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Programa LAS 4.6 del Microscopio Leica DM5000 Microscopio LEICA DM5000 -Técnicas disponibles: Campo claro Campo oscuro DIC Fluorescencia -Programa para la captación de imágenes: LAS V4.6 encender el microscopio para poder abrir el programa la fluorescencia es opcional

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Programa LAS 4.6 del Microscopio Leica DM5000

Microscopio LEICA DM5000

-Técnicas disponibles: Campo claro Campo oscuro DIC Fluorescencia -Programa para la captación de imágenes: LAS V4.6 encender el microscopio para poder abrir el programa la fluorescencia es opcional

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Programa LAS 4.6 del Microscopio Leica DM5000 Programa LAS 4.6 del Microscopio Leica DM5000

Fuente de luz blanca

(LED) Encender del interruptor y luego en la pantalla de

control abrir el obturador Pantalla de

control

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Programa LAS 4.6 del Microscopio Leica DM5000

Microscopio LEICA DM5000

-Encender el ordenador y el microscopio -Encender la fuente de luz blanca (LED). Ver foto anterior

-Entrar en LasX User. Contraseña: Leica5000 -Programa para la captación de imágenes: LAS V4.6

Fuente de fluorescencia (opcional)

Ordenador

Microscopio

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Equipos para la observación de las muestras SERVICIO DE MICROSCOPÍA

Instituto de Biología Molecular y Celular de Plantas. CSIC-UPV

Botón donde se puede seleccionar la técnica con la que se va a trabajar

Botón de estado del equipo. Indica el objetivo y la técnica con la que

estamos trabajando.

1. Intensity: NO controla la luz blanca. Se hace desde la fuente LED

2. Obturador o TL-Shutter: cierra el paso de la luz transmitida

3. Aperture: diafragma de apertura o de iris, permite dar más contraste a la imagen

4. Field: diafragma de campo. Se ajusta para hacer el Köhler pero este equipo lo adapta a cada objetivo.

TRANSMITIDA INCIDENTE

1. BF: campo claro

2. DF: campo oscuro

3. DIC o Nomarski

4. POL: polarización

Fluo: fluorescencia

A DAPI GFP N21

F.excitac BP 340-380 350/50 BP 470/40 BP 515-560

F.emis LP425 460/50 BP 525/50 LP 590

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En Opciones Preferencias (imagen): -Poner cómo se guardarán las imágenes. Ojo al formato! - Es aconsejable el formato tiff y en 8 bits para poder hacer Stitching (no comprime) - Añadir un nombre por defecto si se desea

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Programa LAS 4.6 del Microscopio Leica DM5000

Carpeta de captura: -Elegir o hacer una nueva carpeta en imágenes usuarios. -Establecerla como carpeta de captura; se verá con un punto rojo.

BOTONES DE CARPETA Y ESCALA

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Escala: -Activar Mostrar y cambiar sus propiedades si se desea (color, fondo, barra de fin…) -Activar Fusionar todo si deseamos poner la escala en todas las fotos. -Desplazar la escala en la imagen antes de adquirir la foto.

BOTONES DE CARPETA Y ESCALA

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EN ADQUIRIR

Exposición automática

Equilibrado de blancos

Mostrar sub/sobreexposición

Selección de configuración: las guardadas por los usuarios

Configuraciones predefinidas

OJO es aconsejable volver a las condiciones iniciales en

Opciones de EntradaConfiguración Default

(luego quitar el modo automático)

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-En Adquirir opciones de entrada dar a la configuración por defecto y quitar la exposición automática -Ajustar la exposición y resto de parámetros.

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Equilibrado de blancos: -Con un click derecho en la pantalla aparece el recuadro de la imagen. -Situarlo en la zona donde se quiera hacer el balance y hacer el cuadro del tamaño adecuado. Luego seleccionar equilibrado de blancos.

EN ADQUIRIR

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Programa LAS 4.6 del Microscopio Leica DM5000

EN ADQUIRIR

Ajuste de exposición: -Exposición: regula el tiempo de exposición de la cámara y por tanto, la cantidad de luz de la imagen. -Ganancia: poner a valores bajos. Sólo altos para enfocar en fluorescencia usando valores bajos de exposición. -Saturación: da mayor o menor intensidad a los colores. -Gamma: valor de 0.6 en imágenes de campo claro y de 1 en imágenes con fluorescencia.

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Programa LAS 4.6 del Microscopio Leica DM5000

Adquirir: -En Cámara, opciones de entrada: se puede guardar una configuración nueva con sus valores de exposición, ganancia..etc. -Tras guardarla aparecerá en el recuadro de configuraciones propias.

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EN ADQUIRIR

Procesamiento: -Se puede dar nitidez a la imagen y mostrar en vivo o voltearla.

Región de interés: -Útil para encontrar foco.

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Programa LAS 4.6 del Microscopio Leica DM5000

EN EXAMINAR o PROCESAR

Stitching: -Quitar la escala (ni merge ni show) -Hacer las fotos con cierto grado de solapamiento entre ellas -Seleccionar todas las imágenes a unir -En las ventanas de la derechadar a stitching y poner nombre. -Después se puede añadir la escala.

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Programa LAS 4.6 del Microscopio Leica DM5000

EN PROCESAR

Agregar línea de medida: -En Anotar anotaciones básicas, activar mostrar en línea. Poner línea de distancia y hacerla sobre la imagen. -Después se puede reemplazar la imagen anterior o bien guardarla como una nueva.