaju sve biljke2. selektivne, koji uništavaju samo

određene vrste biljaka, u prvom redu korovsko bilje

Kako deluju herbicidi?1. herbicide kontaktnog dejstva,

deluju pri neposrednom kontaktu sa nadzemnim delovima biljaka

2. translokacione herbicide, prenose po organizmu sprovodnim sistemima biljaka.

Citohrom P450 Citohromi P450 su proteini čija je prostetična

grupa hem, porfirinsko jezgro sa atomom gvožđa u centru. Promenom valentnog stanja Fe2+↔ Fe3+ joni reverzibilno prenose po 1 elektron u multikomponentnom elektron-transportnom lancu u kome vrše ulogu terminalne oksidaze.

Najčešće funkcionišu kao monooksigenaze, vezuju supstrat i jedan atom molekulskog kiseonika (drugi se redukuje do H2O), pri čemu NAD(P)H služi kao reduktant. Da bi se ostvarila kataliza, molekulski kiseonik se aktivira redukujućim ekvivalentima prenetim od NADPH do citohroma P450 posredstvom flavoproteina NADPH: citohromP450 reduktaze (koji je karakterističan za većinu monooksigenaza eukariota).

Enzimski sistem P450 u biljakam se citohrom P450 reduktaza i citohrom P450 membranski enzimi, nalaze na strani citoplazme endoplazmatičnog retikuluma i u normalnim uslovima katalizuju čitav niz drugih reakcija uključujući dimerizaciju, redukciju, dehidrataciju i izomerizaciju (Schuler, 1996).

Metabolizam herbicida se vrši kataboličkim reakcijama pri čemu od izvornog molekula nastaju manje fitotoksični hidroksilovani ili dealkilovani metaboliti (Kreuz i sar., 1996). Isto tako enzim P450 ima značajnu ulogu u desulfurizaciji organofosfornih insekticida (Bearg i sar., 1995).

Značaj citohroma P450 za metabolizam herbicida

Enzimi citohroma P450 su najznačajniji enzimski sistemi za prvu (I) fazu metabolizma herbicida u biljkama

Značaj citohroma P450 se povećava sa uvođenjem novih klasa herbicida koji svoje delovanje ispoljavaju u malim količinama primene (7-70 g/ha).

Dok je za (II) faza metabolizma herbicida u biljkama odgovorna,glutation- transferaza.

Ona je značajna za herbicide starije generacije koji su se upotrebljavali u znatno većim količinama po jedinici površine (100-1000 puta) te su glutation-transferaze imale tipičnu i ključnu ulogu u procesu detoksikacije.

Uloga citohroma P450 u biljkama

Najveći broj citohroma P450 u biljkama ima značajnu ulogu u sekundarnom metabolizmu.

Biljni citohromi P450 su uključeni u biosintezu strukturnih komponenti: lignina, flavonoida, izoflavonoida, terpena, sterola, hormona, lipida, furankumarina, alkaloida i drugih sekundarnih metabolita biljaka (Chapple, 1998).

Dok je funkcija citohroma P450 u biljkama je metabolizam herbicida uključujući i sekundarni metabolizam (Janjić, 1993, 2009; Janjić i sar. 1994; Werck-Reichart i sar. 2000; Elezović, 2003).Tabela 1. Primeri funkcija familija citohroma P450

P450 familija Uloga u biosintezi Referenca CYP51 Biosinteza sterola Bak i sar., 1997 CYP71c Biosinteza dimboa Frey i sar., 1995;1997 CYP73 Biosinteza fenilpropanoida Teutsch i sar.,1993 CYP74 Biosinteza jasmoninske

kiseline Song i sar., 1993

CYP75 Biosinteza hidroksilaza flavonoida

Holton, 1995

CYP79 Biosinteza durina Koch i sar., 1995 CYP80 Biosinteza alkaloida Kraus and Kutchan, 1995 CYP84 Biosinteza lignina Meyeri i sar., 1996

Detoksikacija herbicida Mikrozomalnim testovima gajenih i

korovskih biljaka proučavan je metabolizam herbicida i nekih insekticida.

U ovim biljnim vrstama herbicidi koji su bili predmet proučavanja su metabolizirani pod uticajem citohroma P450.

