PENGARUH PEMBERIAN MADU TERHADAP BAKTERI

STAPHYLOCOCCUS AUREUS DAN ESCHERICHIA COLI

Laporan Penelitian ini ditulis sebagai salah satu syarat untuk

memperoleh gelar SARJANA KEDOKTERAN

OLEH :

Nurul Elliza

NIM: 107103000166

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH

JAKARTA

1431 H/ 2010 M

i

LEMBAR PERNYATAAN

Dengan ini saya menyatakan bahwa :

1. Penelitian ini merupakan hasil karya asli saya yang diajukan untuk memenuhi

salah satu persyaratan untuk memperoleh gelar sarjana kedokteran di

Universitas Islam Negri (UIN) Syarif Hidayatullah Jakarta.

2. Semua sumber yang saya gunakan dalam penulisan ini telah saya cantumkan

sesuai dengan ketentuan yang berlaku di Universitas Islam Negri (UIN) Syarif

Hidayatullah Jakarta.

3. Jika di kemudian hari terbukti bahwa karya ini bukan hasil karya asli saya

atau merupakan jiplakan dari karya orang lain, maka saya bersedia menerima

sanksi yang berlaku di Universitas Islam Negri (UIN) Syarif Hidayatullah

Jakarta.

Jakarta, 6 Oktober 2010

Nurul Elliza

ii

iii

iv

KATA PENGANTAR

Puji syukur saya panjatkan kehadirat Allah SWT atas rahmat dan hidayah-

Nya. Shalawat serta salam senantiasa tercurahkan kepada nabi Muhammad SAW

sebagai suri tauladan ummat Islam.

Alhamdulillah saya dapat menyelesaikan penelitian ini yang berjudul

Pengaruh Pemberian Madu Terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus dan

Bakteri Escherichia Coli.

Saya menyadari bahwa tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak,

sangatlah sulit bagi saya untuk menyelesaikan penelitian ini. Oleh karena itu, dalam

kesempatan kali ini saya ingin mengucapkan terimakasih yang sebesar-besarnya pada

pihak yang membantu dan memberikan bimbingan dalam penyusunan penelitian ini.

Ucapan terimakasih dan penghargaan, saya sampaikan kepada:

1. Kedua orang tua tercinta yaitu ayahanda H. Ahmad Effendi dan Ibunda Hj.

Eni Gunaeni, yang selalu memberikan dukungan baik moril maupun material,

serta doa yang tiada henti untuk saya, terimakasih yang sedalam-dalamnya

atas perhatian dan kasih sayang kalian selama ini yang telah diberikan.

Semoga ananda dapat membahagiakan dan membalas jasa- jasa kebaikan

kalian selama ini.

2. Prof. DR (hc). DR. M.K. Tadjudin, Sp.And dan Drs. H. Achmad Gholib, MA,

selaku Dekan dan Pembantu Dekan Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

3. Zeti Harriyanti, M.Biomed selaku dosen pembimbing yang telah banyak

menyediakan waktu, tenaga dan pikiran untuk mengarahkan saya dalam

penyusunan skripsi ini.

v

4. Yuli, M. Biomed selaku dosen pembimbing laboratorium yang telah banyak

menyediakan waktu, tenaga dan pikiran untuk mengarahkan saya dalam

melakukan penelitian ini.

5. Untuk semua dosen- dosen saya yang telah begitu banyak membimbing dan

memberikan kesempatan saya untuk menimba ilmu selama saya menjalani

masa pendidikan di Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, rasa hormat

saya atas segala yang telah mereka berikan.

6. Kakak dan adik- adikku tersayang, kakakku Muhammad Hardiansyah, Fachry

Zakya dan adikku Khoirunnisa, Ibnu Muzakky yang selalu memberikan

dukungan dan motivasinya di setiap langkah hidupku serta memberikan

keceriaan dalam hidupku dengan canda tawa kalian yang membuat hidupku

lebih berwarna.

7. Teman- temanku seangkatan, senasib seperjuangan di Pendidikan Dokter

(FKIK UIN Jakarta). Sebuah kebahagiaan bisa menjadi bagian dari kalian dan

melewati satu fase kehidupan bersama kalian.

8. Teman-teman satu kelompok yang terus memberikan motivasi dan bantuan

dalam melakukan penelitian ini.

9. Semua pihak yang telah memberikan kontribusi penyelesaian penelitian ini

dan tidak dapat disebutkan satu persatu.

Akhir kata, saya berharap Allah SWT berkenan membalas segala kebaikan

semua pihak yang telah membantu. Dengan segala kelemahan, kekurangan dan

kelebihan yang ada, semoga skripsi ini dapat bermanfaat khususnya untuk diri saya

sendiri dan semua pihak sebagai informasi tambahan atau sekedar contoh yang baik.

Jakarta, 06 Oktober 2010

Nurul Elliza

vi

ABSTRAK

Nurul Elliza. Pengaruh Pemberian Madu terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan

Escherichia coli. Penelitian, 2010.

Penyakit infeksi yang disebabkan oleh bakteri merupakan penyakit yang banyak

ditemukan dalam masyarakat. Menurut laporan WHO penyakit infeksi ini menjadi

penyebab kematian terbesar pada anak-anak dan dewasa dengan jumlah kematian

lebih dari 13 juta jiwa setiap tahun, dan satu dari dua kematian terjadi di negara

berkembang seperti Indonesia. Bakteri yang sering menyebabkan infeksi adalah

Staphylococcus aureus (merupakan bakteri Gram positif) dan Escherichia coli

(merupakan bakteri Gram negatif). Penanganan penyakit akibat infeksi yg disebabkan

oleh bakteri yaitu dengan menggunakan antibakteri tersebut. Madu merupakan

pengobatan alami yang mempunyai efek antibakteri seperti hidrogen peroksida, pH

yang rendah dan aktivitas air yang rendah yang mampu menghambat pertumbuhan

bakteri. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas madu sebagai antibakteri

terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Uji aktivitas antibakteri

dilakukan secara invitro menggunakan metode difusi dengan menggunakan cakram

disk pada medium MHA dengan mengukur diameter zona bening yang merupakan

zona hambat dari pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli

dengan satuan milimeter. Konsentrasi yang digunakan 25%, 50%, 75% dan 100%

dengan aquades steril sebagai kontrol negatif. Data analisis dengan uji Kruskal Wallis

memiliki nilai 0,406 (>0,05) yang menunjukan bahwa tidak terdapat perbedaan

bermakna diantara masing-masing konsentrasi madu baik terhadap bakteri

Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Pengaruh konsentrasi 25%, 50%, 75%

dan 100% terhadap Staphylococcus aureus menghasilkan zona hambat sebesar 8; 9;

10;11mm sedangkan pada Escherichia coli sebesar 7; 9; 10; 11 mm. Kesimpulan dari

penelitian ini adalah pengaruh konsentrasi madu terhadap Staphylococcus aureus

memiliki zona hambat yang sama dengan Escherichia coli.

Kata kunci : Madu, Antibakteri, Staphylococcus aureus, Escherichia coli

vii

ABSTRACT

Nurul Elliza. Effect of honey against the bacteria Staphylococcus aureus and

Escherichia coli. Reseach, 2010.

Infectious disease is a disease caused by bacteria that are found in society. According

to the WHO infectious disease cause of death in children and adults with the number

of deaths more than 13 million people each year, and one of the two deaths occurred

in developing countries like Indonesia. Bacteria that commonly cause infections are

Staphylococcus aureus (Gram-positive bacteria) and Escherichia coli (Gram-negative

bacteria). Handling of infectious disease that is caused by bacteria that is by using the

antibacterial. Honey is a natural treatment that has antibacterial effects such as

hydrogen peroxide, low pH and low water activity that can inhibit the growth of

bacteria. The research aimed to determine the antibacterial activity of honey against

Staphylococcus aureus and Escherichia coli. Tests performed in vitro antibacterial

activity using diffusion method with cakram disk on MHA medium by measuring the

diameter of the clear zone is a zone of inhibition of growth of Staphylococcus aureus

and Escherichia coli by millimeters. Concentrations used 25%, 50%, 75% and 100%

with sterile distilled water as a negative control. Data analysis by Kruskal-Wallis test

has a value of 0.406 (> 0.05) indicating that there is no significant difference between

each concentration of honey well against Staphylococcus aureus and Escherichia

coli. Effect of concentration of 25%, 50%, 75% and 100% against Staphylococcus

aureus produce inhibition zone of 8; 9; 10; 11mm whereas in Escherichia coli by 7;

9; 10; 11 mm. The conclusion of this study is the effect of honey against

Staphylococcus aureus concentration have same inhibited (inhibition zone greater)

with Escherichia coli.

Key words: Honey, Antibacterial, Staphylococcus aureus, Escherichia coli.

viii

DAFTAR ISI

LEMBAR PERNYATAAN ........................................................................................ i

LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................................. ii

LEMBAR PENGESAHAN ....................................................................................... iii

KATA PENGANTAR ............................................................................................... iv

ABSTRAK ................................................................................................................. vi

ABSTRACT ............................................................................................................. vii

DAFTAR ISI ........................................................................................................... viii

BAB I. PENDAHULUAN........................................................................................... 1

1.1 Latar Belakang .................................................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah................................................................................................ 3

1.3 Hipotesis Masalah ............................................................................................... 4

1.4 Tujuan Penelitian ................................................................................................ 4

1.4.1 Tujuan Umum ............................................................................................ 4

1.4.2 Tujuan Khusus ........................................................................................... 4

I.5 Manfaat Penelitian .............................................................................................. 4

ix

1.5.1 Untuk Masyarakat ...................................................................................... 4

1.5.2 Untuk Institusi ........................................................................................... 5

1.5.3 Untuk Umum ............................................................................................. 5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................................................................................ 6

2.1. TINJAUAN PUSTAKA (LANDASAN TEORI) ................................................. 6

2. 1. 1 Madu .......................................................................................................... 6

2. 1. 2 Staphylococcus aureus .............................................................................. 9

2. 1. 3 Escherichia coli ........................................................................................ 14

