mikrobnÍ zmĚny - jejich pŮvodci
TRANSCRIPT
10.10.2018
1
Významné mikroorganismy
a mikrobiální změny
v potravinách
Vysoká škola chemicko-technologická v Praze
Ústav konzervace potravin Výskyt mikroorganismů
Mikroorganismyv potravinách
Bakterie
Kvasinky
Plísně
Viry
Priony(infekční prionová bílkovina PrPc, původci onemocnění u zvířat)
Zdroje
Endogenní
Exogenní
nahodilé: vzduch, voda, půda,
manipulace
záměrné: přídavek, součást
technologie
Důsledky přítomnosti mikroorganismů
Součást technologie: mikroorganismy definovaného složení - fermentované výrobky (sýry,
jogurty, startovací kultury…)
Kažení výrobku: kazící mikroorganismy, snižování jakosti výrobku
Onemocnění spotřebitele: patogenní mikroorganismy, onemocnění /otravy
Formy
Planktonické buňky
nebo
Biofilmy
Bakterie - charakteristika
560 rodů: Bergeyův manuál systematické bakteriologie
Většina nesnáší: nízké pH, vysoký osmotický tlak
Odolnost: spory, „heat-shock proteins“, biofilmy
aerobní Acetobacter , Asaia, Bacillus, Listeria, Pseudomonas
anaerobní Clostridium
fakultativně anaerobní Escherichia, Salmonella, Lactobacillus, Proteus,
Staphylococcus
sporulující Bacillus, Clostridium, Desulfotomaculum
Kvasinky - charakteristika
Tolerance prostředí s vyšším osmotickým tlakem: vysoká kyselost , NaCl,
různé cukry
Termorezistence: tvorba spor
Vztah ke kyslíku: aerobní
Preference: kyselé prostředí
Fermentace: přednostně sacharidy
Enzymové vybavení: indukované enzymy
Kvasinky spp.. Výskyt - potravina vlastnosti/projev
napadení
Saccharomyces zelenina, med, kečupy, džemy
Pichia ovoce a zelenina, obilí, chleba, maso
Rhodotorula maso, ryby, kysané zelí barevné skvrny
Torulopsisovocné šťávy, koncentráty, krmné
směsi
Candida pivo, mléčné výrobky, maso, zelenina křís, povlaky
Plísně - charakteristika
Růst plísní tam, kde bakterie obtížně rostou:
nepatrné množství živin, nízké pH, nízká aktivita vody, vysoký
osmotický tlak
Vztah ke kyslíku: aerobní
Nesnášejí rychlý pohyb vzduchu (průvan)
Enzymové vybavení: značná přizpůsobivost k substrátu - tvorba
indukovaných enzymů
Produkce toxinů
Plíseň spp.. Výskyt - potravina vlastnosti/projev napadení
Mucor zelenina
Penicillium ovoce a zelenina, obilí, chleba, maso modrozelené „sametové“ kolonie
Rhizophus ovoce, zelenina černá plíseň na chlebě (Rhizophus stolonifer)
Byssochlamys mošty, ovocné dřeně, kompoty nebo
krmiva
termorezistentní, toxinogenní
Aspergillus obilí, džemy, uzené maso, ořechy,
ovoce, zelenina
široce rozšířené, hyfy, asexuální spory (černé barvy) na
konidiích, xerofilní (rostou při nízké aw)
Alternaria rajčata, mléčné produkty černé spóry na konidiích, žluknutí mléčných produktů
Geotrichum mlékárenské zařízení světlé, béžové kolonie, vypadající jako kvasinky
Pomnožení patogenních
bakterií v zažívacím traktu
člověka a produkce
(entero)toxinů v organismu.
Produkce toxinu bakteriemi a
plísněmi v potravině před její
konzumací.