Pri čemu je u nekim slučajevima aktivnost citohroma P450 je bila nedovoljna pa je dolazilo do oštećenja biljaka.

Dok je u nekim drugim slučajevima citohrom P450 izaziva povećani metabolizam pa je potrebna II faza metabolizma za potpunu detoksikaciju. Ovakav slučaj utvrđen je za imazetapir u kukuruzu (Shaner i Mallipudi, 1991).

Herbicid ReferenceHlortoluron Fonne-Pfisfer i Kreuz, 1990Bentazon McFadden i sar.,1990; Moreland i sar.,

1993bPrimisulfuron Fonne-Pfisfer i sar., 1990; Moreland i

sar., 1995Prosulfuron Moreland i sar., 1993bMetolahlor Moreland i sar., 1993bDiazinon Moreland i sar., 1993bFlumatsulam Prear i sar., 1993Acetohlor Jablonkai i Hatrios, 1994Nikosulfuron Diehl i sar., 1995; Baerg i sar., 1996Triasulfuron Perans i Shuler, 1995Hlorimuron Polge i Harrett, 1995Linuron Moreland i sar., 1995Imazetrapir Davies i sar., 1998

Ta bela 2. P rim e ri u lo g e c ito h ro m a P 4 5 0 iz m ik ro z o m a k u ku ru z a u m eta b o liz m u herbicida

Metabolizam herbicida preko citohroma P450 (aktivna komponenta bentazon)

Rezistentnost korova na herbicide

Selektivnost detoksikacija

Selektivnost i selektivna toksičnost herbicida je direktno povezana sa procesima njegove detoksikacije u gajenim i korovskim biljkama.

Visoka selektivnost bazirana je na pravcima i brzini detoksikacije molekula herbicida.

Neke korovske biljke nemaju izražen kapacitet za detoksikaciju herbicida, pa su osetljive na njihovo toksično delovanje. Druge korovske biljke brzo metabolizuju molekul toksičnog herbicida u netoksične proizvode pa se za njihovo suzbijanje moraju tražiti drugi herbicidi ili druge tehnike suzbijanja.

Usled ovoga javlja se novi problem – problem rezistentnosti korova na herbicide (Holt i sar., 1993; Janjić, 1994).

Mehanizam za razvoj rezistentnosti:1. promene na mestu delovanje

herbicida i2. povećanje kapaciteta detoksikacije

herbicida u korovskim biljkama.

Pri procesu razvoja rezistentnosti korovske biljke vrše detoksikaciju herbicida na dva moguća mehanizma:1. mutacija na postojećem citohromu

P450 koja dovodi do ubrzanog vezivanja i metabolizma herbicida i

2. povećanje aktivnosti postojećeg citohroma P450.

Zaključak Sekudarni metabolizam,

metabolizam herbicida, biosinteza strukturnih metabolita.

Detoksikacija rezistentnost.

Pitalica:

Šta su to herbicidi?

Koja je uloga citohroma P450 u metabolizmu herbicida?

Usled čega se stvara rezistentnost korova na herbicide?

LITERATURAB a k , S ., K a n n , R .A ., O ls e n , C .E ., H a lk ie r, B .A .: C lo n in g and ex p re ss io n in E sc h e r ic h ia c o li o f the o b tu s i fo -

liol 1 4 α -d e m e thy la se o f S o rg h um b ico lo r (L ) M o en ch , a c y to c h ro m e P 4 5 0 o r th o lo g o u s to the sterol 1 4 α -de m e thy la se s (C Y P 5 1) fro m fu n g i and m am m a ls. P lan t Jou rn a l, 11 , 1 9 1 -2 0 1 , 1997.

B a rre tt , M .: M a la th io n m e tab o lism by m a iz e m ic ro so m e s . A b s tra c t s o f the 8th IU PA C C o n g re ss o f Pesticide C h e m istr y, 2 , 9 4 2 , 1994.

B atard , Y., S ch a lk , M ., P ire r re l, M .-A ., Z im m e rlin , A., D u r s t, F. and W e rc k -R e ich a r t , D .: R e g u la t io n o f the c in n a m ate 4 -hydro x y la se (C Y P 7 3 A 1 ) in Je ru s a le m a r tich o k e tu b e rs in re sp o n se to w o u n d in g and chemi- c a l tre a tm e n ts . P la nt P hys io lo g y, 1 1 3 , 9 5 1 -9 5 9 , 1997.

