q.f.b. fini

TOMA MANEJO, ALMACENAMIENTO, TRANSPORTE Y PROCESAMIENTO DE

MUESTRAS EN MICROBIOLOGÍA.

Q.F.B. SERAFINA DEL ROSARIO ORTEGA SARMIENTO

Q.F.B. JUAN CARLOS PAAT PUC

RECOLECCION DE MUESTRAS

La correcta recolección de una muestra para su cultivo es posiblemente la etapa mas importante en el

aislamiento de microorganismos responsables de enfermedades infecciosas. Una muestra

deficientemente recogida puede ser el motivo del fracaso de aislar el microorganismo causante, y la

recuperación de contaminantes puede conducir a una terapia incorrecta o a una perjudicial.

1. La muestra para cultivo debe ser material del verdadero sitio de infección y debe recogerse con un mínimo de contaminación de tejido, órganos o secreciones adyacentes por ejemplo:

La contaminación de una muestra de endometrio con secreciones vaginales.

2. Establecer períodos óptimos para la recolección de muestras a fin de tener la mejor oportunidad de aislar los microorganismos causantes. Ejemplo.

En pacientes con fiebre de tifoidea el microorganismo causante puede ser aislado óptimamente de la sangre durante la primera semana de la enfermedad. El cultivo de heces u orina es usualmente positivo durante la segunda y tercera semana de la enfermedad.

3. Obtener suficiente cantidad de muestra para llevar acabo las técnicas de cultivo solicitada.

Es preciso establecer pautas que indiquen lo que constituye un volumen suficiente de material para cultivo. En la mayoría de los casos de infección bacteriana activa se producen cantidades suficientes de secreción purulenta, del modo que el volumen no es problema. En formas crónicas o más benignas de infección, puede ser difícil obtener suficiente material; tales muestras no se deben descartar categóricamente, más bien se debe de solicitar una segunda muestra, ya que hay situaciones en que aun una muestra escasa es mejor que no disponer de ninguna.

4. Utilizar dispositivos de recolección, recipientes para las muestras y medios de cultivos adecuados para asegurar el óptimo aislamiento.

Se deben emplear recipientes estériles para la recolección de muestras. Es también importante que dichos recipientes estén construidos para facilitar la recolección, particularmente si se requiere que los pacientes obtengan sus propias muestras. Los frascos de boca estrecha no son adecuados para la recolección de muestras de esputo u orina. Los recipientes deben de estar también provistos de tapa de cierre hermético para evitar derrame o contaminación durante el traslado de muestra.

5. Siempre que sea posible, obtener las muestras antes de la administración de antibióticos.

Esto es particularmente aconsejable para el aislamiento de microorganismo como los estreptococos beta hemolíticos de muestras de garganta. Neisseria gonorrhoeae del tracto genitourinario, o Haemophilus influenzae y Neisseria meningitidis en las meningitis.

Sin embargo, la administración de antibióticos no necesariamente excluye la recuperación de otras especies de microorganismos de muestras clínicas. La acción de muchos antibióticos puede ser Bacteriostática, No Bactericida.

6. El envase recolector de la muestra debe de estar correctamente rotulado.

A fin de que el Químico pueda llevar acabo las técnicas de cultivo en forma correcta y proveer al médico información completa y exacta, cada recipiente que contiene una muestra debe de tener un rótulo legible con los siguiente datos mínimos:

Nombre:__________. No. ID:___________. Tipo de Muestra:___________. Fecha y hora:______________.

RECOLECCIÓN DE MUESTRAS DE DIFERENTES SITIOS

ANATÓMICOS

La flora microbiana usual de garganta, faringe y nariz consiste en Estreptococos Alfa Hemolíticos, especies de Neisseria (que no son Neisseria gonorrhoeae, Staphylococcus epidermidis, S. aureus, S. pneumoniae, varias especies de Haemophilus, Difteroides, y numerosas especies de bacterias anaerobias.

En la mayoría de los casos, las muestras de garganta se realizan a fin de aislar Estreptococos Beta hemolíticos del grupo A, que causan faringitis

Toma de la muestra.Se instruye al paciente para que respire profundo y la

lengua se hace descender suavemente con un abatelengua. El hisopo se desliza entonces entre los pilares tonsilares y por detrás de la úvula, cuidando de no tocar las paredes laterales de la cavidad bucal. La emisión de un ”aah” por parte del paciente sirve para elevar la úvula y ayuda a reducir el reflejo de la náusea. El hisopo se debe pasar rápidamente de un lado a otro de la faringe posterior a fin de obtener una muestra adecuada. Una vez recogida la muestra el hisopo se debe de colocar inmediatamente en un tubo que contenga un medio de enriquecimiento.