2.1. 4 Faktor- faktor yang mempengaruhi pertumbuhan mikroorganisme .......... 18

2.1.5 Metode Difusi Kirby Baurer ....................................................................... 20

2.2. KERANGKA KONSEP ..................................................................................... 20

BAB III. METODOLOGI PENELITIAN ................................................................. 21

3.1 Desain Penelitian ............................................................................................... 21

3.2 Tempat dan Waktu Penelitian ........................................................................... 21

3.3 Sampel Penelitian .............................................................................................. 21

3.4 Kriteria Penelitian .............................................................................................. 21

3.4.1 Kriteria Inklusi ......................................................................................... 21

x

3.4.2 Kriteria Eksklusi ...................................................................................... 21

3.5 Bahan Penelitian ................................................................................................. 21

3.6 Alat Penelitian .................................................................................................... 22

3.7 Variabel dan Definisi Operasional ..................................................................... 22

3.8 Cara Kerja .......................................................................................................... 24

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................ 27

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 34

DAFTAR PUSTAKA .............................................................................................. 35

LAMPIRAN ............................................................................................................. 37

DAFTAR RIWAYAT HIDUP .................................................................................. 44

xi

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Biakan bakteri Staphylococcus aureus di MSA....................................... 37

Gambar 2. Biakan bakteri Escherichia coli di Mc-Conkey........................................ 37

Gambar 3. MHA dan MSA ...................................................................................... 38

Gambar 4. Sediaan Madu Sumbawa .......................................................................... 38

Gambar 5. Larutan madu dengan konsentrasi 25%.................................................... 38

Gambar 6. Larutan madu dengan konsentrasi 50%.................................................... 39

Gambar 7. Larutan madu dengan konsentrasi 75% ................................................... 39

Gambar 8. Larutan madu dengan konsentrasi 100% ................................................. 39

Gambar 9. Larutan Aquades ...................................................................................... 39

Gambar 10. Perbandingan berbagai konsentrasi larutan madu (25%, 50%, 75%,

100%) dan aquades sebagai kontrol .......................................................................... 40

Gambar 11. Zona hambatan larutan madu dengan konsentrasi 25% dan 50% terhadap

bakteri Staphylococcus aureus .................................................................................. 40

Gambar 12. Zona hambatan larutan madu dengan konsentrasi 75% dan 100%

terhadap bakteri Staphylococcus aureus..........................................................................41

xii

Gambar 13. Zona hambatan larutan madu dengan konsentrasi 25% dan 50% terhadap

bakteri Escherichia coli ............................................................................................. 41

Gambar 14. Zona hambatan larutan madu dengan konsentrasi 75% dan 100%

terhadap bakteri Escherichia coli............................................................................... 41

xiii

DAFTAR TABEL

Tabel 1. Hasil pengukuran diameter zona hambatan yang ditimbulkan oleh madu

sumbawa terhadap Staphylococcus aureus ................................................................ 27

Tabel 2. Uji Kruskal Wallis zona hambatan madu hutan sumbawa terhadap

Staphylococcus aureus ............................................................................................... 28

Tabel 3. Hasil pengukuran diameter zona hambatan yang ditimbulkan oleh madu

sumbawa terhadap Escherichia coli. ......................................................................... 29

Tabel 4. Uji Kruskal Wallis zona hambatan madu hutan sumbawa terhadap

Escherchia coli .......................................................................................................... 30

Pengaruh pemberian madu terhadap bakteri Staphylococcus aureus dengan

melakukan Uji Kruskal Wallis ................................................................................... 42

Pengaruh pemberian madu terhadap bakteri Escherichia coli dengan melakukan Uji

Kruskal Wallis ........................................................................................................... 43

1

BAB I

PENDAHULUAN

I.1 LATAR BELAKANG MASALAH

Penyakit infeksi merupakan penyakit yang banyak ditemukan dalam

masyarakat. Menurut laporan WHO penyakit infeksi ini menjadi penyebab

kematian terbesar pada anak-anak dan dewasa dengan jumlah kematian lebih dari

13 juta jiwa setiap tahun, dan satu dari dua kematian terjadi di negara berkembang

seperti indonesia. (WHO, 1999).

Pada tubuh manusia secara alami terdapat bakteri flora normal yang

bermanfaat untuk tubuh. Salah satu contoh bakteri flora normal yang ada pada

tubuh manusia yaitu Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Bakteri flora

normal ini dapat berubah menjadi patogen apabila jumlahnya yang berlebih dari

kadar normalnya, tidak berada di tempat predileksi yang sesungguhnya dan

menurunnya daya tahan tubuh seseorang. Hal inilah salah satu contoh seseorang

menjadi terinfeksi. Berdasarkan hasil penelitian untuk menanggulangi bakteri

flora normal yang berubah menjadi bakteri patogen dapat menggunakan madu

yang memiliki antibakteri. (Jawetz, 2008)

Madu ini telah lama dikenal, seperti digunakan untuk pengawetan mayat

zaman mesir kuno. Rasulullah SAW selalu menggunakan madu untuk mengobati

berbagai penyakit. seperti sabdaNya :

Manfaatkanlah dua jenis penyembuhan; madu dan Al-Quran

Firman Allah SWT dalam surat An Nahl ayat 68-69. Bahwa dalam madu

terdapat obat yang menyembuhkan manusia. Dan Tuhanmu mewahyukan kepada

lebah; buatlah sarang-sarang di bukit-bukit dan ditempat-tempat yang dibuat

manusia, kemudian makanlah dari tiap-tiap (macam) buah-buahan dan

tempuhlah jalan Tuhanmu yang telah dimudahkan (bagimu). Dari perut lebah

itu keluar minuman (madu) yang bermacam-macam warnanya, didalamnya

2

terdapat obat yang menyembuhkan manusia. Sesungguhnya pada yang demikian

terdapat tanda-tanda bagi orang yang memikirkan

Madu adalah cairan kental dan cairan alami yang dihasilkan oleh lebah

madu (genus apis), yang berasal dari nektar bunga. Madu memiliki sifat

antimikiroba atau antibakteri. yang memiliki aktivitas senyawa antibakteri

terutama pada bakteri Gram positif, yakni bakteri Staphylococcus aureus. Sifat

madu sebagai antibakteri juga dapat mengeliminasi flora-flora normal dengan

kadar yang berlebih pada kulit dan mukosa tubuh. Berdasarkan hasil peneliti

(Komara 2002),

Bakteri kelompok Staphylococcus merupakan bakteri Gram positif yang

dapat menyebabkan berbagai penyakit. Lebih dari 30 jenis Staphylococcus yang

dapat menginfeksi manusia dan dari jenis tersebut yang paling banyak

menginfeksi adalah Staphylococcus aureus. Bakteri Staphylococcus aureus dapat

mengakibatkan infeksi pada kerusakan kulit atau luka pada organ tubuh karena

bakteri akan mengalahkan mekanisme pertahanan tubuh. Bakteri masuk ke

peredaran darah bakteri dapat menyebar ke organ lain dan menyebabkan infeksi,

seperti pneumonia, infeksi pada katup jantung yang memicu pada gagal jantung,

radang tulang, bahkan dapat menyebabkan shock yang dapat menimbulkan

kematian. Pada kasus keracunan makanan akibat terkontaminasi Staphylococcus

aureus dapat menimbulkan penyakit diare, muntah-muntah dan dehidrasi yang

gejalanya baru timbul kira-kira 1-6 jam setelah mengkonsumsi makanan yang

terkontaminasi. Kasus diare tersering selain keracunan makanan yang disebabkan

oleh Staphylococcus aureus yaitu infeksi saluran pencernaan penyebab

terseringnya yaitu Escherichia coli. (Stroppler, 2008).

Manfaat madu yang sedemikian besar telah mendorong para ilmuwan

untuk meneliti khasiat madu secara ilmiah. Penelitian tentang pemanfaatan produk

lebah madu dimulai sejak tahun 1922 oleh Prof. R. Chauvin dari Universitas

Sorbone, Perancis (Apiari Pramuka, 2003 dalam Peri, 2004). Penelitian-penelitian

selanjutnya mengenai manfaat madu banyak dilakukan dan berhasil menguraikan

berbagai manfaat madu, salah satunya itu untuk menyembuhkan jenis penyakit

3

antioksidan, antiinflamasi. Beberapa penelitian yang telah dilakukan menunjukan

bahwa madu dapat digunakan sebagai antimikroba pada luka termasuk luka pasca

operasi. Penelitian yang dilakukan terhadap pasien pasca operasi pada luka yang

tidak berhasil disembuhkan oleh antibiotik intravena,dengan mengoleskan madu

5-10 ml dua kali sehari memperlihatkan terjadinya penyembuhan luka pada 5 hari

pemakaian (Vardi dkk,1998).

Langkah pengobatan untuk penyakit infeksi ini adalah dengan pemberian

agen antimikroba yang dapat menghambat pertumbuhan dan atau membunuh

mikroba yang menginfeksi. Agen antimikroba telah banyak ditemukan sekarang

ini, tetapi beberapa diantaranya menjadi tidak efektif digunakan karena banyaknya

mikroba yang resisten dan efek sampingnya sangat merugikan penderita (Soemiati

dkk, 2007). Oleh karena itu pencarian antimikroba baru yang lebih efektif dan

aman menjadi perlu untuk terus dilakukan, terutama yang berasal dari bahan alam

contohnya yaitu madu.

Maka dengan adanya bahan yang alami yaitu madu yang salah satu

kandungannya dapat menghambat pertumbuhan atau membunuh mikroba yang

menginfeksi, maka perlu dilakukan penelitian untuk menjadi dasar ilmiah

penggunaan madu sebagai obat antibakteri melalui pengujian pengaruh madu

terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli untuk melihat dari

aktivitas madu sebagai antibakteri terhadap Staphylococcus aureus dan

Escherichia coli.

I.2 RUMUSAN MASALAH

1. Bagaimana aktivitas pemberian madu sebagai antibakteri terhadap bakteri

Staphylococcus aureus?

2. Bagaimana aktivitas pemberian madu sebagai antibakteri terhadap bakteri

Escherichia coli?

3. Pada konsentrasi berapa madu memiliki aktivitas daya hambat

pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli?

4

4. Apakah terdapat perbedaan aktivitas pemberian madu sebagai antibakteri

terhadap bakteri Staphylococcus aureus (bakteri Gram positif) dengan

Escherichia coli (bakteri Gram negatif)?

