18530742 metodos oficiales de analisis bebidas alcoholic as

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ANALITICOS EN ALIMENTARIA METODOS OFICIALES DE ANALISIS Productos derivados de la uva, aguardientes y sidras

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Page 1: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

D O S A N A L I T I C O S E N A L I M E N T A R I A

M E T O D O S O F I C I A L E S D E A N A L I S I S

Productosderivados dela uva,aguardientesy sidras

Page 2: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

PANREAC QUIMICA, S.A. publica una nueva

edición de sus folletos de Métodos Analíticos en Ali-

mentaria, en la que podrán apreciar a simple vista

un cambio de formato respecto a las anteriores.

Esta nueva imagen, pretende ser una expresión de

los cambios que con el tiempo hemos experimentado

en nuestros campos de actividad, puesto que si con-

tinuamos manteniendo una importante implanta-

ción en el sector alimentario como fabricantes de

reactivos para análisis PANREAC y de los aditivos

alimentarios ADITIO, actualmente hemos aumen-

tado nuestra aportación de productos para el análisis

alimentario con nuestras líneas de Cromatografía en

Capa Fina PANREAC-TLC y Medios de Cultivo

Deshidratados para Microbiología CULTIMED.

La colección Métodos Analíticos en Alimentaria se

compone de 6 folletos monográficos, por campos de

alimentos, que recogen una transcripción íntegra

de los métodos oficiales de análisis en España, que

a su vez son publicados en los correspondientes

B.O.E. mencionados en el índice de cada

monografía incorporando los reactivos y productos

auxiliares PANREAC en la calidad considerada

más idónea, así como los medios de cultivo

CULTIMED.

M E T O D O S A N A L I T I C O S E N A L I M E N T A R I A

Page 3: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

Los títulos de las 6 monografías son:

Aceites y grasas

Aguas potables de consumo público y aguas de bebida envasadas

Carne y productos cárnicos

Cereales, derivados de cereales y cerveza

Leche y productos lácteos

Productos derivados de la uva,aguardientes y sidras

Obviamente esta edición ha sido actualizada con las

disposiciones publicadas hasta el momento, que

establecen nuevos procedimientos o que modifican

notablemente características anteriormente estable-

cidas.

Por último, comentarles que están a su disposición

además de esta colección, nuestros:

Catálogo General de Reactivos PANREAC

Catálogo ADITIO de Aditivos Alimentarios

Catálogo CULTIMED de Medios de Cultivo Deshi-

dratados

Catálogo PANREAC-TLC de Placas, Folios y

Accesorios para Cromatografía en Capa Fina.

M

Page 4: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

Productos derivadosde la uva:VinosMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 22-7-1977, 23-7-1977,25-7-1977, 26-7-1977, 27-7-1977,30-8-1979 Y 14-10-1981)

1- Examen organoléptico (B.O.E. 22-7-1977) ............................ 9

2- Ensayos previos de conservación ....... 93a- Color (B.O.E. 14-10-1981) .................. 103b- Color de los vinos (aplicable a vinos

tintos y rosados (B.O.E. 22-7-1977) ... 144a- Masa volúmica y densidad relativa

(método picnométrico) ........................ 144b- Masa volúmica y densidad relativa

(método areométrico) ......................... 155a- Título alcohométrico (método

picnométrico)...................................... 225b- Título alcohométrico (método

areométrico) (B.O.E. 23-7-1977) ......... 296- Extracto seco total ............................. 317a- Azúcares reductores (defecación

plúmbica) (provisional) ........................ 347b- Azúcares reductores (defecación

mercúrica) (provisional) ....................... 367c- Azúcares reductores (valoración)

(B.O.E. 30-8-1979) ............................. 378- Glicerol (Glicerina) (B.O.E. 23-7-1977).. 389- 2,3-Butanodiol ................................... 4010a- Sacarosa (método cualitativo

colorimétrico)...................................... 4210b- Sacarosa (método cuantitativo) ........... 4311- Cenizas ............................................. 4312- Alcalinidad de cenizas ........................ 4413- Fosfatos ............................................. 4414- Calcio (método complexométrico) ....... 4515- Magnesio ........................................... 4616- Hierro (método colorimétrico del

sulfocianuro) ....................................... 4717- Cobre ................................................ 4818- Potasio (fotometría de llama) .............. 4919- Sodio (fotometría de llama) ................. 4920- Acidez total ........................................ 5021- Acidez volátil ...................................... 5122- Acido Sórbico en el destilado para

acidez volátil ...................................... 5223- Acidez fija (B.O.E. 25-7-1977) ............ 5324a- Acido Tartárico total (método del calcio

racemato)........................................... 5324b- Acido Tartárico total (método

complexométrico) ............................... 5425- Acido Láctico ..................................... 5426- Acido Cítrico ...................................... 56

I N D I C E

Page 5: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

27- Sulfatos (B.O.E. 26-7-1977) ............... 5828a- Anhídrido Sulfuroso (método Paul) ......... 5928b- Anhídrido Sulfuroso (método Ripper doble) 6029- Acido Sórbico .................................... 6130- Cloruros (B.O.E. 30-8-1979) ............... 6231- Acido Benzoico (B.O.E. 26-7-1977) .... 6332- Bromo total ....................................... 6433- Bromo orgánico ................................. 6534- Acidos Monobromoacético y

Monocloroacético de origen orgánico(método cualitativo) (provisional) ......... 66

35- Indice de Permanganato (B.O.E. 27-7-1977) ............................ 67

36a- Determinación de presencia de vino procedente de “híbridos productores directos” (método cualitativo) ............. 68

36b- Determinación de presencia de vino procedente de “híbridos productores directos” (provisional) ........................ 68

37- Metanol (Alcohol metílico) (método delácido cromotrópico) .......................... 69

38- Nitrógeno (método Kjeldhal) .............. 7039a- Flúor (provisional) .............................. 7139b- Flúor (B.O.E. 30-8-1979) ................... 7340- Hidroximetilfurfural (provisional)

(B.O.E. 27-7-1977) ............................ 7441- Determinación cualitativa de Acido

Sórbico, Benzoico, p-Clorobenzoico,Salicílico, p-Hidroxibenzoico y su ésteretílico ................................................ 75

42- Investigación de derivados monohalogenados del Acido Acético (B.O.E. 30-8-1979) ............................ 77

43- Grado alcohólico en potencia ............ 7844- Grado alcohólico total ....................... 7845- Colorantes sintéticos ......................... 7846- Mercurio ............................................ 7947- Plomo ................................................ 8148- Relación P/a ..................................... 8249- Anhídrido Carbónico (método aprobado

pero no publicado en el B.O.E.) ......... 8250- Etanal (método aprobado pero no

publicado en el B.O.E.) ...................... 8451- Presión del Anhídrido Carbónico

(B.O.E. 14-10-1981) .......................... 8552- Antisépticos y Antifermentos (método

microbiológico) .................................. 85

Zumos de UvaMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 7-5-1988)

1- Grado Brix ........................................ 892- Densidad .......................................... 983- pH .................................................... 994- Acidez total ...................................... 995- Acidez volátil ..................................... 1006- Sólidos solubles ................................. 101

7- Azúcares totales y reductores ............ 1038- Acido Ascórbico ................................ 1049- Relación glucosa/fructosa ................. 10510- Nitrógeno total .................................. 10511- Etanol ............................................... 10612- Indice de formol ................................ 10713- Prolina .............................................. 10714- Acido Sórbico .................................... 10815- Acido Benzoico ................................. 10816- Hidroximetilfurfural ............................. 10917- Cenizas ............................................. 10918- Material mineral insoluble en Acido

Clorhídrico al 10% ............................ 11019- Fósforo total ...................................... 11020- Sulfatos ............................................. 11121- Anhídrido Sulfuroso ........................... 11222- Potasio .............................................. 11223- Sodio ................................................ 11324- Arsénico ............................................ 11325- Hierro ................................................ 11426- Plomo ............................................... 11527- Estaño ............................................... 11528- Cobre ............................................... 11629- Zinc ................................................... 116

VinagresMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 27-7-1977, 30-8-1979Y 14-10-1981)

1- Extracto total (B.O.E. 27-7-1977) ....... 1192- Acidez total (grado acético) ................ 1193- Acidez fija ......................................... 1194- Acidez volátil ..................................... 1205- Sulfatos ............................................. 1206- Acetilmetilcarbinol (Acetoína)

(B.O.E. 30-8-1979) ............................ 1217- Cenizas (B.O.E. 27-7-1977) ............... 1218- Indice de oxidación ........................... 1229- Metanol (Alcohol Metílico), método del

Acido Cromotrópico (B.O.E. 30-8-1979). 12310a- Acido Tartárico (método cualitativo) .... 12310b- Acido Tartárico (método cuantitativo) .. 12411- Cobre ............................................... 12512- Cloruros ............................................ 12613- Grado alcohólico ................................ 12614- Arsénico ............................................ 12715- Zinc ................................................... 12816- Prolina .............................................. 12917- Acido Acético de síntesis

(B.O.E. 14-10-1981) .......................... 129

Orujos, Heces y LíasMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 30-8-1979)

1- Contenido alcohólico en orujos, heces y lías ................................................. 133

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Page 6: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

Aguardientes compuestos:WhiskyMETODOS DE ANALISIS (Anexo I de laOrden 3-4-1985, B.O.E. 13-4-1985)

1- Obtención del destilado ..................... 1352- Furfurol ............................................. 1353- Extracto seco .................................... 1364- Esteres .............................................. 1365- Alcoholes superiores .......................... 1376- Metanol ............................................. 1387- Grado alcohólico ............................... 1388- Aldehídos .......................................... 1399- Acidez volátil ...................................... 14010- Cenizas (materia mineral total) ............ 14011- Plomo ................................................ 14112- Zinc ................................................... 14213- Cobre ................................................ 14214- Arsénico ............................................ 142

Ron METODOS DE ANALISIS(B.O.E. 24-10-1985)

1- Obtención del destilado ...................... 1452- Furfurol (Furfuraldehído) ...................... 1453- Extracto seco reducido ...................... 1464- Esteres .............................................. 1475- Alcoholes superiores .......................... 1486- Metanol (Alcohol Metílico) .................. 1487- Grado alcohólico ............................... 1498- Aldehídos .......................................... 1499- Acidez volátil ..................................... 15010- Azúcares reductores .......................... 15011- Plomo ............................................... 15312- Zinc ................................................... 15313- Cobre ................................................ 15414- Arsénico ............................................ 15415- Sacarosa .......................................... 155

GinebraMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 25-10-1985)

1- Obtención del destilado ..................... 1572- Furfurol (Furfuraldehído) ..................... 1573- Extracto seco .................................... 1584- Bases nitrogenadas ........................... 1585- Alcoholes superiores .......................... 1586- Metanol (Alcohol Metílico) .................. 1597- Grado alcohólico ............................... 160

8- Sacarosa ........................................... 1609- Acidez total ....................................... 16110- Materias reductoras

(Azúcares reductores) ........................ 16111- Plomo ................................................ 16312- Zinc ................................................... 16313- Cobre ................................................ 16414- Arsénico ............................................ 164

AnísMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 13-5-1987)

1- Obtención del destilado ..................... 1672- Peso específico del aceite esencial

natural (en materia prima) ................... 1673- Punto de fusión del aceite esencial

natural (en materia prima) ................... 1684- Grado alcohólico ............................... 1695- Azúcares totales ............................... 1696- Anetol ............................................... 1707- Metanol ............................................. 1718- Bases nitrogenadas ........................... 1729- Aceites esenciales ............................. 17310- Hidroximetilfurfural y furfural ............... 17411- Arsénico ............................................ 17412- Plomo ............................................... 17613- Zinc ................................................... 17614- Cobre ................................................ 177

Sidras:Sidra y otras bebidasderivadas de lamanzanaMETODOS DE ANALISIS(B.O.E. 28-7-1980)

1- Eliminación del Anhídrido Carbónico .......................................... 179

2- Grado alcohólico adquirido ................ 1793- Azúcares reductores .......................... 1794- Anhídrido Sulfuroso ............................ 1795- Metanol (Alcohol Metílico) .................. 1796- Acidez volátil ..................................... 1797- Extrato seco total .............................. 1798- Cenizas ............................................. 1799- Hierro ................................................ 17910- Etanal ................................................ 17911- Anhídrido Carbónico .......................... 180

Page 7: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

Relación de reactivos y productos auxiliaresque se utilizan en losmétodos analíticos, Productos derivados dela Uva, Aguardientes y Sidras ....................................... 184

Aditivos y coadyuvantes tecnológicos para uso alimentario industrial ................................. 190

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Page 8: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

Productos derivadosde la uva:Vinos

NOTA: Se han consignado todos los métodosoficiales de análisis de vinos publicados en elB.O.E., pero no los prescritos por el Reglamento2676/90 de la C.E., por no estar suficientementeextendidos en nuestro país y, por tanto, no teneruna aplicación generalizada.

Page 9: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

METODOS DE ANALISIS(B.O.E. 22-7-1977, 23-7-1977,25-7-1977, 26-7-1977, 27-7-1977,30-8-1979 Y 14-10-1981)

1. EXAMEN ORGANOLEPTICO

1.1. Examen del color.Determinar mediante apreciación visual las

características, bien definidas, del color del vino.Observar el vino colocado en copas de cristal finoe incoloro, o bien en tazas de plata o de fondoplateado, el cual presentará diferentes formasconvexas o abolladas, para apreciar el vino endiferentes espesores y sobre fondo brillante.

Utilizar las siguientes calificaciones del colorpara vinos tintos: rojo rubí, rojo violáceo o mora-do, viraje a tono cebolla o amarillento.

Según la intensidad del color, el vino tinto pue-de calificarse en: vino tinto, rosado, clarete, y sitiene mucho o poco color dentro de estos tipos,se dirá que tiene mucha o poca capa.

En vinos blancos, utilizar las calificaciones detono verdoso, casi incoloro, amarillo, amarillo-oro,ambarino, pajizo claro u oscuro (rancia), etc., y entodos los tipos, si el color es blanco, o si azulea,pardea o ennegrece.

1.2. Formación de espuma.Observar el aspecto de la espuma que se for-

ma al agitar el vino en la copa y determinar si es ono abundante, si desaparece rápidamente o, encaso de vinos tintos, si persiste unos momentosel color más o menos intenso. El vino de muchacapa o el vino enyesado produce espuma que tar-da mucho en desaparecer.

1.3. Presencia de gas carbónico.Verter vino en una copa. La formación de bur-

bujas indica la presencia de gas carbónico en elvino. Este gas carbónico debe eliminarse paracontinuar el examen de la muestra, agitando o enla forma que se indica en los métodos analíticos.

1.4. Limpieza.Apreciar en copa o en taza de plata, al mismo

tiempo que el color, si el vino está turbio, claro obrillante.

Observar también si hay depósito y si al agitartiene aspecto cristalino o pulverulento que entur-bie el vino.

1.5. Degustación o cata.Proceder a la degustación recién destapada la

botella, consignando datos, referentes a la cali-dad, origen, edad y posibles alteraciones del vino.

Coger una copa de cristal ovoide por su platillocon los dedos pulgar, índice y central de la manoderecha, quedando la copa libre para examinar elvino. Llenar con vino sólo 1/3 o 1/4 de la copa,para poder agitar bien y tener un espacio vacíodonde se concentren los aromas. Agitar haciendogirar el vino y apreciar el aroma.

Apreciar y caracterizar el olor a “vinoso”, queacusa vino nuevo, el “afrutado”, el del vino quecomenzó la “crianza”, la riqueza alcohólica, oloresácidos volátiles, olores que acusen defectos deelaboración, etc., y la presencia de enfermedadesy alteraciones.

En degustación de más precisión, como serála necesaria para definir características de un tipode vino y que han de servir de referencia, es nece-sario reunir un grupo determinado de buenoscatadores, y realizar un nú-mero de catas sufi-cientes para obtener resultados satisfactoriosestadísticamente según las normas específicasexistentes.

1.6. Referencia.1.6.1. Amerine, M.A., y Feduchy, E.: “Los

resultados de la cata del vino y del análisis quími-co”. Boletín I.N.I.A., 31, 353-375, 1956.

2. ENSAYOS PREVIOS DE CONSERVACION

2.1. Prueba del aire.2.1.1. “Quiebras” tánico-férricas o fosfatoférri-

cas.- Dejar el vino en contacto con el aire (en unacopa mediada), en sitio fresco y al resguardo de laluz. Observar al cabo de 12 o más horas. El entur-biamiento o el ennegrecimiento pone de manifies-to la posibilidad de “quiebras” tánico-férricas ofosfato-férricas.

2.1.2. “Quiebra oxidásica”.- Proceder como en2.1.1., utilizando dos muestras de vino, una pas-terizada, para destruir la oxidasa, y la otra sinpasterizar. La formación de color pardo y precipi-tado pulverulento oscuro son señales característi-cas de la “quiebra oxidásica”.

2.1.3. “Quiebra cuprosa”.- Poner la muestraen botella cerrada, calentar en baño de agua a357, y exponer a la luz. Si la riqueza en cobre essuficiente, aparece enturbiamiento característicode la “quiebra cuprosa”.

2.2. Prueba del frío.Enfriar el vino a la temperatura que normal-

mente se suponga va a estar expuesto, y com-probar si se produce precipitación de bitartrato.

2.3. Prueba de la estufa.Mantener una muestra de vino en estufa a 22-257

durante 3-4 días. Examinar al microscopio el posibledesarrollo microbiano distinguiendo si se trata delevaduras o de bacterias. Si es necesario, proceder alconteo y la identificación de los microorganismos.

2.4. Examen microscópico.Realizar el examen microscópico sobre prepa-

ración del poso de la muestra, que puede apare-cer después de reposo en estufa o a temperaturaambiente.

9

M

Page 10: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

Si el vino se presenta turbio en el envase origi-nal, hacer una preparación directamente del vinoo del poso obtenido por centrifugación de esevino. Si no se presenta depósito y el vino estápoco turbio, hacer una preparación del posoobtenido por centrifugación.

Determinar en el examen microscópico si eldepósito es microbiano, distinguiendo levaduras ybacterias.

3(a). COLOR

3.(a).1. Principio.El color de los vinos se determina por trans-

parencia como se percibe por la vista, pero porun procedimiento independiente de la aprecia-ción personal, valiéndose de métodos espectro-fométricos triestimulares de ordenadas seleccio-nadas de Hardy, fundado en el sistema de laCommisión Internationale de l’Echairage (C.I.E.),con relación a la luz producida por un cielo nubla-do (fuente C).

3(a).2.1. Espectrofotómetro para medida enel espectro visible. Los valores de transmitanciacorrespondientes a una misma muestra, nodeben acusar diferencias superiores a 0,005 ycuando la escala del aparato esté graduada envalores de transmitancia multiplicados por 100,no debe haber diferencias superiores a 0,5.

Las cubetas de cuarzo o de vidrio de índice derefracción máximo 1,5, de paredes paralelas yespesor interno b que se expresa en centíme-tros y con una aproximación de ± 0,002.b.

Conviene disponer de cuatro pares de cubetasen las que los espesores b, sean de 0,1 cm; 0,2 cm; 0,5 cm y 1 cm.

Según la intensidad del color se escogerán unpar de cubetas de tal forma que la absorbancia Aquede comprendida entre 0,3-0,7 (transmitancia0,5-0,2).

3(a).3. Procedimiento.Si el vino no está limpio centrifugar previamen-

te. Eliminar el gas carbónico, si es necesario, poragitación con vacío parcial.

Medir directamente con el espectrofotómetrolas transmitancias del vino a las cuatro longitudesde onda = 625, 550, 495 y 445 mm, empleandola cubeta de espesor conveniente, según intensi-dad del color del vino.

3(a).4. Cálculo.Utilizar 131074 Agua PA-ACS como líquido de

referencia.3(a).4.1. Calcular las coordenadas (x, y) del

punto representativo del color del vino en el dia-grama tricromático de la C.I.E.

X Yx = ————— y = —————

X + Y + Z X + Y + Z

X = 0,42 T625 + 0,35 T550 + 0,21 T445

Y = 0,20 T625 + 0,63 T550 + 0,17 T495

Z = 0,24 T495 + 0,94 T445

Los valores triestimulares X, Y, Z, expresan lasproporciones de colores rojos, verdes y azulesque dan por mezcla el color del vino.

Cuando el espesor b de la cubeta sea inferiora 1 cm, referir la transmitancia a 1 cm en lasiguiente forma T = T’1/b y si la transmitancia vieneexpresada en porcentaje.

T’ 1/b

T = ————–—100 (1/b)-1

T = transmitancia referida a 1 cm de espesorde cubeta.

T’ = transmitancia obtenida para b cm deespesor de cubeta.

b = espesor en cm de la cubeta utilizada.

Como los espectrofotómetros están general-mente graduados tanto en transmitancia T comoen absorbancia A, se puede también calcular latransmitancia en 1 cm de espesor del vino a par-tir de la absorbancia observada en el espesor b, sila medida se ha hecho en cubeta de espesor infe-rior a 1 cm, teniendo en cuenta que:

1A = log ———

T

Con este fin, se calculan las absorbancias A enun cm de espesor multiplicando respectivamentepor 2,5 y 10 las absorbancias leídas en un espe-sor b de 0,5; 0,2 y 0,1 cm. Se obtienen despuéslos valores correspondientes de transmitanciabien por aplicación de la relación anterior, bienrefiriéndose a la tabla calculada a partir de esamisma relación.

3(a).4.2. Luminosidad relativa.- Es el valor deY, expresado en porcentaje (siendo el negro y = 0y el incoloro y = 100).

3(a).4.3. Cromaticidad.- Para expresar la cro-maticidad (longitud de onda dominante y pureza)se recurre al diagrama de cromaticidad, querepresenta el “locus” de todos los colores delespectro, considerando que a 400 nm, corres-ponde el azul, a 520 nm corresponde el verde ya 700 nm el rojo. El punto 0 corresponde a lafuente luminosa utilizada, que, en este caso, esel iluminante estándar Q, que representa la luz

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Page 11: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

de un día medianamente claro y cuyas coorde-nadas son:

xo = 0,3101 e yo = 0,3163

3(a).4.4. Longitud de onda dominante.Conocidas las coordenadas x e y del color, se

une el punto de esas coordenadas C al punto 0.En el punto en el que esta recta corta al “Spec-trum Locus” se encuentra la longitud de ondadominante que corresponde al matiz de estecolor. Así en el caso de vinos de tono teja, la lon-gitud de onda dominante se sitúa entre 585 y 598nm aproximadamente. Para los vinos de un colortinto franco, se sitúa entre 599 y 650 nm, mien-tras que para los vinos de tono rojo púrpura estácaracterizada por la longitud de onda dominantedel color complementario. Se obtiene el valor de

esta longitud de onda prolongando la recta en ladirección de C hacia 0 para que ella corte el“Spectrum Locus” como hemos visto antes.

Este color complementario en el caso de vinosde tono rojo púrpura se sitúa en el verde. Se ano-ta el valor de esta longitud de onda seguida de c(complementario), por ejemplo 495 c.

3(a).4.5. Pureza. La pureza se calcula determinando la distancia

relativa del punto C que representa el color delvino examinado y del punto S que corresponde al“Spectrum Locus” al punto 0 que representa aliluminante.

Se expresa la pureza en porcentaje por la rela-ción:

Distancia del punto C al punto 0100 x —————————————––———

Distancia del punto 0 al punto S

11

M

Figura 3(a).I. Diagrama de cromaticidad de la C.I.E.

Page 12: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

3(a).5. Observaciones.3(a).5.1. El color de un vino queda completa-

mente definido por la luminosidad relativa Y enporcentaje y las coordenadas tricromáticas x e y.

Se pueden preveer las características cromáti-cas de una mezcla de varios vinos cuando se

conocen las características cromáticas de lasmismas. Los valores triestimulares X, Y, Z de lamezcla se obtienen por la suma de esos valoresmultiplicando por su proporción para cada consti-tuyente.

12

TABLA DE TRANSFORMACION DE ABSORBANCIAS EN TRANSMITANCIAS

%trans ,0 ,1 ,2 ,3 ,4 ,5 ,6 ,7 ,8 ,9

0 3,00 2,70 2,52 2,40 2,30 2,22 2,15 2,10 2,051 2,00 1,96 1,92 1,89 1,85 1,82 1,80 1,77 1,74 1,722 1,70 1,68 1,66 1,64 1,62 1,60 1,59 1,57 1,55 1,543 1,52 1,51 1,50 1,48 1,47 1,46 1,44 1,43 1,42 1,414 1,40 1,39 1,38 1,37 1,36 1,35 1,34 1,33 1,32 1,315 1,30 1,29 1,28 1,28 1,27 1,26 1,25 1,24 1,24 1,236 1,22 1,21 1,21 1,20 1,19 1,19 1,18 1,17 1,17 1,167 1,15 1,15 1,14 1,14 1,13 1,13 1,12 1,11 1,11 1,108 1,10 1,09 1,09 1,08 1,08 1,07 1,07 1,06 1,06 1,059 1,05 1,04 1,04 1,03 1,03 1,02 1,02 1,01 1,01 1.00

10 1,00 1,00 0,99 0,99 0,98 0,98 0,97 0,97 0,97 0,9611 0,96 0,95 0,95 0,95 0,94 0,94 0,93 0,93 0,93 0,9212 0,92 0,92 0,91 0,91 0,91 0,90 0,90 0,90 0,89 0,8913 0,89 0,88 0,88 0,88 0,87 0,87 0,87 0,86 0,86 0,8614 0,85 0,85 0,85 0,84 0,84 0,84 0,84 0,83 0,83 0,8315 0,82 0,82 0,82 0,82 0,81 0,81 0,81 0,80 0,80 0,8016 0,80 0,79 0,79 0,79 0,78 0,78 0,78 0,78 0,77 0,7717 0,77 0,77 0,76 0,76 0,76 0,76 0,75 0,75 0,75 0,7518 0,74 0,74 0,74 0,74 0,73 0,73 0,73 0,73 0,73 0,7219 0,72 0,72 0,72 0,71 0,71 0,71 0,71 0,71 0,70 0,7020 0,70 0,70 0,69 0,69 0,69 0,69 0,69 0,68 0,68 0,6821 0,68 0,68 0,67 0,67 0,67 0,67 0,67 0,66 0,66 0,6622 0,66 0,66 0,65 0,65 0,65 0,65 0,65 0,64 0,64 0,6423 0,64 0,64 0,63 0,63 0,63 0,63 0,63 0,63 0,62 0,6224 0,62 0,62 0,62 0,61 0,61 0,61 0,61 0,61 0,60 0,6025 0,60 0,60 0,60 0,60 0,59 0,59 0,59 0,59 0,59 0,5926 0,58 0,58 0,58 0,58 0,58 0,58 0,57 0,57 0,57 0,5727 0,57 0,57 0,57 0,57 0,56 0,56 0,56 0,56 0,56 0,5628 0,55 0,55 0,55 0,55 0,55 0,54 0,54 0,54 0,54 0,5429 0,54 0,54 0,53 0,53 0,53 0,53 0,53 0,53 0,53 0,5230 0,52 0,52 0,52 0,52 0,52 0,52 0,51 0,51 0,51 0,5131 0,51 0,51 0,51 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 0,50 0,5032 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,49 0,48 0,4833 0,48 0,48 0,48 0,48 0,48 0,47 0,47 0,47 0,47 0,4734 0,47 0,47 0,47 0,46 0,46 0,46 0,46 0,46 0,46 0,4635 0,46 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,45 0,4436 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,44 0,43 0,4337 0,43 0,43 0,43 0,43 0,43 0,43 0,42 0,42 0,42 0,4238 0,42 0,42 0,42 0,42 0,42 0,41 0,41 0,41 0,41 0,4139 0,41 0,41 0,41 0,41 0,40 0,40 0,40 0,40 0,40 0,4040 0,40 0,40 0,40 0,40 0,39 0,39 0,39 0,39 0,39 0,3941 0,39 0,39 0,39 0,38 0,38 0,38 0,38 0,38 0,38 0,3842 0,38 0,38 0,38 0,37 0,37 0,37 0,37 0,37 0,37 0,3743 0,37 0,37 0,37 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,3644 0,36 0,36 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35

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M

13

TABLA DE TRANSFORMACION DE ABSORBANCIAS EN TRANSMITANCIAS

%trans ,0 ,1 ,2 ,3 ,4 ,5 ,6 ,7 ,8 ,9

45 0,35 0,35 0,34 0,34 0,34 0,34 0,34 0,34 0,34 0,3446 0,34 0,34 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,3347 0,33 0,33 0,33 0,32 0,32 0,32 0,32 0,32 0,32 0,3248 0,32 0,32 0,32 0,32 0,32 0,31 0,31 0,31 0,31 0,3149 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31 0,30 0,30 0,30 0,3050 0,30 0,30 0,30 0,30 0,30 0,30 0,29 0,29 0,29 0,2951 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,29 0,2852 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,28 0,2853 0,28 0,28 0,27 0,27 0,27 0,27 0,27 0,27 0,27 0,2754 0,27 0,27 0,27 0,27 0,26 0,26 0,26 0,26 0,26 0,2655 0,26 0,26 0,26 0,26 0,26 0,25 0,25 0,25 0,25 0,2556 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,2457 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,24 0,2458 0,24 0,24 0,24 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,2359 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,23 0,22 0,22 0,22 0,2260 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,22 0,2261 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,2162 0,21 0,21 0,21 0,21 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,2063 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,19 0,1964 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,1965 0,19 0,19 0,19 0,19 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,1866 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,18 0,17 0,1767 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,17 0,1768 0,17 0,17 0,17 0,17 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,1669 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,1670 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,1571 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,14 0,14 0,14 0,1472 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,1473 0,14 0,14 0,14 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,1374 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,13 0,1375 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,1276 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,11 0,11 0,1177 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,1178 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,10 0,10 0,10 0,10 0,1079 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,10 0,1080 0,10 0,10 0,10 0,10 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,0981 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,0982 0,09 0,09 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,0883 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,0884 0,08 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,0785 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,0786 0,07 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,0687 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,0688 0,06 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,0589 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,0590 0,05 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,0491 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0.0492 0,04 0,04 0,04 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,0393 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,0394 0,03 0,03 0,03 0,03 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,0295 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,0296 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,01 0,01 0,01 0,0197 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,0198 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,0099 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00

100 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00

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3(b). COLOR DE LOS VINOS(Aplicable a vinos tintos y rosados)

3(b).1. Principio.La intensidad de color se mide por la suma de

las absorbancias del vino para un espesor de 1cm correspondientes a las longitudes de onda deabsorbancia mínima (420 nm) del vino tinto.

La tonalidad se expresa por el ángulo que for-ma con el eje de longitudes de onda la cuerdaque une los puntos de la curva espectrofotométri-ca representativos de las absorbancias corres-pondientes a las longitudes de onda de 420 y 520 nm.

3(b).2. Material y aparatos.Como en 3(a).2.

3(b).3. Procedimiento.Como en 3(a).3, excepto que las longitudes de

onda utilizadas serán de 420 nm y 520 nm.

3(b).4. Cálculo.Calcular la intensidad colorante y la tonalidad.3(b).4.1. Intensidad colorante:

1I = (A420 + A520) –––––

b

A420 = absorbancia a 420 nm.A520 = absorbancia a 520 nm.b = espesor en cm de la cubeta.

3(b).4.2. Tonalidad.- La tonalidad se mide porel ángulo cuya tangente es igual a la diferencia delvalor numérico de las dos absorbancias A520-A420.Conocido este valor, se puede determinar el valordel ángulo por tablas expresadas en grados sexa-gesimales.

3(b).5. Observaciones.Con este método no se determina el color,

sino la intensidad y la tonalidad del color, que soncaracterísticas cromáticas convencionales. Por surapidez y sencillez, es muy práctico para compro-bar la evolución de la materia colorante durantesu “crianza” o añejamiento.

3(b).6. Referencias.3(b).6.1. Determinación triestimular del color

de los vinos, método simplificado por C.Stella.Comunicación al O.I.V. núm. 282 (2 febrero 1968).

3(b).6.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O.I.V. AO, 1-14. 1969.

4(a). MASA VOLUMICA Y DENSIDAD RELATIVA(Método picnométrico)

4(a).1. Principio.La masa volúmica es el cociente de la masa de

un cierto volumen de vino o de mosto por estevolumen, Se expresa en g por ml y su símbolo esr20.

La densidad relativa es el cociente de la masavolúmica del vino por la masa volúmica del agua.Su símbolo es d20 ó simplemente d, cuando nohaya posibilidad de confusión.

La masa volúmica y la densidad relativa de unvino se determinan a 20°C.

El método picnométrico consiste en la deter-minación ponderal del contenido en alcohol de undestilado por medio de un picnómetro.

4(a).2. Material y aparatos.4(a).2.1. Picnómetro de vidrio de 50 ml de

capacidad, de cuello con diámetro interior de3,5 mm. Embudo y sifón para picnómetros.

4(a).2.2. Termómetro contrastado dividido en1/5-1/10 de grado Celsius graduado de 10 a307C.

4(a).2.3. Termostato regulado a 207C ± 0,27. 4(a).2.4. Balanza con aproximación de 0,1 mg.

4(a).3. Procedimiento.Lavar bien el picnómetro y enjuagarlo después

con 131085 Etanol 96% v/v PA y luego con EterDietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO, escurrir bien y secar cuidadosamentecon paño de hilo o papel filtro el exterior, y concorriente de aire seco el interior, tapar, dejar enreposo en la caja de la balanza durante 30 minu-tos aproximadamente, y pesar.

Llenar después con agua a 207 recién destila-da, con cuidado de evitar burbujas de aire en elinterior del picnómetro. Sumergir en el agua a latemperatura comprobada de 207.

Mantener el picnómetro en el termostatodurante 30 minutos, y enrasar el nivel del aguacon la marca del cuello. Tapar el picnómetro,secar exteriormente con las precaucionesexpuestas, dejar nuevamente 30 minutos en lacaja de la balanza y después pesar.

Vaciar el picnómetro, enjuagar nuevamente,primero con agua y después con Etanol 96% v/vPA y Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm deBHT PA-ACS-ISO, y secar como anteriormente,llenar con el vino a temperatura de 207C, aproxi-madamente, cuidando que no quede ningunaburbuja de aire (en caso de que el vino tenga gascarbónico, se eliminará previamente como luegose indica). Dejar el picnómetro con el vino en eltermostato a 207C ± 0,27 durante 30 minutos, lle-nar hasta volumen con el vino y pesar.