Exudado vaginal

Nombres alternativos

Cultivo endocervical;

cultivo del tracto genital femenino;

cultivo vaginal;

cultivo del cuello uterino

Definición

Es un examen de laboratorio que implica tomar muestras del endocérvix y utilizarlas para aislar e identificar el (los) organismo(s) causantes de una infección en el tracto genital femenino.

Preparación para el examen

La preparación para un examen vaginal consiste en vaciar la vejiga (también es aconsejable el vaciado intestinal),

desvestirse de la cintura para abajo,

colocar los pies en los estribos de la mesa de examinación y cubrir la parte inferior del cuerpo con una sábana suministrada por el médico o la enfermera.

Lo que se siente durante el examen

Se siente una presión producida por el espejo vaginal con el fin de poder observar el cuello uterino y recolectar la muestra.

Puede haber una leve sensación de cólico cuando se toca el cuello uterino con el aplicador (hisopo).

Ya teniendo la muestra se coloca en un tubo que contenga un medio de enriquecimiento (estéril). El cual nos sirve como medio de transporte.

Forma en que se realiza el examen

Durante el examen vaginal, se hace un raspado de moco y células del endocérvix (el orificio del útero).

Se colocan frotis en láminas o en un medio de cultivo (o en ambos) dependiendo de la causa posible de la infección.

Se obtiene también una muestra la cual el hisopo debe de colocarse en ClNa y examinar al microscopio en fresco inmediatamente después de obtenidas, para detectar la presencia de Trichomonas vaginalis o de levaduras de Candida Albicans.

Se realizan frotis para la tinción de Graam.

Razones por las que se realiza el examen

El examen se puede realizar para determinar la causa de una vaginitis, de una secreción genital inusual o de otros signos y síntomas de infección.

Razones por las que se realiza el examen

También se usa para la detección de enfermedades de transmisión sexual.

Valores normales

Se presentan los

microorganismos vaginales normales en las cantidades esperadas.

Significado de los resultados anormales Los resultados anormales indican

la presencia de una infección en el tracto genital femenino.

Mediante un cultivo se pueden detectar

– Gonorrea.

– Herpes simple

– E. coli,

– C. trachomatis,

– Estreptococos del grupo B

– y otros microorganismos.

La recuperación de estos microorganismos no la podemos realizar pues no contamos con los medios de transporte y los medios de cultivos selectivos.

Medios de transportes.

Sistemas Transgrow, Jembec y Gonozyme. Medios selectivos.

Agar-base Chocolate se conoce ahora Agar de Thayer-Martin modificado(MTM).

Otro medio selectivo es el Agar de Martin-Lewis (ML), es semejante a MTM.

Otro medio selectivo es llamado NYC suplementado con eritrocitos de caballo lisados y plasma de caballo citratado en lugar de hemoglobina, lo que produce un medio translucido en lugar de opaco. (fórmulas original y modificadas se encuentran en los comercios en placas de petri.

Los cultivos se incuban a 35°C en una atmósfera con 3 a 5% de CO2. Se deben sembrar también en medios no selectivos

Otras indicaciones.

Clamidia Uretritis crónica Gonococcemia

diseminada Enfermedad

Pélvica Inflamatoria.

¿Cuáles Son Los Riesgos?

No hay riesgos.

EXUDADO URETRAL

Nombres alternativos

Cultivo del tracto genital masculino. Cultivo uretralDEFINICION Es un examen de laboratorio en el que es

necesario tomar una muestra de la uretra, y procesarla para aislar e identificar el (los) organismo(s) causantes de una infección en el tracto genital masculino

FORMA EN QUE SE REALIZA EL EXAMEN

En el exámen el paciente debe presentarse sin asearse y se hace una toma del orificio de la uretra ya que el paciente se presenta con una uretritis supurativa aguda en la cual es posible identificar diplococos gramnegativos intracelulares.

Se colocan frotis en laminas para la realización de la tinción de gram y medio de transporte y cultivos selectivos y también deben inocularse y sembrarse en medios no selectivos.

