mikrobiolog1 sterilisasi

7/23/2019 MIKROBIOLOG1 sterilisasi

1/18

MIKROBIOLOGI

Sterilisasi dan Pembuatan Media

Oleh

Najma Istifada

NIM.1222201

!"sen Pen#am$u

%&alul Pati'in(M.SI

INS)I)*) %G%M% ISL%M N+G+RI ,I%IN-

R%!+N %)%/ P%L+MB%NG

%K*L)%S P+N!I!IK%N !%N K+G*R*%N

PROGR%M S)*!I BIOLOGI

201


2/18

BAB I

PENDAHULUAN

1.2 Latar Belakang

*ntu menelaah mir""r#anisme di lab"rat"rium( ita harus da$at

menumbuhan merea. Mir""r#anisme da$at beremban# bia den#an

alami atau den#an bantuan manusia. Mir""r#anisme an# diemban#an

"leh manusia diantarana melalui substrat an# disebut media. *ntu

melauan hal ini haruslah dimen#erti jenis3jenis nutrient an# diisaratan

"leh bateri dan ju#a ma4am lin#un#an fisi an# menediaan "ndisi

"$timum ba#i $ertumbuhanna.

%lat3alat an# di#unaan dalam $eremban#biaan ini$un harus

ditsterilisasian terlebih dahulu. /al tersebut dimasudan a#ar tida ada

"r#anisme lain an# tida diin#inan tumbuh dalam media tersebut sehin##a

da$at men#hambat $ertumbuhan miir""r#anisme an# aan dibiaan

dalam media tersebut.

1.2 Tujuan Praktikum

%da$un tujuan $ratium an# aan dilasanaan aitu5

1. Men#etahui 4ara $embuatan media dan membedaan berba#ai media

$ertumbuhan mir"ba.

2. Men#etahui 4ara dan ma4am3ma4am sterilisasi.


3/18

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Sterilisasi alat me!ium"#a$an !an area kerja

Sterilisasi mir"bi"l"#i adalah suatu $r"ses mematian mir"r#anisme

an# mun#in ada $ada atau di dalam benda. Se4ara umum ada em$at teni

an# biasa di#unaan untu sterilisasi. Pemilihan teni sterilisasi didasaran

$ada sifat bahan dan alat an# aan disterilisasi. Pada teni ase$tis

di#unaan 4ara $embaaran dan bahan imia. 6ara lain adalah den#an

men##unaan $anas dan $enarin#an.

Sterilisasi den#an men##unaan $anas dan "mbinasi den#an ua$ air

disebut sterilisasi $anas basah7lembab. Sebalina jia tan$a air disebut

sterilisasi erin#. )ermasu dalam jenis sterilisasi erin# jia di#unaan sinar

*8 atau #as tertentu untu sterilisasi ,%n"nim $df.201-

a. Aut%kla& (Autoclave)

%ut"laf meru$aan alat sterilisasi an# serin# di#unaan. %lat ini

beerja den#an sistem sterilisasi basah. Se4ara $rinsi$( 4ara erja alat ini

adalah sterilsasi den#an men##unaan ua$ air $ada suhu 12106 selama 19

menit $ada teanan 1 atm. %tau lebih ter#antun# etin##ian tem$at

terhada$ $ermuaan air laut. Sterilisasi ua$ ini ter#antun# $ada : ,1- sifat

bahan atau alat( harus da$at ditembus atau terena ua$ se4ara merata tan$a

men#alami erusaan a#arsterilisasi berlan#sun# efetif( ,2- "ndisi

sterilisasi harus bebas udara ,;a4uum-( ,- suhu an# teruur harusmen4a$ai 12106 dan di$ertahanan selama 19 menit ,/adiant"m"(1


4/18

'am#ar ( Pr"ses Sterilisasi den#an %ut"4la;e

#. )*en

O;en bersuhu tin##i ,1=0 3 1006- biasa di#unaan untu sterilisasi

erin#. Karateristi sterilisasi erin# adalah suhu tin##i dan &atu

sterilisasi an# lama ,13 jam-. Bahan atau alat an# aan disterilisasi

erin# harus tahan $anas dan tida men#alami erusaan $ada suhu an#

di#unaan dan disterilan den#an 4ara membun#us( menumbat atau

meletaanna dalam &adah tertutu$ untu men4e#ah "ntaminasi etia

dieluaran dari ";en ,/ardiant"(1 jam.