14

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4(a).4. Cálculo.4(a).4.1. Cálculo de la densidad relativa a

207C.

P” - Pd20

20 = ––––––––P’ - P

P = peso en g del picnómetro vacío.P’ = peso en g del picnómetro más agua a

207C.P” = peso en g del picnómetro más vino a

207C.

4(a).4.2. Cálculo de la masa volúmica r20.

r20 = 0,998203 d2020

o bienc

r20 = d2020 - ––––––––

1.000

El valor de c se encuentra en las tablas 4(a).I y4(a).II.

La aproximación de los resultados será de0,0003. Para mayor precisión, se tendrá en cuen-ta el empuje del aire como en 5(a).5.

4(a).5. Observaciones.Si el vino contiene cantidad sensible de gas

carbónico, se eliminará todo lo posible agitando

un volumen de unos 250 ml del vino, en matrazde 1.000 ml.

Si el vino está turbio, se filtrará por papel de fil-tración rápida, de pliegues y procurando airear lomenos posible, tapando también el embudo convidrio de reloj.

Si el enturbiamiento es por suspensión delevadura, la filtración corriente aludida no lo acla-rará, siendo conveniente en este caso, dejardecantar el vino en probeta tapada, durante dos otres días en sitio fresco.

4(a).6. Referencia.

4(a).6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O.I.V., A1, 11-26. 1969.

4(b). MASA VOLUMICA Y DENSIDADRELATIVA(Método areométrico)

4(b).1. Principio.Determinación de la masa volúmica a partir dela lectura del areómetro que flota introducidoen el vino.

4(b).2. Material y aparatos.4(b).2.1. Areómetro. Los areómetros empleados

deben responder a las siguientes normas (I.S.O.):Parte cilíndrica sumergible y tallo de sección

circular de 3 mm de diámetro como mínimo. Para

15

M

TABLA 4(a). I

Cálculo de la masa volúmica (r20) a partir de la densidadrelativa 20/20 y recíprocamente

Densidades 0,960 0,980 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100Correcciones c 1,73 1,76 1,80 1,84 1,87 1,91 1,94 1,98Densidades 1,120 1,140 1,160 1,180 1,200 1,220 1,240 1,260Correcciones c 2,02 2,05 2,09 2,12 2,16 2,20 2,23 2,27Densidades 1,280 1,300 1,320 1,340 1,360 1,380 1,400Correcciones c 2,30 2,34 2,38 2,41 2,45 2,48 2,52

TABLA 4(a). II

Cálculo de la masa volúmica (r15) a partir de la densidadrelativa 15/15 y recíprocamente

Densidades 0,960 0,980 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100Correcciones c 0,86 0,88 0,90 0,92 0,94 0,95 0,97 0,99Densidades 1,120 1,140 1,160 1,180 1,200 1,220 1,240 1,260Correcciones c 1,01 1,03 1,04 1,06 1,08 1,10 1,12 1,13Densidades 1,280 1,300 1,320 1,340 1,360 1,380 1,400Correcciones c 1,15 1,17 1,19 1,21 1,22 1,24 1,25

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vinos secos, la graduación será de 0,983 a 1,003en milésimas y 0,2 milésimas. Las divisiones demilésimas deben ser de 5 mm como mínimo. Paravinos desalcoholizados y vinos dulces, y eventual-mente para mostos, se recomienda un juego de 5areómetros graduados de 1,000-1,030; 1,030-1,060; 1,060-1,090; 1,090-1,120; 1,120-1,150.Estos aparatos estarán graduados en masasvolúmicas a 207C, en milésimas y 0,5 milésimaspor lo menos. Cada división de una milésima seráde 3mm como mínimo. En los aparatos se indica-rá que las lecturas deben hacerse por la partesuperior del menisco.

4(b).2.2. Termómetro contrastado, graduadopor lo menos en 1/2 grados.

4(b).2.3. Probeta cilíndrica de 36 mm de diá-metro interior y 320 mm de altura.

4(b).2.4. Plataforma con tornillos de nivelación,para mantener vertical la probeta sobre ella colo-cada.

4(b).3. Procedimiento.Colocar en la probeta descrita 250 ml del vino

e introducir el areómetro y el termómetro.El areómetro y especialmente el tallo graduado

deberán estar limpios y desengrasados.Agitar para uniformar la temperatura. Un minu-

to después, hacer la lectura del termómetro. Reti-rar el termómetro y hacer la lectura de la masaaparente sobre el tallo del areómetro, después deun minuto de reposo.

4(b).4. Cálculo.Calcular la masa volúmica referida a 207C.

c (_ si t es inferior a 207C)r20 = rt ± ––––––

1.000 (+ si t es superior a 207C)

r20= masa volúmica referida a 207.

rt= lectura del tallo graduado del areómetro.c = valor de la corrección correspondiente a la

temperatura del vino en el momento de la lectura.Este valor se encuentra en las tablas 4(b). I y 4(b).II.

t = temperatura del vino en el momento de lalectura.

Los resultados se obtendrán con una precisiónde 0,0003.

4(b).5. Observaciones.Si se utilizan areómetros que den d15

4 o d2020,

hay que corregir la lectura en las tablas corres-pondientes, y después expresar los resultados end20

20 o r20, empleando las fórmulas y tablas si-guientes:

Cd20

20 = d154 + –––––– ;valores de C en la tabla 4(b). III.

1.000

Cd20

20 = d1515 + –––––– ;valores de C en la tabla 4(b). IV.

1.000

Cr20

20 = d154 + ––––– ;valores de C en la tabla 4(b). V.

1.000

Cr20

20 = d1515 + ––––– ;valores de C en la tabla 4(b). VI.

1.000

4(b).6. Referencias.4(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. O.I.V. A1, 11-26.4(b).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: “Tables de

correspondance entre les diverses tables Alcoo-métriques”. Société Pharmacie Montpellier, 26: 2,111-141, 1966.

16

TABLA 4(b). ICorrecciones para referir la masa volúmica de los vinos secos a 207

GRADOS ALCOHOLICOS

0 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

10º 1,45 1,51 1,55 1,58 1,64 1,70 1,78 1,88 1,98 2,09 2,21 2,34

11º 1,35 1,40 1,43 1,47 1,52 1,58 1,65 1,73 1,83 1,93 2,03 2,1512º 1,24 1,28 1,31 1,34 1,39 1,44 1,50 1,58 1,66 1,75 1,84 1,9413º 1,12 1,16 1,18 1,21 1,25 1,30 1,35 1,42 1,49 1,56 1,64 1,7314º 0,99 1,03 1,05 1,07 1,11 1,14 1,19 1,24 1,31 1,37 1,44 1,52

15º 0,86 0,89 0,90 0,92 0,95 0,98 1,02 1,07 1,12 1,17 1,23 1,29

16º 0,71 0,73 0,74 0,76 0,78 0,81 0,84 0,87 0,91 0,93 0,99 1,0517º 0,55 0,57 0,57 0,59 0,60 0,62 0,65 0,67 0,70 0,74 0,77 0,81

Tem-pera-turas

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M

17

TABLA 4(b). ICorrecciones para referir la masa volúmica de los vinos secos a 207

GRADOS ALCOHOLICOS

0 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

18º 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,50 0,52 0,5519º 0,19 0,20 0,20 0,21 0,21 0,22 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28

20º

21º 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,25 0,26 0,27 0,29 0,2922º 0,43 0,45 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50 0,52 0,54 0,56 0,58 0,6023º 0,67 0,69 0,70 0,71 0,72 0,74 0,77 0,79 0,82 0,85 0,88 0,9124º 0,91 0,93 0,95 0,97 0,99 1,01 1,04 1,07 1,11 1,15 1,20 1,24

25º 1.16 1,19 1,21 1,23 1,26 1,29 1,33 1,37 1,42 1,47 1,52 1,57

26º 1,42 1,46 1,49 1,51 1,54 1,58 1,62 1,67 1,73 1,79 1,85 1,9227º 1,69 1,74 1,77 1,80 1,83 1,88 1,93 1,98 2,05 2,12 2,20 2,2728º 1,97 2,03 2,06 2,09 2,14 2,19 2,24 2,31 2,38 2,46 2,55 2,6329º 2,26 2,33 2,37 2,40 2,45 2,50 2,57 2,64 2,73 2,82 2,91 2,99

30º 2,56 2,64 2,67 2,72 2,77 2,83 2,90 2,98 3,08 3,18 3,28 3,38

GRADOS ALCOHOLICOS

16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27

10º 2,47 2,60 2,75 2,90 3,06 3,22 3,39 3,57 3,75 3,93 4,12 4,3111º 2,26 2,38 2,51 2,65 2,78 2,93 3,08 3,24 3,40 3,57 3,73 3,9012º 2,04 2,15 2,26 2,38 2,51 2,63 2,77 2,91 3,05 3,19 3,34 3,4913º 1,82 1,91 2,01 2,11 2,22 2,33 2,45 2,57 2,69 2,81 2,95 3,0714º 1,59 1,67 1,75 1,84 1,93 2,03 2,13 2,23 2,33 2,44 2,55 2,66

15º 1,35 1,42 1,49 1,56 1,63 1,71 1,80 1,88 1,96 2,05 2,14 2,23

16º 1,10 1,15 1,21 1,27 1,33 1,39 1,45 1,52 1,59 1,66 1,73 1,8017º 0,84 0,88 0,92 0,96 1,01 1,05 1,11 1,15 1,20 1,26 1,31 1,3618º 0,57 0,60 0,62 0,65 0,68 0,71 0,74 0,78 0,81 0,85 0,88 0,9119º 0,29 0,30 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46

20º

21º 0,31 0,32 0,34 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46 0,4822º 0,63 0,65 0,68 0,71 0,73 0,77 0,80 0,83 0,86 0,89 0,93 0,9623º 0,95 0,99 1,03 1,07 1,12 1,16 1,21 1,25 1,30 1,35 1,40 1,4524º 1,29 1,34 1,39 1,45 1,50 1,56 1,62 1,69 1,76 1,82 1,88 1,95

25º 1,63 1,70 1,76 1,83 1,90 1,97 2,05 2,13 2,21 2,29 2,37 2,45

26º 1,99 2,07 2,14 2,22 2,31 2,40 2,49 2,58 2,67 2,77 2,86 2,9627º 2,35 2,44 2,53 2,63 2,72 2,82 2,93 3,04 3,14 3,25 3,37 3,4828º 2,73 2,83 2,93 3,03 3,14 3,26 3,38 3,50 3,62 3,75 3,85 4,0029º 3,11 3,22 3,34 3,45 3,58 3,70 3,84 3,97 4,11 4,25 4,39 4,54

30º 3,40 3,62 3,75 3,88 4,02 4,16 4,30 4,46 4,61 4,76 4,92 5,07

Tem-pera-turas

Tem-pera-turas

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18

TABLA 4(b). IICorrecciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207

MASAS VOLUMICAS VINOS DE 137

1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

10º 2,24 2,58 2,93 3,27 3,59 3,89 4,18

11º 2,06 2,37 2,69 2,97 3,26 3,53 3,7812º 1,87 2,14 2,42 2,67 2,94 3,17 3,4013º 1,69 1,93 2,14 2,37 2,59 2,80 3,0014º 1,49 1,70 1,90 2,09 2,27 2,44 2,61

15º 1,25 1,42 1,59 1,75 1,90 2,05 2,19

16º 1,03 1,17 1,30 1,43 1,55 1,67 1,7817º 0,80 0,90 1,00 1,09 1,17 1,27 1,3618º 0,54 0,61 0,68 0,75 0,81 0,86 0,9219º 0,29 0,33 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48

20º

21º 0,29 0,32 0,35 0,39 0,42 0,45 0,4722º 0,57 0,64 0,70 0,76 0,82 0,88 0,9323º 0,89 0,98 1,08 1,17 1,26 1,34 1,4324º 1,22 1,34 1,44 1,56 1,68 1,79 1,90

25º 1,61 1,68 1,83 1,98 2,12 2,26 2,40

26º 1,87 2,05 2,22 2,40 2,56 2,71 2,8727º 2,21 2,42 2,60 2,80 3,00 3,18 3,3528º 2,56 2,80 3,02 3,25 3,47 3,67 3,8929º 2,93 3,19 3,43 3,66 3,91 4,14 4,37

30º 3,31 3,57 3,86 4,15 4,41 4,66 4,92

Tempera-turas

TABLA 4(b). IICorrecciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207

MASAS VOLUMICAS VINOS DE 157

1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

10º 2,51 2,85 3,20 3,54 3,86 4,02 4,46

11º 2,31 2,61 2,93 3,21 3,51 3,64 4,0212º 2,09 2,36 2,64 2,90 3,16 3,27 3,6113º 1,88 2,12 2,34 2,56 2,78 2,88 3,1914º 1,67 1,86 2,06 2,25 2,45 2,51 2,77

15º 1,39 1,56 1,72 1,88 2,03 2,11 2,32

16º 1,06 1,27 1,40 1,53 1,65 1,77 1,8817º 0,87 0,98 1,08 1,17 1,26 1,35 1,4418º 0,60 0,66 0,73 0,80 0,86 0,91 0,9719º 0,32 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48 0,51

20º

21º 0,32 0,35 0,38 0,42 0,45 0,48 0,5022º 0,63 0,69 0,75 0,81 0,87 0,93 0,9823º 0,97 1,06 1,16 1,25 1,34 1,42 1,5124º 1,32 1,44 1.54 1,66 1,78 1,89 2,00

25º 1,66 1,81 1,96 2,11 2,25 2,39 2,52

26º 2,02 2,20 2,37 2,54 2,70 2,85 3,0127º 2,39 2,59 2,78 2,98 3,17 3,35 3,5228º 2,75 2,89 3,22 3,44 3,66 3,86 4,0729º 3,16 3,41 3,65 3,89 4,13 4,36 4,59

30º 3,55 3,81 4,10 4,38 4,66 4,90 5,16

Tempera-turas

Page 19: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

M

19

TABLA 4(b). IICorrecciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207

MASAS VOLUMICAS VINOS DE 177

1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

10º 2,81 3,15 3,50 3,84 4,15 4,45 4,74

11º 2,57 2,89 3,20 3,49 3,77 4,03 4,2812º 2,32 2,60 2,87 3,13 3,39 3,63 3,8413º 2,09 2,33 2,55 2,77 2,98 3,19 3,3914º 1,83 2,03 2,23 2,42 2,61 2,77 2,94

15º 1,54 1,71 1,87 2,03 2,18 2,32 2,47

16º 1,25 1,39 1,52 1,65 1,77 1,89 2,0017º 0,96 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,5218º 0,66 0,72 0,79 0,86 0,92 0,97 1,0319º 0,35 0,38 0,41 0,45 0,48 0,51 0,53

20º

21º 0,34 0,38 0,41 0,44 0,47 0,50 0,5322º 0,68 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,0423º 1,06 1,15 1,25 1,34 1,42 1,51 1,5924º 1,43 1,55 1,65 1,77 1,89 2,00 2,11

25º 1,80 1,94 2,09 2,24 2,39 2,52 2,66

26º 2,18 2,36 2,53 2,71 2,86 3,02 3,1727º 2,58 2,78 2,97 3,17 3,36 3,54 3,7128º 2,97 3,21 3,44 3,66 3,88 4,09 4,3029º 3,40 3,66 3,89 4,13 4,38 4,61 4,82

30º 3,82 4,08 4,37 4,65 4,93 5,17 5,42

Tempera-turas

TABLA 4(b). IICorrecciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207

MASAS VOLUMICAS VINOS DE 197

1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

10º 3,14 3,48 3,83 4,17 4,48 4,78 5,07

11º 2,87 3,18 3,49 3,78 4,06 4,32 4,5712º 2,58 2,86 3,13 3,39 3,65 3,88 4,1013º 2,31 2,55 2,77 2,99 3,20 3,41 3,6114º 2,03 2,23 2,43 2,61 2,80 2,96 3,13

15º 1,69 1,86 2,02 2,18 2,33 2,48 2,62

16º 1,38 1,52 1,65 1,78 1,90 2,02 2,1317º 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,53 1,6218º 0,73 0,79 0,85 0,92 0,98 1,03 1,0919º 0,38 0,41 0,44 0,48 0,51 0,52 0,56

20º

21º 0,37 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53 0,5622º 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04 1,1023º 1,15 1,30 1,34 1,43 1,51 1,60 1,6824º 1,55 1,67 1,77 1,89 2,00 2,11 2,23

25º 1,95 2,09 2,24 2,39 2,53 2,67 2,71

26º 2,36 2,54 2,71 2,89 3,04 3,20 3,3527º 2,79 2,99 3,18 3,38 3,57 3,75 3,9228º 3,20 3,44 3,66 3,89 4,11 4,32 4,5329º 3,66 3,92 4,15 4,40 4,64 4,87 5,08

30º 4,11 4,37 4,66 4,94 5,22 5,46 5,71

Tempera-turas

Page 20: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

20

TABLA 4(b). IICorrecciones para referir la masa volúmica de los vinos dulces a 207

MASAS VOLUMICAS VINOS DE 217

1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

10º 3,50 3,84 4,19 4,52 4,83 5,12 5,41

11º 3,18 3,49 3,80 4,09 4,34 4,63 4,8812º 2,86 3,13 3,41 3,67 3,92 4,15 4,3713º 2,56 2,79 3,01 3,23 3,44 3,65 3,8514º 2,23 2,43 2,63 2,81 3,00 3,16 3,33

15º 1,86 2,03 2,19 2,35 2,50 2,65 2,80

16º 1,51 1,65 1,78 1,91 2,03 2,15 2,2617º 1,15 1,25 1,35 1,45 1,54 1,63 1,7118º 0,79 0,85 0,92 0,98 1,05 1,10 1,1519º 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,59

20º

21º 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,5922º 0,81 0,88 0,94 1,00 1,06 1,10 1,1723º 1,25 1,34 1,44 1,53 1,61 1,70 1,7824º 1,68 1,80 1,90 2,02 2,13 2,25 2,36

25º 2,11 2,25 2,40 2,55 2,69 2,83 2,97

26º 2,55 2,73 2,90 3,07 3,22 3,38 3,5427º 3,01 3,20 3,40 3,59 3,78 3,96 4,1328º 3,46 3,69 3,93 4,15 4,36 4,58 4,7729º 3,95 4,20 4,43 4,68 4,92 5,15 5,36

30º 4,42 4,68 4,97 5,25 5,53 5,77 6,02

Tempera-turas

TABLA 4(b). III

Cálculo de la densidad 20/20 a partir de la densidad 15/4

Vinos secos (d154 comprendida entre 0,97 y 1,03)

Grados alcohólicos 5,1 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1Correcciones c 0,9 0,8 0,8 0,8 0,7 0,7 0,7Grados alcohólicos 12,1 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1Correcciones c 0,6 0,6 0,5 0,5 0,4 0,3 0,3Grados alcohólicos 19,1 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1Correcciones c 0,2 0,1 0,0 0,0 -0,1 -0,2 -0,3

Vinos dulces

Densidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

107 0,7 0,5 0,3 0,1 0,0 -0,2 -0,3137 0,6 0,4 0,2 0,0 -0,1 -0,3 -0,4157 0,5 0,2 0,0 -0,2 -0,3 -0,5 -0,6177 0,4 0,1 -0,1 -0,3 -0,4 -0,6 -0,7197 0,2 -0,1 -0,3 -0,5 -0,6 -0,8 -0,9217 0,0 -0,2 -0,4 -0,6 -0,7 -0,9 -1,0

GradosAlcohólicos{

Page 21: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

M

21

TABLA 4(b). IV

Cálculo de la densidad 20/20 a partir de la densidad 15/15

Vinos secos

Grados alcohólicos 5,1 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1Correcciones c 0,1 0,1 0,1 0,2 0,2 0,2 0,3Grados alcohólicos 12,1 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1Correcciones c 0,3 0,4 0,4 0,5 0,6 0,6 0,7Grados alcohólicos 19,1 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1Correcciones c 0,9 0,9 1,0 1,0 1,1 1,2 1,2

Vinos dulces

Densidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

107 0,2 0,4 0,5 0,7 0,8 1,0 1,1137 0,3 0,5 0,6 0,8 0,9 1,1 1,2157 0,5 0,7 0,8 1,0 1,1 1,3 1,4177 0,6 0,8 0,9 1,1 1,2 1,4 1,5197 0,8 1,0 1,1 1,3 1,4 1,6 1,7217 1,0 1,1 1,2 1,4 1,5 1,7 1,8

GradosAlcohólicos{

TABLA 4(b). V

Cálculo de la masa volúmica a 207C ( r20 ) a partir de la densidad 15/4

Vinos secos

Grados alcohólicos 5,1 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1Correcciones c 0,9 1,0 1,0 1,0 1,1 1,1 1,1Grados alcohólicos 12,1 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1Correcciones c 1,2 1,2 1,3 1,3 1,4 1,5 1,5Grados alcohólicos 19,1 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1Correcciones c 1,6 1,7 1,8 1,8 1,9 2,0 2,1

Vinos dulces

Densidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

107 1,1 1,3 1,5 1,7 1,8 2,0 2,1137 1,2 1,4 1,6 1,8 1,9 2,1 2,2157 1,3 1,6 1,8 2,0 2,1 2,3 2,4177 1,4 1,7 1,9 2,1 2,2 2,4 2,5197 1,6 1,9 2,1 2,3 2,4 2,6 2,7217 1,8 2,0 2,2 2,4 2,5 2,7 2,8

GradosAlcohólicos{

Page 22: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

5(a). TITULO ALCOHOMETRICO (1)(Método picnométrico)

5(a).1. Principio.El título alcohométrico es igual al número de

litros de etanol contenidos en 100 l de vino, medi-dos ambos volúmenes a 207C, y se expresa engrados alcohólicos volumétricos, con una preci-sión de 0,17C.

Se determina por destilación simple de líquidoalcalinizado y medida de la densidad del destiladopor picnometría.

5(a).2. Material y aparatos.5(a).2.1. Aparato de destilación.- Consta de

las siguientes partes:5(a).2.1.1. Matraz de destilación de 1.000 ml

con rodaje esmerilado.5(a).2.1.2. Columna rectificadora de 20 cm de

largo.5(a).2.1.3. Disco metálico o de amianto con un

orificio de 8 cm de diámetro.5(a).2.1.4. Refrigerante de West de 40 cm de

longitud, con circulación rápida de agua y dis-puesto verticalmente.

5(a).2.2. Picnómetro.- Como en 4(a).2.1, devidrio pyrex.

5(a).2.3. Tara del picnómetro.- Recipiente devidrio del mismo volumen exterior que el picnómetro.Se llena casi por completo con una solución de sodiocloruro, de densidad tal que la masa de esta tara seaigual a la masa del picnómetro lleno de un líquido dedensidad 1,01. Este recipiente cierra a la llama. Sucapacidad exterior debe ser igual a la del picnómetrolleno, con una aproximación de 1 ml de diferencia.

5(a).2.4. Termostato y accesorios, descritos en4(a).2.

5(a).2.5. Balanza analítica de 0,1 mg y 100 gde carga.

5(a).3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS211234 Calcio Oxido natural,

escoriforme QP131325 Fenolftaleína PA-ACS211835 Piedra Pómez gránulos QP

5(a).3.1. Lechada de cal. Solución de 120 gde Calcio Oxido natural escoriforme QP en 1.000 mlde Agua PA-ACS.

22

TABLA 4(b). VI

Cálculo de la masa volúmica a 207C ( r20 ) a partir de la densidad 15/15

Vinos secos (d comprendida entre 0,97 y 1,03)

Grados alcohólicos 5,11 6,1 7,1 8,1 9,1 10,1 11,1Correcciones c 1,81 1,9 1,9 1,9 2,0 2,0 2,0Grados alcohólicos 12,11 13,1 14,1 15,1 16,1 17,1 18,1Correcciones c 2,11 2,1 2,2 2,2 2,3 2,4 2,4Grados alcohólicos 19,11 20,1 21,1 22,1 23,1 24,1 25,1Correcciones c 2,65 2,6 2,7 2,7 2,8 2,9 3,0

1515

Vinos dulces

Densidades 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120

107 2,0 2,2 2,4 2,6 2,7 2,9 3,1137 2,1 2,3 2,5 2,7 2,8 3,1 3,2157 2,2 2,5 2,7 2,9 3,0 3,3 3,4177 2,3 2,6 2,8 3,0 3,1 3,4 3,5197 2,5 2,8 3,0 3,2 3,3 3,6 3,7217 2,7 2,9 3,1 3,3 3,4 3,7 3,8

GradosAlcohólicos{

(1).- Denominación adoptada para el grado alcohólico por la Oficina Internacional del Vino (O.I.V.).

Page 23: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

5(a).4. Procedimiento.Para vinos jóvenes o espumosos, eliminar

previamente el gas carbónico. Agitar 250 ml de vinoen un matraz de 500 ml previamente siliconado elinterior del matraz por tres gotas de solución al 1%,de silicona soluble en agua, y después de bien seco,añadir el vino.

5(a).4.1. Destilación.- Medir 250 ml de vino en unmatraz aforado con cuello de 12 mm de diámetrointerior como máximo, y anotar la temperatura.

Introducir el vino en un matraz de destilación quecontenga una docena de fragmentos de materiaporosa Piedra Pómez gránulos QP. Lavar el matrazcuatro veces con 5 ml de Agua PA-ACS. Añadir 10 ml de la Lechada de cal. La materia colorante delvino debe virar a la alcalinidad. En el caso de vinosmuy ácidos, puede comprobarse por toques exter-nos el viraje de la Fenolftaleína PA-ACS. Recoger eldestilado en el mismo matraz de 250 ml, conteniendounos 10 ml de Agua PA-ACS, en la que debe sumer-girse el pico del tubo afilado, prolongación del refrige-rante. Destilar por lo menos 200 ml. Después agitar yllenar hasta volumen con Agua PA-ACS, a la mismatemperatura que se midió el vino inicialmente.

5(a).4.2. Tarado del picnómetro vacío.- Poner enun platillo de la balanza la tara y en el otro el picnóme-tro vacío, limpio y seco, y a su lado, las masas nece-sarias p, para entre ambos equlibrar la balanza.

La masa equivalente a la de la tara será:Masa del picnómetro + m + pm = 0,0012 V.m = masa en g del aire contenido en el picnóme-

tro vacío.V = volumen en ml del picnómetro.0,0012 g/ml = masa volúmica del aire.El volumen del picnómetro se considera, con sufi-

ciente aproximación, que es numéricamente igual a lamasa de Agua PA-ACS que llene el picnómetro.

Para calcular esta masa, colocar el picnómetrolleno de Agua PA-ACS en el platillo de la balanza, si p’es la masa que hay que colocar a su lado para equi-librar la de la tara, la masa m será:

m = (p - p’) . 0,0012Operar siempre a 207 exactamente para realizar el

enrase, utilizando el termostato. Si se opera a t7, paraconocer el volumen del picnómetro a 207, hay quemultiplicar (p - p’) por un factor F, que da la tabla 5 (a). Ipara picnómetro del vidrio pyrex.

Repetir estas operaciones de tara tres vecesseguidas. Al cabo de un año, volver a comprobar latara del picnómetro.

Con balanza monoplato, proceder análogamente.Primero poner la tara, hacer la lectura correspondien-te en la escala de pesos y después poner el picnó-metro vacío. Anotar los pesos p que hay que añadirhasta marcar la pesada que alcanzó la tara.

Tara = picnómetro + aire + p5(a).4.3. Determinación picnométrica.- Llenar el

picnómetro lavado y seco con las precauciones

expuestas en 4(a). 3 con el destilado alcohólico a latemperatura ambiente, llevar después al termosta-to, agitar el líquido haciendo girar el picnómetro pordos o tres veces, hasta que la temperatura quemarca el termómetro del picnómetro sea constante.Enrasar con el borde superior del tubo lateral, secaréste, colocarlo sobre el tapón receptor (para peque-ños rebordes) y anotar la temperatura tº utilizandouna lupa. Secar con el mismo cuidado el exteriordel picnómetro y llevarlo al platillo de la balanza.Equilibrar la tara del picnómetro colocada en el otroplatillo.

5(a).5. Cálculo.Calcular el título alcohométrico expresado en gra-

dos alcohólicos volumétricos.5(a).5.1. Cálculo de la masa volúmica aparente.

p + m - p’r t = ——————————————

volumen del picnómetro a 20º

r t = masa volúmica aparente.m = masa del aire contenido en el picnómetro

vacío.p = diferencia de masa entre la tara y el picnóme-

tro lleno con destilado alcohólico.5(a).5.2. Cálculo de grado alcohométrico.Calcular el grado alcohólico internacional O.I.V. a

207C utilizando la tabla 5(a). I de masa volúmicas a t7corregidas del empuje del aire.

Buscar sobre la línea horizontal correspondiente ala cifra de la parte entera de la temperatura, t, la cifrade la masa volumen inmediatamente superior a rt. Elgrado alcohólico que encabeza la columna donde seencuentra esta cifra será la parte entera del gradoalcohólico a 207C.

Determinar la masa volúmica r correspondiente ala parte entera de la temperatura, t, utilizando la dife-rencia tabular que se lee por debajo de la masavolúmica inmediatamente superior a rt antes encon-trada, y la cifra decimal t, r = rt + (diferencia tabular xparte decimal de t) 10-5.

Hallar la parte decimal del grado alcohólico a 207,buscando en las tablas sobre la línea horizontal quecomienza con la cifra de los enteros de la temperatu-ra, t, la masa volúmica r‘ que sea inmediatamentesuperior a r, y dividiendo la diferencia r‘ - r por ladiferencia tabular que está a la derecha de la cifra dela masa volúmica r‘.

5(a).6. Referencias.5(a).6.1 Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. O.I.V. A2,1-25. 1969.5(a).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: “Tables de corres-

pondance entre les diverses tables alcoométriques”.Société Pharmacie Montpellier, 26: 2, 111-141. 1966.

23

M

Page 24: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

24

TAB

LA 5

(a).

IM

asas

vol

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(pic

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Pyr

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GR

ADO

S AL

CO

HO

LIC

OS

01

23

45

6

10º

999

61

1 5

099

8 1

1 1

46

996

65

1 4

399

5 2

21

39

993

83

1 3

499

2 4

9

1 3

099

1 1

91

25

98

89

910

911

º99

9 5

21

49

998

03

1 4

699

6 5

7 1

44

995

13

1 3

999

3 7

4 1

35

992

39

1

29

991

10

1 2

610

1010

1010

101

12º

999

42

1 4

999

7 9

3 1

46

996

47

1 4

499

5 0

3 1

39

993

64

1 3

599

2 2

9

1 3

099

0 9

91

26

1111

1111

1111

1213

º99

9 3

1 1

49

997

82

1 4

699

6 3

6 1

44

994

92

1 3

999

3 5

3 1

35

992

18

1

31

990

87

1 2

612

1213

1213

1313

14º

999

19

1 4

999

7 7

0 1

47

996

23

1 4

399

4 8

0 1

40

993

40

1 3

599

2 0

5

1 3

199

0 7

4 1

26

1414

1314

1414

1415

º99

9 0

5 1

49

997

56

1 4

699

6 1

0 1

44

994

66

1 4

099

3 2

6 1

35

991

91

1

31

990

60

1 2

714

1415

1414

1516

16º

998

91

1 4

999

7 4

21

47

995

95

1 4

399

4 5

21

40

993

12

1 3

699

1 7

6

1 3

299

0 4

4 1

27

1616

1516

1616

1617

º99

8 7

5 1

49

997

26

1 4

699

5 8

0 1

44

994

36

1 4

099

2 9

61

36

991

60

1

32

990

28

1 2

817

1717

1718

1818

18º

998

58

1 4

999

7 0

91

46

995

63

1 4

499

4 1

9 1

41

992

78

1 3

699

1 4

2

1 3

299

0 1

0 1

28

1818

1818

1819

1919

º99

8 4

0 1

49

996

91

1 4

699

5 4

5 1

44

994

01

1 4

199

2 6

0 1

37

991

23

1

32

989

91

1 2

919

1920

2019

1920

20

º99

8 2

11

49

996

72

1 4

799

5 2

5 1

44

993

81

1 4

099

2 4

1 1

37

991

04

1

33

989

71

1 2

920

2020

2021

2121

21º

998

01

1 4

999

6 5

2 1

47

995

05

1 4

499

3 6

1 1

41

992

20

1 3

799

0 8

3

1 3

398

9 5

0 1

30

2121

2121

2122

2222

º99

7 8

0 1

49

996

31

1 4

799

4 8

4 1

44

993

40

1 4

199

1 9

9 1

3899

0 6

1

1 3

398

9 2

8 1

30

2222

2223

2323

2323

º99

7 5

8 1

49

996

09

1 4

799

4 6

2 1

45

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17

1 4

199

1 7

6 1

38

990

38

1

33

989

05

1 3

124

2424

2324

2425

24º

997

34

1 4

999

5 8

5 1

47

994

38

1 4

499

2 9

4 1

42

991

52

1 3

899

0 1

4

1 3

498

8 8

0 1

31

2424

2425

2525

2525

º99

7 1

0 1

49

995

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1 4

799

4 1

4 1

45

992

69

1 4

299

1 2

7 1

38

989

89

1

34

988

55

1 3

125

2525

2525

2626

26º

996

85

1 4

999

5 3

6 1

47

993

89

1 4

599

2 4

41

42

991

02

1 3

998

9 6

3

1 3

498

8 2

9 1

32

2626

2727

2727

2827

º99

6 5

9 1

49

995

10

1 4

899

3 6

2 1

45

992

17

1 4

299

0 7

5 1

39

989

36

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41

34

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972

831

11

971

721

14

970

581

15

969

431

18

968

251

19

967

061

20

3840

4143

4445

26º

972

451

13

971

321

15

970

171

17

969

001

19

967

811

20

966

611

22

3940

4243

4446

27º

972

061

14

970

921

17

969

751

18

968

571

20

967

371

22

966

151

24

4041

4244

4647

28º

971

661

15

970

511

18

969

331

20

968

131

22

966

911

23

965

681

25

4143

4445

4648

29º

971

251

17

970

081

19

968

891

21

967

681

23

966

451

25

965

201

26

4242

4445

4748

30º

970

831

17

969

661

21

968

451

23

967

221

24

965

981

26

964

721

28

Tem

pe-

ratu

ras

Page 28: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

28

Tem

pe-

ratu

ras

TAB

LA 5

(a).

