plankton kültürü
TRANSCRIPT
PLPLANANKTKTONONBBİİLGLGİİSSİİ VE KVE KÜÜLTLTÜÜRRÜÜ
Yrd. DoYrd. Doçç. Dr. Edis . Dr. Edis KORUKORUEge Üniversitesi
Su Ürünleri Fakültesi
Yetiştiricilik Bölümü Plankton Kültür Laboratuvarı
Bornova-İzmir
Plankton TanPlankton Tanıımmıı
ve Tarihve Tarihççesiesi
••
PlanktonPlankton; su i; su iççinde yainde yaşşayan ayan öözel hareket organelleri olamayan zel hareket organelleri olamayan veya olsa bile bu organelleri yer deveya olsa bile bu organelleri yer değğiişştirmede aktif olarak tirmede aktif olarak
kullankullanıılamayan, ancak su hareketleriyle pasif olarak yer lamayan, ancak su hareketleriyle pasif olarak yer dedeğğiişştirebilen organizmalar toplulutirebilen organizmalar topluluğğudur. udur.
••
Plankton terimi birden fazla organizmayPlankton terimi birden fazla organizmayıı
kapsayan kapsayan ççooğğul bir ul bir ifadedir.ifadedir.
PlankterPlankter
tek bir tek bir planktonikplanktonik
organizmaya verilen organizmaya verilen
isimdir. Plankton biliminde (isimdir. Plankton biliminde (PlanktonolojiPlanktonoloji) ger) gerççek plankton ek plankton olmayolmayııp, zaman zaman dalgalarp, zaman zaman dalgalarıın etkisiyle dipten koparak su n etkisiyle dipten koparak su
yyüüzeyine zeyine ççııkan, skan, süürrüüklenen bitki parklenen bitki parççacacııklarklarıı
ile nehirlerle gile nehirlerle gööl l veya denizlere taveya denizlere taşışınan bitkiler de nan bitkiler de PseudoplanktonPseudoplankton
(yalanc(yalancıı
plankton) olarak tanplankton) olarak tanıımlanmlanıır. r. ••
Planktonik organizmalar deniz veya gPlanktonik organizmalar deniz veya gööl l ççukurunu dolduran, ukurunu dolduran,
bentik zonu (dibi ibentik zonu (dibi iççeren saha) eren saha) öörten ve trten ve tüüm su km su küütlesini itlesini iççine alan ine alan pelajik bpelajik böölgede yalgede yaşşarlar. arlar.
••
BaBaşşka bir deka bir değğiişşle plankton, pelajik ble plankton, pelajik böölgede zeminle ililgede zeminle ilişşkisi kisi olmadan yaolmadan yaşşayan organizmalarayan organizmalarıın olun oluşşturduturduğğu ve u ve PelagosPelagos
olarak olarak
adlandadlandıırrıılan toplululan topluluğğun pasif hareketlerle yer deun pasif hareketlerle yer değğiişştiren ve tiren ve
hidromedhidromedüüzlerzler
ddışıışında genelde mikroskobik olan canlnda genelde mikroskobik olan canlıı
organizmalardorganizmalardıır. Plankton bu r. Plankton bu öözellikleriyle zellikleriyle PelagosPelagos’’unun
didiğğer canler canlıı organizmalarorganizmalarıı
olan olan NektonNekton’’dan (Cephalopodlar, baldan (Cephalopodlar, balııklar) kolayca klar) kolayca
ayrayrıılabilir. Plankton aynlabilir. Plankton aynıı
zamanda zamanda BenthosBenthos’’uu
(zeminde ya(zeminde yaşşayan, ayan, sabit bsabit böölgede yalgede yaşşayan) oluayan) oluşşturan organizmalarturan organizmalarıın karn karşışıttııddıır.r.
••
1828 y1828 yııllıında ilk defa J. THOMSON basit bir plankton kepnda ilk defa J. THOMSON basit bir plankton kepççesi esi kullanarak deniz suyundan planktonu skullanarak deniz suyundan planktonu süüzmzmüüşşttüür.r.
••
1845 y1845 yııllıında J.Mnda J.MÜÜLLER daha da geliLLER daha da gelişştirditirdiğği plankton i plankton kepkepççesiyle sesiyle süüzdzdüüğğüü
zooplanktonik organizmalar zooplanktonik organizmalar üüzerinde zerinde
ççalalışışarak planktonun biyoloji bilimi iarak planktonun biyoloji bilimi iççinde yer almasinde yer almasıınnıı sasağğlamlamışışttıır.r.
••
1887 y1887 yııllıında HENSEN planktonu tannda HENSEN planktonu tanıımlammlamışışttıır.r.••
ÖÖnceleri sistematik nceleri sistematik ççalalışışmalarmalarıı
iiççeren plankton ile ilgili eren plankton ile ilgili
araaraşşttıırmalar, yrmalar, yüüzyzyııllıın ikinci yarn ikinci yarııssıında bu organizmalarnda bu organizmalarıın ekolojik, n ekolojik, fizyolojik ve anatomik fizyolojik ve anatomik öözelliklerini de kapsamaya bazelliklerini de kapsamaya başşlamlamışışttıır.r.
••
Planktonik organizmalarPlanktonik organizmalarıın biyolojileri ve ekolojilerinin yann biyolojileri ve ekolojilerinin yanıı ssııra yine son zamanlarda yetira yine son zamanlarda yetişştiricilitiriciliğği i üüzerine de zerine de ççalalışışmalar malar
yapyapıılmaktadlmaktadıır. Dr. Düünyadaki nnyadaki nüüfusun hfusun hıızlzlıı
artartışıışıyla birlikte besin yla birlikte besin ihtiyacihtiyacıınnıı
karkarşışılamak ve protein alamak ve protein aççığıığınnıı
kapatmak ikapatmak iççin deniz ve in deniz ve
tatltatlıı
sulardaki su sulardaki su üürrüünleri anleri aşışırrıı
şşekilde avlanmaktadekilde avlanmaktadıır. r. ÇÇaağığımmıızda gelizda gelişşen teknoloji ile birlikte en teknoloji ile birlikte ççevre kirlilievre kirliliğği i sorunlarsorunlarıınnıın artn artışıışı, denizlerin ve i, denizlerin ve içç
sularsularıın kirlenmesi bu sularda n kirlenmesi bu sularda
yayaşşayan organizmalarayan organizmalarıı
etkilemietkilemişş
ve azalmalarve azalmalarıına yol ana yol aççmmışışttıır. r. Bu nedenlerle Bu nedenlerle ççeeşşitli su itli su üürrüünlerin yetinlerin yetişştiricilitiriciliğği yapi yapıılmaya lmaya babaşşlanlanıılmlmışışttıır. Yetir. Yetişştiricilik tiricilik ççalalışışmalarmalarıınnıın ban başışından itibaren ndan itibaren ççeeşşitli safhalaritli safhalarıında bir nda bir ççok plankton tok plankton tüürleri besleyici yem olarak rleri besleyici yem olarak kullankullanıılmaktadlmaktadıır.r.
Planktonun SPlanktonun Sıınnııflandflandıırrıılmaslmasıı
••
Planktonik organizmalar biyolojik ve ekolojik Planktonik organizmalar biyolojik ve ekolojik öözelliklerine zelliklerine ggööre sre sıınnııflandflandıırrıılmlmışışlardlardıır.r.
A. Biyolojik A. Biyolojik ÖÖzelliklerine Gzelliklerine Gööre Sre SıınnııflandflandıırmarmaFitoplankton:Fitoplankton:
Bitkisel plankton olup, klorofil taBitkisel plankton olup, klorofil taşışıyan basit yan basit
yapyapııya sahip tek veya ya sahip tek veya ççok hok hüücreli canlcreli canlıılardlardıır. Tek bar. Tek başışına na yayaşşayan (Soliter) veya koloniler oluayan (Soliter) veya koloniler oluşşturan bu alg grubu su turan bu alg grubu su hareketleriyle pasif olarak yer dehareketleriyle pasif olarak yer değğiişştirir.tirir.Zooplankton:Zooplankton:
Hayvansal planktondur. Hayat devirlerindeki Hayvansal planktondur. Hayat devirlerindeki
serbest yserbest yüüzme safhalarzme safhalarıına gna gööre Holoplankton ve re Holoplankton ve
Meroplankton olarak ikiye ayrMeroplankton olarak ikiye ayrııllıır.r.
HoloplanktonHoloplankton::
TTüüm yam yaşşamlaramlarıı
boyunca devamlboyunca devamlıı
pelajik bpelajik böölgede lgede plankton plankton öözellizelliğği gi göösteren organizmalardsteren organizmalardıır.r.
Meroplankton:Meroplankton:
YaYaşşam evrelerinin ilk safhalaram evrelerinin ilk safhalarıında plankton olan nda plankton olan daha sonralardaha sonralarıı
ise bentik ve nekton ise bentik ve nekton öözellizelliğğindeki canlindeki canlıılardlardıır.r.
B. BB. Büüyyüüklklüüklerine Gklerine Gööre Sre Sıınnııflandflandıırmarma
Planktonik organizmalarPlanktonik organizmalarıın boylarn boylarıı
MedMedüüsler harisler hariçç
tutulursa tutulursa genellikle genellikle ççok kok küçüüçük boyludur. k boyludur. ÖÖzellikle fitoplanktonik tzellikle fitoplanktonik tüürler rler mikron veya milimetre ile mikron veya milimetre ile ööllçüçüllüür.r.Planktonik organizmalarPlanktonik organizmalarıın boylarn boylarıına gna gööre sre sıınnııflandflandıırrıılmaslmasıında nda araaraşşttıırrııccıılar lar ççeeşşitli itli ööllçüçü
aralaralııklarklarıı
öönerminermişşlerdir. lerdir.
Bunlardan en yaygBunlardan en yaygıın olan ve basit olarak ifade edilen n olan ve basit olarak ifade edilen MARGALEFMARGALEF (1967)(1967)’’ıınn
ssıınnııflandflandıırrıılmaslmasıı
esas alesas alıınmnmışışttıır.r.
SSıınnııflandflandıırmarma BoyutlarBoyutlar OrganizmalarOrganizmalar
UltraplanktonUltraplankton 5 5 µµ Bakteri, mikroflagellatBakteri, mikroflagellat
NannoplanktonNannoplankton 5 5 --
50 50 µµ Chlorococcales, DiatomophyceaeChlorococcales, DiatomophyceaeCyanophyceae, CoccolithophoridCyanophyceae, Coccolithophorid
MikroplanktonMikroplankton 50 50 ––
500 500 µµ DinofalgellatDinofalgellat
MesoplanktonMesoplankton 0,5 0,5 ––
5 mm5 mm CopepodaCopepoda
MakroplanktonMakroplankton 5 5 ––
50 mm50 mm50 mm50 mm
Sagitta, EuphasiaSagitta, EuphasiaBBüüyyüük Medk Medüüzlerzler
MegaloplanktonMegaloplankton 5 5 ––
50 cm50 cm ClupediaClupedia
Planktonun boyutlarına göre sınıflandırılması
(MARGALEF, 1967)
C. C. ŞŞekillerine Gekillerine Gööre Sre Sıınnııflandflandıırmarma
••
Planktonik canlPlanktonik canlıılar pelajik hayata uyum salar pelajik hayata uyum sağğlamak ilamak iççin in kazandkazandııklarklarıı
öözel zel şşekillere gekillere gööre re ddöört gruptart grupta
incelenir.incelenir.
DiskoplanktonDiskoplankton::
VVüücutlarcutlarıı
paraparaşşüüt veya disk t veya disk şşeklinde olan eklinde olan organizmalardorganizmalardıır. r. ÖÖrnek, fitoplanktonik organizmalardan rnek, fitoplanktonik organizmalardan Plaubtoniella, Stephanodiscus, CoscinodiscusPlaubtoniella, Stephanodiscus, Coscinodiscus, zooplankton , zooplankton organizmalardan Coelenterata torganizmalardan Coelenterata tüürleri ve bazrleri ve bazıı
medmedüüzler.zler.
RabdoplanktomRabdoplanktom::
VVüücutlarcutlarıı
ççubuk ubuk şşeklinde uzayan eklinde uzayan organizmalardorganizmalardıır. r. CeratiumCeratium, , SynedraSynedra, , NitzchiaNitzchia, , AsterionellaAsterionella gibi gibi bitkisel organizmalar ile bitkisel organizmalar ile OstracodOstracod’’lardanlardan
ConchoeciaConchoecia ConchoeciaConchoecia, ,
AmphipodAmphipod’’lardanlardan
RhabdosomaRhabdosoma, , CephalopodCephalopod’’lardanlardan
DoratopsisDoratopsis öörnek olarak verilebilir.rnek olarak verilebilir.
FizoplanktonFizoplankton::
VVüücutlarcutlarıı
balon veya kbalon veya küüre re şşeklinde olan eklinde olan organizmalardorganizmalardıır. r. ÖÖrnek rnek NoctilucaNoctiluca miliarismiliaris ve bazve bazıı
medmedüüzler.zler.
KetoplanktonKetoplankton::
VVüücutlarcutlarıı
uzamuzamışış, kol veya diken , kol veya diken şşeklinde eklinde uzantuzantıılarlarıı
olan organizmalardolan organizmalardıır. Bazr. Bazıı
DiatomeaDiatomea’’larlar
((ChaetocerosChaetoceros) ) ForaminiferForaminifer
((GlobigerinaGlobigerina bulloidesbulloides)), , AcanthairaAcanthaira
((AcanthometraAcanthometra elasticaelastica) t) tüürleri rleri öörnek olarak rnek olarak
verilebilirverilebilir
D. YaD. Yaşşadadııklarklarıı
Ortama GOrtama Gööre Sre Sıınnııflandflandıırmarma
Planktonik organizmalar deniz ve iPlanktonik organizmalar deniz ve içç
sularda bulunusularda bulunuşşuna guna gööre re gruplandgruplandıırrııldldığıığında; nda; LimnoplanktonLimnoplankton
(G(Gööllerde bulunan plankton), llerde bulunan plankton),
HelioplanktonHelioplankton
(Denizlerde bulunan plankton), (Denizlerde bulunan plankton), RheoplanktonRheoplankton (Akarsularda buluna plankton), (Akarsularda buluna plankton), KrenoplanktonKrenoplankton
(Kaynak sular(Kaynak sularıında nda
bulunan plankton), bulunan plankton), HeleoplanktonHeleoplankton
(G(Göölclcüüklerde bulunan klerde bulunan plankton) olarak adlandplankton) olarak adlandıırrııllıır. r.
E. Horizontal DaE. Horizontal Dağığıllışışlarlarıına Gna Gööre Sre SıınnııflandflandıırmarmaSu derinliSu derinliğğinin az olduinin az olduğğu ku kııyyııya yakya yakıın bn böölgelerden itibaren 200 m lgelerden itibaren 200 m derinliderinliğğe kadar olan kesimlerde bulunan planktonik organizmalar e kadar olan kesimlerde bulunan planktonik organizmalar Neritik Planktonu oluNeritik Planktonu oluşştururlar. Bu grup organizmalartururlar. Bu grup organizmalarıın bn büüyyüük k ççooğğunluunluğğu Meroplanktonik canlu Meroplanktonik canlıılardlardıır. Oseanik plankton olarak r. Oseanik plankton olarak isimlendirilen 200 m derinlikte, sahilden uzakta yaisimlendirilen 200 m derinlikte, sahilden uzakta yaşşayan aayan aççıık deniz k deniz planktonu ise Holoplanktondur.planktonu ise Holoplanktondur.
E. Vertikal DaE. Vertikal Dağığıllıımlarmlarıına Gna Gööre Sre Sıınnııflandflandıırmarma
••
Planktonun su iPlanktonun su iççindeki vertikal daindeki vertikal dağığıllışıışına gna gööre sre sıınnııflandflandıırrıılmaslmasıı deniz ortamdeniz ortamıınnıın ekolojik n ekolojik öözellikleri de dikkate alzellikleri de dikkate alıınarak yapnarak yapııllıır.r.
EpiplanktonEpiplankton: : YYüüzey sularzey sularıından itibaren 50ndan itibaren 50––80 m. derinli80 m. derinliğğe e kadar bulunan planktonik canlkadar bulunan planktonik canlıılar.lar.MesoplanktonMesoplankton: : 5050--80 m.80 m.’’den 200 m. derinliden 200 m. derinliğğe kadar rastlanan e kadar rastlanan planktonik canlplanktonik canlıılar.lar.InfraplanktonInfraplankton: : 200200––600 m. derinliklerinde ya600 m. derinliklerinde yaşşayan planktonik ayan planktonik canlcanlıılardlardıır.r.BathyplanktonBathyplankton: : 600600––2.500 m. derinlikte rastlanan planktonik 2.500 m. derinlikte rastlanan planktonik
canlcanlıılar.lar.AbissoplanktonAbissoplankton: : 2.500 m.2.500 m.’’den daha derinlerde bulunan den daha derinlerde bulunan
planktonik canlplanktonik canlıılar.lar.HadoplanktonHadoplankton: : Dip planktonu olup, zemine yakDip planktonu olup, zemine yakıın bn böölgede lgede yayaşşayan canlayan canlıılardlardıır.r.
Denizel ortamın ekolojik yönden sınıflandırılması
(PERCIER,1967’in ÖZEL, 1992).
G. Orijinlerine GG. Orijinlerine Gööre Sre Sıınnııflandflandıırmarma
Bir akuatik habitatBir akuatik habitatıın yerli planktonu n yerli planktonu AutogenetikAutogenetik
planktonplankton, , akuatik akuatik ortamortamıın devamln devamlıı
planktonu olmayplanktonu olmayııp akarsularla tap akarsularla taşışınnııp karp karışışan an
organizmalar ise organizmalar ise AllogenetikAllogenetik
planktonplankton
olarak isimlendirilir. olarak isimlendirilir.
H. Populasyonu OluH. Populasyonu Oluşşturan Tturan Tüürlerin Durumuna Grlerin Durumuna Göörere
HAECKEL (1992)HAECKEL (1992)’’in sin sıınnııflandflandıırmasrmasıında plankton populasyonunda nda plankton populasyonunda ttüürlerin sayrlerin sayıılarlarıına gna gööre plankton 4 gruba ayrre plankton 4 gruba ayrııllıır.r.
Monotonus PlanktonMonotonus Plankton: : Plankton populasyonunda organizmalarPlankton populasyonunda organizmalarıın % 75n % 75’’i i aynaynıı
ttüüre ait bireylerdir.re ait bireylerdir.
Privalent PlanktonPrivalent Plankton: : Plankton populasyonunda bireylerin % 50Plankton populasyonunda bireylerin % 50’’si aynsi aynıı ttüüre aittir.re aittir.
Polimiktik PlanktonPolimiktik Plankton: : Plankton populasyonunda yaklaPlankton populasyonunda yaklaşışık aynk aynıı
saysayıılarda larda birey ibirey iççeren birden fazla teren birden fazla tüür bulunur.r bulunur.Planktomiktik PlanktonPlanktomiktik Plankton: : Dominant tDominant tüür bulunmayan, r bulunmayan, ççok sayok sayııda tda tüür r olan plankton populasyonudur.olan plankton populasyonudur.
Planktonun ToplanmasPlanktonun Toplanmasıı, Tespiti ve Miktar, Tespiti ve Miktarıınnıın Tayinin Tayini
Fitoplanktonun ToplanmasFitoplanktonun Toplanmasıı: : Fitoplankton toplama yFitoplankton toplama yööntemleri, ntemleri, taksonomik envanter olutaksonomik envanter oluşşturmak iturmak iççin yapin yapıılan kalitatif lan kalitatif ççalalışışmalar ile malar ile biyomasbiyomasıı
bulmaya yarayan kantitatif arabulmaya yarayan kantitatif araşşttıırmalarda farklrmalarda farklıı
şşekiller ekiller
ggööstermektedir. stermektedir. ÇÇalalışışmanmanıın amacn amacıına gna gööre re ççeeşşitli itli öörnekleme yrnekleme yööntemleri ntemleri uygulanuygulanıır.r.
Kalitatif Analiz Kalitatif Analiz İİççin in ÖÖrnek Toplama: rnek Toplama: Plankton kepPlankton kepççeleriyle eleriyle yapyapıılmaktadlmaktadıır.r.
Ucu musluklu Kepçe
KepçeKollektör
••
GGööl, gl, göölclcüük ve nehirlerde kk ve nehirlerde kııyyııdan dan öörnek alrnek alıımlarmlarıında plankton nda plankton kepkepççesi gesi gööllüün mn müümkmküün olan en uzak kn olan en uzak kıısmsmıına dona doğğru fru fıırlatrlatııllıır. Su r. Su iiççinde tamamen batmamasinde tamamen batmamasıına ve ina ve iççindekilerin boindekilerin boşşalmamasalmamasıına na dikkat edilerek yavadikkat edilerek yavaşşçça a ççekilir. Bu iekilir. Bu işşleme filenin ileme filenin iççinde inde organizmalardan oluorganizmalardan oluşşan 4 veya 5 cman 4 veya 5 cm33
yoyoğğun kitle toplanun kitle toplanııncaya ncaya
kadar devam edilir.kadar devam edilir.••
Derinlerden Derinlerden öörnek almak irnek almak iççin file aynin file aynıı
şşekilde en uzak yere doekilde en uzak yere doğğru ru
ffıırlatrlatııllıır. Belirli bir derinlir. Belirli bir derinliğğe kadar batmamase kadar batmamasıı
sasağğlanlanıır. Dibe r. Dibe ççarpmadan, dikkatlice arpmadan, dikkatlice ççekilir. Kepekilir. Kepççenin ienin iççindeki toplanan indeki toplanan
plankton bir kap iplankton bir kap iççine boine boşşaltaltııllıır. Kepr. Kepççede organizma kalmayacak ede organizma kalmayacak şşekilde temizlenir ve gekilde temizlenir ve gööl suyuyla yl suyuyla yııkankanıır. Laboratuara dr. Laboratuara döönnüüşşte te kepkepççe tekrar tatle tekrar tatlıı
su ile ysu ile yııkankanıır ve ipleri ar ve ipleri aççıık bir k bir şşekilde kurumaya ekilde kurumaya
bbıırakrakııllıır. r.
Kantitatif Analiz Kantitatif Analiz İİççin in ÖÖrnek Toplamarnek Toplama
••
Kantitatif Kantitatif öörnek alrnek alıımlarmlarıında amanda amaçç, incelenen ortamda di, incelenen ortamda diğğer er organizmalarorganizmalarıın besinini ten besinini teşşkil eden total planktonu bulmak veya kil eden total planktonu bulmak veya belirli hacimde albelirli hacimde alıınan su nan su öörnerneğğinde planktonu oluinde planktonu oluşşturan turan ççeeşşitli itli gruplargruplarıın hacimsel den hacimsel değğerini, miktarerini, miktarıınnıı
ve ve evolusyonunuevolusyonunu
saptamaktsaptamaktıır.r.••
Kantitatif araKantitatif araşşttıırmalarda muhtelif derinliklerinden belirli rmalarda muhtelif derinliklerinden belirli hacimlerde su hacimlerde su öörnekleri almak irnekleri almak iççin in öözel olarak hazzel olarak hazıırlanmrlanmışış
öörnekleme rnekleme şşiişşelerinde kullanelerinde kullanııllıır. r. ÖÖrnekleme rnekleme şşiişşeleri eleri ççeeşşitlidir. itlidir. MeyerMeyer, , NansenNansen, , MecabolierMecabolier, N.I.O., Van , N.I.O., Van DornDorn
ve ve UniversalUniversal
su su
öörnekleyicisi gibi. rnekleyicisi gibi. ••
NansenNansen
gibi ters dgibi ters döönebilen nebilen şşiişşelerde mesajcelerde mesajcıı, , şşiişşeye eye ççarptarptığıığında nda
üüst ust uççtaki ktaki kııskacskacıın serbest kalmasn serbest kalmasıınnıı
sasağğlayarak layarak şşilenin 180 0 ilenin 180 0 ddöönmesine sebep olur. Bu ani dnmesine sebep olur. Bu ani döönme her iki unme her iki uççtaki kapaklartaki kapaklarıın n kapanmaskapanmasıınnıı
sasağğlar. Blar. Bööylece istenilen derinlikte belli hacimde su ylece istenilen derinlikte belli hacimde su
öörnerneğği ali alıınabilir.nabilir.
Meyer
Şişesi
Von
Dorn
şişesi
Nansen
ŞişesiAllen
Bottle
B. Zooplanktonun ToplanmasB. Zooplanktonun Toplanmasıı
••
Zooplanktonun toplanmasZooplanktonun toplanmasıında plankton kepnda plankton kepççeleri ve eleri ve öörnekleme rnekleme şşiişşelerini yanelerini yanıı
ssııra farklra farklıı
aletlerden de yararlanaletlerden de yararlanııllıır. Her alet r. Her alet
toplanacak organizmantoplanacak organizmanıın bn büüyyüüklklüüğğüüne, dine, diğğer er öözelliklerine ve zelliklerine ve ççalalışışma ma şşekline gekline gööre sere seççilir.ilir.
••
Zooplanktonun toplanmasZooplanktonun toplanmasıında dnda döört farklrt farklıı
tipte su tipte su öörnekleme aleti rnekleme aleti kullankullanııllıır;r;––
AlAlççak hak hıızla plankton szla plankton süüzmede kullanzmede kullanıılan aletler,lan aletler,
––
YYüüksek hksek hıızla plankton szla plankton süüzmede kullanzmede kullanıılan aletler,lan aletler,––
Suyu pompa ile toplaySuyu pompa ile toplayııp sp süüzen aletler,zen aletler,
––
ÖÖzel kullanzel kullanıımlar imlar iççin yapin yapıılan toplama aletleri.lan toplama aletleri.
AlAlççak Hak Hıızla Plankton Szla Plankton Süüzmede Kullanzmede Kullanıılan Aletlerlan Aletler••
Bu aletler plankton kepBu aletler plankton kepççeleridir. Beleridir. Büüyyüüklklüüklerini araklerini araşşttıırrııccıılar, lar, ççalalışışmanmanıın aman amaççlarlarıına ve mevcut teknik imkanlara gna ve mevcut teknik imkanlara gööre ayarlarlar. re ayarlarlar. KullanKullanıılan plankton bezlerinin glan plankton bezlerinin gööz az aççııklklığıığı
50 50 µµ
ile 1 mm arasile 1 mm arasıında nda
dedeğğiişşir. Naylondan yapir. Naylondan yapıılmlmışış
olan plankton bezlerinin uluslar arasolan plankton bezlerinin uluslar arasıı kabul edilmikabul edilmişş
29 farkl29 farklıı
ggööz az aççııklklığıığı
bulunur ve bunlar 0000 ile 25 bulunur ve bunlar 0000 ile 25
arasarasıında denda değğiişşen numaralar ile kodlanen numaralar ile kodlanıır.r.••
Zooplankton kepZooplankton kepççelerin elerin ççapapıı
oldukoldukçça genia genişş
olup 30 cm ile 2 m olup 30 cm ile 2 m
arasarasıında denda değğiişşir. Kepir. Kepççe konik, silindirimsi konik veya e konik, silindirimsi konik veya ovoidovoid
şşekilli ekilli olup, uzunluolup, uzunluğğu u ççap aap aççııklklığıığından 2 5 defa daha fazladndan 2 5 defa daha fazladıır. Kepr. Kepççenin enin alt kalt kıısmsmıında toplaynda toplayııccıı
kollektkollektöörr
bulunur. Bu kap metalik veya bulunur. Bu kap metalik veya
plastik olabilir.plastik olabilir.KollektKollektöörrüünn
pencere pencere şşeklindeki aeklindeki aççııklklııklarklarıı
ssüüzmeyi zmeyi sasağğlayan plankton bezi ile layan plankton bezi ile öörtrtüüllüür.r.
Discovery
Tipi Kollektör
Tregouboff
tipi Kollektör
Plankton bezi göz açıklığı
ve numaraları
••
BazBazıı
kepkepççelerin yalnelerin yalnıızca alt zca alt kkıısmsmıı
ssüüzzüüccüü
nitelikte, nitelikte, üüst st
kkııssıımlarmlarıı
ise koruyucu ise koruyucu öörtrtüü niteliniteliğğindedir.indedir.HensenHensen’’inin
yumurta kepyumurta kepççesi gibi esi gibi öön tarafa n tarafa ilave edilen silave edilen süüzme zme öözellizelliğği i olmayan keten ve dayanolmayan keten ve dayanııklklıı
bir bir
maddeden yapmaddeden yapıılmlmışış
konik konik şşekilli kekilli kııssıım gelen suyun m gelen suyu
n
miktarmiktarıınnıın arttn arttıırrıılmaslmasıınnıı
sasağğlar.lar.
••
KepKepççenin senin süüzme oranzme oranıınnıın n hassasiyetini artthassasiyetini arttıırmak irmak iççin, in, ssüüzme torbaszme torbasıınnıın n öön tarafn tarafıına, na, aynaynıı
ggööz az aççııklklııklarklarıına ve na ve
kapanma durumlarkapanma durumlarıına gna gööre re birbirinden farklbirbirinden farklııllııklar gklar göösterir. sterir. YapYapıılan deneyler glan deneyler gööstermistermişştir tir ki plankton kepki plankton kepççesi ne kadar esi ne kadar hhıızla zla ççekilirse toplanan ekilirse toplanan organizmalar o nispette telef organizmalar o nispette telef olmaktadolmaktadıır. Ayrr. Ayrııca kepca kepççe e bezinin gbezinin gööz az aççııklklığıığı
akakıım m şşekli ekli
üüzerinde rol oynamaktadzerinde rol oynamaktadıır.r.
••
Horizontal Horizontal ÇÇekim:ekim:
YYüüzeye paralel olarak yapzeye paralel olarak yapıılan lan ççekimdir. ekimdir. Horizontal Horizontal ççekim sekim sıırasrasıında kepnda kepççeyi istenilen derinlikte eyi istenilen derinlikte tutabilmek itutabilmek iççin kepin kepççenin gergi iplerinin birleenin gergi iplerinin birleşştitiğği halkaya i halkaya genellikle kepgenellikle kepççenin benin büüyyüüklklüüğğüüne veya gne veya gööz az aççııklklığıığına bana bağğllıı
olarak deolarak değğiişşen aen ağığırlrlııklar takklar takııllıır. Bu r. Bu ççekimde derinlik, ekimde derinlik, ççekme ekme ipinin uzunluipinin uzunluğğu ile ipin yu ile ipin yüüzeyle yaptzeyle yaptığıığı
aaççııdan yararlandan yararlanıılarak larak
hesaplanhesaplanıır. r. ÇÇekim zamanekim zamanıı
prensip olarak 10 dakikadprensip olarak 10 dakikadıır. r. ••
VertikalVertikal
ÇÇekim: ekim: Zeminden yZeminden yüüzey kadar olan su kzey kadar olan su küütlesinin veya tlesinin veya
belirli metrelerdeki su sbelirli metrelerdeki su süütununun dikey olarak stununun dikey olarak süüzzüülmesidir. lmesidir. ÇÇekim hekim hıızzıı
kepkepççenin genin gööz az aççııklklığıığına gna gööre ayarlanre ayarlanıır. Bu r. Bu ççekimde ekimde
kepkepççenin batmasenin batmasıı
iiççin genellikle kolektin genellikle kolektööre bir are bir ağığırlrlıık bak bağğlanlanıır. r. Bu tip plankton Bu tip plankton ççekimlerinde WPekimlerinde WP--’’, , NansenNansen
kepkepççesi kullanesi kullanııllıır.r.