Cuando la secreción es escasa y no se observan diplococos intracelulares en una muestra al azar, puede ser útil recoger la primera muestra matinal previa a la micción. Puede obtenerse exudado del orificio uretral “ordeñando” suavemente el pene; sí no se obtiene, puede insertarse la punta de un hisopo de algodón, rayón o dacrón de pequeño diámetro con un soporte de plástico o aluminio de 3 a 4 cm. En la uretra anterior. El hisopo debe dejarse unos pocos segundos para que las fibras se saturen con el exudado.

Para el aislamiento se requiere los mismos medios selectivos de exudado vaginal

LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO

La punción espinal lumbar es el procedimiento utilizado por los

médicos a fin de obtener LCR para cultivo y otros estudios de laboratorio.

TOMA DE LA MUESTRA

Luego de desinfectar convenientemente la piel de la zona lumbar, se pide al paciente que se recueste sobre un costado con el torso doblado hacia adelante para separar las apófisis espinosas de las vértebras lumbares.

Bajo anestesia local, se introduce una larga aguja en el conducto espinal, entre la tercera y cuarta vértebras lumbares. El LCR no necesita ser aspirado ya que fluye de la boca de la aguja a una presión de aproximadamente 90 a 150 mm de LCR en individuos normales.

El liquido se recoge comúnmente en tres tubos: tubo No.1 para recuento de células y tinciones diferenciales, tubo No. 2 para

tinción de gram y cultivo y tubo No. 3 para estudio de proteínas y glucosa o estudios especiales.

Las dos especies bacterianas mas comunes causantes de meningitis: Neisseria meningitidis y Haemophylus influenzae.

El aislamiento de H. influenzae por lo común se logran por estos procedimientos: -Agar-chocolate-Técnica de la estría estafilocócica -Agar para aislamiento de Haemophilus-Agar de enriquecimiento de Fildes-Agar-sangre de caballo de CASMAN-Incubación en un medio húmedo con CO2 aumentado (3 a 5 % )

En el aislamiento de Neisseria Meningitidis se utilizan los mismos medios que Neisseria Gonorrhoeae.

UROCULTIVO

INSTRUCCIONES PARA OBTENER MUESTRAS DE ORINA CON LA TÉCNICA DE

RECOLECCIÓN LIMPIA (MUJERES) 1. Quitarse totalmente la ropa interior y

sentarse cómodamente en el inodoro, llevando una rodilla hacia el costado lo mas lejos posible.

2. Abrase la zona genital con una mano y continúe así mientras se limpia y recoge la muestra.

3. Lavado. Asegúrese de lavarse y enjuagarse muy bien antes de recoger la muestra de orina. Usando compresas estériles de 4” x 4” empapadas en jabón verde al 10%, límpiese de adelante hacia atrás; repita esto 4 veces, cada vez con una nueva compresa. Lave entre los pliegues de la piel en la forma mas cudadosa que pueda.

4. Enjuague. Una vez que se a lavado con cada compresa con jabón, enjuáguese con una compresa húmeda con el mismo movimiento de adelante hacia atrás. No use ninguna compresa mas de una vez.

5. Mantenga la zona genital abierta y deje caer las primeras gotas de orina en el inodoro. Mantenga el envase en posición y deje salir el resto de la orina en él.

6. Coloque la tapa del envase.

En hombres, habitualmente el agua jabonosa no es necesaria; por lo general, la simple limpieza del meato uretral inmediatamente antes de la micción y la recolección de la parte media del chorro son suficientes

En pacientes sin infecciones del tracto urinario, el recuento es nulo o a lo sumo de muy pocas colonias; en los que tienen infección, el recuento es comúnmente mayor de 100,000 UFC/ml. El aislamiento de tres o mas especies bacterianas también indica generalmente que la muestra sea contaminado por recolección incorrecta o demora en el transporte.

Se pueden emplear para cultivo muestras de orina obtenidas por cateterismos. Se debe obtener el “flujo libre” de la boca del catéter. La orina recogida en bolsas con catéter es generalmente inadecuada para cultivo, excepto en bebes, tomando precauciones especiales. Las muestras de orina recogidas con puntas de catéter de foley no son apropiadas para cultivo, debido a que las puntas de catéter están invariablemente contaminadas con organismos uretrales.