I(C

ontin

uaci

ón)

GR

ADO

S AL

CO

HO

LIC

OS

2526

2728

2930

10º

971

96

9497

102

9797

005

9996

906

1 0

196

805

1 0

396

702

1 0

835

3739

4143

4511

º97

161

9697

065

9996

966

1 0

196

865

1 0

396

762

1 0

596

657

1 0

935

3840

4244

4612

º97

126

9997

027

1 0

196

926

1 0

396

823

1 0

596

718

1 0

796

611

1 1

237

3840

4244

4613

º97

089

1 0

096

989

1 0

396

886

1 0

596

781

1 0

796

674

1 0

996

565

1 1

437

4042

4446

4714

º97

052

1 0

396

949

1 0

596

844

1 0

796

737

1 0

996

628

1 1

096

518

1 1

639

4042

4446

4815

º97

013

1 0

496

909

1 0

796

802

1 0

996

693

1 1

196

582

1 1

296

470

1 1

739

4143

4446

4816

º96

974

1 0

696

868

1 0

996

759

1 1

096

649

1 1

396

536

1 1

496

422

1 2

040

4243

4647

4917

º96

934

1 0

896

826

1 1

096

716

1 1

396

603

1 1

496

489

1 1

696

373

1 2

041

4245

4648

5018

º96

893

1 0

996

784

1 1

396

671

1 1

496

557

1 1

696

441

1 1

896

323

1 2

341

4445

4749

5019

º96

852

1 1

296

740

1 1

496

626

1 1

696

510

1 1

896

592

1 1

996

273

1 2

543

4446

4849

5120

º96

809

1 1

396

696

1 1

696

580

1 1

896

462

1 1

996

343

1 2

196

222

1 2

643

4546

4850

5221

º96

766

1 1

596

651

1 1

796

534

1 2

096

414

1 2

196

293

1 2

396

170

1 2

744

4547

4950

5222

º96

722

1 1

696

606

1 1

996

487

1 2

296

365

1 2

296

243

1 2

596

118

1 2

944

4748

4952

5323

º96

678

1 1

996

559

1 2

096

439

1 2

396

316

1 2

596

191

1 2

696

065

1 3

146

4749

5152

5324

º96

632

1 2

096

512

1 2

296

390

1 2

596

265

1 2

696

139

1 2

796

012

1 3

246

4850

5152

5525

º96

586

1 2

296

464

1 2

496

340

1 2

696

214

1 2

796

087

1 3

095

957

1 3

347

4850

5153

5426

º96

539

1 2

396

416

1 2

696

290

1 2

796

163

1 2

996

034

1 3

195

903

1 3

648

4950

5254

5527

º96

491

1 2

496

367

1 2

796

240

1 2

996

111

1 3

195

980

1 3

295

958

1 3

648

5052

5354

5628

º96

443

1 2

696

317

1 2

996

188

1 3

096

058

1 3

295

926

1 3

495

792

1 3

849

5152

5455

5729

º96

394

1 2

896

266

1 3

096

136

1 3

296

004

1 3

395

871

1 3

695

735

1 4

050

5153

5456

5730

º96

344

1 2

996

215

1 3

296

083

1 3

395

950

1 3

595

8 1

51

37

956

781

40

Page 29: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

5(b). TITULO ALCOHOMETRICO(Método areométrico)

5(b). 1.Principio.Como en 5(a).1.

5(b).2. Material y aparatos.5(b).2.1. Aparatos de destilación.- Como en

5(a).2.1.5(b).2.2. Aparatos de areometría.5(b).2.2.1. Alcohómetro.5(b).2.2.2. Termómetro.5(b).2.2.3. Probeta.

5(b).3. Reactivos.Como en 5(a).3.

5(b).4. Procedimiento.Las generalidades como en 5(a).4.5(b).4.1. Destilación.- Como en 5(a).4.1.

5(b).4.2. Determinación areométrica.- Comoen 4(b).3, teniendo en cuenta que se utiliza desti-lado en vez de vino, y que el tallo del areómetroviene graduado en grados alcohólicos aparentes.Hacer al menos tres lecturas del grado alcohólicoaparente, sirviéndose si es preciso de una lupa.

5(b).5. Cálculo.Calcular el grado alcohólico internacional O.I.V.

a 207C, utilizando la tabla 5(b).I, añadiendo o res-tando al grado alcohólico aparente a t7 la correc-ción correspondiente.

5(b).6. Referencias.5(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. O.I.V. A2, 1-25. 1969.5(b).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: “Tables de

correspondance entre les diverses tables alcoo-métriques”. Société Pharmacie Montpellier, 26: 2,111, 141, 1966.

29

M

TABLA 5 (b). ICorrecciones a efectuar sobre el grado alcohólico aparente

para corregir la acción de la temperatura

Grados alcohólicos aparentes

0 1 2 3 4 5 6 7 8

10º 0,84 0,87 0,88 0,92 0,96 1,01 1,08 1,16 1,24

11º 0,80 0,81 0,83 0,86 0,90 0,96 1,01 1,08 1,1612º 0,74 0,76 0,78 0,80 0,84 0,88 0,94 1,00 1,0713º 0,67 0,69 0,70 0,73 0,76 0,80 0,85 0,90 0,9514º 0,60 0,61 0,62 0,65 0,68 0,71 0,75 0,79 0,85

15º 0,51 0,52 0,54 0,56 0,58 0,61 0,64 0,68 0,72

16º 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,50 0,53 0,55 0,5817º 0,32 0,33 0,34 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,4618º 0,23 0,24 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,30 0,3119º 0,11 0,12 0,12 0,13 0,13 0,13 0,14 0,15 0,16

20º - - - - - - - - -

21º - 0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,15 0,1622º - 0,26 0,27 0,28 0,28 0,29 0,30 0,32 0,3423º - 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,49 0,5124º - 0,56 0,57 0,58 0,59 0,61 0,64 0,67 0,70

25º - 0,71 0,72 0,73 0,75 0,78 0,81 0,84 0,89

26º - 0,86 0,88 0,91 0,93 0,96 1,00 1,04 1,0927º - - 1,05 1,08 1,10 1,14 1,18 1,23 1,2828º - - 1,22 1,25 1,28 1,33 1,38 1,44 1,5029º - - 1,40 1,44 1,48 1,52 1,58 1,64 1,71

30º - - 1,59 1,62 1,66 1,71 1,77 1,85 1,93

Tempe-raturas

R E

S T

A R

S

U M

A R

Page 30: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

30

TAB

LA 5 (b

). I (continuación)

Grad

os alcohólicos aparentes

910

1112

1314

1516

17

10º1,34

1,441,58

1,731,89

2,062,24

2,432,63

11º1,25

1,341,46

1,591,73

1,882,04

2,212,38

12º1,15

1,231,32

1,431,55

1,681,82

1,972,13

13º1,02

1,101,18

1,281,38

1,481,60

1,721,85

14º0,90

0,961,03

1,111,19

1,281,39

1,491,59

15º0,77

0,820,87

0,941,01

1,091,17

1,261,34

16º0,62

0,660,71

0,760,82

0,880,94

1,011,08

17º0,48

0,510,55

0,580,63

0,670,71

0,760,81

18º0,33

0,340,36

0,390,42

0,450,47

0,500,53

19º0,16

0,170,18

0,200,21

0,230,24

0,260,28

20º-

--

--

--

--

21º0,17

0,180,19

0,200,21

0,230,24

0,260,28

22º0,35

0,370,40

0,420,44

0,460,48

0,510,54

23º0,54

0,560,60

0,630,67

0,710,74

0,780,82

24º0,73

0,770,81

0,850,89

0,940,99

1,041,09

25º0,93

0,981,02

1,071,12

1,181,24

1,321,38

26º1,14

1,191,24

1,301,36

1,431,51

1,571,65

27º1,34

1,401,46

1,531,60

1,681,76

1,851,93

28º1,56

1,621,68

1,751,83

1,922,02

2,112,21

29º1,78

1,851,92

2,002,08

2,172,28

2,392,50

30º2,00

2,072,15

2,232,33

2,452,55

2,672,79

Temp

e-raturasR E S T A R S U M A R

TAB

LA 5 (b

). I (continuación)

Grad

os alcohólicos aparentes

1819

2021

2223

2425

26

10º2,84

3,013,15

3,293,44

3,583,70

3,823,93

11º2,56

2,712,84

2,953,08

3,213,32

3,423,52

12º2,27

2,402,51

2,632,73

2,842,93

3,023,10

13º1,99

2,112,20

2,292,38

2,472,57

2,642,71

14º1,71

1,811,89

1,962,03

2,112,19

2,252,30

15º1,44

1,511,58

1,641,71

1,771,82

1,871,91

16º1,15

1,201,26

1,311,36

1,401,45

1,491,53

17º0,85

0,900,95

0,991,02

1,061,09

1,121,15

18º0,56

0,600,63

0,650,68

0,700,72

0,750,76

19º0,29

0,300,31

0,320,33

0,340,35

0,360,37

20º-

--

--

--

--

21º0,30

0,310,32

0,330,34

0,350,36

0,370,38

22º0,57

0,600,62

0,650,67

0,690,71

0,730,74

23º0,86

0,900,94

0,981,00

1,031,06

1,081,11

24º1,14

1,211,27

1,311,35

1,381,42

1,461,50

25º1,44

1,511,60

1,651,69

1,721,76

1,811,86

26º1,73

1,821,90

1,972,02

2,062,12

2,182,23

27º2,02

2,122,22

2,302,36

2,422,47

2,532,59

28º2,31

2,432,54

2,632,70

2,762,83

2,902,96

29º2,62

2,732,85

2,963,05

3,113,18

3,253,32

30º2,91

3,043,16

3,283,38

3,383,46

3,543,61

Temp

e-raturasR E S T A R S U M A R

Page 31: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

6. EXTRACTO SECO TOTAL

6.1. Principio.El extracto seco total o materias secas totales

es el conjunto de todas las sustancias que, encondiciones físicas determinadas, no se volatili-zan. Estas condiciones físicas deben fijarse de talmanera que las sustancias componentes de esteextracto sufran el mínimo de alteración.

El extracto seco total se calcula indirectamen-te conociendo la densidad del “residuo sin alco-hol”, que es el vino cuyo alcohol ha sido evapora-do y después se ha restablecido el volumen primi-tivo por adición de agua.

6.2. Procedimiento.Llevar el residuo de la destilación del alcohol del

vino (sin previa neutralización) al matraz en dondese midió el vino. Lavar el matraz en donde se des-tiló el vino con varias porciones de agua, y llenarcon estas aguas hasta volumen, el matraz con elresiduo de la destilación, a la misma temperatura ala que se enrasó el vino. Mezclar bien, verter en unaprobeta y determinar la densidad como en 4(a).

6.3. Cálculo.Calcular el extracto seco expresado en g/l a

partir de la densidad del residuo sin alcohol utili-zando la tabla 6.I.

6.3.1. Determinar la densidad del residuo sinalcohol como en 6.2.

6.3.2. Calcular la densidad 20/20 del residuosin alcohol según la fórmula de Tabarié:

dr = dv - da +1

dr = densidad 20/20 del residuo sin alcohol.dv = densidad del vino a 207.da = densidad a 207 de la mezcla hidroalcohólicadel mismo grado que el vino.

6.3.3. Calcular la densidad del residuo sinalcohol a partir de las masas volúmicas.

dr = 1,0018 (rv - ra) + 1rv = masa volúmica del vino a 20º.ra = masa volúmica a 207 de la mezcla hidroalco-hólica del mismo grado que el vino.

Para valores de rv menores a 1,05 puedetomarse 1 en vez de 1,0018.

31

M

TABLA 5 (b). I (continuación)

Grados alcohólicos aparentes

27 28 29 30

10º 4,04 4,14 4,24 4,43

11º 3,61 3,69 3,78 3,8612º 3,18 3,25 3,32 3,3913º 2,78 2,84 2,89 2,9414º 2,36 2,42 2,47 2,52

15º 1,96 2,01 2,05 2,09

16º 1,56 1,59 1,62 1,6417º 1,17 1,19 1,21 1,2318º 0,77 0,79 0,81 0,8219º 0,38 0,40 0,41 0,42

20º - - - -

21º 0,38 0,39 0,39 0,4022º 0,76 0,78 0,79 0,8123º 1,14 1,16 1,19 1,2124º 1,53 1,56 1,58 1,60

25º 1,90 1,94 1,97 2,00

26º 2,28 2,31 2,35 2,3927º 2,64 2,70 2,74 2,7828º 3,02 3,07 3,12 3,1629º 3,39 3,45 3,51 3,56

30º 3,76 3,83 3,89 3,95

Tempe-raturas

R E

S T

A R

S

U M

A R

Page 32: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

6.4. Observaciones.El extracto seco se expresa por la cantidad de

sacarosa que, disuelta en agua hasta 1 l, da unasolución de la misma densidad que el residuo sinalcohol. En la tabla 6. I se encuentra la equivalen-cia de esta densidad, en extracto, expresada ensacarosa.

6.5. Referencia.6.5.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’ Analyse des Vins. O.I.V. A3, 1-6. 1969.

32

Densidadcon dos

deci-males

TABLA 6. I Contenido en extracto seco (g/l)

Tercer decimal de la densidad

0 1 2 3 4 5

Gramos de extracto por litro

1,00 0 2,6 5,1 7,7 10,3 12,9

1,01 25,8 28,4 31,0 33,6 36,2 38,81,02 51,7 54,3 56,9 59,5 62,1 64,71,03 77,7 80,3 82,9 85,5 88,1 90,71,04 103,7 106,3 109,0 111,6 114,2 116,8

1,05 129,8 132,4 135,0 137,6 140,3 142,9

1,06 155,9 158,6 161,2 163,8 166,4 169,01,07 182,1 184,8 187,4 190,0 192,6 195,21,08 208,4 211,0 213,6 216,2 218,9 221,51,09 234,7 237,3 239,9 242,5 245,2 247,8

1,10 261,0 263,6 266,3 268,9 271,5 274,2

1,11 287,4 290,0 292,7 295,3 298,0 300,61,12 313,9 316,5 319,2 321,8 324,5 327,11,13 340,4 343,0 345,7 348,3 351,0 353,71,14 366,9 369,6 372,3 375,0 377,6 380,3

1,15 393,6 396,2 398,9 401,6 404,3 406,9

1,16 420,3 423,0 425,7 428,3 431,0 433,71,17 447,1 449,8 452,4 455,2 457,8 460,51,18 473,9 476,6 479,3 482,0 484,7 487,41,19 500,9 503,5 506,2 508,9 511,6 514,3

1,20 527,8 - - - - -

Page 33: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

M

33

Densidadcon dos

deci-males

TABLA 6. I (Continuación)

Tercer decimal de la densidad

6 7 8 9

Gramos de extracto por litro

1,00 15,4 18,0 20,6 23,2

1,01 41,3 43,9 46,5 49,11,02 67,3 69,9 72,5 75,11,03 93,3 95,9 98,5 101,11,04 119,4 122,0 124,6 127,2

1,05 145,5 148,1 150,7 153,3

1,06 171,6 174,3 176,9 179,51,07 197,8 200,5 203,1 205,81,08 224,1 226,8 229,4 232,01,09 250,4 253,1 255,7 258,4

1,10 276,8 279,5 282,1 284,8

1,11 303,3 305,9 308,6 311,21,12 329,8 332,4 335,1 337,81,13 356,3 359,0 361,6 364,31,14 382,9 385,6 388,3 390,9

1,15 409,6 412,3 415,0 417,6

1,16 436,4 439,0 441,7 444,41,17 463,2 465,9 468,6 471,31,18 490,1 492,8 495,5 498,21,19 517,0 519,7 522,4 525,1

1,20 - - - -

TABLA INTERCALAR

4º decimalde la densidad Extracto g/l

1 0,32 0,53 0,84 1,05 1,36 1,67 1,88 2,19 2,3

Page 34: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

7 (a). AZUCARES REDUCTORES(Defecación plúmbica)(Provisional)

7(a).1. Principio.Eliminación previa de todas las materias reduc-

toras distintas de los azúcares por defecación conplomo acetato neutro, y valoración basada en laacción reductora sobre solución cupro-alcalina.Aplicable a vinos blancos y tintos de color no muyintenso.

7(a).2. Material y aparatos.7(a).2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigeran-

te de reflujo.7(a).2.2. Filtro de vidrio G3 con capa fina de

amianto de fibra fina y lavado con agua hirviendo.7(a).2.3. Kitasatos de 500 ml con frasco de

seguridad intermedio.

7(a).3. Reactivos.131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS121212 Calcio Carbonato precipitado PA131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO171321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS121793 Hierro II Sulfato p2-hidrato PA121360 Hierro III Sulfato x-hidrato PA131466 Plomo II Acetato 3-hidrato

PA-ACS-ISO181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l

(0,1N) SV(o preparar con 131527 Potasio Permangana-

to PA-ACS-ISO)131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato

PA-ACS-ISO131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%

PA-ACS-ISO182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV131706 di-Sodio Oxalato PA-ACS

7(a).3.1. Solución de Plomo II Acetato (aproxi-madamente saturada). Añadir a 250 g de Plomo IIAcetato 3-hidrato PA-ACS-ISO, Agua PA-ACScaliente hasta 0,5 l y agitar hasta disolución com-pleta.

7(a). 3.2. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV7(a).3.3. Calcio Carbonato precipitado PA7(a).3.4. Solución Cúprica A. Mezclar 40 g de

Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO con 2 mlde Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y añadir AguaPA-ACS hasta 1 l.

7(a).3.5. Solución Tartrato-Alcalina B. Mezclar200 g de Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACS-ISO con 150 g de Sodio Hidróxido lentejas 97%PA-ACS-ISO y añadir Agua PA-ACS hasta 1 l.

7(a).3.6. Solución de Hierro III C. Mezclar 50 gde Hierro III Sulfato x-hidrato PA con 20 g deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO y añadir Agua PA-

ACS hasta 1.000 ml. Comprobar esta soluciónponiendo en un vaso de vidrio 30 ml de soluciónC, 100 ml de Agua PA-ACS y una gota de HierroII-1, 10 Fenantrolina. La coloración amarillo-ver-dosa de esta mezcla debe virar a verde puro conuna sola gota de Potasio Permanganato 0,02mol/l (0,1N) SV. En caso contrario, añadir PotasioPermanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV a la soluciónhasta conseguir el viraje descrito. Generalmentees necesario añadir 1-3 ml de Potasio Permanga-nato 0,02 mol/l (0,1N) SV por l de solución C.

7(a).3.7. Solución de Hierro II-1,10 Fenantroli-na. Mezclar 0,695 g de Hierro II Sulfato p2-hidra-to PA , 100 ml de Agua PA-ACS y 1,485 g de1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS.

7(a).3.8. Potasio Permanganato 0,02 mol/l(0,1N) SV. En su defecto preparar disolviendo 3,16 gde Potasio Permanganato PA-ACS-ISO en AguaPA-ACS hasta 1 l. Comprobar esta solución porvaloración con una solución de di-Sodio OxalatoPA-ACS

7(a).4. Procedimiento.7(a).4.1. Vinos secos.- Llevar 100 ml de vino a

un matraz aforado de 125 ml, añadir (V-0,5) ml deSodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV, siendo V el volu-men de solución N/10 utilizada para valorar laacidez total de 10 ml de vino, como en 20.4. Aña-dir agitando 5 ml de solución saturada de PlomoII Acetato y 1g de Calcio Carbonato precipitadoPA, agitar varias veces y dejar sedimentar por lomenos 15 minutos, enrasar con Agua PA-ACS,añadir 0,6 ml más de Agua PA-ACS y filtrar.

7(a).4.2. Vinos dulces.- En un matraz aforadode 100 ml colocar un volumen de vino variablesegún su riqueza en azúcar. Para vinos dulces conmasa volúmica comprendida entre 1,005 y 1,038,tomar 20 ml de líquido a analizar, diluido al 20%.Para vinos abocados con masa volúmica entre0,997 y 1,006, tomar 20 ml de vino no diluido.

Añadir 0,5 g. de Calcio Carbonato precipitadoPA, unos 60 ml de Agua PA-ACS y cantidad (0,5-2,0 ml) de solución saturada de Plomo II Acetatohasta el límite del enturbiamiento, agitar y dejarreposar durante 15 minutos por lo menos, agi-tando de cuando en cuando. Enrasar, añadir0,2 ml más de Agua PA-ACS y filtrar.

Un ml del filtrado corresponde a 0,04 ml devino dulce y 0,20 ml de vino abocado.

En el Erlenmeyer de 300 ml, poner 20 ml desolución Cúprica A, 20 ml de solución Tartrato-Alcalina B, 20 ml de solución azucarada conte-niendo de 10 a 100 mg de azúcar reductor. Hacerhervir con reflujo (o con la boca del matraz tapadacon un pequeño embudo) durante 3 minutos,enfriar inmediatamente bajo una corriente deAgua PA-ACS hasta refrigeración completa, dejarposar el Cobre I Oxido (inclinando el Erlenmeyeren un cristalizador con algodón y descansando el

34

Page 35: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

cuello en el borde), filtrar después por el filtro G3con la capa de amianto, ayudando la filtración conla trompa de vacío. Tener la precaución de que, enlo posible, haya una capa de líquido sobre el pre-cipitado adherido al fondo, tanto en el filtro comoen el Erlenmeyer, para evitar que se oxide. Lavarel precipitado del Erlenmeyer con Agua PA-ACShirviendo y verter en el filtro, repitiendo tres vecesla operación, agitar cada vez con precacución deoperar rápidamente para no dejar al descubiertoel precipitado de Cobre I Oxido. Cambiar el Kita-sato y proceder a la disolución del Cobre I Oxido,añadiendo primero al Erlenmeyer unos 10 ml desolución C de Hierro III Sulfato, que disuelve rápi-damente el precipitado y verter la solución en el fil-tro. Disolver el precipitado que queda en el filtro,agitando con varilla de vidrio para facilitar la diso-lución. Repetir tres veces estas adiciones y lavarErlenmeyer y filtro cinco veces con unos 20 ml de

Agua PA-ACS fría cada vez.Valorar el Hierro II Sulfato formado, que se

encuentra en el líquido del Kitasato, con PotasioPermanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV, añadiendopreviamente una gota de solución de Hierro II-1,10-Fenantrolina. Dar por terminada la valoracióncuando el color pase de verde-naranja a verdefranco.

7(a).5. Cálculo.La cantidad de azúcar contenida en la solución

azucarada utilizada se obtiene en la tabla 7(a).I.

7(a).6. Referencias.7(a).6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. O.I.V. A4, 8-10, 1969.7(a).6.2. Jaulmes, P. “Analyse des vins”, págs.

170-171, 1951.

35

M

TABLA 7 (a). I

KMn04 Azúcar KMn04 Azúcar KMn04 AzúcarN/10 invertido N/10 invertido N/10 invertido

ml mg ml mg ml mg4,0 12,4 12,0 39,1 20,0 68,74,2 13,0 12,2 39,7 20,2 69,34,4 13,6 12,4 40,5 20,4 70,14,6 14,3 12,6 41,2 20,6 70,94,8 14,9 12,8 42,0 20,8 71,65,0 15,5 13,0 42,6 21,0 72,45,2 16,2 13,2 43,3 21,2 73,25,4 16,8 13,4 44,1 21,4 74,15,6 17,5 13,6 44,7 21,6 74,95,8 18,1 13,8 45,5 21,8 75,66,0 18,8 14,0 46,3 22,0 76,46,2 19,4 14,2 47,0 22,2 77,26,4 20,1 14,4 47,6 22,4 78,06,6 20,7 14,6 48,4 22,6 78,76,8 21,4 14,8 49,1 22,8 79,57,0 22,0 15,0 49,8 23,0 80,37,2 22,7 15,2 50,5 23,2 81,17,4 23,4 15,4 51,3 23,4 81,97,6 24,1 15,6 52,1 23,6 82,77,8 24,7 15,8 52,7 23,8 83,58,0 25,5 16,0 53,5 24,0 84,48,2 26,1 16,2 54,2 24,2 85,28,4 26,8 16,4 55,0 24,4 86,08,6 27,5 16,6 55,7 24,6 86,78,8 28,1 16,8 56,4 24,8 87,59,0 28,8 17,0 57,2 25,0 88,49,2 29,5 17,2 57,9 25,2 89,29,4 30,1 17,4 58,7 25,4 90,09,6 30,8 17,6 59,4 25,6 90,99,8 31,5 17,8 60,1 25,8 91,6

10,0 32,2 18,0 61,0 26,0 92,510,2 32,9 18,2 61,6 26,2 93,310,4 33,6 18,4 62,4 26,4 94,110,6 34,3 18,6 63,2 26,6 95,010,8 35,0 18,8 64,0 26,8 95,811,0 35,6 19,0 64,8 27,0 96,611,2 36,4 19,2 65,4 27,2 97,311,4 37,0 19,4 66,2 27,4 98,211,6 37,7 19,6 67,1 27,6 99,111,8 38,4 19,8 67,8 27,8 99,9

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7(b). AZUCARES REDUCTORES(Defecación mercúrica) (Provisional)

7(b).1. Principio.Eliminación previa de todas las materias reduc-

toras distintas de los azúcares por defecación conmercurio II acetato, y valoración por la acciónreductora de los azúcares sobre la solucióncupro-alcalina. Aplicable a vinos jóvenes, de colorintenso y ricos en azúcar, o cuando se va a reali-zar una valoración polarimétrica. Este métodoproporciona la menor pérdida de azúcares reduc-tores.

7(b).2. Material y aparatos.7(b).2.1. Aparato generador de ácido sulfhídri-

co. Filtrar el gas producido por la acción del ácidoclorhídrico diluido sobre el hierro II sulfuro porpaso a través de lana de vidrio y lavado en unfrasco lavador con agua.

7(b).2.2. Dispositivo para eliminar el exceso deácido sulfhídrico. Eliminar el ácido sulfhídrico enexceso después de la precipitación del exceso demercurio, mediante aspiración conectada al tubolateral de un Kitasato, en el que se encuentra ellíquido a tratar. Tapar el matraz con un tapón atra-vesado por un tubo que se sumerge en el líquido.Humedecer el aire aspirado que entra en el tubopor borboteo en un matraz de un litro lleno hastala mitad de agua.

7(b).3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO171321 1,10 -Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS131325 Fenolftaleína PA-ACS121793 Hierro II Sulfato p2-hidrato PA131426 Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l

(0,1N) SV(o preparar con 131527 Potasio PermanganatoPA-ACS-ISO131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato

PA-ACS-ISO131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%

PA-ACS-ISO181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV131706 di-Sodio Oxalato PA-ACS141783 Zinc metal, polvo PRS

7(b).3.1. Solución de Mercurio II. Mezclar 240 gde Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS con 240 mlde Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y añadirAgua PA-ACS hasta 1 litro. Hervir hasta disolución

completa, enfriar y añadir Agua PA-ACS hasta 1litro.

7(b).3.2. Solución de Sodio Hidróxido 4N apro-ximadamente. Tomar Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N)SV y diluir convenientemente. Esta solución debepoder neutralizar exactamente un volumen igual alsuyo, de la solución de Mercurio II en presencia deFenolftaleína PA-ACS. Se debe comprobar estacorrespondencia antes de su empleo, en particu-lar si se observa un depósito en la solución deMercurio II y si es necesario diluir la solución só-dica.

7(b).3.3. Zinc metal, polvo PRS. Para eliminarel exceso de Mercurio.

7(b).3 (4,5,6,7,y 8). Como 7 (a). 3 (4,5,6,7 y 8).

7(b).4. Procedimiento.7(b).4.1. Vinos secos y dulces, en los que se

propone determinar el azúcar y la desviación pola-rimétrica. Colocar 100 ml de vino en una cápsulade 10-12 cm de diámetro y adicionar (V-0,5) ml deSodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV, siendo V el volu-men de Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SVempleado para valorar la acidez total de 10 ml devino, como en 20.4. Evaporar en baño de aguahirviendo con corriente de aire caliente sobre lasuperficie del líquido, hasta reducir el volumen a50 ml, aproximadamente. Llevar a un matraz de100 ml, lavar tres veces la cápsula con Agua PA-ACS, añadir 5 ml de solución de Mercurio II y, agi-tando, 5 ml de solución de Sodio Hidróxido quese corresponde, volumen a volumen, con la deMercurio II (solución de Sodio Hidróxido 4N apro-ximadamente), dejar reaccionar 5 minutos por lomenos; añadir 2 ml de solución de Mercurio IIAcetato y enrasar a 100 ml. Filtrar y recoger el fil-trado en un Kitasato de 500 ml.

Tratar el filtrado con una corriente de AcidoSulfhídrico para precipitar el Mercurio en forma deSulfuro negro (este tratamiento puede detenersecuando el precipitado tome color negro). Despuésse hace barbotar aire (previamente saturado devapor de agua) a través del líquido, hasta quehaya perdido todo su olor a Acido Sulfhídrico(5-10 minutos) y se filtra. Un ml del filtrado corres-ponde a 1 ml de vino. Este líquido se emplea sindilución cuando se trata de vino seco o con unos5 g/l de azúcar.

Con vino más rico en azúcar conviene diluirdespués del examen polarimétrico y antes delanálisis químico.

7(b).4.2. Vinos secos y dulces en los que sola-mente se va a realizar el análisis del azúcar por elmétodo químico y no por polarografía. Tomar20 ml de vino sin diluir o diluido según normaanterior, añadir 20 ml de Agua PA-ACS y 1 ml desolución de Mercurio II Acetato y añadir, agitando,1 ml de la solución sódica.

Dejar actuar 5 minutos por lo menos, añadir

36

Page 37: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

1 ml de solución de Mercurio II, enrasar con aguay filtrar. Tratar con Acido Sulfhídrico y aire húmedobarbotando en la forma antes expuesta, y filtrar.Continuar como en 7(a). 4 después de la defe-cación.

7(b).5. Observaciones.En los análisis de azúcar por el método quími-

co, para vinos no muy ricos en azúcar, en vez deeliminar el exceso de mercurio por el ácido sulfhí-drico, es más práctico eliminarlo mediante la adi-ción de Zinc metal, polvo PRS, de la siguienteforma: Añadir 1 g de Zinc metal, polvo PRS allíquido filtrado, agitar durante 2 horas de cuandoen cuando, y filtrar.

7(b).6. Referencias.7(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. O.I.V. A4, 6-8. 1969.7(b).6.2. Jaulmes, P. “Analyse des vins”, pág.

176, 1951.

7(c). AZUCARES REDUCTORES(Valoración)

7(c).1. Principio.Eliminación de las materias reductoras distin-

tas de los azúcares reductores por defecación, y

posterior valoración basada en la acción reducto-ra de los azúcares sobre una solución cupro-alca-lina.

7(c).2. Material y aparatos.7(c).2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigeran-

te de reflujo.7(c).2.2. Material necesario para volumetría.7(c).2.3. Baño de agua.

7(c).3. Reactivos.131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO211835 Piedra Pómez gránulos QP131542 Potasio Yoduro PA-ISO131647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV

7(c).3.1. Solución Cupro-Alcalina:Disolver por separado: 25 g de Cobre II Sulfa-

to 5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS; 50 g de Acido Cítrico anhidro PA-ACS en300 ml de Agua PA-ACS y 388 g de Sodio Car-bonato 10-hidrato PA-ISO en 300-400 ml de Agua

37

M

TABLA 7(c).IAzúcares reductores, expresados en mg

Primera cifra decimal

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

0 0,0 0,3 0,6 1,0 1,3 1,6 1,9 2,2 2,6 2,91 3,2 3,5 3,8 4,2 4,5 4,8 5,1 5,4 5,7 6,12 6,4 6,7 7,1 7,4 7,7 8,1 8,4 8,7 9,0 9,43 9,7 10,0 10,4 10,7 11,0 11,4 11,7 12,0 12,3 12,74 13,0 13,3 13,7 14,0 14,4 14,7 15,0 15,4 15,7 16,15 16,4 16,7 17,1 17,4 17,8 18,1 18,4 18,8 19,1 19,56 19,8 20,1 20,5 20,8 21,2 21,5 21,8 22,2 22,5 22,97 23,2 23,5 23,9 24,2 24,6 24,9 25,2 25,6 25,9 26,38 26,6 26,9 27,3 27,6 28,0 28,3 28,6 29,0 29,3 29,79 30,0 30,3 30,7 31,0 31,3 31,7 32,0 32,4 32,7 33,0

10 33,4 33,7 34,1 34,4 34,8 35,1 35,4 35,8 36,1 36,511 36,8 37,2 37,5 37,9 38,2 38,6 38,9 39,3 39,6 40,012 40,3 40,7 41,0 41,4 41,7 42,1 42,4 42,8 43,1 43,513 43,8 44,2 44,5 44,9 45,2 45,6 45,9 46,3 46,6 47,014 47,3 47,7 48,0 48,4 48,7 49,1 49,4 49,8 50,1 50,515 50,8 51,2 51,5 51,9 52,2 52,6 52,9 53,3 53,6 54,016 54,3 54,7 55,0 55,4 55,8 56,2 56,5 56,9 57,3 57,617 58,0 58,4 58,8 59,1 59,5 59,9 60,3 60,7 61,0 61,418 61,8 62,2 62,5 62,9 63,3 63,7 64,0 64,4 64,8 65,119 65,5 65,9 66,3 66,7 67,1 67,5 67,8 68,2 68,6 69,020 69,4 69,8 70,2 70,6 71,0 71,4 71,7 72,1 72,5 72,921 73,3 73,7 74,1 74,5 74,9 75,3 75,6 76,0 76,4 76,822 77,2 77,6 78,0 78,4 78,8 79,2 79,6 80,0 80,4 80,823 81,2 81,6 82,0 82,4 82,8 83,2 83,6 84,0 84,4 84,824 85,2 85,6 86,0 86,4 86,8 87,2 87,6 88,0 88,4 88,825 89,2 89,6 90,0 90,4 90,8 91,2 91,6 92,0 92,4 92,8

ml sodiotiosulfato

0,1N

Page 38: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

PA-ACS caliente. Mezclar la solución de AcidoCítrico y la de Sodio Carbonato. Añadir a continua-ción la solución de Cobre II Sulfato y completar elvolumen con Agua PA-ACS hasta un litro.

7(c).3.2. Solución de Potasio Yoduro al 30%.Conservar en frasco topacio.

7(c).3.3. Solución de Acido Sulfúrico al 25% envolumen.

7(c).3.4. Solución de Engrudo de Almidón de5 g/l; contendrá 200 g/l de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO para asegurar su conservación. Estasolución debe ser mantenida diez minutos en ebu-llición en el momento de su preparación.

7(c).3.5. Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV.

7(c).4. Procedimiento.Poner en el Erlenmeyer de 300 ml, 25 ml de la

solución Cupro-Alcalina y 25 ml del vino previa-mente defecado según 7(a) o 7(b). Este volumenañadido no debe contener más de 60 mg de azú-cares reductores.