••
OblikOblik
Plankton Plankton ÇÇekimleri: ekimleri: ise ise horizontal ve horizontal ve vertikalvertikal
ççekimlerin ekimlerin
birlebirleşşimi imi şşeklindedir. Bu eklindedir. Bu ççekim ekim planktonca fakir olan gplanktonca fakir olan gööllerde daha llerde daha fazla sfazla süüzme imkanzme imkanıı
sasağğlamak ilamak iççin in
kullankullanııllıır.r.••
VertikalVertikal
veya horizontal plankton veya horizontal plankton
ççekimlerinde plankton kepekimlerinde plankton kepççesinin esinin aaççıık olmask olmasıı
ve belli derinlikte ve belli derinlikte
kapanmaskapanmasıı
gerekir.Bu tipe gerekir.Bu tipe öörnek rnek olarak verilebilen olarak verilebilen NansenNansen
kepkepççesi esi
istenildiistenildiğği derinlikte ve zamanda i derinlikte ve zamanda kepkepççeyi saran ince halat yardeyi saran ince halat yardıımmııyla yla bbüüzzüülebilir.Keplebilir.Kepççeyi taeyi taşışıyan halat yan halat mesajcmesajcıı
adadıı
verilen bir sistem verilen bir sistem
yardyardıımmııyla kepyla kepççeden ayreden ayrııllıır. Br. Bööylece ylece kepkepççe yalne yalnıızca bzca büüzzüüccüü
halat halat
yardyardıımmııyla yukaryla yukarııya ya ççekilerek alekilerek alıınnıır. r.
Nansen
kepçesinin açık ve kapalı
şekli
••
JudayJuday--BogorovBogorov
Tipi KepTipi Kepççeler:eler:Bu kepBu kepççe tipi Akdeniz Uluslar arase tipi Akdeniz Uluslar arasıı
Bilim Komisyonu (C.I.E.S.M.) Bilim Komisyonu (C.I.E.S.M.) taraftarafıından standart tip olarak ndan standart tip olarak öönerilminerilmişştir. Keptir. Kepççenin genin gööz z aaççııklklığıığı
0.0675 0.0675 mmmm’’dirdir. Kep. Kepççenin enin
kapanmaskapanmasıı
mesajcmesajcıı
adadıı
verilen bir verilen bir sistem yarsistem yarıımmııyla yapyla yapıılmaktadlmaktadıır. r. Bu KepBu Kepççe 2000 e 2000 mm’’yeye
kadar kadar
vertikalvertikal
ççekimler ile denizin ekimler ile denizin üüst st kesimlerinde horizontal kesimlerinde horizontal ççekimler ekimler yapyapıılabilir.labilir.
Judgay-Borogow
tipi plankton kepçesi
WP 2 Tipi Plankton KepWP 2 Tipi Plankton KepççesiesiBu kepBu kepççe e öözellikle zellikle mesoplanktonun toplanmasmesoplanktonun toplanmasıında nda kullankullanııllıır. UNESCO tarafr. UNESCO tarafıından ndan 200 200 mm’’dede
horizontal olarak horizontal olarak
zooplankton toplamak izooplankton toplamak iççin bu arain bu araçç geligelişştirilmitirilmişştir. Keptir. Kepççenin aenin ağğ
ggööz z
aaççııllığıığı
200 200 µµ
dirdir. 200 . 200 µµ
ile 10 mm ile 10 mm bbüüyyüüklklüükteki organizmalarkteki organizmalarıı
toplamak itoplamak iççin kullanin kullanıılmaktadlmaktadıır.r.
••
WP 3 Tipi Plankton KepWP 3 Tipi Plankton KepççesiesiWP3 kepWP3 kepççesi silindirikesi silindirik--konik konik
olup, 1 mm golup, 1 mm gööz az aççııklklığıığında, nda, 133 cm 133 cm ççapapıında, 2.81 m nda, 2.81 m boyunda bboyunda büüyyüük bir ak bir ağğddıır. Balr. Balıık k yumurtalaryumurtalarıınnıın ve bazn ve bazıı
makro makro
planktonik organizmalarplanktonik organizmalarıın n yakalanmasyakalanmasıında kullannda kullanııllıır. r. WP2WP2’’nin gelinin gelişştirilmesiyle tirilmesiyle oluoluşşturulmuturulmuşştur.tur. WP3 tipi plankton kepçesi
ClarkeClarke--BumpusBumpus
Tipi Plankton Tipi Plankton KepKepççesiesi12.70 cm 12.70 cm ççapapıında, 60.69 cm nda, 60.69 cm uzunluuzunluğğunda,0.27 mm gunda,0.27 mm gööz z aaççııklklığıığında olan konik plankton nda olan konik plankton kepkepççesinin metal olan esinin metal olan öön kn kıısmsmıında nda mesajcmesajcıı
ile ile ççalalışışan bir aan bir aççmama--
kapama sistemi mevcuttur.Metal kapama sistemi mevcuttur.Metal disk adisk ağığın an ağğzzıınnıı
kapar. Bu kapak kapar. Bu kapak
istenilen derinlikte yukaristenilen derinlikte yukarııdan dan ggöönderilen mesajcnderilen mesajcıı
vasvasııtastasııyla yla
ddöönme sistemiyle anme sistemiyle aççııllıır ve istenen r ve istenen derinlikte derinlikte öörnek alrnek alıınnıır.r.
YYüüksek Hksek Hıızda Plankton Toplama Arazda Plankton Toplama Araççlarlarıı
••
HHıızlzlıı
hareket eden zooplankton ve hareket yetenehareket eden zooplankton ve hareket yeteneğği artmi artmışış
balbalıık k larvalarlarvalarıınnıın yakalanmasn yakalanmasıı
iiççin hin hıızlzlıı
plankton plankton ççekme araekme araççlarlarıı
kullankullanııllıır. GULF III dir. GULF III diğğer keper kepççelerden farklelerden farklıı
bir plankton toplama bir plankton toplama aracaracııddıır. Sr. Süüzme torbaszme torbasıı
ddışıışında metal bir muhafaza knda metal bir muhafaza kıısmsmıınnıın n
bulunmasbulunmasııddıır. Saatte 6 mil hr. Saatte 6 mil hıızla zla ççekilebilir. Bu kepekilebilir. Bu kepççenin olumsuz enin olumsuz taraftarafıı
organizmalarorganizmalarıın n ççekim esnasekim esnasıında parnda parççalanmasalanmasıı
ve ve
bozulmasbozulmasııddıır. Basr. Basıınnçç
nedeniyle olan bozulmaynedeniyle olan bozulmayıı
öönlemek inlemek iççin in ““JetJet-- NetNet””
adadııyla anyla anıılan keplan kepççeler gelieler gelişştirilmitirilmişştir. Bu keptir. Bu kepççelerde suyun elerde suyun
basbasııncncıınnıı
azaltazaltııccıı
bböölmeler glmeler gööze ze ççarpar. Keparpar. Kepççeye giren ile eye giren ile ççııkan su kan su miktarmiktarıı
aynaynıı
olacak olacak şşekilde dekilde düüzenlenmizenlenmişştir.tir.
Yüksek hızda plankton toplama araçları
A. Gulf
III, B. Jet-Net
••
YYüüksek hksek hıızda plankton zda plankton ççekme araekme araççlarlarıı
genellikle torpil genellikle torpil şşeklindedir. eklindedir. Bu araBu araççlarda bir indikatlarda bir indikatöör adr adıı
verilen verilen HardyHardy’’ıınn
plankton plankton
belirleyicisidir. Bu arabelirleyicisidir. Bu araçç
ilk defa Kuzey Denizilk defa Kuzey Deniz’’indeki Ringa indeki Ringa balbalııklarklarıınnıın avcn avcııllığıığında kullannda kullanıılmlmışışttıır. Bu amar. Bu amaççla ringa balla ringa balııklarklarıınnıın n ggııdasdasıınnıı
oluoluşşturan zooplanktonik (turan zooplanktonik (Calanus, SagittaCalanus, Sagitta) organizmalar) organizmalarıın n
dadağığıllıımmıı
kontrol edilerek balkontrol edilerek balııklarklarıın varln varlığıığı, bollu, bolluğğu tespit edilmiu tespit edilmişştir.tir.
Hardy
modeli plankton toplama aracı
••
SSüüratli plankton yratli plankton yüüzdzdüürrüüccüülerine en iyi lerine en iyi öörnek rnek HardyHardy’’inin
plankton plankton kaydedicisidir. Torpil kaydedicisidir. Torpil şşeklinde 1 m uzunlueklinde 1 m uzunluğğunda 161.3 cm2 olan unda 161.3 cm2 olan bu arabu araçç
ddüüzenli bir zenli bir şşekilde horizontal olarak ekilde horizontal olarak ççekilerek otomatik ekilerek otomatik
olarak zooplankton toplanolarak zooplankton toplanıır.r.
Hardy’in
plankton kaydedicisi
HPN-Hamburg Plankton NetModification
of the
Isaacs-Kidd-Midwater
Trawl
-
IKMT -
for
collection
of larger
quantities
of plankton. Overall
length
10 m, mesh size 500 microns.
Bongo
NetDouble
net ring of stainless
steel, 60 cm diameter
each, with
Nylon
webbings
and
zip
fasteners. Two
Nets
of 250 cm length, standard
mesh size 500 microns. TwoPVC net buckets
with
distance
rod.
Accessories
(not included): V-Fin Depressor
and
FlowMeter.
Suyu Pompa Suyu Pompa İİle Toplayle Toplayııp Sp Süüzen Aletlerzen Aletler
••
DoDoğğal ortamdan planktonu toplamak ial ortamdan planktonu toplamak iççin tekneye terlein tekneye terleşştirilmitirilmişş
bir bir motopomp sistemlerinden yararlanmotopomp sistemlerinden yararlanııllıır. Pompayla alr. Pompayla alıınan su bir veya nan su bir veya birbirççok, gok, gööz az aççııklklığıığı
farklfarklıı
olan plankton kepolan plankton kepççelerine aktarelerine aktarııllıır. Bu r. Bu
şşekilde farklekilde farklıı
plankton kepplankton kepççeleri kullanmak suretiyle seleri kullanmak suretiyle süüzzüülen len plankton bplankton büüyyüüklklüüğğüüne gne gööre ayrre ayrıılmlmışış
olur.olur.
••
Bu sistemde pompayla Bu sistemde pompayla ççekilen su sisteminde plankton ezilmeden, ekilen su sisteminde plankton ezilmeden, bozulmadan toplanmbozulmadan toplanmışış
olduolduğğu gibi bu sistemin olumlu yu gibi bu sistemin olumlu yöönnüü
bbüüyyüük k
hacimlerinde su pompalanarak ( 2000 hacimlerinde su pompalanarak ( 2000 ––
3000 litre; 7000 3000 litre; 7000 ltlt//dkdk) ) ssüüzzüülebilir.lebilir.
••
Bu yBu yööntemle ntemle öözellikle zellikle EuphausiaceaeEuphausiaceae üüyeleri, Copepodyeleri, Copepod’’lar ve ballar ve balıık k larvalarlarvalarıı
toplantoplanıır. Pompanr. Pompanıın ayaklarn ayaklarıı
ve borunun uzunluve borunun uzunluğğu u
ççooğğunlukla 100 m. derinliklerinde sunlukla 100 m. derinliklerinde sıınnıırlrlııddıır.r.
ÖÖzel Kullanzel Kullanıımlar mlar İİççin Yapin Yapıılan Toplama Aletlerilan Toplama Aletleri
Makroplankton KepMakroplankton Kepççeleri: eleri: MakroplanktonikMakroplanktonik
organizmalarorganizmalarıı
toplamak toplamak iiççin ain ağğ
da diyebileceda diyebileceğğimiz bimiz büüyyüük kepk kepççeler kullaneler kullanııllıır. Bu aletlerin 4 r. Bu aletlerin 4
modeli vardmodeli vardıır. Horizontal olarak kullanr. Horizontal olarak kullanıılan bu alet, 1000 lan bu alet, 1000 mm’’yiyi
aaşşan an derinliklere indirebilir.derinliklere indirebilir.
Makroplankton filesi (I.K.M.T)
MotodaMotoda
KepKepççeleri:eleri:
Bu Bu kepkepççe, e, ççok sayok sayııda da basit kepbasit kepççelerin elerin uzunlamasuzunlamasıına seri na seri olarak yan yana olarak yan yana getirilmesiyle getirilmesiyle oluoluşşturulmuturulmuşştur. tur. Muhtelif Muhtelif derinliklerden seri derinliklerden seri öörnek alrnek alıımlarmlarıında nda kullankullanııllıır.r.
Motoda
fileleri
HyponeustonHyponeuston
KepKepççelerieleriNeustonikNeustonik
organizmalarorganizmalarıı
(suyun havayla temas etti(suyun havayla temas ettiğği su filmi i su film
i
sathsathıındaki organizmalar) toplamak indaki organizmalar) toplamak iççin in şşamandamandııralara baralara bağğlanmlanmışış aağığız az aççııklklığıığı
dikddikdöörtgen olan keprtgen olan kepççelerden yararlanelerden yararlanııllıır. r. SavilovSavilov
kepkepççesi bu aletlere esi bu aletlere öörnek olarak verilebilir.rnek olarak verilebilir.
Savilov
Kepçesi
Plankton TespitiPlankton Tespiti
••
Plankton Plankton öörnekleri sistematik tayinlerin daha iyi yaprnekleri sistematik tayinlerin daha iyi yapıılabilmesi ilabilmesi iççin in canlcanlıı
olarak incelenmelidir. Kamolarak incelenmelidir. Kamççııssıı, , setalarsetalarıı
olan planktonik formlar olan planktonik formlar
ancak canlancak canlıı
materyal olduklarmateryal olduklarıında tayin edilebilirler. Bunu inda tayin edilebilirler. Bunu iççin in plankton plankton ççekiminden hemen sonra organizmalarekiminden hemen sonra organizmalarıın 250 n 250 cccc, , ½½
ltlt
veya 1 veya 1
ltlt’’liklik
hacimlerde cam kavanozlara alhacimlerde cam kavanozlara alıınarak dnarak düüşşüük sk sııcaklcaklıık ve k ve ışıışıkta kta saklanmassaklanmasıı
gerekir. Plankton yogerekir. Plankton yoğğunluunluğğu fazla ise u fazla ise öörnerneğği uzun zaman i uzun zaman
canlcanlıı
tutmak gtutmak güçüçleleşşebilir. Plankton ebilir. Plankton öörnekleri genellikle hemen rnekleri genellikle hemen dedeğğerlendirilemedierlendirilemediğğinden % 4 inden % 4 ––
5 5 liklik
formaldehit veya potasyum formaldehit veya potasyum
iyoduriyodur
gibi gibi fiksatiflerfiksatifler
kullankullanıılarak saklanlarak saklanıır. r. DiatomeaDiatomea’’lerinlerin
tespiti ve tespiti ve incelenmesinde kabuk yapincelenmesinde kabuk yapııssıınnıın, n, ççeper seper süüslerinin daha iyi gslerinin daha iyi göörrüüllüüp, p, sistematik tayinlerin yapsistematik tayinlerin yapıılabilmesine organik materyal engel telabilmesine organik materyal engel teşşkil kil ettiettiğğinde yakma (inde yakma (grillagegrillage) y) yööntemi uygulanntemi uygulanıır. Sitolojik r. Sitolojik ççalalışışmalarda malarda hhüücrenin farklcrenin farklıı
kkııssıımlarmlarıınnıı
daha iyi belirleyebilmek amacdaha iyi belirleyebilmek amacııyla da yla da lugollugol, ,
metilen mavisi, nmetilen mavisi, nöötr ve tr ve karmenkarmen
kkıırmrmıızzııssıı
gibi reaktifler gibi reaktifler kullankullanıılmaktadlmaktadıır.r.
Plankton MiktarPlankton Miktarıınnıın Tayinin Tayini
Sucul ortamdan toplanan planktonik organizmalarSucul ortamdan toplanan planktonik organizmalarıın miktar tayinleri n miktar tayinleri ortam verimliliortam verimliliğğini belirlediini belirlediğğinden inden öönemlidir. Planktonda nemlidir. Planktonda üürrüün, n, belirli alanda ve belirli sbelirli alanda ve belirli süüre ire iççinde elde edilecek plankton inde elde edilecek plankton kküütlesinin yada organik maddenin atlesinin yada organik maddenin ağığırlrlığıığı
olarak da tanolarak da tanıımlanmlanıır. r.
Plankton aPlankton ağığırlrlığıığınnıı, hacmini, total plankton miktar, hacmini, total plankton miktarıınnıı
tayin etmede tayin etmede ççeeşşitli yitli yööntemler kullanntemler kullanııllıır.r.
Plankton dePlankton değğerlendirilmesinde, erlendirilmesinde, öözellikle dozellikle doğğal ortamdan toplanan al ortamdan toplanan plankton plankton öörneklerinin yorneklerinin yoğğunlaunlaşşttıırrıılmaslmasıı
yyööntemleri uygulanntemleri uygulanıır. r.
YoYoğğunlaunlaşşttıırma rma üçüç
şşeklide olureklide olur––
SantrifSantrifüüjj
––
SSüüzme (zme (FiltrasyonFiltrasyon))––
ÇöÇöktktüürme (rme (SedimentasyonSedimentasyon))
––
Sayma YSayma Yööntemintemi
••
SantrafSantrafüüjj: : Belirli hacimde alBelirli hacimde alıınan su nan su öörnerneğği laboratuarda i laboratuarda
dakikada 1500 dakikada 1500 ––
2000 tur yapan santrif2000 tur yapan santrifüüj aletinde 1.5 j aletinde 1.5 ––
2 2
dakika santrifdakika santrifüüj edilir. Bj edilir. Bööylece plankton tylece plankton tüüppüün dibine n dibine çöçöker. ker. ÜÜst kst kıısmsmıındaki su dikkatlice pipet yarndaki su dikkatlice pipet yarıımmııyla yla ççekilir. Tekilir. Tüüpteki pteki çöçökmeyi kolaylakmeyi kolaylaşşttıırmak irmak iççin az miktarda in az miktarda çöçöktktüürrüüccüü
((koagkoagüülantlant) kat) katıılabilir.Bu ylabilir.Bu yööntemin kolaylntemin kolaylığıığı
klasik santrifklasik santrifüüj j aletleriyle veya baletleriyle veya büüyyüük hacimlerde alk hacimlerde alıınan sularda nan sularda ççalalışışma ma imkanimkanıı
veren sveren süürekli santrifrekli santrifüüjle yojle yoğğunlaunlaşşttıırrıılan canllan canlıı
materyal materyal
üüzerinde anzerinde anıında hnda hıızlzlıı
bir bir şşekilde ekilde ççalalışışabilmesidir.abilmesidir.
••
SSüüzme: zme: SSüüzme yzme yööntemi ntemi OseanografiOseanografi’’dede
ççok kullanok kullanııllıır. r. Fitoplanktonun biyokimyasal analizlerinde (Klorofil a, ATP, Fitoplanktonun biyokimyasal analizlerinde (Klorofil a, ATP, ProtidProtid, , lipidlipid, primer prod, primer prodüüksiyon vb. ) ksiyon vb. ) ççok kullanok kullanııllıır. Total r. Total plankton hacmini bulmak iplankton hacmini bulmak iççin in filtrasyondanfiltrasyondan
faydalanfaydalanııllıır. r.
••
ÇöÇöktktüürme (Sedimantasyon): rme (Sedimantasyon): Plankton kepPlankton kepççeleriyle seleriyle süüzzüülen len plankton veya belirli hacimlerde alplankton veya belirli hacimlerde alıınan su nan su öörnekleri dereceli rnekleri dereceli kaplara konularak 48 saat kaplara konularak 48 saat çöçökeltmeye bkeltmeye bıırakrakııllıır. r. ÇöÇöken ken planktonun dereceli silindir kaptan hacmi planktonun dereceli silindir kaptan hacmi ööllçüçüllüür. r.
Utermohl
sedimentasyon
silindirleri
Sayma YSayma Yööntemi: ntemi: saysayıım lamlarm lamlarıınnıın pek n pek ççok tipleri mevcuttur. Bu ok tipleri mevcuttur. Bu sayma kamalarsayma kamalarıı
1 ml (1 ml (SedgwickSedgwick--RafterRafter
saysayıım kamerasm kamerasıı) ile 10 ) ile 10 --44
ml (Thomas sayml (Thomas sayıım kamerasm kamerasıı) aras) arasıında denda değğiişşebilir. ebilir. ÖÖzellikle zellikle nannoplanktonnannoplankton
saysayıımlarmlarıında kullannda kullanıılan bu sayma aralan bu sayma araççlarlarıından en ndan en
ççok kullanok kullanıılan lan NauberNauber
hemasitometresihemasitometresi’’dirdir. . ••
Mikroplankton, Mikroplankton, mikrozooplanktonmikrozooplankton
saysayıımlarmlarıı
iiççin 5 * 10 cm in 5 * 10 cm
boyutunda olan boyutunda olan DolfusDolfus--cuvecuve
sayma kamerassayma kamerasıı
kullankullanııllıır. r. ••
Daha bDaha büüyyüük boyutlark boyutlarıındaki zooplanktonun sayndaki zooplanktonun sayıımlarmlarıında ise nda ise SedgwickSedgwick--RafterRafter
sayma kamerassayma kamerasıı
veya Couting veya Couting traytray
sayma tepsisi sayma tepsisi
kullankullanııllıır. r. ••
CourtingCourting
traytray
sayma tepsisi bsayma tepsisi büüyyüük planktonik organizmalark planktonik organizmalarıın n
saysayıımmıında kullannda kullanııllıır.r.••
SaySayıım kameralarm kameralarıınnıın bulunmadn bulunmadığıığı
yerlerde uygulanan tek damla yerlerde uygulanan tek damla
yyööntemi, hacmi belirli olan bir damlayntemi, hacmi belirli olan bir damlayıı
lam ve lamel araslam ve lamel arasıına alna alııp, p, normal sayma sistemi olan normal sayma sistemi olan ışıışık mikroskobunda saymaktk mikroskobunda saymaktıır. Sar. Sağğllııklklıı
sonusonuçç
almak ialmak iççin bu yin bu yööntemde oldukntemde oldukçça a ççok damla sayok damla sayııp p ortalamasortalamasıınnıı
almak gerekir.almak gerekir.
Sayma AraSayma Araççlarlarıı SaySayıılan Alanlan Alanıın Boyutlarn BoyutlarııUzunluk*En*Derinlik (mm)Uzunluk*En*Derinlik (mm)
Hacim (ml)Hacim (ml)
ThomaThoma 1 * 1 * 0,11 * 1 * 0,1 10 10 --44
AgasseAgasse
LafontLafont 1 * 1 * 0,11 * 1 * 0,1 1010--44
NeubaeurNeubaeur 3 * 3 * 0,13 * 3 * 0,1 9.10 9.10 --44
MallassezMallassez 2,5 * 2 * 0,22,5 * 2 * 0,2 10 10 --33
FushsFushs
RosenthalRosenthal 4 * 4 * 0,24 * 4 * 0,2 32.10 32.10 --44
AgasseAgasse
LafontLafont
BB 5 * 4 * 0,55 * 4 * 0,5 10 10 --22
LamaurLamaur 10 * 10 * 0,410 * 10 * 0,4 4. 10 4. 10 --22
NageotteNageotte 10 * 10 * 0,510 * 10 * 0,5 5. 10 5. 10 --22
KamarlarKamarlarPalmeyPalmey
MaloneyMaloney ØØ
17,9 * 0,417,9 * 0,4 10 10 --11
SedgwickSedgwick--RafterRafter 50 * 20 * 150 * 20 * 1 11AgasseAgasse
LafontLafont 1 * 1 * 0,11 * 1 * 0,1 10 10 --44
Plankton Sayma araçlarının özellikleri (JACQUES, 1978)
FitoplanktonFitoplankton
••
Fitoplanktonik OrganizmalarFitoplanktonik Organizmalarıı
Genel Genel ÖÖzellikleri:zellikleri:
Fitoplankton, Fitoplankton, hhüücrelerinde klorofil bulunan, basit yapcrelerinde klorofil bulunan, basit yapııya sahip, tek veya ya sahip, tek veya ççok ok hhüücreli olabilen, creli olabilen, ççooğğunluunluğğu mikroskobik bu mikroskobik büüyyüüklklüüklerde, boyutlarklerde, boyutlarıı
birkabirkaçç
µµ
ile birkaile birkaçç
yyüüz mikron arasz mikron arasıında denda değğiişşen bitkisel en bitkisel organizmalardorganizmalardıır. Ototrof olan bu canlr. Ototrof olan bu canlıılar, lar, ışıışıkta fotosentez yolu ile kta fotosentez yolu ile karbondioksit ve inorganik maddelerden ykarbondioksit ve inorganik maddelerden yüüksek enerji potansiyeline ksek enerji potansiyeline sahip organik bilesahip organik bileşşikleri yaparlar. Adeta protein ikleri yaparlar. Adeta protein üüreten fabrikalardreten fabrikalardıır r ((bioreaktbioreaktöörr). Bu fonksiyonlar). Bu fonksiyonlarıı
nedeniyle fitoplanktonik canlnedeniyle fitoplanktonik canlıılar ilar içç
sularda (gsularda (gööl, akarsu, lagl, akarsu, lagüün ve barajlarda) ve denizlerdeki hayvanlarn ve barajlarda) ve denizlerdeki hayvanlarıın n beslenmesinde beslenmesinde ççok ok öönemli olup sucul ortamda tnemli olup sucul ortamda tüüm m üüretimin retimin temelidir. temelidir.
••
Algler (Algler (latincelatince: : algaalga) veya ) veya fikofitlerfikofitler
(Yunanca: (Yunanca: phykosphykos, alg, , alg, phytonphyton: : bitki) bitki sistematibitki) bitki sistematiğğinde einde eğğrelti otlarrelti otlarıı, kara yosunlar, kara yosunlarıı, mantarlar ve , mantarlar ve linklerle birlikte Yunanca linklerle birlikte Yunanca kryptoskryptos: gizli, : gizli, gamosgamos: evlilik : evlilik kelimelerinden olukelimelerinden oluşşan ve Tan ve Tüürkrkççe e ççiiççeksiz bitkiler olarak ifade eksiz bitkiler olarak ifade ettiettiğğimiz imiz KriptogamaeKriptogamae
grubunda yer algrubunda yer alıırlar.rlar.
••
Algleri inceleyen bilim dalAlgleri inceleyen bilim dalıı
algolojialgoloji
bu konuda bu konuda ççalalışışan an araaraşşttıırrııccıılarda larda algologalgolog
olarak bir olarak bir ççok ok üülkede isimlendirilmekle lkede isimlendirilmekle
birlikte birlikte algolojialgoloji
terimi aterimi ağğrrıı
bilim olarak tbilim olarak tııpta da kullanpta da kullanıılmaktadlmaktadıır. r. AlgosAlgos
aağğrrıı
ve sve sıızzııyyıı
ifade etmektedir. Bu nedenli gifade etmektedir. Bu nedenli güünnüümmüüzde zde
algolojialgoloji
yerine yerine FikolojiFikoloji, , algologalgolog
yerine yerine FikologFikolog
tantanıımlarmlarıı
daha daha uygun guygun göörrüülmlmüüşşttüür.r.
••
KKöök, gk, göövde ve yaprak farklvde ve yaprak farklıılalaşşmasmasıı
ggööstermeyen bitkiler stermeyen bitkiler (Thallophyta) grubunda yer alan algler h(Thallophyta) grubunda yer alan algler hüücre yapcre yapıılarlarıı
ve ive iççerdikleri erdikleri
pigment maddelerine gpigment maddelerine gööre gruplara ayrre gruplara ayrııllııp, uluslar arasp, uluslar arasıı nomenklatnomenklatüürr
kurallarkurallarıına gna gööre isimlendirilirler. re isimlendirilirler.
••
Fitoplanktonik algler genellikle Fitoplanktonik algler genellikle ççok kok küçüüçük boyutlarda olduk boyutlarda olduğğundan undan mikromikro--algler olarak da isimlendirilirler. Bu algler denizlerde algler olarak da isimlendirilirler. Bu algler denizlerde ççok ok bbüüyyüük kitleler halinde bulunduklark kitleler halinde bulunduklarıı
gibi tatlgibi tatlıı
sularda da sularda da ççok fazla ok fazla
geligelişşim gim göösterirler. Tatlsterirler. Tatlıı
su fitoplanktonunun su fitoplanktonunun ççeeşşitliliitliliğği i denizlerdekinden fazladdenizlerdekinden fazladıır. r.
Prokaryotik OrganizmalarProkaryotik Organizmalar CyanophytaCyanophyta
ThallophytaThallophyta(Pyhcophyta)(Pyhcophyta)
(Mycophyta)(Mycophyta)
ChlorophytaChlorophytaRhodophytaRhodophytaPyrrhophytaPyrrhophytaChromophytaChromophytaEuglenophytaEuglenophytaMyxomycophytaMyxomycophytaEumycophytaEumycophyta
Eukaryotik Organizmalar Lichen Eukaryotik Organizmalar Lichen (Cormophyta)(Cormophyta)(Archegonatia)(Archegonatia)(Spermaphyta)(Spermaphyta)
BryophytaBryophytaPteridophytaPteridophytaGymnospermaGymnospermaAngiospremaAngiosprema
Alglerin Bitkiler alemindeki yeri
Taksonomik Sıra Bitiş
KodlarıDivizyo
Divisio
(Bölüm) ----phyta
Classis (Sınıf) ----phyceaeSub Classis (Alt sınıf) ----phycidaeOrdo
(Takım) ----ales
Sub Ordo
(Alt takım) ----ineaeFamilia
(Aile) ----aceae
Sub Familia
(Alt aile) ----oideaeTribü
(Soy) ----aea
Genus (cins)Sub-genus Alt cinsSection KısımSpecies TürSub-species Alt TürVariete ÇeşitForma Şekil
Uluslar arası
nomenklatür
kurallarına göre alglerinsınıflandırılmasında
bitiş
kodları
Morfolojik Morfolojik ÖÖzelliklerzellikler
••
Fitoplanktonik alglerin morfolojileri Fitoplanktonik alglerin morfolojileri ççok ok ççeeşşitlilik gitlilik göösterir. Bu sterir. Bu organizmalar tek horganizmalar tek hüücreliden, creliden, kolonialkolonial
forma, ipliksi biforma, ipliksi biççimden imden şşeritsi eritsi
yapraksyapraksıı
ve ave ağğaaççssıı
bibiççimlere kadar farklimlere kadar farklıı
ddışış
ggöörrüünnüüşşlerde lerde olabilirler.olabilirler.
