propag in vitro de heliconia

7/31/2019 Propag in Vitro de Heliconia

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GRUPO: 9 B


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Se aplic un protocolo que permiti lamicropropagacin de la especie ornamentalHeliconia standleyi Macbride.

Se estudiaron variantes de desinfeccin,medios de cultivo y manejo de explantesdurante las diferentes etapas del proceso yfinalmente su aclimatacin.

Durante la fase de establecimiento in vitrode la especie, se logr una desinfeccinptima con hipoclorito de sodio (NaOCl) al2%, durante 20 min en medio liquido.


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Los mejores resultados durante lamultiplicacin se lograron con el medio

suplementado con 6BAP (2.0 mglitro1), AIA(0.65 y 1.3 mglitro1) y cuando lasvitroplantas tenan un tamao mayor de 1.0cm en medio semislido, mismas que

alcanzan un coeficiente de multiplicacin de4.6 explantes por pice.

stos llegan a enraizar adecuadamente con laadicin de cido indolactico (1.3 mglitro1)al medio y se aclimatan satisfactoriamente alos 45 das siempre que las vitroplantastengan entre 3 5 cm de altura.


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La propagacin de Heliconia sp. en Cuba serealiza mediante mtodos tradicionales, deplantacin de rizomas. Por otro lado, lapropagacin agmica aunque garantiza al

cultivador la homogeneidad de las plantasproducidas y por lo tanto un crecimiento,floracin y calidad uniforme; no provee losvolmenes necesarios de plantas para laplantacin de las reas dedicadas a este cultivo.

La propagacin "in vitro" de esta especie ha sidoescasamente abordada por lo que se encuentranmuy pocos trabajos realizados con esta temticaen la literatura (Divo y Vilella, 1994; Olivera etal., 2000).


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Establecer una metodologa para lapropagacin in vitro de picesmeristematicos de H. standleyi, as como

para su aclimatizacin bajo las condicionesde la provincia de Cienfuegos, en Cuba.


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Material vegetal utilizadoComo material de partida se utilizaron

rizomas de plantas donantes de la variedadH. standleyi Macbride de la Biofbrica deVilla Clara, en Cuba. Estos rizomas fueronsembrados en macetas usando como sustratouna mezcla de suelo (60%), estircol vacunocon dos aos de descomposicin (30%) y

zeolita (10%); el mismo fue desinfestado convapor durante 30 minutos; todo el ciclo delexperimento estuvo en condicionescontroladas (invernadero).


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Para la fase I de establecimiento, se inici elexperimento con pices de plantaspreviamente establecidas en macetas yseleccionadas por su vigor y sanidad.

Para los estudios de la fase II (multiplicacin)

y la fase III (enraizamiento) en condiciones invitro, el material vegetal utilizado seencontraba en el tercer subcultivo.


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Los rizomas fueron mondados con auxilio de unacuchilla, hasta llegar a tres centmetros delongitud. Los mismos fueron lavados con aguaabundante y cepillo y luego se pasaron a un

recipiente con detergente al 1% durante cincominutos, enjuagndolos finalmente con agua(Villegas, 1990).

Los explantes fueron desinfestados con unasolucin de hipoclorito de sodio (NaOCl),

probando tres concentraciones (1, 2 y 3%) entres intervalos de tiempo (10, 20 y 30 min).Posteriormente, los residuos del hipocloritofueron eliminados con tres enjuagues en aguaestril (Agramonte et al.,1993).


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Los meristemos fueron diseccionados conayuda de un estereoscopio,

aproximadamente entre 0.5 0.8 mm,formados por 1 3 primordios foliares(Hernndez et al., 1997), fueron implantadosen medio de cultivo lquido con soporte depapel. El medio contena sales MS (Murashigey Skoog, 1962), con 20 g de sacarosa y 0.5mglitro1 de tiamina y suplementado con 2.0mglitro1 de 6BAP.

Las evaluaciones fueron realizadas

semanalmente, hasta 40 das teniendo encuenta los frascos contaminados yregeneracin, as como la brotacin, segnIsaza (2004).