Añadir algunos granos de Piedra Pómez grá-nulos QP, y llevar a ebullición, que debe ser alcan-zada en dos minutos, adaptando el Erlenmeyer alrefrigerante de reflujo y mantener exactamentedurante diez minutos la ebullición.

Enfriar inmediatamente bajo corriente de aguafría. Añadir 10 ml de la solución de Potasio Yodu-ro al 30%, 25 ml de la solución de Acido Sulfúricoal 25% y 2 ml de Engrudo de Almidón. A conti-nuación, valorar con Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l(0,1N) SV.

Efectuar una prueba en blanco, sustituyendolos 25 ml del vino previamente defecados porigual volumen de Agua PA-ACS y tratar como seha indicado antes para la muestra.

7(c).5. Cálculo.La cantidad de azúcar, expresada en azúcar

invertido contenida en la muestra analizada, seobtiene en la tabla 7(c).1 en función del n’ - n deml de tiosulfato utilizado.

Siendo:n = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato 0,1 N

utilizados en la valoración de la muestra.n’ = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato 0,1 N

utilizados en la prueba en blanco.Expresar el contenido del vino en g de azúcar

invertido por litro, teniendo en cuenta las dilucio-nes efectuadas en el curso de la defecación delvolumen de la muestra analizada.

7(c).6. Referencia.7(c).6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. O.I.V. A 4e 29-31.

8. GLICEROL (Glicerina)

8.1. Principio.La glicerina separada del vino, previa defeca-

ción, por extracción con acetona, se oxida conácido peryódico a formaldehído. La reaccióncoloreada del formaldehído con la fluoroglucinapermite la determinación espectrofotométrica a480 nm. La presencia de sorbitol y de manitolson causa de error en la determinación de glice-rina.

8.2. Material y aparatos.8.2.1. Aparato de destilación. Compuesto de

las siguientes partes:8.2.1.1. Matraz esférico de 500 ml.8.2.1.2. Columna rectificadora.8.2.1.3. Columna Widmer con camisa de aisla-

miento.8.2.1.4. Termómetro con escala de 0-1107 C.8.2.1.5. Refrigerante.8.2.2. Frascos con tapón esmerilado de 1 l y de

60 ml.8.2.3. Matraz aforado de 50 ml.8.2.4. Matraz aforado de 200 ml.8.2.5. Matraces con tapón esmerilado de 60 ml.8.2.6. Matraces aforados de 100 ml.8.2.7. Kitasato o recipiente para vacío de 250 ml.8.2.8. Filtro de porosidad número 4.8.2.9. Filtros de papel Schleicher et Schull 1574

de 12,5 cm de diámetro o similar.8.2.10 Espectrofotómetro con cubetas de 1 cm

de espesor interior.

8.3. Reactivos.131007 Acetona PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO181059 Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV131074 Agua PA-ACS211160 Arena de Mar lavada, grano fino QP131188 Bario Hidróxido 8-hidrato PA-ISO

Fluoroglucina 0,2%141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX211456 Piedra Pómez gránulos QP121523 Potasio meta-Peryodato PA181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV

8.3.1. Bario Hidróxido 8-hidrato PA-ISO.8.3.2. Arena de Mar lavada, grano fino QP8.3.3. Acetona PA-ACS-ISO8.3.4. Sodio Hidróxido 1N SV.8.3.5. Piedra Pómez gránulos QP8.3.6. Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (IN) SV8.3.7. Solución 0,05 M de Acido Peryódico. En un

matraz aforado de 1 l, introducir 11,5 g de Potasiometa-Peryodato (KIO4) y aproximadamente unos 800a 850 ml de Agua PA-ACS. Si la sal utilizada esK2H3IO6 se pesan 15,2 g. Añadir en seguida 15 ml deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO y calentar muy ligeramen-

38

Page 39: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

te en baño de agua hasta disolución completa. Enfriara la temperatura ordinaria y llenar hasta volumen.

8.3.8. Solución de Fluoroglucina 0,2%. Estasolución debe ser renovada cada 15 días.

8.3.9. Solución madre de Glicerina. Diluir unos20 ml de Glicerina PRS-CODEX a 100 ml. Determi-nar después la concentración exacta de esta solu-ción midiendo su índice de refracción, y después,por diluciones convenientes y sucesivas, llevar suconcentración a 0,1 g por l.

8.4. Procedimiento.Extraer los polioles y valorar la glicerina.8.4.1. Separación de polioles.- Introducir en un

matraz de 100 ml, de tapón esmerilado, 5 g deBario Hidróxido 8-hidrato PA-ISO (no pulverizar), 5 gde Arena de Mar lavada, grano fino QP y 10 ml devino, que se deja deslizar por la pared del matraz.

Si el vino contiene más de 120 g de azúcar porlitro, se opera sólo con 5 ml.

Agitar enérgicamente durante 30 segundos ydejar en reposo, agitando de cuando en cuando.Añadir después 50 ml de Acetona PA-ACS-ISO yagitar otra vez durante 30 segundos. Llevar elmatraz a un termostato a 45ºC durante 5 minutos,agitando enérgicamente cada minuto.

Filtrar la solución caliente por un crisol filtrante deporosidad número 4 dispuesto sobre Kitasato devidrio en el que se han puesto 40 ml de Agua PA-ACS y 5 ml de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.Lavar el residuo tres veces con Acetona PA-ACS-ISO, removiendo el precipitado con una espátula.Escurrir después el precipitado lo más posible. Tras-vasar después este precipitado al matraz del apara-to destilador, enjuagando bien el Kitasato con Ace-tona PA-ACS-ISO.

Destilar la Acetona con llama fuerte, hasta que eltermómetro marque 100ºC, y destilar después20 ml más de Agua PA-ACS.

Añadir al residuo de la destilación aún caliente,5 ml de Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV, dejarenfriar y trasvasar a matraz aforado de 50 ml. Seenrasa con las aguas de lavado del matraz, agitar yfiltrar por filtro de papel.

8.4.2. Valoración de la glicerina.- Esta operaciónhay que realizarla antes de las 2 o 3 horas siguien-tes a la separación de los polioles.

Llevar una alícuota de 5 ml del filtrado anterior amatraz aforado de 100 ml y enrasar con Agua PA-ACS.

Introducir 20 ml de esta dilución en un matraz de60 ml con tapón esmerilado. Añadir 10 ml de solu-ción de Acido Peryódico 0,05 M. Agitar y dejar enreposo 5 minutos.

Añadir después sucesiva y rápidamente, desli-zando a lo largo de la pared, las siguientes solucio-nes: 10 ml de Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV y10 ml de solución de Fluoroglucina. Agitar despuésde la adición de cada una de las soluciones.

Llevar rápidamente la mezcla de soluciones a lacubeta del espectrofotómetro y medir la absorban-cia a 480 nm en un minuto, porque la coloraciónvioleta que se obtiene es muy fugaz.

Ajustar el espectrofotómetro de forma que lasolución obtenida, al sustituir en las operacionesanteriores los 5 ml de filtrado por 5 ml de Agua PA-ACS, dé una densidad óptica 0.

8.4.3. Obtención de la curva patrón.Diluir 25, 50, 75, 100, 125, 150, 175 ml de solucióninicial de glicerina de 0,1 g por l, a 200 ml.

Tomar después 20 ml de cada una de estas dilu-ciones y 20 ml de la solución inicial, y llevar a fras-

39

M

TABLA 8.I

FACTORES DE CORRECCION PARA EL CONTENIDO EN GLICERINADE VINOS QUE CONTENGAN AZUCARES

Contenido en Contenido enazúcar g/l Factor azúcar g/l Factor

5 1,020 80 1,12310 1,030 90 1,13420 1,045 100 1,14530 1,060 110 1,15640 1,073 120 1,16850 1,086 130 1,18060 1,099 140 1,19170 1,111 150 1,202

Page 40: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

cos de 60 ml con tapón esmerilado y tratar como en8.4.2 para los 20 ml de la dilución del filtrado. Medirdespués las densidades ópticas correspondientes,ajustando el espectrofotómetro como en 8.4.2.

Esta escala corresponde a riquezas en glicerinaen 0,2 ml de vino, que varían de 0 a 2 mg

8.5. Cálculo.Calcular el contenido en glicerina expresado en g/l.

PGlicerina = 50 —— f g/l

V

P = peso en g de glicerina obtenido de la curvapatrón.V = volumen en ml de la muestra de vino.f = 1 para contenido de azúcar en vinos inferiores a5 g/l.f = valor del factor de corrección según la tabla 8.Ipara contenidos de azúcar en vinos superiores a5 g/l.

8.6. Referencia.8.6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. 0. I. V. A21, 1-9, 1969.

9. 2,3-BUTANODIOL

9.1. Principio.El 2,3-butanodiol separado del vino, previa defe-

cación, por extracción con acetona, se oxida conácido peryódico a acetaldehído. La reacción colo-reada del acetaldehído con el sodio nitroprusiato yla piperidina permite la determinación espectrofoto-métrica a 570 nm.

9.2. Material y aparatos.9.2. (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10), como 8.2. (1,

2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10).

9.3. Reactivos.131007 Acetona PA-ACS-ISO

Acido Peryodico 0,05 M131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO181059 Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV131074 Agua PA-ACS211160 Arena de Mar lavada, grano fino QP121188 Bario Hidróxido 8-hidrato PA124551 2,3-Butanodiol PA211456 Piedra pómez granulos QP162377 Piperidina PS121523 Potasio meta-Peryodato PA131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS181691 Sodio Hidroxido 1 mol/l (1N) SV121705 Sodio Nitroprusiano 2-hidrato PA

9.3. (1; 2; 3; 4; 5; 6 y 7), como 8.3. (1; 2; 3; 4; 5;6 y 7).

9.3.8. Solución de Sodio Acetato al 27%.

9.3.9. Solución de Sodio Nitroprusiato al 2%.Conservar en la oscuridad y renovar semanalmente.

9.3.10. Solución de Piperidina al 10%. Renovarcada 15 días.

9.3.11. Solución madre de 2,3-Butanodiol. Utili-zar 2,3-Butanodiol rectificado, desechando el pri-mero y el último tercio. Pesar con exactitud 2 g ydisolverlos en 1.000 ml. Diluir esta solución hasta1/10.

9.4. Procedimiento.Extraer los polioles y valorar el 2,3-Butanodiol.9.4.1. Separación de polioles. Como en 8.4.1.9.4.2. Valoración del 2,3-Butanodiol.Esta operación hay que realizarla antes de las 2

o 3 horas siguientes a la separación de los polioles.Llevar a un matraz de 60 ml con tapón esmerila-

do 5 ml del filtrado, 5 ml de solución de Sodio Ace-tato al 27% y 10 ml de solución de Acido Peryódico0,05M.

Agitar y dejar 2 minutos en contacto. Añadirdeslizando por las paredes del frasco: 5 ml desolución de Sodio Nitroprusiato al 2% y 5 ml de lasolución de Piperidina al 10%. Agitar después dela adición de cada una de las soluciones. Llevarinmediatamente la solución a la cubeta de 1 cm y hacer la lectura en el espectrofotómetro a570 nm. La coloración violeta que se obtiene conla reacción alcanza el máximo de intensidad a los30-40 segundos y después disminuye rápida-mente.

Ajustar el espectrofotómetro de forma que lasolución obtenida al sustituir en las operacionesanteriores los 5 ml de filtrado por 5 ml de Agua PA-ACS dé una densidad óptica 0.

9.4.3. Obtención de la curva patrón.Diluir 10, 20, 30, 40, 50, 60 y 70 ml de la solu-

ción inicial hasta 100 ml. Tomar 5 ml de cada una deestas diluciones y tratarlas como en 9.4.2 para los5 ml del filtrado inicial. Determinar inmediatamentelas densidades ópticas máximas correspondientes,ajustando el espectrofotómetro como en 8.4.2.

Esta curva proporciona valores de contenido en2,3-Butanodiol en 5 ml de vino que varían de 0 a0,7 mg.

9.5. Cálculo.9.5.1. Vinos con contenido en azúcar inferior a

5 g/l. La cantidad de 2,3-butanodiol en g/l de vinoes igual a la cantidad de 2,3-butanodiol en mg con-tenido en 5 ml del filtrado.

9.5.2. Vinos cuyo contenido en azúcar estácomprendido entre 5 y 120 g/l.

La cantidad calculada según 9.5.1 se corrigesumando o restando el factor encontrado en la tabla9.I.

9.5.3. Vinos con contenidos en azúcar superio-res a 120 g/l.- (La defecación se realiza sobre 5 mlde vino). La cantidad calculada según 9.5.1 se corri-

40

Page 41: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

ge como en 9.5.2, utilizando sólo la mitad del con-tenido en azúcar. El resultado multiplicado por 2 esel contenido en 2,3-butanodiol en g/l de vino.

9.6. Referencia.9.6.1. Recueil des Méthodes Internationales d’A-

nalyse des Vins. 0. I. V. A21, 1-9. 1969.

41

M

TABLA 9.I

Correcciones a realizar para expresar el contenido en2,3-butanodiol de vinos con azúcares

Contenido en azúcar, g/lButanodiol

g/l10 20 30 40 50 60 70 80

0- 0,2 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,0350,3 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,030,4 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03

0,5 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02

0,6 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,020,7 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 -0,01 -0,010,8 -0,03 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 -0,01 0,00 0,000,9 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,01

1,0 -0,02 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,01 +0,01 +0,02

1,1 -0,01 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,02 +0,02 +0,031,2 -0,01 -0,01 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,03 +0,041,3 -0,01 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,04 +0,05 +0,051,4 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,04 +0,05 +0,06 +0,07

1,5 0,00 +0,01 +0,02 +0,04 +0,05 +0,06 +0,07 +0,08

1,6 +0,01 +0,02 +0,03 +0,05 +0,06 +0,07 +0,09 +0,101,7 +0,01 +0,03 +0,04 +0,06 +0,07 +0,09 +0,10 +0,121,8 +0,02 +0,03 +0,05 +0,07 +0,09 +0,10 +0,12 +0,131,9 +0,02 +0,04 +0,06 +0,08 +0,10 +0,12 +0,14 +0,15

2,0 +0,02 +0,05 +0,07 +0,10 +0,12 +0,14 +0,15 +0,17

Page 42: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

10(a). SACAROSA(Método cualitativo colorimétrico)

10(a).1. Principio.El vino se defeca por plomo acetato, magnesio ypotasio permanganato a pH = 8-9. Se trata el defe-cado a 100°C con difenilamina en medio clorhídricoy acético. El producto de condensación obtenido enpresencia de sacarosa se extrae por cloroformo quese colorea de azul.

10(a).2. Material y aparatos.10(a).2.1. Baño de agua con temperatura con-

trolada.10(a).3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS121828 Difenilamina PA

121086 Etanol absoluto PA211276 Magnesio Oxido QP131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO131252 Triclorometano estabilizado con etanol

PA-ACS-ISO

10(a).3.1. Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO.

10(a).3.2. Magnesio Oxido QP. 10(a).3.3. Potasio Permanganato al 2%.10(a).3.4. Triclorometano estabilizado con etanol

PA-ACS-ISO.10(a).3.5. Reactivo de Difenilamina. A 10 ml de

solución de Difenilamina PA al 10% en Etanol absolu-to PA, añadir 20 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y 70 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.

42

TABLA 9.I

Correcciones a realizar para expresar el contenido en2,3-butanodiol de vinos con azúcares

Contenido en azúcar, g/l

Butanodiolg/l 90 100 110 120 130 140 150

0 - 0,2 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,035 -0,0350,3 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,030,4 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02

0,5 -0,02 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 -0,02 -0,01

0,6 -0,01 -0,01 -0,01 0,00 0,00 0,00 0,000,7 -0,01 -0,01 0,00 0,00 0,00 0,00 +0,010,8 0,00 0,00 0,00 +0,01 +0,01 +0,01 +0,020,9 +0,01 +0,01 +0,01 +0,02 +0,02 +0,03 +0,03

1,0 +0,02 +0,03 +0,03 +0,03 +0,03 +0,04 +0,05

1,1 +0,04 +0,04 +0,04 +0,05 +0,05 +0,06 +0,071,2 +0,05 +0,05 +0,05 +0,06 +0,07 +0,07 +0,081,3 +0,06 +0,07 +0,07 +0,08 +0,09 +0,09 +0,101,4 +0,08 +0,09 +0,09 +0,10 +0,11 +0,11 +0,12

1,5 +0,09 +0,10 +0,11 +0,12 +0,13 +0,13 +0,14

1,6 +0,11 +0,12 +0,13 +0,14 +0,15 +0,16 +0 171,7 +0,13 +0,14 +0,15 +0,16 +0,17 +0,18 +0 191,8 +0,15 +0,16 +0,18 +0,19 +0,20 +0,21 +0,221,9 +0,17 +0,18 +0,20 +0,21 +0,23 +0,24 +0,25

2,0 +0,19 +0,20 +0,22 +0,24 +0,26 +0,27 +0,28

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Para comprobar la pureza de este reactivo aña-dir 2 ml de reactivo de Difenilamina y 2 ml de AguaPA-ACS, calentar en baño de agua hirviendo duran-te 5 minutos. Enfriar la solución bruscamente por in-mersión en agua fría y extraer con 1 ml de Tricloro-metano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO, nodebiendo presentar el líquido extraído coloraciónazul.

10(a).4. Procedimiento.Disolver en 10 ml de Agua PA-ACS 100 a 200 mg

de Magnesio Oxido QP y unos 200 mg de Plomo IIAcetato 3-hidrato PA-ACS-ISO.Llevar al baño de agua que se mantiene a 90-95°Cdurante 3 a 5 minutos. Añadir 2 ml del vino quedebe estar limpio y con una riqueza en azúcar infe-rior al 1%.

Diluir la muestra si la riqueza en azúcar es supe-rior a la indicada como límite.

Comprobar si la dosis de Plomo II Acetato3-hidrato PA-ACS-ISO es suficiente y no excesiva,lo que disminuiría la sensibilidad de la reacción. Paraello añadir gota a gota, al líquido que sobrenada,una solución concentrada de Plomo II Acetato,hasta que no se acuse enturbiamiento al caer lagota sobre el líquido. Añadir entonces soluciónsaturada de Sodio Sulfato para eliminar el excesode Plomo.

Añadir 0,5 ml de la solución de Potasio Perman-ganato y mantener la mezcla en el baño de agua a90-95° durante 10 minutos.

Enfriar bruscamente por inmersión en agua fría,y filtrar.

Puede aparecer una débil coloración amarilla,pero no influye en la reacción.

Poner en un tubo de ensayo 2 ml del líquido fil-trado, añadir 2 ml del reactivo de Difenilamina; man-tener en baño de agua hirviendo, durante 5 minutosexactamente. Enfriar por inmersión en agua fría,añadir 1 ml de Triclorometano estabilizado con eta-nol PA-ACS-ISO y observar la coloración que seforma.

10(a).5. Expresión de los resultados.Los vinos secos no adicionados con sacarosa

pueden dar una coloración gris-azulada muy ligera,pero, en presencia de sacarosa, aparece una francacoloración azul.

Los vinos ricos en azúcar dan una coloraciónamarillo oro en ausencia de sacarosa, pero en pre-sencia de ésta, la coloración es verde franco.

Los resultados son sensibles para riquezas desacarosa desde 0,2 mg.

10(a).6. Referencia.10(a).6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. 0. I. V. A-S, 1-2. 1969.

10(b). SACAROSA(Método cuantitativo)

10(b).l. Principio.La sacarosa se determina por la diferencia de los

poderes reductores antes y después de la hidrólisisclorhídrica del líquido procedente de la defecacióndel vino.

10(b).2. Reactivos.131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO131074 Agua PA-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%

PA-ACS-ISO

10(b).2.1. Acido Clorhídrico 35% PA-ISO.10(b).3. Procedimiento.Poner en dos matraces Erlenmeyer de 200 ml

cada uno el mismo volumen del líquido de defeca-ción, según las normas indicadas para el análisis deazúcares. La defecación se realiza como en 7(b) coneliminación previa del alcohol.

Añadir a cada matraz un volumen de Acido Clor-hídrico 35% PA-ISO a razón de 0,3 ml por 10 ml delíquido azucarado.

En uno de los matraces añadir inmediatamente0,3 ml de Sodio Hidróxido 12N (disolver Sodio Hidró-xido lentejas 97% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS yajustar a la concentración indicada), por cada10 ml de líquido azucarado procediendo a la valora-ción de los azúcares reductores.

Llevar el otro matraz con el contenido sin neutra-lizar a baño de agua hirviendo durante 2 minutos.Añadir entonces el mismo volumen de Sodio Hidróxi-do 12N que al otro matraz y valorar.

10(b).4. Cálculo.La diferencia entre las cantidades de azúcares

reductores encontrada en los resultados de estasdos valoraciones, multiplicada por 0,95 da la riquezaen sacarosa de la muestra en estudio.

Este resultado se expresa en g por l de vino,teniendo presentes las diluciones efectuadas even-tualmente en el curso de la defecación y del volumende la muestra de vino que se sometió a la defecación.

10(b).5. Referencia.10(b).5.l. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. 0. I. V. A5, 4, 1969.-80

11. CENIZAS

11.1. Principio.Se denominan cenizas de un vino, al conjunto de

los productos de incineración del residuo de evapo-ración de un volumen conocido del vino, realizadade manera que se puedan obtener todos los catio-nes (excepto amonio) en forma de carbonatos yotras sales minerales anhidras.

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11.2. Materiales y aparatos.11.2.1. Horno eléctrico regulable.11.2.2. Baño de agua y baño de arena.11.2.3. Lámpara de infrarrojo.11.2.4. Cápsula de platino o de cuarzo de

70 mm de diámetro y 25 mm de altura, fondo plano.

11.3. Procedimiento.Colocar 20 ml de vino en una cápsula tarada en

balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar con pre-caución en baño de agua, después de evaporarhasta consistencia siruposa, continuar el calenta-miento sobre baño de arena con moderación ydurante una media hora. Es conveniente ayudar a laevaporación con la aplicación de rayos infrarrojoshasta carbonización. Cuando ya no se desprendanvapores, llevar la cápsula al horno eléctrico a 525°C± 25° y con aireación continua.

Después de 5 minutos de carbonización com-pleta, sacar la cápsula del horno, dejar enfriar y aña-dir 5 ml de agua que se evaporan en baño de agua,y llevar de nuevo al horno a 525°C.

Si la combustión de las partes carbonosas no seconsigue en 15 minutos, volver a comenzar la ope-ración de adición de agua, evaporación y recalcina-ción.

Cuando se trate de un vino rico en azúcares, serecomienda adicionar unas gotas de aceite purovegetal al extracto, antes de comenzar la calcina-ción para impedir el desbordamiento de la masa delcontenido. La duración de la primera carbonizacióndeberá ser en este caso 15 minutos.

Después de enfriar en el desecador cápsula ycenizas, se pesan.

11.4. Cálculo.Calcular el contenido en cenizas expresado en g/l.

Cenizas = 50 P g/lP = peso en g de las cenizas contenidas en 20 mlde vino.

Dar los resultados con una aproximación de0,03 g/l.

11.5. Referencias.11.5.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. 0. I. V. A6, 1. 1969.11.5.2. “Métodos Oficiales de Análisis de Vinos”,

pág. 106. Ministerio de Agricultura, 1956.

12. ALCALINIDAD DE CENIZAS

12.1. Principio.Se denomina alcalinidad total de cenizas la suma

de los cationes, diferentes del amonio, combinadoscon los ácidos orgánicos del vino.

La valoración se funda en la volumetría conácido sulfúrico, valorando en retorno después de

disolver en el mismo y en caliente, las cenizas, yempleando el anaranjado de metilo como indicador.

12.2. Material y aparatos.12.2.1. Baño de agua.12.2.2. Pipeta de 10 ml.12.2.3. Varilla de vidrio.12.2.4. Bureta de valoraciones.

12.3. Reactivos.181061 Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV171432 Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE181693 Sodio Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV

12.3.1. Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV.12.3.2. Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE.12.3.3. Sodio Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV.

12.4. Procedimiento.Añadir a las cenizas ya pesadas, 10 ml de Acido

Sulfúrico 0,05mol/l (0,1N) SV y llevar la cápsula a unbaño de agua hirviendo durante un cuarto de hora,frotando varias veces el fondo de la cápsula con unavarilla de vidrio para activar la disolución de las par-tículas difíciles de disolver. Añadir en seguida dosgotas de Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE yvalorar el exceso de Acido Sulfúrico con SodioHidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV, hasta que el indicadorvire a amarillo.

12.5. Cálculo.Calcular la alcalinidad de las cenizas expresadas

en meq/l o en g/l de potasio carbonato.Alcalinidad de las cenizas = 5 (10 - V) meq/lAlcalinidad de las cenizas = 0,345 (10 - V) g/l de

potasio carbonato.V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,1N utili-

zados.Dar los resultados con una aproximación de

0,5 g por l en potasio carbonato.

12.6. Referencia.12.6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. 0. I. V. A7, 1-2, 1969.

13. FOSFATOS

13.1. Principio.Oxidación del vino, evaporación e incineración.

Pre-cipitación del ácido fosfórico en ácido nítrico alestado de amonio fosfomolibdato. Esta sal sedisuelve por acción de un exceso de sodio hidróxi-do 0,5N en presencia de formaldehído. Valoracióndel exceso de sodio hidróxido por ácido clorhídrico0,5N en presencia de fenolftaleína.

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13.2. Material y aparatos.13.2.1. Cápsula de sílice de 70 mm de diámetro.13.2.2. Baño de arena.13.2.3. Horno de mufla.13.2.4. Erlenmeyer de 500 ml.13.2.5. Vasos de precipitados y elementos para

volumetría.13.2.6. Agitador mecánico.

13.3. Reactivos.181022 Acido Clorhídrico 0,5 mol/l (0,5N) SV121737 Acido Nítrico 53% PA131074 Agua PA-ACS131134 Amonio Molibdato 4-hidrato

PA-ACS-ISO131135 Amonio Nitrato PA-ACS-ISO171327 Fenolftaleína solución 1% RE131328 Formaldehído 36,5-38% p/v estabili-

zado con metanol PA-ACS181692 Sodio Hidróxido 0,5mol/l (0,5N) SV

13.3.1. Solución de Acido Nítrico al 25% (d1,153). Añadir a 440 ml de Acido Nítrico 53% PAAgua PA-ACS hasta 1.000 ml.

13.3.2. Solución de Amonio Nitrato. Añadir, a340 g de Amonio Nitrato PA-ACS-ISO, Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.

13.3.3. Solución de Amonio Molibdato. Añadir, a30 g de Amonio Molibdato 4-hidrato PA-ACS-ISO,Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.

13.3.4. Solución de lavado. 50 g de AmonioNitrato PA-ACS-ISO, 40 ml de Acido Nítrico al 25%y Agua PA-ACS hasta 1 l.

13.4. Procedimiento.Evaporar a sequedad 100 ml de vino en cápsu-

la de cuarzo en sucesivas adiciones. Añadir des-pués 4 ml de Acido Nítrico 53% PA y calentar pro-gresivamente en el baño de arena y después en elhorno de mufla.

Añadir a las cenizas 2 ml de Acido Nítrico 53%PA y evaporar a sequedad en el baño de agua parainsolubilizar la sílice. Añadir 10 ml de Acido Nítrico al25%; remover y arrastrar las cenizas a un filtro; lavarla cápsula y filtro con 5 ml del mismo ácido y des-pués con 20-30 ml de Agua PA-ACS. Recoger el fil-trado en un Erlenmeyer de unos 500 ml, adicionar25 ml de solución de Amonio Nitrato de 340 g por ly agitar.

Después añadir de una vez 80 ml de solución deAmonio Molibdato 3% y agitar mecánicamentedurante 12 minutos a razón de 200 sacudidas porminuto. Decantar y filtrar por papel. Lavar luego elprecipitado con 75 ml de líquido de lavado dosveces. Cada lavado no debe durar más de 10 minu-tos. Lavar 8 veces más con Agua PA-ACS.

Colocar el filtro y el precipitado en un vaso con50 ml de Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV. Aña-dir 12,5 ml de Formaldehído 36,5-38% p/v, estabili-zado con metanol PA-ACS neutralizado en presen-

cia de Fenolftaleína solución 1% RE, para disolver elprecipitado de Fosfomolibdato. Escurrir el filtro yextender sobre la pared del vaso, por encima dellíquido de la solución. Valorar el exceso de sodiohidróxido con Acido Clorhídrico 0,5 mol/l (0,5N) SV,hasta decoloración de la Fenolftaleína, habiendosumergido al final nuevamente el filtro.

13.5. Cálculo.Calcular el contenido en fosfatos expresado en

meq de ácido fosfórico (considerado como triácido),o en g de P205 por l de vino.

Fosfatos = 0,577 (50 - V) meq de ácido fosfórico.Fosfatos = 0,01365 (50 - V) g de P205 por l de

vino.V = volumen en ml de solución de ácido clorhí-

drico 0,5N.Dar los resultados con una aproximación de

0,01 g/l.

13.6. Referencia.13.6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. 0. I. V. A16, 1-2 1969.

14. CALCIO(Método complexométrico)

14.1. Principio.Valoración del calcio por complexometría sobre lasolución nítrica o clorhídrica de las cenizas del vino.

14.2. Material y aparatos.14.2. (1, 2, 3 y 4) como 11.2. (1, 2, 3 y 4).14.2.5. Matraces Erlenmeyer de 1.000 ml.14.2.6. Matraces Erlenmeyer de 100 ml.

14.3. Reactivos.182318 Acido Clorhídrico 0,25 mol/l (0,25N) SV182120 Acido Etilendiaminotetraacético Sal

Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV (Acido EDTA Na2) (o preparar con 131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO)Acido a-Hidroxi-1-(2-Hidroxi-1-Naftila-zo)-4-Naftalensulfónico, Sal Sódica (CALCON)

131074 Agua PA-ACS182241 Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV

(o preparar con 121212 Calcio Carbo-nato precipitado PA)

131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO131687 Sodio Hidróxido 97% lentejas PA-ACS-ISO14.3.1. Acido Clorhídrico 0,25 mol/l (0,25N) SV. 14.3.2. Acido Etilendiaminotetraacético Sal Di-

sódica 0,05 mol/l (0,05M) SV. En su defecto añadira 18,61 g de Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 2-hidrato PA-ACS-ISO Agua PA-ACShasta 1.000 ml y disolver.

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14.3.3. Lejía de Sodio Hidróxido al 40%. Añadira 40 g de Sodio Hidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISOAgua PA-ACS hasta 100 ml.

14.3.4. Indicador de Calcon. Mezclar 1 g deAcido a-Hidroxi-1-(2-Hidroxi-1-Naftilazo)-4-Nafta-lensulfónico, Sal Sódica con 100 g de Sodio Cloru-ro PA.

14.3.5. Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV. Ensu defecto disolver 5,05 g de Calcio Carbonato pre-cipitado PA en la cantidad necesaria de Acido Clor-hídrico diluido y completar a 1 litro. Valorar estasolución por medio de Acido Etilendiaminotetra-acético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV en pre-sencia de Calcon en la forma que luego se des-cribe.

14.4. Procedimiento.Evaporar a sequedad en baño de agua hirviendo

50 ml de vino colocados en cápsulas preferente-mente de platino. Incinerar el residuo como en 11.Disolver las cenizas en 8 ml de Acido Clorhídrico0,25 mol/l (0,25N) SV, llevar a un matraz aforado de50 ml; lavar varias veces la cápsula con AguaPA-ACS vertiéndola en el matraz. Enrasar y agitar.

Tomar 20 ml de la solución de cenizas y calentarhasta ebullición, en un Erlenmeyer de unos 100 ml.Dejar enfriar y después añadir 0,5 ml de solución deSodio Hidróxido al 40%, 10 ml de Acido Etilendia-minotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SVy 100 mg aproximadamente de indicador Calcon.

Si el color de la mezcla es rojo-vinoso, añadirAcido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 0,05mol/l (0,05M) SV en exceso hasta aparición de colorazul-violeta.

Evitar una cantidad de Acido Etilendiaminotetra-acético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV en exce-so relativamente grande, que enmascara el puntode viraje.

Valorar el exceso de Acido Etilendiaminotetra-acético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV añadien-do Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV. El indica-dor Calcon virará de azul violeta a rojo-vinoso al finalde la reacción.

14.5. Cálculo.Calcular el contenido en calcio como iones Ca

en meq/l, o como iones Ca expresados en g/l.

Calcio = (10 - V) 5 meq/l de ion Ca.

Calcio = (10 - V) 0,1 g/l de ion Ca.

V = volumen en ml de calcio cloruro 0,05M.

14.6. Referencias.14.6.1. Castino, M. “Determinazione complesso-

metrica del Calcio o del Magnesio nei vini”. Rivistade Viticoltura e di Enologia di Conegliano, 9, 1960.

14.6.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V. A26, 2-3, 1969.

15. MAGNESIO

15.1. Principio.Valoración del magnesio por complexometría

sobre la solución nítrica o clorhídrica de las cenizasdel vino.

15.2. Material y aparatos.15.2. (1, 2, 3 y 4), como 11.2. (1, 2, 3 y 4).15.2. (5 y 6), como en 14.2. (5 y 6).

15.3. Reactivos.131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO182120 Acido Etilendiaminotetraacético Sal

Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV181397 Magnesio Cloruro 0,l mol/l (0,1M) SV

(diluir o preparar como se indica en 15.3.4)211276 Magnesio Oxido QP (*)171439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO171730 Solución Tampón pH 10 RE(o preparar con 131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO,121129 Amoníaco 25% (en NH3) PA y 131074 Agua PA-ACS)

15.3.1 Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disó-dica 0,05 mol/l (0,05M) SV. Como en 14.3.2.

15.3.2. Solución Tampón pH 10 RE. En sudefecto preparar disolviendo 50 g de Amonio Clo-ruro PA-ACS-ISO en 350 g de Amoníaco 25% (enNH3) PA y añadir Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.

15.3.3. Indicador Negro de Eriocromo T. Mezclar1 g de Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS,con 100 g de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO.

15.3.4. Solución de Magnesio Cloruro 0,05M. Enun matraz aforado de 1 l introducir 500 ml de Mag-nesio Cloruro 0,1mol/l (0,1M) SV, diluir y enrasar conAgua PA-ACS o preparar disolviendo 2,25 g deMagnesio Oxido QP en la cantidad necesaria deAcido Clorhídrico diluido y llevar después el volumena 1 litro. Valorar esta solución con Acido Etilendia-minotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV(15.3.1) en presencia de Negro de Eriocromo T(15.3.3) como se indica a continuación.