MonoidMonoid
Tip: Tip: HHüücreler genel olarak creler genel olarak solitersoliter
ve hareketli olup, 1,2 veya ve hareketli olup, 1,2 veya 3,4 kam3,4 kamççııllııddıır. Ayrr. Ayrııca ca kontraktilkontraktil
vakuolleri mevcuttur.Hvakuolleri mevcuttur.Hüücre cre ççeperi eperi
ççok ince ve ok ince ve ççııplak olanlarplak olanlarıı
bulundubulunduğğu gibi (Volvocales u gibi (Volvocales üüyeleri) yeleri) ççeperleri kaleperleri kalıın, n, tuniketunike
yapyapııssıında (nda (PhacatusPhacatus) ve ) ve ççeper eper üüzerinde zerinde
dikensi uzantdikensi uzantıılar ve silar ve siğğilimsi ilimsi ççııkkııntntıılarlarıı
olanlarolanlarıı
da (da (TrachelomonasTrachelomonas) ) vardvardıır.r.
••
MonoidMonoid
tipi ayrtipi ayrıı
ayrayrıı
hhüücrelerden veya kolonilerden olucrelerden veya kolonilerden oluşşabilir. abilir. Genellikle kamGenellikle kamççııllıı
hhüücreler koloniler halindedir (creler koloniler halindedir (Eudorina, Eudorina,
Pandorina, VolvoxPandorina, Volvox). Bu tip morfolojik ). Bu tip morfolojik öözellikler zellikler vejetatifvejetatif hhüücrelerde, Cyanophyta, Rhodophyta ve Pheophyta grubu crelerde, Cyanophyta, Rhodophyta ve Pheophyta grubu
üüyelerinde gyelerinde göörrüülmez.lmez.
KokoidKokoid
Tip: Tip: BazBazıı
tek htek hüücreli algler, gerek ayrcreli algler, gerek ayrıı
ayrayrıı
gerekse gerekse kolonialkolonial olsun, olsun, vejetatifvejetatif
olarak bolarak bööllüünmezler. Her hnmezler. Her hüücre cre sporosistesporosiste
ve ve
gametosistegametosiste
ddöönnüüşşüür. Spor veya gamet kr. Spor veya gamet köökenli bu ayrkenli bu ayrıı
ayrayrıı
hhüücreler creler kokoidkokoid
tipi olutipi oluşşturur. Hturur. Hüücreler hareketsizdir, creler hareketsizdir, şşekilleri kekilleri küüreseldir reseldir
((ChlorellaChlorella). Baz). Bazıı
ttüürlerde rlerde sporsporüülasyondanlasyondan
sonra sporlar grup halinde sonra sporlar grup halinde kalarak kalarak senobsenob
olarak adlandolarak adlandıırrıılan koloni olulan koloni oluşştururlar (tururlar (Scenedesmus, Scenedesmus,
Pediastrum, CoelastrumPediastrum, Coelastrum).).PalmelloidPalmelloid
Tip: Tip: HHüücreler kamcreler kamççııssıız ve z ve mmüüsilajsilaj
bir bir öörtrtüü
iiççinde, inde,
hareketsizdir. hareketsizdir. KontraktilKontraktil
vakuolleri mevcuttur (vakuolleri mevcuttur (PalmellaPalmella).).Rhizopodial Tip (Amipsi Rhizopodial Tip (Amipsi HarektliHarektli): ): Rhizopodial formlarda sabit hRhizopodial formlarda sabit hüücre cre
duvarduvarıı
yoktur. yoktur. PlazmikPlazmik
bir dbir dışış
öörtrtüü
oluoluşşturmuturmuşştur (tur (RhizopodiumRhizopodium). ). Amipte olduAmipte olduğğu gibi yalancu gibi yalancıı
ayak verir. Tek farkayak verir. Tek farkıı
plastplastıınn
oluoluşşudur.udur.
İİpliksi Tip: pliksi Tip: Alglerin morfolojik yAlglerin morfolojik yöönnüünden evriminde ikinci anden evriminde ikinci aşşama ipliksi ama ipliksi yapyapııddıır. Bazr. Bazıı
tek htek hüücrelerin ardcrelerin ardışıışık bk bööllüünmesi ile birbirinden nmesi ile birbirinden
ayrayrıılmamaslmamasıı
sonucu ipliksi tipler olusonucu ipliksi tipler oluşşmumuşştur. Htur. Hüücreler bir zincir creler bir zincir şşeklinde gruplandeklinde gruplandıırrıılmlmışışttıır.r.
Algler Algler tallustallus
ipliipliğğinin dallanmaminin dallanmamışış
veya dallanmveya dallanmışış
oluoluşşuna guna gööre re tiplere ayrtiplere ayrııllıır.r.
a)Dallanmama)Dallanmamışış
ipliksi algler: ipliksi algler: Oscillatoria, Phormidium, LygnbyaOscillatoria, Phormidium, Lygnbya gibi alglerde, ipliksi zincir tek sgibi alglerde, ipliksi zincir tek sııralralıı
hhüücreden olucreden oluşşmumuşştur.tur.
b) Dallanmb) Dallanmışış
ipliksi algler: ipliksi algler: 1.1.
Basit dallanmBasit dallanmışış
ipliksi alglere ipliksi alglere öörnek olarak bir rnek olarak bir ççok ok Cyanophyceae Cyanophyceae ttüürleri rleri öörnek verilebilir. rnek verilebilir. Schizothrix, Schizothrix, MastigocladusMastigocladus gibi alglerde dallanma tek ygibi alglerde dallanma tek yöönlnlüüddüür.r.
2.2.
İİlerlemilerlemişş
dallanma gdallanma göösteren ipliksi alglerde ise bazsteren ipliksi alglerde ise bazıı hhüücrelerin yanlara bcrelerin yanlara böölme vermesi sonunda gerlme vermesi sonunda gerççek dallanmek dallanmışış ipliksi tipler ortaya ipliksi tipler ortaya ççııkar.kar.
Planktonik alglerde organizasyon tipleri
2 ve 3:Rhizopodial
tip: Rhizochrysis dofleinnii ve Stephanoporos regularis. 4 ve 5: Kokkoid
tip: Synechocytis
aquatilis ve Cosmarium granatum. 6 ve 7 Kamçılı
tip:
Trachelomonas hispida var coronata ve Mallomonas mirabilis. 8 ve 10 Müsilajlı
koloni: Kirchneriella obesa, Chroococcus limneticus ve Pandorina morum. 11 ve 13 Senop: Tetrastrum heteracanthum, Scenedesmus acuminatis ve Pediastrum clathratum
İpliksi alglerde dallanma şekilleri:
1. Hapalosiphon sp., gerçek dallanma, 2. Scytonema sp., yalancı
dallanma, 3.Mastigocladus sp., V şeklinde dallanma,
4. Tolypothrix sp.,
5. Stigonema minitum,
6. Schizothrix lardaceae
Plankton KPlankton Küültltüürrüü
Fitoplankton KFitoplankton Küültltüürleri: rleri: Sucul ortamlarda organik madde sentezleyen Sucul ortamlarda organik madde sentezleyen temel temel üüreticiler fitoplankton veya mikro alg treticiler fitoplankton veya mikro alg tüürleridir. Mikro algler son rleridir. Mikro algler son derece zengin, karbonhidrat ve derece zengin, karbonhidrat ve öözellikle yazellikle yağğ
asidi iasidi iççerieriğğine sahiptirler. ine sahiptirler.
Besin deBesin değğeri yeri yüüksek olan bu organizmalar sucul ksek olan bu organizmalar sucul kommunitelerkommuniteler
iiççin in makro nutrient, vitamin ve iz elementlerin en makro nutrient, vitamin ve iz elementlerin en öönemli kaynanemli kaynağığıddıırlar. rlar. AynAynıı
zamanda balzamanda balıık ve omurgask ve omurgasıızlarda renklenmenin gelizlarda renklenmenin gelişşmesinde mesinde
gerekli olan temel pigmentleri sagerekli olan temel pigmentleri sağğlarlar. Dolaylarlar. Dolayııssııyla mikro alglerin yla mikro alglerin sucul ortamlarsucul ortamlarıındaki temel organik ndaki temel organik üüreticiler olmalarreticiler olmalarıı, y, yüüksek besin ksek besin dedeğğerine sahip olmalarerine sahip olmalarıı, nutrient d, nutrient dööngngüüssüünde nde öönemli bir role sahip nemli bir role sahip olmalarolmalarıı
bunlarbunlarıın ekolojik, fizyolojik ve biyokimyasal n ekolojik, fizyolojik ve biyokimyasal öözelliklerini zelliklerini
ççalalışışmak imak iççin yeterli nedenlerdir.in yeterli nedenlerdir.İİlk olarak 1890lk olarak 1890’’da da BeijernikBeijernik, , Chlorella Chlorella vulgarisvulgaris ‘‘in in agaragar
üüzerinde zerinde
kolonilerini elde etmikolonilerini elde etmişş, bunu takiben , bunu takiben AllenAllen
ve Nelson 1910ve Nelson 1910’’da bir da bir diatomdiatom
ttüürrüü
olan olan Phaeodactylum tricornutumPhaeodactylum tricornutum’’u izole ederek u izole ederek
kküültltüürlerini yapmrlerini yapmışışlardlardıır.r.
Alg kAlg küültltüür r ççalalışışmalarmalarıında mikrobiyolojik ynda mikrobiyolojik yööntemler gentemler geççerlidir. erlidir. ÇüÇünknküü
temel temel öözellikler bakzellikler bakıımmıından pek ndan pek ççok yok yöönden benzerlikler nden benzerlikler
ggöösterir. Ancak temel algler bsterir. Ancak temel algler büüyyüüme me öözellikleri bakzellikleri bakıımmıından ndan faklfaklııddıır. Daha yavar. Daha yavaşş
bbüüyyüüme hme hıızlarzlarıına sahiptirler ve genellikle na sahiptirler ve genellikle
fotosentetik organizmalar olduklarfotosentetik organizmalar olduklarıından bir ndan bir ışıışık kaynak kaynağığına mutlaka na mutlaka gereksinim duyarlar. gereksinim duyarlar.
AkvakAkvaküültltüürderde
Fitoplanktonun Yeri ve Fitoplanktonun Yeri ve ÖÖnemi: nemi: Denizlerde ve tatlDenizlerde ve tatlıı sularda sularda ssüüspansespanse
maddenin canlmaddenin canlıı
kkıısmsmıınnıı
oluoluşşturan planktonik turan planktonik
organizmalar, kendi baorganizmalar, kendi başşararıına hareket edemeyen, ancak su na hareket edemeyen, ancak su hareketleriyle yer dehareketleriyle yer değğiişştirebilen canltirebilen canlıılardlardıır. Akuatik bir ortamr. Akuatik bir ortamıın n verimliliverimliliğği i üüzerinde zerinde ççok ok öönemli olan bu organizmalar hakknemli olan bu organizmalar hakkıında nda bilgi edinmek ibilgi edinmek iççin, in, ööncelikle ortamncelikle ortamıın plankton kompozisyonunu ve n plankton kompozisyonunu ve bunun bunun üüzerinde etkili faktzerinde etkili faktöörleri saptamak gerekir. Besin zincirinin rleri saptamak gerekir. Besin zincirinin temelini olutemelini oluşşturan bu organizmalarturan bu organizmalarıın verimlilin verimliliğği, besin zincirinin i, besin zincirinin buna babuna bağğllıı
didiğğer halkalarer halkalarıınnıı
etkiler ve daha etkiler ve daha üüst beslenme st beslenme
ddüüzeylerindeki zeylerindeki üüretimin sretimin sıınnıırrıınnıı
belirler.belirler.
Fitoplankton tFitoplankton tüürleri besin rleri besin zinciri izinciri iççinde oynadinde oynadııklarklarıı
bu bu
öönemli rollerinin yannemli rollerinin yanıı
ssııra, ra, akuatik ortamdaki nutrient akuatik ortamdaki nutrient ddööngngüüssüünde anahtar bir role nde anahtar bir role sahiptir. Bunlar amonyak, sahiptir. Bunlar amonyak, üüre, nitrat ve fosfat gibi re, nitrat ve fosfat gibi makro nutrientleri, iz makro nutrientleri, iz elementleri ve bazelementleri ve bazıı
vitaminleri kullanarak vitaminleri kullanarak organik maddeyi oluorganik maddeyi oluşştururlar. tururlar. Bu hBu hüücrelerin crelerin ööllüüp p dekomposedekompose
olmasolmasııyla yla
kimyasal ve organik dkimyasal ve organik dööngngüü devam eder.devam eder.
a)Azot Döngüsü, b) Karbon döngüsü
Gerek doGerek doğğal ortamda gerekse laboratuar koal ortamda gerekse laboratuar koşşullarullarıında knda küültltüürleri rleri yapyapıılan deniz alglerinin ekonomideki lan deniz alglerinin ekonomideki öönemi bnemi büüyyüüktktüür. Bu r. Bu öönem nem onlaronlarıın n ççok ok ççeeşşitli alanlarda kullanitli alanlarda kullanıılabilmesinden ileri gelmektedir; labilmesinden ileri gelmektedir; besin kaynabesin kaynağığı
olarak kullanolarak kullanııllıırlar, yanrlar, yanıı
ssııra arra arııtma tma üünitelerinde ve nitelerinde ve
AkvakAkvaküültltüür sistemlerinde en r sistemlerinde en öönemli basamanemli basamağığı
teteşşkil ederler. kil ederler.
Temel fitoplankton gruplarTemel fitoplankton gruplarıından alndan alıınan nan öörnek trnek tüürlerin krlerin küültltüürleri rleri yapyapıılarak, blarak, büüyyüümeleri meleri üüzerine farklzerine farklıı
fiziksel ve kimyasal faktfiziksel ve kimyasal faktöörlerin rlerin
etkilerinin saptanmasetkilerinin saptanmasıı, bu gruplar, bu gruplarıın don doğğal al populasyonlarpopulasyonlarıınnıınn bbüüyyüümeleri imeleri iççin gerekli sin gerekli sııcaklcaklıık, karbondioksit dk, karbondioksit düüzeyi, besin zeyi, besin
kaynakaynağığınnıın kalitesi ve dn kalitesi ve düüzeyi, gzeyi, güüneneşş
ışığıışığınnıın yon yoğğunluk ve sunluk ve süüresi gibi resi gibi kritik faktkritik faktöörlerin saptanmasrlerin saptanmasıı
aaççııssıından da ndan da öönemlidir. Bu nedenle nemlidir. Bu nedenle
belirli kobelirli koşşullar altullar altıında bir tnda bir tüürrüün performansn performansıınnıı
daha daha öönceden nceden kestirebilmek ikestirebilmek iççin belirlenen optimum koin belirlenen optimum koşşullar altullar altıındaki potansiyelini ndaki potansiyelini bilmek gereklidir. Bu bilgiler, temel fizyolojik, biyokimyasal bilmek gereklidir. Bu bilgiler, temel fizyolojik, biyokimyasal ççalalışışmalarmalarıın den değğerlendirilmesi ve kerlendirilmesi ve küültltüür sistemlerinin dizaynr sistemlerinin dizaynıı, , kurulmaskurulmasıı
ve ive işşletilmesi gibi konularletilmesi gibi konularıın temelini olun temelini oluşşturur.turur.
Yer yYer yüüzzüündeki yndeki yııllllıık toplam net primer k toplam net primer üüretim 1.4*10retim 1.4*101414
kg kuru kg kuru
aağığırlrlııktktıır. Bu miktarr. Bu miktarıın en azn en azıından % 40 gibi ndan % 40 gibi öönemli bir miktarnemli bir miktarıı denizlerdeki fitoplankton tdenizlerdeki fitoplankton tüürleri tarafrleri tarafıından olundan oluşşturulur. Primer turulur. Primer
üüretime katkretime katkııda bulunan denizel fitoplankton tda bulunan denizel fitoplankton tüürleri arasrleri arasıında nda gerek kgerek kııta sahanlta sahanlııklarklarıı
gibi verimli okyanuslargibi verimli okyanuslarıın en verimli n en verimli
yerlerinde gerekse kyerlerinde gerekse kııta sahanlta sahanlııklarklarıı
gibi verimli kgibi verimli kııyyıısal bsal böölgelerde lgelerde en ben büüyyüük katkk katkııyyıı
% 25 gibi bir oranla % 25 gibi bir oranla diatomdiatom
gruplargruplarıı
yapar. Bu yapar. Bu
nedenle nedenle diatomlardiatomlar
karasal ekosistemdeki bkarasal ekosistemdeki büüyyüük orman sahlark orman sahlarııyla yla aynaynıı
kategoriye girer. kategoriye girer. DiatomlarDiatomlar
gerek deniz kgerek deniz küültltüürrüü
ççalalışışmalarmalarıında gereksem deniz nda gereksem deniz ççiftliiftliğğinde anahtar role sahip inde anahtar role sahip organizmalardorganizmalardıır. r.
Fitoplankton KFitoplankton Küültltüürlerinin Tarihrlerinin Tarihççesi: esi: II. DII. Düünya Savanya Savaşışından sonra ndan sonra alglerin yalglerin yığıığın kn küültltüürleriyle ilgili rleriyle ilgili ççalalışışmalarda hedeflenen amamalarda hedeflenen amaçç, , tek htek hüücre proteini (SCP: cre proteini (SCP: SingleSingle
CellCell
Protein) Protein) üüretmekti. Mikro alg retmekti. Mikro alg
kküültltüürleriyle SCP rleriyle SCP üüretiminin dretiminin düünyadaki protein anyadaki protein aççığıığınnıı
kapatacak kapatacak bbüüyyüük bir alternatif olduk bir alternatif olduğğuna inanuna inanııllııyordu. Alglerin yyordu. Alglerin yüüksek ksek protein iprotein iççerieriğği gibi pek i gibi pek ççok avantajok avantajıınnıın yann yanıı
ssııra bazra bazıı
öönemli nemli
dezavantajlardezavantajlarıınnıın da oldun da olduğğu gu göözlemlenmizlemlenmişştir. Bunlar;tir. Bunlar;11--
Tek hTek hüücreli alglerin hasadcreli alglerin hasadıında karnda karşışılalaşışılan glan güçüçllüükler; mikro kler; mikro partikpartiküüllerin ortamdan ayrllerin ortamdan ayrıılmaslmasıı
ve konsantre edilmesindeki ve konsantre edilmesindeki
ggüçüçllüükler.kler.22--
BazBazıı
ttüürlerin kalrlerin kalıın, seln, selüülozik tabiattaki hlozik tabiattaki hüücre duvarlarcre duvarlarıı
insan ve insan ve
hayvan sindirimini ghayvan sindirimini güçüçleleşştiren yaptiren yapııya sahip olmasya sahip olmasıı33--
Ticari aTicari aççııdan besin dan besin üüretimi iretimi iççin gerekli geniin gerekli genişş
kküültltüür sistemleri r sistemleri
oldukoldukçça karmaa karmaşışık ve pahalk ve pahalıı
mmüühendislik dizaynhendislik dizaynıınnıın yapn yapıımmıı
ve ve iişşletme giderlerini gerektirmesi.letme giderlerini gerektirmesi.
Bu tBu tüür dezavantajlarr dezavantajlarıına rana rağğmen insan yamen insan yaşşamamıınnıın vazgen vazgeççilmez besini ilmez besini protein, pahalprotein, pahalıı, kaynaklar, kaynaklarıın yetersiz ve dn yetersiz ve düünyada knyada kııtltlığıığı
ççekilen bir ekilen bir
besin maddesi olmasbesin maddesi olmasıı
mikro alg kmikro alg küültltüürlerini cazip hale getirmirlerini cazip hale getirmişştir.tir.
Gerek AkvakGerek Akvaküültltüür gerekse tek hr gerekse tek hüücreli protein (SCP) elde etme creli protein (SCP) elde etme
amacamacıına yna yöönelik tnelik tüüm km küültltüür uygulamalarr uygulamalarıında temel amanda temel amaçç, fotosentez , fotosentez iişşleminin organik maddeye dleminin organik maddeye döönnüüşşüümmüündeki verimlilindeki verimliliğği maksimuma i maksimuma ulaulaşşttıırmak ve bitkisel organik maddeyi optimum rmak ve bitkisel organik maddeyi optimum şşekilde ekilde üüretmektir. retmektir. BBööyle bir sonucu yyle bir sonucu yüüksek ksek biyomasbiyomas
eldesieldesi
amaamaççlanan blanan büüyyüük k ööllççekli ekli
kküültltüür sistemlerinde bar sistemlerinde başşarabilmek iarabilmek iççin gin güüneneşş
enerjisinden enerjisinden faydalanmak gereklidir. Genifaydalanmak gereklidir. Genişş
ööllççekli alg kekli alg küültltüür sistemlerini r sistemlerini
laboratuar dlaboratuar dışıışında ve geninda ve genişş
alanlarda kurmak zorunludur. Balanlarda kurmak zorunludur. Bööyle alg yle alg kküültltüür sistemleri, r sistemleri, ççevresel koevresel koşşullarullarıından etkilenir ve bu sistemler ndan etkilenir ve bu sistemler biyobiyo--mmüühendislik, ekolojik problemleri de beraberinde getirir. hendislik, ekolojik problemleri de beraberinde getirir. BBüüyyüük sistemlerde kk sistemlerde küültltüürrüün homojen bir n homojen bir şşekilde karekilde karışışttıırrıılmaslmasıı
besleyici tuz (nutrientler) miktarlarbesleyici tuz (nutrientler) miktarlarıınnıın n üüremesi arzu edilen tremesi arzu edilen tüürlere rlere ggööre dre düüzenlenmesi, tzenlenmesi, tüür kompozisyonunun kontrolr kompozisyonunun kontrolüü, karbondioksit , karbondioksit ilavesi, su kaynailavesi, su kaynağığı
ve suyun kalitesi, buharlave suyun kalitesi, buharlaşşmanmanıın kontroln kontrolüü
ve ve
sonusonuçç
üürrüünnüü
elde etmek ielde etmek iççin hin hüücrelerin ayrcrelerin ayrıılmaslmasıı
ve hasat ive hasat işşlemleri lemleri karkarşışılalaşışılan temel problemlerdir. lan temel problemlerdir.
Alglerin KullanAlglerin Kullanıım Alanlarm Alanlarıı::
Mikroskobik alglerin ticari bir mal gibi Mikroskobik alglerin ticari bir mal gibi üüretimleri yaklaretimleri yaklaşışık 40 k 40 yyııldan buyana yapldan buyana yapıılmaktadlmaktadıır. Algal r. Algal üüretim gretim güünnüümmüüzde artzde artıık k bir sanayi kolu haline gelen atbir sanayi kolu haline gelen atıık su ark su arııttıımmıı
ve gve güüneneşş
enerjisinin enerjisinin
biyomasabiyomasa
ddöönnüüşşttüürrüülmesi gibi alanlarda bilinen en etkili ve en lmesi gibi alanlarda bilinen en etkili ve en ekonomik yoldur. Ayrekonomik yoldur. Ayrııca Akvakca Akvaküültltüür amar amaççlarlarıı
ççererççevesinde evesinde
larval larval üüretim yapretim yapıılan tesislerde alg klan tesislerde alg küültltüür r üüniteleri, sistemin niteleri, sistemin kakaççıınnıılmaz ve en lmaz ve en öönemli basamanemli basamağığıddıır. Bu r. Bu üünitedeki banitedeki başşararıı, , kurulan zincirin dikurulan zincirin diğğer halkalarer halkalarıına hemen yansna hemen yansıır. Dir. Diğğer taraftan er taraftan algal algal biyomasbiyomas
bazbazıı
kimyasal maddelerin kimyasal maddelerin üüretiminde, enerji retiminde, enerji
eldesindeeldesinde, gerek insanlar gerekse hayvanlar i, gerek insanlar gerekse hayvanlar iççin protein in protein kaynakaynağığı
olarak da kullanolarak da kullanıılabilirler.labilirler.
İİlk olarak lk olarak ÇÇadad
çöçöllüünde bulunan nde bulunan Spirulina Spirulina , yan, yanıı
ssııra ra Nostoc Nostoc pruniforme, Nostoc commune, Nostoc pruniforme, Nostoc commune, Nostoc verrucosumverrucosum, , Phylloderma sacrum, Oodegonium, Spirogyra, Prasiola Phylloderma sacrum, Oodegonium, Spirogyra, Prasiola juannicajuannica, Prasiola japonica , Prasiola japonica gibi tgibi tüür insanlara tarafr insanlara tarafıından ndan bebeğğeniyle teniyle tüüketilmektedir.ketilmektedir.
KKüültltüürrüü
YapYapıılan Alg Tlan Alg Tüürlerirleri
Günümüzde dünyanın çeşitli yerlerinden izole edilen 40 dan fazla mikro alg türü
intensif
Akvakültür
operasyonlarında saf suşlar
olarak kültürü
yapılmakta ve kullanılmaktadır. Yetiştiriciliği yapılan alg türlerinin büyüklükleri birkaç
mikrometre ile 100 µm
üzerinde
değişir. Akvakültürde
yaygın olarak kullanılan türler diatomlardan
Skeletonema costatum, Thalassiosira
pseudonana, Chaetoceros gracilis, C. calcitrans, flagellatlardan
Isochrysis galbana, Tetraselmis suecica,
Monochrysis lutheri ve Chlorococcaleanlardan
Chlorella spp.
gibi türlerdir.
AkvakAkvaküültltüürderde
canlcanlıı
yem kaynayem kaynağığı
olarak kullanolarak kullanıılan lan BacillariophyceaeBacillariophyceae
ssıınnııffıına ait bazna ait bazıı
alg talg tüürleri rleri
Chaetoceros calcitransSkeletonema costatum
Phaeodactylum tricornutum Nitzchia seriata
AkvakAkvaküültltüürderde
canlcanlıı
yem kaynayem kaynağığı
olarak kullanolarak kullanıılan lan HaptophyceaeHaptophyceae
ssıınnııffıına ait bazna ait bazıı
alg talg tüürlerirleri
Isochrysis galbana Pavlova (Monochrysis) lutheri
AkvakAkvaküültltüürderde
canlcanlıı
yem kaynayem kaynağığı
olarak olarak ççok yaygok yaygıın bir n bir şşekilde kullanekilde kullanıılan lan PrasinophyceaePrasinophyceae
ssıınnııffıından ndan
TetraselmisTetraselmis ((PlatymonasPlatymonas) ) suecicasuecica
Tetraselmis (Platymonas) suecica
AkvakAkvaküültltüürderde
canlcanlıı
yem kaynayem kaynağığı
olarak kullanolarak kullanıılan lan Chlorophyceae sChlorophyceae sıınnııffıına ait bazna ait bazıı
alg talg tüürlerirleri
Dunaliella tertiolectaChlorella pyrenoidosa
Nannochloris spp.
AkvakAkvaküültltüürderde
canlcanlıı
yem kaynayem kaynağığı
olarak kullanolarak kullanıılan lan CyanophyceaeCyanophyceae
ssıınnııffıına ait olan na ait olan SpirulinaSpirulina ttüürlerirleri
Spirulina spp.
AkvakAkvaküültltüürderde
canlcanlıı
yem kaynayem kaynağığı
olarak kullanolarak kullanıılan lan DinophyceaeDinophyceae
ssıınnııffıına ait olan na ait olan GymnodinidumGymnodinidum splendenssplendens
Gymnodinidum splendens
Uygun Fitoplankton TUygun Fitoplankton Tüürrüünnüün Sen Seççimiimi
Tek hTek hüücre proteini ve cre proteini ve akvakakvaküültltüürr
sistemlerinde kullansistemlerinde kullanıılacak lacak alg talg tüürlerin sahip olmasrlerin sahip olmasıı
gereken gereken öözellikler:zellikler:
1.1.
YYüüksek bksek büüyyüüme hme hıızzıına sahip olmasna sahip olmasıı,,2.2.
YYüüksek protein iksek protein iççerieriğğine sahip olmasine sahip olmasıı,,3.3.
Ortam koOrtam koşşullarullarıındaki ani dendaki ani değğiişşimlere karimlere karşışı
direndirenççli olmasli olmasıı,,4.4.
Besleyici deBesleyici değğeri yeri yüüksek, kolayca sindirilebilir ve ksek, kolayca sindirilebilir ve toksiktoksik olamamasolamamasıı..
KKüültltüürle rle İİlgili Temel Kavramlarlgili Temel Kavramlar
1.1.
ÖÖncelikle mikroorganizmanncelikle mikroorganizmanıın yan yaşşamamıı, geli, gelişşmesi ve mesi ve ççooğğalmasalmasıı
iiççin gereken besin maddelerini iin gereken besin maddelerini iççeren keren küültltüür r
ortamortamıı
hazhazıırlanmalrlanmalııddıır. Bu ortamda mikroorganizmalarr. Bu ortamda mikroorganizmalarıın n yayaşşamamıınnıı
ssıınnıırlayan besinlere rlayan besinlere vazgevazgeççilmez besinler ilmez besinler adadıı
verilir. Bunlar verilir. Bunlar mikrobiyalmikrobiyal
kinetikte kinetikte substratsubstrat
olarak kabul olarak kabul edilirler. edilirler.
2.2.
KKüültltüür ortamr ortamıına yani na yani besiyeribesiyeri, , üüretimi amaretimi amaççlanan tlanan tüüre ait re ait canlcanlıı
hhüücrelerinin ilavesine crelerinin ilavesine aaşışılamalama
yada yada ekimekim
denir. Bu denir. Bu
iişşlemin bakteriyolojik tekniklere uygun bir lemin bakteriyolojik tekniklere uygun bir şşekilde, aseptik ekilde, aseptik kokoşşullarda yapullarda yapıılmaslmasıı
gerekmektedir. gerekmektedir.
3.3.
KKüültltüür ortamr ortamıında gelinda gelişşmeyi hmeyi hıızlandzlandıırrııccıı
maddelerin maddelerin bulunmasbulunmasıı, geli, gelişşmeyi engelleyici maddelerinse olmamasmeyi engelleyici maddelerinse olmamasıı
gerekir.gerekir.4.4.
