Allergeenien testaus

Erihyvä – Erityisruokavaliot, tarpeita ja mahdollisuuksiaTutkimus, tuotekehitys ja analytiikka

10.05.2017, Turku

Timo Tumelius, FMTieteellinen yhteyspäällikkö, Labema Oy

Ruoan allergeenit

• Luontaisesti esiityviä proteiineja ruoka-aineissa

• Ruoka-allergialle ei tunneta lääkitystä

• Ainoa onnistunut menetelmä hallita ruoka-allergeenejaon tarkkailla ruuan sisältämiä proteiineja seuraaviensystemaattisten toimintatapojen kautta:

GMP Good Manufacturing Practice

HACCP Hazard Analysis and Critical Control Points

SSOP Sanitation Standard Operating Procedures

Directiivi 2000/13/EC päivitettynä Directiivillä2007/68/EC listaa 14 allergiaa aiheuttavaa

ainesosaa, jotka täytyy ilmoittaapakkausmerkinnöissä

• Cereals • Nuts

• Crustacean • Celery

• Fish • Mustard

• Egg • Sesame seeds

• Peanut • Sulphur dioxide

• Soybean • Lupine

• Milk • Molluscs

• vilja • pähkinät

• äyriäiset • selleri

• kala • sinappi

• kananmuna • seesaminsiemen

• maapähkinä • rikkidioxidi

• soija • lupiini

• maito • nilviäiset

Ruoka-allergeenien kontrollointisuunnitelma

Mitkä seikat täytyy ottaa huomioon:näytteenottosuunnitelma, näytteidenoton taajuus, näytteenottotyyppi, menetelmän tarkoitukseen sopivuus, menetelmän hyväksynnät javalidointi, herkkyys, spesifisyys, tarkkuus, näytematriisin vaikutus, koulutus, tulosten tallentaminen, laboratoriopalvelut ja akkreditointi, kustannukset ja aika…

Reveal 3-D & Reveal Veratox

➢ Maito Manteli

➢Maapähkinä Hasselpähkinä

➢Kananmuna Saksanpähkinä

➢ Soija Seesami

➢Gliadiini/Gluteeni Äyriäiset

➢ Sinappi Lupiini

AllergeenitestejäLabemalta ja Neogenilta

Testien formaatit:Kittivaihtoehdot, vasta-ainepohjaisia

2. Seulontatesti, paikanpäällä tapahtuva(on-site lateral flow) testi: Reveal 3-D

1. Kvantitatiivinen kuoppalevytesti(Microwell): Veratox ja Alert

Reveal 3-D -Testi

Testin formaatti Lateral Flow ja 3D-tekniikka (vasta-aine),

ei lisävälineitä

Tunnistusraja Matala 5-10 ppm taso ruoka-aineille, riippuu

testistä

Soveltuvuus Pintanäytteet, CIP viimeiset huuhteluvedet

Pakkauksen

testimäärä

10 testiä

Testausaika <10 min / näyte

Reveal 3-D -Testit

Almond Casein Egg Gluten Hazelnut Peanut Shellfish Soya 10 tests 902086G 902075M 902082Q 901031P 902087E 901041L 902081S 902093K 100 tests 902089Z 902079D 902102M 901036D 902090R 902077H 902091P 902104H

Manteli Gliadiini Muna Gluteeni Hasselpähkinä Maapähkinä Äyriäiset Soija

UUTUUDETMaito

SinappiPuupähkinät

Reveal 3-D™ -Testipakkaus

• Puskurijauhepussi (10)

• Näyteputki ja korkki (10)

• Reveal 3-D testi-väline (10)

• Näytteenottotikku (10)

Reveal 3D –Testin työnkulkuhuuhtelunäytteet

• Avaa puskuripussi ja kaada sisältö näyteputkeen.

• Lisää 0,25 ml näytettä putkeen, tai puoli korkkia. / tai 1ml

• Sulje valkoinen korkki ja ravista minuutin ajan.