I.3 HIPOTESIS MASALAH

Madu memiliki efektivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus

aureus dan Escherichia coli. Semakin tinggi konsentrasi madu semakin besar

efektivitas madu sebagai antibakteri yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri

tersebut.

I.4. TUJUAN PENELITIAN

1.4.1. Tujuan Umum

Mengetahui efektivitas madu sebagai antibakteri

1.4.2. Tujuan Khusus

Mengetahui efektivitas pemberian madu terhadap antibakteri

Mengetahui perbedaan efektivitasnya pemberian madu pada

bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli

Mengetahui mekanisme madu terhadap inhibisi mikroba

Mengetahui konsentrasi tepat pemberian madu sebagai antimikroba

atau antibakteri

I.5 MANFAAT PENELITIAN

Untuk masyarakat: menjadi sumber informasi bagi masyarakat tentang

pengaruh penggunaan madu untuk kehidupan sehari-hari.

5

Untuk institusi: hasil penelitian ini diharapkan dapat menjadi data dasar

untuk penelitian lebih lanjut mengenai pengaruh pemberian madu sebagai

antibakteri.

Untuk peneliti: untuk menambah pengetahuan dan wawasan, sebagai

prasyarat untuk menempuh jenjang pendidikan klinik Program Studi Pendidikan

Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

6

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA DAN KERANGKA KONSEP

2.1 TINJAUAN PUSTAKA (LANDASAN TEORI)

2.1.1 MADU

Madu adalah larutan gula dengan saturasi tinggi yang dihasilkan

oleh lebah. Lebah madu (genus apis) mengumpulkan cairan dari sari

bunga yang disebut nektar dan di bawa ke sarang lebah. Di dalam sarang,

lebah madu menambahkan enzim ke nectar dan menempatkannya dalam

wadah hexagonal yang mematangkan menjadi madu (selama pematangan

enzim terjadi perubahan molekul gula). (Komara, 2002)

Madu tersusun atas beberapa molekul gula seperti glukosa dan

fruktosa serta sejumlah mineral dan vitamin. Dibawah ini adalah

kandungan umum madu murni terdiri dari air (17,0%), fruktosa (38,5%),

glukosa (31,5%), maltosa (7,2%), karbohidrat (4,2%), sukrosa (1,5%),

enzim, mineral, vitamin (0,5%), energi kalori/100 gram (294,0%). Selain

itu, madu juga memiliki aktivitas senyawa antibakteri terutama pada

bakteri Gram positif, yakni bakteri Staphylococcus aureus dan B. cereus.

(Komara, 2002)

Madu diteliti oleh beberapa ahli dalam hal mengobati infeksi yang

disebabkan oleh bakteri maupun jamur. Kemampuan madu sebagai

antibaktreri diduga menurut molan (1992 dan 1995 ), White,dkk, (1964),

Wootton dkk, (1997, dan Tan dkk, (1989) antara lain : Madu mempunyai

osmolaritas yang tinggi, kandungan hydrogen peroksida. pH yang rendah,

aktivitas air yang rendah. (Ika puspitasari, 2007)

1. Madu Sebagai Osmolaritas Yang Tinggi

Madu memiliki efek osmotik yaitu memiliki osmolaritas yang

cukup untuk menghambat pertumbuhan bakteri. Madu merupakan cairan

7

yang mengandung glukosa dengan saturasi yang tinggi yang mempunyai

interaksi yang kuat terhadap molekul air. Kekurangan kadar air dapat

menghambat pertumbuhan bakteri. Dari penelitian telah ditemukan bahwa

luka yang terinfeksi dengan Staphylococcus aureus dan diberi madu luka

menjadi steril. (Ika puspitasari, 2007)

Kandungan antibakterial madu pertama kali dikenalkan oleh Van

Ketel tahun 1982. Hal ini diasumsikan bahwa efek osmotik dihasilkan oleh

kandungan gula yang tinggi di dalam madu. Madu, seperti larutan gula

lainnya; syrup, memiliki osmolaritas yang cukup untuk menghambat

bakteri. Madu juga telah menunjukkan pada luka yang terinfeksi

Staphylococcus aureus dapat dengan cepat diubah menjadi steril atau

dengan cara menghambat pertumbuhan bakteri. (Ika puspitasari, 2007)

Bukti kandungan antibakteri pada madu meningkat bila diencerkan

setelah diteliti dan dilaporkan pada tahun 1919. Penjelasan ini berasal dari

penelitian bahwa madu mengandung enzim yang memproduksi hydrogen

peroksida ketika diencerkan. (Ika puspitasari, 2007)

2. Kandungan Hidrogen Peroksida

Hidrogen peroksida dikenal sebagai sumber utama kemampuan

antibakteri dari madu seperti yang diteliti oleh White dkk. (1963).

Hidrogen peroksida dihasilkan dari reaksi enzim glukosa oksidase

(glukosidase) dalam madu, khususnya glukosa, dengan adanya enzim

tersebut akan mengalami reaksi diubah menjadi asam glukonat dan

hidrogen peroksida. (Ika puspitasari, 2007)

GLUKOSA + H20 + O2 --------enzim glukosidase-------- asam glukonat

+ H2O2 (Hidrogen Peroksida)

Enzim glukosidase dalam madu akan bekerja secara maksimal

dengan adanya air. Dengan demikian, untuk meningkatkan kemampuan

madu sebagai antibakteri, diperlukan kadar madu yang tidak terlalu pekat.

Hidrogen peroksida yang dihasilkan dari reaksi glukosa dalam madu

8

dengan air akan sangat rendah sekitar 1mmol/liter madu. Sementara dalam

pemakaian, hidrogen peroksida dalam medis berkisar 3% berat pervolume.

Karena itu, tidak perlu dikhawatirkan akan rusaknya jaringan dalam tubuh

akibat terlepasnya hidrogen peroksida dari madu tersebut. Panas yang

tinggi diatas 50c akan merusak enzim glukosidase dalam madu. Oleh

karena itu, sebagai antibakteri, madu tidak boleh dipanaskan terlalu tinggi.

(Ika puspitasari, 2007)

Meskipun kadar hidrogen peroksida sangat rendah namum masih

efektif sebagai antimikroba. Hal ini telah dilaporkan bahwa hidrogen

peroksida lebih efektif bila diberikan secara terus menerus. Sebuah

penelitian pada Escherichia coli untuk mengetahui aliran hidrogen

peroksida yang ditambahkan secara konstan, menunjukkan bahwa

pertumbuhan bakteri dapat dihambat oleh 0,02 0,05 mmol/l hidrogen

peroksida, konsentrasi tersebut tidak merusak sel fibroblast pada kulit

manusia. (Ika puspitasari, 2007)

3. pH yang Rendah

Madu memiliki pH yang asam, yakni berkisar 3,2-4,5. Keasaman

yang rendah merupakan penghambat yang efektif terhadap pertumbuhan

bakteri, baik di kulit maupun di saluran lain dalam tubuh. (Ika puspitasari,

2007)

4. Aktivitas Air yang Rendah

Aktivitas air pada madu sebesar 0,562-0,62. Secara umum bakteri

tidak akan tumbuh pada media yang memiliki aktivitas air yang rendah.

Tetapi bakteri Staphylococcus aureus masih bisa hidup pada media yang

memiliki aktivitas air dibawah 0,86. Penelitian yang dilakukan oleh Molan

tahun 1996 menemukan pada konsentrasi tertentu, ternyata madu mampu

menekan pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus. Selain adanya

aktivitas air yang rendah, kemungkinan besar adanya kandungan senyawa

lain dalam madu ikut serta berperan dalam kemampuan madu sebagai

9

antibakteri, khususnya terkait dengan Staphylococcus aureus. (Ika

puspitasari, 2007)

2.1.2 STAPHYLOCOCCUS AUREUS

Staphylococcus aureus merupakan salah satu bakteri flora normal

yang ada pada tubuh manusia. Tempat predileksi yaitu pada mulut.

Staphylococcus aureus ini dapat berubah menjadi patogen apabila

jumlahnya sudah melebihi kadar normalnya yaitu lebih dari 105

dan

apabila bakteri tersebut tidak tinggal di tempat predileksinya.

Staphylococcus aureus adalah sel sferis Gram-positif, biasanya tersusun

dalam kelompok seperti anggur yang tidak teratur. Staphylococcus tumbuh

dengan baik di beberapa medium dan aktif secara metabolik, melakukan

fermentasi karbohidrat dan menghasilkan pigmen yang bervariasi dari

putih hingga kuning tua. (Jawetz, 2008)

Morfologi dan Klasifikasi (Binomial Staphylococcus aureus Rosenbach

1884 ) adalah :

Domain: Bacteria

Kingdom: Eubacteria

Phylum: Firmicutes

Kelas: Bacilli

Order: Bacillales

Family: Staphylococcaceae

Genus: Staphylococcus

Spesies: Staphylococcus aureus

Ciri khas kuman ini berbentuk bola dengan diameter 0,1 m.

pengecatan Gram Staphylococcus aureus menunjukkan kokus Gram

positif yang tersusun dalam bentuk kluster yang tidak teratur atau seperti

anggur. Kokus tunggal, berpasangan, tetrad dan bentuk rantai juga tampak

dalam biakan cair. Kokus muda memberikan pewarnaan Gram-positif

yang kuat; akibat penuaan, banyak sel yang menjadi Gram-negatif.