KKüültltüür ortamr ortamıında tnda tüürrüün isten isteğğine uygun olarak optimum ine uygun olarak optimum fiziksel ve kimyasal kofiziksel ve kimyasal koşşullarullarıın olun oluşşturulmasturulmasıı
gerekir.gerekir.
KKüültltüürr
OrtamOrtamıınnıınn
HazHazıırlanmasrlanmasıı
••
Mikro alg hMikro alg hüücrelerinin crelerinin üüreyebilecereyebileceğği ortamlar i ortamlar ççeeşşitli besleyici itli besleyici
tuzlarla zenginletuzlarla zenginleşştirerek haztirerek hazıırlanrlanıır. Kullanr. Kullanıılan kimyasal maddelerin lan kimyasal maddelerin analitik kalitede (ARanalitik kalitede (AR
: : AnaliticalAnalitical
ReagentReagent) olmas) olmasıı
ve stoklarve stoklarıın n
hazhazıırlanmasrlanmasıında saf su ve hatta nda saf su ve hatta distiledistile
su kullansu kullanıımmıı
tercih edilir. tercih edilir. KullanKullanıılan her bir kimyasal maddenin konsantre stoklarlan her bir kimyasal maddenin konsantre stoklarıı
ayrayrıı
ayrayrıı
hazhazıırlanrlanıır. Bu r. Bu öözellikle zellikle ççok dok düüşşüük konsantrasyonlarda madde k konsantrasyonlarda madde
hazhazıırlarken kolaylrlarken kolaylıık sak sağğlar. Hazlar. Hazıırlanan stoklar arlanan stoklar ağğzzıı
kapalkapalıı
olarak olarak
sosoğğukta (+4 ukta (+4 00C) ve karanlC) ve karanlııkta saklanmalkta saklanmalııddıır. Bu ir. Bu işş
iiççin bir buzdolabin bir buzdolabıı veya kveya küçüüçük bit sok bit soğğuk hava deposu uygundur. Ortamuk hava deposu uygundur. Ortamıın hazn hazıırlanma rlanma
yyööntemine bantemine bağğllıı
olarak stoklar otoklavda sterilize edilerek olarak stoklar otoklavda sterilize edilerek saklanabilir. saklanabilir.
KKüültltüür Ortamr Ortamıınnıın Hazn Hazıırlanmasrlanmasıı
••
KKüültltüür r ççalalışışmalarmalarıında temel olarak iki tip nda temel olarak iki tip ortam kullanortam kullanııllıırr
1)1)
Sentetik Deniz Suyu Ortam,Sentetik Deniz Suyu Ortam,2)2)
Deniz Suyu OrtamDeniz Suyu Ortamıı
Sentetik Deniz Suyu OrtamSentetik Deniz Suyu Ortamıı
••
DoDoğğal deniz suyunun daha basite indirgenerek hazal deniz suyunun daha basite indirgenerek hazıırlanmrlanmışış
halidir. halidir. Algal bAlgal büüyyüüme ve gelime ve gelişşme dome doğğal deniz suyunda oldual deniz suyunda olduğğu kadar u kadar tatminkar olur. Ayrtatminkar olur. Ayrııca kimyasal kompozisyonun iyi kontrol ca kimyasal kompozisyonun iyi kontrol edilebilmesi, doedilebilmesi, doğğal deniz suyu yanal deniz suyu yanıında sahip oldunda sahip olduğğu en bu en büüyyüük k avantajdavantajdıır. Bu nedenle kontrollr. Bu nedenle kontrollüü
kokoşşullarda yullarda yüürrüüttüülen denemelerde len denemelerde
tercih edilirler. Dotercih edilirler. Doğğal deniz suyunun yerini tam olarak tutmamasal deniz suyunun yerini tam olarak tutmamasıı nedeniyle her tnedeniyle her tüürrüün kn küültltüürrüünde uygun dende uygun değğildir. Yanildir. Yanıı
ssııra ra
hazhazıırlanmasrlanmasıı
fazladan bir emek ve masraf gerektirdifazladan bir emek ve masraf gerektirdiğğinden, doinden, doğğal al deniz suyunu temin etmenin zor oldudeniz suyunu temin etmenin zor olduğğu yerlerde veya u yerlerde veya öözel zel denemelerde kullandenemelerde kullanıımmıı
ssöözz
konusudur. Sentetik deniz suyu ortamkonusudur. Sentetik deniz suyu ortamıı
hazhazıır olarak satr olarak satıılmaktadlmaktadıır (r (InstantInstant
OceanOcean). Deniz suyundaki ). Deniz suyundaki maddeleri imaddeleri iççeren bu hazeren bu hazıır ortam, belli hacimdeki saf suya ilave r ortam, belli hacimdeki saf suya ilave edilerek deniz suyu ilave edilir.edilerek deniz suyu ilave edilir.
DoDoğğal Deniz Suyu Ortamal Deniz Suyu Ortamıı
••
YeryuvarYeryuvarıında mevcut elementlerin bnda mevcut elementlerin büüyyüük bir bk bir bööllüümmüünnüün n (90 elementten 80(90 elementten 80’’inin) deniz suyunda inin) deniz suyunda çöçözzüünmnmüüşş
halde halde
olduolduğğu sanu sanıılmaktadlmaktadıır. Son derece kompleks bir ortam r. Son derece kompleks bir ortam olan deniz suyu pekolan deniz suyu pek
ççok katok katıı
madde ve gazmadde ve gazıın n çöçözzüünmnmüüşş
halde bulunduhalde bulunduğğu bir u bir çöçözeltidir. Bu nedenle deniz bitkileri zeltidir. Bu nedenle deniz bitkileri de dahil olmak de dahil olmak üüzere pekzere pek
ççok deniz canlok deniz canlııssıınnıın bn büüyyüümesi mesi
iiççin ideal bir ortamdin ideal bir ortamdıır. Ancak deniz suyunda hr. Ancak deniz suyunda hıızlzlıı
bir bir algal balgal büüyyüüme elde etmek ime elde etmek iççin yeterli nin yeterli nuutrient yoktur. Bu trient yoktur. Bu nedenle deniz suyuna bnedenle deniz suyuna büüyyüümeyi hmeyi hıızlandzlandıırmak ve daha rmak ve daha yyüüksek bir ksek bir biyomasbiyomas
elde etmek ielde etmek iççin nin nuutrientler ve genitrientler ve genişş
bir tbir tüür aralr aralığıığına hitap edebilmesi ina hitap edebilmesi iççin iz elementler ve in iz elementler ve vitaminler ilave edilir.vitaminler ilave edilir.
••
ÖÖrnek 1. rnek 1. ErdshreiberErdshreiber
OrtamOrtamıı0.1 gr NaNO0.1 gr NaNO
33
0.02 gr Na0.02 gr Na
22
HPO HPO 4450 ml toprak 50 ml toprak ekstraekstrakkttıı
70 70 00CC’’de pastde pastöörize edilmirize edilmişş
1000 ml deniz suyu halen pek1000 ml deniz suyu halen pek
StStok ok laboratuarda bu ilk formlaboratuarda bu ilk formüüllüün den değğiişştirilmitirilmişş
şşekli kullanekli kullanıılmaktadlmaktadıır:r:
0.10.1
gr gr NaNONaNO
330.02 gr 0.02 gr NaNa
22
HPO HPO 44
.12H .12H 22
OO50 ml toprak 50 ml toprak ekstraktekstraktıı
30 dakika 151 30 dakika 151 bsbs’’dede
otoklavotoklavllaananarakrak
ststerilizeerilize
edilmiedilmişş
1000 ml deniz 1000 ml deniz suyu (%95 deniz suyu + %5 saf su).suyu (%95 deniz suyu + %5 saf su).
ZenginleZenginleşştirme Soltirme Solüüsyonlarsyonlarıı
Toprak Toprak EkstraktEkstraktıınnıınn
HazHazıırlanmasrlanmasıı
1 1 kg ince elenmikg ince elenmişş
ggüübresiz bahbresiz bahççe toprae toprağığı
2 2 ltlt ççeeşşme suyu ile (veya 6 kg toprak ve 6 me suyu ile (veya 6 kg toprak ve 6 ltlt
su) su)
birlikte 1 saat 5 birlikte 1 saat 5 lbslbs’’dede
otoklavlanotoklavlanıırr
(veya bir (veya bir ocakta kaynatocakta kaynatııllıır). Sor). Soğğumaya bumaya bıırakrakıılan bu bulanlan bu bulanıık k ssııvvıı
tekrar kaynama noktastekrar kaynama noktasıına getirilerek tekrar na getirilerek tekrar
sterilize edilir. Bu sterilize edilir. Bu ekstraktekstrakt
ççok ince ok ince ççamur amur ssüüspansiyonu ispansiyonu iççerecektir. Bu serecektir. Bu sııvvıı
ya ya santrifsantrifüüjlenirjlenir
yada 3yada 3--6 hafta boyunca 6 hafta boyunca çöçöktktüürrüüllüür ve r ve üüstte kalan stte kalan temiz su altemiz su alıınnıır. Bu r. Bu şşekilde iekilde iççinde hiinde hiçç
partikpartiküül l
madde imadde iççermeyen altermeyen altıın sarn sarııssıı
bir sbir sııvvıı
elde edilir.elde edilir.
ErdschreiberErdschreiber
OrtamOrtamıınnıın Hazn Hazıırlanmasrlanmasıı1.1.
Yeterli miktarda deniz suyu 0.45 Yeterli miktarda deniz suyu 0.45 mm’’lukluk
bir bir membranmembran
filtreden veya GF/C filtreden veya GF/C
cam fiber (cam fiber (glassglass--fibrefibre) filtre ka) filtre kağığıddıından sndan süüzzüüllüür, %5 saf su ilave edilerek r, %5 saf su ilave edilerek deniz suyu seyreltilir ve adeniz suyu seyreltilir ve ağğzzıı
bir pamuk tbir pamuk tııkakaççla kapatla kapatııllıır.r.
2.2.
KullanKullanııma hazma hazıır haldeki toprak r haldeki toprak ekstraktekstraktıı
uygun miktarda bir uygun miktarda bir erleneerlene
alalıınnıır r aağğzzıı
pamukla kapatpamukla kapatııllıır.r.
3.3.
Nutrient tuzlarNutrient tuzlarıınnıın konsantre soln konsantre solüüsyonlarsyonlarıı
ayrayrıı
ayrayrıı
hazhazıırlanrlanıır. r. ÖÖrnerneğğin 100 in 100 ltlt bbüüyyüüme ortamme ortamıı
hazhazıırlamak irlamak iççin 100 ml saf suya, daha in 100 ml saf suya, daha öönce belirtilen nce belirtilen
oranlarda (NaNOoranlarda (NaNO
33
ve ve NaNa
22
HPO HPO 44
iiççin) madde ilave edilerek konsantre stoklar in) madde ilave edilerek konsantre stoklar hazhazıırlanrlanıır ve ar ve ağığızlarzlarıı
bir pamuk tbir pamuk tııkakaççla kapatla kapatııllıır.r.
4.4.
HazHazıırlanan bu rlanan bu üçüç
kap (deniz suyu, torak kap (deniz suyu, torak ekstraktekstraktıı
ve nve nuutrient tuzlartrient tuzlarıı) ve ) ve dereceli 5 dereceli 5 mlml’’liklik
pipet otoklavda 30 dakika sterilize edilir. Sopipet otoklavda 30 dakika sterilize edilir. Soğğumaya umaya
bbıırakrakııllıır. r. 5.5.
Steril pipet kullanSteril pipet kullanıılarak gerekli miktardaki nlarak gerekli miktardaki nuutrient tuz soltrient tuz solüüsyonu sosyonu soğğumuumuşş
toprak toprak ekstraktekstrakt’’ıınana
ve sonra bu karve sonra bu karışıışım som soğğumuumuşş
deniz suyuna ilave edilir. deniz suyuna ilave edilir. Bu iBu işşlemler slemler sıırayla takip edilirse rayla takip edilirse çöçökelme tehlikesi kelme tehlikesi öönlenminlenmişş
olur. Ortama olur. Ortama
hhüücreleri acreleri aşşlamadan lamadan öönce snce sııvvıınnıın oda sn oda sııcaklcaklığıığına gelmina gelmişş
olmasolmasıına dikkat na dikkat edilmelidir.edilmelidir.
ÖÖrnek 2. rnek 2. ConwayConway
OrtamOrtamıı
İİstiridye larvalarstiridye larvalarıınnıın beslenmesinde bir n beslenmesinde bir flagellatflagellat
ttüürrüü
IsochrysisIsochrysis galbanagalbana kküültltüürrüü
iiççin in
kullankullanıılmlmışışttıır.r.Bu ortam toprak Bu ortam toprak ekstraktekstraktıındanda
yer alan kimyasal yer alan kimyasal
maddelerin maddelerin ççooğğunu iunu iççerir. Bu kimyasallar erir. Bu kimyasallar pahalpahalııddıır ancak r ancak ççok kok küçüüçük miktarlarda gereklidir. k miktarlarda gereklidir. Bu nedenle gereksiz harcamadan kaBu nedenle gereksiz harcamadan kaççıınmak inmak iççin in konsantre nutrient stoklarkonsantre nutrient stoklarıı
hazhazıırlanrlanıır. 1 r. 1 ltlt
deniz deniz
suyuna I ve II suyuna I ve II nolunolu
stok solstok solüüsyonlarsyonlarıından sadece ndan sadece 1 ml ilave edilir.1 ml ilave edilir.
Stok SolStok Solüüsyon I (syon I (İİnorganik Maddeler)norganik Maddeler)
NaNONaNO
33
100 gr100 grNaHNaH
22
PO PO 44
.2H .2H 22
OO
20 gr20 grFeClFeCl
33
.6H .6H 22
OO
1.3 gr1.3 grH H 33
BO BO 33.6 gr33.6 grNaNa.EDTA.EDTA
45 gr45 gr
MnClMnCl
22
.4H .4H 22
OO
0.36 gr0.36 grİİz element solz element solüüsyonusyonu
1 ml1 ml
DistileDistile
SuSu
1 1 ltlt
İİz Element Solz Element Solüüsyonusyonu
ZnClZnCl
22
2.1 gr2.1 grCoClCoCl
22
.6H .6H 22
OO
2.0 gr2.0 gr(NH (NH 44
)6.)6.MoMo
77
O O 2424
.4H .4H 22
OO 0.9 gr0.9 gr
CuSOCuSO
44
.5H .5H 22
OO
2.0 gr2.0 grDistileDistile
SuSu
100 ml100 ml
••
Maddenin iyi Maddenin iyi çöçözzüülmesi ve yeterli lmesi ve yeterli asiditeasidite
elde elde etmek ietmek iççin saf in saf HClHCl
ilave edilir.ilave edilir.
Stok SolStok Solüüsyon IIsyon II
ThiaminThiamin
hydrochloridhydrochlorid
((VitVit.B1).B1)
20 mg20 mgCyanocobalaminCyanocobalamin
((VitVit.B12).B12)
1 mg1 mg
DistileDistile
SuSu
200 ml200 ml
ÖÖrnek 3.rnek 3. MiquelMiquel--AllenAllen
OrtamOrtamıı
ErdschreiberErdschreiber
ortamortamıında bnda büüyyüümesi gmesi güçüç
olan bazolan bazıı ttüürler irler iççin kullanin kullanıılmlmışışttıır.r.
SolSolüüsyon Asyon AKNOKNO
33
100 gr100 grKBrKBr
2 gr2 gr
KIKI
1 gr1 grDistileDistile
SuSu
1 1 ltlt
SolSolüüsyon Bsyon B
NaNa
22
HPO HPO 44
25 gr25 grCaClCaCl
22
.6H .6H 22
OO
12.5 gr12.5 grFeClFeCl
33
(%58 w/v sol.)(%58 w/v sol.)
12.5 ml12.5 mlHClHCl
(P(Püür r KonsKons.).)
14.5 ml14.5 ml
DistileDistile
SuSu
500 ml500 ml
2 2 ltlt
deniz suyuna 2 ml A ve 1 ml deniz suyuna 2 ml A ve 1 ml B B solsolüüsyonu ilave edilir,syonu ilave edilir,70 70 00C C ‘‘de 20 dakika pastde 20 dakika pastöörize edilir.rize edilir.
ÖÖrnek 4.rnek 4.
••
HemerickHemerick
(1978) taraf(1978) tarafıından 200 kadar ndan 200 kadar Chlorophyceae, Cyanophyceae ve Chlorophyceae, Cyanophyceae ve RhodophyceaeRhodophyceae
ttüürrüünnüün kn küültltüürrüünde sadece iki ortam nde sadece iki ortam kullankullanıılmlmışışttıır. Bunlar tatlr. Bunlar tatlıı
su isu iççin BGM (in BGM (AllenAllen, ,
1963) ve deniz suyu i1963) ve deniz suyu iççin in SWMSWM’’dirdir..
••
BGM, herBGM, her
biri ayrbiri ayrıı
ayrayrıı
hazhazıırlanan 13 bilerlanan 13 bileşşik ik iiççerir. Bunlar kerir. Bunlar küültltüür ortamr ortamıına 5ml/na 5ml/ltlt
şşeklinde eklinde
ilave edilir.ilave edilir.
MajorMajor
StoklarStoklar
KNO KNO 33
200 gr/200 gr/ltltK K 22
HPO HPO 44
70 gr/70 gr/ltltMgSOMgSO
44
.7H .7H 22
OO
50 gr/50 gr/ltltNaClNaCl
34 gr/34 gr/ltlt
FeEDTAFeEDTA
10 gr/10 gr/ltltCaClCaCl
22
5 gr/5 gr/ltlt
Borik AsitBorik Asit
••
20 ml/20 ml/ltlt
şşeklinde sulandeklinde sulandıırrııllıır ve kr ve küültltüür r ortamortamıına 5 ml/na 5 ml/ltlt
ilave edilir.ilave edilir.
MinorMinor
StoklarStoklar
MnClMnCl
22
.4H .4H 22
OO
72 gr/72 gr/ltlt(NH4) (NH4) 22
MoO MoO 44
5.2 gr/5.2 gr/ltltZnClZnCl
22
4.0 gr/4.0 gr/ltltCuSOCuSO
44
.5H .5H 22
OO
3.2 gr/3.2 gr/ltltCoSOCoSO
44
2.0 gr/2.0 gr/ltltNH NH 44
VO VO 33
0.8 gr/0.8 gr/ltlt
•• HazHazıırlanan bu solrlanan bu solüüsyonlar 5 mg/syonlar 5 mg/ltlt
şşeklinde eklinde
sulandsulandıırrııllıır ve kr ve küültltüür ortamr ortamıına 5 ml/na 5 ml/ltlt
olarak ilave olarak ilave edilir.edilir.
KKüültltüür Kor Koşşullarullarıı 1. 1. KKüültltüür Kaplarr Kaplarıı
ve Temizlive TemizliğğiiKKüültltüür r ççalalışışmalarmalarıında cam kaplarnda cam kaplarıı
kullanmak her zaman tercih kullanmak her zaman tercih
sebebidir.sebebidir.
ÖÖzellikle azellikle aşışı
ve stok kve stok küültltüürlerin hazrlerin hazıırlanmasrlanmasıında cam kaplar en nda cam kaplar en iyi sonucu verir. Bu iiyi sonucu verir. Bu işş
iiççin ayrin ayrıılan cam kaplar sadece klan cam kaplar sadece küültltüür ir işşlemlerinde lemlerinde
kullankullanıılmallmalııddıır. Bu kaplarda kesinlikle r. Bu kaplarda kesinlikle formalinformalin
veya HClveya HCl
22
gibi gibi kimyasallar bulundurulmamalkimyasallar bulundurulmamalııddıır.r.
Cam kaplarCam kaplarıın temizlin temizliğği bai başşararııllıı
alg kalg küültltüür r ççalalışışmalarmalarıında ilk nda ilk esastesastıır ve dikkat edilmesi gereken r ve dikkat edilmesi gereken öönemli bir husustur. Knemli bir husustur. Küültltüür r ççalalışışmalarmalarıında kullannda kullanıılacak bir cam kap tercihen slacak bir cam kap tercihen sııvvıı
sabunla (veysabunla (veya a ssııvvıı
deterjanla) fdeterjanla) fıırrççalalanarakanarak
iyice yiyice yııkankanıır. Bu sayede alglerin alkali kor. Bu sayede alglerin alkali koşşullarda ullarda oluoluşşturduturduğğu organik film tabakasu organik film tabakasıı
giderilmigiderilmişş
olur. olur. ÇÇeeşşme suyu ile iyice me suyu ile iyice
ççalkalandalkalandııktan sonra seyreltik ktan sonra seyreltik HClHCl’’denden
gegeççirilir ve son olarak saf su ile bir irilir ve son olarak saf su ile bir kakaçç
defa defa ççalkalanalkalanıır. Kurumasr. Kurumasıı
iiççin ters in ters ççevrilir ve bir etevrilir ve bir etüüvde kurutulup vde kurutulup
tozdan ve havadan gelen sporlardan (tozdan ve havadan gelen sporlardan (airair--borneborne) korumak i) korumak iççin ain ağğzzıı alalüüminyum folyo ile kapatminyum folyo ile kapatııllıır. Kullanr. Kullanııma hazma hazıır hale gelen bu kaplar yine r hale gelen bu kaplar yine
tozsuz bir ortamda , dolapta yada rafta saklantozsuz bir ortamda , dolapta yada rafta saklanıır.r.Hassas Hassas ççalalışışmalarda kullanmalarda kullanıılacak (vitamin lacak (vitamin bioassaybioassay
gibi) cam gibi) cam
kaplardaki serbest iz organikleri gidermek ikaplardaki serbest iz organikleri gidermek iççin bu kaplar 400 in bu kaplar 400 00CC’’de 4 saat de 4 saat bbıırakrakııllıır.r.
SSııcaklcaklığıığın kontrolln kontrollüü
olduolduğğu Alg odasu Alg odasıı: Stok k: Stok küültltüürler test rler test ttüüplerinde (solda) ve izolasyon ve ekim iplerinde (solda) ve izolasyon ve ekim işşlerinin yaplerinin yapııldldığıığı
ççeker eker
ocak (saocak (sağğda)da)
2. 2. SterilizasyonSterilizasyon
••
KKüültltüür r ççalalışışmalarmalarıında da genel mikrnda da genel mikroobiyolojik biyolojik yyööntemler esas olduntemler esas olduğğundan, kaplarundan, kaplarıın ve n ve ortamlarortamlarıın sterilizasyonunda otoklav in sterilizasyonunda otoklav işşlemi en lemi en ççok tercih edilen bir yok tercih edilen bir yööntemdir. Bunun yanntemdir. Bunun yanıı
ssııra ra
filtrasyonlafiltrasyonla, radyasyonla sterilizasyon ve , radyasyonla sterilizasyon ve ççeeşşitli itli kimyasallarla (buharlakimyasallarla (buharlaşşan veya buharlaan veya buharlaşşmayan) mayan) dezenfeksiyon ydezenfeksiyon yööntemleri de kntemleri de küültltüür r ççalalışışmalarmalarıında kullannda kullanıılabilir (labilir (HamiltonHamilton, 1978). , 1978). ÖÖzellikle deneysel zellikle deneysel ççalalışışmalarda malarda ççok kullanok kullanıılan ve lan ve tercih edilen bir ytercih edilen bir yööntem olan otoklav ile ntem olan otoklav ile sterilizasyon asterilizasyon aşşaağığıda ada aççııklanmklanmışışttıır.r.
3. 3. Otoklav Otoklav İİle Sterilizasyonle Sterilizasyon
••
KKüültltüür r ççalalışışmalarmalarıında tnda tüüm kaplar, pipetler ve ortamlar otoklavda m kaplar, pipetler ve ortamlar otoklavda sterilize edilmelidir. Tam bir sterilizasyon 121 sterilize edilmelidir. Tam bir sterilizasyon 121 00CC’’de doygun buhar de doygun buhar iiççinde 15 inde 15 IbIb/in /in 22
atmosferik basatmosferik basıınnççta gerta gerççekleekleşşir. Sir. Sııvvıılarlarıın n
sterilizasyonunda gerekli zaman hacmin bir fonksiyonudur. sterilizasyonunda gerekli zaman hacmin bir fonksiyonudur. ÖÖrnerneğğin in 1000 ml s1000 ml sııvvıı
10 dakikada sterilize edilirken daha b10 dakikada sterilize edilirken daha büüyyüük hacimler daha k hacimler daha
uzun zamana gereksinim duyar. Ancak genel olarak 30 dakika uzun zamana gereksinim duyar. Ancak genel olarak 30 dakika otoklava pek otoklava pek ççok ekipman ve ortamok ekipman ve ortamıın sterilizasyonu in sterilizasyonu iççin yeterli bir in yeterli bir ssüüredir. Eredir. Eğğer otoklav gibi (er otoklav gibi (ŞŞekil) bir ekipman yoksa, aynekil) bir ekipman yoksa, aynıı
amaca amaca
hizmet eden genihizmet eden genişş
hacimli dhacimli düüddüüklklüü
tencereler kullantencereler kullanıılabilir. Deney labilir. Deney ttüüpleri tel sepetlere yerlepleri tel sepetlere yerleşştirilerek otoklava konur. Bu sepetlere tirilerek otoklava konur. Bu sepetlere
ssııralanan tralanan tüüplerin aplerin ağğzzıı
pamuk tpamuk tııkakaççlarla kapatlarla kapatııldldııktan sonra kuruma ktan sonra kuruma kakağığıddıı
ve ambalaj kave ambalaj kağığıddıı
ile ile öörtrtüüllüüp lastikle bantlanp lastikle bantlanııp otoklava konur. p otoklava konur.
Bu kaBu kağığıtlar ve pamuk ttlar ve pamuk tııkakaççlar ylar yüüksek basksek basıınnçç
altaltıında doygun buhar nda doygun buhar gegeççiişşine izin verir ve tam bir sterilizasyon saine izin verir ve tam bir sterilizasyon sağğlar.lar.
Otoklav iOtoklav işşlemleri slemleri sıırasrasıında kullannda kullanıılan lan pipet muhafaza kaplarpipet muhafaza kaplarıı
4. 4. HavalandHavalandıırmarma
••
GeniGenişş
hacimli khacimli küültltüürlerde havalandrlerde havalandıırma bazrma bazıı
ttüürlerin maksimum rlerin maksimum bbüüyyüüme hme hıızzıına ulana ulaşşmasmasıı
bakbakıımmıından ndan öönemlidir. Ancak knemlidir. Ancak küçüüçük k
hacimli khacimli küültltüürlerde (2 rlerde (2 ltlt’’denden
az) havalandaz) havalandıırma gereksizdir. Brma gereksizdir. Bööyle yle kaplarda yapkaplarda yapıılan klan küültltüürlerde kabrlerde kabıın an ağğzzıından gendan geççen hava algal en hava algal bbüüyyüüme ime iççin yeterli olacaktin yeterli olacaktıır. Bazen kr. Bazen küültltüür ortamr ortamıınnıı
havalandhavalandıırmanrmanıın veya karn veya karışışttıırmanrmanıın iyi sonun iyi sonuçç
vermedivermediğği ti tüürlerde rlerde vardvardıır. r. ÖÖrnerneğğin in SkeletonemaSkeletonema costatumcostatum havalandhavalandıırma yaprma yapıılmayan lmayan kküültltüürlerde daha iyi bir brlerde daha iyi bir büüyyüüme gme göösterir. Havalandsterir. Havalandıırmayla verilen rmayla verilen COCO
22
, , Phaeodactylum Phaeodactylum ve bazve bazıı
flagellatlarflagellatlarıınn
bbüüyyüüme hme hıızzıınnıı
arttarttıırrııccıı etki yapar (etki yapar (RaymontRaymont
ve Adams, 1958). Kve Adams, 1958). Küültltüüre verilen hava, re verilen hava, ççeeşşitli itli
partikpartiküülleri (toz, spor vs) illeri (toz, spor vs) iççerebilir. Bunlarerebilir. Bunlarıı
ararıındndıırmak irmak iççin hava, in hava, kküültltüüre girmeden re girmeden öönce bir filtreden gence bir filtreden geççirilerek verilir (irilerek verilir (ŞŞekil).ekil).
Hava filtresi (Hava filtresi (FoxFox, 1983), 1983)
5. 5. AydAydıınlatmanlatma
••
Alg kAlg küültltüürleri bir rleri bir ışıışık kaynak kaynağığına gereksinim duyar. na gereksinim duyar. ÇüÇünknküü
ışıışık, k, fotosentezim enerji kaynafotosentezim enerji kaynağığıddıır. Ir. Işışık yok yoğğunluunluğğuna karuna karşışı
fotosentez fotosentez
hhıızzıı
dodoğğru bir ru bir şşekilde artar. Bu artekilde artar. Bu artışış
doygun doygun ışıışık yok yoğğunluunluğğunda bir unda bir platoya ulaplatoya ulaşışır (r (ŞŞekil). Yekil). Yüüksek ksek ışıışık yok yoğğunluklarunluklarıı
fotosentezi fotosentezi inhibeinhibe
eder, deder, düüşşüük k ışıışık yok yoğğunluklarunluklarııysa fotosentezi sysa fotosentezi sıınnıırlayrlayııccıı
öözellizelliğğe e sahiptir. Isahiptir. Işığışığın yon yoğğunluunluğğu ve su ve süüresi kresi küültltüürlerin verimlilirlerin verimliliğği ai aççııssıından ndan öönemlidir. Banemlidir. Başşlanglangııççta ta ışıışık yok yoğğunluunluğğuna paralel una paralel şşekilde artan ekilde artan organik organik üüretim, kretim, küültltüürrüün daha n daha ilerkiilerki
safhalarsafhalarıında snda sıınnıırlayrlayııccıı
bir bir
faktfaktöör olarak ortaya r olarak ortaya ççııkar (kar (GuillardGuillard, 1972). Bu s, 1972). Bu sıınnıırlayrlayııccıı
etki, etki, ortamdaki hortamdaki hüücre konsantrasyonunun bir sonucu olarak hcre konsantrasyonunun bir sonucu olarak hüücrelerin crelerin birbirlerini gbirbirlerini göölgelemesi ve lgelemesi ve ışığışığa doygun hale gelen ha doygun hale gelen hüücrelerin daha crelerin daha fazla fazla ışıışık enerjisi kullanmamask enerjisi kullanmamasıı
nedeniyle ortaya nedeniyle ortaya ççııkar.kar.
