7/24/2019 Metodologia Purificacion actividad

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MOMENTO 2PURIFICACIN Y

CARACTERIZACIN DESACCHAROMYCES CEREVISAE

JOSE LUIS SERRATO PATIO

BIOTECNOLOGIA ALIMENTARIA211619_5

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SACCHAROMYCESCEREVISIAE

La levadura de erve!a e" u# $%#&%u#'elular( u# )'*% de levadura u)'l'!ad%'#du")r'al+e#)e e# la ,a-r'a'.# de *a#(

erve!a / v'#%0 E# "u 'l% de v'da al)er#a#d%" ,%r+a"( u#a $a*l%'de / %)ra d'*l%'de

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ESTRUCTURA DE LAINVERTSA

La ,u#'.# -'%l.&'a de

la e#!'+a '#ver)a"a e"*ar)''*ar e# el+e)a-%l'"+% de la&lu%"a0

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METODO DEPURIFICACION

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PREPARACION DE LA LEVADURA

Se real'!a u#a "%lu'.# %# a&ua de"'%#'!ada"e ad''%#a )%lue#% al / ar-%#a)% de "%d'%al 1( "e '#u-a la "%lu'.# *%r d'a"( lue&% "ee#)r',u&aa 333 & 4 23 +'#( "e re+ueve el"ed'+e#)% / "e ad''%#a el e)a#%l0 See#)r',u&a de #uev% / a"' "e %-)'e#e el"%-re#ada#)e ue re*re"e#)a el e4)ra)% *ur%del e4)er#al '#ver)a"e '"%,%ru+"0

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CROMATOGRAFA DE GEL DE

INTERCAMBIO UNICO

Se real'!a %# el# de l%&rar eleu'l'-r'% de la"%lu'.# / "e

de-e +%#')%rear0

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CROMATOGRAFA DE GEL Se real'!a la "e*ara'.# *r% ,%r+a" / lue&% la

,ra'.# %rre"*%#d'e#)e a la" *r%)e7#a"( "ed'"uelve #ueva+e#)e e# a&ua de"'%#'!ada0

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ELECTROFORESIS EN GEL DE

POLIACRILAMIDA Se l%&ra "e*arar la" +%l8ula"

-'%l.&'a" e# de*e#de#'a,u#da+e#)al+e#)e de "u ar&a0

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ENFOQUEISOELECTRICO

Se l%&ra ue la" ar&a" de la *r%)e7#a "ea# 3/ /a #% "e +ueva# +a"0

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DETERMINACION DE ANALISIS

Y CONCENTRACION DE LAACTIVIDAD INVERTASA

La '#ver)a"a 25 IL:,ue a&re&ada a la "%lu'.#

de "aar%"a %( M e# 53 +M de )a+*.#ae)a)% ;5 IL:( P$ (50

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DETERMINACIN DE LACONSTANTE DE CINTICA

Se de)er+'#% u)'l'!a#d% la" %#d''%#e"

de"r')a" del e#"a/% '#ver)a"a / u#a%#e#)ra'.# de "aar%"a e# el ra#&% de 205a 33 #M0 La @+ "e alula u"a#d% la)ra#",%r+a'%# de la eua'%# de +'$ael'"

Me#)e# de l'#eeaverBur0

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PH Y LA TEMPERATURA OPTIMA

Para de)er+'#ar el *$ %*)'+% de ada u#a dela" '"%,%r+a"( el e#"a/% de la '#ver)"ade"r'-e ue ,ue real'!ad% e# 25=C *er% e#-uDer de Mllva'#e ')ra)% ,%",a)% de "%d'% /%(1 M de 3(2 M: %# l%" d',ere#)e" val%re" de*$ e# el ra#&% de 03 a 030 La )e+*era)ura%*)'+a "e de)er+'#% u)'l'!a#d% la"%#d''%#e" de"r')a" de e#"a/% '#ver)a"a ad',ere#)e" )e+*era)ura" de"de 13 $a")a;3=C:0

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ESTABILIDAD TERMAL

Se '#u-ar%# +ue")ra" de la" '"%,%r+a" de la'#ver)a"a e4)er#%" 15 UF+L: e# a&uade"'%#'!ada a 63=C 0 Al7u%)a" 25IL: ,uer%#)%+ada" ada 5 +'# / el re"'dual de laa)'v'dad "e +'d'% d're)a+e#)e %# la"%#d''%#e" de"r')a" de e#"a/% '#ver)a"a0

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INMOVILIZACIN DE LA

INVERTASA EXTERNA La" '"%,%r+a" de de la '#ver)a"a e4)er#%" "e

'#+%v'l'!ar%# "%-re Eu*er&') +a)er'al *%r%"%*%r)ad%r de+%")rad% C( "e)%r ue %#)'e#e %4'ra#%

&ru*%" rea)'v%" ,re#)e a a+'#% / "ul$'dr'l% &ru*%"de e#!'+a"0 Tre'#)a +'l'&ra+%" de eu"*er&') "ea?ad'. a 2 +l de +ue")ra e4)er#% '"%,%r+a" de la'#ver)a"a d'lu'da %# a&ua de"'%#'!ada a 2 UF+l /"e a&')% dura#)e 1 $ a )e+*era)ura a+-'e#)e /de"*ue" "e %l%a a =C %# a&')a'%# %a"'%#al('#+%v'l'!a#d% "e lav% e4)e#"a+e#)e %# a&uade"'%#'!ada *ara el'+'#ar el e#!'+a #% u#'d%0 See4*u"'er%# +ue")ra" de %#)r%l de la '#ver)a"a a la"

+'"+a" %#d''%#e" %+')'e#d% eu*er&') C0