microscopia
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Microscopia
Prof(a): Nyara Marques
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MICROSCOPIA
Ciência que estuda os métodos e as aplicações em que se usa o Microscópio para observação de objectos, ou pormenores de objectos, com dimensões inferiores ao limite de resolução do olho humano (0,1 mm).
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Classificação dos Microscópios em função do Classificação dos Microscópios em função do número de sistemas de lentes: número de sistemas de lentes:
Microscópio simples ou Lupa – apenas possui uma lente ou um sistema de lentes centradas;
Microscópio composto – possui dois sistemas de lentes centradas, ocular e objectiva, para produzir uma imagem ampliada
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Classificação dos Microscópios compostosem função do princípio de iluminação que utiliza
Fotónico – em que o responsável pela transmissão de imagem é um feixe de fotons (luz visível, ultravioleta ou infra-vermelho).
Electrónico – emprega um feixe de electrons para produzir imagens ampliadas.
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A História do Microscópio
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Robert Hooke, estudioso inglês, foi o primeiro (em 1665) a observar células. Para tal valeu-se de um rudimentar microscópio, idealizado anos antes por um outro estudioso, Anthony Van Leeuwenhoeck.
Hooke observou cortes finos de cortiça, que se apresentavam ao microscópio com um aspecto similar a pequenos favos de mel empilhados. A cada um destes favos Hooke atribuiu a designação de cellulae (células).
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A história do microscópio óptico
começa na antiguidade clássica,
com a lente de aumento simples, e
apresenta um “renascimento” no
séc. XVII.
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Cerca de dez anos mais tarde o próprio Leeuwenhoeck observou pequenos seres vivos, que designou por “protozoários”, aos quais mais tarde foi dada a designação de bactérias.
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Assim, à medida que se dava a evolução do microscópio óptico, também o conhecimento da constituição dos diferentes organismos ia evoluindo.
A ciência atravessava uma fase de grande desenvolvimento, que viria a culminar no séc. XIX.
Durante todo este período a preocupação dos homens da ciência centrava-se não só no aperfeiçoamento dos sistemas ópticos, mas também na evolução das técnicas inerentes à preparação do material para observação.
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Em meados do nosso século, o aparecimento do microscópio electrónico e, mais recentemente, do microscópio confocal laser, associados a sistemas computadorizados de análise de imagem, contribuíram para o avanço da biologia celular e molecular, continuando assim o conhecimento iniciado por Hooke.
Adaptado de Gonçalves et al, 2002
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MOC – Microscópio Óptico Composto
MET – Microscópio Electrónico de Transmissão
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MOC
Microscópio Óptico Composto
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Microscópio Óptico
O Microscópio Óptico e os seus constituintes:
Parte Mecânica;
Parte Óptica.
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Microscópio Óptico
Parte MecânicaPé ou Base
Braço ou coluna
Platina
Tubo ou canhão
Revólver ou Porta-objectivas
Parafuso Macrométrico
Parafuso Micrométrico
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Microscópio ÓpticoParte Óptica
Sistema de iluminação:Sistema de iluminação:
●Espelho ou lâmpada
●Condensador
●Diafragma
Sistema de ampliaçãoSistema de ampliação:
●Ocular
●Objectivas
●Objectivas de imersão
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Oculares
Ampliam a imagem fornecida pelo sistema
de objectivas.
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Canhão ou tubo
Serve de suporte ao
sistema ocular
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Braço
Serve de suporte à
platina e ao revólver.
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Revólver
Serve de suporte às objectivas e permite
a sua mudança.
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Objectivas
Amplia a imagem do objecto que está a ser observado.
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Platina
Serve de suporte à preparação a observar. Tem uma abertura na
pane central (janela da platina).
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Condensador
Distribui regularmente no campo da preparação a
luz que atravessa o diafragma
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Diafragma
Regula a intensidade da luz captada pelo espelho e que incide na preparação.
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Fonte de Luz
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Parafusos Macrométrico e Micrométrico
Permite movimentos (de maior ou menor amplitude)
de aproximação ou afastamento entre a
preparação e as objectivas.
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Base ou péConstitui a base de suporte de
todos os elementos do microscópio.
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Cuidados Gerais na Utilização do MOC:
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Na mesa apenas deverá permanecer o material
estritamente necessário;
Antes de pegar na caixa do microscópio, verifica
sempre que está fechada;
Transporta sempre o microscópio com ambas as
mãos, apoiando uma sobre a base e com a outra a
segurar o braço;
Coloca o microscópio na mesa afastado do bordo;
Não mexer nas objectivas e ocular com os dedos;
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Cuidados Gerais na Utilização do MOC:
As lentes devem ser limpas com pincel ou papel
apropriado ou com um pano de limpeza macio;
A objectiva de imersão, quando utilizada, deve ser
limpa com um pano embebido em xilol;
Evita molhar o microscópio;
Antes de arrumar, verifica que a objectiva de
menor ampliação está no prolongamento do tubo.
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Microscópio Óptico
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Microscópio ÓpticoManuseamento do MOC:
Iluminação:
Antes de iniciar qualquer observação é necessário
proceder à iluminação do campo microscópico;
Verifica se a objectiva de menor poder ampliador
está em posição de observação;
Verifica se o diafragma está completamente
aberto e se o condensador está completamente
subido;
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Microscópio ÓpticoManuseamento do MOC:
Iluminação:
Se o microscópio tiver uma fonte de iluminação
própria liga-a. (se não utiliza o espelho – face
côncava para a luz artificial e face lisa para luz
natural. Orienta o espelho de modo a que o campo
do microscópico fique completamente iluminado.)
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Ordem de utilização das objectivas:
A observação inicia-se com a objectiva de menor ampliação;
Vai-se aumentando gradualmente o poder de ampliação até à objectiva de maior ampliação;
Se for necessário utilizar a objectiva de 100 X, deverá colocar-se uma gota de óleo de imersão sobre a preparação.
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Focagem:
Coloca a preparação a observar na platina e depois de a centrar, fixa-a com o auxílio das pinças;
Utiliza o parafuso macrométrico em movimentos lentos para deslocar o tubo ou a platina até que a objectiva fique muito próxima da preparação;
Observa pela ocular enquanto rodas o parafuso macrométrico lentamente até obteres uma imagem nítida;
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Focagem:
Percorre lentamente a preparação em vários sentidos afim de encontrares a zona de maior interesse ;
Centra a zona de maior interesse;
Corrige a focagem com o auxílio do parafuso micrométrico, rodando-o em movimentos lentos.
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Técnica de substituição de objectivas:
Para observar com ampliações maiores basta rodar o revólver no sentido da objectiva da ampliação pretendida;
Corrige-se a focagem utilizando apenas o parafuso micrométrico.
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O O Microscópio Microscópio
ÓpticoÓptico