B e a rg , R .J ., B a r re tt , M ., P o lg e , N .D : In se c tic id e and in s e c tic id e m e ta b o l ite in te ra c t io n s w ith c y to c h ro m e P450 ac tiv itie s in m a ize . Pe stic id e B io ch em istr y and P hysio lo g y, 5 0 , 1 0 -2 0 , 1996.

B o lw e l l ,G .P., B o z a k , K ., Z im m e r lin , A .: P la n t c y to ch ro m e P 4 50 . P hy to chem istr y, 3 7 , 1 4 9 1 -1 5 0 5 , 1994. B u r to n , J.D ., M an ess , E .P.: C on st itu tiv e an d in d u c ib le b e n taz o n h y d rox y la tio n in sh a tte rc an e (S o rg h u m bicolor)

and jo h n so n g ra s s (S org hu m h a le p en se ). Pe stic id e B io ch e m istr y and P hysio lo g y, 4 4 , 4 0 -4 9 , 1992. C h ap p le , C .: M o le c u la r-g e ne tic a na lysis of p lan t c y to c h ro m e P 4 5 0 -d e p e n d e n t m on o ox y g en ase s. A n n u a l R e v iew

o f P la n t P hysio lo g y and P la nt M o lecu la r B io lo g y, 4 9 , 31 1 -3 4 3 , 1998. D av ie s , J., C a s e le y, J.C .: H erb ic id e safen e rs: a re v ie w. Pe stic ide S c ie n c e , 5 5 , 1 0 4 3 -1 0 5 8 , 1999. D a v ie s , J., C a s e le y, J.C ., Jo n e s , O .T.G ., B a rre tt, M ., P o lg e , N .D .: M o de of a c tio n of n ap h tha lic a n hy d r id e a s a sa fe -

ner for h e rbic id e A C 2 63 2 22 in m a iz e . P e s t ic id e S c ie n c e , 5 5 , 2 9 -3 8 , 1998. D ie h l, K .E ., S to lle r, E .W., B a rre t t M .: In v iv o an d in v itro in h ib ition of n ic o su lfu ron m e ta b o lism b y te rb u fo s meta-

b o lite s in m aiz e . Pestic id e B io ch em istr y and P hysio lo g y, 5 1 , 1 3 7 -1 4 9 , 1995. E lezo v ić , I., B o žić , D ., Vrb n ič a n in , S .: A p sorp c ija , tran s lo k ac ija i m e ta b o liz a m su lfo n ilu re a h e rb ic id a u biljci.

Pe st ic id i , 1 8 , 2 0 5 -2 2 2 , 2003.

H a a c k , A .E ., B a lk e , N .E .: A ry l-hyd rox y la tion o f b e n taz on by b e n taz on 6 -hyd ox y la se , a c y to ch rom e P 4 5 0 mono- ox y g en ase , f ro m so rg h u m , corn and rice . A b stra c ts o f the 8th IU PA C C o n g re s s of P e stic id e C h e m istr y, l, 2 , 8 3 9 , 1994.

H o lt., J.S ., P o w le s S .B ., H o ltu m J.A .M .: M e c h a n ism s and a g ro n o m ic a sp e c ts o f h e rb ic id e re s istan c e . Annual R e v ie w o f P la nt P hysio lo g y and P lant M o lec u la r B io lo g y, 44 , 20 3 -2 29 , 1993.

H o lto n , T.A .: M o d ific a tio n o f f lo w er c o lo u r v ia m a n ip u la tio n of P 4 5 0 g e n e e x p re s sio n in tra n sg e n ic p la n ts . Drug M e tab o lism and D ru g In te rac t ion s, 12 , 35 9 -3 6 8 , 1995.

F e ye re ise n , R .: In se c t P 4 5 0 g e ne s . A n n u a l R e v ie w of E nto m o lo g y, 4 4 , 5 0 7 -5 3 3 , 1999. F o n n e -P f is te r, R ., G u a d in , J., K re u z , K ., R a m ste in e r, K . , E b e r t, E .: H y d ro x y la tio n o f p rim isu lfu ro n b y an in du c ib le

c y to c h ro m e P 4 5 0 -d e p en d e n t m on o ox y g en ase sy ste m fro m m aiz e . P es tic id e B io ch e m istr y an d P hy sio lo g y, 3 7 , 1 6 5 -1 7 3 , 1990.