5. 5. AydAydıınlatmanlatma
••
Pratik uygulamalarda direkt gPratik uygulamalarda direkt güüneneşş
ışığıışığı
alg kalg küültltüürleri irleri iççin in inhibeinhibe
edici etki yapar. Bu nedenle kedici etki yapar. Bu nedenle küültltüür kaplarr kaplarıı
ggüüneneşş
ışığıışığınnıı
dodoğğrudan almayan, kuzeye bakan pencerelererudan almayan, kuzeye bakan pencerelere-- raflara konur. Eraflara konur. Eğğer ger güüneneşş
ışığıışığınnıı
dodoğğrudan alan bir yere rudan alan bir yere
koymak zorunluysa bu kaplarkoymak zorunluysa bu kaplarıın gn göölgelenmesi gerekir.lgelenmesi gerekir.••
KKüültltüür uygulamalarr uygulamalarıı
suni aydsuni aydıınlatma kaynaklarnlatma kaynaklarııyla yla
yyüürrüüttüülecekse, bularlecekse, bularıı
ggüüneneşş
ışığıışığına ena eşşdedeğğer kaynaklar er kaynaklar olmasolmasıına dikkat edilmelidir. Bu ina dikkat edilmelidir. Bu işşlem ilem iççin gerekli in gerekli floresanfloresan
lambalarlambalarıınnıın verdin verdiğği i ışıışık k şşiddetiiddeti
de farklde farklııddıır. Bunlarr. Bunlarıın n hesaplanhesaplanııp, uygun kaynaklarp, uygun kaynaklarıınnıın sen seççilmesi gerekir.ilmesi gerekir.
5. 5. AydAydıınlatmanlatma
••
FarklFarklıı
tipteki tipteki floresanfloresan
lambalarlambalarıın dn döönnüüşşüüm katsaym katsayıılarlarıı;;
FloresanFloresan
LambalarLambalarıı
KatsayKatsayıılarlarıı
(C)(C)CoolCool--whitewhite
(40)(40)
0.300.30
DayDay
LightLight
0.340.34GroGro--luxlux
0.900.90
C katsayC katsayııssıınnıın kullann kullanıımmıı: : LuxLux
X C=X C=
mWmW/cm/cm22
Genel olarak 1000 Genel olarak 1000 luxlux
ışıışık yok yoğğunluunluğğu stok ku stok küültltüürleri rleri devamdevam
ettirmede yeterli olurken yettirmede yeterli olurken yüüksek bir ksek bir üüretim iretim iççin in
35003500--5000 5000 luxlux
ışıışık yok yoğğunluunluğğu gerekir.u gerekir.
Alg kAlg küültltüür tanklarr tanklarıı
üüzerindeki suni zerindeki suni aydaydıınlatma sistemlerinlatma sistemleri
Alg KAlg Küültltüürleri irleri iççin kullanin kullanıılan lan ışıışıklandklandıırrıılmlmışış öözel masalar zel masalar
6. 6. SSııcaklcaklııkk
••
Fitoplankton hFitoplankton hüücrelerinin biyolojik aktiviteleriyle ortam crelerinin biyolojik aktiviteleriyle ortam ssııcaklcaklığıığı
arasarasıında genel bir ilinda genel bir ilişşki vardki vardıır. Br. Büüyyüüme hme hıızlarzlarıı
belli bir optimuma kadar sbelli bir optimuma kadar sııcaklcaklığığa baa bağğllıı
olarak artar. olarak artar. Ancak bu noktadan sonra azalmaya baAncak bu noktadan sonra azalmaya başşlar. Bu optimum lar. Bu optimum pekpek
ççok deniz ve tatlok deniz ve tatlıı
su tsu tüürleri irleri iççin 18in 18--25 25 00C C
aralaralığıığındadndadıır. Bu nedenle alg kr. Bu nedenle alg küültltüürleri irleri iççin sin sııcaklcaklığıığın 25 n 25 00CC’’nin nin üüzerine zerine ççııkmamaskmamasıı
gerekir. Sabit sgerekir. Sabit sııcaklcaklııktaki ktaki
kküültltüür koleksiyon odalarr koleksiyon odalarıı
genellikle 18 genellikle 18 00CC’’de tutulur de tutulur ((ŞŞekil). Sonuekil). Sonuçç
olarak olarak ççok dok düüşşüük sk sııcaklcaklııklar bklar büüyyüümeyi meyi
geciktirir, geciktirir, ççok yok yüüksek sksek sııcaklcaklııklarsa kklarsa küültltüürler irler iççin in ööldldüürrüüccüü olabilir.olabilir.
7. 7. Enfeksiyonun Enfeksiyonun ÖÖnlenmesinlenmesiAlg kAlg küültltüürlerinde krlerinde küültltüürrüün nitelin niteliğğini bozabilecek ve hatta ini bozabilecek ve hatta ööllüüm m
fazfazıına getirecek na getirecek ççeeşşitli enfeksiyon kaynaklaritli enfeksiyon kaynaklarıı
vardvardıır (r (ŞŞekil). Kekil). Küültltüür r kaplarkaplarıınnıın ve ortamn ve ortamıın sterilizasyonuna ilaveten bakteriyel bulan sterilizasyonuna ilaveten bakteriyel bulaşşma ma veya tveya tüürlerin birbirine karrlerin birbirine karışışma nedenleri bazma nedenleri bazıı
basit basit öönlemlerle nlemlerle
giderilebilir.giderilebilir.1.1.
KaplarKaplarıın an ağğzzıınnıı
öörten pamuk trten pamuk tııkakaççlarlarıın hazn hazıırlanmasrlanmasıında tercihen nda tercihen
hidrofil veya 2. Kalite pamuk kullanhidrofil veya 2. Kalite pamuk kullanııllıır ve r ve şşekilde gekilde göösterildisterildiğği gibi i gibi hazhazıırlanrlanıır (r (ŞŞekil).ekil).
2.2.
BBu tu tııkakaççlar masa veya slar masa veya sııra ra üüststüü
gibi steril olmayan yerlere gibi steril olmayan yerlere konulmamalkonulmamalııddıır. Br. Bööyle yerler algal spor ve bakteriyel bulayle yerler algal spor ve bakteriyel bulaşşma ma kaynaklarkaynaklarııddıır.r.
3.3.
Bu tBu tııkakaççlarla steril olmayan kaplarlarla steril olmayan kaplarıın an ağığızlarzlarıı
kapatkapatıılmamallmamalıı
veya veya bbööyle kaplarda kullanyle kaplarda kullanıılan tlan tııkakaççlar steril kaplarda kullanlar steril kaplarda kullanıılmamallmamalııddıır.r.
4.4.
Ara iAra işşlemlerde (Transfer veya alemlerde (Transfer veya aşışılama) kullanlama) kullanıılan lan pastpastöörr
yada yada dereceli pipetler, dereceli pipetler, öönce saf su ile nce saf su ile ççalkalanmalalkalanmalıı, et, etüüvde kurutulduktan vde kurutulduktan ve genive genişş
ucu pamukla kapatucu pamukla kapatııldldııktan sonra cam yada metal bir pipet ktan sonra cam yada metal bir pipet
kabkabıı
iiççinde otoklava konulmalinde otoklava konulmalııddıır.r.
7. 7. Enfeksiyonun Enfeksiyonun ÖÖnlenmesinlenmesi
5.5. KKüültltüür transferleri ve ar transferleri ve aşışılamalar steril kolamalar steril koşşullarda yullarda yüürrüüttüülmeli, lmeli,
ara iara işşlemlerde kullanlemlerde kullanıılan kaplar, pipetler vs. steril olmallan kaplar, pipetler vs. steril olmalııddıır. r. Transfer iTransfer işşlemleri tercihen U.V. lamba yaklemleri tercihen U.V. lamba yakıılmlmışış
bir odada, bek alevi bir odada, bek alevi
kullanarak yapkullanarak yapıılmallmalııddıır. Tr. Tüüplerin aplerin ağığızlarzlarıındaki tndaki tııkakaçç
ve tve tüüp sol elle p sol elle tutulur, satutulur, sağğ
eldeki pipet ile bek alevinde transfer yapeldeki pipet ile bek alevinde transfer yapııllıır (r (ŞŞekil).ekil).
6.6.
KullanKullanııma hazma hazıır steril ortamlar buzdolabr steril ortamlar buzdolabıında (+4 nda (+4 00C) C) saklanmalsaklanmalııddıır. Bununla birlikte taze ortam kullanmaya dikkat r. Bununla birlikte taze ortam kullanmaya dikkat edilmelidir. edilmelidir. ÇüÇünknküü
bayatlambayatlamışış
kküültltüür ortamlarr ortamlarıı
bakteri bakteri
poppopuulasyonlarlasyonlarıınnıınn
geligelişşimine imine ççok uygundur.ok uygundur.7. 7. AyrAyrııca ortamca ortamıın zenginlen zenginleşştirilmesinde kullantirilmesinde kullanıılan lan ççalalışışma ma
stoklarstoklarıınnıın da taze olarak hazn da taze olarak hazıırlanrlanııp kullanp kullanıılmaslmasıına dikkat na dikkat edilmelidir (edilmelidir (öözellikle vitamin solzellikle vitamin solüüsyonlarsyonlarıı).).
Alg Alg ÜÜnitelerinde Su Arnitelerinde Su Arııttıımmıı
iiççin kullanin kullanıılan lan Kum filtre SistemleriKum filtre Sistemleri
Alg kAlg küültltüürrüü
ÜÜnitelerinde Su arnitelerinde Su arııttıımmıı
iiççin in kullankullanıılan lan kartukartuçç
filtre sistemifiltre sistemi
KKüültltüür Tiplerir Tipleri
••
SSııvvıı
KKüültltüürlerrler
Deneysel Deneysel ççalalışışmalarda en malarda en ççok kullanok kullanıılan ve tercih edilen ortam lan ve tercih edilen ortam tipidir. Deney ttipidir. Deney tüüppüündeki bndeki büüyyüüme ortamme ortamıına, kna, küçüüçük bir hk bir hüücre grubu cre grubu aaşışılanlanıır. Bu ir. Bu işşlem lem ççeeşşitli yollarla yapitli yollarla yapıılabilir. Daha labilir. Daha öönce mevcut olan nce mevcut olan kküültltüürden birkarden birkaçç
damla yeni ortamdamla yeni ortamıın in iççersine ilave edilir (daha ersine ilave edilir (daha öönce nce
bahsedilen aseptik kobahsedilen aseptik koşşullara dikkat ederek veya doullara dikkat ederek veya doğğal ortamal ortamıından ndan alalıınan hnan hüücre veya hcre veya hüücre grubu acre grubu aşışılanlanıır. Ar. Aşışılama ilama işşlemi daha lemi daha öönce nce belirtildibelirtildiğği gibi hazi gibi hazıırlanan bir pipet yada rlanan bir pipet yada ööze yardze yardıımmııyla yapyla yapıılabilir.labilir.
KKüültltüür Tiplerir Tipleri••
KatKatıı
((AgarAgar) K) Küültltüürlerirleri
KatKatıı
ortam hazortam hazıırlamak irlamak iççin zenginlein zenginleşştirilmitirilmişş
deniz suyu deniz suyu sosoğğukken %1.5ukken %1.5--2 oran2 oranıında toz nda toz agaragar
ile karile karışışttıırrııllıır (r (agaragarıınn
topaklatopaklaşşmammamışış
olmasolmasıına dikkat edilir). na dikkat edilir). İİlave edilen lave edilen agaragar
bainbain-- mariemarie
(su banyosu) yoluyla veya do(su banyosu) yoluyla veya doğğrudan aleve maruz rudan aleve maruz
bbıırakrakıılmadan lmadan ııssııttıılarak larak çöçözzüüllüür. Solr. Solüüsyon syon ııssııttııllıırken devamlrken devamlıı karkarışışttıırarak rarak agaragarıınn
topaklatopaklaşşmasmasıı
öönlenir. Bir nlenir. Bir erlenerlen
yada bir yada bir
beher ibeher iççersinde yapersinde yapıılan, lan, agaragarıı
ııssııtarak tarak çöçözdzdüürme irme işşleminden leminden sonra otoklavda sterilize edilir. Otoklavdan sonra otoklavda sterilize edilir. Otoklavdan ççııkarkarıılan bu slan bu sııcak cak solsolüüsyon steril tsyon steril tüüplere pay edilir. Tplere pay edilir. Tüüpler yatpler yatıık vaziyette k vaziyette tutularak donmastutularak donmasıı
sasağğlanlanıır. Bu ir. Bu işşlem bize daha genilem bize daha genişş
bir ekim bir ekim
yyüüzeyi sazeyi sağğlar. Bu lar. Bu şşekilde hazekilde hazıırlanan trlanan tüüplerdeki katplerdeki katıı
ortamlara, ortamlara, steril kosteril koşşullarda, ana stoktan bir ullarda, ana stoktan bir ööze veya pipet ile hze veya pipet ile hüücreler creler alalıınnııp ekim yapp ekim yapııllıır (r (ŞŞekil).ekil).
KKüültltüür Tiplerir Tipleri
••
EEğğer bu ier bu işşlemi lemi petripetri
kaplarkaplarıında yapacaksak nda yapacaksak erlendeerlende
çöçözdzdüürrüülen len agaragar solsolüüsyonu ssyonu sııcakken cakken petripetri
kaplarkaplarıına pay edilir. Bu sna pay edilir. Bu sııcak solcak solüüsyon syon
genellikle genellikle petripetri
kabkabıı
derinliderinliğğinin yarinin yarııssıı
kadar ilave edilir ve kadar ilave edilir ve sosoğğumaya bumaya bıırakrakııllıır. Yine bu ortama hr. Yine bu ortama hüücreler steril bir creler steril bir ööze ze yardyardıımmııyla ayla aşışılanlanıır.r.
KatKatıı
KKüültltüür (r (AgarAgar) Ortam) Ortamıınnıın in iççinde inde bulundubulunduğğu u PetriPetri
KaplarKaplarıı
KKüültltüürlerde Brlerde Büüyyüümeme
AAlg klg küültltüürlerinde brlerinde büüyyüüme denince mikroorganizmalarme denince mikroorganizmalarıın birim n birim hacimde veya birim alanda belirli bir zaman aralhacimde veya birim alanda belirli bir zaman aralığıığında olunda oluşşturduturduğğu u kuru veya yakuru veya yaşş
aağığırlrlııktaki organik kktaki organik küütle arttle artışıışı
akla gelir.akla gelir.
BBüüyyüüme Tayin Yme Tayin Yööntemlerintemleri
••
Alg kAlg küültltüür r ççalalışışmalarmalarıında bnda büüyyüüme kalitatif ve kantitatif me kalitatif ve kantitatif yollarla yapyollarla yapıılabilir. labilir. ÖÖzellikle aynzellikle aynıı
ttüürrüün kn küültltüürlerinin rutin rlerinin rutin
olarak yapolarak yapııldldığıığı
durumlarda, kdurumlarda, küültltüürrüün renginden genel bir n renginden genel bir tahmin ytahmin yüürrüüttüülebilir. lebilir. ÇÇok bok büüyyüüme var, az bme var, az büüyyüüme var me var veya hiveya hiçç
bbüüyyüüme yok gibi. Bme yok gibi. Bööyle yaklayle yaklaşışık bir tahminde k bir tahminde
bulunmak kbulunmak küültltüürrüün gidin gidişşatatıınnıı
dedeğğerlendirmek ierlendirmek iççin veya in veya yaryarıı
ssüürekli krekli küültltüürlerde taze ortam ilave edilme zamanrlerde taze ortam ilave edilme zamanıınnıın n
bulunmasbulunmasıında yeterlidir. Ancak bu tahmin bize hinda yeterlidir. Ancak bu tahmin bize hiçç
bir bir zaman kzaman küültltüürdeki hrdeki hüücresel gelicresel gelişşmeyle ilgili ayrmeyle ilgili ayrııntntııllıı
bilgiler (hbilgiler (hüücre saycre sayııssıı, h, hüücre hacmi, cre hacmi, biyokbiyoküütletle
vs) vermez vs) vermez ve bu nedenleve bu nedenle
de deneysel de deneysel ççalalışışmalarda yeterli demalarda yeterli değğildir.ildir.
BBüüyyüüme Tayin Yme Tayin Yööntemlerintemleri
••
KKüültltüürlerin kantitatif derlerin kantitatif değğerlendirmesi herlendirmesi hüücre cre saysayııssıı, optik yo, optik yoğğunluk, kuru ve yaunluk, kuru ve yaşş
aağığırlrlıık, k,
klorofil miktarklorofil miktarıı, organik karbon vs. gibi algal , organik karbon vs. gibi algal bbüüyyüümeyle ilgili parametrelerin hassas bir meyle ilgili parametrelerin hassas bir şşekilde ekilde ööllçüçülmesiyle elde edilir.lmesiyle elde edilir.
••
Algal bAlgal büüyyüüme me ööllçüçümmüünde kullannde kullanıılan ylan yööntemlere ntemlere gegeççmeden meden öönce bnce büüyyüümenin karakteristikleri ve menin karakteristikleri ve bazbazıı
temel btemel büüyyüüme fazlarme fazlarıınnıın ayrn ayrııntntıılarlarıından, ndan,
yani byani büüyyüüme dinamiklerinden sme dinamiklerinden sööz etmek z etmek gerekir.gerekir.
BBüüyyüüme Dinamiklerime Dinamikleri
••
Optimum fiziksel (Optimum fiziksel (ışıışık, sk, sııcaklcaklıık, COk, CO
22
) ve kimyasal () ve kimyasal (nnüütrientlertrientler, iz , iz elementler, vitaminler) koelementler, vitaminler) koşşullarullarıın hazn hazıırlandrlandığıığı
bir kbir küültltüür ortamr ortamıına na
aaşışılanan hlanan hüücreler, ortama uyum gcreler, ortama uyum göösterip sterip ççooğğalmaya baalmaya başşlaylayııncaya ncaya kadar belirli bir skadar belirli bir süüre gere geççer. Bu ser. Bu süüre zarfre zarfıında hnda hüücre saycre sayııssıında hemen nda hemen hemen hihemen hiçç
bir artbir artışış
ggöözlenmez. Kzlenmez. Küültltüürlerin barlerin başşlanglangııccıında gnda göözlenen zlenen
bu evreye bu evreye gecikme fazgecikme fazıı
adadıı
verilir. (verilir. (ŞŞekil). Bu faz genellikle aekil). Bu faz genellikle aşışıdaki daki ööllüü
hhüücrelerin saycrelerin sayııssıına ve metabolik aktivitesine bana ve metabolik aktivitesine bağğllıı
olarak ortaya olarak ortaya
ççııkar. Akar. Aşışınnıın kalitesi (genn kalitesi (gençç
kküültltüür olmasr olmasıı) daha k) daha küültltüür ir işşlemlerinin lemlerinin babaşşlanglangııccıında nda öönemli bir sorun olarak karnemli bir sorun olarak karşışımmııza za ççııkar. Bu nedenle kar. Bu nedenle aaşışı
kküültltüürlerinin, brlerinin, büüyyüümenin logaritmik fazmenin logaritmik fazıında, yani aktif bnda, yani aktif büüyyüüme me
iiççinde bulunan alt kinde bulunan alt küültltüürlerden alrlerden alıınmasnmasıı
uygundur.uygundur.
BBüüyyüüme Dinamiklerime Dinamikleri
••
Gecikme fazGecikme fazıında yavanda yavaşş
bir bir şşekilde artan hekilde artan hüücre konsantrasyonu belirli cre konsantrasyonu belirli bir dbir düüzeye ulazeye ulaşışınca nca logaritmik evreyelogaritmik evreye
varvarııllıır (r (ŞŞekil). Bu evrede ekil). Bu evrede
hhüücreler ecreler eşşit ve ardit ve ardııl zaman arall zaman aralııklarklarıında logaritmik olarak artar (nda logaritmik olarak artar (ŞŞekil). ekil). Sabit hacimde yapSabit hacimde yapıılan kesikli klan kesikli küültltüürlerde /rlerde /BatchBatch
kküültltüür) bu artr) bu artışış, ,
ortamdaki besinle tortamdaki besinle tüükeninceye kadar devam eder. Hkeninceye kadar devam eder. Hüücre artcre artışıışı
belirli bir belirli bir noktaya ulanoktaya ulaşışınca bnca büüyyüüme daha fazla devam etmez. me daha fazla devam etmez. ÇüÇünknküü
bbüüyyüümeyi meyi
ssıınnıırlayan rlayan ççeeşşitli faktitli faktöörler devreye girer. rler devreye girer. ÖÖrnerneğğin, yin, yüüksek hksek hüücre cre konsantrasyonunun bir sonucu olarak hkonsantrasyonunun bir sonucu olarak hüücrelerin birbirini gcrelerin birbirini göölgelemesi lgelemesi sonucu olusonucu oluşşan an ışıışık sk sıınnıırlamasrlamasıı
(I(Işışık sk sıınnıırlamasrlamasıı
aynaynıı
zamanda zamanda ışığışığa a
doygun yani daha fazla doygun yani daha fazla ışıışık enerjisi kullanamayan hk enerjisi kullanamayan hüücrelerin crelerin oluoluşşmasmasııyla da meydana gelir) veya ortamda biriken ve byla da meydana gelir) veya ortamda biriken ve büüyyüümeyi meyi inhibeinhibe
eden metabolik arteden metabolik artııklar sonucu oluklar sonucu oluşşan an toksiktoksik
etki gibi setki gibi sıınnıırlayrlayııccıı
faktfaktöörler brler büüyyüümenin daha fazla devam etmesine izin vermez ve bmenin daha fazla devam etmesine izin vermez ve büüyyüüme me bir bir duraklama evresiduraklama evresine girer (ne girer (ŞŞekil).ekil).
BBüüyyüüme Dinamiklerime Dinamikleri
••
Duraklama evresini hDuraklama evresini hüücrelerin ecrelerin eşşit ve ardit ve ardııl zaman l zaman aralaralııklarklarıındaki artndaki artışıışınnıın sabit bir oranla ifade edildin sabit bir oranla ifade edildiğği, i, yani byani büüyyüüme hme hıızzıınnıın sabit bir katsayn sabit bir katsayıı
halinde kaldhalinde kaldığıığı
sabit sabit
bir evredir (bir evredir (ŞŞekil). Bu evrede ekil). Bu evrede ööllüü
hhüücrelerin saycrelerin sayııssıı
loglog faza gfaza gööre re ççok yok yüükselmikselmişştir ve tir ve ööllüü
hhüücrelerle canlcrelerle canlıı
hhüücrelerin saycrelerin sayııssıı
neredeyse eneredeyse eşşit hale gelmiit hale gelmişştir. Batir. Başşka bir ka bir dedeğğiişşle bu fazda hle bu fazda hüücre konsantrasyonunda zamana gcre konsantrasyonunda zamana gööre re net bir artnet bir artışış
yada azalyada azalışış
ggöörrüülmez. Bunu izleyen fazda, lmez. Bunu izleyen fazda,
yani yani mikrobiyalmikrobiyal
kinetikinetiğğin son evrelerinde in son evrelerinde ööllüüm hm hıızzıı
arttarttığıığı iiççin hin hüücre konsantrasyonunda net bir azalcre konsantrasyonunda net bir azalışış
ggöözlenir. Bu zlenir. Bu
azalmanazalmanıın sonunda kn sonunda küültltüür r ööllüüm fazm fazıına girer ve sona erer.na girer ve sona erer.
Mikro alg kMikro alg küültltüürlerinin 5 Brlerinin 5 Büüyyüüme Fazme Fazıı
BBüüyyüüme Hme Hıızzıınnıın Hesaplanmasn Hesaplanmasıı
••
Algal kAlgal küültltüürlerde brlerde büüyyüüme hme hıızzıı
dxdx//dtdt’’ninnin
diferansiyeli diferansiyeli şşeklinde eklinde hesaplanabilir. Formhesaplanabilir. Formüüldeki x hldeki x hüücre saycre sayııssıı, karbon, azot, klorofil , karbon, azot, klorofil aa vs. vs. olabilir.t ise zamanolabilir.t ise zamanıı
ifade eder.ifade eder.
BBüüyyüüme hme hıızzıı; ; dxdx
. . 1 1 dtdt
xx
••
EEğğer her hüücre artcre artışış
hhıızzıı
logaritmik fazda oldulogaritmik fazda olduğğu gibi belirli bir zaman u gibi belirli bir zaman periyodu boyunca sabitse denklem bilinen periyodu boyunca sabitse denklem bilinen üüssel bssel büüyyüüme denklemine me denklemine entegre edilebilir.entegre edilebilir.
= = dxdx
. . 1 1
dtdt
xx
BBüüyyüüme Hme Hıızzıınnıın Hesaplanmasn Hesaplanmasıı
BBüüyyüüme Hme Hıızzıınnıın Hesaplanmasn Hesaplanmasıı
Spesifik bSpesifik büüyyüüme hme hıızzıı
olarak tanolarak tanıımlanan (mlanan (µµ) ) biyomastabiyomasta
birim birim zamanda meydana gelen zamanda meydana gelen nisbinisbi
yada kyada kıısmi artsmi artışıışı
ifade eder. Alg ifade eder. Alg
kküültltüürlerinde grlerinde gööz z öönnüüne alne alıınan zaman birimleri, genellikle saatnan zaman birimleri, genellikle saat--11
veya gveya güünn--11
dirdir..
Alg kAlg küültltüürlerinde brlerinde büüyyüüme, genellikle hme, genellikle hüücre saycre sayııssıındaki veya ndaki veya konsantrasyonunda birim zamanda olukonsantrasyonunda birim zamanda oluşşan artan artışış
olarak kabul edilir. olarak kabul edilir.
Buna baBuna bağğllıı
olarak bolarak büüyyüüme hme hıızzıı
da gda güünlnlüük bk bööllüünme saynme sayııssıı
yada yada ikilenme adedi olarak hesaplanikilenme adedi olarak hesaplanıır. r. ÇüÇünknküü
gergerççekte hekte hüücre cre
bbööllüünmesinin anlamnmesinin anlamıı, onun ikilenmesi yani iki kat, onun ikilenmesi yani iki katıına na ççııkmaskmasıı demektir. Bu nedenle gdemektir. Bu nedenle güünlnlüük bk bööllüünme adedi baknme adedi bakıımmıından bndan büüyyüümenin menin
hesaplanmashesaplanmasıında kullannda kullanıılan en mantlan en mantııklklıı
taban logtaban log
22
tabantabanııddıır. r.
DolayDolayııssııyla denklem;yla denklem;
şeklinde yazılabilir. Bu işlem pratik olarak;
şekline dönüştürülerek yapılır.
HHüücre Saycre Sayııssıınnıın Tespitin Tespiti
••
Alg kAlg küültltüürlerindeki hrlerindeki hüücre saycre sayııssıınnıın bulunmasn bulunmasıında ve bnda ve büüyyüümenin menin izlenmesinde kullanizlenmesinde kullanıılan lan ççeeşşitli sayma kamaralaritli sayma kamaralarıı
mevcuttur. Bunlar mevcuttur. Bunlar
arasarasıında karelerin bnda karelerin büüyyüüklklüüğğüü, bunlar, bunlarıın sn sııralanralanışıışı, total derinlik, total , total derinlik, total hacim gibi dehacim gibi değğiişşkenlerde farklkenlerde farklııllııklar vardklar vardıır. Dolayr. Dolayııssııyla farklyla farklıı
sayma sayma
kamaralarkamaralarıı
farklfarklıı
bbüüyyüüklklüükteki ve kteki ve şşekildeki hekildeki hüücreler ile bunlarcreler ile bunlarıın n farklfarklıı
yoyoğğunluktaki kunluktaki küültltüürlerini saymaya yarar.rlerini saymaya yarar.
••
Sayma kamaralarSayma kamaralarıınnıın temel tipleri n temel tipleri GuillardGuillard
(1978) taraf(1978) tarafıından ndan şşu u şşekilde ekilde öözetlenmizetlenmişştir.tir.
Sayma KamaralarSayma Kamaralarıı
SedgwickSedgwick--RafterRafter
: : ÖÖllççeksiz ve dikdeksiz ve dikdöörtgensel (50X20 mm) rtgensel (50X20 mm) kamara, 1 mm derinlik, 1000 mm kare ykamara, 1 mm derinlik, 1000 mm kare yüüzey alan ve 1 ml zey alan ve 1 ml hacme sahiptir. Genellikle bhacme sahiptir. Genellikle büüyyüük hk hüücrelerin saycrelerin sayıımmıında nda kullankullanııllıır (r (ŞŞekil).ekil).
PalmerPalmer--MaloneyMaloney::ÖÖllççeksiz, dairesel, eksiz, dairesel, ççap 17.9 mm, derinlik ap 17.9 mm, derinlik 400 400 µµm (0.4 mm), ym (0.4 mm), yüüzey alanzey alanıı
250 mm 250 mm 22
, total hacim 0.1 , total hacim 0.1
mlml’’dirdir. Basit bir yap. Basit bir yapııya sahip ve bya sahip ve büüyyüük hk hüücrelerin saycrelerin sayıımmıına na elverielverişşlidir (lidir (ŞŞekil).ekil).
Sayma KamaralarSayma Kamaralarıı
••
HemasitometreHemasitometre: : İİki tipi mevcuttur; ki tipi mevcuttur; FuchFuch--RosenthalRosenthal ööllççeklerine sahip olan (eklerine sahip olan (ŞŞekil) ve ekil) ve NeubauerNeubauer
veya geliveya gelişştirilmitirilmişş
NeaubauerNeaubauer
ööllççeklerine sahip olan (eklerine sahip olan (ŞŞekil) ekil) hemasitometrelerdirhemasitometrelerdir..••
a.a.
FuchFuch--RosenthalRosenthal
Tip Tip HemasitometreHemasitometre: : YYüüzey alanzey alanıı
her her
birinin kenarbirinin kenarıı
1 mm olan 116 geni1 mm olan 116 genişş
kareye bkareye bööllüünmnmüüşşttüür. Her r. Her bir kare, kenarlarbir kare, kenarlarıı
250 250 µµm olan 6 kareye daha bm olan 6 kareye daha bööllüünmnmüüşşttüür. r.
Bu kBu küçüüçük kareler 1/16 mm k kareler 1/16 mm 22
(6.25X10 (6.25X10 ––22
mm mm 22
veya 6.25X10 veya 6.25X10
––44
cm cm 22) alana sahiptir. Kamaran) alana sahiptir. Kamaranıın derinlin derinliğği 0.2 i 0.2
mmmm’’dirdir.B.Bööylece her bir kylece her bir küçüüçük kare (6.25X10 k kare (6.25X10 ––4 4 cmcm22X0.02 cm X0.02 cm veya 1.25X10veya 1.25X10--55
cmcm22) sahiptir. Her bir geni) sahiptir. Her bir genişş
kare (0.1 cmkare (0.1 cm
X 0.1 X 0.1
cmX0.02 cm) 2X10cmX0.02 cm) 2X10--44
ml, hacme sahipken, kamaranml, hacme sahipken, kamaranıın total n total
hacmi (0.4 cmX0.4 cmX0.2 cm) 32X10hacmi (0.4 cmX0.4 cmX0.2 cm) 32X10--44
mlml’’dirdir
((ŞŞekil).ekil).