Onemocnění
z potravin
Otravy
z potravin
Bakteriální infekceBakteriální a plísňové
toxikózy
salmonelóza – Salmonella enteritidis
listerióza – Listeria monocytogenes
kampylobakterióza – Campylobacter
jejuni
tyfus – Salmonella typhi
cholera – Vibrio cholerae
průjmový syndrom – Bacillus cereus
Stafylokoková enterotoxikóza -
Staphylococcus aureus
Emetický syndrom - emetický toxin –
Bacillus cereus
10.10.2018
2
LegislativaNařízení Komise (ES) č. 2073/2005 o mikrobiologických kritériích pro potraviny
Mikroorganismus Kategorie potravin
Legislativa
Nejvyšší mezní hodnota
na g (ml)
Bacillus cereus
Potraviny určené pro kojeneckou
a dětskou výživu
Ostatní potraviny
102
104
CampylobacterTermotolerantní
Všechny potraviny 0/25
Clostridium perfringens
Potraviny určené pro kojeneckou
a dětskou výživu
Ostatní potraviny
102
104
E. coli O 157 a další E. coli
produkující shiga toxin (STEC)Všechny potraviny 0/25
Escherichia coli
Potraviny určené pro kojeneckou
a dětskou výživu
Ostatní potraviny
10
104
Listeria monocytogenes
Potraviny určené pro kojeneckou
a dětskou výživu
Potraviny určené k přímé spotřebě*
Negat./25
Negat./25
Pseudomonas aeruginosa
Potraviny určené pro kojeneckou
a dětskou výživu
Ostatní potraviny
10
104
Nařízení Komise (ES) č. 2073/2005 o mikrobiologických kritériích pro potraviny
ČSN 56 9609 Pravidla správné hygienické a výrobní praxe - Mikrobiologická kritéria pro potraviny. Principy stanovení a aplikace
Mikroorganismus Kategorie potravin
Legislativa
Nejvyšší mezní hodnota
na g (ml)
Salmonella spp.
*Všechny potraviny (mimo potravin,
na které se vztahují kritéria uvedená
v Nařízení (ES) 2073/2005)
0/25
Shigella spp. Všechny potraviny 0/25
Koagulázopozitivní stafylokoky
(S. aureus a další druhy)
Všechny potraviny určené
pro kojeneckou
a dětskou výživu
Ostatní potraviny
(mimo pokrmů, na které se vztahují
kritéria uvedená
v Nařízení (ES) 2073/2005)
102
104
Yersinia enterocolitica
(suspektní patogenní kmeny)Všechny potraviny 0/25
Vibrio parahaemolyticus
Ryby, měkkýši, korýši a hlavonožci
z vod tropických a subtropických
pásem určené k přímé spotřebě
0/25
Nařízení Komise (ES) č. 2073/2005 o mikrobiologických kritériích pro potraviny
ČSN 56 9609 Pravidla správné hygienické a výrobní praxe - Mikrobiologická kritéria pro potraviny. Principy stanovení a aplikace Otravy z potravin - bakteriální toxikózy
Toxin Bakterie
Stafylokokové enterotoxiny Staphylococcus aureus
Enterotoxin Clostridium perfringens
Enterotoxin Bacillus cereus
Shiga toxin 1, shiga toxin 2 Escherichia coli, Shigella dysenteriae
Hemolytické toxiny - termostabilní Vibrio parahaemolyticus
Botulotoxin Clostridium botulinum
Otravy z potravin - plísňové toxikózy
Toxin Plíseň
Aftatoxiny Aspergillus flavus
Patulin Penicillium spp., Aspergillus spp., Byssochlamys spp.
Ochratoxin Aspergillus ochraceus
Kyselina byssochlamová Byssochlamys fulva
ČSN 56 9609 Pravidla správné hygienické a výrobní praxe - Mikrobiologická kritéria pro potraviny. Principy stanovení a aplikace Potraviny jsou zdravotně závadné, pokud:
a) byly překročeny nejvyšší mezní hodnoty počtu mikroorganismů,
b) obsahují toxické produkty mikroorganismů,
c) obsahují jiné mikroorganismy a mikrobiální metabolity působící onemocnění
z potravin,
d) vykazují nežádoucí změny způsobené mikrobiální činností, například zápach,
změněnou barvu, povrchovou oslizlost, netypický zákal, tvorbu plynu,
změněnou chuť nebo projevují příznaky nežádoucího růstu mikroorganismů,
například viditelné kolonie, mycelium, maz.