F o n n e-P f is te r, R., K re u z, K .: R in g -m e th y l hy d ro x y la tio n o f c h lo r to lu ro n by an in d u c ib le c y to c h ro m e P450- d e p e n d en t en z y m e from m a iz e . P hy to ch em istry, 29 , 2 7 9 3 -27 9 6 , 1990.

F re a r, D .S ., S w a n s o n , H .R ., Ta n a k a , F.S .: N -d em ethy la tion o f su b stitu te d 3 -(ph e ny l)-1 -m ethy lu re as: iso la tion and c a rac te riz a tio n o f m ic ro so m a l m ixe d fu n c t ion ox id ase from c o tton . P hy to ch em istry, 8 , 2 1 5 7 -2 1 6 9 , 1969.

F re a r, D .S ., Sw a n s o n , H .R ., Ta n ak a , F.S .: M e ta b o lism of f lu m e tsu lam (D E -498 ) in w h ea t, corn an d b arley. Pesticide B io ch em istry and P hy sio lo g y, 4 5 , 1 7 8 -1 9 2 , 1993.

F re ar, D .S ., S w an so n , H .R ., T h a la ck e r, F.W.: In d u c e d m ic ros o m a l o x id a tio n of d ic lofo p, tr ia su lfu ro n , c h lor su lfu - ron and lin u ro n in w h e at. Pestic id e B io ch em istry and P hy sio lo g y, 4 1 , 2 7 4 -2 8 7 , 1991.

F re ar, D .S .: W h e at m ic ro s o m a l c y to c h ro m e P 4 5 0 m o n o ox y g e n a se s : c h a ra c te r iz a tio n a n d im p or ta n ce in th e meta- b o lic d e tox ific a tion an d se lec tiv ity o f w e ath h e rb ic id e s. D ru g M e ta bo lism an d D rug In te rac t ion s, 1 2 , 239- 3 5 7 , 1995.

F re y, M ., K lie m , R ., S a e d le r, H ., G ie r l , A .: E x pre ssion o f c y toc h rom e P 450 g e n e fam ily in m aize . M o lec u la r and

G e n e ra l G e n e tic s , 2 4 6 , 1 0 0 -1 0 9 , 1995. F re y, M ., K l ie m , R ., S a e d le r, H ., G ie r l , A .: A n a ly sis o f a ch e m ic a l p la n t d e fe n se m e c h a n ism in g ra sse s. S c ie n ce ,

2 7 7 , 6 9 6 -6 9 9 , 1997.

Ja b lo n k ai, I., H a tz io s , K .K .: M ic ro som al ox id a tion o f the h erb ic id es E P T C and ac e to c h lo r and of the sa fen e r M G -1 9 1 in m aiz e . Pe stic id e B io ch em istr y and P hy sio lo g y, 4 8 , 9 8 -1 0 9 , 1994.

Ja n jić , V.: M e ta b o liz a m h e rb ic ida u b i ljk a m a . A c ta h e rb o lo g ic a , 2 , 2 , 5 -2 1 , 1993. Ja n jić , V.: R e z iste n tn o st k o ro v s k ih b i lja k a pre m a h e rb ic id im a . A c ta h e rb o lo g ic a , 3 , 1 , 5 -1 7 , 1994. Ja n jić, V., Jo va n ović- Ve ljo v ić , S . , S ta n k o v ić -K a le z ić , R ., Jo va n ović , L j., M a r isa v lje v ić , D .: D elo vanje herbicida

na foto sinte z u . A c ta h e rb o lo g ic a , 3 , 2 , 5 -1 5 , 1994. Ja n jić , V.: S u lfo n ilu re e . Institut za istra ž iv a n ja u p o ljop riv re d i S rb ija , A k a d em ija n au k a i u m je tn o st i Republike

S r p ske . B e o g ra d , 2002. Ja n jić , V.: F ito fa rm ac ija . D ru štv o z a z aštitu b ilja S rb ije , In stitu t z a istraž iva n ja u p oljopr iv re d i S rb ija , Po ljop r iv red n i

fa k u lte t B a n ja L u k a . B e o g ra d – B a n ja L u k a , 2005. Ja n jić , V.: M e h a n iz a m d e lo va n ja p e stic id e . D ru štv o za z a š titu b ilja S rb ije , A k a d e m ija na u k a i u m je tn o st i R ep u b lik e