15.4. Procedimiento.Tomar 20 ml de la solución de cenizas antes pre-

parada, llevar a ebullición en un Erlenmeyer de unos100 ml, dejar enfriar y añadir 10 ml de Acido Etilen-diaminotetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M)SV, 5 ml de Solución Tampón pH 10 RE, 50 mgaproximadamente de indicador Negro de Eriocro-mo T.

Valorar después el exceso de Acido Etilendiami-notetraacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV

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con la solución de Magnesio Cloruro 0,05M. El indi-cador vira del azul al rojo vinoso.

15.5. Cálculo.Calcular el contenido en magnesio expresado en

meq/l o en g/l de iones Mg.

Magnesio = (V - V’) x 5 meq/l

Magnesio = (V - V’) x 0,06075 g/l de iones Mg.

V = volumen en ml de calcio cloruro 0,05M utili-zado para valorar el exceso de ácido EDTA Na20,05M en la determinación del calcio (14.4).

V’ = volumen en ml de solución de magnesiocloruro 0,05M.

(*) El magnesio óxido del comercio está general-mente carbonatado, aun puro, por lo que debe cal-cinarse. Tomar 5 g en cápsulas de platino; llevar alrojo durante más de 30 minutos. Dejar enfriar ypesar los 2,25 g.

15.6. Referencias.15.6.1. Castino, M. “Determinazione complesso-

metrica del Calcio o del Magnesio nei vini”. Rivista diViticoltura e di Enologia di Conegliano, 9, 1960.

15.6.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V., A26, 2-3, 1969.

16. HIERRO(Método colorimétrico delsulfocianuro)

16.1. Principio.El hierro oxidado por el agua oxigenada se com-

bina con el ion sulfociánico en medio clorhídrico. Elcolor rojo se compara con escala patrón o se midepor espectrofotometría. Para los vinos tintos, el hie-rro sulfocianuro se extrae con éter. Para valorarsolamente el hierro trivalente, se suprime la adicióndel agua oxigenada.

16.2. Material y aparatos.16.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro para

lectura a 508 nm de longitud de onda.16.2.2. Tubos de 200 x 20 mm.16.2.3. Bola de decantación de 50 ml.

16.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131036 Acido Nitrico 60% PA-ISO131074 Agua PA-ACS131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO131365 Amonio Hierro lll Sulfato 12-hidrato

PA-ACS-ISO

121085 Etanol 96% v/v PA132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm

de BTH PA-ACS-ISO141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)

PRS211934 Hierro metal, granulado fino QP121534 Potasio Tiocianato PA141699 Sodio metal, barras PRS

(o 121237 Carbón Activo polvo PA o142367 Manganeso IV Oxido 85% precipitado PRS)

131687 Sodio Hidróxido lentejas PA

16.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.16.3.2. Hidrógeno Peróxido de 10 volúmenes.

Usese Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.) PRS ydiluir convenientemente.

16.3.3. Eter Dietílico. Destilar el Eter Dietílico estabi-lizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO antes de suempleo o bien mantenerlo en presencia de Sodio metal,barras PRS o Carbón Activo polvo PA o Manganeso IVOxido 85% precipitado PRS.

16.3.4. Solución de Potasio Tiocianato. Añadir a200 g de Potasio Tiocianato PA Agua PA-ACS hasta1litro, y disolver.

16.3.5. Solución de Hierro III Cloruro de 0,1 g deHierro metal, granulado fino QP por litro. Disolver 0,1 gde Hierro metal, granulado fino QP en 10 ml de AcidoClorhídrico 37% PA-ACS-ISO y 30 ml de Agua PA-ACS.Añadir 1 ml de Acido Nítrico 60% PA-ISO y hervir. Enfriary añadir Agua PA-ACS hasta 1 litro.

También puede prepararse la siguiente solución deHierro. Disolver 0,863 g de Amonio Hierro III Sulfato12-hidrato PA-ACS-ISO, 0,863 g de Amonio Cloruro PA-ACS-ISO (*) y 10 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS y diluir hasta 1.000 ml.

(*). En el original indica “amonio”, entendemos setrata de Amonio Cloruro.

16.3.6. Etanol de 20º. Usese Etanol 96% v/v PA ydiluir convenientemente.

16.4. Procedimiento.16.4.1. Determinación del hierro total. (Férrico +

ferroso).16.4.1.1. Vinos blancos o poco coloreados. Colocar

10 ml de vino en un tubo de 200 x 20 mm, añadir 1 mlde Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO, 5 gotas deHidrógeno Peróxido y 1 ml de solucion de Potasio Tio-cianato.

A la aparición del color añadir 20 ml de Eter Dietíli-co, agitar para mezclar las dos fases sin emulsionar ydejar decantar 5 minutos. Determinar la absorbancia dellíquido decantado en espectrofotómetro colorímetro a508 nm. Ajustar el espectrofotómetro a cero, utilizandocomo prueba en blanco 10 ml de vino acidulados con1 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO y diluidoscon 1 ml de Agua PA-ACS. De esta forma se compen-

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sa la influencia del color del vino y de la posible apari-ción de color o del reavivado del vino, ambas coloracio-nes debidas a la acidez añadida al vino.

Obtener una curva, procediendo en la formaanteriormente descrita y utilizando en vez de 10 mlde vino mezclas de 5 ml de alcohol de 20° y por-ciones de 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 ml, completadashasta 5 ml con Agua PA-ACS. Estas mezclas con-tendrán, respectivamente, 5,10, 15, 20 y 25 mg/l dehierro.

16.4.1.2. Vinos tintos.- Como en 16.4.1.1, peroutilizando sólo 0,2 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO. El exceso de acidez dificulta la extraccióndel hierro sulfocianuro por el éter.

16.4.2. Determinación del hierro trivalente.Como en 16.4.1, pero sin adicionar HidrógenoPeróxido.

16.5. Cálculo.Calcular el contenido en hierro expresado en

mg/l por comparación de la absorbancia con lacurva patrón.

16.6. Observaciones.En lugar del éter algunos autores (16.7.2) reco-

miendan el empleo del etilo acetato, que no tiene elinconveniente de la posible presencia de peróxidos;sin embargo, en algunos vinos de intenso color denuestro país se ha observado extracción de partede la materia colorante con el etilo acetato, lo queno sucede con el éter.

16.7. Referencias.16.7.1. Ribereau-Gayon, J., y Peynaud, E.

“Analyse et Controle des Vins”, pág. 194, 1958.16.7.2. Jaulmes, P.; Brun, S.; Tour, C.; Cabanis,

J.C. “Dosage direct du fer dans les vins”. SociétéPharmacie Montpellier, 24:2, 1964.

17. COBRE

17.1. Principio.

El sodio dietilditiocarbamato reacciona con elcobre (reacción de Delepine), dando la sal corres-pondiente a este metal y coloración amarilla oro,cuya intensidad se mide por colorimetría o espec-trofotometría.

Para evitar interferencias debidas a la presenciade hierro y otros cationes polivalentes presentes enel vino se emplea la sal disódica del ácido etilendia-minotetraacético, que forma complejos solubles ymuy estables a pH = 8. También puede utilizarse elamonio citrato para evitar la interferencia del hierro.

17.2. Material y aparatos.17.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro con fil-

tro para longitud de onda de 420 nm.

17.2.2. Bola de decantación de unos 100 ml.

17.3. Reactivos.131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal

Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO(Acido EDTA Na2 2-hidrato) (o 131120di-Amonio Hidrógeno Citrato PA-ACS)

131074 Agua PA-ACS121129 Amoníaco 25% (en NH3) PA131245 Carbono Tetracloruro PA-ACS-ISO131091 Metanol PA-ACS-ISO131668 Sodio Dietilditiocarbamato 3-hidrato

PA-ACS

17.3.1. Solución acuosa al 0,1% de Sodio Dietil-ditiocarbamato.

17.3.2. Suspensión de Acido Etilendiaminotetra-acético Sal Disódica al 20%, o bien solución acuo-sa de Amonio Citrato al 20%.

17.3.3. Solución amoniacal al 15%. Diluir conve-nietemente el Amoníaco 25% (en NH3) PA con AguaPA-ACS.

17.3.4. Metanol PA-ACS-ISO.17.3.5. Carbono Tetracloruro PA-ACS-ISO.17.3.6. Agua bidestilada en vidrio. Utilizarla tam-

bién para la preparación de reactivos.

17.4. Procedimiento.Poner en una bola de decantación 10 ml del

vino, añadir 5 ml de una suspensión del Acido EDTANa2 2-hidrato (o 5 ml de soluciónde Amonio Citrato)y llevar a pH 8 con la solución amoniacal. Añadir1 ml de reactivo de Sodio Dietilditiocarbamato y5 ml de Metanol PA-ACS-ISO (para evitar emulsión),y agitar durante 1 minuto.

Extraer varias veces con Carbono TetracloruroPA-ACS-ISO (agitando cada vez durante 1 minuto)hasta recoger 20 ml, cuidando que no pasen restosde agua, pues éstos dan enturbiamiento con el Car-bono Tetracloruro PA-ACS-ISO. Si pasa algunagota, filtrar por papel de filtro puro, quedando lastrazas de agua en el papel.

Determinar la absorbancia en el espectrofotóme-tro a 420 nm de longitud de onda.

Para la prueba en blanco utilizar los mismosreactivos en las mismas proporciones, sustituyendoel volumen de vino por otro igual de Agua bidestila-da en aparato de vidrio.

La curva que previamente será construida apartir de lecturas correspondientes a escala dediferentes riquezas de cobre es una línea recta,por obedecer a la ley de Lamber-Beer. En el inter-valo en que se opera con 1 ml de reactivo puedenvalorarse 10 ppm de cobre; para valores superio-res, se añadirán 2 ml o se toma menor volumende muestra.

17.5. Cálculo.El valor obtenido para la absorbancia a 420 nm

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se lleva a la curva patrón y se expresa el correspon-diente contenido en cobre en ppm.

17.6. Referencia.17.6.1. Garoglio, P. G., y Stella, C. “Methodi uffi-

ciali di analisi per i mosti, i vini e gli aceti”, pág. 75,1958.

18. POTASIO(Fotometría de llama)

18.1. Principio.Se utiliza una solución de referencia con 100 mg

de potasio por litro y con diversos aniones, cationesy materia orgánica en proporciones tales que denun compuesto similar a un vino diluido a 1/10 conagua.

18.2. Material y aparatos.18.2.1. Fotómetro de llama y accesorios.18.2.2. Pipetas de 10 ml.18.2.3. Matraces aforados de 1.000 ml.

18.3. Reactivos.131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS

Alilo Isotiocianato121221 Calcio Cloruro anhidro 95% polvo PA121085 Etanol 96% v/v PA141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX211794 Magnesio Cloruro p50% MgCl2 QP121486 Potasio Hidrógeno Tartrato PA131621 Sacarosa PA-ACS131965 Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato

PA-ACS141859 Sodio Salicilato (USP, BP, F. Eur.)

PRS-CODEX

18.3.1. Solución de referencia. Disolver 481,3 mgde Potasio Hidrógeno Tartrato PA en 500 ml deAgua PA-ACS muy caliente y mezclar con una solu-ción de 10 ml de Etanol 96% v/v PA, 700 mg deAido Cítrico anhidro PA-ACS, 300 mg de SacarosaPA-ACS, 1.000 mg de Glicerina (USP, BP, F. Eur.)PRS-CODEX, 20 mg de Sodio di-Hidrógeno Fosfa-to 1-hidrato PA-ACS, 10 mg de Calcio Cloruro anhi-dro 95% polvo PA y 10 mg de Magnesio Clorurop50% MgCl2 polvo QP en 400 ml de Agua PA-ACS.Completar con Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.

Añadir dos gotas de Alilo Isotiocianato para con-servación más segura de la solución.

18.3.2. Solución de dilución. Igual que la ante-rior, cambiando el Potasio Hidrógeno Tartrato PApor 383 mg de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO.

Para preparar la solución de referencia, comen-zar por disolver 481,3 mg de Potasio HidrógenoTartrato PA en medio litro de Agua PA-ACS muycaliente y mezclar esta solución con los otros com-

ponentes, previamente disueltos en 400 ml de AguaPA-ACS; enrasar después a 1 litro exactamente.

Para la conservación más segura de esta solu-ción se añaden 2 gotas de Alilo isotiocianato.

Con vinos dulces, añadir una cantidad de Saca-rosa PA-ACS igual a la décima parte de la que con-tenga el vino.

Añadir a la solución de referencia una cantidadde Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato PA-ACSequivalente al contenido en sodio del vino cuandoeste contenido sea superior al equivalente a 20 mgde Sodio di-Hidrógeno Fosfato 1-hidrato PA-ACS.

En el caso del fraude por adición de 1 g/l deSodio Salicilato, añadir 100 mg de Sodio Salicilato(USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX por litro de la solu-ción de referencia y de dilución. El Sodio Salicilatotiene una influencia muy marcada en el resultado delanálisis.

18.4. Procedimiento.Regular el aparato y establecer una curva de

calibración con la solución de referencia pura y condiversas diluciones de la solución de referencia dilui-da a 1/20, 1/10, 1/5, 1/2, con la solución de dilu-ción.

Diluir el vino a 1/10 con agua y hacer la determi-nación en el fotómetro.

Si la lectura no queda comprendida entre losvalores 40 y 100 de la escala del galvanómetro,diluir convenientemente el vino con solución de dilu-ción.

18.5. Cálculo.Calcular el contenido en potasio expresado en

g/l con una aproximación de ±0,02 g/l.

Potasio = 10 L g/l

L = valor correspondiente a la lectura de la esca-la del galvanómetro en la curva de calibración.

18.6. Referencia.18.6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. 0. I. V. A8, 1-6, 1969.

19. SODIO(Fotometría de llama)

19.1. Principio.Como en 18.1, referido a sodio.

19.2. Material y aparatos.Como en 18.2.

19.3. Reactivos.131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS

Alilo Isotiocianato

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121221 Calcio Cloruro anhidro 95%, polvo PA121085 Etanol 96% v/v PA141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX211794 Magnesio Cloruro p50% MgCl2 QP131621 Sacarosa PA-ACS131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO141859 Sodio Salicilato (USP, BP, F. Eur.)

PRS-CODEX

19.3.1. Solución de referencia.- Como en18.3.1, sustituyendo los 20 mg de Sodio di-Hidró-geno Fosfato 1-hidrato PA-ACS por 50,84 mg deSodio Cloruro PA-ACS-ISO.

19.3.2. Solución de dilución.- Como en 18.3.2,suprimiendo los 50,84 mg de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO.

19.4. Procedimiento.Como en 18.4. Para la curva de calibración, uti-

lizar la solución de referencia diluida a 1/20, 1/10,1/2, 3/4.

19.5. Cálculo.Calcular el contenido en sodio expresado en g/l

con una aproximación de ± 0,05 g/l.

19.6. Referencia.19.6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. 0. I. V. A25, 1-2, 1969.

20. ACIDEZ TOTAL

20.1. Principio.La acidez total de un vino se considera como la

suma de los ácidos titulables cuando se lleva el vinoa pH = 7 por adición de un licor alcalino valorado. Elácido carbónico y el anhídrido sulfuroso libre y com-binado no se consideran comprendidos en la acideztotal.

El gas carbónico se elimina previamente del vinopor agitación en frío y con vacío parcial.

20.2. Material y aparatos.20.2.1. Potenciómetro con electrodo de vidrio.20.2.2. Agitador magnético.20.2.3. Puente con solución saturada de ClK

para evitar la introducción del electrodo de calome-lanos en el vino.

20.2.4. Kitasato de un litro.20.2.5. Pipeta de 20 ml.20.2.6. Vaso de 100 ml de capacidad.20.2.7. Bureta de 50 ml.

20.3. Reactivos.171495 Potasio Cloruro solución saturada RE171694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE

20.3.1. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE.

20.4. Procedimiento.Poner 50 ml de vino en un Kitasato de 1l de

capacidad, conectar al vacío agitando al mismotiempo el matraz. El desprendimiento de CO2 seaprecia a los pocos momentos. Observar atenta-mente el momento en que dejan de desprenderselas burbujas, desconectar del vacío.

Tomar 20 ml del vino sin CO2 y llevar a un vasode unos 100 ml de capacidad, introducir el electro-do de vidrio en el vino y el de calomelanos en vasolateral con Potasio Cloruro solución saturada RE.Disponer un puente de la misma solución en tubode vidrio con los extremos uno en cada vaso esta-bleciendo contacto.

Poner en marcha el agitador y añadir desdebureta Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE al vinohasta que la aguja del potenciómetro marque pH =7, manteniendo el agitador en marcha durante laoperación, que no debe durar más de cinco minu-tos.

20.5. Cálculo.Calcular la acidez total expresada en meq/l con

una aproximación de 0,1 meq/l o en g de ácido tar-tárico.

VAcidez total = 10 —— - 0,35 V - 0,25 V” meq/l

2

VAcidez total = 0,75 ( —— - 0,035 V’ - 0,025 V”) g/l

2de ácido tartárico.

V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,1N.

V’ = volumen en ml de yodo 0,01N utilizado parala oxidación de anhídrido sulfuroso libre (21.-).

V” = volumen en ml de yodo 0,01N utilizado parala oxidación del anhídrido sulfuroso combinado (21.-).

20.6. Referencias.

20.6.1. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V. A10, 1-3, 1969.

20.6.2. Jaulmes, P. ”La mesure de l’acidité totaldes vins”. Annal des Falsifications et des Fraudes,556, 1955.

NOTA: Organismos como la American Society ofEnologist y la Association of Official Analytical Che-mist, aconsejan que el punto de viraje sea a pH 8,2en lugar de 7,0 por tratarse de una valoración deácidos débiles con una base fuerte.

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21. ACIDEZ VOLATIL

21.1. Principio.La acidez volátil está constituida por la parte de

ácidos grasos pertenecientes a la serie acética quese encuentra en los vinos, ya sea en estado libre ode sal. Se determina mediante la separación de losácidos volátiles por arrastre con vapor de agua yrectificación de los vapores. Se debe evitar con pre-caución la presencia de gas carbónico en el destila-do. La acidez del anhídrido sulfuroso libre y combi-nado arrastrados con el destilado no deben com-prenderse en la acidez volátil, por lo que hay querestar la equivalencia de su acidez de la del destila-do, así como la del ácido sórbico eventualmentepresente. Para estas correcciones se sigue la normaJaulmes (21.7.2), en la que se considera comocompleta la influencia de SO2 libre y sólo la mitad dela del combinado.

21.2. Material y aparatos.21.2.1. Aparato para destilación aislada (fig.21.I).21.2.1.1. Matraz de generador de vapor de

3.500 ml.El agua condensada en el tubo de unión del

matraz con el barbotador se purga por el purgador(c).

21.2.1.2. Barbotador (b).- Tubo cilíndrico de3 cm de diámetro y 27 cm de altura. Este tubo repo-sa sobre un disco de amianto de 15 cm de diáme-tro, con un orificio central de 29 mm. El tubo (d) porel que entra el vapor en el barbotador debe llegar a1 cm del fondo.

21.2.1.3. Columna rectificadora (e) .- Constituidapor un tubo cilíndrico de 20 mm de diámetro y50 cm de altura, conteniendo una hélice de tela deacero inoxidable número 100 plegada, con 15 mmde paso.

21.2.1.4. Refrigerante de West (f).- De 40 cm delongitud activa, colocado verticalmente.

21.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131066 Acido L (+)-Tartárico PA-ACS-ISO171073 Agua de Cal solución saturada RE(o 171071 Agua de Barita solución saturada RE)131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121085 Etanol 96% v/v PA131325 Fenolftaleína PA-ACS131542 Potasio Yoduro PA-ISO131644 di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato

PA-ACS-ISO181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV

21.3.1. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV.21.3.2. Solución de Fenolftaleína al 1% en Etanol

96% v/v PA. Usese Fenolftaleína PA-ACS y diluirconvenientemente.

21.3.3. Solución de Yodo 0,01N. Diluir Yodo0,01 mol/l (0,02N) SV con Agua PA-ACS a 1:1 ydeterminar el factor.

21.3.4. Almidón soluble RE.

21.4. Procedimiento.Alimentar el generador de vapor con Agua de

Cal solución saturada RE o Agua de Barita soluciónsaturada RE limpia, manteniéndolo lleno hasta unos2/3 de su volumen. Poner en el barbotador 20 mldel vino exento de gas carbónico como en 20.4.Añadir al vino unos 0,5 g de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO, poner en marcha el generador de vapor,manteniendo abierta la salida del tubo purgador delvapor; después de cerrar ésta, calentar el barbota-dor. Durante la operación se regula el calentamien-to de forma que el volumen de líquido en el barbo-tador no pase sensiblemente de los 20 ml iniciales.

Destilar en unos 12-15 minutos 250 ml.Valorar con Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV

en presencia de dos gotas de Fenolftaleína comoindicador.

Valorar el sulfuroso libre en este destilado, aña-diendo al terminar la anterior valoración una gota deAcido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO, para acidularnuevamente y valorar el SO2 libre con solución deYodo 0,01N, añadiendo también 2 ml de Almidónsoluble RE como indicador y un cristal de PotasioYoduro PA-ISO.

Para determinar el Acido Sulfuroso combinadocon el Acetaldehído, añadir 20 ml de solución satu-rada de di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PA-ACS-ISO (el líquido toma un color rosa pálido) y valorarnuevamente con solución de Yodo 0,01N.

21.5. Cálculo.Calcular la acidez volátil expresada en meq/l,

con una aproximación de 0,2 ml, o en g/l de ácidosulfúrico o de ácido acético, con una aproximaciónde 0,1 g/l.

Acidez volátil = 5 (V - V’/10 - V”/20) meq/l

0,49Acidez volátil = ——— (V - V’/10 - V”/20) g/l de

2ácido sulfúrico.

0,6Acidez volátil = ——— (V - V’/10 - V”/20) g/l de

2ácido acético.

V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,1N.V’= volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en la

oxidación del anhídrido sulfuroso libre.V”= volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en la

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oxidación del anhídrido sulfuroso combinado con elacetaldehído.

21.6. Observaciones.En la destilación del vino para la determinación

de la acidez volátil el ácido sórbico pasa casi en sutotalidad al destilado, junto con el ácido acético, fal-seando el resultado del análisis. Para corregir elresultado, determinar el ácido sórbico en el destila-do como en 29, procediendo en la siguiente formasimplificada: tomar 0,5 ml del destilado de la acidezvolátil, llevar a la cubeta de 1 cm de espesor inter-no, añadir 1,5 ml de la solución (a), dejar la cubetaal aire durante unos minutos y medir después laabsorbancia en el espectrofotómetro a 256 nm.Graduar el espectrofotómetro con 0,5 ml de la solu-ción (b) y 1,5 ml de la solución (a).

21.7. Referencias.21.7.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. 0. I. V. All, 1-4, 1969.21.7.2. Jaulmes, P. Analyse des Vins, 2a. ed.,

1951.

22. ACIDO SORBICO EN EL DESTILADOPARA ACIDEZ VOLATIL

22.1. Principio.En la destilación del vino para la determinación

de la acidez volátil el ácido sórbico pasa casi en sutotalidad al destilado junto con el ácido acético, fal-seando el resultado del analísis. Para valorar esteácido sórbico se parte de una muestra de 0,5 ml dedestilado (lo que no supone un error sensible) y sevalora por espectrofotometría en el ultravioleta.

22.2. Material y aparatos.22.2.1. Espectrofotómetro ultravioleta.22.2.2. Cubetas de cuarzo de 1 cm.22.2.3. Pipetas de 0,5 ml y 1,5 ml.

22.3. Reactivos.141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX131074 Agua PA-ACS131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO121531 Potasio Sorbato PA121638 Sodio Hidrógeno Carbonato PA

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Figura 21.I.- Aparato para destilación aislada

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22.3.1. Solución a): Mezclar 0,5 g de SodioHidrógeno Carbonato PA con 0,001 g de Cobre IISulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y añadir Agua PA-ACS hasta un litro.

22.3.2. Solución b): Llevar 20 mg de Acido Sór-bico (USP-NF) PRS-CODEX a matraz de un litro quecontenga 900 ml de Agua PA-ACS caliente, agitar,dejar enfriar y enrasar a un litro. En vez de AcidoSórbico (USP-NF) PRS-CODEX puede emplearse26,8 g de Potasio Sorbato PA.

22.4. Procedimiento.Tomar 0,5 ml del destilado de la acidez volátil,

llevar a la cubeta de 1 cm de espesor interno, aña-dir 1,5 ml de la solución a), dejar la cubeta al airedurante unos minutos y medir después la absor-bancia en el espectrofotómetro a 256 nm. Graduarel espectrofotómetro con 0,5 ml de la solución b) y1,5 ml de la solución a).

22.5. Cálculo.Un gramo de ácido sórbico corresponde a

8,92 ml de solución normal y a 0,438 g de ácido sul-fúrico. Para todo vino adicionado con 200 mg deácido sórbico por litro la corrección sustractiva quecorresponde hacer a la acidez volátil es de 1,7 meqo 0,088 g del ácido sulfúrico o 0,107 g de ácidoacético por litro de vino.

22.6. Referencia.22.6.1.Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. O. I. V. All, 3.

23. ACIDEZ FIJA

23.1. Principio.Se considera convencionalmente como acidez

fija la diferencia entre acidez total y acidez volátil,ambas expresadas en ácido tartárico.

No es necesario hacer las correcciones poreventual presencia de anhídrido sulfuroso combina-do y libre.

24(a). ACIDO TARTARICO TOTAL(Método del calcio racemato)

24(a).1. Principio.Adición al vino de ácido tartárico levógiro que en

unión con el ácido tartárico dextrógiro del vino y enpresencia de solución de calcio, forman en condi-ciones determinadas calcio racemato insoluble.

En el método adoptado se determinan las con-diciones de precipitación del calcio racemato, fijan-do la solubilidad del calcio tartrato levógiro (quetambién se forma) y las del calcio racemato en fun-ción del pH y de la riqueza en iones de calcio. Conestos datos se ha fijado un pH conveniente para

que precipite el calcio racemato y se solubilice eltartrato levógiro.

24(a).2. Material y aparatos.24(a).2.1. Vaso cilíndrico de 600 ml.24(a).2.2. Filtros de porosidades números 4 y 2.24(a).2.3. Kitasato y trompa de agua para vacío.24(a).2.4. Material accesorio para una volume-

tría.24(a).3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS

Amonio D(-)-Tartrato121212 Calcio Carbonato precipitado PA

24(a).3.1. Solución de Calcio Acetato de 10 g deCalcio por litro. Mezclar en matraz aforado de1.000 ml 25 g de Calcio Carbonato precipitado PAcon 40 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO yenrasar con Agua PA-ACS hasta 1.000 ml.

24(a).3.2. Calcio Racemato cristalizado. En unvaso, introducir 20 ml de una solución de AcidoL(+)-Tartárico de 5 g por litro, 100 ml de Agua PA-ACS, 20 ml de una solución de Amonio Tartratolevógiro de 6,126 g por litro y 6 ml de la solución deCalcio Acetato.

Dejar precipitar durante dos horas. Recoger elprecipitado sobre un filtro de porosidad número 4,lavando y arrastrando cuatro veces. Secar en estu-fa a 70° hasta peso constante. Se obtienen unos340 mg de Calcio Racemato cristalizado.

Conservar en frasco tapado.24(a).3.3. Licor de precipitación. Introducir enmatraz aforado de 1.000 ml 150 g de Amonio D(-)-Tartrato levógiro, 8,8 ml de solución de Calcio de10 g/l y enrasar con Agua PA-ACS.

Por ser el Calcio Racemato ligeramente solubleen este licor, conviene saturarlo antes de su empleo,añadiendo 5 g de Calcio Racemato a un litro de estelicor. Agitar durante 12 horas y filtrar.

24(a).4. Procedimiento.24(a).4.1. Precipitación del Racemato.- En un

vaso cilíndrico de 600 ml introducir 500 ml de licorde precipitación y 10 ml de vino. Mezclar y dejarprecipitar durante 24 horas.

24(a) 4.2. Valoración gravimétrica.- Filtrar sobrefiltro poroso número 2, tarado y puesto sobre elKitasato, recogiendo el precipitado. Lavar el vaso enel que se ha efectuado la precipitación y arrastrar lasúltimas partículas de precipitado con el líquido ya fil-trado.

Secar en estufa a 70° hasta peso constante.

24(a).5. Cálculo.Calcular el ácido tartárico expresado en g/l de

vino o en g de potasio bitartrato.

Acido tartárico = 28,84 x P g/l

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Acido tartárico = 36,15 x P g de potasio bitar-trato.

P = peso en g del calcio racemato, cristalizadocon cuatro moléculas de agua.

24(a).6. Referencia.24(a).6.1. Jaulmes, P.; Brum, S.; Cabanis, J.

“Comunicación número 304 de Métodos de Análisisde Vinos”. 0. I. V., 1969.

24(b). ACIDO TARTARICO TOTAL(Método complexométrico)

24(b).1. Principio.Como en 24(a).1.

24(b).2. Material y aparatos.24(b).2. (1, 2, 3, 4) como 24 (a) .2. (1, 2, 3, 4).

24(b).3. Reactivos.131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO182120 Acido Etilendiaminotetraacético Sal

Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV (Acido EDTA Na2 0,05M SV) (o prepa-rar con 131669 Acido EDTA Na22-hidrato PA-ACS-ISO)

131074 Agua PA-ACS211276 Magnesio Oxido QP171439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV272172 Tampón, Solución pH 9,00 ±0,02 (20ºC) ST(o preparar con 131121 Amonio CloruroPA-ACS-ISO, 121129 Amoníaco 25% (en NH3) PA y Agua PA-ACS)

24(b).3.1. Solución Tampón pH 9,00 ±0,02(20ºC) ST, o preparar mezclando 54 g de AmonioCloruro PA-ACS-ISO, 350 ml de Amoníaco 25% (enNH3) PA y completar con Agua PA-ACS hasta unlitro.

24(b).3.2. Indicador de Negro de Eriocromo T.Mezclar 1 g de Negro de Eriocromo T (C.I. 14645)RE-ACS con 100 g de Sodió Cloruro PA-ACS-ISO.

24(b).3.3. Solución de Magnesio 0,05M. Disolver2,25 g de Magnesio Oxido QP (para asegurar queno esté carbonatado se recomienda calcinar 5 g deMagnesio Oxido QP al rojo en horno eléctricodurante 30 minutos, enfriar y pesar 2,25 g). Hacer ladisolución en cantidad necesaria de Acido Clorhídri-co diluido (10%) y luego se enrasa a un litro.

Valorar esta solución con Acido Etilendiaminote-traacético Sal Disódica 0,05 mol/l (0,05M) SV enpresencia de Negro de Eriocromo T.

24(b).3.4. Acido Etilendiaminotetraacético Sal Di-sódica 0,05 mol/l (0,05M) SV. En su defecto disolver18,61 g de Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica2-hidrato PA-ACS-ISO en 1 litro de Agua PA-ACS.

24(b).3.5. Acido Clorhídrico diluido a 1/5 (v/v).Diluir Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PA-ACS.

24(b).3.6. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.

24(b).4. Procedimiento.Disolver en 10 ml de Acido Clorhídrico diluido el

precipitado de Racemato recogido sobre el crisol fil-trante. Lavar el crisol filtrante con unos 50 ml deAgua PA-ACS. Añadir un volumen de Sodio Hidró-xido 1 mol/l (1N) SV suficiente para neutralizar lasolución (unos 20-22 ml). Añadir después 5 ml deSolución Tampón pH = 9, 5 ml de sal de magnesio0,05M y 50 mg de indicador Negro de Eriocromo T.Valorar con Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 0,05 mol/l (0,05M) SV.

24(b).5. Cálculo.Acido tartárico en g/l de vino = (V - 5) 3,75.Acido tartárico expresado en g/l de potasio bitar-

trato = (V - 5) 4,70.V = volumen en ml de ácido EDTA Na2 0,05M.La expresión de los resultados será en potasio

bitartrato y con una aproximación de 0,5 miliequiva-lentes por litro, o de 0,05 g / l.

25. ACIDO LACTICO

25.1. Principio.Aislamiento del ácido láctico mediante columna

de resinas cambiadoras de aniones, oxidación aacetaldehído y valoración colorimétrica por la reac-ción coloreada del acetaldehído con la piperidina.

25.2. Material y aparatos.25.2.1. Espectrofotómetro y accesorios.25.2.2. Tubo de vidrio o bureta de 10-11 mm de

diámetro y 30 cm de longitud con llave en la parteinferior.

25.2.3. Lana de Vidrio, lavada QP.25.2.4. Resina Lewatit® MP 600 (*) (aniónica fuerte l)

25.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131034 Acido L(+)-Lactico 85% PA-ACS182105 Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV131074 Agua PA-ACS121248 Cerio IV Sulfato 4-hidrato PA211376 Lana de Vidrio lavada QP162377 Piperidina PS

Resina Lewatit® MP 600 (aniónica fuerte I)

131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO181691 Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV121705 Sodio Nitroprusiano 2-hidrato PA131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO141717 Sodio Sulfito anhidro PRS

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25.3.1. Solución de Cerio IV Sulfato 0,1M enAcido Sulfúrico 0,7N. Disolver en frío 40,431 g deCerio IV Sulfato 4-hidrato PA en 350 ml de AcidoSulfúrico 1 mol/l (2N) SV exactamente valorado. Nocalentar, pues se formaría un cerio IV óxido insolu-ble. Llevar la solución a 1.000 ml con Agua PA-ACS.

25.3.2. Solución valorada de Sodio Hidróxido2,5N. Disolver Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS, ajustar a la concentraciónindicada y determinar el factor.

25.3.3. Solución de Sodio Acetato al 27%. Disol-ver 270 g de Sodio Acetato anhidro PA-ACS enAgua PA-ACS y completar 1.000 ml.

25.3.4. Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV.25.3.5. Solución de Sodio Nitroprusiato al 2%.

Disolver 2 g de Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA enAgua PA-ACS, después completar a 100 ml. Con-servar tapado en la oscuridad. La solución no debetener más de ocho días.

25.3.6. Solución de Piperidina al 10%. Llevar aun matraz de 100 ml, 10 ml de Piperidina PS y enra-sar a 100 ml con Agua PA-ACS.

(*). En el original indica “resina cambiadora de anio-nes”. Consideramos apropiada la aniónica fuerte I.