Bebera$a hal an# harus di$erhatian dalam sterilisasi imia&i ini adalah 5

,1- Bahan an# di#unaan seba#ai sterilisat"r harus benar3benar

dihilan#an sebelum alat di#unaan dan biasana memerluan &atu an#

4uu$ lama( ,2- daa baar bahan imia sterilisat"r( ,- $ersaratan

$eralatan dan biaa $elasanaan ,/ardiant"(1


5/18

adalah 4airan serum( antibi"ti( enAim( t"sin larutan biarb"nat dan

medium sinteti tertentu ,/ardiant"(1


6/18

"r#anisme an# men##unaan sumber arb"n "r#ani disebut "r#anisme

heter"tr"f ,%n"nim $df-.

+. Sum#er Nitr%gen(Nitrogen/N Sources)

Sumber nitr"#en ba#i "r#anisme da$at diba#i menjadi nitr"#en

an"r#ani dan nitr"#en "r#ani. Or#anisme aut"tr"fi men##unaan

arb"n an"r#ani sedan#an "r#anisme heter"tr"f men##unaan arb"n

an"r#ani beru$a asam amin" atau sena&a3sena&a $r"tein intermediet

se$erti $e$tida( $r"te"sa dan $e$t"n ,%n"nim $df(201-.

!. -i+r%nutrients

Or#anisme ju#a memerluan unsur mir" beru$a l"#am a#ar

$ertumbuhanna n"rmal. Bebera$a l"#am an# di$erluan di antarana

natrium ,Na-( alium ,K-( ma#nesium ,M#-( man#an ,Mn-( besi ,e-( sen#

,n-( temba#a ,6u-( f"sf"r ,P-( dan "balt ,6"- ,%n"nim $df(201-.

e. Derajat Keasaman /0H

!erajat easaman media atau $/ medium ju#a san#at menentuan

$ertumbuhan mir"r#anisme. *mumna mir"r#anisme hidu$ $ada

isaran $/ netral ,- aan teta$i( mir"r"#anisme $at"#en biasana hidu$

$ada $/ alalin. Medium $ertumbuhan mir""r#anisme da$at diba#i

menjadi dua jenis( medium sinteti dan medium "m$le. Pemba#ian

tersebut didasaran $ada "m$"sisi imia&i medium. Medium sinteti

dibuat dari 4am$uran bahan imia den#an emurnian tin##i dan jumlah

dietahui Pratium Mir"bi"l"#i Laut CM10%209D )% 201 Pa#e

9den#an $asti. Medium "m$les dibuat dari bahan3bahan "r#ani

"m$les se$erti estra da#in# dan $e$t"n ,!&idj"se$utr"(1


7/18

an# umum di#unaan adalah a#ar3a#ar( selain itu da$at ju#a di#unaan

untu #elatin atau silia #el ,!&idj"se$utr"(1


8/18

3.3 5ara Kerja

BAB I6

HASIL DAN PE-BAHASAN

7.1 Hasil

Gambar Keteran#an

Gelas uur berfun#si untu

men#uur ;"lume suatu 4airan


9/18

Pinset berfun#si untu

men#ambil benda atau menje$itbenda.

6a&an $etri berfun#si untu

membiaan ,ulti;asi-

mir""r#anisme

Pi$et tetes berfunfsi untu

memindaan larutan den#an

;"lume sediit.


10/18

%ut"laf adalah alat untu

mensterilan berba#ai ma4amalat dan bahan an# di#unaan

dalam mir"bi"l"#i

men##unaan ua$ air $anas

berteanan.

%lat3 alat $ratium an# sudah

diun#us den#an ertas

dimasuan edalam aut"laf

untu mensterilan alat dari

mir"ba an# terda$at didalam.

%'uades an# dimasuan

edalam #elas uur diletaan di

atas h"t $late sam$ai airna

mendidih.


11/18

Setelah air mendidih entan#

an# sudah di$"t"n# dimasuanedalam #elas uur an# suda di

isi den#an air.

Setelah entan# masa( air

estra entan# diambil dan

di$indahan etem$at lain.

%ir estra entan# an# sudah

di$ah tadi di letaan embali di

atas h"t $late lalu di4am$uran

den#an a#ar3a#ar 19 #r( #ula 10

#r( tun##u sam$ai bahanna

menatu den#an estra

entan#.

Kentan# an# sudah direbus.