S rp ske , In stitu t za p e stic id e i z a štitu ž ivo tn e s re d in e . B an ja L u k a – B e o gra d , 2009. K e m p, M .S ., C a se le y, J.C .: Sy n e rg istic e ffe c t o f 1 -am in o b en z o tria zo le on the p hy to to x ic ity o f c h lo r to lu ron and

iso p ro tu ro n in a re sista n t p op u lation o f b lack -g ra ss (A lop ec u ru s m yo su ro ide s ). P ro c e ed in g s B rig hto n C rop P ro tec tio n C on fe ren ce -W ee d s, 8 9 5 -89 8 , 1987.

K e m p, M .S ., M o s s , S .R ., T h o m a s , T.H .: H erbic id e re sista nce in A lop ecu r u s m y o suro id e s . In : M an a g in g R esistance to A groc h e m ica ls . A C S Sy m p osiu m S e r ia l 4 21 (eds . M .B . G ree n , H .M . L e B aron an d W.K . M o b e rg ) , A m eric an C he m ic a l S o c ie ty, W as h in g to n , D C , 3 7 6 -3 9 3 , 1990.

K o ch , B .M ., S ib b es e n , O ., H alk ie r, B .A . Sv e n d ese n , I ., M o lle r, B .L .: T h e pr im ar y s e qu e n c e o f c y to ch ro m e P 4 50 T Y R , th e m u ltifu n kc ion a l N -hy d rox y lase ca ta ly z ing th e c onve rsion of L - ty ro sine to p -h y d ro x y p h e y la c e ta ld ehyd e o x im e in b io sy nte sis o f the c y a n o g en ic g lu c is id e dhurrin in S o rg h u m b ic o lo r (L ) M o e n c h . A rc h iv e s o f B io ch em istry and B io p hysic s , 3 2 3 , 1 7 7 -1 8 6 , 1995.

K rau s , P.F.X ., K u tch a n , T.M .: M o lec u la r c lon in g an d h e te ro lo g ou s e x pres s ion of a c D N A en c o d in g berbamunine, a C -O p h e n o l co u p lin g c y to c h ro m e P 4 5 0 fro m the h ig h e r plant B e rb e ris sto lo n ife ra . P ro c ee d in g s o f the N a tio n a l A ca d e m y o f S c e in c e s o f U S A , 9 2 , 2 0 7 1 -2 0 7 5 , 1995.

Lu n d qu ist , E ., Jo h an sso n , I ., In g e lm a n -S u n d b e rg , M .: G e n e tic m a ch an ism s fo r dup lication an d m u ltidup lication o f th e hu m an C Y P 2 D 6 g e n e an d m e th o d s fo r d e te c tio n o f d u p lic a te d C Y P 2 D 6 g en e s. G en e , 2 2 6 , 3 2 7 -3 3 8 , 1 9 9 9 .

M c F a d d e n , J .J ., G ro n w a ld , J.W., E b e r le in , C .V : In v itro hy d ro x y la tio n o f b e n ta z o n b y m ic ro s o m e s f ro m n aph th a lic a n hy d rid e - t re a ted c o rn sh o o ts. B io c h e m ic a l a n d B io p hys ic a l R e se arc h C om u nic a tio ns , 1 6 8 , 2 0 6 - 2 1 3 , 1 9 9 0 .

M c F a d d e n , J.J ., F re ar, D .S ., M a ng ag e r, E .R .: A r y l hy d ro x y la tio n o f d ic lofo p b y a c y to ch ro m e P 4 5 0 d e p en de nt m o n o ox y g en ase fro m w h eat. Pe stic id e B io ch e m is tr y and P hysio lo g y, 3 4 , 9 2 -1 0 0 , 1989.

M e y e r, K., C u su m a n o, J.C ., S o m e r v ille , C ., C h a p p le , C .C .S .: F e rru la te -5 -hy d ro x y la se f ro m A ra b id o p sis thali- ana d e fin e s a n e w fa m ily of c y to c h rom e P 4 5 0 d e p en d en t m o n o ox y g ena ses, P ro cee d in g s o f the National A c a d e m y o f S c ie n c e s o f th e U S A , 9 3 , 6 8 6 9 -6 8 7 8 , 1996.