En ocasiones puede ser necesario obtener una muestra valida de orina para cultivo directamente de la vejiga por aspiración suprapúbica, en particular tratándose de niños pequeños.

HERIDAS Y ABSCESOS

Las infecciones de las cuales se obtienen muestras de heridas y abscesos pueden ser exógenos o endógenas.

Las infecciones exógenos incluyen las asociadas con heridas traumáticas, heridas o úlceras por decúbito, mordeduras de animales

o humanos, quemaduras o cuerpos extraños en la piel o mucosa. Estas lesiones con frecuencia son colonizadas por bacterias

ambientales y los hisopados a menudo no reflejan la verdadera causa del proceso infeccioso.

FORMA EN QUE SE REALIZA LA TOMA

El método mas aconsejable para recolectar muestras consiste en aspirar el liquido o pus de la profundidad de la herida con una aguja y jeringa

estériles.Primero debe descontaminarse el sitio con jabón quirúrgico y alcohol

etílico o isopropilico al 70%.La misma jeringa puede usarse como medio de transporte; pero si se

demora mas de 30 minutos para llevarla al laboratorio debe transferirse a un tubo estéril.

Si no se puede obtener material con aguja y jeringa y debe usarse un hisopo, se deben separar suavemente los bordes de la herida con el

pulgar e índice de una mano (usando un guante estéril), introduciendo la punta del hisopo en la profundidad de la herida con la otra mano,

cuidando de no tocar los bordes cutáneos adyacentes. El hisopo debe colocarse en un medio de transporte adecuado.

Las heridas y abscesos endógenos pueden asociarse con apendicitis, colecistitis, celulitis o muchas otras infecciones internas.

COPROCULTIVO

TOMA DE LA MUESTRA

Las muestras obtenidas directamente en recipientes estériles de boca ancha se

deben cubrir con tapas herméticas.Pueden ser necesario el hisopado rectal

para el aislamiento de especies de SHIGELLA o NEISSERIA gonorrhoeae. En

el caso de este ultimo organismos, el hisopo se debe introducir justo pasando

el esfínter anal, evitando la contaminación con materia fecal dentro

del recto.Las muestras de heces se deben

examinar y cultivar tan pronto como sea posible después de la recolección.

HEMOCULTIVO

TOMA DE LA MUESTRA

Los hemocultivos se pueden obtener ya sea utilizando aguja y jeringa, o bien por el llamado “SISTEMA CERRADO”, empleando un frasco al

vació y un tubo de recolección con doble aguja, nunca debe extraerse sangre para cultivos de un catéter intravenoso o

intraarterial in situ.En ambos casos el sitio de venopunsion debe descontaminarse

convenientemente.Una optima preparación de la piel para evitar contaminación comprende:

1.- lavar con jabón verde2.- enjuagar con agua destilada

3.- aplicar tintura de yodo yodopovidona 1-2 % y dejar secar durante 1 a 2 minutos y

4.- eliminar el yodo con alcohol al 70%.

El sitio de venopunsion no se debe palpar luego de este tratamiento, salvo que se utilice un guante estéril.

Si se utiliza yodopividona, debe omitirse el paso cuarto.

Los hemocultivos se realizan en medios anaerobios, pero también se aconseja obtener frascos aerobios.

Los frascos aerobios deben ser ventilados con aire ambiental mediante una aguja tapada con algodón, una vez inyectada la muestra de

sangre.

ESPERMOCULTIVO

PREPARACION PARA EL EXAMEN

Abstinencia sexual de 3-5 dias. Asearse con agua y jabón -manos y pene-. Secarse con ropa limpia. Masturbación y recolección de la muestra en un recipiente estéril de

boca ancha y cierre hermético.

Recolectada la muestra, llevarla inmediatamente al laboratorio para su procesamiento

Anotarle: NombreHora de recolección Hora de recepciónNumero de identificación

Sembrar en sus respectivos medios de cultivo.

RAZONES POR LAS QUE SE REALIZA EL EXAMEN:

Cuando se sospecha de enfermedad Prostática o de las Vesículas seminales, y que pudiera ser factor de infertilidad que junto con la espermatobioscopia, dónde podemos observar presencia de leucocitos, eritrocitos y levaduras se complementa el diagnostico.