12/18

7.2 Pem#a$asan

Persia$an dan sterilisasi alat( %lat3alat an# aan disterilan di4u4i dan

dierin#an. !itutu$ dan dibun#us den#an ertas (alat3alat an# mem$unai

mulut se$erti 5 )abun# reasi( +rlenmer( Gelas uur(Pi$et uur( 6a&an $etri(

Pi$et( dan Pinset( di tutu$ den#an a$as. 6ara diambil se$"t"n# a$as(

dili$at edua ujun#na sehin##a berbentu se#i em$at ,besar ter#antun#

besar mulut-. !i#ulun# a$as hin##a berbentu silinder an# 4uu$ $ada(

emudain dimasuan e dalam mulut alat ,27 masu diba#ian mulut alat-.

%lat an# $ermuaanna harus steril ditutu$ den#an a$as satu $er satu.

6a&an $etri(tabun# reasi( $i$et uur( $inset( erlemeer( dibun#us

seluruhna den#an ertas beas an# bersih ,buan ertas "ran-. %lat3alat

#elas bai an# beru$a alat uur ,harus $resisi- mau$un buan( disterilisasi

den#an aut"laf $ada suhu 121F6( selama 19320 menit. Setelah disterilisasi

den#an aut"laf dierin#an den#an alat3alat dalam ";en $en#erin# 0F6

selama 0 menit atau disim$an ditem$et terbua( untu men#hilan#an ua$

air an# masih tersisa.

Pembuatan dan sterilisasi media serta larutan $en#en4eran( bersian

entan# lalu $"t"n#3$"t"n# setelah itu timban# sebana 200 #r( #ula 10 #r(

a#ar3 a#ar 19 #r( terlebih dahulu masuan entan# sebana 200 #r e

dalam air a'uades an# sudah di $anasan di atas h"t $late( setelah matan#

$isahan entan# den#an airna( estra entan# an# sudah di$isahan

diletaan embali eatas h"t $late lalu masuan #ula 10 #r dan a#ar3a#ar 19

#r tun##u hin##a estra entan# menatu den#an #ula dan a#ar3a#ar.

!in#inan lalu amati $erubahanna. %lat3alat an# dimasuan e dalam

aut"laf tadi dibua lalu din#inan.

%#ar3a#ar di#unaan seba#ai media $ertumbuhan bateri. Pembuatan

medium $er4"baan ini den#an men##unaan nutrien a#ar( dimana dalam

$embuatanna terlebih dahulu den#an 4ara menimban# bahan an# aan

di#unaan edalam nera4a analitim sesuai den#an jumlah an# di$erluan

emudian memasuan bahan edalam erlenmeer 290 ml( dimana bahan


13/18

tersebut adalah a'uades 290 ml( N% (9 dan a#ar #ram setelah itu

di$anasan diatas h"t $late ??0 4 di iuti "leh $en#aduan den#an

men##unaan ma#neti stirer( tujuan dari $emanasan dan $en#aduan ini

adalah untu men#h"m"#enan N% den#an a'uades( dimana den#an

$emanasan da$at mem$er4e$at $elarutan dari N% den#an a'uades. Setelah

di$anasan bebera$a menit larutan berubah &arna dari eruh menjadi unin#

e4"latan hal ini menandaan larutan telah h"m"#en. Setelah itu larutan

ditambahan KO/ 1 an# bertujuan menda$atan $/ netral aitu dan

didin#inan emudian diuur $/na( P/ an# di$er"leh hal ini

menandaan bateri da$at hidu$ $ada P/ tersebut( hal ini sesuai den#an

literatur an# menataan bateri da$at hidu$ $ada Ph =(>3. Kemudian

dimasuan edalam aut"laf den#an mulut erlenmeer disumbat den#an

a$as dan dila$isi ertas diluarna. )ujuan dari $enutu$an ini a#ar

meminimalan "ntaminasi. Pembuatan N% berdasaran "nsistenna

termasu medium $adat dan menurut e#unaanna termasu medium umum.

Ma4am3ma4am sterilisasi 5

Pada $rinsi$na sterilisasi da$at dilauan den#an 4ara aitu se4ara

meani( fisi dan imia&i.

1. Sterilisai se4ara meani ,filtrasi- men##unaan suatu sarin#an an#

ber$"ri san#at e4il ,0.22 mir"n atau 0.?9 mir"n- sehin##a mir"ba

tertahan $ada sarin#an tersebut. Pr"ses ini ditujuan untu sterilisasi bahan

an# $ea $anas( misal na larutan enAim dan antibi"ti.