M o r e la n d , D .E ., C o rb in , F .T., M a c F a r la n d , J.E .: E ffe c ts of safe n e rs on the o x id a tion o f m u ltip le su b s tra te s by g ra in so rg hu m m ic ro s om es . Pe stic id e B io ch e m istr y and P hysio lo g y, 4 5 , 4 5 -5 3 , 1993a.

M o re la n d , D .E ., C o rb in , F.T., M a cF a r la n d , J.E .: O x id ation o f m u ltip le su b stra tes by c o rn m ic ro so m es . Pesticide B io ch em istry and P hysio lo g y, 4 5 , 9 8 -1 0 8 , 1993b.

M o relan d , D .E . , C o rb in , F.T., M a c Fa rlan d, J.E .: Pa rt ia l c h ara c te r iz a tio n of m ic ro so m e s iso la te d f rom m u n g bean c oty le d on s. Pe stic id e B io ch em istry and P hys io lo g y, 5 2 , 9 8 -1 0 8 , 1995.

M o u g in , C ., C a b a n n e , F., C a n ive n c , M ., S c a lla R .: H y d rox y la tio n an d N -d e m e thy la tion o f c h lo rto lu ro n by wheat m ic ro so m a l e n z y m e s . P la n t S c ie n c e , 6 6 , 1 9 5 -2 0 3 , 1990.

M o ug in , C ., P o lg e , N ., S c a lla , R ., C a b an n e , F.: In te ra c tio n s o f v ar iou s a g ro c he m ic a ls w ith c y to c h ro m e P 4 5 0 depen- d e n t m on ox y d ro g e n a s e s o f w h e a t c e lls . Pe st ic id e B io c he m istr y and P hysio lo g y, 4 0 , 1 -1 1 , 1991.

Pe rsa n s, M .W., S c h u le r, M .A .: D iffe ren tia l in du c tio n o f c y to c ro m e P 4 5 0 -m ed ia te d t ria su lfu ro n m e ta b o lism by n ap h ta l ic a n h y d rid e and tr ia su lfu ron . P la n t P h ysio lo g y, 1 0 9 , 1 4 8 3 - 1 4 9 0 , 1995.

P o lg e , N .D ., B a r re t t, M .: C h a ra c te r iza tio n o f c y to c h ro m e P 4 5 0 -m e d ia te d c h lo rim u ro n e th y l hy d ro x y la tio n in m aize m ic ro som es. Pestic id e B io ch em istry and P hy sio lo g y, 5 3 , 1 9 3 -2 0 4 , 1995.

P o r te r, T.D ., C o o n , M .J.: C y to c h ro m e P-4 5 0 M u ltip lic ity o f iso fo rm s , su b stra te s and re g u la to r y mechanisms. Jo u rn a l o f B ilo g ic a l C h e m istr y, 2 6 6 , 1 3 4 6 9 -1 3 4 7 2 , 1991.

P re sto n , C ., Ta rd if, F.J., C h r isto p h e r, J.T., P o w le s , S .B .: M u ltip le re sistan c e to d issim ila r h e rb ic id e chemistries in a b io ty p e o f L o liu m r ig id u m du e to en h an c e d a c tiv ity o f seve ra l h e rb ic id e d eg ra d in g en z y m es. Pesticide B io ch em istry and P hy sio lo g y, 5 4 , 1 2 3 -1 3 4 , 1996.

P re s to n , C ., P o w le s , S .B .: L ig h t-d e p e n d e n t e n h a n c e d m e ta b o lism o f ch lo r to lu ro n in a su b s titu ted u re a herbicide- resiste n t b io ty p e o f L o liu m rig idu m G au d . P lan ta , 2 0 1 , 2 0 2 -2 0 8 , 1997.

R o b in e a u , T., B a ta rd , Y., N e d e lk in a , S ., C a b e l lo -H u r ta d o, F ., L e R e t, M ., S o ro k in e , O ., D id ie r je a n , L ., W e rck - R e ic h ar t , D .: T h e ch em ica lly in d u c ib le plant P 4 5 0 C Y P 7 6 B 1 a c tive ly m e ta b o liz es ph e ny lu re a and other x e n o b io tic s . P la nt P hy sio lo g y, 1 1 8 , 1 0 4 9 -1 0 5 6 , 1998.