Staphylococcus tidak motil dan tidak membentuk spora. (Stroppler, 2008)

http://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Binomial_nomenclature&prev=/search%3Fq%3Dstaphylococcus%2Baureus%26hl%3Did%26client%3Dfirefox-a%26rls%3Dorg.mozilla:en-US:official%26hs%3DQhK&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhgGYOvT0pY3qv1RCGTg9LO_PMZMAQhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Bacteria&prev=/search%3Fq%3Dstaphylococcus%2Baureus%26hl%3Did%26client%3Dfirefox-a%26rls%3Dorg.mozilla:en-US:official%26hs%3DQhK&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhi12N1d4JCUwgAlkGfXlfjHC98c3Qhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Bacterium&prev=/search%3Fq%3Dstaphylococcus%2Baureus%26hl%3Did%26client%3Dfirefox-a%26rls%3Dorg.mozilla:en-US:official%26hs%3DQhK&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhg_y5CI0R6igtI5lRwZcU1V7YDJWQhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Firmicutes&prev=/search%3Fq%3Dstaphylococcus%2Baureus%26hl%3Did%26client%3Dfirefox-a%26rls%3Dorg.mozilla:en-US:official%26hs%3DQhK&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhiuER2SYHZCvKthz3V721s_fJSw5Qhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Bacilli&prev=/search%3Fq%3Dstaphylococcus%2Baureus%26hl%3Did%26client%3Dfirefox-a%26rls%3Dorg.mozilla:en-US:official%26hs%3DQhK&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhh_508FI9U4XEunoMOAUfBdHrR0ywhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Bacillales&prev=/search%3Fq%3Dstaphylococcus%2Baureus%26hl%3Did%26client%3Dfirefox-a%26rls%3Dorg.mozilla:en-US:official%26hs%3DQhK&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhhMRsw0c78gDuviSZAc4_6j-FFosghttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Staphylococcaceae&prev=/search%3Fq%3Dstaphylococcus%2Baureus%26hl%3Did%26client%3Dfirefox-a%26rls%3Dorg.mozilla:en-US:official%26hs%3DQhK&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhibiiCPX5yUvCniiPL2-I6PmNM7uQhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Staphylococcus&prev=/search%3Fq%3Dstaphylococcus%2Baureus%26hl%3Did%26client%3Dfirefox-a%26rls%3Dorg.mozilla:en-US:official%26hs%3DQhK&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhg9yED0n8E9dwwcV5hiZEjTkbeduw

10

Genus Staphylococcus sedikitnya memiliki 30 spesies diantaranya

Staphylococcus aureus bersifat koagulase-positif, yang membedakannya

dari spesies lain. Staphylococcus aureus adalah patogen utama pada

manusia yang paling banyak menginfeksi. Hampir semua orang pernah

mengalami infeksi Staphylococcus aureus dalam hidupnya, dengan derajat

keparahan beragam, dari keracunan makanan atau infeksi kulit ringan

hingga infeksi berat yang mengancam jiwa. (Jawetz, 2008)

Biakan Staphylococcus aureus tumbuh dengan baik pada berbagai

media bakteriologi di bawah suasana aerobik dan mikroaerobik. Tumbuh

dengan cepat pada temperatur 37C, pembentukan pigmen yang terbaik

adalah pada temperatur kamar (20-35C). pH optimal untuk pertumbuhan

yaitu 7,4. Media untuk pertumbuhan Staphylococcus aureus umumnya

mengandung asam amino dan vitamin-vitamin seperti thereonin, asam

nikotinat, dan biotin. Koloni pada media padat berbentuk bulat, lembut,

dan mengkilat sedangkan pada pembenihan kaldu misalnya ditemukan

tersendiri atau tersusun sebagai rantai pendek. Staphylococcus aureus

biasanya membentuk koloni abu-abu hingga kuning tua kecoklatan. media

yang sering digunakan untuk pertumbuhan Staphylococcus aureus yaitu

MSA (Mannitol Salt Agar). (Usman Suwandi. 1999)

Mannitol Salt Agar Medium

Media dan morfologi mikroorganisme

Mikroorganisme Jenis Media Karakteristik

Staphylococcus aureus Mannitol Salt Agar (MSA) Kuning dengan zona kuning

Mempunyai kandungan garam cukup tinggi. Staphylococcus

aureus cukup tahan terhadap garam tinggi, sehingga dapat tumbuh dengan

warna kuning keemasan dan mediapun berubah menjadi kuning. Dengan

demikian media ini sudah sangat selektif dan mampu menumbuhkan

Staphylococcus aureus. (Usman Suwandi. 1999)

11

Struktur Antigen

Staphylococcus mengandung polisakarida antigenik dan protein

serta substansi penting lainnya dalam struktur dinding sel. Peptidoglikan,

polimer sakarida, yang mangandung subunit-subunit terangkai,

merupakan eksoskelet yang kaku pada dinding sel. Peptidoglikan

dihancurkan oleh asam kuat atau pajanan terhadap lisozim. Peptidoglikan

memicu produksi interleukin-1 (pirogen endogen) dan antibodi opsonik

oleh monosit, dan dapat menjadi chemoattractant untuk leukosit

polimorfonuklear, yang memiliki aktivitas mirip endotoksin, dan

mengaktifkan komplemen. (Jawetz, 2008)

Asam teikoat, yang merupakan polimer gliserol ribitol fosfat,

berhubungan dengan petidoglikan dan dapat menjadi antigenic. Beberapa

strain Staphylococcus aureus mampu menghasilkan Staphyloxanthin

adalah sebuah karotenoid pigmen yang berperan sebagai faktor virulensi.

Pigmen ini memiliki antioksidan yang membantu untuk menghindari

pembunuhan mikroba dengan reaktif oksigen yang digunakan oleh sistem

kekebalan tubuh inang. Diperkirakan bahwa Staphyloxanthin bertanggung

jawab untuk 'karakteristik warna keemasan. Ketika membandingkan strain

normal Staphylococcus aureus dengan regangan dimodifikasi untuk

kekurangan warna kuning, ketegangan yang berpigmen lebih mungkin

bertahan hidup terhadap oksidasi kimia seperti hidrogen peroksida.

(Jawetz, 2008)

Enzim dan Toksin

Staphylococcus dapat menyebabkan penyakit baik melalui

kemampuannya berkembang biak dan menyebar luas di jaringan serta

dengan menghasilkan berbagai substansi ekstraselular. Beberapa substansi

tersebut adalah enzim, dan yang lainnya disebut toksin, tetapi dapat

berfungsi sebagai enzim. Banyak dari enzim tersebut dibawah kontrol

genetik plasmid, beberapa dengan kontrol kiromosomal dan

ekstrakromosomal, dan mekanisme genetik lainnya. (Jawetz, 2008)

http://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Carotenoid&prev=/search%3Fq%3Dstaphylococcus%2Baureus%26hl%3Did%26client%3Dfirefox-a%26rls%3Dorg.mozilla:en-US:official%26hs%3DQhK&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhjtDy-u5XLCNZFEbB_CZU_UI91I8Qhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Pigment&prev=/search%3Fq%3Dstaphylococcus%2Baureus%26hl%3Did%26client%3Dfirefox-a%26rls%3Dorg.mozilla:en-US:official%26hs%3DQhK&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhgI2sdt8KmimaQ9gmUIonjDMPfejAhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Hydrogen_peroxide&prev=/search%3Fq%3Dstaphylococcus%2Baureus%26hl%3Did%26client%3Dfirefox-a%26rls%3Dorg.mozilla:en-US:official%26hs%3DQhK&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhhh1TfzGvx4rlwRgqOzVDT1xoQT8A

12

Katalase

Staphylococcus menghasilkan katalase, yang mengubah hidrogen

peroksida menjadi air dan oksigen. (Jawetz, 2008)

Koagulase dan Faktor Penggumpal

Staphylococcus aureus menghasilkan koagulase, suatu protein

yang dapat menggumpalkan plasma yang mengandung oksalat dan

sitrat. Koagulase berikatan dengan protrombin; bersama-sama keduanya

menjadi aktif secara enzimatik dan menginisiasi polimerase fibrin.

Koagulase dapat menyimpan fibrin pada permukaan Staphylococcus,

mungkin mengubah ingestinya oleh sel fagositik atau destruksi

Staphylococcus dalam sel-sel tersebut. Memproduksi koagulase

dianggap sama dengan memiliki potensi patogen yang invasif. Faktor

penggumpal adalah kandungan permukaan Staphylococcus aureus yang

berfungsi melekatkan organisme ke fibrin atau fibrinogen. Bila berada

dalam plasma, Staphylococcus aureus membentuk gumpalan. Faktor

penggumpal berbeda dengan koagulase. (Jawetz, 2008)

Enzim Lain

Enzim-enzim lain yang dihasilkan Staphylococcus antara lain

adalah hialuronidase, atau faktor penyebar, Staphylokinase

menyebabkan fibrinolisis tetapi bekerja jauh lebih lambat daripada

Streptokinase; proteinase; lipase, dan -laktamase. (Jawetz, 2008)

Eksotoksin

-toksin merupakan protein hematogen yang bekerja dengan

spektrum luas pada membran sel eukariot. -toksin merupakan

hemolisin yang kuat. -toksin dapat menguraikan sfingomielin sehingga

toksik untuk berbagai sel, termasuk sel darah merah manusia. -toksin

melisiskan sel darah merah manusia dan hewan. toksin bersifat

heterogen dan terurai menjadi beberapa subunit pada detergen nonionik.

Toksin tersebut mengganggu membran biologik dan dapat berperan

pada penyakit diare akibat Staphylococcus aureus. (Jawetz, 2008)

13

Leukosidin

Toksin Staphylococcus aureus ini memiliki dua komponen.

Leukosidin dapat membunuh sel darah putih manusia dan kelinci.

Kedua komponen tersebut bekerja secara sinergis pada membran sel

darah putih membentuk pori-pori dan meningkatkan permeabilitas

kation. (Jawetz, 2008)

Toksin Eksfoliatif

Toksin epidermolitik Staphylococcus aureus ini memiliki dua

protein yang berbeda dengan berat molekul yang sama. Toksin

epidermolitik A adalah produk kromosomal dan tahan panas. Toksin

epidermolitik B diperantai plasmid dan tidak yahan panas. Toksin

epidermolitik menyebabkan deskuamasi generalisata pada

Staphylococcal scalded skin syndrome. Toksin-toksin tersebut

merupakan super antigen. (Jawetz, 2008)

Toksin Sindrom-syok-toksik

Sebagian besar strain Staphylococcus aureus yang diisolasi dari

pasien syok toksik menghasilkan toksin sindrom-syok-toksik-1 (TSST-

1), yang serupa dengan enterotoksin F. TSST-1 merupakan superantigen

prototipikal, berikatan dengan MHC kelas II, menstimulasi sel T.

Toksin ini menyebabkan demam, syok, dan toksik. (Jawetz, 2008)

Enterotoksin

Terdapat berbagai enterotoksin (A-E, G-I, K-M), sekitar 50%

Staphylococcus aureus dapat menghasilkan satu enterotoksin tahan

terhadap panas dan resisten terhadap enzim usus. Enterotoksin

dihasilkan bila Staphylococcus aureus tumbuh di makanan yang

mengandung protein dan karbohidrat. Ingesti 25 g enterotoksin B

dapat menyebabkan diare. (Jawetz, 2008).