2. Sterilisasi se4ara fisi da$at dilauan den#an $emanasan H $eninaran.

Pemanasana. Pemijaran ,den#an a$i lan#sun#-5 membaar alat $ada a$i se4ara

lan#sun#( 4"nt"h alat 5 jarum in"ulum( $inset( batan# L( dll.

b. Panas erin#5 sterilisasi den#an ";en ira3ira =031>006. Sterilisasi

$anas erin# 4"4" untu alat an# terbuat dari a4a misalna

erlenmeer( tabun# reasi dll.

4. *a$ air $anas5 "nse$ ini miri$ den#an men#uus. Bahan an#

men#andun# air lebih te$at men##un#aan met"de ini su$aa tida

terjadi dehidrasi.


14/18

d. *a$ air $anas berteanan 5 men##unalan aut"laf

Peninaran den#an *8

Sinar *ltra 8i"let ju#a da$at di#unaan untu $r"ses sterilisasi(

misalna untu membunuh mir"ba an# menem$el $ada $ermuaan

interi"r Safet 6abinet den#an disinari lam$u *8

. Sterilisaisi se4ara imia&i biasana men##unaan sena&a

desinfetan antara lain al"h"l.

Sterilisasi den#an $anas adalah unit "$erasi dimana bahan di$anasan

den#an suhu an# 4uu$ tin##i dan &atu an# 4uu$ lama untu merusa

mir"bia dan ati;itas enAim. Seba#ai hasilna( bahan an# disterilan aan

memilii daa sim$an lebih dari enam bulan $ada suhu ruan#. 6"nt"h $r"ses

sterilisasi adalah $r"du "lahan dalam alen# se$erti "rnet( sarden dan

seba#aina. Peremban#an ten"l"#i $r"sesin# an# memilii tujuan

men#uran#i erusaan nutrien dan "n$"nen sens"ris dan ju#a men#uran#i

&atu $r"sesin# menjadian teni serilisasi terus diemban#an. Lamana

&atu sterilisasi an# dibutuhan bahan di$en#aruhi "leh5 resistensi

mir""r#anisme dan enAim terhada$ $anas( "ndisi $emanasan( $/ bahan(

uuran &adah atau emasan an# disterilan( eadaan fisi bahan .

Sterilisasiden#an udara erin#(alat an# umum dienal adalah ";en.

%lat ini di$aai untu mensterilan alat3alat #elas se$erti erlenmeer(

$etridish( tabunn# reasi dan alat #elas lainna. bahan3bahan se$erti a$as(

ain dan ertas da$at disterilan den#an alat ini. $ada umunha suhu an#

di#unaan $ada sterilisasi se4ara erin# adalah 10 3 1>0 6 selama $alinn#sediit 2 jam. Lama isterilisasi ter#antun# $ada alat dan jumlahna.

Sterilisasi den#an ua$ air $anas(bahan an# men#andun# 4airan tida

da$at didterilan den#an ";en sehin##a di#unaan alat ini. alat ini disebut

%rn"ld steam steriliAer den#an suhu 10006dalam eadaan lembab. Se4ara

sederhana da$at $ula di#unaan dandan#. Mula3mula bahan disterilan $ada

suhu 10006 selama 0 menit untu membunuh sel3sel ;e#etatif mir"bia.

emudian disim$an $ada suhu amr 2? jam untu memberi esem$atan s$"ra


15/18

tumbuh menjadi sel ;e#etatif( lalu di$anasan la#i 10006 0 menit. dan

diinubasi la#i 2? jam dan disterilan la#i( jadi ada ali sterilisasi. Bana

bateri bers$"ra belum mati den#an 4ara ini sehin##a diemban#an 4ara

beriutna aitu ua$ air berteanan.

Sterilisasi den#an ua$ air $anas berteanan(alat ini disebut aut"laf

,aut"4la;e- untu steriliasasi ini alat dilen#a$i den#an atu$ $en#aman. %lat

diisi den#an air emudian bahan dimasuan. Panasan sam$ai mendidih dan

dari atu$ $en#aman elaur ua$ air den#an lan4ara lalu ditutu$. Suhu aan

nai sam$ai 12106 dan biaran selama 19 menit ,untu industri $en#alen#an

ada $erhitun#an tersendiri-( lalu biaran din#in sam$ai teanan n"rmal dan

le$ $en#aman dibua(4ara ini aan mematian s$"ra den#an 4ara $enetrasi

$anas e dalam sel atau s$"ra sehin##a lebih 4e$at.6ara mana an# di$ilih

ter#antun# bahan( biaa dan etersediaan alat(untu bahan an# tida tahan

$anas( maa 4ara diatas tida da$at di$aai.