S c h u le r, M .A .: P la n t c y to c hrom e P 4 5 0 m o n o o x y g e na se s. C ritic a l R e v ie w s o f P la nt S c ien ce , 1 5 , 2 3 5 - 2 8 4 , 1996. S im in sz ak y, B ., C o rb in , F ., Ward, E .R ., F le is c h m a n n , T.J ., D e w e y, R .E .: E x pre ssio n of a soy b e a n cytochrome

P 4 5 0 m o n o ox y g e n a s e . P ro c e e d in g s o f th e N a tio n a l A c a d e m y of S c ie n c e o f th e U S A , 9 6 , 1 7 5 0 -1 7 5 5 , 1999. S in g h , S ., K irk w o o d , R .C ., M a rsh al l, G .: E ffe c t o f A B T on a c tiv ity and the rate of d e g ra d a tio n o f isoproturon

in su sce p tib le and resistan t b io ty p e s o f P h a la ris m in o r and in w e at. P e s t ic id e S c ie n c e , 5 3 , 1 2 3 -1 3 2 , 1998. S h a n e r, D ., M a l lip u d i, N .M .: M e c h a n ism s o f se le c tiv ity o f the im id a z ilin on e h e rb ic id e s . In: T h e Imidazilinone

H e rbic id e es (e d s. D .L . S h an e r and S .L . O C o n n o r) , C R p re a a , B o c a R a to n , F L , 9 1 -1 0 2 , 1991. S o n g , W.C ., F u n k , C .D ., B ra s h , A .R .: M o le c u la r c lo n in g o f an a l len e ox id e sy n thase : a c y tic h rom e P 4 50 spacia-

liz ed fo r th e m e ta b o lism o f fa tty ac id hy d ro p erox id es . P ro c eed in g s o f th e N ation a l A c ad e m y o f S c ie nce o f th e U S A , 9 0 , 8 5 1 9 -8 5 2 3 , 1993.

T h a la ck e r, F.W., S w a n s o n , H .R ., F r e a r, D .S .: C h ara c te riz a tio n , p u r i f ic a tio n and rec on stitu tio n o f an inducible c y to ch rom e P 4 5 0 -d e p en d en t tr ia su lfu ron hyd ox y lase fro m w h e at. Pe stic id e B io ch em istry an d P hysio log y, 4 9 , 2 0 9 -2 2 3 , 1994.

Te u ts c h , H .G ., H a s e n fra n tz , M .P., L e so t , A ., S to ltz , C ., G a r n ie r, J.-M : Iso la tio n a n d s e q u e n c e o f a c D N A en c o d in g th e Je ru sa le m a rtich o k e c in n a m m ate -4 -hy d rox y lase , a m ajor p lan t c y to ch rom e P 4 5 0 in vo lved in th e p h e - ny lp ro p an o id p a thw ay. P ro c ee d in g s of th e N ation a l A c ad e m y o f S c ie nce o f th e U S A , 9 0 , 4 1 0 2 -4 1 0 6 , 1 9 9 3 .

Z im m e rlin , A ., D u rst , F.: X e n o b io tic m e ta b o lis in p la n ts: A r y l hy d rox y la t io n o f d ic lo fo p b y a c y to c h ro m e P 4 5 0 en zy m e from w h eat. P hy to chem istry, 2 9 , 1 7 2 9 -1 7 3 2 , 1990.

Z im m e rlin , A ., D u rs t, F.: A r y l-hy d ro x y la t ion of the h e rb ic id e d ic lo fop by a w h e at c y to c h ro m e P-4 5 0 monooxy- g en ase : sub strate sp e c ific ity and p hys io lo g ic a l a c tiv ity. P la n t P hy sio lo g y, 1 0 0 , 8 7 4 -8 8 1 , 1992.

W e rc k -R e ic h a r t, D ., H e h n , A ., D id ie r je a n , L .: C y to ch rom es P 4 5 0 fo r e n g in ee rin g h e rb ic id e to le ran c e . Trend s in P lant S c ie n ce R e v ie w, 5 , 1 1 6 -1 2 3 , 2000.