Sayma KamaralarSayma Kamaralarıı
••
NeubaeurNeubaeur
Tip Tip HemasitometreHemasitometre::
neubauerneubauer
ve gelive gelişştirilmitirilmişş NeubauerNeubauer
olmak olmak üüzere iki tipi mevcuttur. Her zere iki tipi mevcuttur. Her ikisideikiside
9 adet 1 9 adet 1
mmmm’’liklik
karelere sahiptir ancak farklkarelere sahiptir ancak farklıı
şşekillerde ekillerde bbööllüünmnmüüşşlerdir (lerdir (ŞŞekil). Bu kamaralar 0.1 mm veya 0.01 cm ekil). Bu kamaralar 0.1 mm veya 0.01 cm derinliderinliğğe sahiptir.e sahiptir.
••
GeliGelişştirilmitirilmişş
tipteki tipteki neubauerneubauer
sayma lamsayma lamıında 9 adet 1 mmnda 9 adet 1 mm22’’lik lik kareler farklkareler farklıı
şşekillerde bekillerde bööllüünmnmüüşşttüür (r (ŞŞekil ). 2.,4.,6., ve 8. ekil ). 2.,4.,6., ve 8.
kareler kendi araskareler kendi arasıında 20 dikdnda 20 dikdöörtgene; 1.,3.7., ve 9. kareler rtgene; 1.,3.7., ve 9. kareler kendi araskendi arasıında 16 kareye bnda 16 kareye bööllüünmnmüüşşttüür. Buradaki her bir kr. Buradaki her bir küçüüçük k kare 16 kareye daha bkare 16 kareye daha bööllüünmnmüüşş
ve toplam (25X16) 400 kareye ve toplam (25X16) 400 kareye
sahip olmusahip olmuşştur.tur.••
DolayDolayııssııyla en kyla en küçüüçük 400 kare 1/400 mmk 400 kare 1/400 mm22
yani (2.5X10yani (2.5X10--3 3
mmmm22, 2.5X10, 2.5X10--55
cmcm22) alana sahiptir ve her bir karenin hacmi ) alana sahiptir ve her bir karenin hacmi
2.5X102.5X10--77
mlml’’dirdir. Kamaran. Kamaranıın total hacmi (0.3 cmX0.3 n total hacmi (0.3 cmX0.3
cmX0.01 cmX0.01 ccçç) 9X10) 9X10--44
mlml’’dirdir..
Sayma KamaralarSayma Kamaralarıı
••
4. 4. PetroofPetroof
HauserHauser
Bakteri Sayma LamBakteri Sayma Lamıı: : GeliGelişştirilmitirilmişş
NeubauerNeubauer ööllççeklerine ve 0.02 mm derinlieklerine ve 0.02 mm derinliğğe sahiptir. e sahiptir. ÖÖllççeklenmieklenmişş
alanalanıın total n total
hacmi 1.8X10hacmi 1.8X10--55
mlml’’dirdir. Lam. Lamıın n üüzerine zerine immersiyonimmersiyon
yayağığı
damlatdamlatıılarak larak
yyüüksek bksek büüyyüütmede incelenebilir. 1 karedeki ortalama 1 htmede incelenebilir. 1 karedeki ortalama 1 hüücrelik crelik saysayıı, 5X10, 5X1044h/h/mlml’’liklik
bir hbir hüücre yocre yoğğunluunluğğu verir (u verir (ŞŞekil).ekil).
a. Sedgwick-Raffer, b.Palmer-Maloney, C. Kan sayımı yapılan tip (Fuch-Rosental
veya Neubauer), d. Pertoff-
Hausser
bakteri ayım kamarası
Fuch-Rosenthal
sayma lamı
Geliştirilmiş
Neubauer
tip sayma lamı
SaySayıım Ym Yööntemintemi••
SaySayıım lamlarm lamlarıı
öörnekle doldurulmadan rnekle doldurulmadan öönce iyice temizlenmeli nce iyice temizlenmeli
ve kurutulmalve kurutulmalııddıır. Sayma kamarasr. Sayma kamarasıı
temiz ve yatemiz ve yağğssıız olmalz olmalııddıır r çüçünknküü
kamarankamaranıın n üüzerine ellerden gezerine ellerden geççecek bir yaecek bir yağğ
tabakastabakasıı, ,
kamara ikamara iççine konan ine konan öörnerneğğin dain dağığıllıımmıınnıı
ggüçüçleleşştirir ve tirir ve öönemli nemli bir hata kaynabir hata kaynağığı
oluoluşşturur. Temizleme iturur. Temizleme işşleminde kamara leminde kamara öönce nce
deterjanla ydeterjanla yııkankanııp suyla iyice p suyla iyice ççalkalanalkalanıır, silinir, etanol yada r, silinir, etanol yada asetonlu pamukla silindikten sonra temiz bir tasetonlu pamukla silindikten sonra temiz bir tüülbent beziyle lbent beziyle kurutulur. Lamel de aynkurutulur. Lamel de aynıı
iişşlemlerden gelemlerden geççirilir. Kamaranirilir. Kamaranıın n
üüzerinde lamelin oturacazerinde lamelin oturacağığı
yer hafifyer hafifççe e ııslatslatııllıır ve lamel r ve lamel kamara kamara üüzerine hizerine hiçç
hareket etmeyecek hareket etmeyecek şşekilde yapekilde yapışışttıırrııllıır. r.
SaySayıılacak lacak öörnek rnek homojenizehomojenize
edildikten sonra, edildikten sonra, pastpastöörr
pipetiyle pipetiyle bir miktarbir miktarıı
alalıınarak saynarak sayııma hazma hazıır hale getirilen kamaraya r hale getirilen kamaraya
dikkatlice doldurulur ve hdikkatlice doldurulur ve hüücrelerin tcrelerin tüüm kamara alanm kamara alanıına na homojen olarak dahomojen olarak dağığılmaslmasıı
sasağğlanlanıır. Sayr. Sayıım im işşlemine gelemine geççmeden meden
öönce hnce hüücrelerin crelerin çöçökmesi ikmesi iççin 3in 3--5 dakika beklenir ve say5 dakika beklenir ve sayıım m iişşlemine gelemine geççilir. Bu iilir. Bu işşlemler yaplemler yapıılacak saylacak sayıımmıın don doğğruluruluğğunu unu etkileyen en etkileyen en öönemli noktalardnemli noktalardıır.r.
SaySayıım Ym Yööntemintemi••
Bir Bir öörnekteki hrnekteki hüücre konsantrasyonunun istatistiksel tayini icre konsantrasyonunun istatistiksel tayini iççin en az 4 in en az 4 ardardııl sayl sayıım yapm yapıılmallmalııddıır. Yani sayma kamarasr. Yani sayma kamarasıı
2 veya 4 kere yeniden 2 veya 4 kere yeniden
doldurularak ayrdoldurularak ayrıı
ayrayrıı
saysayıılmallmalııddıır. Tekrarlanan bu sayr. Tekrarlanan bu sayıımlardaki mlardaki hhüücrelerin toplamcrelerin toplamıı
10001000’’dn az olamamaldn az olamamalııddıır (r (üüst sst sıınnıır 300r 300--400 h400 hüücreden creden
fazla olmamalfazla olmamalıı). ). ÇüÇünknküü
bu sayma kamaralarbu sayma kamaralarıındaki hndaki hüücreler creler PoissonPoisson dadağığıllıımmıına sahiptir. na sahiptir. PoissonPoisson
dadağığıllıımmıına uyan hna uyan hüücrelerin saycrelerin sayııssıı
ancak ancak
ardardııl sayl sayıımlarla, istatistiki mlarla, istatistiki öönem tanem taşışıyan rakamlar elde edilerek tahmin yan rakamlar elde edilerek tahmin edilebilir. Zincir formundaki hedilebilir. Zincir formundaki hüücrelerle yapcrelerle yapıılan saylan sayıımlarda total hmlarda total hüücre cre saysayııssıı
ççok yok yüüksek ksek ççııkabilir. Bu nedenle zincir formuna sahip hkabilir. Bu nedenle zincir formuna sahip hüücrelerin crelerin
saysayıılmadan lmadan öönce iyice nce iyice ççalkalanarak kalkalanarak kıırrıılmaslmasıı, g, güüven aralven aralığıığınnıın n daralmasdaralmasıınnıı
ve hassasiyetin artmasve hassasiyetin artmasıınnıı
sasağğlar. Zincirleri klar. Zincirleri kıırma irma işşlemi bir lemi bir
homojenithomojenitöörderde
yada bir yada bir vortexvortex
karkarışışttıırrııccııssıında yapnda yapıılabilir. Bu ilabilir. Bu işşlem lem yapyapııllıırken hrken hüücrelerin tamamen parcrelerin tamamen parççalanmamasalanmamasıına dikkat edilmelidir. na dikkat edilmelidir. ÖÖrnerneğğin 30in 30--40 40 µµmm’’dandan
daha bdaha büüyyüük bir k bir ççapa sahip hapa sahip hüücre cre homojenizehomojenize
edilmez, edilmez, çüçünknküü
tamamen partamamen parççalanma olasalanma olasııllığıığı
daha ydaha yüüksektir.ksektir.
SaySayıım Ym Yööntemintemi
••
Alg kAlg küültltüürlerindeki hrlerindeki hüücre konsantrasyonu ayncre konsantrasyonu aynıı
zamanda bu zamanda bu hhüücrelerin bcrelerin büüyyüüklklüüğğüü
ileile
de ilgilidir. Bde ilgilidir. Büüyyüük hk hüücreler niscreler nisppeten daha eten daha
ddüüşşüük hk hüücre konsantrasyonuna sahiptir. Bcre konsantrasyonuna sahiptir. Büüyyüük k dinoflagellatdinoflagellat
ttüürleri, rleri, öörnerneğğin in CeratiumCeratium ttüürrüü
olgun kolgun küültltüürlerinde genellikle 1000rlerinde genellikle 1000--5000 5000
hhüücre/cre/mlml’’liklik
maksimum konsantrasyona sahiptir. Daha kmaksimum konsantrasyona sahiptir. Daha küçüüçük k öörnerneğğin in SkeletonemaSkeletonema costatumcostatum, , ThalassiosiraThalassiosira pseudonanapseudonana, , Phaeodactylum Phaeodactylum triconutumtriconutum vs. gibi tvs. gibi tüürlerse olgun krlerse olgun küültltüürlerde 10rlerde 1066
hhüücre/ml ve katlarcre/ml ve katlarıı
şşeklinde konsantrasyona sahip olabilirler. Daha eklinde konsantrasyona sahip olabilirler. Daha kküçüüçük planktonik alg tk planktonik alg tüürleri (5 rleri (5 µµm yada daha km yada daha küçüüçük hk hüücre cre ççapapıına na sahip olanlar; sahip olanlar; öörnerneğğin in IsIsoochrysischrysis galbanagalbana, , PavlovaPavlova lutherilutheri gibi gibi ttüürler) genellikle 10rler) genellikle 1077
hhüücre/ml gibi ycre/ml gibi yüüksek hksek hüücre cre
konsantrasyonlarkonsantrasyonlarıına ulana ulaşşabilirler.abilirler.
SaySayıım Ym Yööntemintemi
••
İşİşte farklte farklıı
tipteki sayma kamaralartipteki sayma kamaralarıı
da farklda farklıı
hhüücre bcre büüyyüüklklüüklerine klerine ve sayve sayıılarlarıına sahip kna sahip küültltüürlerdeki brlerdeki büüyyüümenin daha kolay izlenmesine menin daha kolay izlenmesine yyöönelik olarak dizayn edilminelik olarak dizayn edilmişşlerdir. lerdir. ÇüÇünknküü
hhüücre bcre büüyyüüklklüüğğüü
ve ve
hhüücre konsantrasyonu arascre konsantrasyonu arasıında yukarnda yukarııda bahsedilen ilida bahsedilen ilişşki, aynki, aynıı zamanda sayma kamaralarzamanda sayma kamaralarıı
arasarasıında da vardnda da vardıır. Bu nedenle sayma r. Bu nedenle sayma
kamaralarkamaralarıında belirli bir hnda belirli bir hüücre bcre büüyyüüklklüüğğüü
ve hve hüücre konsantrasyonu cre konsantrasyonu aralaralığıığına sahip na sahip öörnekler sayrnekler sayıılabilir. Tablolabilir. Tablo’’da 3 sayma kamarasda 3 sayma kamarasıı
iiççin in
bu aralbu aralııklar klar öörneklerle belirtilmirneklerle belirtilmişştir.tir.
TABLOTABLO--
FarklFarklıı
HHüücre konsantrasyonlarcre konsantrasyonlarıına sahip alg na sahip alg kküültltüürlerinin sayma kamaralarrlerinin sayma kamaralarıında istatistik olarak nda istatistik olarak beklenen hbeklenen hüücre saycre sayıılarlarıı
Kültürdeki Hücre Konsantrasyonu (Hücre/ml)
Palmer-Maloney0.1 ml
Fuchs-Rosenthal3.2X10 –3 ml
Geliştirilmiş
Neubauer9X10 –4 ml
102 10 0 0
103 100 3.2 0.9
104 1000 32 9
105 104 320 90
106 105 3200 900
107 106 3.2X104 9X103
SaySayıım Ym Yööntemintemi
••
Tablo ya gTablo ya gööre re öörnerneğğin 10in 1033
hhüücre/cre/mlml’’denden
daha ddaha düüşşüük k
konsantrasyona sahip kkonsantrasyona sahip küültltüür r PalmerPalmer--MaloneyMaloney
ile sayile sayıılmallmalııddıır. r. EEğğer ker küültltüürdeki yordeki yoğğunluk 1000 hunluk 1000 hüücre/ml cre/ml ‘‘den daha dden daha düüşşüükse kse bu kbu küültltüürlerdeki hrlerdeki hüücreler dicreler diğğer kamaralarer kamaralarıın karelerinde hin karelerinde hiçç
ggöörrüülmez (Tablo). 10lmez (Tablo). 1033--
101044
hhüücre/ml arascre/ml arasıındaki hndaki hüücre cre
yoyoğğunluunluğğu iu iççin in PalmerPalmer--maloneymaloney
kullankullanıılabilir. Elabilir. Eğğer er öörnekte rnekte 3000 h3000 hüücre/ml cre/ml ‘‘den daha yden daha yüüksek bir hksek bir hüücre konsantrasyonu cre konsantrasyonu varsa sulandvarsa sulandıırma yaprma yapıılabilir. labilir. ÇüÇünknküü
her bir kamarada 300her bir kamarada 300’’den den
fazla hfazla hüücre saymak anlamscre saymak anlamsıızdzdıır ve bu bor ve bu boşş
yere zaman ve yere zaman ve emek sarfemek sarfıı
demektir. Ancak 15 demektir. Ancak 15 µµmm’’dandan
daha kdaha küçüüçük hk hüücre cre
ççapapıına sahip tna sahip tüürler irler iççin in çöçöktktüürmek yada santrifrmek yada santrifüüjle jle öörnerneğği i konsantre etmek tavsiye edilir. konsantre etmek tavsiye edilir. ÖÖrnerneğğin 400 hin 400 hüücre/cre/mlml’’liklik
bir bir
hhüücre cre öörnerneğği 5 kat konsantre edilirse 20000 hi 5 kat konsantre edilirse 20000 hüücre/cre/mlml’’liklik
bir bir konsantrasyon verir. Bu konsantrasyon verir. Bu öörnek (rnek (FuchsFuchs--RosenthalRosenthal
lamlamıında) nda)
yaklayaklaşışık 64 hk 64 hüücre/cre/mlml’’liklik
bir saybir sayıı
verecevereceğğinden kolaylinden kolaylııkla kla saysayıılabilir.labilir.
SaySayıım Ym Yööntemintemi
••
HHüücre bcre büüyyüüklklüüğğüü
ile sayma kamarasile sayma kamarasıınnıın derinlin derinliğği de gi de gööz z öönnüünde nde bulundurulmasbulundurulmasıı
gereken bir digereken bir diğğer er öönemli husustur. nemli husustur. ÖÖrnerneğğin kin küçüüçük k
hhüücre cre ççapapıına sahip tna sahip tüürlerin sayrlerin sayıımmıı
PalmerPalmer--MaloneyMaloney’’dede
yapyapıılamaz. lamaz. ÇüÇünknküü
bu kamaranbu kamaranıın derinlin derinliğği 0.4 mm (400 i 0.4 mm (400 µµm)m)’’dirdir. K. Küçüüçük tk tüürlerin rlerin
bu derinlikte dibe batmasbu derinlikte dibe batmasıı
beklenemez. beklenemez. KaldKaldııkiki
bazbazıı
dinoflagellatdinoflagellat ttüürleri santrifrleri santrifüüjle bile iyi bir jle bile iyi bir çöçökelme vermez. 10kelme vermez. 1044
hhüücre/cre/mlml’’denden
daha daha
yoyoğğun un öörnekler dirnekler diğğer iki kamarayla kolayler iki kamarayla kolaylııkla saykla sayıılabilirler. labilirler. ÇüÇünknküü bu tip kamaralar kantitatif olarak bu tip kamaralar kantitatif olarak ççok daha kok daha küçüüçük hacimlere sahip k hacimlere sahip
karelere bkarelere bööllüünmnmüüşşlerdir.lerdir.
SonuSonuççlarlarıın Den Değğerlendirilmesierlendirilmesi
••
Daha Daha ööncede ancede aççııklandklandığıığı
gibi bgibi büüyyüüme, kantitatif yme, kantitatif yööntemle; yani ntemle; yani “ç“çok az bok az büüyyüüme var veya hime var veya hiçç
bbüüyyüüme yokme yok””
şşeklinde eklinde
dedeğğerlendirilebilir. Ancak bu yerlendirilebilir. Ancak bu yööntem rutin ntem rutin ççalalışışmalar imalar iççin gein geççerlidir erlidir ve bve büüyyüümenin bu menin bu şşekilde izlenmesiyle bir araekilde izlenmesiyle bir araşşttıırmanrmanıın sonun sonuççlarlarıı
dedeğğerlendirilemez. Berlendirilemez. Bööyle deyle değğerler ancak bir tabloda yererler ancak bir tabloda yer
alabilir ve alabilir ve bbüüyyüümeyi uygun imeyi uygun işşaretlerle ifade edebiliriz (aretlerle ifade edebiliriz (öörnerneğğin ++, +, in ++, +, --
gibi). gibi).
BBööyle bir deyle bir değğerlendirme bize ancak kerlendirme bize ancak küültltüür hakkr hakkıında genel bilgi nda genel bilgi
verebilir.verebilir.
SonuSonuççlarlarıın Den Değğerlendirilmesierlendirilmesi
••
Kantitatif deKantitatif değğerlerse (erlerse (öörnerneğğin hin hüücre saycre sayııssıı, optik yo, optik yoğğunluk, klorofil unluk, klorofil miktarmiktarıı
yada birim ayada birim ağığırlrlıık gibi) grafikle en iyi k gibi) grafikle en iyi şşekilde ifade ekilde ifade
edilebilir. Bedilebilir. Bööyle kantitatif bir deyle kantitatif bir değğerlendirme alg kerlendirme alg küültltüürrüünnüün gidin gidişşi, i, sonusonuççlarlarıı
ve ortam kove ortam koşşullarullarııyla iliyla ilişşkileri hakkkileri hakkıında kesin bilgiler nda kesin bilgiler
verir.verir.
KKüültltüür Tekniklerir Teknikleri
••
Kesikli KKesikli Küültltüürlerrler: : Daha Daha öönce bnce büüyyüüme dinamikleri konusunda me dinamikleri konusunda bahsedildibahsedildiğği gibi alg ki gibi alg küültltüürlerindeki brlerindeki büüyyüüme fazlarme fazlarıınnıı
bilmek, bilmek,
kullankullanıılan farkllan farklıı
tekniklerin daha iyi anlatekniklerin daha iyi anlaşışılmaslmasıına yardna yardıımcmcıı olacaktolacaktıır. Algal br. Algal büüyyüümedeki karakteristik fazlarmedeki karakteristik fazlarıı
ancak kesikli ancak kesikli
teknikle yapteknikle yapıılan klan küültltüürlerde grlerde göörebiliriz. Krebiliriz. Küültltüür ortamr ortamıına ana aşışılanan lanan hhüücrelerin bcrelerin büüyyüümeye bameye başşlamadan lamadan öönce ortama uyum ince ortama uyum iççin bit in bit duraklama evresi geduraklama evresi geççirmesi, sonra logaritmik bir irmesi, sonra logaritmik bir şşekilde artmasekilde artmasıı, , belli bir noktada bbelli bir noktada büüyyüümenin yavamenin yavaşşlayarak blayarak büüyyüümenin sabit bir menin sabit bir evreye girmesi kesikli kevreye girmesi kesikli küültltüürlerde (srlerde (süüreksiz, reksiz, batchbatch) g) göözlenir. zlenir.
KKüültltüür Tekniklerir Teknikleri••
Bu kBu küültltüür teknir tekniğğinin inin öözellizelliğği sabit hacimde yapi sabit hacimde yapıılmaslmasııddıır. Yani belirli r. Yani belirl
i
hacimdeki khacimdeki küültltüür ortamr ortamıına hna hüücreler alcreler alıınnıır, belli bir sr, belli bir süüre sonra bre sonra büüyyüüme me babaşşladladığıığında hnda hüücreler ortamdaki creler ortamdaki nnüütrientleritrientleri
kullanarak logaritmik (kullanarak logaritmik (üüssel, ssel,
exponentialexponential) olarak artmaya ba) olarak artmaya başşlarlar. Bu artlarlar. Bu artışış
ortamdaki ortamdaki nnüütrientlertrientler
hhüücreler creler taraftarafıından tndan tüüketilinceye kadar devam eder. Bketilinceye kadar devam eder. Büüyyüümenin belli bir noktasmenin belli bir noktasıında nda nnüütrientlertrientler
ttüükenir. kenir. ÇüÇünknküü
taze ortam giritaze ortam girişşi yoktur ve ortam i yoktur ve ortam
yenilenmemektedir. Bu nedene kesikli kyenilenmemektedir. Bu nedene kesikli küültltüürlerde hrlerde hüücreler ulacreler ulaşşttııklarklarıı
bir bir maksimumdan sonra bmaksimumdan sonra büüyyüüme durur. Bme durur. Büüyyüümenin durmasmenin durmasıında nda nnüütrientlerintrientlerin
ttüükenmesinden bakenmesinden başşka hka hüücrelerin kendilerinin hcrelerin kendilerinin hüücre dcre dışıışı
salgsalgıılarlarııyla neden yla neden olduklarolduklarıı
toksiktoksik
madde birikimi ve bmadde birikimi ve büüyyüümenin ulamenin ulaşşttığıığı
maksimum noktada maksimum noktada
ışığışığa doygun ha doygun hüücrelerin olucrelerin oluşşmasmasıı
gibi faktgibi faktöörlerin etkisi brlerin etkisi büüyyüüktktüür. Ir. Işığşığa doygun a doygun hhüücreler mevcut creler mevcut ışıışık enerjisinden daha fazla yararlanamazlar ve bu olgu k enerjisinden daha fazla yararlanamazlar ve bu olgu
fotosentez hfotosentez hıızzıınnıın n öönemli nemli ööllçüçüde dde düüşşmesiyle sonumesiyle sonuççlanlanıır. Hr. Hüücrelerin ulacrelerin ulaşşttığıığı
bir bir maksimumda, artan hmaksimumda, artan hüücre yocre yoğğunluunluğğunun sonucu olarak hunun sonucu olarak hüücrelerin birbirini crelerin birbirini ggöölgelemesiyle lgelemesiyle ışığıışığın sn sıınnıırlayrlayııccıı
etkisi ayretkisi ayrııca ortaya ca ortaya ççııkar.kar.
Fitoplankton kFitoplankton küültltüürlerirleri
KontrollKontrollüü ortamda saklanan saf ortamda saklanan saf kküültltüürlerrler
Kesikli KKesikli Küültltüürlerdeki rlerdeki ÜÜretim retim ŞŞemasemasıı
Kesikli Alg KKesikli Alg Küültltüür Teknir Tekniğği i İİççin Genel in Genel ÜÜretim retim ŞŞemasemasıı
(Lee ve (Lee ve TamaruTamaru, 1993)., 1993).
Alglerin Ekim Alglerin Ekim İşİşleminden leminden öönce nce ErlenlerinErlenlerin HazHazıırlanmasrlanmasıı
ErlenlereErlenlere
nutrientlerin ilavesinutrientlerin ilavesi
Alg kAlg küültltüürleri irleri iççin kullanin kullanıılan alternatif lan alternatif kaplarkaplar
KarboyKarboy
KKüültltüür Sistemi (r Sistemi (FoxFox, 1983)., 1983).
KarboyKarboy
KKüültltüür Sistemi (r Sistemi (FoxFox, 1983)., 1983).
150 150 ltlt
hacmindeki silindirlerde hacmindeki silindirlerde Mikroalglerin Kesikli KMikroalglerin Kesikli Küültltüürlerirleri
Alg kAlg küültltüür r ççalalışışmalarmalarıı
iiççin kullanin kullanıılan lan kküçüüçük polyester torbalark polyester torbalar
Alg kAlg küültltüür operasyonlarr operasyonlarıı
iiççin kullanin kullanıılan lan orta ve borta ve büüyyüük boydaki polyester torbalark boydaki polyester torbalar
20,000 20,000 ltlt
hacmindeki tanklarda alglerin hacmindeki tanklarda alglerin Kesikli KKesikli Küültltüürlerirleri
KKüültltüür Tekniklerir Teknikleri••
SSüürekli Krekli Küültltüürlerrler: : BBüüyyüümenin durmasmenin durmasıına neden olan tna neden olan tüüm bu faktm bu faktöörler bir rler bir babaşşka kka küültltüür teknir tekniğği ile giderilebilir. Bu ki ile giderilebilir. Bu küültltüür teknir tekniğği kesiksiz yada si kesiksiz yada süürekli rekli ((continouscontinous) k) küültltüür diye adlandr diye adlandıırrııllıır. Sr. Süürekli krekli küültltüür teknir tekniğği algal i algal biyoteknolojidebiyoteknolojide
uygulanan yeni tekniklerden biridir. Sabit hacimlerde yapuygulanan yeni tekniklerden biridir. Sabit hacimlerde yapıılan kesikli klan kesikli küültltüürlere rlere ggööre pek re pek ççok avantajok avantajıı
vardvardıır. Bu nedenle hem r. Bu nedenle hem üüretim amaretim amaççllıı
hem de deneysel hem de deneysel
amaamaççllıı
sistemlerde daha sasistemlerde daha sağğllııklklıı
olarak uygulanabilen bir yolarak uygulanabilen bir yööntemdir. ntemdir. KemostatKemostat olarak da adlandolarak da adlandıırrıılan bu sistemde blan bu sistemde büüyyüümenin belli bir noktasmenin belli bir noktasıında snda sıınnıırlayrlayııccıı olan bir olan bir nnüütrienttrient
ortama sortama süürekli olarak verilir. Sistem rekli olarak verilir. Sistem şşekil ekil …’…’de gde göörrüüldldüüğğüü
gibi taze bgibi taze büüyyüüme ortamme ortamıınnıın bulundun bulunduğğu bir kap (1), bunu hu bir kap (1), bunu hüücrelerin bulunducrelerin bulunduğğu u kaba hassas bir ayarla gkaba hassas bir ayarla göönderen bir nderen bir peristaltikperistaltik
pompa (2), algal bpompa (2), algal büüyyüüme ime iççin in
gerekli gerekli ışıışık kaynak kaynağığı
(3), havaland(3), havalandıırma sistemi ve rma sistemi ve homojenizasyonuhomojenizasyonu
etkili etkili bibiççimde saimde sağğlayan bir manyetik karlayan bir manyetik karışışttıırrııccııdan (4) oludan (4) oluşşmumuşştur. Btur. Bööyle bir yle bir sistemde ortama ssistemde ortama süürekli taze besinler girer ve ortamdan srekli taze besinler girer ve ortamdan süürekli rekli üürrüün ve yan n ve yan üürrüünle nle ççııkar. Ortamda olukar. Ortamda oluşşan yan an yan üürrüünler (hnler (hüücre dcre dışıışı
salgsalgıılar) slar) süürekli olarak rekli olarak
ortamdan uzaklaortamdan uzaklaşşttıırrııldldığıığından (giren taze besin ortamndan (giren taze besin ortamııyla yer deyla yer değğiişştirir), tirir), bbüüyyüümeye ket vuran bu maddeler ortamda birikim yapmaz. Ayrmeye ket vuran bu maddeler ortamda birikim yapmaz. Ayrııca sca süürekli rekli olarak taze besin ortama girdiolarak taze besin ortama girdiğğinden binden büüyyüümeyi belli bir noktada smeyi belli bir noktada sıınnıırlayan rlayan nnüütrientintrientin
ssıınnıırlayrlayııccıı
etkisietkisi
de ortadan kaldde ortadan kaldıırrıılmlmışış
olur.olur.
KKüültltüür Tekniklerir Teknikleri
••
Kesikli kKesikli küültltüürlerde brlerde büüyyüümenin durmasmenin durmasıına neden olan bu faktna neden olan bu faktöörler, rler, kemostatkemostat
sisteminde ortadan kaldsisteminde ortadan kaldıırrıılmlmışışttıır. Kesikli kr. Kesikli küültltüürlerde rlerde
ortamdaki nutrientlerin tortamdaki nutrientlerin tüükenmesiyle ve hkenmesiyle ve hüücre dcre dışıışı
salgsalgıılarlarıın n birikmesiyle olubirikmesiyle oluşşan ket vurucu faktan ket vurucu faktöörler giderilmirler giderilmişş
olur. Bir taraftan olur. Bir taraftan
taze besin ortama girip, ditaze besin ortama girip, diğğer taraftan organik er taraftan organik üürrüün aln alıındndığıığından ndan kküültltüür sr süürekli olarak aktif brekli olarak aktif büüyyüüme fazme fazıında kalnda kalıır ve kesikli kr ve kesikli küültltüür ir iççin in bahsedilen bbahsedilen büüyyüüme fazlarme fazlarıı
bu kbu küültltüür teknir tekniğğinde ginde göözlenmez. Ancak zlenmez. Ancak
kemostatkemostat
sisteminde ksisteminde küültltüürdeki denge halinin kurulmasrdeki denge halinin kurulmasıı
öönemli bir nemli bir husustur. husustur.
