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MOISISSURESETENVIRONNEMENT
SteffiROCCHIUMR6249CNRSchrono-environnement
ServicedeMycologieCHRUJeanMinjoz [email protected]
12èmes JournéesScientifiquesdelaSociétéFrançaisedelaMucoviscidose
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INTRODUCTION
12à14h/jourenmoyennedansleslogements
POLLUANTSBIOLOGIQUES
Moisissures
Bactéries Acariens
Expositionimportantedifférentspolluants
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INTRODUCTION
15m3 d’air/jour/adulte103à108sporesfongiques/m3
(OMS2009)
170spores/m3
>1000spores/m3
1010spores/m3
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INTRODUCTION
Mécanismes dedéfense
Facteursdevirulence
15m3 d’air/jour/adulte103à108sporesfongiques/m3
(OMS2009)
PASD’EFFET
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INTRODUCTION
15m3 d’air/jour/adulte103à108sporesfongiques/m3
(OMS2009)
INFECTIEUX ALLERGIQUE
TOXIQUE
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INTRODUCTION
15m3 d’air/jour/adulte103à108sporesfongiques/m3
(OMS2009)
INFECTIEUX ALLERGIQUE
Infection fongiqueinvasive
(Patients immunodéprimés)
AsthmeAllergies(IgE)
Mycosesbroncho-pulmonairesallergiques
(IgE +IgG)Pneumopathies d’hypersensibilité
(IgG)
PATIENT/PERSONNE ENVIRONNEMENT• Immunité/Traitements• Génétique/Ethnie
•Micro-organismes présents• Quantitésetmomentexposition
(Seltzer &Fedoruk,Pediatr ClinNorth Am2007)
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INTRODUCTION
ENVIRONNEMENT •Micro-organismes présents• Quantitésetmomentexposition
Revueinpress :Medical diagnosticsforindoormoldexposure(Hurrab etal.,Int.JofHygiene andEnvironmental Health,inpress)
Patientsàrisquequidoiventêtreprotégés:
- Patientsimmunodéprimés- Patientsmucoviscidose- Patientsasthmatiques
Lerisqueallergiqueaudomicile=leplusétudié
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• Difficultésméthodologiques:PrélèvementsponctuelsCulture=viable
• Peud’étudesavecdesmesures
moisissuresvisibles
Problèmedestandardisation
+de100cohortesdenaissancedanslemonde(30ans)
ENVIRONNEMENT •Micro-organismes présents• Quantitésetmomentexposition
- Patientsasthmatiques
INTRODUCTION
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• En dehors des traitements antifongiques, la prévention repose sur lamaîtrise de l’environnement
• Déséquilibre entre les mesures prises à l’hôpital et l’environnement dulogement (seulesquelquesrecommandations)
Très peu demesure d’expositionà domicile
ENVIRONNEMENT •Micro-organismes présents• Quantitésetmomentexposition
INTRODUCTION
- Patientsimmunodéprimés
• Connaissancesun peu plusdocumentées
• Déplacement CMEI (< 3% logementsBourgogne-Franche-Comté)
- Patientsmucoviscidose
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COLONISATIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE
(Pihet etal.,Medical Mycology2009)
Expectorationsdepatients(mucoviscidose)
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COLONISATIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE
(Pihet etal.,Medical Mycology2009)
Expectorationsdepatients(mucoviscidose)
ALLERGIQUE
Aspergillose Broncho-PulmonaireAllergique (ABPA)
Formed’allergiepulmonairesévèreetcomplexe(IgE etIgG)lésionspulmonairesgraves
1à11%despatientsatteintsdemucoviscidose
A.fumigatus fréquent dansl’air(intérieur /extérieur) Momentd’acquisition?(Ramsayetal.,ExpertReviewofRespiratoryMedicine2016)
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Étudeexpositionàl’hôpital:Comparaisonentremoisissuresisoléesdansleserviceet
danslesexpectorationsdespatients(Naganoetal.,Medical Mycology2010)
EXPOSITIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE
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1) Domiciles (Sidot et al., J Cyst Fibrosis 2007) :Recrutement:Patientsavec expectorations+ à S. apiospermum6 logements : prélèvementsair, eau, surface, terre des plantes
Plantes = sources de S. apiospermum
ÉtudesexpositionàScedosporium :
2) Différentssols (Kaltesis et al., MedMycol 2009 et Guaro et al. MedMycol 2006) :Industriels, champs agricoles, aires de jeux …
Reliéà la contaminationorganiquedes sols
3) Comparaison sols (ruraux urbains) (Harun et al., MedMycol 2010) :25 sites
Relié à l’activité humaine (grandes villes avec traffic,tourisme)
EXPOSITIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE
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3) Prélèvements humides de surface dans 34 domiciles comparés entre les2 groupesde patients :
- marqueursaspergillairesabsents- marqueursaspergillairesprésents
Aucun lien entre exposition et pathologies aspergillairesdiagnostiquées (Pricope et al., poster SFMM 2014)
1) Concentrations(Aspergillus)mesurées (culture)2 logementspatientsABPA
Baisse exposition= prévention (Beaumont et al., Allergy 1984)
2) Evaluationparquestionnaireenvironnementalpatientsasthmatiques(n=202)etpatientsavecABPA(n=101)
Environnementrural=lienABPA(Agarwal etal.LungIndia 2014)
ÉtudesexpositionàA.fumigatus :
EXPOSITIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE
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qPCR AspergillusfumigatusPOUSSIERE2moisChambre
16patients(CRCM) CULTURE
ÉtudesexpositionàA.fumigatus :
CHRUBESANCON
EXPOSITIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE
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CHRUBESANCON
Aspergillusfumigatus
CULTURE
3’
5’
Amorce
SondeRQ
PRINCIPE
ncycles
Mesurefluorescence
QuantifierADN
qPCRPOUSSIERE2moisChambre
16patients(CRCM)
ÉtudesexpositionàA.fumigatus :
EXPOSITIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE
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qPCR Aspergillusfumigatus
4patientsABPA
CULTURE
2patientsenrémission
üIgE spécifiquesA.fumigatusüIgE totaux>500IU/mLüprécipitines A.fumigatus ouradiologiecompatible(Stevensetal.,2003)
7patientssensibilisés
5patientsØ
POUSSIERE2moisChambre
16patients(CRCM)
ÉtudesexpositionàA.fumigatus :
CHRUBESANCON
EXPOSITIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE
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0
100
200
300
400
500
P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7 P8 P9 P10 P11 P12 P13 P14 P15 P16
Cultureliquidederinçagedeslingettes(toutesmoisissures)
UFCto
tales/m
3
De21à432UFC/25cm2(Étudepatientshématologiede16à416UFC/25cm2)
Logements"standards"
Logementsdepatients
(Rocchi etal.2015,JofCystic Fibrosis)
ÉtudesexpositionàA.fumigatus :
EXPOSITIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE
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0
100
200
300
400
500
P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7 P8 P9 P10 P11 P12 P13 P14 P15 P16
UFCto
tales/m
3
Ø/ sensibilisés/rémission /ABPA
Cultureàpartirdescapteurs=pasdedifférencepatientsABPAA.fumigatus détectéenculturedans5logements
(Rocchi etal.2015,JofCystic Fibrosis)
Logementsdepatients
Cultureliquidederinçagedeslingettes(toutesmoisissures)
ÉtudesexpositionàA.fumigatus :
EXPOSITIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE
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Patients A.fumigatus (fg/µL)P15 6,53P14 6,40P13 6,37P5 5,44P10 4,29P16 3,44P9 2,46P8 2,11P11 2,10P6 1,91P2 1,17P7 0,90P4 0,52P3 0,39P12 0,07P1 0,00
RésultatsqPCRA.fumigatus
(Rocchi etal.2015,JofCystic Fibrosis)
ÉtudesexpositionàA.fumigatus :
EXPOSITIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE
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Patients A.fumigatus (fg/µL) ClassificationP15 6,53 ABPAP14 6,40 ABPAP13 6,37 ABPAP5 5,44 RémissionP10 4,29 RémissionP16 3,44 ABPAP9 2,46 SensibiliséP8 2,11 SensibiliséP11 2,10 SensibiliséP6 1,91 SensibiliséP2 1,17 ØP7 0,90 SensibiliséP4 0,52 ØP3 0,39 ØP12 0,07 SensibiliséP1 0,00 Ø
qPCR
A.fu
migatus
(fg/µL)
No ABPA ABPA
01
23
46
5
ABPAVSlesautres
glm :p-value=0,001
(Rocchi etal.2015,JofCystic Fibrosis)LienA.fumigatuset ABPA
RésultatsqPCRA.fumigatusÉtudesexpositionàA.fumigatus :
EXPOSITIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE
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Analysedelogementsde:- 13patientsaveccolonisationaspergillaire- 13patientssanscolonisationaspergillaire
Poussièresparcapteurs(Sapet etal.2015,JofCystic Fibrosis)
PasdelienentreA.fumigatusàdomicileet colonisation
Analyseparculture
• Duréesd’exposition différentes(14j- 10semaines)• Pasmêmerecrutement• Pasmêmetechniquesd’analyse
Culture=viableIMPORTANCEsurveillanceàdomicile
ÉtudesexpositionàA.fumigatus :
EXPOSITIONFONGIQUE/MUCOVISCIDOSE
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SOUCHESA.fumigatusRÉSISTANTES
De+en+decassouchesrésistantes
ABPA:TraitementsazolésaulongcourtAZOLÉS
MutationsdugèneCYP51Acodantpourl’enzymecibledesantifongiquesazolés (14-alphadéméthylase)
Deuxmodesd’acquisitionderésistanceauxazolés :- Suiteautraitementaulongcours(aspergillosechronique,ABPA)
Mutationsponctuelles(changement(s) acideaminé)- Acquisesdansl’environnement(patientssanstraitements)
Mutations+complexes(TR34ou46+changement (s)acideaminé)
SuividessouchesrésistantesauCHRUdeBesançon:Isolatspatientsmucoviscidose(Janv-Fév2017):6 TR34/L98H
France,Allemagne, Danemark,Belgique(Burgel etal.,2012AAC;Fisheretal.,2014JAC;Morioetal,2012JAC;Mortensenetal.,2011JClinMicrobiol ;Vermeulenetal.,2015AAC)
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A.fumigatus
(25%desfongicides)
mutationsTR34/L98H
TR46/Y121F/T289A
AZOLÉS
Isolatsdansl’environnement(Europe,Asie,Afrique,Amérique)
SOUCHESA.fumigatusRÉSISTANTES/ENVIRONNEMENT
ÉtudesCHRUdeBesançon:-Environnementhospitalier(2015-2017):2TR34/L98H-Environnement (agriculturecéréalière, scieries,maraichers) TR34/L98H ++-Logements(1700capteurs):2TR34/L98Het1TR46/Y121F/T289A
Quellienentrecessouches?Rechercheàdomicilechezpatients
5molécules≈Médecine
HYPOTHESE
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Mercipourvotreattention
SteffiROCCHIUMR6249CNRSchrono-environnement
ServicedeMycologieCHRUJeanMinjoz [email protected]
12èmes JournéesScientifiquesdelaSociétéFrançaisedelaMucoviscidose