TRANSPORTE DE MUESTRAS

EN UN MEDIO HOSPITALARIO SE RECOMIENDA UN LIMITE DE 2 HORAS ENTRE LA RECOLECCION DE LAS MUESTRAS Y SU ENVIO AL LABORATORIO PARA PROCESARLAS

PROCEDIMIENTOS DE LOS SIGUIENTES MEDIOS QUE

UTILIZAMOS EN EL LABORATORIO

DIAGRAMA DE FLUJO 1

MAC CONKEY: ENTEROBACTERIAS

MUESTRA

SEMBRAR LA COLONIA EN TUBOS PARA PRUEBAS DE BIOQUÍMICA (TSI, LIA, C.S, UREA DECHRISTENSEN, MIO)

REALIZAR ANTIBIOGRAMA EN MEDIO DE MUELLER-HINTON UTILIZANDO MULTIDISCOS PARA GRAM (-)

INCUBAR 24 HORAS A 37ºC

INTERPRETAR PRUEBAS DE BIOQUIMICA

LEER ANTIBIOGRAMA

RESULTADOS

POSITIVA

S. Aureus

PRUEBA DE LA COAGULASA

DIAGRAMA DE FLUJO 2

SAL Y MANITOL : STAPHYLOCOCCUS

MUESTRA

REALIZAR ANTIBIOGRAMA EN MUELLER-HINTON CON MULTIDISCOS GRAM (+)

REALIZAR TAPETES EN A. SANGRE DEPOSITAR UNIDISCOS DE NEOMICIMA Y NOVOBIOCINA

INCUBAR 24 HRS A 37ºC

INCUBAR 24 HRS A 37ºC INCUBAR 24 HRS A 37ºC(OBSERVAR A INTERVALOS DE

30 MIN. DURANTE LAS PRIMERAS 4 HRS. YA QUE HAY

BACTERIAS FUERTEMENTE COAGULASA (+) QUE PUEDEN PRODUCIR COAGULOS EN 1-4

HRS. ALG. S. aureus QUE FORMAN FUERTES

FIBRINOLISINAS QUE DISUELVEN EL COAGULO

RECIEN FORMADO ).

NEGATIVA

S. epidermidis

O

S. saprophyticus LEER ANTIBIOGRAMA

LEER SENSIBILIDAD O RESISTENCIA EN LOS UNIDISCOS Y CLASIFICAR LA ESPECIE DE STAPHYLOCOCCUS

RESULTADOS

DIAGRAMA DE FLUJO 3

SABOURAUD : HONGOS

MUESTRA

REALIZAR PRUEBA DE KOH EN UN PORTAOBJETOS. SE COLOCA UN CUBREOBJETOS Y SE OBSERVA AL MICROSCOPIO CON OBJETIVO DE 40X

APARICIÒN DE LEVADURAS

REALIZAR LA PRUEBA DEL TUBO GERMINAL

INCUBAR 3 HRS. A 37ºC

OBSERVAR AL MICROSCOPIO CON OBJETIVO DE 40X UNA GOTA DE LA SUSPENSIÒN DEL TUBO GREMINAL

LEVADURAS SOLAS PRESENCIA DE TUBOS GERMINALES

LEVADURAS DIFERENTES A CANDIDA ALBICANS

CANDIDA ALBICANS

DIAGRAMA DE FLUJO 4

AGAR SANGRE: STREPTOCOCCUS

MUESTRA

CATALASA Y OXIDASA

TINCION DE GRAM

β HEMOLITICO HEMOLITICO

REALIZAR TAPETES EN A. SANGRE Y DEPOSITAR UNIDISCO DE BACITRACINA (O.O4 U.)

REALIZAR LA PRUEBA DE CAMP

INCUBAR 24 HRS. A 37º C.

REALIZAR LECTURA SEGÚN SENSIBILIDAD O RESISTENCIA DEL UNIDISCO DE BACITRACINA

POSITIVO : S. BETA HEMOLITICO DEL GPO. “A”

NEGATIVO NO GPO. “A”

LEER ZONAS DE HEMOLISIS EN CABEZA DE FLECHA EN LAS INTERSECCIONES DE LA INOCULACION

POSITIVO CONFIRMAN QUE EL S. EN ESTUDIO PERTENECE AL GPO. “B” DE LANCE FIELD

NEGATIVO No. GRUPO “B”

REALIZAR TAPETES EN A. SANGRE Y DEPOSITAR UNIDISCO DE OPTOQUINA


REALIZAR LECTURA SEGÚN SENSIBILIDAD O RESISTENCIA DEL UNIDISCO

POSITIVO

S. PNEUMONIAE

NEGATIVO

S. ALFA HEMOLITICO

PRUEBA DE CAMPLa siembra diagonal a través de la placa es un Staphylococcus beta

hemolítico; la siembra perpendicular es de un cultivo puro de Streptococcus a ser identificado.