KKüültltüür Tekniklerir Teknikleri
••
Daha Daha öönce belirtildince belirtildiğği gibi logaritmik bi gibi logaritmik büüyyüüme fazme fazıında hnda hüücrelcreleerin rin artartışıışı, bu faz boyunca belirli bir oran dahilinde devam eder , bu faz boyunca belirli bir oran dahilinde devam eder ((=050 b=050 bööllüünme/gnme/güün veya n veya = 0.70 b= 0.70 bööllüünme/gnme/güün gibi). n gibi). İşİşte te kemostattakemostatta
bu spesifik bbu spesifik büüyyüüme hme hıızzıına uygunna uygun
bir sulandbir sulandıırma (D) rma (D)
seseççilmesi lazilmesi lazıımdmdıır. r. ÇüÇünknküü
sistemin bir denge halinde olmassistemin bir denge halinde olmasıı şşarttarttıır ve r ve =D olmal=D olmalııddıır. r. ÖÖrnerneğğin kin küültltüür sistemindeki br sistemindeki büüyyüüme me
hhıızzıı, logaritmik faz boyunca 0.70 b, logaritmik faz boyunca 0.70 bööllüünme/gnme/güün gibi bir den gibi bir değğerde erde sabit kaldsabit kaldııysa, sulandysa, sulandıırma hrma hıızzıı
da bu orana bada bu orana bağığımlmlıı
olmalolmalıı
ve yer ve yer
dedeğğiişştiren ortam miktartiren ortam miktarıı
da %70da %70’’de kalmalde kalmalııddıır. Bunun aksi r. Bunun aksi halinde yani halinde yani µµ> D olu> D olurrsa, sistem bir kesikli ksa, sistem bir kesikli küültltüüre dre döönnüüşşüür r yada yada µµ< D olursa h< D olursa hüücre scre süüppüürrüülmesi (lmesi (washoutwashout) olay) olayıı
meydana meydana
gelir ve kgelir ve küültltüür sisteminde hr sisteminde hüücre kalmaz ve bcre kalmaz ve büüyyüümekte olan mekte olan
hhüücreler, giren taze besin ortamcreler, giren taze besin ortamııyla birlikte dyla birlikte dışışararıı
atatııllıırlar. rlar.
KemostatKemostatıınn
bir debir değğiişşik ik şşekli de ekli de TurbidostatTurbidostat’’ddıırr. .
KKüültltüür Tekniklerir Teknikleri
••
Bu sistemin esasBu sistemin esasıınnıı
ortama sortama süürekli olarak rekli olarak nnüütrientlerintrientlerin
akakışıışı sasağğlanarak hlanarak hüücre yocre yoğğunluunluğğunu belirli bir dunu belirli bir düüzeyde tutmak oluzeyde tutmak oluşşturur. turur.
Yani bu sistemde Yani bu sistemde kemostattakemostatta
olduolduğğu gibi su gibi sıınnıırlayrlayııccıı
nnüütrientintrientin ortama belli bir oranda verilmesi deortama belli bir oranda verilmesi değğil, hil, hüücre yocre yoğğunluunluğğunun belli bir unun belli bir
sabitte tutulmassabitte tutulmasıı
amaamaççlanmlanmışışttıır. Temel olarak r. Temel olarak kemostatkemostat
sistemiyle sistemiyle aynaynıı
prensiplere sahiptir.prensiplere sahiptir.
SSüürekli Krekli Küültltüür Sistemi : (r Sistemi : (LaingLaing, 1991)., 1991).
40 40 ltlt
hacmindeki Shacmindeki Süürekli Krekli Küültltüür Tankr Tankıınnıın n ŞŞemasemasıı
((LaingLaing, 1991)., 1991).
40 40 ltlt
hacmindeki Shacmindeki Süürekli Krekli Küültltüür r TankTankıınnıın n ŞŞemasemasıı
((LaingLaing, 1991)., 1991).
Plastik Torbalarda Mikroalglerin SPlastik Torbalarda Mikroalglerin Süürekli Krekli Küültltüürleri.rleri.
SSüürekli Krekli Küültltüür operasyonlarr operasyonlarıınnıın yapn yapııldldığıığı BiyofenslerBiyofensler
SSüürekli Krekli Küültltüür operasyonlarr operasyonlarıınnıın yapn yapııldldığıığı BiyofenslerBiyofensler
KKüültltüür Tekniklerir Teknikleri
••
YYığıığın Kn Küültltüürlerrler: : Kesikli kKesikli küültltüür teknir tekniğği kullani kullanıılarak daha genilarak daha genişş hacimlerde yaphacimlerde yapıılan klan küültltüürlerdir. Hrlerdir. Hıızlzlıı
bir bbir büüyyüüme elde etmek ime elde etmek iççin in
etkili bir aydetkili bir aydıınlatma (3500nlatma (3500--5000 5000 luxlux
veya daha yveya daha yüüksek) ve ksek) ve havalandhavalandıırmanrmanıın san sağğlandlandığıığı
kküültltüür ortamr ortamıı, uygun , uygun nnüütrientlertrientler
ile ile
zenginlezenginleşştirilerek htirilerek hüücreler acreler aşışılanlanıır. Yr. Yüüksek bksek büüyyüüme hme hıızzıınnıı desteklemek idesteklemek iççin kin küültltüüre giren hava %1re giren hava %1--2 oran2 oranıında COnda CO
22
ile ile zenginlezenginleşştirilir. Bu itirilir. Bu işşlem ylem yığıığın kn küültltüürlerde daha yrlerde daha yüüksek bir ksek bir biyomasbiyomas
elde etmek ielde etmek iççin gereklidir. in gereklidir. İİstenen hstenen hüücre yocre yoğğunluunluğğuna ulauna ulaşışıldldığıığında nda üürrüün ya tamamen aln ya tamamen alıınnıır yada logaritmik fazdaki spesifik br yada logaritmik fazdaki spesifik büüyyüüme me hhıızzıı
oranoranıında alnda alıınnııp, ortama taze besinler girilerek kp, ortama taze besinler girilerek küültltüüre devam re devam
edilir (yaredilir (yarıı--ssüürekli krekli küültltüür). Br). Bööylece bylece büüyyüüme kesintisiz olarak devam me kesintisiz olarak devam ettirilmiettirilmişş
olur. Bu yolur. Bu yööntem genellikle rutin kntem genellikle rutin küültltüür r ççalalışışmalarmalarıında nda
uygulanuygulanıır.r.
Mikroalglerin yMikroalglerin yığıığın kn küültltüürlerirleri
Mikroalglerin yMikroalglerin yığıığın kn küültltüürlerirleri
Mikroalglerin yMikroalglerin yığıığın kn küültltüürlerirleri
BALIK BESLEMEDEBALIK BESLEMEDE
ROTROTİİFERFERİİN KULLANIMIN KULLANIMI
Larval Besleme Larval Besleme ÇÇalalışışmalarmalarıında nda Rotiferin KullanRotiferin Kullanıılmaslmasıınnıın Sebeplerin Sebepleri
••
BalBalıık larvalark larvalarıınnıı
dodoğğal besinini olual besinini oluşşturmasturmasıı,,••
LarvalarLarvalarıın an ağığız az aççııllığıığına uygun bna uygun büüyyüüklklüükte kte olmalarolmalarıı,,
••
DoDoğğal ortamdan izolasyonlaral ortamdan izolasyonlarıınnıın rahat olmasn rahat olmasıı,,••
KolaylKolaylııkla kla üüretilebilmesi,retilebilmesi,
••
Bireylerin yumurta oluBireylerin yumurta oluşşturabilme aturabilme aşşamasamasıına na ççok ok kkıısa ssa süürede ularede ulaşşmasmasıı
ddıır.r.
•Phylum: Rotifera
•Classis
: Monogononta
•Familia: Brachionidae
Brachionus plicatilis
Şekil 1: Rotiferin
genel görünüşü
(Dhert,1996)
ROTROTİİFERFERİİN BN BİİYOLOJYOLOJİİK K ÖÖZELLZELLİİKLERKLERİİ
•Erkek bireyler, dişi bireylere oranla daha az gelişmiş
ve
daha küçük yapıdadır
•Dış
yüzeyi keratin
benzeri bir proteinle kaplanmış
olup lorica
olarak adlandırılmıştır
•Baş
kısmında yüzme ve besin alma işlemini gerçekleştiren siller
mevcuttur.
•Gövde kısmında sindirim sistemi ve yumurtalıklar bulunur
•Kuyruk bölgesinde yumurtalarını
taşırlar
Şekil 2: Rotiferin Genel Görünüşü
(Koste, 1980).
ROTROTİİFERFERİİN HAYAT DN HAYAT DÖÖNGNGÜÜSSÜÜ
•Rotifer partenogenetik
hayat
devrine sahiptirler.
•Genelikle
aseksüel
hayat fazı görülmektedir
•Aseksüel
fazda amiktik dişi amiktik yumurtalar üretir. Bu yumurtlara 24 –
48
saat içinde açılır ve yeni dişi bireyler oluşur.
•Uygun şartlar oluştuğu zaman Rotifer seksüel üreme fazına geçer.
•Miktik
dişi mayoz
bölünme geçirerek miktik
yumurta ve erkek bireyleri
oluşturur.
•Bunların döllenmesi ile diploid kromozoma sahip olan kalıcı
yumurtalar
meydana gelir.Şekil 3 : Rotiferin Hayat döngüsü
(Hoff
ve Snell, 1987)
Rotifer kRotifer küültltüürrüünnüün n aseksaseksüüelel
fazdan fazdan SeksSeksüüel faza geel faza geççiren faktiren faktöörler;rler;
1.1.
Suyun sSuyun sııcaklcaklığıığı,,2.2.
Suyun tuzluluSuyun tuzluluğğu,u,
3.3.
IIşışık yok yoğğunluunluğğu ve u ve ışıışık gek geççirgenliirgenliğği,i,4.4.
Suyun kalitesiSuyun kalitesi
5.5.
Suyun Suyun pHpH
‘‘ıı6.6.
Besinin cinsi ( alg, maya Besinin cinsi ( alg, maya vdvd.).)
7.7.
KKüültltüürdeki yrdeki yüüksek birey yoksek birey yoğğunluunluğğuu8.8.
Rotifer neslinin genetik karakterleri Rotifer neslinin genetik karakterleri dirdir..
•Rotiferin iki tipi mevcuttur
•Küçük olanı
S-tipi diye isimlendirilen Brachionus Brachionus rotundiformisrotundiformis ,,
•Büyük olanı
L-tipi olarak adlandırılan Brachionus Brachionus plicatilisplicatilis tir.
•Yetişkin S-tipi rotiferde loricanın
uzunluğu 130 –
340
m, L-tipinde ise 100 -210 m arasında değişmektedir.
Şekil 4: Farklı
tipteki Rotiferlerin Karşılaştırılması
(Fu et al.,1991).
Rotiferin Kültür Şartları
•Tuzluluk:
%0
1 –
97 tuzluluk aralığında dağılım gösterirler. Optimal üremeleri %0
35 in altında gerçekleşmektedir.
•Sıcaklık :
Rotiferin tipine bağlı
olarak optimal sıcaklık değerleri değişmektedir. S-
tipi Rotiferler 28 –
35 0C, L-tipi Rotiferler 18 –
25 0C
arasındaki sıcaklıkları
tercih etmektedir.
Tablo 1. Sıcaklığın Brachionus plicatilis üreme aktivitesine etkisi. (After Ruttner-Kolisko, 1972).
SSııcaklcaklıık ( k ( 00
C)C) 15 15 00CC 20 20 00CC 25 25 00CC
EmbriyonikEmbriyonik
geligelişşim sim süüresi (gresi (güün)n) 1.31.3 1.01.0 0.60.6
DiDişşi bireyin ilk yumurtlama si bireyin ilk yumurtlama süüresi (gresi (güün)n) 3.03.0 1.91.9 1.31.3
İİki yumurtlama araski yumurtlama arasıında genda geççen sen süüre (saat)re (saat) 7.07.0 5.35.3 4.04.0
YaYaşşam sam süüresi (gresi (güün)n) 1515 1010 77
Bir diBir dişşi bireyi hayati bireyi hayatıı
boyunca yumurtlama boyunca yumurtlama saysayııssıı
2323 2323 2020
•Çözünmüş
Oksijen:
Rotifer çözünmüş
oksijen miktarı
2 mg / l olan ortamlarda bile yaşamını
sürdürebilmektedir. Kültürdeki
çözünmüş
oksijen miktarı
sıcaklığa, tuzluluğa, Rotifer yoğunluğuna ve kullanılan yiyeceğin türüne göre değişim göstermektedir. Havalandırma Rotiferlere zarar verecek kadar kuvvetli olmamalıdır.
•pH
:
Rotifer doğal ortamında pH
ın 6.6 olduğu sularda yaşarlar. Kültür ortamında ise pH
7.5 tercih etmektedirler.
•Amonyak (NH3
) :
NH3
/ NH4
+
oranı
suyun pH
‘ı
ve sıcaklığından etkilenmektedir. Kültür ortamında NH3
konsantrasyonunun 1 mg /l nin
altında olması
istenmektedir.
•Bakteriler:
Rotifer kültürlerinde en çok Pseudomonas ve Acinetobacter türleri görülmektedir. Bazı
Pseudomonas türleri kültür
şartları
altında büyümeyi sınırlayıcı
bir faktör olan B12 vitaminini sentezlerler.
Yapılan çalışmalarda, rotifer kültüründe Vibrio türlerinin dominant olduğu saptanmıştır.
Kültür zenginleştirilmeden ortamda Cytophaga / Flavobacterium türleri görülürken, Kültürler zenginleştirildikten sonra Pseudomonas / Alcaligenes
türleri görülmektedir.
Rotiferlerdeki Vibrio sayısını
düşürmenin en etkili yolu ortama Lactobacillus plantarum içeren rotifer besinlerinin verilmesidir. Bu probiotik
bakterinin ortama verilmesiyle
hem bakterilerin zararlı
etkileri azaltılır hem de rotifer üretim oranı
arttırılmış
olur.
•Siliatlar:
Uronema sp. ve Euplotes sp
gibi Halotricha ve Hypotricha
siliatlar
kültür ortamında
istenilmemektedir.
Siliatlar
metabolik atıkları
ile sudaki NO2-
seviyesini arttırarak suyun pH
seviyesinin azalmasına neden
olmaktadır.
Siliatların
rotifer kültürüne zarar vermesini önlemek için, rotiferlere verilmek üzere hazırlanan alglerin bulunduğu tanklara, rotiferlere verilmeden 24 saat önce 20 mg / l oranında formalin
konulması
gerekmektedir.
Rotiferin Stok KültürüRotifer yetiştiriciliği sırasında;
•Ortam koşullarında meydana gelen ani değişimlere,
•Beslemede kullanılan alg, ekmek mayası
ve yapay yiyeceklerin özelliklerindeki değişimlere,
•Ortamdaki bakteri ve siliat
yükü
değişimine
bağlı
olarak ani ölümler görülebilmektedir.
Bu nedenle,üretimin sürekliliğini sağlamak amacıyla, izole edilmiş odalarda küçük stok kültür çalışmalarına yönlenilmiştir.
•Doğadan, Araştırma Enstitülerinden veya Kuluçkahanelerden temin edilen Rotifer stok kültürleri, yoğun üretim aşamasına başlanmadan önce kültürde bulunan ölü
Rotiferleri ortamdan kaldırmak için
aşağıdaki karışım kullanılır.
•Erythromycin
10 mg / l, Chloramphenicol
10 mg / l, Sodium oxolinate
10 mg / l, Penicillin
100 mg / l, Streptomycin
20 mg / l
•50µm lik
plankton bezi kullanılarak ölü
Rotiferler, yumurtalardan ayrılır.
•Elde edilen yumurtalarla stok kültüre başlanılır.
Şekil 5: Stok kültürleri 50 ml ‘lik
santrifüj tüplerinde tutulmaktadır (Dhert,1996).
•Stok kültüründe kullanılacak olan su 1 µm lik
filtreden geçirilir, 1 gece boyunca 5 mg / lt
NaOCl
bekletilir. Su Na2
S2
O3
ile nötralize edilir ve 0,45 µm lik
filtreden geçirilir.
•Rotiferler tüplere 2 mg / l olacak şekilde stoklanır.
•Suyun;
Tuzluluğu : %0 25
Sıcaklığı : 19 –
25 0C
Aydınlatma
: Tüplere 20 cm uzaklıkta 3000 lux
ışık yoğunluğu
Besleme : Her gün 1-2.108
hücre / ml yoğunluğunda 200 µl
alg tüplere ilave edilir.
•
Rotifer yoğunluğu 200 birey / ml ulaştığı
zaman kültür hasat edilir. Bir kısmı
ile stok kültüre devam edilirken bir kısmı
da daha
büyük ölçekli kültüre geçmek amacıyla kullanılır.
Stok KStok Küültltüürden Brden Büüyyüük k ÖÖllççekli Kekli Küültltüürlere Gerlere Geççiişş::Santrifüj tüplerinden sonra 500 ml lik
erlenmayerlerde
üretime
başlanılır. Kültür Şartları:
Su Sıcaklığı
: 30 0C nin
üzerine çıkamamalıdır
Aydınlatma
: Erlenmayerlere
2 cm uzaklıkta 5000 lux
ışık
yoğunluğu
Stok yoğunluğu: 50 birey / ml
Besleme : 1,6.106
hücre / ml alg
Havalandırma
: Uygulanmaz
Üç
gün içinde rotifer yoğunluğu ml de 200 bireye yükselir.
Hasatı; İlk önce 200 µm lik
plankton bezinden kültür geçirilerek katı partiküller ortamdan uzaklaştırılır. Sonra, 50 µm lik
plankton bezi
yardımıyla rotiferler toplanır.
Hasat işlemi suyun içinde gerçekleştirilmedir. Böylece kayıp oranı
% 1 altına düşürülebilir.
Şekil 6: Santrifüj tüpleri ile Erlenmayerlerde
yetiştirilen rotiferlerin büyüme oranının karşılaştırılması
(Dhert,1996).
Hasat edilen rotiferler 2 lt
si su ile doldurulmuş
olan 15 lt
lik şişelere 50 birey / ml olacak şekilde konulurlar.
Havalandırma kullanılır. Siliat
kontaminasyonunu
önlemek amacıyla hava karbon filtresinden de geçirilebilir.
Algler günlük olarak ortama ilave edilir (Chlorella için 1,6.106
hücre / ml)
Her gün kültür temizlenir ve rotiferler 200 birey / ml olacak şekilde yeniden stoklanır
1 hafta sonra, alg ilavesiyle birlikte 15 lt
lik
şişeler dolmuştur ve yığın kültürlerde kullanıma hazır hale gelmiştir.
RotiferinRotiferin
YYığıığın Kn Küültltüürrüü
1.
Alglerle yapılan yığın kültürü
2.
Alg ve Maya ile yapılan yığın kültürü
3.
Maya ile yapılan yığın kültürü
4.
Özel formüle edilmiş
besinlerle yapılan yığın kültürü
1. Alglerle Yap1. Alglerle Yapıılan Ylan Yığıığın Kn Küültltüürrüü
Algler, rotiferler için vazgeçilmez bir besin kaynağıdır. Rotifer kültürlerinde kullanılan bazı
fitoplankton türleri:
Dunaliella tertiolecta Tetraselmis suecica
Monochrysis lutleri Isochrysis galbana
Chlorella sp.
Nannochloropsis sp.
Scenedesmus sp.
Olisthodiscus sp.
Chlamydomonas sp.
Nannochlorosis sp.
Alg ile beslemede, alg kültürünün yanında, hücre konsantrasyonu da önemli yer tutmaktadır. Bu nedenle ortama verilecek alg’in rotiferin
tüketebileceği kadar olması
önemlidir.
Fitoplankton türüne göre ortama verilecek hücre sayısı değişiklik göstermektedir.
Besin TipiBesin Tipi Besin MiktarBesin Miktarıı Rotifer SayRotifer Sayııssıı
TetraselmisTetraselmis suecicasuecica 200 h200 hüücre / rotifercre / rotifer 220 rotifer / ml220 rotifer / ml
PavlovaPavlova ((MonochrysisMonochrysis)) 25.000 h25.000 hüücre / rotifercre / rotifer 120 rotifer / ml120 rotifer / ml
Chlorella Chlorella spsp.. 30.000 h30.000 hüücre / rotifercre / rotifer 250 rotifer / ml250 rotifer / ml
Tablo 2: Fitoplankton türlerine göre uygulanması
gereken besin miktarları
Rotiferleri fitoplankton ile beslemenin tercih edilmesinin en büyük nedeni, fitoplanktonların vitamin, klorofil ve uzun zincirli doymamış
yağ
asitleri
bakımından zengin oldukları
için beslenme kalitesini yükseltmeleridir.
2. Alg ve Maya ile Yapılan Yığın KültürüRotifer beslemesinde kullanılan alg kalitesine bağlı
olarak, ekmek
mayası
da kullanılabilir. Rotiferleri maya ile besleme oranı
1 g / milyon Rotiferdir. Ancak bu durum rotiferin türüne ve kültür şartlarına göre değişiklik göstermektedir.
Genellikle Kesikli ve Yarı-Sürekli kültür sistemlerinde Algler ile maya birlikte kullanılmaktadır.
a) Kesikli Kültür Sistemi: 1.200 lt
lik
tankların yarısı
13 –
14 . 106
hücre / ml yoğunluktaki algler ile 100 birey / ml yoğunluğundaki rotiferler doldurulur. Suyun tuzluluğu %0
25 ve sıcaklığı
30 0C yi aşmayacak şekilde ayarlanır. İlk gün aktif ekmek mayası
günde
iki kez 0,25 g/ 106
rotifer olacak şekilde ortama verilir. Bir sonraki gün tanklar aynı
alg yoğunluğu olacak şekilde tamamen
doldurulur ve ekmek mayası
1 milyon Rotifere 0,375 g olacak şekilde günde iki kez verilir. Bir sonraki gün Rotiferler hasat edilir ve yeni tanklara konulur.
b) yarı-Sürekli Kültür Sistemleri: Bu kültür tekniğinde rotiferler aynı
tank içerisinde 5 gün tutulur. İlk iki gün boyunca kültür hacmi iki kat arttırılır ve rotifer yoğunluğu yarıya indirilir. İzleyen günlerde, tankın yarısı
hasat
edilir ve yoğunluk tekrar yarıya indirilir. Beşinci günde tank hasat edilir ve prosedür yeniden uygulanır.
Alglerle beslenen rotiferlerin besin kompozisyonu bir çok predator balığın ihtiyacını
karşılamaz ve bazen rotiferler yağ, vitamin ve protein
gibi besleyici maddeleri ilave etmek amacıyla zenginleştirme yapılmaktadır.
3. Maya ile Yapılan Yığın Kültürü
Ekmek mayasının rotifer yetiştiriciliğinde kullanılmasını
sebepleri:
1.
5 –
7 µm boyutlarında olması
2.
Yüksek protein oranına sahip olması
3.
Fitoplankton yetiştirilmesi gibi ek bir çalışma gerektirmemesi
4.
Ucuz olması
dır.
Mayanın beslemem kullanılması
amacıyla çeşitli formüller geliştirilmiştir.
Bu formüller:
D=1,3*C*V
C 200 ( C, 200’den küçük veya
100 eşitse)
D=
C * V C 200 (C, 200’
den fazla ise)
100
C : ml ’deki birey sayısı
V : Yetiştiricilik tankının hacmi lt
olarak (hasattan sonra)
D : Verilecek maya miktarı
gr olarak
Diğer bir besleme formülü
ise:
Rotifer / ml 100’den küçük ise 2 gr / 106
rotifer
Rotifer / ml 100 –
200 arası
ise 1,33 gr/ 106
rotifer
Rotifer / ml 200’den büyük ise 1 gr / 106
rotifer
ml deki rotifer sayısı
arttıkça verilen maya miktarı
azaltılır. Bunun nedeni, ortamda kirlenme olmasını
engellemek ve olumsuz şartların
oluşmasını
önleyerek kalıcı
yumurtaların oluşmasını
önlemektir.
Genellikle Kesikli kültür sistemleri maya ile beslemede tercih edilmektedir.
Maya ile besleme yapılırken su sıcaklığının 27 0C ‘den düşük olmaması
gerekmektedir. Eğer sıcaklık düşük olursa rotiferler
tarafından maya tüketilmemekte ve tank dibine çökerek kirlilik yapmaktadır.
Yapılan araştırmalarda sadece maya ile beslenen rotiferler de E vitamin ve klorofil noksanlığı
gözlemlenmiştir. Dolayısıyla tek başına
kullanımı
tercih edilmemektedir.
4. Özel Formüle Edilmiş
Yiyeceklerle Beslenmesi
Avrupa'da rotifer kültüründe en çok kullanılan formüle edilmiş besin SELCO dur. Bu besin tamamıyla canlı
alglerin yerine
geçmektedir ve aynı
zamanda rotiferlerdeki EFA ve vitamin seviyesini arttırmaktadır. Bir çok Selco çeşidi vardır. Rotifer yetiştiriciliğinde en fazla kullanılanı
Culture Selco dur. Culture
Selco ise % 45 protein, % 30 karbonhidrat, % 15 yağ
( % 33 ü HUFA (-3) ve % 7 kül içermektedir. Ancak, DHA Protein Selco
ve Protein Selco çeşitleri de rotifer yetiştiriciliğinde kullanılmaktadır.
Selco ile beslemede havalandırmanın çok iyi yapılması gerekmektedir. Çünkü, Selco mayaya oranla su kalitesini daha
çabuk bozmaktadır.
Suyun kirliğini kontrol etmek amacıyla sünger benzeri yapılar veya hava pompalayarak suyu karışımını
sağlayan süngerden
yapılmış
cihazlar kullanılmadır.
Şekil 7: Tankların içine konulan sünger benzeri yapılar (Dhert,1996).
Şekil 8: Hava pompalayarak suyu karışımını
sağlayan
süngerden yapılmış
cihazlar (Dhert,1996).
Rotifer yoRotifer yoğğunluunluğğu/ u/ mlml
Culture Selco 10Culture Selco 1066
Rot / gRot / güünn Culture Selco mCulture Selco m33
/ g/ güünn
((L tip için) ( gr )( gr ) ( gr )( gr )
100 100 --
150 150 0,530,53 53 53 ––
8080
150 150 ––
200200 0,470,47 70 70 ––
9393
200 200 ––
250 250 0,400,40 80 80 ––
100100
250 250 ––
300300 0,370,37 92 92 ––
110110
300 300 --
350350 0,330,33 100 100 ––
117117
350 350 ––
400400 0,300,30 105 105 ––
120120
400 400 ––
450450 0,270,27 107 107 ––
120120
450 450 ––
500500 0,230,23 105 105 ––
117117
500500 0,250,25 125125
12001200 0,200,20 240240
Tablo 3: Rotifer yoğunluğuna bağlı
olarak Culture Selco kullanım oranları
(Dhert,1996).
Selco nun
rotifer tanklarına saat başı
verilmesi daha
uygun olur. Selco suda çözdürüldükten sonra + 4 0C de 30 saat boyunca saklanabilmektedir. Selco nun
bu özelliğinden
yararlanılarak bir sistem geliştirilmiştir. Bu sisteme göre Selco karışımı
bir
pompa yardımıyla tanklara saat başı
dağıtılmaktadır.
Şekil 9: Selco nun
tanklara dağıtılmasını
sağlayan pompa
sistemi (Dhert,1996).
Bu tür pompa sistemleri bulunmadığı
zaman başka bir yöntem kullanılmaktadır.
Şekil 10: Selco nun tanklara dağıtılması sağlayan pompasız
sistem (Dhert,1996).
Genellikle Kesikli kültür sistemleri Selco kullanıldığında tercih edilmektedir. Üretim periyodu 4 gün sürmektedir . Kültüre 200 rotifer / ml olarak başlanır ve 4. gün sonunda yoğunluk 600 rotifer / ml olduğunda son verilir. Dört günlük üretim periyodunda uygulanacak Selco
Yüksek Yoğunlukta Rotifer YetiştiriciliğiCulture Selco kullanılarak yapılan rotifer kültür tekniği bu tür yetiştiricilik için de kullanılmaktadır. Kültüre 500 rotifer / ml yoğunluğunda başlanılır ve 4 günlük yetiştiri periyodu sonunda 1.000 rotifer / ml yoğunluğu ulaşılınca son verilir. Ortam şartları:
Oksijen : 7 –
9 ppm
pH
: 7,5 –
8,5
Amonyak
< 6 mg / l
Havalandırma
:Kuvvetli olmalı, hava taşları
tankın zemininde 15 cm yukarısına yerleştirilmelidir.
Suyun kirliliğini önlemek amacıyla tank duvarlarına sünger benzeri yapılar konulmalıdır
Hava taşları, sünger benzeri yapılar günde üç
kez temizlenmelidir.
AAşşamalaramalar GGüünlernler Rotifer / mlRotifer / ml GGüünlnlüük besleme k besleme oranoranıı
KKüültltüüre bare başşlamalama 00 500500 0,3430 0,3430 aa
11 750750 0,28570,2857
22 900900 0,28570,2857
ZenginleZenginleşştirme tirme bb 33 12001200 0,28570,2857
Hasat Hasat 44 15001500
Tablo 4: Rotiferin yoğun yetiştiriciliğinde uygulanan besleme oranları (Dhert,1996).
a: % 50 Culture Selco, % 50 Protein Selco karıştırılarak günlük verilecek miktar hesaplanır günde 4 kez verilir.
b: Culture Selco yerine Protein veya DHA Protein Selco kullanılabilir
4 günlük yetiştiri periyodunda elde edilen rotiferlerin tamamı
larvalara verilir. Yeniden yetiştiriciliği yapılmaz. Bunun nedeni ise, yüksek yoğunlukta yetiştirilen rotiferlerin yumurta sayılarının azalmasıdır.
Şekil 11: Rotifer yoğunluğu ve yumurta oranı
arasındaki
ilişki (Dhert,1996).
Rotiferin Sayımı
Rotifer konsantrasyonu ve genel durumu, boyu, yumurtalı
olup olmadığı
ve içeriği her gün sayım işlemi sırasında takip edilmelidir.
Rotifer kültürlerinde birey sayısı
Sedgwick-Raffer
sayma lamı
ile izlenebilir.
Kültürdeki büyüme hızı
ise:
K= InNt
–
InNo
t
formülü
ile hesaplanır.
No
: Başlangıçtaki birey sayısı
Nt
: Yetiştiri sonundaki birey sayısı
T : Yetiştiriciliği sırasında geçen süre
Rotiferin Hasatı
1.
Tank pisliğini ortamdan uzaklaştırmak için 1-2 lt
su ortamdan uzaklaştırılır.
2.
Tank suyu 300 µ
luk
plankton bezinden süzülür.
3.
Havalandırma kapatılır
4.
Rotiferler 15 dk
içinde tankın dip kısmına inerler
5.
250 –
300 µ
plankton bezinin altına 45 -50 µ
luk
bir plankton bezi daha konularak tank suyu süzülür.
6.
Toplanan rotiferler temiz deniz suyu ile yıkanarak bir kısmı larvalara verilir, bir kısmında kültür amaçlı
kullanılır.
