određivanje ostataka pesticida u hrani - crolab · toksičnost pesticida akutna • visoke...
TRANSCRIPT
Određivanje ostataka pesticida u hrani
mr. sc. Mirela Grubelid, voditeljica Odjela hrane i vode
Euroinspekt-Croatiakontrola d.o.o.
1
Pregled
• Povijest
• Toksičnost pesticida
• Zahtjevi legislative
• Određivanje ostataka pesticida u hrani – izazovi
• Tehnike određivanja
• Naša iskustva
• Zaključci
2
Povijest
• Počeci ratarstva – prije 10000 godina u Mezopotamiji
• Sumerani – prije 4500 g. koriste spojeve sumpora
• Do 40-tih godina prošlog stoljeda – anorganski spojevi i organski spojevi iz prirodnih izvora
• 1939. g. - DDT = ”deus ex machina”
3
Povijest
4
Toksičnost pesticida
Akutna • visoke koncentracije, kratkotrajna
izloženost
• radnici u proizvodnji, poljoprivrenici
• klasični simptomi trovanja
Kronična • niske koncentracije, dugotrajna
izloženost
• svi (hrana, voda, zrak)
• dokazano:
– reproduktivna toksičnost
– kancerogenost
– endokrina toksičnost
5
nedokazani učinci?!
Smanjivanje rizika
Dobra poljoprivredna praksa
• doza
• karencija
Kontrola sigurnosti hrane
• maksimalna razina ostataka pesticida (MDK)
6
Legislativa • EU
– Regulation EC no 396/2005 on maximum residue levels of pesticides in or on food and feed of plant and animal origin (i dopune)
– Regulation EU 1274/2011 concerning a coordinated multiannual control programme of the Union for 2012, 2013 and 2014 to ensure compliance with maximum residue levels of pesticides and to assess the consumer exposure to pesticide residues in and on food of plant and animal origin
– Document N° SANCO/12495/2011 Method validation and quality control procedures for pesticide residues analysis in food and feed
• HR – Pravilnik o maksimalnim razinama ostataka pesticida u i na hrani i
hrani za životinje biljnog i životinjskog podrijetla NN 148/08 (i dopune) – Pravilnik o koordiniranom višegodišnjem programu kontrole s ciljem
osiguranja sukladnosti s maksimalno dopuštenim razinama ostataka pesticida i procjene izloženosti potrošača ostacima pesticida u i na hrani biljnog i životinjskog podrijetla (NN 116/11)
7
Određivanje ostataka pesticida u hrani - izazovi
• Komplicirane matrice
• Velik broj različitih spojeva
• Niske maksimalne dopuštene vrijednosti
– dječja hrana 3 µg/kg za pojedine spojeve
8
Klasične tehnike
• Plinska kromatografija s različitim detektorima (ECD, FPD, NPD itd.)
• Tekudinska kromatografija (DAD, FLD)
• Ostale tehnike – tankoslojna kromatografija, ELISA
Nedvojbena identifikacija?
9
Multirezidualne metode
• GC-MS, GC-MS/MS
• LC-MS, LC-MS/MS
10
Spektrometrija masa
• Visoka selektivnost
• Visoka osjetljivost
• Mogudnost istovremenog određivanja velikog broja različitih spojeva odjednom
• Informacija o strukturi molekule
Višestruka spektrometrija masa • Minimalan utjecaj matrice
• Nije potrebno potpuno kromatografsko razdvajanje komponenti u uzorku
11
Priprema uzorka
• Ekstrakcija tekude-tekude (LLE)
• Ekstrakcija na čvrstoj fazi (SPE)
• Disperzija matrice u čvrstoj fazi (MSPD)
• Mikroekstrakcija na čvrstoj fazi (SPME)
• Gel permeacijska kromatografija (GPC)
• Disperzivna tehnika (QuEChERS)
12
QuEChERS
Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged, Safe • HRN EN 15662:2008 Hrana biljnog porijekla – Određivanje ostataka
pesticida metodom plinske kromatografije/spektrometrijom mase (GC-
MS) i/ili metodom tekućinske kromatografije/tandemskom
spektrometrijom mase (LC-MS/MS) nakon ekstrakcije/razdiobe
acetonitrilom i čišćenja disperzivnom SPE – QuEChERS metodom (EN
15662:2008)
13
Naša iskustva Metoda za određivanje organoklornih pesticida
• SPE; GC-ECD
• 18 analita
• organoklorni pesticidi
Multirezidualna metoda
• QuEChERS; LC-MS/MS
• 275 pesticida
• organofosforni, karbamati, tiokarbamati, derivati ureje, benzimidazoli, strobilurini, neonikotinoidi, dinitroanilini...