Las zonas de hemólisis en cabeza de flecha en las intersecciones de la inoculación confirman que el S. en estudio pertenece al grupo “B” de

lancefield.

PRUEBAS DE SUSCEPTIBILIDAD A ANTIBIOTICOS

Debe tomarse una decisión en cuanto a la realización de pruebas de susceptibilidad a antibióticos para los microorganismos recuperados de

muestras clínicas. No todos los aislamientos deben estudiarse, aun cuando el medico haya efectuado la solicitud usual de “cultivo y

antibiograma”. No deben estudiarse aquellos microorganismos cuyo antibiograma se conoce, como Streptococcus alfa y beta hemolíticos,

incluyendo S. pneumoniae (pocas cepas son resistentes a análogos de la penicilina). No deben efectuarse pruebas de susceptibilidad para

microorganismos que se consideran contaminantes o cuando se recuperan tres especies o mas.

PRUEBA DE LA BACITRACINA

Para diferenciar los Streptococcus del Gpo. “A” y “B” de otros grupos beta hemolíticos con los que pueden ser confundidos, es útil colocar un disco de susceptibilidad SXT a lado del disco

de bacitracina. La mayor parte de los Streptococcus del Gpo. “A” y “B” son

resistentes a SXT. Los Streptococcus beta hemolíticos resistente a SXT pero susceptibles a la bacitracina (o.o4U)

pueden ser identificados presuntivamente como pertenecientes al grupo “A” ; si son resistentes a ambos discos lo mas

probable es que sean del Gpo. “B”.Los microorganismos beta hemolíticos que son resistentes a la bacitracina pero sensibles a SXT no pertenecen al Gpo. “A” ni

al “B”.

LOS PROCEDIMIENTOS QUE SE REALIZAN CUANDO UNA

MUESTRA LLEGA AL LABORATORIO

PROCEDIMIENTO: CULTIVO DE EXUDADO FARINGEO

MUESTRA :EXUDADO FARINGEO

COLOCAR UN FROTIS EN UN PORTAOBJETOS

INCUBAR EN CALDO DE ENRIQUECIMIENTO I.C.C. – 2 HRS A 37ºC

SEMBRAR EN LOS AGARES

MAC CONKEY SAL Y MANITOL SABOURAUD A. SANGRE


DESARROLLO BACTERIANO

REALIZAR EL PROCEDIMIENTO SEGÚN DESARROLLO DE FLUJOS (1,2,3,4.)


LEER - RESULTADOS

MAC C.

REALIZAR EL PROCEDIMIENTO SEGÚN DESARROLLO DE FLUJOS (1,2,3,4)

PROCEDIMIENTO: CULTIVO DE EXUDADO VAGINAL

MUESTRA: EXUDADO VAGINAL

INCUBAR EN CALDO DE ENRIQUECIMIENTO I.C.C. – 2HRS. A

37ºC


S Y M SABOURAUD A. SANGRE

INCUBAR 24HRS A 37ºC


REALIZAR ANTIBIOGRAMA


COLOCAR UN HISOPO EN SOLUCION SALINA

CENTRIFUGAR A 3,500 r.p.m. 5 minutos

COLOCAR EL PRECIPITADO EN UN PORTAOBJETO

OBSERVAR AL MICROSCOPIO CON OBJETIVO DE 40 x

DETECTAR PRESENCIA DE LEVADURAS O DE TRICHOMONAS VAGINALIS

LEER Y RESULTADOS

COLOCAR FROTIS EN PORTAOBJETO

REALIZAR TINCION DE GRAM

POSIBLE IDENTIFICACION DE DIPLOCOCOS GRAM (-)

INTRACELULARES

PROCEDIMIENTO: CULTIVO DE EXUDADO URETRAL

MUESTRA: EXUDADO URETRAL

INCUBAR EN CALDO DE ENRIQUECIMIENTO I.C.C. – 2HRS. A

37ºC


S Y M SABOURAUD A. SANGRE





LEER Y RESULTADOS

COLOCAR FROTIS EN PORTAOBJETO

REALIZAR TINCION DE GRAM

POSIBLE IDENTIFICACION DE DIPLOCOCOS GRAM (-)

INTRACELULARES

MAC C.

