micologia-diagnostico poe el laboratorio

8/14/2019 Micologia-diagnostico Poe El Laboratorio

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LABORATORIOLABORATORIO

ProcedimientosProcedimientosde cultivo yde cultivo y

aislamiento deaislamiento dehongoshongos

Q.C CIRENIA HERNANDEZ TREJOQ.C CIRENIA HERNANDEZ TREJO



OBTENCION Y OBTENCION Y

PROCESO DEPROCESO DEMUESTRASMUESTRAS



ConsideracionesConsideraciones

generalesgenerales Tomar muestra del lugar Tomar muestra del lugar

adecuadoadecuado Usar tecnica esterilUsar tecnica esteril Enviar material adecuadoEnviar material adecuado

Enviar y procesar con prontitudEnviar y procesar con prontitud Etiquetar y enviar diagnosticosEtiquetar y enviar diagnosticos

probablesprobables



Origen deOrigen de

especimenesespecimenes SangreSangre Médula oseaMédula osea LíquidoLíquido

cefalorraquideocefalorraquideo Cutáneo (pelo, uñas yCutáneo (pelo, uñas y

piel)piel) Tracto respiratorioTracto respiratorio TejidosTejidos

OrinaOrina Vagina y cuelloVagina y cuello

uterinouterino HeridasHeridas LesionesLesiones

subcutáneassubcutáneas LesionesLesiones

mucocutáneasmucocutáneas



SangreSangre

Se realiza como hemocultivoSe realiza como hemocultivo 8 ml8 ml Vacutainer con polietanolVacutainer con polietanol

sulfonato de sodiosulfonato de sodio



Líquido cefalorraquideoLíquido cefalorraquideo

Se colecta asepticamente, laSe colecta asepticamente, lamayor cantidad posible.mayor cantidad posible.

Del sedimento se toma muestraDel sedimento se toma muestrapara examen directo epara examen directo einoculacion en medios aerobicos yinoculacion en medios aerobicos y

anaerobicosanaerobicos



EspecimenesEspecimenes

cutaneos, pelocutaneos, pelo Se toman tallos pilosos (10)Se toman tallos pilosos (10) Si son pelos rotos se frota la pielSi son pelos rotos se frota la piel

cabelluda con hoja de bisturicabelluda con hoja de bisturi Colocar el material entre dosColocar el material entre dos

portaobejtos o en caja de Petri oportaobejtos o en caja de Petri o

incluso en un sobre limpioincluso en un sobre limpio



Especimenes cutáneos,Especimenes cutáneos,

uñauña Se limpia la uña con alcohol 70%Se limpia la uña con alcohol 70% Con bisturi estéril, se rebaja lasCon bisturi estéril, se rebaja las

capas superficiales y se obtienecapas superficiales y se obtienequeratina mas profundaqueratina mas profunda

Se extrae material bajo la láminaSe extrae material bajo la lámina Se coloca el material en caja deSe coloca el material en caja de

Petri estérilPetri estéril



Especimenes cutáneos,Especimenes cutáneos,

pielpiel Limpiar la piel con alcohol 70%Limpiar la piel con alcohol 70% frotar con hoja de bisturi estérilfrotar con hoja de bisturi estéril colocar el material obtenido encolocar el material obtenido en

caja de Petri estérilcaja de Petri estéril



Tracto respiratorio,Tracto respiratorio,

esputoesputo Se colecta por la mañanaSe colecta por la mañana Se retira la dentadura y seSe retira la dentadura y se

enjuaga la bocaenjuaga la boca Debe ser de una espectoracionDebe ser de una espectoracion

profundaprofunda colectar en recipiente estérilcolectar en recipiente estéril



Tracto respiratorio, exudado Tracto respiratorio, exudado

faringeofaringeo Se puede usar hisopoSe puede usar hisopo Preferentemente conPreferentemente con

abatelenguas estéril que seabatelenguas estéril que secoloca en tubo estérilcoloca en tubo estérilmanteniendose húmedomanteniendose húmedo



Tracto respiratorio, Tracto respiratorio,

secrecion bronquialsecrecion bronquial Si es lavado bronquial, por loSi es lavado bronquial, por lo

general se contamina con flora degeneral se contamina con flora de

cavidad oral.cavidad oral. Si es punción transtraqueal noSi es punción transtraqueal no

estará conta- minada.estará conta- minada.



