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Práctica 1
Introducción a la biología i morfología de Drosophila melanogaster
Asignatura Genética. Curso 2019-2020Hayley [email protected] de Genética i MicrobiologíaFacultad de Biociencias
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1. Familiarizarse con el ciclo vital y la morfologia de las diferentes fases del desarrollo de Drosophila.
2. Aprender a diferenciar ambos sexos en D. melanogaster.
3. Estudio de las características fenotípicas de diferentes cepas mutantes.
Objetivos
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• Clasificación sistemática
• Dípteros holometábolos Metamorfosis compleja
• Organismo modelo:
1. Fácil de manipular y de mantener
2. Número de cromosomes reducido (2n=8)
3. Se conoce el mapa completo de su genoma
4. Ciclo de vida “CORTO” (10 días min~3 meses máx.)
5. Muy fértiles; gran número de descendéncia.
6. Gran variedad de mutantes (más de 1000 descritos)
7. Presentan CROMOSOMES POLITÉNICOS (rondas repetidas de duplicaciones).
Drosophila melanogaster
PHYLUM: Arthropoda CLASSE: Insecta ORDEN: Díptera
FAMILIA: Drosophilidae GÉNERO: Drosophila
ESPECIE: Drosophila melanogaster
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Ovoposición
4 ESTADIOS1. Huevo 2. Larva (3)3. Pupa (2)4. Adulto ( o “Imago”)
0,5 mm
4,5 mm
Ciclo vital de Drosophila melanogaster
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Temperatura (ºC) Días Huevo/Larva Días de Pupa Ciclo Completo
(días)
11 57 13 70
15 18 8 26
20 9 6 15
25 5 4 9-10
30 4 3 7-8
Drosophila - Cicle de vida
El ciclo de vida depende de diversos factores ambientales, como la temperatura i la humedad.
Ciclo vital de Drosophila melanogaster
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Flascons de vidrio con medio de cultivo hecho a base de:• Harina de maiz • Levadura (Fuente de proteínas para larvas) • Sal• Agar • Agua (se pueden añadir fungicidas o acaricides y conservantes )
Se cambian los flascons cada 15 días a temperatura constante de 25ºC
La mezcla hierve durante 20 minutos para evitar la fermetación de la levadura. Se añade un papel en zig-zag (para absorber la humedad y como superfície para la pupación).
Mantenimiento
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• 4 parejas de cromosomas
(2n=8)
• Cromosomas Politénicos (los cromosomas sufren rondas repetidas de duplicaciones pero sin separarse, processo conocido como ENDOMITOSIS)
• Glándulas salivales
• Tubos de Malpighi
• Células Nutricias
de los Ovarios
• Epitelio Intestinal
Dotación cromosómica
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Cabeza1. Antenas “PLUMOSAS”2. Piezas bucales
“chupador”3. Ojos simples “OCELOS”4. Ojos compuestos
“OMATIDIOS”
Torax1. Protorax2. Mesotorax3. Metatorax:
Alas, los halterios y par de patas en cada segmento.
AbdomenBandas alternadas claras y oscuras. En el extremo
encontramos el aparato reproductor.
Morfología de Drosophila
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Cap Tòrax Abdomen
• Ojos: omatidios (compuestos) y ocelos (simples)
• 1r Par de Patas – PEINE SEXUAL• Quetas• Escutelo• Alas funcionales• Halterios(estructuras de equilibrio)• Final abdomen
CARACTERÍSTIQUES A OBSERVAR
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HALTERIOSPar de alas posteriores transformadas en órganos del equilibrio
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Macroquetas Microquetas
QUETAS Órganos sensitivos
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Diferenciación de sexos en D.melanogaster
Hembras ♀ Machos ♂
Mayor tamaño Menor tamaño
Abdomen puntiagudo Abdomen redondeado
Pigmentación abdomen clara Pigmentación abdomen oscura
7 segmentos abdominales 5 segmentos abdominales
Sin pinta sexual Con pinta sexual
Hembras Machos
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PEINE SEXUALPrimer par de patas (Tarso)
Macho de D.melanogaster
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Drosophila melanogasterCepa: Canton-S (Wild Type)
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ALGUNES MUTACIONS EN DROSOPHILA MELANOGASTER
• Sèpia (Se): Mutación autosómica recesiva. La pigmentación de los ojos se oscurece desde marrón, a sepia o negro.
• Ebony (e): Mutación autosómica recesiva. El cuerpo de los individuos se vuelve negro con la edad.
• White (w): Mutación recesiva ligada al sexo. Ojos sin pigmentación.
• Yellow (y): Mutación recesiva ligada al sexo. Pigmentación del cuerpo amarilla.
• Forked (Fr): Mutación recesiva ligada al sexo. Quetas rotas por la parte superior (similar a pelos quemados).
• Cut (ct): Mutación recesiva ligada al sexo. Alas cortadas por el extremo superior.
Mutacions letals en homozigozis
• Curly (Cy): Mutación autosómica dominante. Presentan las alas curvadas para arriba. No vuelan, dan pequeños saltos.
• Plum (P):Mutación autosómica dominante. Color de los ojos más apagado que las WT.
• Stubble (St): Mutación autosómica dominante. Quetas cortas, però lisas.
• Ultrabithorax (Ubx): Mutación autosómica dominante. Halterios más gruesos y oscuros. Este caràcter es difícil de determinar porque no tiene penetrancia incompleta.
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White (w)
Curly (Cy)
Sèpia (Se)Forked (Fr)
Stubble (St)
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macroquetasmicroquetas
Quetas normales(wild type)
Quetas forked(mutantes)
Quetas mutantes
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Ebony (e)
Yellow (y)Curly (cy)
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MANIPULACIÓ DE DROSOPHILA
CONSEJOS PRÁCTICOS:
• No dejar abierta la ampolla del éter ni el eterificador ya que es altamente inflamable.
• Una exposición prolongada a el éter puede producir la muerte de las moscas.
• Procurar que la ampolla no quede abierta para evitar posibles contaminaciones.
• Si las moscas comienzan a despertarse, se pueden reeterificar con cuidado de no
matarles.
• Antes de dormir las moscas de nuevo, nos hemos de asegurar que no queden otras dentro
del eterificar.
• Una vez finalizada la observación, las moscas se introducirán en el flascón RIP que
contiene una mezcla de agua y etanol.
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