14

2.1.3 ESCHERICHIA COLI

Escherichia merupakan order dari Enterobacteriaceaea.

Enterobacteriaceaea adalah suatu famili kuman yang terdiri dari sejumlah

besar spesies bakteri yag erat hubungannya satu dengan yang lainnya.

Hidup di usus besar manusia dan hewan, tanah, air dan dapat pula

ditemukan dekomposisi material. Karena hidupnya yang pada keadaan

normal di dalam usus besar manusia, kuman ini sering disebut kuman

enterik atau basil enterik. (Karsinah, dkk. 1994)

Sifat biokimiawi dari kuman enterik kompleks dan bervariasi. Pada

suasana anaerob atau kadar O2 rendah terjadi reaksi fermentasi yang cukup

terjadi siklus asam trikarboksilat dan transport elektron untuk bentukan

enersi. (Karsinah, dkk. 1994)

Macam- macam perbenihan yang dipakai untuk isolasi kuman enterik :

(Karsinah, dkk. 1994)

1. Diferensial:

Agar MacConkey, agar eosin Methylin lue, Agar Desoxycholate. Pada

perbenihan ini hampir semua kuman enterik dapat tumbuh.

2. Selektif :

Agar Salmonella-Shigella, agar Desoxycholate citrat. Perbenihan ini

khusus untuk mengisolasi kuman usus patogen

3. Persemaian :

Kaldu GN, kaldu selenit, kaldu tetrahionat. Kuman usus patogen lebih

subur.

Escherichia coli merupakan Gram negatif, habitatnya di

lingkungan akuatik, tanah, makanan, air seni, dan tinja, dan bersifat

sebagai patogen. Dinding selnya mengandung peptidoglikan dan asam

15

teikhoat, selalu berpasangan membentuk rantai pendek. (Karsinah, dkk.

1994)

Kuman berbentuk batang pendek (kokobasil), Gram negatif,

ukuran 0,4-0,7 m x 1,4 m sebagian besar gerak positif dan beberapa

strain mempunyai kapsul. (Jawetz, 2008)

Morfologi dan Klasifikasi Escherichia coli (Karsinah, dkk. 1994)

Domain : Bacteria

Kingdom : Bacteria

Phylum : Proteobacteria

Kelas : Gamma proteobacteria

Order : Enterobacteriales

Family : Enterobacteri aceae

Genus : Escherichia

Spesies : Escherichia coli

Daya tahan kuman

Kuman enterik tidak membentuk spora, mudah dimatikan dengan

desinfektan antibakteri. (Karsinah, dkk. 1994)

Stuktur dinding sel

Dinding sel kuman terdiri dari lapisan murein,lipoprotein,

fosfolipid, protein dan lipopolisakarida. Lapisan murein-lipprotein

membentuk 20% dari total dinding sel dan bertanggung jawab terhadap

celullar rigidity, stuktur ini menyerupai jala/net, terdiri dari rantai N-asetil

glukosamin berikatan kovalen dengan asam N-asetil muramat melalui

ikatan B1-4 glikosida. Lapisan fosfolipid, protein dan lipopolisakarida

membentuk 80%^ dari dinding sel. Komponen utama yang terpenting dari

dinding sel adalah lipopolisakarida, tersiri dari rantai polisakarida yang

http://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Bacteria&prev=/search%3Fq%3Dstaphylococcus%2Baureus%26hl%3Did%26client%3Dfirefox-a%26rls%3Dorg.mozilla:en-US:official%26hs%3DQhK&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhi12N1d4JCUwgAlkGfXlfjHC98c3Qhttp://translate.googleusercontent.com/translate_c?hl=id&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/wiki/Bacterium&prev=/search%3Fq%3Dstaphylococcus%2Baureus%26hl%3Did%26client%3Dfirefox-a%26rls%3Dorg.mozilla:en-US:official%26hs%3DQhK&rurl=translate.google.co.id&usg=ALkJrhg_y5CI0R6igtI5lRwZcU1V7YDJWQ

16

spesifik, menentukan sifat antigenik da aktivitas endotoksin. (Karsinah,

dkk. 1994)

Stuktur antigen

Katerisasi antigen berperan penting dalam epidemiologi dan

klasifikasi. Komponen utama sel bakteri adalah : antigen somatik (O),

antigen flagel (H), dan antigen kapusl (K). (Karsinah, dkk. 1994)

Antigen kapsul

Terdiri dari polisakarida, bila dipanaskan 60C selama satu jam

kapsul akan rusak. Antigen ini dapat menghalangi/ menghambat reaksi

aglutinasi antigen O dengan antiserumnya yang homolog. (Karsinah, dkk.

1994)

Antigen flagel

Terdiri dari protein (Karsinah, dkk. 1994)

Antigen somatik

Terdiri dari lipopolisakarida yang dapat dibedakan dalam 3 regio.

(Karsinah, dkk. 1994)

- Regio 1 :

Merupakan polimer dari unit oligosakarida yang spesifik, tersusun dari 3-4

monosakarida yang berulang. Perbedaan- perbedaan ini dipakai untuk

identifikasi, misalnya subgruping serologik terhdap kuman- kuman

Salmonella, Shigella dan Escherichia.

- Regio 2 :

Regio ini melekat pada regio 1, terdiri dari inti polisakarida, yang

dibedakan dalam inti dalam terdiri dari 2 keto-3 deoksitinat, heptosa,

17

fosfat, pirofosfat dan inti luar terdiri dari heksosa : glukosa, galaktosa dan

N-asetil gluamin.

- Regio 3 :

- Regio ini melekat pada regio 2, terdiri dari lipid A, yang merupakan

bagian molekul yang toksik.

Faktor-faktor patogenitas

Antigen permukaan

Pada Escherichia coli paling tidak terdapat 2 tipe fimbrae yaitu :

a. Tipe manosa sensitif (pili)

b. Tipe manosa resisten

Kedua tipe fimbrae ini penting sebagai colonization factor, yaitu

untuk perlekatan sel kuman pada sel/jaringan. (Pelczar, 2006)

Enterotoksin

Ada 2 macam enterotoksin yang telah berhasil diisolasi dari

Escherichia coli :

a. Toksin LT (Termolabil)

b. Toksin ST (Termostabil)

Produksi kedua macam toksin diatur oleh plasmid yang mampu pindah

dari satu sel kuman ke sel kuman lainnya. Terdapat 2 macam plasmid :

(Pelczar, 2006)

- 1 plasmid mengkode pembentukan toksin LT dan ST

- 1 plasmid lainnya mengatur pembentukan toksin ST saja.

Seperti toksin kolera, toksin termolabil bekerja merangsang enzim

adenil siklase yang terdapat di dalam sel epitel mukosa usus halus,

menyebabkan peningkatan aktivitas enzim enzim tersebut terjadinya

peningkatan permeabilitas sel epitel usus. Sehingga terjadi akumulasi

cairan di dalam usus dan berkahir dengan diare. (Pelczar, 2006)

Toksin ST bekerja dengan cara mengaktivasi enzim guanilat siklase

menghasilkan siklik guanosin monofosfat, menyebabkan gangguan

absorpsi klorida dan natrium, selain itu ST menurunkan motalitas usus

halus. (Pelczar, 2006)

18

Hemolisin

Peranan hemolisisn ada infeksi oleh Escherichia coli tidak jelas

tetapi strain hemolitik Escherichia coli ternyata lebih patogen daripada

strain yang nonhemolitik. (Pelczar, 2006)

2.1.4 Faktor-faktor yang Mempengaruhi Pertumbuhan Organisme

Faktor Kimia

1. Nutrien

Mikroba membutuhkan karbon yang didapat dari sejumlah reaksi

biosintesis dan menghasilkan lebih dari kebutuhannya. Nitrogen

merupakan komponan utama protein dan asam nukleat. Sulfur

merupakan komponen dari banyak substansi organik sel. Fosfor sebagai

komponan ATP, asam nukleat dan sejumlah koenzim komponen dinding

sel, beberapa polisakarida kapsul dan beberapa protein. (Jawetz, 2008)

2. Aerasi

Berbagai organisme obligat aerob, secara khusus membutuhkan

oksigen sebagai penerima hidrogen, beberapa fakultatif, mampu

bertahan hidup secara aerob atau anaerob. Hasil alami metabolisme

aerob adalah senyawa-senyawa reaktif hidrogen peroksida dan

superoksida. Dengan adanya unsur besi, dua senyawa tersebut dapat

membentuk radikal hidroksil yang dapat merusak setiap molekul

biologis. (Jawetz, 2008)

Faktor Fisik

1. pH

Sebagian besar organism paling baik tumbuh pada pH 6,0-8,0,

meskipun beberapa bentuk(asidofil) mempunyai pH optimal 3,0 dan

yang lain (alkalifil) mempunyai pH optimal 10,5. (Jawetz, 2008)

2. Temperatur

Spesies mikroba yang berbeda sangat beragam kisaran temperatur

optimalnya untuk tumbuh, berbentuk psycrophylic (mikroba yang

19

menyukai suhu dingin) tumbuh pada temperatur rendah 15-20C, bentuk

mesophylic (mikroba yang menyukai suhu sedang) tumbuh terbaik pada

30-37C dan kebanyakan thermophylic (mikroba yang menyukai suhu

hangat) tumbuh pada suhu 50-60C. kebanyakan organisme adalah

mesophylic, 30C adalah suhu optimal untuk berbagai bentuk yang hidup

bebas, temperatur badan inang adalah optimal untuk tumbuh dengan

cepat. (Jawetz, 2008)

Selain berpengaruh pada laju pertumbuhan, temperatur yang

ekstrim dapat membunuh mikroorganisme. Panas yang ekstrim

digunakan untuk sterilisasi, dingin yang ekstrim juga dapat membunuh

mikroba, meskipun tidak aman untuk sterilisasi. Bakteri juga

menunjukkan fenomena yang disebut cold shock, pembunuhan sel-sel

dengan pendinginan cepat. (Jawetz, 2008)