REALIZAR EL PROCEDIMIENTO SEGÚN DESARROLLO DE FLUJOS (1,2,3,4)

MUESTRAS QUE TIENEN EL MISMO PROCEDIMIENTO: CULTIVOS DE L.C.R, LIQUIDO DE ASCITIS, LIQUIDO PLEURAL, ESPERMOCULTIVO

MUESTRA

SEMBRAR EN AGARES



SIN DESARROLLO BACTERIANO

REPORTAR NO SE OBSERVO DESARROLLO BACTERIANO

DESPUES DE 48HRS DE INCUBACION


REALIZAR EL PROCEDIMIENTO SEGÚN

DESARROLLO DE FLUJOS (1,2,3,4)



LEER – RESULTADOS

PROCEDIMIENTO : UROCULTIVO

MUESTRA: ORINA ESTERIL

SEMBRAR EN CAJAS DE PETRI SIN DIVICIONES EN LOS AGARES:









LEER Y REPORTAR : >100,000 U.F.C./ml o < 100,000 U.F.C./ml.

TOMAR MUESTRA CON ASA CALIBRADA

CONTAR EL NUMERO DE COLONIAS Y REALIZAR EL PROCEDIMIENTO SEGUN DESARROLLO DE FLUJOS (1,2,3,4)

MUESTRAS QUE TIENEN EL MISMO PROCEDIMIENTO: CULTIVO DE SECRECION Y PUNTA DE CATETER

MUESTRA

SEMBRAR EN AGARES









LEER Y RESULTADOS

INCUBAR EN CALDO DE ENRIQUECIMIENTO I.C.C. 2 HRS A 37ºC

REALIZAR EL PROCEDIMIENTO SEGÚN DESARROLLO DE FLUJOS

(1,2,3,4)

SEMBRAR DIRECTAMENTE EN AGAR MAC CONKEY Y SALMONELLA-

SHIGELLA

ENRIQUECER LA MUESTRA INOCULANDO EN FORMA RELATIVAMENTE ABUNDANTE EN CALDO

DE TETRATIONATO, AGREGAR 4 GOTAS DE YODO.

REALIZAR EL PROCEDIMIENTO SEGÚN FLUJO (1)

PROCEDIMIENTO: COPROCULTIVO

MUESTRA:




LEER – RESULTADOS

LEER Y RESULTADOS

INCUBAR DURANTE 6 – 12 HRS A 37ºC

SUBCULTIVAR EN S.S. Y SULFITO DE BISMUTO

(SELECTIVO PARA S. TYPHI)

INCUBAR DE 12 – 24 HRS A 37ºC


REALIZAR EL PROCEDIMIENTO SEGÚN FLUJO (1)



PROCEDIMIENTO : HEMOCULTIVO

REALIZAR EL PROCEDIMIENTO SEGÚN DESARROLLO DE

FLUJOS (1,2,3,4)

INCUBAR FRASCO DE HEMOCULTIVO POR 21 DIAS A 37ºC SI EXISTE TURBIDEZ O CRECIMIENTO BACTERIANO REALIZAR RESIEMBRA

MUESTRA : HEMOCULTIVO

MEZCLAR LA SANGRE: CON JERINGA Y AGUJA ESTERIL, ASPIRAR UN ml DE SANGRE, DESECHAR DE 2-3 GOTAS Y DEPOSITAR 2 GOTAS EN CADA UNO DE LOS SIGUIENTES AGARES.




REALIZAR LA 2da RESIEMBRA: A LAS 48 HRS DEL FRASCO DE HEMOCULTIVO UTILIZANDO EL MISMO PROCEDIMIENTO ANTERIOR




LEER Y REPORTAR

INCUBAR 24 HRS A 37ºC (FRASCO EN POSICION HORIZONTALN )



REPORTAR: NO SE OBSERVO DESARROLLO BACTERIANO DESPUES DE 72 HRS DE INCUBACION

CHECAR DIARIO PARA OBSERVAR SI EXISTE TUBIDEZ O CRECIMIENTO BACTERIANO

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