Sterilisasi an# umum dilauan da$at beru$a5

a. Sterilisasi se4ara fisi ,$emanasan( $en##unaan sinar #el"mban# $ende

an# da$at dilauan selama sena&a imia an# aan disterilan tida

aan berubah atau terurai aibat tem$eratur atau teanan tin##i-. !en#an

udara $anas( di$er#unaan alat Jbejana7ruan# $anas ,";en den#an

tem$eratur 10" 1>0"6 dan &atu an# di#unaan adalah 2 jam an#

umumna untu $eralatan #elas-.

b. Sterilisasi se4ara imia,misalna den#an $en##unaan disinfetan( larutan

al"h"l( larutan f"rmalin-.

4. Sterilisasi se4ara meani( di#unaan untu bebera$a bahan an# aibat

$emanasan tin##i atau teanan tin##i aan men#alami $erubahan(

misalna adalah den#an sarin#an7filter. Sistem erja filter( se$erti $ada

sarin#an lain adalah melauan selesi terhada$ $artiel3$artiel an#

le&at ,dalam hal ini adalah mir"ba-.

Ma4am3ma4am sterilisasi

Pada $rinsi$na sterilisasi da$at dilauan den#an 4ara aitu se4ara

meani( fisi dan imia&i.


16/18

1. Sterilisai se4ara meani ,filtrasi- men##unaan suatu sarin#an an#

ber$"ri san#at e4il ,0.22 mir"n atau 0.?9 mir"n- sehin##a mir"ba

tertahan $ada sarin#an tersebut. Pr"ses ini ditujuan untu sterilisasi bahan

an# $ea $anas( misalna larutan enAim dan antibi"ti.

2. Sterilisasi se4ara fisi da$at dilauan den#an $emanasan H $eninaran.

a. Pemanasan 5

a. Pemijaran ,den#an a$i lan#sun#-5 membaar alat $ada a$i se4ara

lan#sun#( 4"nt"h alat 5 jarum in"ulum( $inset( batan# L( dll.

b. Panas erin#5 sterilisasi den#an ";en ira3ira =031>006. Sterilisasi

$anas erin# 4"4" untu alat an# terbuat dari a4a misalna

erlenmeer( tabun# reasi dll.4. *a$ air $anas5 "nse$ ini miri$ den#an men#uus. Bahan an#

men#andun# air lebih te$at men##un#aan met"de ini su$aa tida

terjadi dehidrasi.

d. *a$ air $anas berteanan 5 men##unalan aut"laf


17/18

BAB 6

PENUTUP

8.1 Kesim0ulan

Berdasaran hasil $ratium maa da$at disim$ulan bah&a sterilisasi

$ada mir"bi"l"#i dienal den#an sterilisasi erin# dan sterilisasai basah.

Sterilisasi erin# atau sterilisasi den#an udara $anas dilauan den#an

men##unaan ";en $ada suhu 1=031>0F6 terhada$ bahan3bahan dan alat3alat

an# tahan terhada$ tem$eratur tin##i selama 132 jam. Sedan#an sterilisasi

basah aitu sterilisasi den#an ua$ berteanan men##unaan aut"laf. 6ara ini

di#unaan untu mensterilan bahan3bahan atau material se$erti air( medium

dan seba#aina den#an tem$eratur men4a$ai 120F6 selama 1930 menit.

8.1 Saran

Pada saat dijelasan $ratian dihara$an bisa mem$erhatian den#an

bai a$a an# dijelasan "leh asiten a#ar tida terjadi esalahan dalam

melauan $er4"baan sterilisasi dan $embuatan media.

DA9TA PUSTAKA

Bahar( %rdiansah. Sterilisasi Alat. htt$577arbaafi;e"ne.4"m7200


18/18

!&idj"se$utr"( !.Dasar-dasar Mikrobiologi. aarta5 Penerbit !jambatan( 1

mikrobiolog1 sterilisasi

Documents