Kekuatan Iotonik dan Tekanan Osmotik

Pada tingkatan yang lebih kecil, faktor-faktor seperti tekanan

osmotik dan konsentrasi garam harus dapat dikontrol. Kebanyakan

organisme, sifat media yang umum sudah cukup memuaskan, tetapi

faktor-faktor ini harus diperhitungkan. Organisme yang membutuhkan

konsentrasi garam tinggi disebut halofilik, yang membutuhkan tekanan

osmotik tinggi disebut osmofilik. (Jawetz, 2008)

Kebanyakan bakteri mampu mentoleransi kisaran tekanan dan

kekuatan ionik eksternal yang besar karena kemampuan bakteri tersebut

untuk mengatur osmolalitas dan konsentrasi ion internal. Osmolalitas

diatur oleh transport aktif ion K+ ke dalam sel. Kekuatan ionik internal

dijaga tetap konstan oleh ekskresi kompensasi poliamin organik putresin

(suatu poliamin organik bermuatan positif). Karena putresin membawa

beberapa muatan positif per molekul, kekuatan ionik dapat sangat

menurun akibat pengaruh dari perubahan kekuatan osmotik yang kecil

saja. (Jawetz, 2008)

20

2.1.5 Metode Difusi Kirby Baurer

Kirby baurer pengujian antibiotik (KB pengujian atau tes

sensitivitas antibiotik disk difusi) adalah tes yang menggunakan

antibiotik untuk menguji apakah bakteri tertentu rentan terhadap

antibiotik tertentu. KB test juga dapat secara rutin dilakukan untuk

memantau prevalensi bakteri resisten antibiotik, amati tren untuk

mengambil tindakan pencegaham sebagai contoh : pengembangan obat

baru. Jika bakteri yang rentan terhadap antibiotik tertentu wilayah kliring

mengelilingi wafer dimana bakteri tidak mampu tumbuh (disebut zona

inhibisi). (Pelczar, 2006)

Prosedur :

Menyiapkan kultur murni (18-24 jam) sampel pada media, sesuaikan

kekeruhan sampai setara dengan 0.5 standar Mc Farland kekeruhan.

Celupkan kapas steril kedalam sampel yang sudah di standarisasi

kekeruhannya berdasarkan 0.5 Mc Farland standar.

Lalu disebarkan bakteri tersebut pada- Hinton agar- agar Mueller.

Setelah inkubasi, amati di halaman bakteri (zona hambatan).

Ukur diameter zona hambatan.

2.2 KERANGKA KONSEP

Pertumbuhan

Escherichia coli

21

BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

3.1 DESAIN PENELITIAN

Penelitian ini merupakan menggunakan design studi eksperimen.

3.2 TEMPAT DAN WAKTU PENELITIAN

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium mikrobiologi FKUIN Syarif

Hidayatullah Jakarta pada bulan September hingga Oktober tahun 2010.

3.3 SAMPEL PENELITIAN

Sampel penelitian ini menggunakan bakteri Staphylococcus aureus dan

bakteri Escherichia coli yang diambil dari kultur murni.

3.4 KRITERIA PENELITIAN

3.4.1 Kriteria Inklusi

1. Media agar yang terdapat bakteri Staphylococcus aureus

2. Media agar yang terdapat bakteri Escherichia coli

3.4.2 Kriteria Eksklusi

1. Media agar yang tidak hanya terdapat bakteri Staphylococcus aureus

2. Media agar yang tidak hanya terdapat bakteri Escherichia coli

3.5. BAHAN PENELITIAN

Bahan- bahan yang dibutuhkan untuk melakukan penelitian ini adalah

madu hutan sumbawa, suspensi bakteri Staphylococcus aureus, suspense bakteri

22

Escherichia coli, manitol salt agar (MSA), Mc Conkey agar, Mueller Hinton

Agar (MHA), NaCl steril, Aquades .

3.6. ALAT PENELITIAN

Alat- alat yang dibutuhkan untuk melakukan penelitian ini adalah sarung

tangan, tabung reaksi, cawan petri, ose steril, Autoclave, Inkubator , bekker

glass, cakram disk (blank disk) diameter 10 mm, parafilm, bunsen, swab steril,

korek api, sendok, jangka sorong, penggaris

3.7. Variabel dan Definisi Operasional

3.7.1 Variabel penelitian

a. Variabel Bebas

Pemberian madu dengan konsentrasi 25%, 50%, 75%, 100%,

Aquades steril

b. Variabel Tergantung

Pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus di MSA. Dan

diukur dengan diameter zona hambatan yang terbentuk

dalam millimeter di MHA.

Pertumbuhan bakteri Escherichia coli di endo agar. Dan

diukur dengan berbagai diameter zona hambatan yang

terbentuk dalam millimeter di MHA

1. Variabel Perancu Terkendali

Suhu inkubasi 37C

Waktu inkubasi 24 jam

Kepekatan bakteri

23

Waktu perendaman cakram ke dalam madu

3.7.2 Definisi Operasional Variabel

Tabel 2. Definisi operasional

No. Variabel Definisi Operasional Alat

Ukur

Hasil Ukur Skala

Ukur

Terikat

1 Zona hambatan

Staphylococcus

aureus

Daerah sekeliling kertas

cakram dimana tidak

ditemukannya pertumbuhan

Staphylococcus aureus

Jangka

sorong

Diameter

zona

hambatan

Rasio

Zona hambatan

Escherichia coli

Daerah sekeliling kertas

cakram dimana tidak

ditemukannya pertumbuhan

Escherichia coli

Jangka

sorong

Diameter

zona

hambatan

Rasio

Bebas

2 Larutan madu Madu yang sudah

dilarutkan dengan air

dengan konsentrasi yang

sudah ditentukan

Gelas

ukur

Jumlah

larutan

sesuai

konsentrasi

pada setiap

tabung

Rasio

24

3.8. CARA KERJA

3.8.1. Cara penelitian

Pembuatan suspensi biakan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia

coli

Pengambilan masing-masing bakteri tersebut dengan menggunakan ose,

lalu masing-masing bakteri tersebut diambil sebanyak satu sengkelit kemudian

disebarkan dalam media agar masing-masing, Staphylococcus aureus pada MSA

(Manitol Salt Agar) dan Escherichia coli pada Mc Conkey agar. Lalu bakteri

tersebut dibiakan dan di inkubasi selama 24 jam pada suhu 37C.

Staphylococcus Aureus

Ambil NaCl steril dimasukan ke dalam gelas ukur lalu ambil masing-

masing koloni bakteri disimpan di masing masing gelas ukur yg sdh

tersedia NaCl steril lalu dibandingkan kepekatannya dgn Mc farlan

Pembuatan larutan madu

dengan konsentrasi 25%,

50%, 75%, 100% dan

aquades sebagai kontrol

Masukan cakram steril

kedalam setiap

konsentrasi larutan madu

dan Aquades

Letakan ke dalam MHA

Inkubasi 24 jam dengan

suhu 37c

Lakukan pengamatan

Escherichia coli

Di biakan di Mc Conkey

Agar

Di biakan di MSA

Lihat zona hambatan

25

Pembuatan konsentrasi larutan madu

a. Larutan madu dengan konsentrasi 25%, 50%, 75% dan 100%

Madu 25 ml dilarutkan dengan aquades sebanyak 75 ml, madu 50

ml dilarutkan dengan aquades 50 ml, madu 75 ml dilarutkan dengan

aquades 25 ml dan madu 100% tidak perlu dilarutkan dengan aquades.

Lalu semua larutan madu dengan berbagai konsentrasi tersebut dibuat di

dalam bekker glass steril setelah itu bekker glass steril tersebut ditutup

dengan alumunium foil agar tetap steril dan tidak terkontaminasi oleh

mikroorganisme lainnya.

b. Aquades steril

Ambil sedikit aquades steril lalu dipindahkan di bekker glass steril.

Setelah itu bekker glass steril tersebut ditutup dengan alumuniumfoil agar

tetap steril dan tidak terkontaminasi oleh mikroorganisme lainnya..

Uji pengaruh madu terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli

a. Larutan madu dengan konsentrasi 25%

Ambil cakram kosong steril dan masukan kedalam larutan madu

25%, 50%, 75% dan 100% yang masing- masing sudah dilarutkan, tunggu

sekitar 20 menit agar lebih menyerap ke dalam cakram tersebut. Lalu

masing- masing MHA dioleskan bakteri Staphylococcus aureus dan

Escherichia coli yang dimasukan kedalam larutan NaCl steril menurut

standarisasi 0.5 Mc Farland dengan menggunakan swab steril. Tunggu 15

menit lalu ambil cakram yang sudah dimasukan kedalam larutan madu

tersebut kemudian pindahkan kedalam MHA yang sudah dioleskan

masing- masing bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli

dengan menggunakan pinset steril (dibakar terlebih dahulu di atas api

bunsen). Lalu masukan kedalam inkubator selama 24 jam pada suhu 37c.

26

b. Larutan Aquades Steril

Ambil cakram kosong steril dan masukan kedalam larutan aquades

steril tunggu sekitar 20 menit agar lebih menyerap ke dalam cakram

tersebut. Lalu MHA dioleskan oleh bakteri Staphylococcus aureus dan

Escherichia coli yang sudah dilarutkan dengan menggunakan NaCl steril

menurut standarisasi 0.5 Mc Farland dengan menggunakan swab steril.

Tunggu sampai 15 menit lalu ambil cakram yang sudah dimasukan

kedalam larutan madu tersebut kemudian pindahkan kedalam MHA yang

sudah dioleskan masing-masing bakteri Staphylococcus aureus dan

Escherichia coli dengan menggunakan pinset steril (dibakar terlebih

dahulu di atas api bunsen). Perlakuan selalu dipanaskan terlebih dahulu

diatas api. Lalu dimasukan kedalam inkubator selama 24 jam pada suhu

37c.

27

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1. Analisis Hasil Penelitian

Penelitian ini merupakan uji aktivitas antibakteri, dalam hal ini madu

sumbawa terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Penelitian ini

dilakukan metode difusi menggunakan media MHA. Setelah Staphylococcus

aureus diinokulasikan pada agar MHA, setiap satu agar diberikan tiga cakram,

kontrol negative, dan 2 cakram yang sudah dimasukkan ke dalam larutan bawang

putih dengan kadar yang telah ditentukan. Setelah diinkubasi pada suhu 37C

selama 24 jam. Aktivitas antibakteri tersebut nampak dengan terbentuknya zona

hambatan yang diukur dengan menggunukan jangka sorong atau penggaris pada

kertas cakram yang dapat dilihat pada tabel 1.