Sterilované potraviny jsou považovány za
zdravotně závadné, pokud:
a) obal není celistvý (jsou patrné netěsnosti),
b) došlo ke ztrátě vakua,
c) obal je deformovaný pružným nebo pevným vydutím (bombáž), nebo
d) obsah má změněné smyslové vlastnosti (například zápach, atypická barva,
chuť, konzistence).
10.10.2018
3
Penicillium roquefortiPenicillium camemberti
Botrytis cinerea (Tokajské víno)Penicillium spp.
Plísně a potraviny Penicillium spp.
Aspergillus spp.Botrytis cinerea
Alternaria spp. Geotrichum spp.
10.10.2018
4
Výskyt mikroorganismů
v potravinách
Ovoce a zelenina
Klima
Fyziologický stav
Obrané mechanismy
Podmínky skladování
Zpracování po sklizni
Oslabení (poškození, přezrání)
Zdroje kontaminace Faktory
Hmyz, prach, hlína
Povrchová kontaminace
Počty mikroorganismů
Plísně
Kvasinky
Baktérie
Mikroorganismy
Výrobní zařízení: 103 až 105 KTJ/cm2
Ovoce, zelenina: 104 až 107 KTJ/g
Syrové maso
Podmínky po před a po porážce
Průběh post mortem
Kontaminace ze zažívacího traktu, exkrementů, prostředí porážky
Chladírenské skladování –křížová kontaminace
Zdroje kontaminace Faktory
Hmyz, prach, hlína
Povrchová kontaminace
Počty mikroorganismů
Bakterie včetně patogenů:
Salmonella spp.,
Yersinia enterocolitica
Campylobacter jejuni
Staphylococcus spp.
Clostridium perfringens
Mikroorganismy
Mleté maso: 104 KTJ/g
Syrové mléko: méně než 103 KTJ/ml
Vejce: povrch skořápky: cca 107 KTJ/vejce
Mléko a vejce
Počty mikroorganismůMikroorganismy
Pseudomonas spp.
Proteus spp.
Enterobacter spp.
Salmonella spp.
Bacillus stearothermophilus
Clostridium thermosaccharolyticum
Desulfotomaculum nigrificans
Sterilované konzervy
Nekyselé
Mikroorganismy
Teplota nižší než 30 °C: spory neklíčí!
Zdroje kontaminace
Půda
Voda použitá k blanšírování
Cukr
Škrob atd.
Termofilní sporulující bakterie
Mezofilní bakterie
Leuconostoc spp.
Lactobacillus spp.
Cukr a cukrovinky
Mikroorganismy
V cukerných sirupech mohou růst bakterie!
10.10.2018
5
Nealkoholické nápoje,
ovocné šťávy a stolní vody
Potravina Mikroorganismy
Nealkoholické nápoje Obsah různých mnikroorganismů tolerujících nízké pH
Sycené nápoje Kvasinky
Ovocné šťávyLactobacillus spp
Leuconostoc spp.
Kyselé nápoje Patogeny mohou přežívat, ale hynou
Stolní vody v lahvích
Flavobacterium spp.
Micrococcus spp.
Nesmí obsahovat patogeny
Asaia spp.
Bakterie
Lactobacillus spp.
Bacillus spp.
Acidotolerantní plísně a kvasinky:
Geotrichum spp.
Aspergillus spp.
Saccharomyces cerevisiae
Majonézy a dresinky
Mikroorganismy
Kyselost: pH 3,5 – 4,0
Různé bakterie včetně patogenních
Spory bakterií
Spory plísní
Koření
Mikroorganismy
Fekální bakterie
Patogenní bakterieu bacilonosičů
Staphylococcus aureus -sliny, nosní sekret
Cyclospora spp. (druh odolný vůči desinfekčním činidlům) – vlasy (folikuly, mazové žlázky)
Lidské zdroje
Zdroje kontaminaceMikroorganismy
Kůže
suchý povrch, nízké pH –bakterie se spíš nemnoží
Ruce
Vlasy
folikuly, mazové žlázky –
bakterie se mohou množit
Sliny
Hleny
Způsob kontaminace
Distribuce
Dotyk
Počty mikroorganismů
Plocha prstu 102 – 106 KTJ/cm2
Formy degradace biologických
materiálů pomocí mikroorganismů
Formy katabolismu (rozkladu)
1. Plesnivění, houbové hniloby a jiné
změny vzhledu
10.10.2018
6
Skvrny a povlaky:
Penicillium spp.