25.4. Procedimiento.25.4.1. Preparación de la columna de resinas

aniónicas. Colocar Lana de Vidrio lavada QP en elfondo del tubo o bureta 25.2.2, formando tapón de2-3 mm de altura proximadamente, añadir Agua PA-ACS hasta una altura de unos 5 mm sobre el tapónde Lana de Vidrio, lavada QP. Añadir después laResina Lewatit® MP 600, que estará conservada enAcido Acético glacial al 30%, agitar esta suspensióny añadir rápidamente un volumen de unos 10 ml.Dejar sedimentar y después depositar en la superfi-cie un tapón de Lana de Vidrio lavada QP que seconduce a través del líquido sin resinas con unavarilla de vidrio.

La Resina Lewatit ® MP 600 no sirve más quepara una sola vez.

25.4.2. Aislamiento del Acido Láctico. Abrir lallave inferior de la columna y dar salida al Acido Acé-tico diluido hasta unos 2-3 ml por encima del tapónde lana superior. Añadir unos 10 ml de Acido Acéti-co al 0,5%, vaciar hasta igual altura y repetir estoslavados cuatro veces.

Después del último lavado, y con llave cerrada,adicionar 10 ml del vino y señalar la altura alcan-zada, con lápiz graso. Dejar salir goteando el vinoa razón de 1-1,5 gotas por segundo (25-30 ml porminuto). Vaciar hasta el nivel del tapón de Lana deVidrio lavada QP superior. Llenar de nuevo lacolumna con Acido Acético al 0,5% hasta la señalde lápiz graso. Dejar salir a la misma velocidadque la vez anterior y lavar después en la mismaforma siete veces, cada vez con 10 ml de AguaPA-ACS.

Al terminar el último lavado, cerrar la llave cuan-do el nivel del líquido se encuentre un poco más arri-ba del tapón de Lana de Vidrio lavada QP superior.

Colocar un matraz receptor aforado de 100 ml.Eluir los ácidos fijados en el cambiador de anionesmediante adiciones de solución de Sodio Sulfito0,5M (prepararlo disolviendo Sodio Sulfito anhidroPRS en Agua PA-ACS), hasta la señal trazada en eltubo.

Resulta práctico, para realizar esta operación,colocar un frasco con la solución de Sodio Sulfitounido por el cuello a la columna mediante un man-guito de caucho y con unas pinzas para regular lacaída del líquido en la bureta o tubo. Puestos así encomunicación los dos aparatos (frasco y bureta otubo), abrir las pinzas del caucho de unión y la llaveinferior, dejando caer el líquído a la bureta hastaunos 10 cm de altura, y sin que queden huecosvacíos. Se regula la salida del líquido a la proporciónde 2-3 gotas por segundo, para llenar el matraz re-ceptor hasta el enrase.

25.4.3. Valoración del Acido Láctico. Introducir10 ml del eluido en un tubo de ensayo de paredesque no sean gruesas y de unos 50 ml de capacidadcon tapón. Añadir 10 ml del reactivo de Cerio IV Sul-fato. Agitar e introducir el tubo de ensayo en un ter-mostato a 65°C durante 10 minutos exactamente.Inmediatamente después de la inmersión en el líqui-do, destapar durante unos segundos, para dar sali-da al aire dilatado. Cerrar rápidamente con el ta-pón para evitar pérdidas del Acetaldehído formado.Después de 10 minutos, retirar y enfriar el tubo conagua corriente hasta la temperatura de 20°C.

Añadir 5 ml de la solución de Sodio Hidróxido2,5N, mezclar bien y filtrar.

Tomar 15 ml del filtrado y verterlos en probeta detapón esmerilado de 50 ml de capacidad, que con-tenga 5 ml de solución de Sodio Acetato al 27% y2 ml de Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV. Añadir ade-más 5 ml de solución de Sodio Nitroprusiato y mez-clar bien. Añadir después 5 ml de solución de Pipe-ridina, mezclar rápidamente, introducir en seguidaen la cubeta del espectrofotómetro de 10 mmde espesor. Medir la coloración producida, quevaría, de verde a violeta, con relación al aire a la lon-gitud de onda de 570 nm. Esta coloracion aumentaal principio, pero disminuye en seguida rápidamen-te. Tomar como valor definitivo el valor máximo de lalectura de absorbancia.

Si el eluido es muy rico en Acido Láctico y ladensidad óptica es muy elevada, diluir el eluido consolución de Sodio Sulfato al 7,1%.

25.4.4. Curva patrón. Tomar 10 ml de una solu-ción de Acido Láctico 1N exacta, y añadir 10 ml deSodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV y completar a unlitro con solución de Sodio Sulfato al 7,1%. Tomar 5,10, 15, 20 y 25 ml, respectivamente, e introducircada alícuota en un matraz aforado de 100 ml.Enrasar con solución de Sodio Sulfato al 7,1%.

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Mezclar bien, tomar 10 ml de las soluciones asíobtenidas y determinar los valores de las absorban-cias respectivas.

Las diferentes soluciones corresponden a eluidodel vino conteniendo 0,45; 0,90; 1,35; 1,80 y 2,25g/l de Acido Láctico.

La representación gráfica de las absorbanciasde estas soluciones en función de la riqueza enAcido Láctico, es una recta.

25.5. Cálculo.Llevar los valores de absorbancia obtenidos a la

curva patrón y deducir los correspondientes conte-nidos en ácido láctico expresados en g/l.

25.6. Observaciones.Si el vino tiene más de 250 mg por litro de sulfu-

roso total, el resultado puede ser erróneo, por lapresencia de ácido aldehído sulfuroso. En determi-naciones de precisión, conviene realizar una correc-ción en la forma siguiente:

Tomar 15 ml de eluido y llevar a probeta detapón esmerilado, en la que se habrá añadido 5 mlde sodio acetato al 27% y 2 ml de ácido sulfúrico1,55N (77,5 ml de ácido sulfúrico 2N diluidos a100 ml con agua destilada). Añadir 5 ml de sodionitroprusiato al 2% y 5 ml de piperidina al 10%.Mezclar y hacer la determinación espectrofotométri-ca a 570 nm que da el factor de corrección:

L = L’ - C x 0,25

L = contenido real de ácido láctico expresado eng/l.

L’ = contenido aparente de ácido láctico expre-sado en g/l.

C = factor de corrección en g/l.

25.7. Referencia.25.7.1. Rebelein, M. “Deutsche Lebens-mittel

Rudshan”, 2: 36-41, 1961, y 59: 131, 1963.

26. ACIDO CITRICO

26.1. Principio.El ácido cítrico es fijado junto con los otros áci-

dos del vino por una resina cambiadora de aniones.Después se procede a la elución, la que se realizafraccionadamente y separando el ácido citromálicoque es causa de error en la valoración del ácidocítrico.

El ácido cítrico es transformado por oxidacióncuidadosa en acetona, la que se separa por destila-ción. El etanal arrastrado se oxida a ácido acético yse valora sola la acetona por yodometría.

26.2. Material y aparatos.26.2.1. Columna cambiadora de aniones. En

una bureta de llave de 25 ml de capacidad, colocarun tapón de Lana de Vidrio, lavada QP en el fondoy verter 20 ml de Resina Dowex 1 x 2.

Someter la Resina a dos ciclos completos deregeneración con pasos alternos de Acido Clorhídri-co 1mol/l (1N) SV y Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.Lavar después con 50 ml de Agua PA-ACS, agitan-do la Resina Dowex cuando los primeros ml deAgua PA-ACS pasan por la columna para despe-garla del fondo de la bureta.

Saturar la Resina de iones acetato, mediante elpaso de 250 ml de una solución de Acido Acético4N. Lavar luego con 100 ml de Agua PA-ACS.

26.2.2. Aparato para la oxidación. Aparato com-puesto de matraz de cuello largo, atravesado late-ralmente por el tubo afilado de embudo con llave, yen comunicación con refrigerante, según dimensio-nes y forma del diseño (fig. 26.I).

26.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121793 Hierro II Sulfato p2-hidrato PA211376 Lana de Vidrio, lavada QP131413 Manganeso II Sulfato 1-hidrato PA-ACS211456 Piedra Pómez gránulos QP131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato

PA-ACS-ISO131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO182114 Potasio Permanganato 0,01 mol/l

(0,05N) SVResina DOWEX 1 x 2 (50-100 mallas)

181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV

26.3.1. Resina Dowex 1 x 2 (50-100 mallas) 26.3.2. Solución de Acido Acético 4N. Diluir

Acido Acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS a la concentración indicada y determinar elfactor.

26.3.3. Solución de Acido Acético 2,5N. DiluirAcido Acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS a la concentración indicada y determinar elfactor.

26.3.4. Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV. 26.3.5. Acido Sulfúrico diluido al 1/5 (v/v). Diluir

Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS.26.3.6. Solución Tampón pH = 3,2-3,4. En un

matraz aforado de 1 l introducir 150 g de Potasio di-Hidrógeno Fosfato PA-ACS-ISO y 5 ml de Acido

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orto-Fosfórico (d = 1,689) y enrasar con Agua PA-ACS. (Diluir Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISOcon Agua PA-ACS hasta obtener la densidad indi-cada)

26.3.7. Solución de Manganeso Sulfato de 50 g/l.Disolver Manganeso II Sulfato 1-hidrato PA-ACS enAgua PA-ACS.

26.3.8. Piedra Pómez gránulos QP.26.3.9. Potasio Permanganato 0,01 mol/l

(0,05N) SV.26.3.10. Acido Sulfúrico diluido a 1 (v/v). 26.3.11. Solución de Potasio Permanganato 2N.

Disolver Potasio Permanganato PA-ACS-ISO enAgua PA-ACS, ajustar a la concentración indicada ydeterminar el factor.

26.3.12. Solución de Hierro II Sulfato de 40 g por100.

26.3.13. Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV.26.3.14. Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV.26.3.15. Solución de Sodio Tiosulfato 0,02N.

Diluir exactamente 1:5 de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l(0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor.

26.3.16. Almidón soluble RE.

26.4. Procedimiento.26.4.1. Separación de los ácidos cítrico y citro-

málico. Hacer pasar 25 ml del vino a través de lacolumna cambiadora de aniones Dowex 1 x 2 enforma acética a razón de 3 ml cada dos minutos.Lavar la columna con 20 ml de Agua PA-ACS entres veces. Eluir los ácidos con 200 ml de soluciónde Acido Acético 2,5N que se hace pasar por lacolumna a la misma velocidad. En esta fracción deeluido se encuentra, entre otros ácidos, el ácidocitromálico que interesa eliminar.

Eluir los ácidos cítricos y tartáricos haciendopasar a través de la columna 100 ml de SodioHidróxido 2 mol/l (2N) SV y recoger el eluido en elmatraz del aparato de oxidación y destilación des-crito

26.4.2. Oxidación. En el matraz que contiene yael eluido anterior, añadir Acido Sulfúrico diluido al1/5 (unos 20 ml) para llevar el pH a 3,2-3,8, 25 mlde Solución Tampón pH = 3,2-3,4, 1 ml de soluciónde Manganeso II Sulfato y algunos gramos de Pie-dra Pómez gránulos QP. Tapar y conectar el matrazcon el refrigerante, calentando hasta ebullición.Separar los primeros 50 ml destilados.

Colocar Potasio Permanganato 0,01 mol/l(0,05N) SV en el embudo lateral de llave, y verter enel matraz a razón de una gota por segundo, cayen-do en el eluido en ebullición. El destilado se recogeen frasco de 500 ml de tapón esmerilado que con-tiene unos ml de Agua PA-ACS. Continuar la oxida-ción hasta que la coloración parda del líquido acuseun exceso de permanganato.

26.4.3. Separación de la acetona. Si el volumendel destilado es inferior a 90 ml, completar con

Agua PA-ACS hasta este volumen: añadir después4,5 ml de Acido Sulfúrico al 1/3 y 5 ml de una solu-ción de Potasio Permanganato 2N.

Si el volumen del destilado excede de los 90 ml,completar a 180 ml con Agua PA-ACS y utilizar ladosis doble de reactivos.

En estas condiciones (medio Acido Sulfúrico0,5N y Potasio Permanganato 0,1N), el alcohol etíli-co es oxidado a ácido acético y la acetona perma-nece intacta.

Tapar el frasco, dejar en reposo durante 45minutos a la temperatura ambiente. Al cabo de estetiempo se destruye el exceso de permanganato adi-cionando solución de Hierro II Sulfato.

Destilar después y recoger 50 ml aproximada-mente de destilado en un frasco de tapón esmerila-do que contenga 5 ml de Sodio Hidróxido 5 mol/l(5N) SV.

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Figura 26.l

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26.4.4. Valoración de la acetona, añadir al conte-nido del frasco 25 ml de Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV,si la dosis de Acido Cítrico es superior a 0,5-0,6 g/lserá necesario añadir más solución de Yodo, hastaque quede color amarillento que indicará este exce-so. Duplicar o triplicar las dosis de Yodo hasta llegara este punto, pero si la riqueza en Acido Cítrico esmayor de 1,5 g, comenzar otra vez el análisis consólo 10 ml de vino.

Dejar en contacto el Yodo añadido durante 20minutos permaneciendo el frasco tapado. Añadir8 ml de Acido Sulfúrico al 1/5 y valorar el exceso deyodo con Sodio Tiosulfato 0,02N en presencia deAlmidón soluble RE.

Hacer una valoración en blanco en las mismascondiciones sustituyendo los 50 ml de destilado por50 ml de Agua PA-ACS.

26.5. Cálculo.Calcular el contenido en ácido cítrico expresado

en g/l.

V’ - V”Acido cítrico = 0,64 ———— g/l

VV = volumen en ml de la muestra de vino.

V’ = volumen en ml de sodio tiosulfato 0,02N uti-lizado en la valoración en blanco.

V” = volumen en ml de sodio tiosulfato 0,02N uti-lizado en la valoración del yodo en exceso.

26.6. Referencia.26.6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. 0. I. V., A29, 1-3, 1969.

27. SULFATOS

27.1. Principio.Precipitación del bario sulfato en el vino, previa-

mente desprovisto de anhídrido sulfuroso por ebulli-ción al abrigo del aire.

27.2. Material y aparatos.27.2.1. Matraz cónico (Erlenmeyer) de 500 ml,

provisto de ampolla con llave de 100 ml y de des-prendimiento de vapor, atravesando ambos eltapón. El matraz se coloca sobre disco metálico de15 cm de diámetro con abertura circular de 8 cm dediámetro.

27.2.2. Vaso cilíndrico de 400 ml.27.2.3. Baño de agua o plancha caliente a 60°C.

27.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO182108 Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV131074 Agua PA-ACS

131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO

27.3.1. Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV.27.3.2. Bario Cloruro, 100 g de Bario Cloruro 2-

hidrato PA-ACS-ISO en 1.000 ml de Agua PA-ACS.27.3.3. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.

27.4. Procedimiento.27.4.1. Eliminación del anhídrido sulfuroso del

vino. Introducir en el Erlenmeyer del aparato descri-to 50 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de Acido Clorhídri-co 37% PA-ACS-ISO. Hervir esta solución para eli-minar el aire del aparato. Introducir 100 ml del vinopor la ampolla de llave evitando que la ebullición separe durante esta adición. Continuar la ebulliciónhasta reducir el volumen del líquido a unos 100 ml,eliminando así todo el SO2.

27.4.2. Precipitación de Bario Sulfato. Llevar elresiduo de la evaporación anterior a un vaso de400 ml, enjuagando el matraz con la cantidad deAgua PA-ACS suficiente para llevar el volumen totala 200 ml. Añadir 5 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l(2N) y llevar a ebullición. Adicionar gota a gota 10 mlde solución de Bario Cloruro, con la precaución deno parar la ebullición y dejar reposar en caliente,colocando el vaso sobre placa a 60° durante cuatrohoras y en baño de agua hirviendo durante doshoras. En el caso de pequeñas cantidades de preci-pitado, se recomienda un segundo reposo en fríodurante 12 horas. Filtrar por filtro sin cenizas, lavarel vaso y precipitado con Agua PA-ACS calientehasta que no dé reacción con Plata Nitrato PA-ACS-ISO, llevar el filtro cuidadosamente plegado acrisol de porcelana tarado, desecar, calcinar y, des-pués de enfriar en un desecador, pesar.

27.5. Cálculo.Calcular el contenido de sulfatos expresado en

meq/l o en g/l de potasio sulfato con una aproxima-ción de ± 0,05 g/l.

Sulfato = 85,68 P meq/l.

Sulfato = 7,465 P g/l de potasio sulfato.

P = peso de las cenizas en g.

27.6. Referencias.27.6.1. Deibner, P.; Bernard, P. “Industries Ali-

mentaires et Agricoles”, 71: 1, 23 y 5, 427,1954.

27.6.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. 0. I. V., A14, 1-4. 1969.

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28(a). ANHIDRIDO SULFUROSO(Método Paul)

28(a).1. Principio.Liberación de sulfuroso “libre” por acidificación

del vino, arrastre por corriente de aire, oxidación porbarboteo en agua oxigenada neutra y valoracióncon sodio hidróxido del ácido sulfúrico formado.Liberación por ebullición moderada del sulfuroso“combinado”, que queda en el vino después de laextracción del sulfuroso “libre”, y análogo tratamien-to que en la determinación del sulfuroso “libre”. Elsulfuroso “total” es la suma del sulfuroso “libre” y elsulfuroso “combinado”. Puede determinarse acidifi-cando el vino y calentando y procediendo como enlos dos casos anteriores.

28(a).2. Material y aparatos.Utilizar el aparato representado en la figura

28(a).I.28(a).2.1. Matraz de 100 ml o de 250 ml.28(a).2.2. Tubo barbotador provisto de bola hue-

ca en un extremo con unos 20 orificios de 0,2 mmde diámetro alrededor del círculo máximo hori-zontal.

28(a).2.3. Refrigerante que condense vapores ydeje pasar el gas en recorrido seguro.

28(a).2.4. Frasco con agua y con tapón atrave-sado por el tubo que comunica con el barbotadorpara hacer vacío, y otro tubo sumergido en el aguapara acusar la intensidad del vacío por la depresiónde la columna de agua en el interior del tubo,depresión que debe mantenerse entre 20-30 cm.

El gasto de vapor será de 40 l/h.28(a).2.5. Baño de agua regulable a 10°C.

28(a).3. Reactivos.131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS251170 Azul de Metileno (C.I. 52015) DC121085 Etanol 96% v/v PA141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)

PRS171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV

28(a).3.1. Acido Fosfórico aI 25% (p/v). Diluirconvenientemente Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.

28(a).3.2. Hidrógeno Peróxido de 0,3 volúmenes

59

M

Figura 28(a).I. Las dimensiones están indicadas en mm. Los diámetros interiores de los cuatro tubos con-céntricos que constituyen el refrigerante son 45, 34, 27 y 10 mm

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por 100. Diluir convenientemente Hidrógeno Peróxi-do 30% p/v (100 vol.) PRS con Agua PA-ACS.

28(a).3.3. Sodio Hidróxido 0,01N. En un matrazaforado diluir a 1:10, Sodio Hidróxido 0,1 mol/l(0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factorde la solución obtenida 0,01N.

28(a).3.4. Indicador. Mezclar 100 mg de Rojo deMetilo (C.I. 13020) RE-ACS, 50 mg de Azul de Meti-leno (C.I. 52015) DC y 100 ml de Etanol de 50°.Diluir convenientemente Etanol 96% v/v PA conAgua PA-ACS.

28(a).4. Procedimiento.28(a).4.1. Análisis del anhídrido sulfuroso libre.

En el matraz de 100 ml del aparato poner 10 ml delvino y añadir 5 ml de Acido Fosfórico al 25%, colo-cando acto seguido el matraz en su sitio. Si la rique-za en SO2 del vino es pequeña, se emplea el matrazde 250 ml y se ponen 20-25 ml de vino.

Sumergir el matraz en un baño de agua a 10°C.Colocar 2-3 ml de Hidrógeno Peróxido de 0,3

volúmenes y dos gotas del reactivo Indicador en elbarbotador y neutralizar el Hidrógeno Peróxido conSodio Hidróxido 0,01N.

Adaptar el barbotador al aparato y hacer barbo-tar el aire (o nitrógeno) durante 12-15 minutos.Arrastrar el anhídrido sulfuroso libre y después oxi-dar a H2SO4. Retirar el barbotador y valorar el ácidoformado con solución de Sodio Hidróxido 0,01N.

28(a).4.2. Análisis del anhídrido sulfuroso combi-nado. Después de terminar la valoración del anhídri-do sulfuroso libre, colocar en el barbotador ya lim-pio, los 2-3 ml de Hidrógeno Peróxido neutralizadoy con las dos gotas del indicador. Calentar con lla-ma pequeña hasta llevar a la ebullición el vino quequedó en el matraz despojado del anhídrido sulfuro-so libre por la determinación anterior. Aplicar el fue-go directo sobre el fondo del matraz, que des-cansará sobre chapa metálica perforada con orificiode 30 mm de diámetro, para evitar la pirogenaciónde las materias extractivas del vino sobre las pare-des del matraz. Mantener el paso del aire o nitróge-no durante la ebullición, que durará 12-15 minutos,tiempo que se considera suficiente para arrastrartodo el sulfuroso combinado, y después oxidarlo.

Continuar como en 28(a).4.1 a partir de “Colocar2-3 ml de Hidrógeno Peróxido...”.

28(a).4.3. Anhídrido sulfuroso total. Puededeterminarse por la suma anhídrido sulfuroso libremás anhídrido sulfuroso combinado, pero tam-bién puede determinarse directamente, actuandodesde un principio con corriente de aire y concalor.

28(a).5. Cálculo.Calcular el contenido en anhídrido sulfuroso

expresado en mg/l con una aproximación de10 mg/l.

Anhídrido sulfuroso = 32 V mg/l.

V = volumen en ml de sodio hidróxido 0,01N.

28(a).6. Observaciones.Para vino sensiblemente picado (con más de

2 g/l de acidez acética) puede arrastrarse con elanhídrido sulfuroso, ácidos volátiles, especialmentecuando la corriente de aire es intensa.

Corregir determinando la acidez volátil presenteen el líquido del barbotador, operando de la siguien-te forma:

Después de la neutralización con el sodio hidró-xido al valorar la acidez, añadir un cristal de 131066Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO y llevar el conteni-do del barbotador al aparato de determinación de laacidez volátil por destilación en corriente de vapor.Restar despues del resultado anterior la parte deacidez correspondiente a los ácidos volátiles.

28(a).7. Referencias.28(a).7.1. Paul, F. “Mitteilungen Klosternenberg”,

A: 8, 21, 1958.28(a).7.2. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. O. I. V., A17, 1-8, 1969.

28(b). ANHIDRIDO SULFUROSO(Método Ripper doble)

28(b).1. Principio.Valoración yodométrica del SO2operando direc-

tamente con el vino.Para evitar el error introducido por la recombina-

cion del sulfuroso liberado de su combinación conlos aldehídos, durante la valoración volumétrica, sehace una segunda valoración, después de nuevaliberación del SO2 recombinado.

28(b).2. Material y aparatos.28(b).2.1. Erlenmeyer de 500 ml y material para

una volumetría.

28(b).3. Reactivos.Acetaldehído

131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO(Acido EDTA Na2 2-hidrato)

131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121428 Mercurio II Yoduro rojo PA182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV

28(b).3.1. Sodio Hidróxido 4N. En un matrazaforado diluir a 4:5, Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SVcon Agua PA-ACS y determinar el factor de la solu-ción 4N obtenida.

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28(b).3.2. Acido Sulfúrico al 1/10 en volumen(180 g/l). Diluir convenientemente Acido Sulfúrico96% PA-ISO con Agua PA-ACS.

28(b).3.3. Engrudo de almidón preparado de lasiguiente forma:

Pesar 2,5 g de Almidón soluble RE y triturarlo enun mortero junto con 10 mg de Mercurio II Yodurorojo PA. Llevar a un vaso y añadir un volumen deAgua PA-ACS suficiente para poder hervir la sus-pensión con fluidez. Llevar después ésta a matrazcon 1 litro de Agua PA-ACS en ebullición, que semantiene durante 10 minutos. El líquido obtenidoestará limpio y si es necesario se filtra.

28(b).3.4. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.28(b).3.5. Sodio Tiosulfato 0,01N. En un matraz

aforado diluir a 1:5, Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l(0,05N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factorde la solución 0,01N obtenida.

28(b).3.6. Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 2-hidrato PA-ACS-ISO.

28(b).4. Procedimiento.Colocar en el Erlenmeyer de 500 ml, 50 ml del

vino, 3 ml de Acido Sulfúrico al 1/10, 5 ml de Engru-do de Almidón y 30 mg de Acido Etilendiaminote-traacetico Sal Disodica 2-hidrato PA-ACS-ISO (conel fin de evitar la oxidación del SO2 libre durante lavaloración).

Homogeneizar la solución y añadir con buretaYodo 0,025 mol/l (0,05N) SV hasta coloración azuldel almidón, que primero será fugaz, y netamentepersistente después, durante 10-15 segundos,considerándola entonces aceptable. Sea V el volu-men del yodo empleado.

Añadir 8ml de solución de Sodio Hidróxido 4N,agitar una sola vez y dejar en contacto durante 5minutos. Después verter, de un solo golpe y agitan-do enérgicamente, 10 ml de Acido Sulfúrico a 1/10.

Se valora inmediatamente con Yodo 0,025 mol/l(0,05N) SV el SO2 liberado. Sea V’ el volumen en mlde solución de yodo empleado.

Se añade después 20 ml de Sodio Hidróxido4N, se deja en contacto durante 5 minutos despuésde haber agitado una sola vez. Se diluye con 200 mlde Agua PA-ACS bien fría, agitar después enérgica-mente y añadir 30 ml de Acido Sulfúrico al 1/10 yvalorar con Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV el SO2 libe-rado. Sea V” el volumen en ml de la solución deyodo empleado.

Con estas valoraciones se corrige el error quepuede originarse por la recombinación de parte delSO2 ya liberado de los aldehídos, con el mismoaldehído que estará presente en el líquido que sevalora.

También es posible causa de error, y especial-mente cuando se trate de vinos tintos ricos en colory extractos, el consumo de yodo por estas sustan-cias; para corregir este error se opera de la manerasiguiente:

Adicionar a 50 ml del vino, colocados en unErlenmeyer de 300 ml, un exceso de Acetaldehídopara que sea capaz de combinarse con todo el SO2libre; dicha cantidad puede ser de unos 5 ml desolución de Acetaldehído, de 7 g por litro. Se tapael matraz y después de un reposo de 30 minutos,como mínimo, se añaden 3 ml de Acido Sulfúricodiluido al 1/10 y después los de Yodo 0,025 mol/l(0,05N) SV necesarios hasta el viraje de almidón.Sea V’’’ el volumen en ml necesarios.

La presencia de ácido ascórbico también puedeser causa de error. Descontar el yodo correspon-diente, considerando que 1 ml de Yodo 0,025 mol/l(0,05N) SV es consumido por 4,4 mg de ácidoascórbico.

28(b).5. Cálculo.SO2 libre = 32 (V - V’’’) mg/l.SO2 combinado = 32 (V’ + V”) mg/l.SO2 total = 32 (V + V’ + V” - V’’’) mg/l.Con aproximación de 10 mg/l.

28(b).6. Observaciones.Para vinos pobres en SO2, es conveniente

emplear yodo más diluido, solución 0,02N, reem-plazando entonces el coeficiente 32 por el de 12,8en los cálculos.

En los vinos tintos es conveniente, para apreciar elviraje, iluminar con luz amarilla el fondo del Erlenmeyerdonde está el vino. Hay dispositivos sencillos abase de simple bombilla con filtro preparado consolución de potasio cromato, o bien con luz amarillade lámpara de vapor de sodio.

Cuando haya un interés especial en la determi-nación del SO2 libre, debe dejarse la muestra enreposo durante 4 días, al abrigo del aire y a tempe-ratura de 20°C. El análisis se realizará también a20ºC.

28(b).7. Referencias.28(b).7.1. Jaulmes, P. y Dienziede. “Méthode

Ripper double d’analyse de SO2. Bol.”. O. I. V., 274.52-54, 1959.

28(b).7.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O. I. V., A17, 7. 1969.

29. ACIDO SORBICO

29.1. Principio.El ácido sórbico arrastrado por el vapor de agua

(constante de volatilidad 0,59), se valora en el desti-lado por espectrofotometría en el ultravioleta.

29.2. Material y aparatos.29.2.1. Espectrofotómetro ultravioleta y cubetas

de cuarzo de 1 cm de espesor.

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M

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29.2.2. Matraces aforados de 20 ml y de 1 litro.29.2.3. Pipetas de 0,5 ml y 1,5 ml.

29.3. Reactivos.141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX

(o 121531 Potasio Sorbato PA)131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO121638 Sodio Hidrógeno Carbonato PA

29.3.1. Solución (a) (destinada a catalizar la oxi-dación del ácido sulfuroso por el aire). Mezclar 0,5 gde Sodio Hidrógeno Carbonato PA con 0,001 g deCobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y añadirAgua PA-ACS hasta 1.000 ml.

29.3.2. Solución (b) de Acido Sórbico (USP-NF)PRS-CODEX de 20 mg/l. Introducir 20 mg de AcidoSórbico (USP-NF) PRS-CODEX en un matraz afora-do de 1 litro que contenga 900 ml de Agua PA-ACScaliente, agitar, dejar enfriar y enrasar a 1 litro.

En vez de Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEXpuede emplearse 26,8 mg de Potasio Sorbato PA.

29.4. Procedimiento.Destilar como en 21.4, 20 ml de vino adicionado

de 1-2 g de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO.Recoger 320-330 ml de destilado para conseguir lamás completa extracción del Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX, que requiere unos 100 ml másque los necesarios para la acidez volátil.

Tomar 5 ml del destilado, colocar en un matrazaforado 20 ml y enrasar con la solución (a).

Llenar con esta mezcla una cubeta de cuarzo de1 cm de espesor. Dejar la cubeta al aire duranteunos minutos. Determinar la absorbancia a 256 nm.Para la prueba en blanco, sustituir los 5 ml de desti-lado por 5 ml de Agua PA-ACS.

Para obtener la curva patrón, determinar laabsorbancia de soluciones que contengan 0,5, 1,2,5 y 5 mg/l de Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX obtenidas diluyendo con Agua PA-ACS lasolución (b). La gráfica correspondiente a estosvalores es una línea recta.

29.5. Cálculo.Calcular el ácido sórbico expresado en mg/l.

Acido sórbico = 0,2 . C . V mg/l.

C = contenido en mg/l de ácido sórbico determi-nado por comparación con curva patrón.

V = volumen en ml de destilado.

29.6. Referencias.29.6.1. Jaulmes, P.; Mestres, R. y Mandrou, B.

“Annales des Falsifications et de l’Expertise Chimi-que”, 111, 1961.

29.6.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O. I. V., A30, 1-3, 1969.

30. CLORUROS

30.1. Principio.Determinación directa de cloruros por potencio-

metría utilizando el electrodo Ag/AgCl.30.2. Material y aparatos.30.2.1. pH-metro con escala que permita apre-

ciar 2mV.30.2.2. Agitador magnético.30.2.3. Electrodo Ag/AgCl, con una solución

saturada de potasio nitrato como electrolito.30.2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml.

30.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO

Potasio Cloruro (máx. 0,005% de Br)

30.3.1. Solución patrón de cloruros.- Disolver2,1027 g de Potasio Cloruro (máx. 0,005% de Br)puro para análisis (máximo 0,005% de bromo) pre-viamente desecado, en Agua PA-ACS hasta 1 litro.1 ml de esta solución contiene 1 mg de ion Cloro.

30.3.2. Solución de Plata Nitrato.- Disolver4,7912 g de Plata Nitrato PA-ACS-ISO en una solu-ción al 10% v/v de Etanol 96% v/v PA en Agua PA-ACS, hasta un litro. 1 ml de esta solución corres-ponde a 1 mg de ion Cloro.

30.3.3. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.

30.4. Procedimiento.30.4.1. Determinación del potencial del punto de

equivalencia.Introducir 5,0 ml de la solución patrón de cloru-

ros en un vaso de 150 ml.Diluir aproximadamente a 100 ml con Agua PA-

ACS y acidificar con 1,0 ml de Acido Nítrico 70%PA-ACS-ISO (30.3.3). Introducir los electrodos.Añadir 10 ml de la solución de Plata Nitrato, agitan-do moderadamente: adicionar los cuatro primerosml en fracciones de 1 ml y leer las correspondienteslecturas en milivoltios; los dos siguientes ml, enfracciones de 0,2 ml y continuar adicionando enfracciones de 1 ml hasta que se hayan alcanzadoun total de 10 ml. Después de cada adición esperarunos treinta segundos antes de hacer la correspon-diente lectura en milivoltios. Llevar los valores asíobtenidos sobre un papel milimetrado en funciónde los correspondientes ml de solución de PlataNitrato y a partir del punto singular de la curvaobtenida determinar el potencial del punto de equi-valencia.

Para comprobar el potencial del punto de equi-valencia, llevar a un vaso de 150 ml, 5,0 ml de la

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solución patrón de cloruros, 95 ml de Agua PA-ACSy 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO. Introducirel electrodo y valorar agitando, justamente hasta elpotencial del punto de equivalencia.

Repetir esta operación hasta obtener una buenaconcordancia de resultados. Este control debeefectuarse antes de determinar la concentración decloruros en cada serie de muestras a analizar.

30.4.2. Determinación.Llevar a un vaso de 150 ml, 50,0 ml de vino.

Añadir 50 ml de Agua PA-ACS y 1,0 ml de AcidoNítrico 70% PA-ACS-ISO. Valorar a continuaciónsiguiendo el procedimiento descrito anteriormentehasta alcanzar el potencial del punto de equiva-lencia.

30.5. Cálculo.La cantidad de cloruros se determina mediante

las expresiones:

0,02 n en g de ion cloro.0,5633 n en miliequivalentes por litro de ion clo-

ro.0,0329 n en g de sodio cloruro por litro.Siendo:n = volumen, en ml, de solución de plata nitrato

necesario para alcanzar el potencial del punto deequivalencia.

30.6. Referencia.30.6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. O. I. V. A 15j.

31. ACIDO BENZOICO

31.1. Principio.Extracción por el éter del ácido benzoico pre-

sente en el vino. Tratamiento del extracto por lamezcla nitro-sulfúrica y formación del ácido 3,5-dinitrobenzoico, que es extraído con éter y despuésrecogido por la mezcla acetona-alcohol. La adiciónde sodio hidróxido da origen a una coloración viole-ta. Esta reacción es sensible, específica y cuantitati-va, siempre que se opere en condiciones que ase-guren la transformación del ácido benzoico encompuesto coloreado medible en el espectrofotó-metro a 570 nm.