1. Aktivitas Madu Sebagai Antibakteri Terhadap Bakteri Staphylococcus

aureus

Tabel 1. Hasil pengukuran diameter zona hambatan yang ditimbulkan oleh

madu sumbawa terhadap Staphylococcus aureus

Zona hambatan madu sumbawa (dalam milimeter)

Percobaan Kontrol Madu 25% Madu 50% Madu 75% Madu 100%

1 0 mm 8 mm 9 mm 10 mm 11 mm

2 0 mm 8 mm 9 mm 10 mm 11 mm

Total 0 mm 16 mm 18 mm 20 mm 22 mm

Mean 0 8 mm 9 mm 10 mm 11 mm

28

Berdasarkan tabel 1 zona hambat yang terbentuk menunjukan adanya

aktivitas antibakteri madu sumbawa terhadap Staphylococcus aureus. Pengamatan

ini menunjukan hasil bahwa pada kelompok larutan madu dengan konsentrasi

25%, 50%, 75% dan 100% menunjukan hasil dengan terbentuk zona hambat yang

berarti bahwa larutan madu dengan konsentrasi 25%, 50%, 75% dan 100% dapat

menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus. Dari hasil penelitian

tersebut menunjukan bahwa larutan madu memiliki antibakteri seperti kandungan

hidrogen peroksida, pH yang rendah dan aktivitas air yang rendah (Ika

puspitasari, 2007).

Dari percobaan aktivitas madu sebagai antibakteri terhadap bakteri

Staphylococcus aureus dilakukan uji statistik untuk melihat signifikasi dari

hasilnya tersebut. Uji statistik ini menggunakan uji Kruskal Wallis.

Hipotesis dalam melakukan uji Kruskal Wallis pada madu hutan sumbawa

terhadap bakteri Staphylococcus aureus adalah sebagai berikut :

Ho : tidak terdapat perbedaan hasil perlakuan pemberian madu hutan sumbawa

terhadap bakteri Staphylococcus aureus.

H1 : terdapat perbedaan hasil perlakuan pemberian madu hutan sumbawa terhadap

bakteri Staphylococcus aureus. Keputusannya sebagai berikut :

H1 : diterima jika nilai signifikannya < 0.05.

H1 : ditolak jika nilai signifikannya > 0.05.

Tabel 2. Uji Kruskal Wallis zona hambatan madu hutan sumbawa terhadap

Staphylococcus aureus.

Madu Hutan Sumbawa Terhadap Staphylococcus aureus.

Assymp.Sig

Percobaan 1 0.406

Percobaan 2 0.406

29

Hasil uji statistik dengan menggunakan uji Kruskal Wallis, pada tabel 2

terlihat bahwa dari hasil perlakuan madu hutan sumbawa terhadap Staphylococcus

aureus yang diujikan memiliki nilai signifikansi yang lebih besar dari 0.05 yaitu

0.406. berdasarkan hasil tersebut, disesuaikan dengan hipotesis bahwa tidak

terdapat perbedaan hasil perlakuan pemberian madu hutan sumbawa terhadap

bakteri Staphylococcus aureus. Hal ini dikarenakan kurangnya sampel untuk

melakukan penelitian ini, perbedaan zona hambat yang terjadi antara setiap

konsentrasi jarak hanya berbeda sedikit.

2. Aktivitas Madu Sebagai Antibakteri Terhadap Bakteri Escherichia coli

Tabel 3. Hasil pengukuran diameter zona hambatan yang ditimbulkan oleh

madu sumbawa terhadap Escherichia coli.

Zona hambatan madu sumbawa (dalam milimeter)

Percobaan Kontrol Madu 25% Madu 50% Madu 75% Madu

100%

1 0 mm 7 mm 9 mm 10 mm 11 mm

2 0 mm 7 mm 9 mm 10 mm 11 mm

Total 0 mm 14 mm 18 mm 20 mm 22 mm

Mean 0 mm 7 mm 9 mm 10 mm 11 mm

Berdasarkan tebel 3 bahwa zona hambat yang terbentuk menunjukan

adanya aktivitas antibakteri madu sumbawa terhadap Escherichia coli. Pada tabel

3 hasil pengamatan ini menunjukan pada kelompok larutan madu dengan

konsentrasi 25%, 50%, 75% dan 100% menunjukan hasil dengan terbentuk zona

hambat yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli dengan

diameter secara berurutan 7, 9, 10, 11 mm. Dari hasil penelitian tersebut

menunjukan bahwa memiliki aktivitas antibakteri yang terkandung dalam madu

30

seperti kandungan hidrogen peroksida, pH yang rendah dan aktivitas air yang

rendah (Ika puspitasari, 2007).

Dari percobaan aktivitas madu sebagai antibakteri terhadap bakteri

Escherichia coli dilakukan pengujian data menggunakan uji statistik untuk

melihat signifikasi dari hasilnya tersebut. Uji statistik ini menggunakan uji

Escherichia coli.

Hipotesis dalam melakukan uji Kruskal Wallis pada madu hutan sumbawa

terhadap bakteri Escherichia coli adalah sebagai berikut :

Ho : tidak terdapat perbedaan hasil perlakuan pemberian madu hutan sumbawa

terhadap bakteri Escherichia coli.

H1 : terdapat perbedaan hasil perlakuan pemberian madu hutan sumbawa terhadap

bakteri Escherichia coli.

Keputusannya sebagai berikut :

H1 : diterima jika nilai signifikannya 0.05.

Tabel 4. Uji Kruskal wallis zona hambatan madu hutan sumbawa terhadap

Escherichia coli.

Madu Hutan Sumbawa Terhadap Escherichia coli.

Assymp.Sig

Percobaan 1 0.406

Percobaan 2 0.406

Pada uji statistik dengan menggunakan uji Kruskal Wallis, pada tabel 4

terlihat bahwa dari hasil perlakuan madu hutan sumbawa terhadap Escherichia

coli yang diujikan memiliki nilai signifikansi yang lebih besar dari 0.05 yaitu

31

0.406. berdasarkan hasil tersebut bahwa tidak terdapat perbedaan hasil perlakuan

pemberian madu hutan sumbawa terhadap bakteri Escherichia coli. hal ini

dikarenakan beberapa hal yaitu kurangnya sampel untuk melakukan penelitian ini,

perbedaan zona hambat yang terjadi antara setiap konsentrasi madu yang

membentuk zona hambat hanya sedikit zona hambatnya yang berbeda hanya

sedikit.

4.2. Pembahasan

Pada penelitian yang telah dilakukan Warsito, dkk (2001) yaitu madu sebagai

antibakteri terhadap Staphylococcus aureus menunjukan bahwa madu dengan

konsentrasi 1% dan 2,5% belum menunjukan hambatan pada media pertumbuhan

sedangkan madu dengan konsentrasi 5%, 10%, 25%, 50% menunjukan diameter

zona hambatan berturut-turut 22,8; 26,9; 28,8; 28,7 mm. Pada penelitian lain yang

telah dilakukan Tasiah, dkk (2002) pada madu dengan konsentrasi 5%, 10%,

15%, 20%, 25% dan 30% bahwa madu mempunyai daya hambat pada bakteri

Staphylococcus aureus yang dapat dilihat dari zona hambat berturut-turut 0; 1; 1;

1; 2; 3 mm. sementara itu penelitian yang telah dilakukan Cooper, dkk (1999)

menunjukan hasil bahwa madu hutan dan madu campuran memiliki daya hambat

pada bakteri Staphylococcus aureus.

Pada penelitian yang telah dilakukan Lilis, dkk (2004) pemberian madu

terhadap berbagai jenis bakteri patogen, salah satunya adalah bakteri Escherichia

coli juga menunjukan hasil madu memiliki kemampuan daya hambat minimal

pada bakteri Escherichia coli yaitu pada konsentrasi madu 20%. Pada penelitian

lain yang telah dilakukan Ruakyo, dkk (2000) dengan pemberian madu terhadap

bakteri Escherichia coli pada konsentrasi 25% dan 50% menunjukan hasil berupa

daya hambat sebesar 5 mm dan 8 mm dan disimpulkan madu mempunyai manfaat

sebagai antibakteri.

Pada penelitian yang telah saya lakukan melihat efektivitas madu terhadap

bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli dengan konsentrasi yang

lebih pekat lagi yaitu dengan konsentrasi madu 25%, 50%, 75%, 100%. Pada uji

dengan konsentrasi tersebut didapatkan daya hambat madu terhadap

32

Staphylococcus aureus sebagai berikut 8 mm, 9 mm, 10 mm, 11 mm dan pada

Escherichia coli mendapatkan hasil zona hambat berturut- turut 7 mm, 9 mm, 10

mm, 11 mm. Dari hasil tersebut didapatkan pertambahan konsentrasi madu sejalan

dengan zona hambat bakteri. Zona hambat yang terbentuk ini merupakan salah

satu bukti bahwa madu memiliki sifat antibakteri yaitu kandungan hidrogen

peroksida, pH yang rendah dan aktivitas air yang rendah (Ika puspitasari, 2007).

Madu memiliki aktivitas sebagai antibakteri atau antimikroba karena madu

mempunyai osmolaritas yang tinggi yang mampu menarik air, madu memiliki pH

yang rendah yaitu madu memiliki pH asam yakni berkisar 3,2-4,5. Keasaman pH

yang rendah ini merupakan penghambat yang efektif terhadap pertumbuhan

bakteri. Madu memiliki aktivitas air yang rendah sebesar 0,562-0,62. Secara

umum bakteri tidak akan tumbuh pada media yang memiliki aktivitas air yang

rendah. Selain itu juga madu memiliki fungsi sebagai antibakteri karena dapat

menghambat pertumbuhan mikroorganisme melalui senyawa hidrogen peroksida

yang dihasilkan sehingga bakteri sulit untuk berkembang. (Ika puspitasari, 2007).