Tracto respiratorioTracto respiratorio

La secrecion mucosa espesaLa secrecion mucosa espesadeberá ser pro- cesada paradeberá ser pro- cesada para

exponer la mayor cantidad deexponer la mayor cantidad demicroorganismosmicroorganismos

Centrifugar para examen directoCentrifugar para examen directo

y cultivoy cultivo Si se hace un estudioSi se hace un estudio

micobacteriologico separar lamicobacteriologico separar la

muestra en dos tubos antes delmuestra en dos tubos antes del



TejidosTejidos

Las biopsias seran tomadasLas biopsias seran tomadasincluyendo el borde y el centro deincluyendo el borde y el centro de

la lesionla lesion Se mantienen húmedas conSe mantienen húmedas con

solución salinasolución salina

Buscar granos, absesos paraBuscar granos, absesos paracultivarcultivar

Picar y homogenizar el resto delPicar y homogenizar el resto del

tejido para cultivartejido para cultivar



OrinaOrina

La primera de la mañanaLa primera de la mañana Metodo ideal: cateterMetodo ideal: cateter No conviene de muestras de 24No conviene de muestras de 24

hrs.hrs. Centrifugar para examen directoCentrifugar para examen directo

y cultivoy cultivo No exceder de 12-14 hrs a 4°No exceder de 12-14 hrs a 4°



Heridas, abscesos yHeridas, abscesos y

secrecionessecreciones Hacer raspado de fondo y bordeHacer raspado de fondo y borde

de lesionesde lesiones Aspiración de absesosAspiración de absesos Hacer extendidos en busqueda deHacer extendidos en busqueda de

granos y elementos fungicosgranos y elementos fungicos



EXAMENEXAMENDIRECTO DEDIRECTO DE

ESPECIMENEESPECIMENE

SS



Examen directoExamen directo

Fresco en solucion salinaFresco en solucion salina Fresco con Lactofenol azul-Fresco con Lactofenol azul-

algodonalgodon Preparacion con Hidroxido dePreparacion con Hidroxido de

PotasioPotasio Tincion de Gram Tincion de Gram Tincion para AAR Tincion para AAR Tincion con tinta china Tincion con tinta china



Solución salinaSolución salina

Cloruro de sodio 0.85 gr

Agua destilada 100 ml

- Colocar una gota del especimen y una gota

de solucion salina

- Las estructuras micoticas se observaran lige-

ramente verdes, brillantes y birrefringentes




Esferulas de C. immitis

en esputo



Lactofenol Azul-algodónLactofenol Azul-algodón

Cristales de fenol 20 gr

Acido lactico 20 ml

Glicerina 40 mlAgua destilada 20 ml

Azul algodón

solución acuosa 1% 2 ml

- El azul algodon se fija a la quitina de los hongos

- Se puede hacer una preparacion permanente




Histoplasma

Critptococo




Mucor

Aspergillus




Hifa tabicadaen KOH




Parasitacion endotrix




Agentes de Piedra




Malazesia



Tincion de GramTincion de Gram

Los hongos suelen ser Gram +

Los mas frecuentemente encontrados con

esta tincion son levaduras




Pseudohifas

y blastoconidias




Malazesia




Actinomicetos



Tincion de CalcofluorTincion de Calcofluor

blancoblanco- Se trata de un agente blanqueador usado

en la industria textil y del papel

- Se une a la quitina de los hongos

- Se interpreta con el microscopio de

fluorescencia




Pelo parasitado



Tincion para AARTincion para AAR

- Para Actinomicetos

- Coloracion de Ziehl-Neelsen

- Coloracion modificada de Kinyoun



Tinta chinaTinta china

Tinta china 15ml

Merthiolate 1:1000 3ml

Tween 80 1:1000 0.1ml

- Es de utilidad para reconocer la capsula de C. neo-

formans

- Se observa con el condensador del microscopio a lamáxima intensdad de luz




Criptococo

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