31.2. Material y aparatos.31.2.1. Espectrofotómetro que permita lecturas

a 570 nm.31.2.2. Ampolla de decantación de 250 ml.31.2.3. Matraces de 100 ml aforados.31.2.4. Cápsulas.31.2.5. Baño de agua.31.2.6. Matraces aforados de 50 ml.31.2.7. Erlenmeyer de 50 ml.

31.3. Reactivos.131007 Acetona PA-ACS-ISO121014 Acido Benzoico PA131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS121086 Etanol absoluto PA121085 Etanol 96 v/v PA132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm

de BHT PA-ACS-ISO131524 Potasio Nitrato PA-ISO131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO

31.3.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppmde BHT PA-ACS-ISO.

31.3.2. Mezcla Acetona-Etanol: Mezclar 1.000 mlde Acetona PA-ACS-ISO con 1.000 ml de Etanolabsoluto PA.

31.3.3. Mezcla Nitro-Sulfúrico: Añadir a 10 g dePotasio Nitrato PA-ISO, 100 ml de Acido Sulfúrico96% PA-ISO.

31.3.4. Solución Sodio Hidróxido-Etanol al 5%.Añadir a 5 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO (sin Na2CO3) 50 ml de Agua PA-ACS.

Después de fría la mezcla se añade Etanol 96%v/v PA hasta 100 ml.

La solución debe quedar limpia.

31.4. Procedimiento.Vinos secos o con riqueza en azúcar de 100 g/l. Añadir a 10 ml de vino puestos en ampolla de

decantación 2 ml de Acido Sulfúrico al 25% y 25 mlde Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHTPA-ACS-ISO, dos veces seguidas. Decantar y filtrarel Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHTPA-ACS-ISO, por papel seco, llevarlo a matraz afo-rado de 50 ml y enrasar.

Poner 20 ml de la solución de Eter Dietílico enErlenmeyer de 50 ml, evaporar aspirando los vapo-res mediante vacío, permaneciendo el Erlenmeyersumergido en baño de agua fría. Añadir al residuo5 ml de la mezcla Nitrosulfúrica cuidando de empa-par bien todo el residuo. Llevar después al baño deagua hirviendo durante 35 minutos y agitando decuando en cuando, sobre todo al principio.

Enfriar en agua fría, añadir 5 ml de Agua PA-ACS, seguir enfriando y verter el contenido en unaampolla de decantación de 250 ml. Enjuagar elErlenmeyer con 5 ml de Agua PA-ACS, volver a ver-ter el contenido en la ampolla y añadir 30 ml de EterDietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO. Agitar cinco minutos. Eliminar la fase acuosadespués de cuidadosa decantación y lavar el EterDietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO con 5 ml de Agua PA-ACS. Decantar con cui-dado (un lavado más prolongado originaría pérdidasde dinitrobenzoico en la fase acuosa, por lo que espreferible decantar bien, que volver a lavar).

Filtrar el Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm

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de BHT PA-ACS-ISO por filtro revestido con SodioSulfato anhidro PA-ACS-ISO, lavar el filtro en segui-da con 10 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6ppm de BHT PA-ACS-ISO. Evaporar el filtrado enuna pequeña cápsula a 35°, arrastrar con tres adi-ciones de 5 ml de Acetona-Etanol, cada vez (previa-mente enfriado en nevera). Recoger todos estoslíquidos en un tubo de ensayo de tapón esmeriladoy aforado a 15 ml.

En un tubo de ensayo de tapón esmerilado ycon trazo de aforo a 15 ml, poner de 0,5 a 5 ml dela anterior solución. Este volumen debe variar con lariqueza supuesta, para obtener la reacción colorea-da con el ácido dinitrobenzoico originado por 0,1 a0,5 mg de Acido Benzoico PA. El método es válidoentre 0,03 y 1 mg, si se utiliza aparato capaz demedir absorbancias superiores a 1,5.

Diluir el volumen de líquido puesto en el tubo,con la mezcla Acetona-Etanol fría, hasta 14,7 ml yañadir después 0,3 m Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO diluido al 5% en Agua PA-ACS, agitar ysumergir en hielo fundente.

Hacer la determinación en cubeta de 1/2-1 cm a570-580 nm después de 30 minutos y antes de 70minutos a partir del momento de la mezcla.

Utilizar como solución compensadora para com-paración una mezcla de 14,5 de Acetona-Etanolcon 0,3 ml de Sodio Hidróxido al 5%.

Para obtener la curva patrón, preparar una solu-ción valorada de 50 mg de Acido Benzoico PA en100 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm deBHT PA-ACS-ISO. Diluir esta solución a 1/10 conEter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO y tratar 10 ml de esta solución de 50 mgpor litro, como se ha indicado antes para la mues-tra.

La densidad de óptica varía linealmente con lacantidad de Acido Benzoico.

31.5. Cálculo.Llevar la absorbancia obtenida a la curva patrón

y expresar el correspondiente contenido de ácidobenzoico en mg/l.

31.6. Referencia.31.6.1. Spanyar, E,; Kerel, E. y Kiszel, M.

“Zeitschrift für Lebenmittel Untersuchung und Fors-chung”, 1958.

32. BROMO TOTAL

32.1. Principio.Saponificación cuidadosa, para evitar pérdidas,

de los ésteres del ácido brómico, eventualmentepresentes en el vino, transformación del rojo defenol en azul de bromofenol, y valoración colorimé-trica o espectrofotométrica.

32.2. Material y aparatos.32.2.1. Cápsula de sílice de 7 cm de diámetro.32.2.2. Baño de agua.32.2.3. Horno eléctrico, recomendable con

regulador automático, para regular a 525°.32.2.4. Espectrofotómetro o colorímetro capa-

ces para lectura a 584 nm.

32.3. Reactivos.182119 Acido Acético 2 mol/l (2N) SV131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS211234 Calcio Oxido natural escoriforme QP142323 Cloramina T 3-hidrato (BP, F. Eur.)

PRS-CODEX121489 Potasio Bromuro PA171615 Rojo de Fenol RE-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV131721 Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO

32.3.1. Solución de Sodio Hidróxido al 50%.Disolver Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO enAgua PA-ACS.

32.3.2. Lechada de Cal 4N (224 g de Calcio Oxidonatural escoriforme QP por litro con Agua PA-ACS).

32.3.3. Solución de Rojo de Fenol. Mezclar 0,24 gde Rojo de Fenol RE-ACS y 24 ml de Sodio Hidróxi-do 0,1 mol/l (0,1N) SV. Añadir Agua PA-ACS hasta1.000 ml.

32.3.4. Solución Tampón pH = 4,65. Mezclar500 ml de Acido Acético 2 mol/l (2N) SV, 250 ml deSodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV y 250 mI de AguaPA-ACS.

32.3.5. Solución oxidante. A 2 g de Cloramina T3-hidrato (BP, F. Eur.) PRS-CODEX añadir Agua PA-ACS hasta un litro.

Preparar esta solución 48 horas antes de suempleo y sólo será válida hasta quince días.

32.3.6. Solución reductora. Añadir a 25 g deSodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO AguaPA-ACS hasta un litro.

32.3.7. Solución valorada de Potasio Bromuro.Añadir a 1,489 g de Potasio Bromuro PA Agua PA-ACS hasta un litro.

Esta solución contiene 1 g de Bromuro por litro.En el momento de su empleo se hacen dos dilucio-nes sucesivas a 1/10 y se tendrá la solución a em-plear que contiene 10 microgramos de Bromo por ml.

32.4. Procedimiento.Adicionar 0,5 ml de Sodio Hidróxido al 50% y

1 ml de Lechada de Cal 4N a 50 ml del vino coloca-dos en una cápsula de cuarzo de 7 cm de diámetro.Esta adición proporciona un soporte infusible quepermite una buena combustión del carbón. Si el vinoes muy ácido conviene añadir antes sodio hidróxidopara llevarlo a pH 10 por lo menos.

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Si el vino contiene compuestos orgánicos debromo o antisépticos bromados, dejar por lo menos24 horas la muestra de vino alcalinizada, tapando lacápsula con un vidrio de reloj, con el fin de saturarlos ésteres del ácido bromoacético, que son muyvolátiles.

Evaporar el líquido de la cápsula en baño deagua, calentar el residuo con pequeña llama o enbaño de arena para eliminar las últimas trazas deagua. Incinerar hasta cenizas blancas en el hornoeléctrico regulado a 525°C, sin pasar de esta tem-peratura para evitar pérdidas por sublimación.

Para facilitar la obtención de cenizas blancas,retirar la cápsula después de 15 minutos de incine-ración, dejar enfriar y humedecer las cenizas aún gri-sáceas con unas gotas de Agua PA-ACS, evaporary volver al horno, repitiendo esta operación lasveces necesarias hasta conseguir cenizas blancas.

Añadir a las cenizas 5 ml de Agua PA-ACShirviendo y remover con una varilla, llevar a pH 4,6-4,5 con Acido Sulfúrico diluido 1:10 y ajustar conAcido Sulfúrico diluido a 1/100 y completar conAgua PA-ACS hasta 10 ml.

Para calcular la cantidad de Agua PA-ACS a aña-dir, tomar el volumen final igual a 10,2 ml, por consi-derar el aumento de volumen Agua PA-ACS másAcido Sulfúrico, equivalente a 0,2 ml, que habrá sidoarrastrado en la precipitación de los 334 mg de Cal-cio Sulfato hidratado, formado al reaccionar partedel Acido Sulfúrico con la Lechada de Cal 4N aña-dida.

Las restantes causas de pequeña variación devolumen (como las del H2SO4 al pasar a Na2SO4 yK2SO4), se consideran sin sensible influencia.

Triturar con varilla de vidrio el calcio sulfato preci-pitado y remover bien.

Diluir, si es necesario, la solución de cenizas has-ta un contenido en bromo del vino de 1 mg/l, aproxi-madamente. Para comprobar cualitativamente si elcontenido en bromo del vino es superior o inferior a1 mg/l, tomar 1 ml de la solución de cenizas delvino, poner en tubo de ensayo y añadir una gota desolución tampón pH 4,65, una gota de soluciónRojo de Fenol y una gota de solución Cloramina T.Después de un minuto exactamente, detener lareacción añadiendo una gota de solución de SodioTiosulfato. Si la solución es amarilla, amarillo-pardao amarillo-verdosa, el contenido en bromo es apro-ximadamente inferior a 1 mg/l, y si es azul, violeta ovioleta fugaz, el contenido en bromo es superior a1 mg/l, siendo necesario diluir la solución.

Decantar el líquido y trasvasar a un tubo deensayo.

Poner en tubo de ensayo 5 ml de la solución decenizas y añadir 0,25 ml de Solución Tampón,0,25 ml de Rojo de Fenol y 0,25 ml de Cloramina T.

Después de un minuto exactamente, paralizar lareacción con 0,25 ml de solución de Sodio Tiosulfa-to 5-hidrato PA-ACS-ISO. Determinar la absorban-

cia con fotocolorímetro o espectrofotómetromediante medida a 584 nm.

Para obtener la curva patrón, tomar la soluciónde Potasio Bromuro con 10 mg de Bromo por litro,alícuotas de 0,25; 0,50; 0,75; 1,00; 1,25; 1,50; 2,00y 2,50 ml y llevar a 5 ml con Agua PA-ACS.

El contenido en bromo de estas soluciones es,respectivamente, 0,5; 1; 1,5; 2,0; 2,5; 3; 4 y 5 mg/l.

Tratar cada una de estas soluciones de 5 mlcomo la solución de cenizas y hacer las correspon-dientes determinaciones en el espectrofotómetro a584 nm.

32.5. Cálculo.Calcular el contenido en bromo expresado en

mg/l mediante comparación con la correspondientecurva patrón y teniendo en cuenta el factor de dilución.

32.6. Referencias.32.6.1. Jaulmes, P., y Bruns, S. “Valoration du

brome dans les vins”. Annales des Falsifications etde Fraudes. 1952.

32.6.2. Saldoval, J. A., e Hidalgo, T. “Medidaespectrofotométrica de reacciones coloreadas muyfugaces”. Boletín I. N. I. A. 19, 60, 40.

33. BROMO ORGANICO

33.1. Principio.El coeficiente de dilución del ácido monobromo-

acético entre el éter y el agua acidulada con ácidosulfúrico (que anula la ionización) es próximo a 5.Los ésteres del ácido monobromoacético sonmenos solubles en el agua que el mismo ácido, porlo que es más fácil su extracción por el éter. Treslavados con un volumen de éter igual al del vino sonsuficientes para extraer todo el bromo orgánico.

33.2. Material y aparatos.33.2. (1; 2; 3 y 4) como 32.2. (1; 2; 3 y 4).33.2.5. Ampollas de decantación de 50 y

500 ml.

33.3. Reactivos.182119 Acido Acético 2 mol/l (2N) SV131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO181061 Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV131074 Agua PA-ACS211234 Calcio Oxido natural escoriforme QP142323 Cloramina T 3-hidrato (BP, F. Eur.)

PRS-CODEX132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm

de BHT PA-ACS-ISO121489 Potasio Bromuro PA171615 Rojo de Fenol RE-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%

PA-ACS-ISO181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV

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182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV131721 Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-

ISO

33.3. (1; 2; 3; 4; 5; 6 y 7) como 32.3. (1; 2; 3; 4;5; 6 y 7).

33.3.8. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO

33.4. Procedimiento.Colocar en una ampolla de decantación 20-200 ml

de vino (según la riqueza supuesta), añadir 5 g deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO por litro de vino, seañade después un volumen de Eter Dietílico estabi-lizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO igual alvolumen de vino, agitar y decantar cuidadosamenteel Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHTPA-ACS-ISO. Repetir tres veces esta operación. Fil-trar el Eter Dietilico estabilizado con p6 ppm deBHT PA-ACS-ISO, evaporar en frío en cápsula decuarzo que contenga 0,5 ml de Sodio Hidróxido al50% y 1 ml de Lechada de Cal 4N. Después deunas 24 horas de saponificación de los ésteres,durante las que permanece la cápsula tapada conun vidrio de reloj, incinerar progresivamente el resi-duo a la temperatura de 550°C. Arrastrar y disolverlas cenizas como en 32, realizando también en igualforma la valoración colorimétrica del bromo.

33.5. Cálculo.Calcular el contenido en bromo expresado en

mg/l a partir de la correspondiente curva patrón.

34. ACIDOS MONOBROMOACETICO YMONOCLOROACETICO DE ORIGENORGANICO(Método cualitativo) (Provisional)

34.1. Principio.Siendo fraudulenta la presencia de compuestos

orgánicos monohalogenados, es suficiente parainvestigar el fraude un análisis cualitativo.

Extracción de compuestos monohalogenadosen medio ácido con éter y transformación por adi-ción de amonio en glicocola y sal de amonio porcombinación del halógeno desplazado. Separacióncromatográfica y revelado con plata nitrato, obte-niéndose una mancha blanca para la plata cloruro yotra negra para la plata bromuro.

34.2. Material y aparatos.34.2.1. Frascos de tapón esmerilado que ajuste

perfectamente, de 500 ml de capacidad.34.2.2. Ampolla de decantación de 250 ml.34.2.3. Agitador mecánico de unas 150 agita-

ciones por minuto.34.2.4. Papel Watman número 1 para cromato-

grafía.34.2.5. Pipetas, micropipetas de 0,2 ml capila-

res divididas en milésimas.

34.2.6. Secador de aire.34.2.7. Campana o recipiente para cromatogra-

fía y accesorios.34.2.8. Pulverizador todo de vidrio y pulveriza-

ción fina.34.2.9. Campana de luz infrarroja.

34.3. Reactivos.131007 Acetona PA-ACS-ISO121050 Acido Pirogálico PA131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS121118 Amonio Bromuro PA131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO121129 Amoníaco 25% (en NH3) PA121085 Etanol 96% v/v PA131313 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm

de BHT PA-ACS-ISO131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO

34.3.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppmde BHT PA-ACS-ISO

34.3.2. Solución de Acido Sulfúrico: solución enAgua PA-ACS al 1/3 en volumen.

34.3.3. Amoníaco 25% (en NH3) PA (sin cloru-ros).

34.3.4. Mezcla Acetona PA-ACS-ISO-AguaPA-ACS en la proporción 100/20 en volumen.

34.3.5. Revelador de Plata Nitrato. Mezclar85 mg de Plata Nitrato PA-ACS-ISO, 1 ml de AguaPA-ACS, 5 ml de Amoníaco 25% (en NH3) PA y Eta-nol 96% v/v PA hasta 200 ml.

34.3.6. Revelador de Acido Pirogálico. Disolver13 mg de Acido Pirogálico PA en 200 ml de Etanol96% v/v PA. La solución puede durar tres días si seconserva fría y al abrigo de la luz.

34.3.7. Solución testigo de Cloro. Disolver 100mg de Amonio Cloruro PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS y enrasar a 1.000 ml.

34.3.8. Solución testigo de Bromo. Disolver100 mg de Amonio Bromuro PA en Agua PA-ACS yenrasar a 1.000 ml.

34.4. Procedimiento.34.4.1. Extracción del compuesto halogenado.

Tomar 100 ml de vino, llevar el matraz de 500 mlcon tapón esmerilado, añadir 5 ml de Acido Sulfúri-co 1/3 y, acto seguido, 100 ml de Eter Dietílicoestabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO.Agitar brevemente hasta formación de ligera emul-sión, destapar unos momentos el frasco y observarla facilidad de separación.

A veces, como especialmente sucede con vinode prensa, la separación es difícil, siendo necesarionueva adición de Acido Sulfúrico 1/3 y de Eter Dietí-lico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO.Observar si hay facilidad de separación y llevarel frasco a un agitador mecánico, agitando durantetres horas. Poner en ampolla de decantación de

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250 ml de capacidad con el fin de separar el vino dela fracción etérea; eliminar el Eter Etílico por com-pleto filtrando rápidamente por ligera capa de al-godón.

Añadir inmediatamente 10 ml de Amoníaco 25%(en NH3) PA, agitar fuertemente durante tres minu-tos, con el fin de iniciar la formación del aminoácidocorrespondiente (glicocola) y evitar la de otros com-puestos. En este momento se forma la sal de amo-nio por combinación del halógeno desplazado.Dejar reposar 24 horas para que la reacción seacompleta y proceder a la cromatografía.

34.4.2. Análisis cromatográfico.- Depositar conmicropipeta sobre papel Whatman número 1 paracromatografía (28 x 15 cm) a lo largo de una líneaparalela al borde inferior y situada a 2,5 cm de esteborde, 0,02 ml de soluciones testigo de Cl y de Br, yde 0,02 a 0,06 ml, según el contenido en halogena-do, de las muestras de vino, separando cada apli-cación 2 cm por lo menos. Enrollar el papel y colo-car en el fondo de la cubeta con el disolvente y en lacámara o campana de cromatografía.

Retirar el papel de la cubeta cuando el frentedel líquido ascendente se encuentre a 1 cm delborde superior del papel, y dejar secar. Pulverizarcon la solución de Plata Nitrato y, estando húmedoel papel, pulverizar nuevamente con solución deAcido Pirogálico. Para mayor uniformidad del reve-lado, conviene desecar el papel con lámpara infra-rroja.

La mancha correspondiente al Cl es de colorblanco y tiene un Rf de 0,29, y la mancha corres-pondiente al Br es de color marrón y tiene un Rf de0,59.

34.5. Referencia.34.5.1. Morales, J., y Vega, R. “Comunicación

de los Métodos Internacionales de Análisis”. O. I. V.,número 245, 1967.

35. INDICE DE PERMANGANATO

35.1. Principio.Valoración con una solución de permanganato

del poder reductor en frío de las sustancias polife-nólicas del vino. Como todos los componentesfenólicos del vino, a igual concentración no reducenla misma cantidad de permanganato, se trata deuna valoración global que da un índice, al que sedenomina “índice de permanganato”; I Mn.

Constituye una expresión del contenido en sus-tancias fenólicas que están en relación con loscaracteres gustativos de dureza, astringencia oaterciopelado sin que la relación sea absoluta. Esuna determinación especial para vinos tintos; enblancos es poco apreciable y se presta a confusio-nes por consumo de permanganato por otros com-ponentes del vino, que aquí tiene una influenciarelativa más marcada.

35.2. Material y aparatos.Los elementos necesarios para una volumetría.

35.3. Reactivos.131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS251246 Carmín de Indigo (C.I. 73015) DC121085 Etanol 96% v/v PA121515 Potasio Hidróxido lentejas 85% PA181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l

(0,1N) SV

35.3.1. Solución de Potasio Permanganato0,01N. Se conserva mal. Preparar a partir de Pota-sio Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV. En unmatraz aforado diluir a 1:10, Potasio Permanganato0,02 mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS y determi-nar el factor de la solución 0,01N obtenida.

35.3.2. Indicador de Indigo. Preparar una solu-ción de 3 g/l de Carmín de Indigo (C.I. 73015) DC.Filtrar, tomar 50 ml de esa solución, añadir 50 ml deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO y Agua PA-ACS hasta1.000 ml. Mezclar bien.

35.4. Procedimiento.Colocar en un vaso de 50 ml del Indicador de

Indigo antes indicado y añadir 2 ml del vino. Inme-diatamente adicionar gota a gota la solución dePotasio Permanganato 0,01N, y al final, cada vezmás lentamente, hasta desaparición completa delcolor azul y aparición de amarillo oro.

En vinos nuevos, el viraje es menos neto, por loque conviene tomar sólo 1 ml de muestra.

Hacer la prueba testigo para eliminar el perman-ganato por sustancias no polifenoles, sustituyendolos 2 ml de vino por 2 ml de una solución de AcidoL(+)-Tartárico de 5 g/l, neutralizada hasta la mitadcon solución de Potasio Hidróxido y encabezadahasta 10° de Etanol 96% v/v PA.

35.5. Cálculo.Calcular el índice de permanganato o el título de

materias oxidables en frío del vino por permangana-to expresado en meq/l.

Indice de permanganato = 5 (V-V’).

Materias oxidables en frío = 5 (V-V’) meq/l.

V = volumen en ml de solución de potasio per-manganato 0,01N para oxidar el vino.

V’ = volumen en ml de solución de potasio per-manganato 0,01N gastados en la prueba testigo.

35.6. Referencia.35.6.1. Ribereau-Gayon et Peynaud. “Analyse et

Contrôle des Vins”. página 320, 1958.

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36(a). DETERMINACION DE PRESENCIADE VINO PROCEDENTE DE“HIBRIDOS PRODUCTORESDIRECTOS”(Método cualitativo)

36(a).1. Principio.Transformación de la malvina, por la acción con-

trolada de un oxidante apropiado, en una sustanciaque a la luz de Wood acusa viva fluorescencia decolor verde muy sensible.

36(a).2. Material y aparatos.36(a).2.1. Lámpara que emita luz fluorescente

de 366 nm de longitud de onda (luz de Wood).36(a).2.2. Tubos de ensayo.

36(a).3. Reactivos.181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV131074 Agua PA-ACS

Amoníaco (gas)121085 Etanol 96% v/v PA131703 Sodio Nitrito PA-ACS

36(a).3.1. Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV.36(a).3.2. Sodio Nitrito al 1%. Disolver Sodio

Nitrito PA-ACS en Agua PA-ACS y ajustar a la con-centración indicada.

36(a).3.3. Etanol 96% v/v PA con el 5% de Amo-níaco (gas)

36(a).4. Procedimiento.36(a).4.1. Vinos tintos.- Para vinos tintos intro-

ducir en el tubo de ensayo: 1 ml de vino, una gotade Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV, y 1 ml deSodioNitrito al 1%. Agitar y esperar dos minutos, despuésañadir 6 ml de Etanol 96% v/v PA con el 5% deAmoníaco (gas). Agitar, esperar cinco minutos, filtrary observar el filtrado a la luz de Wood. Si hay malvi-na se apreciará la fluorescencia color verde.

36(a).4.2. Vinos rosados o claretes.- Introduciren el tubo de ensayo 5 ml de vino, cinco gotas deAcido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV y 1 ml de SodioNitrito al 1%.

Agitar, esperar dos minutos y añadir despuésEtanol 96% v/v PA con el 5% de Amoníaco (gas).Agitar y observar a la luz de Wood (366 nm).

36(a).5. Cálculo.La intensidad de la fluorescencia verde es muy

sensible y puede acusar netamente la presencia deuna dosis de 0,2% de híbrido Oberlein en el vino,siendo la tolerancia admitida hasta un 2% de rique-za de híbrido Oberlein.

36(a).6. Referencia.36(a).6.1. Ribereau-Gayon, J.; Peynaud, E.

“Analyse et Contrôle des Vins”, pág. 320, 1958.

36(b). DETERMINACION DE PRESENCIADE VINO PROCEDENTE DE“HIBRIDOS PRODUCTORESDIRECTOS”(Provisional)

36(b).1. Principio.Determinación de malvina en vinos tintos secos

por cromatografía de papel. La fase móvil es lasolución Britten-Robinson, en las condiciones delmétodo. Observación del cromatograma a la luz deWood de 366 nm.

Como escala de comparación se emplea unaserie de manchas de soluciones de pinacianol, queda fluorescencia similar a la de la malvina, aunquecon coloración verdosa en vez de la roja ladrillo dela malvina, pero con intensidades de la fluorescen-cia proporcionales a las dosis aplicadas, haciendocomparativos los resultados.

36(b).2. Material y aparatos.36(b).2.1. Fuente de luz de Wood (366 nm).36(b).2.2. Cámara o campana para cromatogra-

fía y accesorios (soporte, pinzas, etc.).36(b).2.3. Papel Arches para cromatografía.

36(b).3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA

Pinacianol o Azul de Quinaldina(Yoduro de 1,1’-Dietilcarbocianina)

131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO

36(b).3.1. Solución Britten-Robinson. Mezclar3,92 g de Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO,2,40 g de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y4,48 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO y añadir AguaPA-ACS hasta 1.000 ml. El pH de esta solución es1,81.

36(b).3.2. Pinacianol o Azul de Quinaldina (Yodu-ro de 1,1’-Dietilcarbocianina).

36(b).3.3. Etanol 96% v/v PA neutro. DestilarEtanol 96%v/v PA rectificado en presenia de SodioHidróxido lentejas PA (5 g/l).

36(b).4. Procedimiento.Hacer aplicaciones con micropipeta de 50 ul de

vino cada una, sobre papel a 2 cm del borde infe-rior, de tal forma que aparezcan manchas rectangu-lares de 2 cm de base por 0,5 cm de los bordes.Aplicar 12 gotas de 4 ul en cada punto, secandocada vez con corriente de aire a temperatura nosuperior a 30°.

Llenar la cubeta hasta una altura de 2 cm con lasolución Britten-Robinson. Sumergir el papel sólo1 cm y retirarlo cuando el líquido llegue a 1 cm del

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borde superior. Ayudar a la desecación con corrien-te de aire no superior a 30° y terminar la desecaciónal ambiente.

Para obtener una escala patrón preparar unasoIución en Etanol 96% v/v PA neutro de Pinacianolo Azul de Quinaldina (Yoduro de 1,1’-Dietilcar-bocianina) de 0,5 g/l y diluir a 1/10. Tomar alí-cuotas de 0,3; 0,4; 0,6; 0,8; 1,2; 1,7; 2,4; 3,5 y 5 mly completar con Etanol 96% v/v PA hasta 5 ml. Aestas mezclas les corresponde un contenido con-vencional de híbrido de 3; 4; 6; 8; 12; 17; 24; 35 y50%, respectivamente.

Aplicar cada una de estas mezclas como ante-riormente. Secar las manchas, recortar y pegarmediante una cola celulósica (aplicar en pequeñasdosis para que no desborde) a lo largo del borde deuna tira de cartulina negra.

Renovar la escala cada 30 o 45 días, pues pier-de intensidad, por lo que hay que conservarla alabrigo de la luz.

Observar las manchas del cromatograma a la luzde Wood (366 nm) en cámara oscura y hacer rápi-damente la comparación con la escala.

Para comprobar la eficacia de la lámpara sehace el siguiente ensayo: Lavar por capilaridad conEtanol 96% v/v PA el papel Arches de cromatogra-fía. Aplicar solución alcohólica de Pinacianol de1 mg/l en cantidad tal que la mancha sea visible y lamisma cantidad diluida a la mitad de una manchano visible en las mismas condiciones de observa-ción. Regular la distancia de la lámpara a la hojapara conseguir este efecto.

36(b).5. Cálculo.Si al observar el cromatograma del vino a la luz

de Wood en las condiciones expuestas se aprecianmanchas de color rojo ladrillo y fluorescentes de unRf = 0,55 ± 0,09 será clara manifestación de pre-sencia de malvina.

Para el análisis cuantitativo, comparar con laescala patrón.

La intensidad del color de cada mancha de laescala testigo de solución de pinacianol será valora-da por el número de mg de pinacianol por litro desolución alcohólica con que se ha hecho la manchasobre el papel.

Con esta definición convencional de la intensi-dad del color de las manchas puede establecersetambién, por comparación de estas manchas conlas correspondientes a las de cromatogramas devinos con mezcla conocida de “híbrido”, un coefi-ciente proporcional a la riqueza de éste presente enlos mismos.

La sensibilidad de las manchas pueden acusarel 1% de híbrido Oberlein (elegido como patrón).

La dosis correspondiente al valor 2 de la escalaconvencional, o sea el 2% de híbrido Oberlein, es lamáxima tolerada provisionalmente por la Conven-ción Internacional.

36(b).6. Referencias.36(b).6.1. Dorier y Verelle. “Comunication a la

Société des Experts-Chemistes de France”. 6 enero1965.

36(b).6.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyse des Vins. O. I. V. A18, 1-4, 1969.

37. METANOL(Alcohol Metílíco)(Método del ácido cromotrópico)

37.1. Principio.Oxidación del alcohol metílico a formaldehído

por potasio permanganato en presencia de ácidofosfórico y medida espectrofotométrica de la reac-ción coloreada del formaldehído con ácido cromo-trópico. Coloración violeta específica del formal-dehído.

37.2. Material y aparatos.37.2.1. Matraces aforados de 50 ml.37.2.2. Baño de agua con regulación a 60-75°.37.2.3. Espectrofotómetro que permita lectura a

575 nm.37.2.4. Matraz esférico de cuello largo, de

500 ml y refrigerante con alargadera.

37.3. Reactivos.171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica

2-hidrato RE131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131091 Metanol PA-ACS-ISO131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO131698 Sodio Disulfito PA-ACS141717 Sodio Sulfito anhidro PRS

37.3.1. Solución de Potasio Permanganato.Disolver 3 g de Potasio Permanganato PA-ACS-ISOy 15 ml de Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISOen 100 ml de Agua PA-ACS. Preparar mensual-mente.

37.3.2. Solución de Acido Cromotrópico SalDisódica 2-hidrato. Solución al 5%. Filtrar si no que-da clara. Preparar semanalmente.

37.3.3. Solución al 2% p/v de Sodio Sulfito anhi-dro PRS.

37.4. Procedimiento.Diluir o ajustar la muestra hasta una concen-

tración total de alcohol de 5-6% en volumen.Utilizando 50 ml de muestra, destilar en destila-dor simple, recogiendo 40 ml de destilado enbaño de hielo. Diluir hasta 50 ml con Agua PA-ACS (si se ha determinado previamente el alcohol,el destilado puede ajustarse a 5-6% de concentra-

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ción de alcohol y utilizarse para esta prueba). Si haymás de 0,05% de metanol por volumen, diluir hastaaproximadamente esa concentración con Etanol96% v/v PA previamente diluido al 5,5% con AguaPA-ACS. Para muestras que contengan menos de0,05% de metanol, poner 200 ml de destilador efi-ciente de fraccionamiento, colocar el sistema dedestilación reflujo total durante 15 minutos y luegodestilar lentamente a elevada proporción de reflujo(por lo menos 20:1). Recoger 10 ml de destilado ydiluir hasta 160 ml con Agua PA-ACS.

Pipetear 2 ml de solución de Potasio Perman-ganato en un matraz aforado de 50 ml. Enfriar enbaño de hielo, añadir 1 ml de muestra diluida y fría ydejar 30 minutos en baño de hielo. Decolorar con unpoco de Sodio Disulfito PA-ACS seco (*) y añadir1 ml de solución de Acido Cromotrópico. Añadir len-tamente con agitado y en baño de hielo 15 ml deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO y colocar 15 minutosen baño de agua caliente (60-75°). Enfriar, añadiruna cantidad suficiente de Agua PA-ACS para llevaraproximadamente a la marca de 50 ml, mezclar ydiluir hasta volumen con Agua PA-ACS a la tempera-tura ambiente. Leer la absorbancia a 575 nm utili-zando como reactivo en blanco Etanol al 5,5% trata-do análogamente a la forma descrita. Tratar soluciónpatrón de Metanol PA-ACS-ISO, que contenga0,025% por volumen de Metanol PA-ACS-ISO, enEtanol al 5,5% simultáneamente en la misma forma,y leer la absorbancia (la temperatura del patrón y dela muestra no debe diferir en más de 1°, ya que latemperatura afecta a la intensidad del color).

37.5. Cálculo.Calcular el contenido en metanol expresado en

porcentaje.A

Metanol = 0,025 —— FA’

A = absorbancia de la muestra.

A’ = absorbancia de la solución patrón de metanol.

F = factor de dilución de la muestra.

37.6. Observaciones.Si el color de la muestra es demasiado intenso,

diluir con reactivo en blanco. No diluir más de tresveces porque la relación de ácido cromotrópico ametanol se reduce demasiado.

37.7. Referencia.37.7.1. “Association of Official Agricultural Che-

mists”. Official Methods of Analysis, pág.138, 1965.

(*). En el original indica NaHSO3 seco. El SodioBisulfito como tal fórmula sólo existe en soluciónacuosa y por tanto debe entenderse Sodio Disulfito,seco, de fórmula Na2S2O5.

38. NITROGENO(Método Kjeldhal)

38.1. Principio.Transformación del nitrógeno orgánico en amo-

nio sulfato por ataque con ácido sulfúrico en ebulli-ción en presencia de sustancias catalizadoras queacortan el tiempo de la mineralización y adición desal potásica que eleve el punto de ebullición. Desti-lación por ebullición de vapor recogiendo el destila-do en volumen conocido de solución de ácido sul-fúrico.

Valoración con solución de sodio tiosulfato, delyodo liberado por el ácido sulfúrico al añadir aldestilado solución de potasio yoduro-potasioyodato.