Nízké nároky:
a) na vlhkost: Aspergillus spp.
b) na kyslík: Mucor spp.
Plesnivění I
Proces odkyselování:
Botrytis spp.
(ušlechtilá x zhoubná hniloba)
Destrukce struktury rostlinného pletiva:
Penicillium spp.
Závěrem působí další mikroorganismy:
Fusarium spp.
Plesnivění II
Kdy používat, kdy je třeba zlikvidovat?
www.fsis.usda.gov/wps/portal/fsis/topics/food-safety-education/
get-answers/food-safety-fact-sheets/safe-food-handling/molds-on-food-are-they-dangerous
JÍDLO Manipulace DŮVOD
Hotový pokrm, maso, slanina
nebo hot dogVyřadit
Potraviny s vysokým obsahem
vlhkosti mohou být kontaminovány
pod povrchem. Zaplísněné
potraviny mohou obsahovat také
bakterie*
Tvrdý salám a sušené šunky Použijte, odstraňte plíseň z povrchuJe normální, že tyto odolné výrobky
mají povrchovou plíseň
Vařené obilí a těstoviny Vyřadit *
Tvrdý sýrPoužijte. Odřízněte alespoň 1 palec
kolem a pod místem plísně. Znovu
zabalte sýr do čerstvého obalu.
Plíseň většinou neproroste moc
hluboko do produktu
Plísňový sýrVyřadit vše co vykazuje známky
nekulturní plísně
Plísně, které nejsou součástí
výrobního procesu, mohou být
nebezpečné
Měkký sýr Vyřadit
* nakrájené nebo nastrohané sýry
mohou být kontaminovány řezacím
nástrojem
Džemy a želé VyřaditPlíseň by mohla produkovat
mykotoxin
Ovoce a zelenina
-tvrdé pletivo
Použijte. Odřízněte alespoň 1 palec
kolem a pod místem plísně.
Malé kolonie plísně mohou být
oříznuty. Většinou neproniknou
příliš hluboko
Chleba a pečivo Vyřadit Může být zasaženo pod povrchem
Červené skvrny (na mase):
Serratia marcescens
Modré skvrny (na mase):
Pseudomonas syncyanea
Žluté skvrny:
Micrococcus luteus
Fotobaktérie: "indikátor čerstvosti"
Změny barvyZměny způsobené bakteriemi
Formy degradace biologických
materiálů pomocí mikroorganismů
2. Kvašení Proces přeměny organických látek (nejčastěji sacharidů nebo
kyselin), při němž za účasti mikroorganismů a jejich enzymů
vznikají látky energeticky chudší.
AEROBNÍ
kyselina jablečná + 3 O2 4 CO2 + 3 H2O Schizosaccharomyces pombe (případně plísně)
ANAEROBNÍ
Kyselina jablečná kyselina mléčná + CO2
Leuconostoc spp., Micrococcus spp.
Podobně: kyselina citronová
Kyselina vinná: odkyselování vína:
Leuconostoc spp., Pediococcus spp.
Produkce biogenních aminů!
Odkyselení ovocných hmot
10.10.2018
7
Kvašení (kysání) I
Všechny skupiny MO
Různé podmínky
Produkce kyselin: snížení pH!
