PRUEBAS SEROLOGICAS

DR. HECTOR A. FERNANDEZ ALCARAZDR. HECTOR A. FERNANDEZ ALCARAZ

PEDIATRIA ESPECIALIZADAPEDIATRIA ESPECIALIZADA

PRUEBAS SEROLOGICAS DE ACTUALIDAD:

E.L.I.S.A.

WESTERN BLOT.

R.I.A.

INMUNOFLUORESCENCIA

E.L.I.S.A.Antígenos sobre unaplaca de plástico.

Placa de plástico.

Unión Ag-Ac-Anti-Ac/UNIDO A ENZIMA

Enzima

Anticuerpos del paciente

Anti-inmunoglobulinas ligadas a enzimas

Sustrato

INMUNOLOGIA

WESTERN BLOT o MANCHA DEL OESTE.- Las muestras de antígeno se someten a una electroforesisen un gel de poliacrilamida, las moléculas resueltas se transfieren electroforéticamente a una membranade nitrocelulosa. La mancha se trata con un anticuerpo específico, se lava y se agrega el conjugado radiomarcadopara detectar los anticuerpos unidos a la mancha. Las bandas se visualizan mediante autorradiografía.

GEL DE SEPARACION TANQUE DE MANCHADO

Transferir pépt idos a lalámina de Nitrocelulosa

(-)

(+)

Pépti dos separados

Antígenos

Añadir anticuerpo, lavaragregar conjugado

radiomarcado

Se revela y sefija y se visualizan

las bandasde antígenos.

(-)

(+)

AUTORRADIOGRAFÍA

INMUNOLOGIA

INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA.- Los antígenos de IgG (rojos), están pegadosal tejido renal, los anti antiguerpos IgG de color verde se marcan con fluoresceina(color amarillo), estos se pegan a los antígenos y la reacción positiva se observa en microscopía de lus U.V.

INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA

Tejido renalcon depósitosde IgG.

Tejido renalcon depósitosde IgG.

IgG

IgG

IgG

IgGAdición de Anti-IgG

marcada con fluoresceina.

Tejido renal con depósitosde IgG del mismo paciente

Fluorescencia positivaal microscopio.

R.I.A.Antígenos sobre unaplaca de plástico.

Placa de plástico.

Anticuerpos del paciente

Anti-Anticuerpos marcadosradioactivamente

Unión Ag-Ac-Anti-Ac/radioactivo

INMUNOLOGIA

R.I.A. (RADIOINMUNO ENSAYO).- El antígenoazul está pegado a una placa de plástico, losanticuerpos de color azul verde, se tratan con radioactividad y se detectan en contador de radiación

GRACIAS