14
Kromatogram (275 pesticida – 10 minuta)
15
16
17
0,0
20,0
40,0
60,0
80,0
100,0
120,0
140,0
Ace
tam
ipri
dA
ldik
arb
Azi
nfo
s et
ilA
zoks
istr
ob
inB
iter
tan
ol
Bo
skal
idB
upi
rim
atB
upr
ofe
zin
Cija
naz
inC
ipro
din
ilC
ipro
kon
azo
lD
ifen
oko
naz
ol
Dik
roto
fos
Dim
eto
atD
imet
om
orf
EPN
Epo
ksik
on
azo
lEt
ion
Eto
pro
fos
Fen
amif
os
Fen
arim
ol
Fen
azak
vin
Fen
bu
kon
azo
lFe
nb
uta
tin
oks
idFe
nh
eksa
mid
Fen
pro
pim
orf
Fen
toat
Flu
azif
op
-P b
uti
lFl
ufe
no
ksu
ron
Flu
sila
zol
Flu
tria
fol
Fosm
etH
eksa
kon
azo
lH
eksi
tiaz
oks
Imaz
alil
Imid
aclo
pri
dIn
do
ksak
arb
Ipro
valik
arb
Kar
bar
ilK
arb
end
azim
Kar
bo
fura
nK
lofe
nte
zin
Klo
rfen
vin
fos
Klo
rpir
ifo
sK
lorp
irif
os
met
il o
kso
nK
rezo
ksim
met
ilK
vin
oks
ifen
Lin
uro
nM
epan
ipir
imM
etal
aksi
lM
etid
atio
nM
etio
karb
Met
oks
ifen
ozi
dM
eto
mil
Mik
lob
utan
ilM
on
okro
tofo
sO
ksam
ilP
aklo
bu
traz
ol
Pen
dim
eta
linP
enko
naz
ol
Pir
azo
fos
Pir
idab
enP
irim
etan
ilP
irim
ifo
s m
etil
Pir
ipro
ksif
enP
rofe
no
fos
Pro
klo
raz
Pro
pik
on
azo
lP
rop
izam
idSp
inos
in A
Spin
osin
DSp
iro
dik
lofe
nSp
iro
ksam
inTe
bu
fen
pir
adTe
trak
on
azo
lTi
aben
daz
ol
Tiak
lop
rid
Tiam
eto
ksam
Tio
dik
arb
Tria
idim
eno
lTr
iflo
ksis
tro
bin
Trit
iko
naz
ol
Iskorištenje (%)
18
0,0
5,0
10,0
15,0
20,0
25,0
Ace
tam
ipri
dA
ldik
arb
Azi
nfo
s et
ilA
zoks
istr
ob
inB
iter
tan
ol
Bo
skal
idB
upi
rim
atB
upr
ofe
zin
Cija
naz
inC
ipro
din
ilC
ipro
kon
azo
lD
ifen
oko
naz
ol
Dik
roto
fos
Dim
eto
atD
imet
om
orf
EPN
Epo
ksik
on
azo
lEt
ion
Eto
pro
fos
Fen
amif
os
Fen
arim
ol
Fen
azak
vin
Fen
bu
kon
azo
lFe
nb
uta
tin
oks
idFe
nh
eksa
mid
Fen
pro
pim
orf
Fen
toat
Flu
azif
op
-P b
uti
lFl
ufe
no
ksu
ron
Flu
sila
zol
Flu
tria
fol
Fosm
etH
eksa
kon
azo
lH
eksi
tiaz
oks
Imaz
alil
Imid
aclo
pri
dIn
do
ksak
arb
Ipro
valik
arb
Kar
bar
ilK
arb
end
azim
Kar
bo
fura
nK
lofe
nte
zin
Klo
rfen
vin
fos
Klo
rpir
ifo
sK
lorp
irif
os
met
il o
kso
nK
rezo
ksim
met
ilK
vin
oks
ifen
Lin
uro
nM
epan
ipir
imM
etal
aksi
lM
etid
atio
nM
etio
karb
Met
oks
ifen
ozi
dM
eto
mil
Mik
lob
utan
ilM
on
okro
tofo
sO
ksam
ilP
aklo
bu
traz
ol
Pen
dim
eta
linP
enko
naz
ol
Pir
azo
fos
Pir
idab
enP
irim
etan
ilP
irim
ifo
s m
etil
Pir
ipro
ksif
enP
rofe
no
fos
Pro
klo
raz
Pro
pik
on
azo
lP
rop
izam
idSp
inos
in A
Spin
osin
DSp
iro
dik
lofe
nSp
iro
ksam
inTe
bu
fen
pir
adTe
trak
on
azo
lTi
aben
daz
ol
Tiak
lop
rid
Tiam
eto
ksam
Tio
dik
arb
Tria
idim
eno
lTr
iflo
ksis
tro
bin
Trit
iko
naz
ol
RSD (%)
Međulaboratorijske usporebe
• FAPAS
• EUPT-FV14
19
Broj pesticida u uzorcima voda
20
71
67
46
11
2 1
0 1 2 3 4 5
Pesticidi koji se najčešde nalaze u uzorcima voda
21
0
10
20
30
40
50
60
tiab
end
azo
l
klo
rpir
ifo
s
imaz
alil
azo
ksis
tro
bin
imid
aklo
pri
d
bo
skal
id
cip
rod
inil
pir
imet
anil
fen
he
ksam
id
spir
od
iklo
fen
karb
end
azim
pir
ipro
ksif
en
pro
chlo
raz
acet
amip
rid
bit
erta
no
l
bu
pro
fezi
n
dia
fen
tiu
ron
dim
eto
at
fen
azak
vin
fen
bu
tati
n o
ksid
klo
rme
kvat
klo
rid
kvin
oks
ifen
met
oks
ifen
ozi
d
par
atio
n m
etil
pir
aklo
stro
bin
pir
imif
os
met
il
tetr
ako
naz
ol
tiam
eto
ksam
tio
fan
at m
etil
Broj pesticida u uzorcima povrda
22
87
9
3 1 1 0
0 1 2 3 4 5
Pesticidi koji se najčešde nalaze u uzorcima povrda
23
0
1
2
3
4
5
6
Zaključci
• Pesticidi su dio našeg života, bududi da ih ne možemo izbjedi, moramo se naučiti živjeti s njima
• Sigurnost hrane – cilj kojem težimo
• Uloga laboratorija: pradenje suvremenih tehnologija koje de omoguditi da sigurnost hrane ostvarimo i u praksi
24
25