CUKERNÝ substrát KYSELINY
ETHANOL
PLYNY
ALKOHOLOVÉ KVAŠENÍ
Saccharomyces cerevisiae
MLÉČNÉ KVAŠENÍ
Homofermentativní MK:
Lactobacillus acidophillus
Heterofermentativní MK:
Lactobacillus brevis
Leuconostoc spp.Cukr + H2O kyselina mléčná + kyselina octová + ethanol + CO2 + H2
Kvašení (kysání) II
SMÍŠENÍ KVAŠENÍ NEKYSELÝCH KONZERV -
BOMBÁŽE:
Clostridium thermosaccharolyticum
Bacillus spp., Proteus spp.: pokud se vyskytuje bílkovinný substrát
PLYNUPROSTÉ KYSNUTÍ KONZERV:
Bez bombáží
Bacillus stearothermophilus
Konzervy z tropů
pokles pH
Kvašení (kysání) III
MÁSELNÉ KVAŠENÍ:
Clostridium butyricum
HOUBOVÁ MACERACE STERILOVANÉHO OVOCE
ROZKLAD ALKOHOLU
Pichia spp., Candida spp. (křís)
OCTOVÉ KVAŠENÍ
ethanol acetaldehyd kyselina octová ethanol
Kvašení (kysání) IV
Formy degradace biologických
materiálů pomocí mikroorganismů
3. Hnití
Nekyselé, bílkovinné substráty
ALKALIZACE
(NH3, aminy), plyny, CO2, H2S, bombáže, dekarboxylace aminokyselin
Escherichia coli, Enterobacter spp. (až pH 4,5)
Proteus spp.
aerobní MO: Bacillus subtilis
anaerobní MO:Clostridium sporogenes
Clostridium putrefaciens
Clostridium perfringens
Hnití I
10.10.2018
8
AEROBNÍ SPORULUJÍCÍ MIKROORGANISMY:
Bacillus spp.
Bacillus subtilis
Bacillus mesentericus
TEXTURNÍ DEFEKTY:
Lepivost a nitkovitost těsta
ZKAŽENÝ CHLÉB:
a) má ovocnou vůni
b) mění barvu
c) stává se lepivým
d) kusy střídy se táhnou
e) alimentární onemocnění
Hnití IIPečivo a nitkovitost těsta
Růst mikroorganismů
Překážka Požadavky
Počáteční počet
mikroorganismůTak nízký jak jen možné.
Skladovací teplota Tak nízká jak jen možné.
pH
Čím nižší, tím lepší (inhibice: sporotvorné a toxinogenní bakterie
- pH pod 4,0 (4,5).
Čím nižší hodnota pH, tím účinnější tepelné zpracování,
účinnější konzervace atd.
Aktivita vody Tak nízká jak jen možné.
Přítomnost kyslíku Nepřítomnost ( × anaerobní mikroorganismy).
Stupeň zahřívání Tak vysoký jak jen možné.
Konzervační
prostředky
Přítomnost v odpovídající koncentraci by měla být přidána v lag
fázi mikrobiálního růstu.
Mikrobilogické rizikoKvalitativní analýza:
Rozhodovací diagramy
Literární rešerše
Kvantitativní analýza:
Prediktivní modely
Mikrobiologické riziko
http://www.cfsan.fda.gov/~mow/intro.html Bad bug book
www.foodsafety.gov Portál US safety
www.who.int/fsf/ WHO
www.fsis.usda.gov USDA
www.foodhaccp.com HACCP
www.fda.gov FDA
www.cdc.gov Centre of Disease Control
and Prevention
www.safetyalerts.com Recall in USA
http://ec.europa.eu/food/food/rapidalert/index_en.htm RASFF
Informační zdrojeWebové stránky
Prediktivní mikrobiologické modely
Matematické modely
Food MicroModel
Pathogen Modling Program
Growth predictor
(Clostridium perfingens)
Databáze růstových křivek mikroorganismů
Com Base
Prediktivní software (PMP7)
Agricultural Research Service,
ARS (U.S. Department of Agriculture's )
Mikrobiologické rizikoPrediktivní modely
10.10.2018
9
Mikrobiologické rizikoPrediktivní modely
Mikrobiologické rizikoKontaminace surovin
Kontaminace potravinářských surovin patogenními mikroorganismy
Mikrobiologické rizikoDoba pro zdvojnásobení patogenních mikroorganismů
Vliv teploty
Mikrobiologické rizikoInfekční dávka
Minimální infekční dávky pro různé skupiny populace