• (Lisää putkeen toisen puskuripussin sisältö, ja ravista jälleen minuutin ajan )

Reveal 3D –Testin työnkulkupintanäytteet

• Avaa puskuripussi ja kaada sisältö näyteputkeen.

• Kuivat pinnat: Kostuta näytteenottotikku liuoksessa.

• Ota näyte 10*10 cm2 alueelta

• Katkaise tikun pää putkeen.

• Sulje valkoinen korkki ja ravista minuutin ajan.

• Lisää putkeen toisen puskuripussin sisältö, ja ravista jälleen minuutin ajan

Reveal 3D –Testin työnkulkunäytteen testaus

• Täytä korkki näyteputken nesteellä.

• Vaahdon tulisi pysyä näyteputkessa.

• Kasta Reveal 3-D laitteen pää korkin sisältämään nesteeseen. Varmista, että aukko on täynnä nestettä.

• Jätä aukko nesteeseen kunnes näet nesteen liikkuvan testi-ikkunassa.

• Aseta laite tasaiselle pinnalle ja anna testin kehittyä 5 minuuttia.

• Huomio: On tärkeää asettaa laite tasaiselle pinnalle heti kun neste on saavuttanut testi-ikkunan, jotta neste virtaa tasaisesti koko testerin läpi

Reveal 3-D -Testin tulokset

Vasemmalta oikealle: Negatiivinen; Positiivinen; Vahva Positiivinen

Ei O-viivaa, T-viiva heikkotai sitä ei ole ollenkaan

(Overload )

VARMA POSITIIVINEN

T-viiva näkyvissä(Above detection limit)

POSITIIVINEN

Ei T-viivaa(Undetectable)

NEGATIIVINEN

Reveal 3-D -validaatio

* Limit of Detection

Reveal 3-D 1ppm 5ppm 10ppm 20ppm >50ppm

Gluteeni Keksit Vauvanruoka Tumma suklaa

Kaseiini Suklaakakku Margariini Punaviini

Hasselpähkinä Maitosuklaa Aamiaismurot Tumma suklaa

Maapähkinä

Suklaalla

kuorrutettu

rulla Rapeat patukat Kana Nugget

Manteli Tumma suklaa Jogurtti Tomaattikastike

Äyriäinen Kasvisöljy Majoneesi

Jauhettu

valkoinen kala

Kananmuna

Margariini

Tumma suklaa Kalakakku Jäätelö

Soija Sianlihamakkara Margariini Jäätelö

Veratox Allergeeni –Kitti (S-ELISAs)

Kit• Kvantitatiiviset tulokset ruoka-

ainenäytteistä• Tarvitsee sekoittavan vesihauteen,

kuoppalevylukijan ja monikanavapipetin

• Kolme 10 minuutin inkubaatiota• Testi 38 näytteelle (+kontrollit)• Ei tarvita monimutkaisia kemiallisia

testejä eikä liuottimia

Veratox-Testin kulkuPipetoi 150 uL uutettua näytettä ja standardeja kuoppalevyn (siirto)kaivoihin

Pipetoi 100 uL kuoppalevyn vasta-ainekaivoihin

Pese 5X

Pipetoi 100 uL Conjugate –liuosta

Pese 5X

Pipetoi 100 uL Substraatti-liuosta

Pipetoi 100 uL Red Stop-liuosta

Lue 650 nm 20 minuutin sisällä

10 min

10 min

10 min

Veratox–Testin työnkulku

Alert Allergeeni –Kitti (S-ELISA)

Kit• Tarkoitettu skriinaukseen• 1 standari, johon tulosta verrataan• Tarvitsee sekoittavan vesihauteen, ja

pipetin• Kolme 10 minuutin inkubaatiota• Testi 24 näytteelle• Ei tarvita monimutkaisia kemiallisia

testejä eikä liuottimia• Visuaalisesti tai lukulaitteella

luettava testi

Alert-Testin työnkulku

Kiitos mielenkiinnosta -

Tervetuloakeskustelemaan

näyttelyständillemme!