Rotifer hasatını
kolaylaştırmak amacıyla kolektörlerde kullanılabilir.
Şekil 12 : Rotifer hasatında
kullanılan kolektörler (Dhert,1996).
Rotifer
Zenginleştirme Teknikleri
HUFA (
-3) İçeriğini Zenginleştirme Teknikleri :
1.
Aglerle
Zenginleştirme: Bazı
mikro alglerin esansiyel
yağ asitlerinden (Örn: Nannochloropsis occulata daki
20:5
-3 ve
Isochrysis galbana da ki 22:6
-3 ) docosahexaenoic
asit (DHA 22:6
-3) ve eicosapentanoic
asit (EPA 20:5
-3) seviyesinin
yüksek olması
nedeniyle tercih edilmektedir.
Yapılan bir araştırmada Isochrysis sp. ve Tetraselmis sp. türleri rotiferleri
zenginleştirmek amacıyla kullanılmıştır. Araştırma
sonucunda Isochrysis ile zenginleştirilen rotiferlerin
DHA / EPA seyiyesi
2 nin
üzerindedir. Tetraselmis ile zenginleştirilen
rotiferlerin
DHA / EPA seviyesi 0,5 in altındadır.
Ayrıca , larva tanklarına da alg konularak rotiferlerin
larva tanklarına konulduktan sonra larva tarafında yenilinceye kadar HUFA seviyesini arttırılmasına çalışılmaktadır.
2. Formüle Edilmiş
Yiyecekler ile Zenginleştirilme: Rotifer yetiştiriciliğinde Culture
Selco, HUFA, EPA ve DHA seviyesini alg ve
mayaya oranla daha fazla yükseltmektedir. Culture
Selco
ile yetiştirilen rotiferler
hasat edilmeden bir gün önce Protein Selco
ile beslenirse
protein seviyelerinde de artış
meydana gelir.
Protein Selco
ve DHA Culture
Selco
rotifer
zenginleştirilmesinde kullanılarak hem yağ
asitleri hem de protein bakımından zenginleştirilir.
EPAEPA DHADHA DHA/EPADHA/EPA S (S (
--3) HUFA > 20:3 3) HUFA > 20:3
--33
CultureCulture
SelcoSelco 18,918,9 15,315,3 0,80,8 36,436,4
DHA DHA ––
CSCS 16,916,9 26,726,7 1,61,6 45,445,4
DHA DHA ––
PSPS 24,424,4 70,670,6 2,92,9 99,399,3
Tablo 5: Bazı
Selco
türlerindeki EPA, DHA oranları
(mg / g kuru ağırlık) (Dhert,1996).
C Vitamini İçeriğinin Zenginleştirmesi:
Farklı
besinlerle beslenen rotiferler
farklı
seviyede Askorbik
asite
sahip olurlar.
KKüültltüür / Zenginler / Zenginleşştirmetirme
LaboratuvarLaboratuvar
ööllççekliekli KKüültltüürrüü(3 g(3 güün)n)
ZenginleZenginleşştirmesitirmesi(6 saat)(6 saat)
Chlorella / Chlorella / IsochrysisIsochrysis 22892289 21552155
Ekmek mayasEkmek mayasıı
/ / IsochrysisIsochrysis 148148 15991599
CultureCulture
SelcoSelco
/ Protein / Protein SelcoSelco
11 322322 12471247
Ticari Ticari ÖÖllççekliekli KKüültltüürr(5(5--7 g7 güün)n)
ZenginleZenginleşştirmetirme(6(6--24 saat)24 saat)
Ekmek mayasEkmek mayasıı+ + ChorellaChorella / Chlorella/ Chlorella 928928 12551255
Ekmek mayasEkmek mayasıı++NannochlorisNannochloris//NannochlorisNannochloris 220220 410410
CultureCulture
SelcoSelco
/ Protein / Protein SelcoSelco
11 136136 941941
CultureCulture
SelcoSelco
11
/ / IsochrysisIsochrysis 327327 15591559
Tablo 7: Laboratuvar
ve Ticari ölçekli rotifer
yetiştiriciliğinde Askorbik asit miktarı
(mg / g kuru ağırlık) (Dhert,1996).
1 : vitamin C ilavelidir.
Protein İçeriğinin Zenginleştirilmesi
Rotiferlerin
protein içeriğinin zenginleştirilmesinde genellikle Protein Selco
kullanılmaktadır.
Zenginleştirilmiş
Rotiferlerin
Hasat Edilmesi
Zenginleştirilmiş
rotiferler
hasat edildikten mutlaka iyice deniz suyunda yıkanmalıdır.
Kalıcı
Yumurtaların Üretimi ve Kullanımı:
Rotiferlerin
larva besini olarak kullanımı
için amiktik üremesi tercih edilmektedir. Kist olarak da adlandırılan kalıcı
yumurtalar saklama ve
taşıma için en ideal yöntemdir. Kalıcı
yumurta üretimi suyun tuzluluk, sıcaklık değişimi ile veya ortama besin maddelerinin az verilmesi ile elde edilir.
Şekil 13: Rotiferin
kalıcı yumurtaları
ve amiktik dişi
bireylerinin mikroskoptaki görünüşü
(Dhert,1996).
Şekil 14: Rotiferin
Kalıcı yumurtasının mikroskoptaki
görünüşü
(Dhert,1996).
Kalıcı
yumurtaların rotifer
kültüründe kullanımının bir çok avantajı vardır. Bunlar:
1.
Stok kültür kullanılması
gerekmez. Böylece işçilik maliyeti ve alg üretim giderleri de azaltılmış
olur.
2.
Stok kültürden daha büyük ölçekli kültüre geçiş
üniteleri azaltılabilir
3.
Kalıcı
yumurtalar yüksek dozda antibiyotikleri ile dezenfekte edilebilir. Böylece kistlerden çıkan rotiferler
bakteri içermezler.
4.
Kalıcı
yumurtalar NaCl
veya glutaraldehyde
gibi kuvvetli dezenfektanlara karşı
dayanıklıdırlar.
Balık Larvalarının Rotifer
Gereksinimlerinin Hesaplanması:
Bir çipura ve levrek ünitesinin rotifer
ihtiyacının en yüksek olduğu dönem çipura balığının 13. ve 14. günleri olup 4 m3
hacminde % 25 su devir
daimi ile 21 0C de litreye 100 larva başlangıç yoğunluğunda bir havuz rotifer
tüketimi yapılan araştırmalar sonunda 94 milyon olarak
bulunmuştur. Bu sayıya su devir daiminden ileri gelen kayıplarda dahildir.
Bu verilere bağlı
olarak toplam rotifer
gereksinimi:
Larva havuz miktarı
* En yüksek rotifer
tüketimi = Rotifer
gereksinimi
6 * 94 = 564 milyon rotifer
Yapılan denemelerde 24 saatlik zenginleştirme sırasında ölüm oranının 400 rotifer
/ ml yoğunlukta % 40 ile % 9 arasında değiştiği ancak genel
ortalamanın % 20 civarında olduğu görülmüştür.
Bu verilere bağlı
olrak
zenginleştirme öncesi rotifer
gereksinimi:Rotifer
gereksinimi + % 20 ölüm oranı
= Zenginleştirme öncesi Rotifer
gereksinimi
564 + 112,8 = 676,8 M= 680
M
680 milyon rotifer
ünitenin günlük rotifer
gereksinimdir.
Gerekli Üretim Hacmin Hesaplanması:
Hasatı
yapılacak havuzdaki rotifer
miktarı
(rot / ml) –
Ekimi yapılacak havuz için gereken rotifer
miktarı
( rot / ml) = Kullanılabilir rotifer
miktarı
(rot / ml)
Larvaların rotifer
gereksinimi / Kullanılabilir rotifer
miktarı
= Günlük gerekli üretim hacmi ( ml)
Rotifer
Ünitesi Muhafaza ve Ön Üretim Bölümü:
Rotiferlerin
stok kültüründen 2 m3 lük tanklara geçinceye kadar olan üretimi genellikle laboratuvarda
gerçekleştirilir.
Buna göre;
20 ml alg kültürü
içerisine birkaç
damla ekim yapılır---7 –
10 gün----
1 lt erlenmayer
alg kültürü
içerisine ----7 –
10 gün----
2.5 lt
erlenmayer
alg
kültürü
içerisine ----
5-7 gün----
20 lt
balon joje
alg kültürü
içerisine ---5- 7 gün----
400 lt
lik
alg kültürü
içerisine ----8-10 gün-----2 m3 lük üretim
tankları
içerisine aktarılır.
Muhafaza ve Ön Üretim Havuzu Gereksinimi:
2 m3 lük üretim havuzlarının hasat edilebilmesi için 4 günlük bir süreye gereksinimleri vardır. Bu nedenle devamlı
bir üretimi sağlamak amacı
ile
en az 4 tankın birer gün ara ile üretime başlaması
gerekir. Her hangi bir aksaklık durumunda acilen yeni bir üretime başlayabilmek için rotifer
laboratuvarında
bütün üretim boyunca birkaç
tane 400 lt
lik
kültür havuzlarının hazır durumda beklemesi önemlidir. Tüm bunlar göz önüne alınırsa laboratuarların 400 lt
lik
havuz gereksinimi:
4 adet 400 lt
tank normal üretime başlayabilmek için,
3 adet 400 lt
lik
tank üretimi garantiye alabilmek için, toplam 7 adet 400 lt lik
tanka ihtiyaç
vardır.
Ayrıca 8 adet 20 lt
lik
balon, 10 adet 2,5 lt
lik
erlenmayer, 20 adet 1 lt
lik erlenmayer
ve deney tüpleri üretime başlayabilmek için gerekli
malzemeler arasındadır.
TUZLA KARTUZLA KARİİDESDESİİ=BR=BRİİNE SHRNE SHRİİMP MP ((ARTEMIAARTEMIA
))
CoCoğğrafik Darafik Dağığıllıımmıı, Biyolojisi, , Biyolojisi, AkvakAkvaküültltüürderde KullanKullanıımmıı
E.E.ÜÜ. SU . SU ÜÜRRÜÜNLERNLERİİ
FAKFAKÜÜLTESLTESİİYETYETİŞİŞTTİİRRİİCCİİLLİİK BK BÖÖLLÜÜMMÜÜ
PLANKTON VE KPLANKTON VE KÜÜLTLTÜÜRRÜÜ
BBİİRRİİMMİİBORNOVABORNOVA--İİZMZMİİRR
ARTEMIAARTEMIA’’NIN SNIN SİİSTEMATSTEMATİĞİİĞİ
KingdomKingdom::
AnimaleAnimale
PhyllumPhyllum:: ArthropodaArthropoda
SubphyllumSubphyllum::
CrustaceaCrustacea
ClassisClassis::
BranchiopodaBranchiopoda
OrdoOrdo::
AnostracaAnostraca
SubordoSubordo::
SarsostracaSarsostraca
FamiliaFamilia: : ArtemiidaeArtemiidae
GenusGenus::
ArtemiaArtemia spsp..
ARTEMIA TARTEMIA TÜÜRLERRLERİİNNİİN CON COĞĞRAFRAFİİK K DADAĞĞILIMIILIMI
ArtemiaArtemia’’nnıınn
YaYaşşam Alanlaram Alanlarıı (Tuz (Tuz ÜÜretimi Yapretimi Yapıılan Sulak Alanlar ve Tuz Glan Sulak Alanlar ve Tuz Göölleri)lleri)
Tuz üretimi yapılan sulak alanlar Göl ekosistemleri
ArtemiaArtemia
YumurtalarYumurtalarıınnıın Toplanmasn Toplanmasıı
Tuz Göllerinde Artemia Hasadı
Tuzla ekosisteminde Artemia yumurtalarının
toplanması
Artemia yumurtaları
Toplanan Toplanan ArtemiaArtemia
YumurtalarYumurtalarıınnıın Temizlenmesi n Temizlenmesi ve Kurutulmasve Kurutulmasıı
Yumurtaların yıkanmasıYumurtalarının Toplanması Yumurtaların kurutulması
Yaş
yumurtaların nakli
ArtemiaArtemia’’nnıınn
CanlCanlıı
Olarak DeOlarak Değğerlendirilmesierlendirilmesi
Havuzdan canlı
Artemia’nın
toplanmasıCanlı
Artemia biyomasının
paketlenmesi
ve hava verilmesi
ArtemiaArtemia’’nnıınn
YaYaşşam Dam Dööngngüüssüü
1) Ovipar
üreme: Artemia anaçlarının Yumurtalarını
doğrudan dış
ortama
bırakması.
2) Ovovivipar
üreme: Artemiauterusunda
yavruların gelişimi
ve dış
ortama bırakılması
ArtemiaArtemia’’nnıınn
ÜÜreme Dreme Dööngngüüssüü
ArtemiaArtemia’’nnıınn
AkvakAkvaküültltüürderde
KullanKullanıımmıı
Artemia su ürünleri yetiştiriciliğinde larval balık, kabuklu ve karides üretiminde yaygın olarak kullanılan canlı
yemdir. Esansiyel
maddelerin,
pigmentlerin, profilaktik
maddelerin, terapitik
madelerin
ve besleme amaçlı zenginleştiriçilerin
larvaya verilmesinde canlı
kapsül olarak kullanımı
en
uygun canlıdır.
ArtemiaArtemia
YumurtalarYumurtalarıınnıın Kullann Kullanıımmıı
Artemia yumurtaları Dekapsüle
edilmiş
Artemia yumurtaları
Paketlenmiş
Artemia yumurtaları, üzerindeki teknik bilgiler de göz önüne alınarak açılır.Larva ünitesinin ihtiyaç
duyduğu Artemia
nauplii
gereksinimine göre kuluçkalanacak
miktar hesaplanır. Bu yumurtalar 1 saat tatlı
su veya deniz suyunda hidrate
edilir. İhtiyacaGöre dekapsüle
(Artemia yumurtasında koryon
adı
verilen dış
kabuğun uzaklaştırılması)
İşlemi yapılır. Dekapsülasyon
yumurtanın koryon
tabakasının kalınlığına göre 5-15 dakikaBoyunca yapılabilir. Ancak ticari ürünlerde farklı
kaynaklardan Artemia yumurtalarının
olabilme olasılığına karşın dekapsülasyon
işleminin 7-8 dakika yapılması
uygundurdur.Dekapsülasyon
NaOH
ile birlikte NaOCl
veya Ca(OCl)2 kimyasallarının kullanılması
işlemidir.Dekapsülasyondan
sonra yumurtaların hızla yıkanması
veya Na2
S2
O3
ile nötralize edilmesi şarttır.
ArtemiaArtemia
YumurtalarYumurtalarıınnıın n KuluKuluççkalanmaskalanmasıı
Kuluçkalamada
amaca göre 100lt.-500 lt. ye kadar farklı
hacimlerde silidri-konik tankların kullanılması
uygundur. Artemia yumurtaları
en uygun olarak 3-5 gr/lt
yoğunlukta ekilir. 2000 lux
ışık şiddeti, pH7-8, DO: 6-7 mg/lt, sıcaklık 28-30 °C optimum kültür şartlarında ekilir. 24 saat sonra çıkan nauplii
hasat edilir.
ArtemiaArtemia
InstarInstar--I I NaupliiNauplii
ArtemiaArtemia
InstarInstar--II ve II ve InstarInstar--IV IV NaupliiNauplii
ArtemiaArtemia’’nnıınn
Beslemede KullanBeslemede Kullanıılmaslmasıı
Deniz balıkları
larval beslemede Karides larvalarının beslenmesinde
ArtemiaArtemia
NaupliiNauplii
ZenginleZenginleşştirilmesitirilmesi
Yumurtadan çıkan Artemia larvaları
hemen kullanılmayacaksa 4-5 °C ortamda muhafaza edilir. Besin içeriği kalitesini artırmak için SELCO, kültür SELCO,Süper SELCO, ALGAMAK-2000 gibi çeşitli ticari zenginleştiriciler kullanılabilir.
Zenginleştirilmiş
Artemia nauplii
ZenginleZenginleşştirilmitirilmişş
ArtemiaArtemia
naupliinauplii
besin ibesin iççeriklerierikleri
DAPHNDAPHNİİAA VE KVE KÜÜLTLTÜÜRRÜÜ
••
Su piresi olarak biline Su piresi olarak biline DaphniaDaphnia bir tatlbir tatlıı
su kabuklusu su kabuklusu ((CrustaceaCrustacea))’’ddıır. Halk arasr. Halk arasıında yaygnda yaygıın olan bu isim daha n olan bu isim daha ziyade organizmanziyade organizmanıın su in su iççerisindeki zerisindeki zııplama tplama tüürrüü
hareketlerinden kaynaklanhareketlerinden kaynaklanıır. r. DaphnidaeDaphnidae
((OrdoOrdo: Cladocera) : Cladocera) familyasfamilyasıına dahil olan bu canlna dahil olan bu canlıı, d, düünya nya üüzerinde kozmopolit zerinde kozmopolit dadağığıllııma sahiptir. Bu familyanma sahiptir. Bu familyanıın iki n iki öönemli nemli üüyesi yesi DaphniaDaphnia ve ve MoinaMoina dodoğğal ortamlarda tatlal ortamlarda tatlıı
su balsu balııklarklarıınnıın en n en öönemli besin nemli besin
kaynakaynağığıddıır. Uzun yr. Uzun yııllardan beri bilinen bu tllardan beri bilinen bu tüürler, aynrler, aynıı zamanda balzamanda balıık yetik yetişştiricileri taraftiricileri tarafıından da canlndan da canlıı
besin kaynabesin kaynağığı
olarak kullanolarak kullanıılmaktadlmaktadıır. Pek r. Pek ççok akvaryum balok akvaryum balığıığı
ttüürrüüne canlne canlıı besin olarak besin olarak DaphniaDaphnia verildiverildiğğinde inde ççok iyi sonuok iyi sonuççlar allar alıındndığıığı bilinmektedir.bilinmektedir.
DAPHNDAPHNİİAA VE KVE KÜÜLTLTÜÜRRÜÜ
••
DaphniaDaphnia organik maddelerin organik maddelerin dekompozedekompoze
olduolduğğu su birikintilerinde, u su birikintilerinde, havuzlarda, ghavuzlarda, gööletlerde ve bataklletlerde ve bataklıık bk böölgelerde lgelerde ççok yok yüüksek ksek konsantrasyonlarda olukonsantrasyonlarda oluşşabilir. abilir. ÖÖzellikle belli periyotlarda bzellikle belli periyotlarda büüyyüüme me kokoşşullarullarıınnıın n optimaleoptimale
ddööndndüüğğüü
(zaman zaman kuruyan) ge(zaman zaman kuruyan) geççici ici
sularda bol olarak bulunur.sularda bol olarak bulunur.
MORFOLOJMORFOLOJİİSSİİ
DaphniaDaphnia’’nnıınn
vvüücudu 5 cudu 5 ekstremiteliekstremiteli
babaşş
ve bir gve bir göövdeden oluvdeden oluşşur. ur. I. I. ÇÇift seksift seksüüel el dimorfizmdimorfizm
ggöösteren steren ççubuk ubuk şşeklindeki eklindeki antennantennüülerdirlerdir. .
II. II. ÇÇift esas olarak hareket ift esas olarak hareket organeliorganeli
olan antenlerdir. Kalan 3. olan antenlerdir. Kalan 3. ÇÇift ift besin alma ibesin alma işşleminde kullanleminde kullanııllıır ve r ve filtrasyonfiltrasyon
iişşlevini glevini göörrüür. Bar. Başışın her n her
iki yaniki yanıında bnda büüyyüük bilek bileşşik gik göözler yer alzler yer alıır.r.DaphniaDaphnia’’nnıınn
öönemli bir nemli bir öözellizelliğği, gi, göövdenin vdenin karapakskarapaks
adadıı
verilen verilen
ddışış
iskeletle kaplanmiskeletle kaplanmışış
olmasolmasııddıır. Yumurtalarr. Yumurtalarıın bulundun bulunduğğu kuluu kuluççka ka kesesi, dikesesi, dişşi bireyin i bireyin dorsalindedorsalinde
yer alyer alıır. r. DaphniaDaphnia’’nnıınn
kulukuluççka kesesi ka kesesi
tamamen kapaltamamen kapalııddıır. Halbuki r. Halbuki MoinaMoina’’dada
bu kese abu kese aççııktktıır. r. DaphniaDaphnia ddışış kabukabuğğunu periyodik olarak deunu periyodik olarak değğiişştirir (tirir (IvlevaIvleva, 1969)., 1969).
DaphniaDaphnia’’nnıınn
genel ggenel göörrüünnüüşşüü
DaphniaDaphnia’’nnıınn
genel ggenel göörrüünnüüşşüü
DaphniaDaphnia’’nnıınn
petripetri
kabkabıında gnda göörrüünnüüşşüü
HAYAT DEVRHAYAT DEVRİİ
DaphniaDaphnia’’nnıınn
hayat devri sekshayat devri seksüüel ve el ve aseksaseksüüelel
fazlarfazlarıı
iiççerir. erir. YYüüksek yoksek yoğğunlukta bulunduklarunlukta bulunduklarıı
pek pek ççok ortamda ok ortamda populasyonunpopulasyonun
aseksaseksüüelel
üüreme fazreme fazıındaki dindaki dişşilerden oluilerden oluşştutuğğu gu göözlenmizlenmişştir. Optimal tir. Optimal kokoşşullarda bir yumurtlama dullarda bir yumurtlama dööneminde neminde DaphniaDaphnia’’nnıınn
100100’’den fazla den fazla
yumurta yumurta üüretebildiretebildiğği ve her 2.3i ve her 2.3--3 g3 güünde bir yeni yumurtlama nde bir yeni yumurtlama ddöönemine girdinemine girdiğği rapor edilmii rapor edilmişştir. Bir ditir. Bir dişşi ti tüüm yam yaşşamamıı
boyunca 25 boyunca 25
yeni yumurtlama dyeni yumurtlama döönemine girebilmektedir (nemine girebilmektedir (IvelvaIvelva, 1969)., 1969).
HAYAT DEVRHAYAT DEVRİİ
Uygun olmayan ortam koUygun olmayan ortam koşşullarullarıında nda populasyondapopulasyonda
erkek erkek bireylerin saybireylerin sayııssıı
artar ve artar ve üüreme devri seksreme devri seksüüel faza girer. Seksel faza girer. Seksüüel el
üüreme sonunda reme sonunda ephippiaephippia adadıı
verilen kalverilen kalııccıı
((restingresting) yumurtalar ) yumurtalar oluoluşşur. Bu oluur. Bu oluşşum um ArtemiaArtemia ve ve RotiferRotifer
kistleriyle benzerlik gkistleriyle benzerlik göösterir. sterir.
ÜÜremenin remenin aseksaseksüüeldenelden
seksseksüüel faza geel faza geççiişşindeki en indeki en öönemli faktnemli faktöörler rler besin yetersizlibesin yetersizliğği, oksijen di, oksijen düüzeyinin dzeyinin düüşşüüklklüüğğüü
ve yve yüüksek ksek
populasyonpopulasyon
yoyoğğunluunluğğudur. Bunlarudur. Bunlarıın yann yanıı
ssııra dra düüşşüük sk sııcaklcaklıık, k, ççok ok uzun (20 saat) ya da uzun (20 saat) ya da ççok kok kıısa (4 saat) gibi asa (4 saat) gibi aşışırrıı
fotoperiyotlardafotoperiyotlarda
kalkalııccıı
yumurtalaryumurtalarıın olun oluşşmasmasıında nda öönemli etkenlerdir (nemli etkenlerdir (IvlevaIvleva, 1969), 1969)
HAYAT DEVRHAYAT DEVRİİ
DaphniaDaphnia ççeeşşitli bakteri gruplaritli bakteri gruplarıı, maya ve , maya ve mikroalgmikroalg
hhüücreleri, creleri, detritus ve detritus ve çöçözzüünmnmüüşş
organik maddelerle beslenebilir. Bu nedenle organik maddelerle beslenebilir. Bu nedenle
DaphniaDaphnia populasyonlarpopulasyonlarıı
bakteri ve maya hbakteri ve maya hüücreleri ve mikro alg creleri ve mikro alg hhüücrelerinin yeterli miktarda olducrelerinin yeterli miktarda olduğğu ortamda bu ortamda büüyyüük bir hk bir hıızla bzla büüyyüür r ((DeweyDewey
ve ve ParkerParker, 1964). Hem bitkisel hem de hayvansal detritus, , 1964). Hem bitkisel hem de hayvansal detritus,
DaphniaDaphnia’’nnıınn
üüreme ve breme ve büüyyüüme hme hıızzıınnıı
arttarttıırrııccıı
rol oynar.rol oynar.DaphniaDaphnia’’nnıınn
besin debesin değğeri yaeri yaşışına ve besin tipine gna ve besin tipine gööre dere değğiişşir. ir.
Ancak ortalama olarak kuru aAncak ortalama olarak kuru ağığırlrlığıığınnıın %50n %50’’sini protein olusini protein oluşşturur. turur. Ergin bireylerin iErgin bireylerin iççerdierdiğği yai yağğ
miktarmiktarıı
gengençç
bireylerindeki yabireylerindeki yağğ
miktarmiktarıından daha yndan daha yüüksektir.ksektir.
Erkek Erkek DaphniaDaphnia’’nnıınn
genel ggenel göörrüünnüüşşüü
KKÜÜLTLTÜÜR YR YÖÖNTEMNTEMİİ
Uzun sUzun süüreli reli daphniadaphnia kküültltüürleri 1rleri 1--2 litrelik 2 litrelik şşiişşelerde kolayca elerde kolayca ssüürdrdüürrüülebilir. Ancak bunlar ballebilir. Ancak bunlar balıık beslemesine yk beslemesine yöönelik, yeterli nelik, yeterli biyomasbiyomasıı
sasağğlayacalayacağığından kndan küültltüürlerin stok olarak saklanmasrlerin stok olarak saklanmasıı
iiççin in
daha uygundur. daha uygundur. DaphniaDaphnia kküültltüürleri irleri iççin en az 30in en az 30--40 litrelik ya da 40 litrelik ya da daha bdaha büüyyüük kaplark kaplarıın kullann kullanıılmaslmasıı
daha iyi sonudaha iyi sonuçç
verir. Bu amaverir. Bu amaççla la
cam akvaryumlar, tanklar (beton, fiberglas, plastik vs.) ya da tcam akvaryumlar, tanklar (beton, fiberglas, plastik vs.) ya da toprak oprak havuzlar kullanhavuzlar kullanıılabilir.labilir.
KKÜÜLTLTÜÜR YR YÖÖNTEMNTEMİİ
DaphniaDaphnia kküültltüürlerinin yaprlerinin yapııldldığıığı
havuzlardaki su derinlihavuzlardaki su derinliğğinin 1 inin 1
metreden daha az olmasmetreden daha az olmasıı
öönerilir (nerilir (IvlevaIvleva, 1969). Hatta derinli, 1969). Hatta derinliğğin 40in 40--50 cm 50 cm
olmasolmasıı
tavsiye edilir (tavsiye edilir (VenturaVentura
ve ve EnderezEnderez, 1980). Su derinli, 1980). Su derinliğğinin az olmasinin az olmasıı hem ortamdaki hem ortamdaki mikroalgmikroalg
fotosentezi ifotosentezi iççin in ışığıışığın daha iyi nn daha iyi nüüfuz etmesi hem fuz etmesi hem
de oksijenlenme dde oksijenlenme düüzeyinin artmaszeyinin artmasıı
bakbakıımmıından ndan öönem tanem taşışır.r.DaphniaDaphnia kküültltüürlerinin kuvvetli bir havalandrlerinin kuvvetli bir havalandıırmayla rmayla ççok iyi ok iy
i
karkarışışttıırrıılmaslmasıı
gerekir. Kuvvetli havalandgerekir. Kuvvetli havalandıırma alg rma alg üüretimini arttretimini arttıırdrdığıığı
gibi, gibi, didişşiler iler üüzerindeki yumurta sayzerindeki yumurta sayııssıınnıı, yumurtal, yumurtalıı
didişşi sayi sayııssıınnıı
ve ve populasyonpopulasyon
yoyoğğunluunluğğunu da arttunu da arttıırrıır (r (HeisigHeisig, 1977). Ancak hava kabarc, 1977). Ancak hava kabarcııklarklarıınnıın n ççok ok kküçüüçük olmamask olmamasıına dikkat edilmelidir. na dikkat edilmelidir. ÖÖzellikle zellikle MoinaMoina kküültltüürlerinde bu rlerinde bu kküçüüçük kabarck kabarcııklar klar karapakskarapaks
altaltıına sna sııkkışıışır ve hayvanr ve hayvanıın yn yüüzeyde kalzeyde kalııp p
öölmesine neden olur.lmesine neden olur.
KKÜÜLTLTÜÜR YR YÖÖNTEMNTEMİİ
DaphniaDaphnia kküültltüürlerinin yaprlerinin yapııldldığıığı
yerin (havuz, tank vs.) yerin (havuz, tank vs.) ½½
ya da ya da 1/3 kadar1/3 kadarıınnıın n üüzerinin zerinin öörtrtüülmesi tavsiye edilir (lmesi tavsiye edilir (IvlevaIvleva, 1969). K, 1969). Küültltüür r havuzlarhavuzlarıınnıın yan yağğmurdan korunmasmurdan korunmasıınnıın kn küültltüürleri kararlrleri kararlıı
kkııldldığıığı
ööne ne
ssüürrüülmektedir (May lmektedir (May ve arkve ark., 1984).., 1984).DaphniaDaphnia kküültltüürlerinin yorlerinin yoğğunluunluğğu 8Xu 8X--10X10X’’lik bir blik bir büüyyüütme ile tme ile
((öörnerneğğin bir bin bir büüyyüüteteççle) izlenebilir. le) izlenebilir. PopulasyonunPopulasyonun
yayaşş
dadağığıllıımmıı
(h(hıızla zla üüreyen kreyen küültltüürlerde rlerde populasyonpopulasyon
gengençç
bireylerden olubireylerden oluşşur), kur), küültltüürde rde
CyclopsCyclops veya veya RotiferlerinRotiferlerin
hakim olup olmadhakim olup olmadığıığı
izlenmesi gereken izlenmesi gereken öözelliklerdir. Yozelliklerdir. Yoğğunlaunlaşşan kan küültltüürlerden rlerden DaphniaDaphnia bireyleri 100bireyleri 100--2500 2500 micronmicron
ggööz az aççııklklığıığına sahip plankton bezinden yapna sahip plankton bezinden yapıılmlmışış
kepkepççelerle elerle
toplantoplanıır.r.
DaphniaDaphnia KKüültltüürlerirleri
Toprak havuzlarda Toprak havuzlarda DaphniaDaphnia KKüültltüürlerirleri