Pada penelitian daya hambat madu terhadap Escherichia coli didaptkan daya

hambat yang lebih kecil dibandingkan dengan Staphylococcus aureus pada

konsentrasi 25%. Hal ini sesuai dengan penelitian yang telah dilakukan Lilis, dkk

(2004) mendapatkan konsentrasi madu yang lebih kecil 20% juga mempunyai

daya hambat yang kecil. Hal ini dipengaruhi stuktur dinding sel yang dimiliki oleh

masing-masing bakteri berbeda. Bakteri Staphylococcus aureus merupakan

bakteri Gram positif yang memiliki struktur dinding sel yang relatif sederhana

dibandingkan dengan bakteri Gram negatif (Bibiana, 1992). Escherichia coli

adalah bakteri Gram negatif yang memiliki struktur dinding sel yang lebih

kompleks dan berlapis tiga, yaitu lapisan luar yang berupa lipoprotein, lapisan

tengah yang berupa peptidoglikan yang tebal dan lapisan dalam lipopolisakarida

(Pelczar, 1988). Struktur dinding sel bakteri Gram positif yang lebih sederhana

tersebut memudahkan senyawa antibakteri untuk masuk ke dalam sel dan

menemukan sasaran untuk bekerja. Sedangkan dinding sel yang kompleks

menimbulkan hambatan bagi senyawa bioaktif seperti madu untuk menembus

membran sel bakteri, sehingga Escherichia coli kurang peka terhadap senyawa

33

bioaktif tersebut, hal ini dapat dilihat dari perbedaan lebar zona hambat antara

bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Tetapi pada hasil penelitian

ini dengan konsentrasi lain (50%, 75% dan 100%) tidak terdapat perbedaan zona

hambat yang terbentuk antara bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia

coli. Hal ini kemungkinan karena tekhnik yang digunakan kurang tepat,

kandungan madu yang memiliki sifat sebagai antibakteri yang terdapat di madu

tersebut belum optimal.

Pada penelitian yang telah saya lakukan didapatkan hasil zona hambat 7-11

mm, menurut klasifikasi Greenwood tahun 1995 membagi berdasarkan luas zona

hambat yang terbentuk terhadap respon daya hambat bakteri, maka hasil

penelitian ini termasuk ke dalam golongan daya hambat yang lemah.

Pada penelitian ini setelah dilakukan uji statistik, didapatkan bahwa tidak ada

pengaruh yang signifikan pemberian madu terhadap bakteri Staphylococcus

aureus dan Escherichia coli. Hal ini mungkin disebabkan oleh beragam faktor

salah satunya karena konsentrasi madu yang digunakan hanya 4 konsentrasi dan

dilakukan secara duplo. Untuk penelitian lebih lanjut sebaiknya dilakukan dengan

5 konsentrasi dengan konsentrasi yang lebih rendah dan dengan 3 kali

pengulangan.

34

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1. KESIMPULAN

Berdasarkan hasil pembahasan terhadap hasil penelitian yang

diperoleh, dapat diambil kesimpulan sebagai berikut :

1. Pengaruh konsentrasi madu 25%, 50%, 75% dan 100% terhadap

bakteri Staphylococcus aureus menghasilkan zona hambat sebesar

8; 9; 10; 11 mm.

2. Pengaruh konsentrasi madu 25%, 50%, 75% dan 100% terhadap

bakteri Escherichia coli menghasilkan zona hambat sebesar 7; 9;

10; 11 mm.

3. Pengaruh pemberian konsentrasi madu terhadap Staphylococcus

aureus (Gram positif) memiliki zona hambat yang sama dengan

Escherichia coli (Gram negatif)

4. Hasil uji statistik dengan Kruskal wallis tidak terdapat perbedaan

yang nyata pemberian madu hutan sumbawa terhadap

Staphylococcus aureus dan pada Escherichia coli.

5.2. SARAN

1. Perlu dilakukan penambahan sampel dan pengulangan

2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan menggunakan

berbagai jenis macam madu ataupun dengan jenis bakteri lainnya.

35

DAFTAR PUSTAKA

Anonim, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, Jakarta: Departemen Kesehatan RI

Banq dkk, 2003, The effect of dilution on the rate of hydrogen peroxide production in honey

and its implications for wound healing, J Altern Complement Med. 9(2):267-73,

http://www.ncbi.nlm.nih.g ov, diakses tanggal 12 Juli 2009.

Cooper , R.A et al. 2007. Journal of the royal society of medicine. Antibacterial activity of

honey against strains of stapylococcus aureus from infected wounda

French VM, Cooper RA, Molan PC. 2005. Journal of The Antibacterial of Honey Against

Coagulase- Negative Staphylococci. Oxfordjournal.

http://jac.oxfordjournals.org/cgi/content/full/56/1/228 diakses tanggal 01 november 2010

Hendri W, Sani Ep, Yani L. 2008. Uji Aktivitas Antibakteri Madu terhadap Bakteri

Staphylococcus aureus. http://hendriapt.wordpress.com/2008/11/14/uji-aktivitas-antibakteri-

madu-terhadap-bakteri-staphylococcus-aureus/. Diakses tanggal 01 november 2010

Jawetz et al. 2008. Mikrobiologi kedokteran. Edisi 23. Jakarta : Salemba medika

Lucyana, Suci.2010. Uji Aktivitas Antimikroba Larutan Madu Kapuk dan Madu Hutan

Terhadap Staphylococcus aureus Secara In Vitro dengan Metode Difusi (Skripsi). Jakarta :

Fakultas Kedokteran Universitas Pembangunan Naional Veteran. 2010

Lucyana, Suci.2009. Uji Aktivitas Antimikroba Larutan Madu dan Gula Pasir Terhadap

Staphylococcus aureus Secara In Vitro dengan Metode Difusi (Skripsi). Jakarta : Fakultas

Kedokteran Universitas Pembangunan Naional Veteran. 2009

Pelczar MJ. 2006. Dasar- asar Mikrobiologi Jilid 2. Jakarta : UI

Puspitasari, Ika. 2007. Rahasia sehat madu. Yogyakarta : B-First (PT.Bentang Pustaka)

Rosita, 2007, Berkat Madu, Penerbit Qanita, Bandung.

Staff Pengajar UI. 1994. Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta

http://hendriapt.wordpress.com/2008/11/14/uji-aktivitas-antibacteri-madu-terhadap-bakteri-staphylococcus-aureus/AL_get%28this,%20%27jour%27,%20%27J%20Altern%20Complement%20Med.%27%29;http://jac.oxfordjournals.org/cgi/content/full/56/1/228http://hendriapt.wordpress.com/2008/11/14/uji-aktivitas-antibakteri-madu-terhadap-bakteri-staphylococcus-aureus/http://hendriapt.wordpress.com/2008/11/14/uji-aktivitas-antibakteri-madu-terhadap-bakteri-staphylococcus-aureus/

36

Soekidjo N. 2005. Metodologi Penelitian Kesehatan. Jakarta: PT. Rineka Cipta

Stroppler, M.C., 2008, Staph Infection (Staphylococcus aureus),

http://www.medicinenet.com/staph_infection/article.html, diakses tanggal 12 Juli 2009.

Suwandi, U., 1999, Peran Media Untuk Identifikasi Mikroba Patogen, Cermin Dunia

Kedokteran No. 124, Grup PT Kalbe Farma, Jakarta

Salam Syamsir, Baequni, Utami dewi. 2006. Modul Metodologi Penelitian. Jakarta : UIN

Jakarta Press

Tonks, A. J., et al. 2003. Honey Stimulates inflammatory cytokine production from

monocytes. Cytokine, 7; 21

Tortora , Funke and case. 2001. Microbiology sventh edition. USA : Addision wesley

longman

Vardi dkk, 1998, Local Application of Honey for Treatment of Neonatal Postoperative

Wound Infection, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9628301, diakses tanggal 17 Mei

2009

WHO. 1999. Infectious Diseases are The Biggest Killer of The Young.

http://www.who.int/infectious-disease-report/index-rpt99.htm diakses tanggal 12 Juli 2009

http://www.medicinenet.com/staph_infection/article.htmlhttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9628301http://www.who.int/infectious-disease-report/index-rpt99.htm

37

37

LAMPIRAN

Gambar 1. Biakan bakteri Staphylococcus aureus di MSA

Gambar 2. Biakan bakteri Escherichia coli di Mc-Conkey agar

38

Gambar 3. MHA dan MSA

Gambar 4. Sediaan Madu Sumbawa

Madu 25 ml diencerkan dengan aquades 75ml

Gambar 5. Larutan madu dengan konsentrasi 25%

39

Madu 50 ml diencerkan dengan aquades 50 ml

Gambar 6. Larutan madu dengan konsentrasi 50%

Gambar 8. Larutan madu dengan konsentrasi 100%

Madu 75 ml diencerkan dengan aquades 25 ml

Gambar 7. Larutan madu dengan konsentrasi 75%

Gambar 9. Larutan Aquades

40

Gambar 10. Perbandingan berbagai konsentrasi larutan madu (25%, 50%, 75%, 100%) dan

aquades sebagai kontrol

Gambar 11. Zona hambatan larutan madu dengan konsentrasi 25% dan 50% terhadap bakteri

Staphylococcus aureus

41

Gambar 12. Zona hambatan larutan madu dengan konsentrasi 75% dan 100% terhadap bakteri

Staphylococcus aureus

Gambar 13. Zona hambatan larutan madu dengan konsentrasi 25% dan 50% terhadap bakteri

Escherichia coli

Gambar 14. Zona hambatan larutan madu dengan konsentrasi 75% dan 100% terhadap bakteri

Escherichia coli

42

43

44

DAFTAR RIWAYAT HIDUP

Nama : Nurul Elliza

Tempat, Tanggal Lahir : Cirebon, 30 Oktober 1990

Jenis Kelamin : Perempuan

Agama : Islam

Kewarganegaraan : Indonesia

Alamat : Jl. Dr. Cipto Mangunkusumo no.111 Rt/Rw 001/011

Pekiringan Kesambi Cirebon 45131

Email : green_lizgelz@yahoo.com

Riwayat Pendidikan :

1. TK Islam Al-Azhar Cirebon ( 1994 1996 )

2. SD Islam Al-azhar Cirebon ( 1996 2002 )

3. SMP Insan Kamil Bogor ( 2002 2005 )

4. SMA Insan Kamil Bogor ( 2005 2007 )