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Fase III: Enraizamiento Se evaluaron dos tamaos de explantes (1

2.9 cm y > de 3.0 cm) que procedan de lafase de multiplicacin, los cuales fueronsembrados en dos tipos de medio deenraizamiento, lquido y semislido (4 glitro1 de agar), compuesto por sales MS + 1.0mglitro1 (tiamina) + 100 mglitro1 demyoinositol + 1.3 mglitro1 de AIA y 4% desacarosa, recomendado previamente porIsaza (2004) para Heliconia sp (Marulanda e

Isaza, 2004). Las evaluaciones se hicieron cada 21 das y se

midieron tres variables: altura, nmero deraces y supervivencia.


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Fase IV: AclimatacinComportamiento de las plantas "in vitro"

en la fase de aclimatizacin sta fue desarrollada segn lo expuesto por

Villalobos y Garca (1982) y Prez et al.(1998) para la aclimatizacin en umbrculoscon cubierta de malla plstica que disminuyela intensidad de la luz en un 30%. En sta seanaliz la adaptacin de las plantastrasplantadas en contenedores de poliespuma, evalundose la influencia sobrefactores morfolgicos y su adaptacin exvitro.


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Fase I: Establecimiento

Desinfeccin superficial del material inicial

Con una concentracin elevada del desinfectante

o del tiempo, disminuye la contaminacin. Esobvio que se producen afectaciones al tejido apartir de 2% y 30 min. En cuanto a la brotacin,el tratamiento 5 (2% y 20 min) mostr diferenciasignificativa con el resto ya que logra mejor

brotacin, sin diferencias en cuanto a la prdidade plantas contaminadas, en correspondenciacon lo expuesto por Agramonte et al. (1998) yAlvarado (2003).


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Fase II: Multiplicacin Al comparar las diferentes hormonas en fase

de multiplicacin, se lograron los mejoresresultados con un coeficiente de 4.5 y 4.6,cuando se combin 2 mglitro1 de 6BAP y0.65 y 1.3 mglitro1 de AIA respectivamente,

lo que justifica un correcto balancecitoquinina auxina necesario para obtenerla mejor calidad de plantas durante lossubcultivos en un medio semislido, dado por

un mejor intercambio in vitro


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Fase III: Enraizamiento En cuanto al estado fsico del medio de

cultivo y el manejo de los explantes seobserv que los explantes que fueronseleccionados, mayores de 3.0 cm incluidosen los tratamientos 3 y 4, siempre obtuvieron

la mayor supervivencia (100%), con un mejordesarrollo en cuanto a altura, nmero dehojas y races, sin diferencias entre medioslquido o semislido.


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Fase IV: Aclimatizacin

Las plantas en fase de aclimatizacintuvieron un incremento aceptable en sualtura (11 14 cm) a medida que estn mstiempo en umbrculo desde 30 60 das,pero sin diferencia significativa con lasplantas que fueron extradas hasta con 3 cmde altura. El nmero de hojas tambin seincrement (5 7 hojas), sin diferencia conla duracin del ciclo en cmaras hasta los 45das, siempre que las plantas tenan entre 3 5 cm de altura.


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Se evalu un protocolo que permiti lamicropropagacin de la especie Heliconiastandleyi Macbride y su aclimatacin en laprovincia de Cienfuegos.

La mejor desinfeccin de los explantes se logracon hipoclorito de sodio (NaOCl) y usandopreferiblemente concentraciones de 2% por 20min.

El establecimiento in vitro se logr con el medioque contena sales MS, suplementado con 0.5mglitro1 de tiamina, 2.0 mglitro1 de 6BAP y20 g de sacarosa.


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En la fase de multiplicacin se logr hasta

4.6 de explantes/pices, cuando sesubcultiva en medio semislido compuestopor 2.0 mglitro1 6BAP y 0.65 mglitro1 deAIA. El desarrollo de races en las

vitroplantas es ptimo siempre que seseleccionen explantes hasta 3.0 cm dealtura. La supervivencia de las vitroplantasdurante la fase de aclimatizacin fue

adecuada cuando las mismas tienen unaaltura mayor de 3.0 cm, estando listas paraenviar a campo despus de los 45 das.


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F. M. SosaRodrguez1, R. S. Ortiz1, R. P.

Hernndez1, P. M. Armas2 y D. S. Guillen3Rev. Chapingo

Ser.Hortic vol.15 no.spe Chapingo 2009

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