38.2. Material y aparatos.38.2.1. Aparato micro-Kjeldhal.

38.3. Reactivos.131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO182102 Acido Sulfúrico 0,01 mol/l (0,02N) SV131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE122726 Cobre II Sulfato anhidro PA171327 Fenolftaleína solución 1% RE

Papel Tornasol131532 Potasio Sulfato PA-ACS-ISO131540 Potasio Yodato PA-ISO131542 Potasio Yoduro PA-ISO141625 Selenio metal, polvo PRS182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV

38.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.38.3.2. Catalizador de Selenio. Mezclar bien pul-

verizados 80 g de Potasio Sulfato PA-ACS-ISO,20 g de Cobre II Sulfato anhidro PA y 5 g de Seleniometal, polvo PRS.

38.3.3. Fenolftaleína solución 1% RE y PapelTornasol.

38.3.4. Acido Sulfúrico 0,01 mol/l (0,02N) SV.38.3.5. Potasio Yoduro solución al 4%. Disolver

Potasio Yoduro PA en Agua PA-ACS y ajustar a laconcentración indicada.

38.3.6. Potasio Yodato solución al 5%. DisolverPotasio Yodato PA-ISO en Agua PA-ACS y ajustar ala concentración indicada.

38.3.7. Solución de Sodio Tiosulfato 0,02N. Enun matraz aforado diluir a 1:5 Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar elfactor de la solución 0,02N obtenida.

38.3.8. Solución concentrada de Almidón solu-ble RE.

38.4. Procedimiento.Poner en el matraz Kjeldhal 50 ml de vino, eva-

porar a ebullición lenta hasta unos 10 ml, añadir10 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y 0,6 g de

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la mezcla pulverizada y bien uniformada de CobreII Sulfato anhidro PA, Selenio metal, polvo PRS yPotasio Sulfato PA-ACS-ISO, continuar calentan-do primero lentamente y después enérgicamente,hasta decoloración, y proseguir unos minutosmás. Si es necesario se van añadiendo nuevasdosis de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO de 5 en5 ml.

Enfriar, pasar el contenido a matraz aforado de100 ml arrastrando el residuo con pequeñas porcio-nes de Agua PA-ACS para enjuagar varias veces elmatraz, comprobando que los últimos lavados nodan trazas de reacción ácida al papel de tornasol.

Tomar una alícuota de 20 ml y llevar al matrazdel aparato de destilación, adicionando unas gotasde Fenolftaleína solución 1% RE. En un vaso cilín-drico de unos 200 ml, se añaden 10 ml de AcidoSulfúrico 0,01 mol/l (0,02N) SV.

Añadir al matraz solución de Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV (4%) en cantidad suficiente para virajede la Fenolftaleína solución 1% RE y se encaja rápi-damente en su sitio. Conectar el aparato de destila-ción con el generador de vapor de agua y comen-zará el arrastre del amoníaco pasando alrefrigerante y recogiendo el destilado en la SoluciónSulfúrica.

Después de 15-20 minutos, comprobar conpapel tornasol si una gota del destilado no acusareacción alcalina. En este caso separar el vaso yproceder a la valoración.

Añadir al vaso con el Acido Sulfúrico 0,01 mol/l(0,02N) SV 4 ml de Potasio Yoduro al 4% y 2 ml dePotasio Yodato al 5%. Mezclar con una varilla ydespués de 20 minutos valorar el yodo liberadocon solución de Sodio Tiosulfato 0,02N emplean-do como indicador 5-10 ml de solución de Almi-dón.

38.5. Cálculo.Calcular el nitrógeno expresado en meq/l o en

mg/l.10 - V

Nitrógeno = ——— x 100 meq/l50

10 - VNitrógeno = ——— x 100 x 14 mg/l

50

V = volumen en ml de solución de sodio tiosulfa-to 0,02N.

39(a). FLUOR(Provisional)

39(a).1. Principio.Incineración de 525° del vino en presencia de un

exceso de calcio o magnesio, destilación encorriente de vapor del ácido fluorhídrico a 135-140°, valoración del ácido destilado a pH 3,6 porsolución de torio nitrato en presencia de alizarinasodio suifonato.

39(a).2. Material y aparatos.39(a).2.1. Aparato de Truhaut, que consta de

generador de vapor, barbotador de pared doble,ampolla para la introducción de la solución sulfúricade las cenizas magnéticas, refrigerante de retorno yrefrigerante de West para la salida del destilado(figura 39.I.).

39(a).2.2. Cápsula de platino o níquel para lascenizas.

39(a).2.3. Horno eléctrico regulable para 525°.39(a).2.4. Matraz de 250 ml.39(a).2.5. Dos cápsulas de porcelana iguales, de

unos 10 cm de diámetro.39(a).2.6. Material para volumetría.

39(a).3. Reactivos.181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica

2-hidrato RE131057 Acido Sulfanílico PA-ACS131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS171168 Azul de Bromotimol solución 0,04% RE211376 Lana de Vidrio lavada QP131394 Magnesio Acetato 4-hidrato PA-ACS211276 Magnesio Oxido QP141801 Plata Sulfato PRS171634 Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV

TetracloroetanoTorio Nitrato 4-hidrato

39(a).3.1. Solución Tampón de pH = 3,1. Mez-clar 100 ml de Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE,303 ml de Agua PA-ACS y 97 ml de Acido Clorhídri-co 1 mol/l (1N) SV.

39(a).3.2. Solución de Torio Nitrato 0,01N. Disol-ver 1,3806 g de Torio Nitrato 4-hidrato, en un litrode Agua PA-ACS.

39(a).3.3. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV. 39(a).3.4. Acido Sulfúrico al 1/10. Diluir conve-

nientemente Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con AguaPA-ACS.

39(a).3.5. Azul de Bromotimol solución 0,04%RE.

39(a).3.6. Magnesio Oxido al 1/10. Suspensiónde Magnesio Oxido QP en Agua PA-ACS.

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39(a).3.7. Magnesio Acetato al 1/10. DisolverMagnesio Acetato 4-hidrato PA-ACS en Agua PA-ACS.

39(a).3.8. Solución Spadns. Añadir a 0,02 g deSpadns, Agua PA-ACS hasta 100 ml. El Spadnsresulta de la combinación del Acido Sulfanílico PA-ACS con el Acido Cromotrópico Sal Disódica2-hidrato RE. Su proceso de preparación es labo-rioso. Se encuentra preparado por Eastman-Kodak.

39(a).3.9. Plata Sulfato PRS.

39(a).4. Procedimiento.39(a).4.1. Incineración.- Poner 20 ml de vino en

cápsula de platino o de níquel, añadir 2 ml de sus-pensión de Magnesio Oxido al 1/10 y 4 ml de Mag-nesio Acetato al 1/10. Evaporar, desecar y calcinaren el horno a 550°C.

39(a).4.2. Destilación.- Colocar en el barbotadordel aparato Truhaut 20 ml de Acido Sulfúrico 96%

PA-ISO diluido al 50% en Agua PA-ACS, 0,5 g deLana de Vidrio lavada QP y 0,5 g de Plata SulfatoPRS, con el fin de retener el Acido Clorhídrico. Lle-var el barbotador a 146°C por ebullición del Tetra-cloroetano (punto de ebullición 146°) en la doblepared (A) y forzar la corriente de vapor de agua a lavelocidad de 5 g por minuto. Conviene calentar pre-viamente el Tetracloroetano en la doble pared delaparato antes de que barbote el vapor en el líquido,por haberse observado que así se evitan la forma-ción de burbujas de espuma, que son un peligropor posible desborde y paso al refrigerante de sali-da.

Se continúa la destilación hasta recoger unos100 ml de destilado.

Con estas operaciones queda el aparato des-provisto de posible presencia de flúor.

Disolver las cenizas en el menor volumen posiblede Acido Sulfúrico al 1/10 e introducir en el barbota-

72Figura 39.I. Aparato de Truhaut

El barbotador (C) tiene una pared doble (A) donde se hierve el tetracloroetano a 146°. El tubo de entrada devapor de agua rodea (E) la pared interna y penetra en su interior, prolongándose verticalmente hasta casi el fondo.

El refrigerante de retorno para condensar los vapores de tetracloroetano se conecta en (B).La ampolla (F), con llave y tapón esmerilado, se ajusta a la boca del barbotador y el tubo penetra hasta la

misma altura que el punto de entrada del tubo de vapor de agua. La salida del destilado comunica con refri-gerante de West, vertical que se prolonga por alargadera tubular cuyo pico se sumerge en el agua que con-tiene el matraz receptor.

REFR

IGER

ANTE

LIE

BIG-

WES

T40

cm

,BOC

AS 1

4/23

REFR

IGER

ANTE

DE

BOLA

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UERZ

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CAS

14 /

23

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dor, enfriando previamente el líquido del barbotadorantes de verter en él la solución sulfúrica de ceni-zas. Proseguir la destilación con el barboteo devapor, comenzando por calentar previamente,como se ha indicado, el Tetracloroetano contenidoen la doble pared. Recoger unos 100 ml de destila-do en un matraz de 250 ml que contenga 5 ml deAgua PA-ACS, de forma que quede sumergido elpico de la alargadera del refrigerante.

39(a).4.3. Valoración.- Descarbonatar el destila-do por agitación en frío y con vacío neutralizar conSodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV en presencia deAzul de Bromotimol solución 0,04% RE como indi-cador. Llevar después a una cápsula de porcelanablanca bien limpia, siendo recomendable frotar pre-viamente su interior con pasta silícea y enjuagarlacon Agua PA-ACS.

Añadir a 50 ml del destilado 1 ml de soluciónacuosa de Spadns y 1 ml de Solución Tampón depH = 3,1. Añadir con microbureta solución de TorioNitrato 0,01N hasta viraje a rojo violeta.

Para apreciar el punto del viraje se compara latonalidad del color con la de una valoración testigohecha en otra cápsula igual y con el mismo volumende Solución Tampón, 1 ml de Spadns y 0,05 ml desolución de Torio Nitrato. Se ha observado que con0,1 ml de Torio Nitrato es más clara la comparaciónde colores.

Restar del volumen de Torio Nitrato gastado enel líquido problema los 0,05 y 0,1 ml añadidos altestigo.

39(a).5. Cálculo.Equivalencia: 1 ml de solución de torio nitrato

0,01N < > 0,19 mg de flúor.Expresar los resultados en mg de flúor por litro y

con una aproximación de unos 0,5 mg.

39(a).6. Referencia.39(a).6.1. Fabré, R.; Trumant, A.; Bouquet, A., y

Bernuchon, J. (1960-1965), Cont. Rendu Aca.Sciences.1965, 240, pág. 211; 1959, 248, pág.504.

39(b). FLUOR

39(b).1. Principio.Determinación directa del flúor total por poten-

ciometría utilizando un electrodo iónico específico.Para eliminar las posibles causas de error se le

adiciona al vino una solución tampón.

39(b).2. Material y aparatos.39(b).2.1. pH-metro con escala que permita

apreciar 0,1 mV.39(b).2.2. Electrodo selectivo de flúor.39(b).2.3. Electrodo de referencia de calomela-

nos.

39(b).2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml.39(b).2.5. Recipientes de plástico de 50-100 ml

de capacidad para mezclas y matraces en materialde plástico para conservar las soluciones patrón.

39(b).2.6. Pipetas de precisión graduadas enmicrolitros.

39(b).2.7. Agitador magnético.

39(b).3. Reactivos.131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131675 Sodio Fluoruro PA-ACS-ISO

39(b).3.1. Solución patrón de fluoruros 10–2Mconteniendo 190 mg de F – por litro. Pesar 0,4198 gde Sodio Fluoruro PA-ACS-ISO (desecado durantecuatro horas a 106°C antes de su utilización), disol-ver y enrasar a un volumen de 1.000 ml.

39(b).3.2. Solución Tampón de Acido orto-Fos-fórico 0,75 M. Diluir convenientemente Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.

39(b).4. Procedimiento.39(b).4.1. Verificación del electrodo y determina-

ción de su pendiente.A partir de la solución 3.1 preparar, mediante

diluciones, soluciones de concentraciones conoci-dasde 10–3M, 10–4M y 10–5M, que contienen, res-pectivamente, 19; 1,9 y 0,19 mg de F– por litro.

Tomar dos vasos de precipitados; en uno deellos colocar 25 ml de la disolución 10–3M de F –, adicionar 5 ml de solución Tampón de Acido orto-Fosfórico y determinar su potencial agitando deforma moderada mientras dure la medida. En el otrovaso, poner 25 ml de disolución 10–4M de F –, 5 mlde solución Tampón de Acido orto-Fosfórico ydeterminar su potencial, agitando como anterior-mente. La diferencia entre los dos potenciales es lapendiente del electrodo (S) y cuyo valor debe ser,aproximadamente, 59 mV.

39(b).4.2. Determinación.Tomar 25 ml de vino, adicionar 5 ml de la solu-

ción Tampón y determinar su potencial (E1). A conti-nuación, y en el mismo vaso, adicionar un ml dedisolución 10–3M de F – y determinar su potencial (E2)

Si el salto de potencial es pequeño, indica que laconcentración de F – es muy alta y hay que diluir lamuestra hasta que el salto alcanzado esté com-prendido alrededor de 20-40 mV.

Los volúmenes de muestra y solución Tampónpueden ser modificados en función de la forma ydisposición de los electrodos utilizados.

39(b).5. Cálculo.La cantidad de flúor, expresada en mg/l, nos

viene determinada por la fórmula:

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V . CCF- = ———————————

m E25 [(antilog —— ) - 1]

SSiendo:CF- = concentración, en mg/l, de F – en el medio.V = volumen, en ml, de solución patrón de fluo-

ruro añadida.C = concentración, en mg/l, de la solución

patrón adicionada.S = pendiente del electrodo.m E = diferencia de los potenciales E1 y E2 obte-

nidos en 39(b).4.2.Este valor se deberá multiplicar por el factor de

dilución correspondiente, en caso de haber sido ne-cesario efectuarla.

39(b).6. Observaciones.39(b).6.1. Todas las soluciones deben conservar

una temperatura próxima a 25°C ±1°C durante lamedida .

39(b).7. Referencias.39(b).7.1. H. E. Haller y C. H. Junge, 1974, O. I.

V. 317/FV/518 y 133/FV/439.39(b).7.2. Deschreider, A., y Mme. R. Meaux,

1974. Determination des fluor dans les vins et eauxminerales naturelles au moyen d’une electrode ioni-que specifique.

40. HIDROXIMETILFURFURAL(Provisional)

40.1. Principio.El hidroximetilfurfural se produce al calentar en

exceso los mostos para su concentración, desulfita-ción o pasterización. La presencia de hidroximetil-furfural en ciertos vinos dulces se considera comoindicio de la adición de mostos.

Este método está basado en la reacción deWinckler (formación de un complejo rojo para laacción del hidroximetilfurfural sobre la p-toluidina yácido barbitúrico). Se utiliza para los vinos blancos ytintos, previa extracción con éter etílico en lossegundos.

40.2. Material y aparatos.40.2.1. Espectrofotómetro y accesorios (cubeta

para 1 cm de espesor del líquido).40.2.2. Matraces aforados.40.2.3. Embudo de decantación con tapón

esmerilado y de 100 ml de capacidad.40.2.4. Cápsula de porcelana de unos 10 cm de

diámetro.

40.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO

Acido Barbitúrico

131090 2-Propanol PA-ACS-ISO132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm

de BHT PA-ACS-ISO162378 P-Toluidina PS

40.3.1. Reactivo de p-Toluidina. Disolver 10 g dep-Toluidina PS en 50 ml de 2-Propanol PA-ACS-ISO. Llevar a matraz aforado de 100 ml, añadir10 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y com-pletar hasta el enrase con 2-Propanol PA-ACS-ISO.Este reactivo dura 4 días.

40.3.2. Reactivo de Acido Barbitúrico. Se intro-duce en matraz aforado de 100 ml, 0,5 g de AcidoBarbitúrico desecado a 105°C y unos 70 ml deAgua PA-ACS. Se calienta ligeramente en baño deagua, se enfría y enrasa con Agua PA-ACS.

40.4. Procedimiento.Llevar 10 ml del vino a embudo de decantación

y añadir 12 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6ppm de BHT PA-ACS-ISO. Agitar durante 3 minu-tos, decantar el Eter Dietílico estabilizado con p6ppm de BHT PA-ACS-ISO a cápsula de porcelanaque contenga 2 ml de Agua PA-ACS, repetir cuatroveces la extracción del residuo del embudo conotros 12 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6ppm de BHT PA-ACS-ISO cada vez y decantarigualmente a la cápsula. Dejar evaporar el éter enmedio ambiente. Al residuo de evaporación añadirAgua PA-ACS hasta 10 ml, agitar y tomar 2 ml paraanálisis.

Mezclar los 2 ml tomados con 5 ml de Reactivode p-Toluidina y un 1 ml de Acido Barbitúrico lle-vándolos inmediatamente a la cubeta del espectro-fotómetro (de un cm de espesor del líquido) y hacerrápidamente la lectura de la absorbancia a 546 nm.Emplear como líquido de referencia el AguaPA-ACS en lugar de Acido Barbitúrico, o sea, 3 mlde Agua PA-ACS más 5 ml de Reactivo de p-Tolui-dina.

40.5. Cálculo.Determinar el contenido en hidroximetilfurfural

expresado en mg/l por comparación con la corres-pondiente curva patrón teniendo en cuenta el factorde dilución.

40.6. Observaciones.En el caso de vinos turbios centrifugar previa-

mente. Si hay presencia de CO2 eliminarlo agitandoel vino en un matraz.

40.7. Referencias.40.7.1. Sandoval, J. A.; Hidalgo, T. “Puesta a

punto de un método para análisis cuantitativoespectrofotométrico de hidroximetilfurfural en losvinos”. Boletín I. N. I. A., 16: 4. 454-469,1967.

40.7.2. Amerine, M. A. “Hydroximethyl-furfural inCalifornia Wines”. Food Research. 13: 264-269, 1948.

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41. DETERMINACION CUALITATIVA DEACIDO SORBICO, BENZOICO,p-CLOROBENZOICO, SALICILICO,p-HIDROXIBENZOICO Y SU ESTER ETILICO

41.1. Principio.Extracción con éter etílico de los antisépticos del vinopreviamente acidificados. Separación por cromato-grafía de capa fina. Identificación a la luz ultravioleta yreveladores específicos.

41.2. Material y aparatos.41.2.1. Extractor en continua de Palkin (figura 41.I)

que comporta un tubo A de 55 cm de longitud y 3,8cm de diámetro. La parte superior va unida a un refri-gerante de bolas mediante boca esmerilada 34-25. A30 cm de la base y formando un ángulo de 60º seencuentra un tubo lateral acodado a los 13 cm, for-mando un ángulo de 120°. Este tubo lateral terminaen una junta esmerilada 24/40 en bisel, lo que permi-te su unión a un matraz de 50 ml que se calientasobre una placa. En el tubo A se introducen bolitas devidrio y el tubo interior (B) de 48,5 cm de longitud y1,2 cm de diámetro, terminando en una placa devidrio poroso.

41.2.2. Agitador mecánico (ver 41.6.1).41.2.3. Erlenmeyer de 500 ml de boca esmerilada.41.2.4. Baño María.41.2.5. Estufa eléctrica (200º C).41.2.6. Embudos de separación de 500 ml.41.2.7. Cápsulas de porcelana de 70-80 cm de

diámetro.41.2.8. Equipo de cromatografía de capa fina.41.2.9. Placas de vidrio de 20 x 20 cm.

41.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO121014 Acido Benzoico PA182108 Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV

Acido p-Clorobenzoico163231 Acido 4-Hidroxibenzoico PS141045 Acido Salicílico (USP, BP, F. Eur.)

PRS-CODEX141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX131057 Acido Sulfanílico PA-ACS131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO

Acido Tiobarbitúrico131074 Agua PA-ACS121086 Etanol absoluto PA121085 Etanol 96% v/v PA132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm

BHT PA-ACS-ISO132063 n-Hexano PA-ACS131252 Triclorometano estabilizado con etanol

PA-ACS-ISO164542 4-Nitroanilina PS122006 n-Pentano PA

Polvo de Poliamida para Cromatografía

131500 Potasio Dicromato PA-ISORevelador F 254

131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS131647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO182159 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SV131703 Sodio Nitrito PA-ACS131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO131091 Metanol PA-ACS-ISO

41.3.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppmde BHT PA-ACS-ISO.

41.3.2. Metanol PA-ACS-ISO.41.3.3. Etanol 96% v/v PA41.3.4. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO diluido a

20% (v/v) con Agua PA-ACS.41.3.5. Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO.41.3.6. Polvo de Poliamida para cromatografía

Macherey-Nagel o Merck.41.3.7. Revelador F 254 Merck o equivalente.41.3.8. Solventes:n-Pentano PA: 10 partes.n-Hexano PA-ACS: 10 partes.Acido Acético glacial PA-ACS-ISO: 3 partes.41.3.9. Soluciones patrones. Preparar solucio-

nes de 0,1 g por 100 ml en Etanol 96% v/v PA conlos Acidos Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX, p-Cloro-benzoico, Salicílico (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX,4-Hidroxibenzoico PS y sus ésteres. Preparar unasolución de 0,2 g por 100 ml en Etanol 96% v/v PAcon el Acido Benzoico PA.

41.3.10. Preparación de las placas. 10 g dePoliamida con el 3% de indicador fluorescente sehomogenizan durante 20 segundos en agitadormecánico con 35 ml de Metanol PA-ACS-ISO y25 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO. Las placas impregnadas se secan duran-te 1 hora a 80°C.

41.3.11. Solución hidroalcohólica conteniendo0,15 g por 100 de Potasio Dicromato PA-ISO(41.6.2).

41.3.12. Solución saturada de Acido Tiobarbitú-rico en Etanol 96% v/v PA (0,1% aproximadamente)(41.6.2).

41.3.13. Solución de 0,5 g de 4-Nitroanilina en100 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV (41.6.3).

41.3.14. Solución de Sodio Nitrito al 5% (41.6.3).Disolver Sodio Nitrito PA-ACS en Agua PA-ACS.

41.3.15. Solución de Sodio Acetato al 20%(41.6.3). Disolver Sodio Acetato anhidro PA-ACS enAgua PA-ACS.

41.3.16. Solución de Sodio Carbonato al 15%(41.6.3). Disolver Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO en Agua PA-ACS.

41.3.17. Reactivo de Pauly. Disolver 4,5 g deAcido Sulfanílico PA-ACS en 45 ml de Acido Clorhí-drico 2 mol/l (2N) SV (calentando, diluir la solución a500 ml en Agua PA-ACS, 10 ml de la solución dilui-da se enfrían con hielo), se le añaden 10 ml de solu-ción acuosa de Sodio Nitrito al 4,5% también fría. El

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reactivo resultante se mantiene durante 15 minutosa 0°C (a esta temperatura es estable de 1 a 3 días)y se le añade un volumen igual de solución acuosade Sodio Carbonato al 10% en el momento de pul-verizar las placas (41.6.4).

41.4. Procedimiento.Acidular 100 ml de vino o mosto con 10 ml de

Acido Sulfúrico al 20%.

Extraer tres veces con 20 ml de Eter Dietílicoestabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISOcada vez, reuniendo las soluciones etéreas; o bien,durante 6 horas en el extractor continuo de Palkincon 175 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6ppm de BHT PA-ACS-ISO a una velocidad de reflu-jo de 500-600 ml/hora.

Los extractos etéreos se desecan con 6 g deSodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO durante 12horas. Filtrar y el Eter Dietílico estabilizado con p6ppm de BHT PA-ACS-ISO se evapora a sequedaden baño María 40-45°. El residuo se disuelve en unml Etanol absoluto PA tomando cantidades de 5 a10 el para cromatografía. Mediante el tratamientode los extractos etéreos con 5 ml de Sodio Hidróxi-do 2,5N (diluir a 1:1 Sodio Hidróxido 5 mol/l (5N) SVcon Agua PA-ACS) y acidulado de nuevo con 5 mlde Acido Sulfúrico al 20% se obtendrá en los cro-matogramas las manchas correspondientes a losácidos liberados por efecto de la saponificación.

Para obtener el desarrollo de los cromatogra-mas, depositar la muestra en forma de manchaspuntuales de 5-10 el.

El desarrollo se lleva a cabo en cámara saturadacon el eluyente y a temperatura ambiente. Dejarmigrar el solvente hasta una altura de unos 15 cm(una hora y media a dos horas y media).

Retirar la placa de la cubeta y dejar secar a latemperatura ordinaria.

41.5. Cálculo.Observación a la luz ultravioleta (360 nm).Los conservadores aparecen de abajo arriba en

el siguiente orden: ácido 4-hidroxibenzoico, éste-res del ácido 4-hidroxibenzoico, ácido salicílico,ácido p-clorobenzoico, ácido benzoico y ácidosórbico.

Para detectar el ácido sórbico pulverizar prime-ramente el cromatograma con la solución 41.3.11 yseguidamente con la 41.3.12. Calentar la placa a80°C, 5-10 minutos. La mancha de ácido sórbicoaparece de color rojo sobre fondo ocre.

Para detectar los ácidos salicílico y 4-hidroxi-benzoico y éster etílico del ácido 4-hidroxibenzoi-co, pulverizar la placa con una mezcla compues-ta de 2 ml de 41.3.13 más 3-5 gotas de 41.3.14más 8 ml de 41.3.15, añadiéndolos en esteorden. Una vez seca la placa aparecen las man-chas correspondientes a los tres componentescitados de color amarillo. La materia colorantepropia de los vinos toma colores que van delamarillo al naranja. Pulverizar de nuevo con lasolución 41.3.16. La manchas del ácido 4-hidro-xibenzoico toman color rojo; las del éster etílicodel ácido 4-hidroxibenzoico, color rosa, y las delacido salicílico, amarillo limón. Los distintos com-ponentes de la materia colorante toman coloresque van desde distintos tonos de ocre al pardo ytambién verde y azulado.

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Figura 41.l. Extractor continuo de Palkin

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Para detectar los ácidos 4-hidroxibenzoico ysalicílico y el éster etílico del ácido 4-hidroxibenzoi-co se utiliza empleando el reactivo 41.3.17.

41.6. Observaciones.41.6.1. Para el análisis cualitativo.41.6.2. Para detectar el ácido sórbico.41.6.3. Para detectar los ácidos salicílico y 4-hi-

droxibenzoico y éster etílico del ácido 4-hidroxiben-zoico.

41.6.4. Para detectar los ácidos 4-hidroxibenzoi-co y salicílico y el éster etílico del ácido 4-hidroxi-benzoico.

42. INVESTIGACION DE DERIVADOSMONOHALOGENADOS DELACIDO ACETICO

42.1. Principio.Extracción de los derivados monohalogenados

del ácido acético con éter etílico previamente acidi-ficado. Formación de tioindigo, de color rojo, que seextrae con cloroformo.

El método permite detectar de 1,5 a 2 mg/l deácido monocloroacético y las cantidades corres-pondientes de otros derivados monohalogenados.

42.2. Material, aparatos y reactivos.131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO

Acido Tiosalicílico131074 Agua PA-ACS131252 Triclorometano estabilizado con etanol

PA-ACS-ISO132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm

de BHT PA-ACS-ISO131503 Potasio Hexacianoferrato lll PA-ACS181692 Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV182158 Sodio Hidróxido 2 mol/l (2N) SV131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO

42.2.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppmde BHT PA-ACS-ISO.

42.2.2. Acido Sulfúrico (1 + 4) (v/v) . Diluir AcidoSulfúrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS.

42.2.3. Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISOdesecado en estufa a 105°C.

42.2.4. Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV.42.2.5. Acido Tiosalicílico (2 Mercaptobenzoico)

al 3% (p/v) en Sodio Hidróxido 1,5N (diluir SodioHidróxido 2 mol/l (2N) SV con Agua PA-ACS y ajus-tar a la concentración indicada).

42.2.6. Potasio Ferricianuro al 2% (prepararinmediatamente antes de usar). Disolver PotasioHexacianoferrato lll PA-ACS en Agua PA-ACS.

42.2.7. Triclorometano estabilizado con etanolPA-ACS-ISO.

42.2.8. Baño de agua.42.2.9. Estufa eléctrica.42.2.10. Embudos de separación.

42.2.11. Cápsulas de porcelana 70-80 mm Ø.42.2.12. Tubos de 150 x 15 mm con tapón

esmerilado.42.2.13. Tubos de 150 x 15 mm con llave infe-

rior.

42.3. Procedimiento.Introducir en un Erlenmeyer de 500 cc y boca

esmerilada 100 ml de vino, 5 ml de Acido Sulfúrico(1+5) y, agitando, 100 ml de Eter Dietílico estabiliza-do con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO, continuandoen un agitador durante una hora.

Separar en embudo de decantación y descartarla capa inferior. Añadir 8-10 g de Sodio Sulfato anhi-dro PA-ACS-ISO al extracto éter, agitando vigorosa-mente. Verter el éter en otro embudo de 500 ml,agregando sucesivamente: 5,0, 2,5 y 2,5 ml deSodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV, agitando unminuto cada vez y reuniendo las tres capas inferio-res alcalinas obtenidas en un tubo con tapón esme-rilado, en el cual se habrá vertido previamente 1 mlde la solución de Acido Tiosalicílico. Agitar enérgi-camente durante treinta segundos y transferir elcontenido del tubo a una cápsula de porcelana,evaporando durante una hora en baño de agua(90-100°C), tiempo que habrá de respetarse auncuando el agua se evapore mucho antes.

Si se formara una costra sobre la superficie, esconveniente romperla con una varilla fina de vidrio, loque facilitará la evaporación. Pasado este tiempo,llevar la cápsula con el residuo seco a la estufa man-tenida a 200°C durante treinta minutos exactamen-te, pasados los cuales se retira y se deja enfriar a latemperatura ambiente. Añadir 2 ml de Agua PA-ACSque disolverá la mayor parte del extracto y recogeren un tubo con llave en su parte inferior; agregarotros 2 ml de Agua PA-ACS para lavar la cápsula y,por último, 3 ml de solución de Potasio Ferricianuro,recogiendo todo ello con los primeros, agitando bienel tubo durante treinta segundos para facilitar la oxi-dación. Conviene asegurarse de que todo el residuose disolvió bien en los 4 ml de Agua PA-ACS antesde añadir la solución de Potasio Ferricianuro. En pre-sencia de un derivado monohalogenado se desarro-llará una coloración rojo-anaranjado (apenas percep-tible para contenidos inferiores a 0,1 mg). Agregar3 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO; agitar alternativamente tres-cuatro veces ydecantar. Si el extracto clorofórmico inferior se colo-rea de rojo-fucsia o rosado, indica la presencia dederivados monohalogenados del ácido acético.

42.4. Referencias. 42.4.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. O. I. V. A 35h.42.4.2. Cabezuco, Gorostiza y Garrido: Determi-

nación de derivados monohalogenados del ácidoacético. Instituto de Fermentaciones (1971, ATA,vol. II, núm. 1, páginas 145-151).

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43. GRADO ALCOHOLICO ENPOTENCIA

43.1. Principio.Es el volumen en litros de alcohol susceptible de

obtenerse por fermentación total de los azúcarescontenidos en 100 litros de vino.

43.2. Material y aparatos.Como en 7(a).2 o 7(b).2.

43.3. Reactivos.Como en 7(a).3 o 7(b).3.

43.4. Procedimiento.Como en 7(a) o 7(b).

43.5. Cálculo.

N - 1Grado alcohólico en potencia = ————

17

donde:

N = g/l de azúcares reductores de la muestra.

44. GRADO ALCOHOLICO TOTAL

44.1. Principio.Se considera el grado alcohólico total como la

suma del grado alcohólico adquirido determinadosegún 5(a) o 5(b), y del grado alcohólico potencial,determinado según 43.

44.2. Cálculo.Grado alcohólico total = Grado alcohólico adquirido +

+ Grado alcohólico potencial.

45. COLORANTES SINTETICOS

45.1. Principio.Concentración mediante ebullición, extracción

con éter etílico y fijación de colorantes sintéticosbásicos y ácidos sobre lana y posterior confirmaciónpor cromatografía en papel.

45.2. Material y aparatos.45.2.1. Hebras de lana blanca previamente

desengrasadas con Eter Dietílico estabilizado conp6 ppm de BHT PA-ACS-ISO.

45.2.2. Hebras de lana blanca mordentadas.Disolver 1 g de Aluminio Sulfato 18-hidrato escori-forme (BP, F. Eur.) PRS-CODEX y 1,2 g de PotasioHidrógeno Tartrato PA en 500 ml de Agua PA-ACS.Introducir en esta solución 10 g de hebras de lanablanca, previamente desengrasadas con Eter Dietí-lico estabilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISOy secas, agitar durante una hora y dejar reposar de

dos a tres horas; transcurrido dicho tiempo, secar atemperatura ambiente.

45.2.3. Papel para cromatografía Whatmannúmero 1 o similar.

45.2.4. Erlenmeyer de 50 ml de capacidad.45.2.5. Ampolla de decantación de 200 ml de

capacidad.

45.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO131074 Agua PA-ACS131082 1-Butanol PA-ACS-ISO121085 Etanol 96% v/v PA141101 Aluminio Sulfato 18-hidrato escoriforme

(BP, F. Eur.) PRS-CODEX141128 Amoníaco 20% (en NH3) PRS132770 Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm

de BHT PA-ACS-ISO121486 Potasio Hidrógeno Tartrato PA131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%

PA-ACS-ISO

45.3.1. Eter Dietílico estabilizado con p6 ppmde BHT PA-ACS-ISO.

45.3.2. Sodio Hidróxido al 5%. Disolver SodioHidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.

45.3.3. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.45.3.4. Acido Acético diluido, 1/18 (v/v). Diluir

Acido Acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.45.3.5. Acido Clorhídrico diluido 1/10 (v/v). Diluir

Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PA-ACS.45.3.6. Amoníaco 20% (en NH3) PRS.45.3.7. Solvente número 1 para cromatografía

de colorantes de carácter básico:1-Butanol PA-ACS-ISO . . . . . . . . . . . 50 mlEtanol 96% v/v PA . . . . . . . . . . . . . . 25 mlAcido Acético glacial PA-ACS-ISO . . . 10 mlAgua PA-ACS. . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 ml45.3.8. Solvente número 2 para la cromatografía

de colorantes de carácter ácido:1-Butanol PA-ACS-ISO . . . . . . . . . . . 50 mlEtanol 96% v/v PA . . . . . . . . . . . . . . 25 mlAmoníaco 20% (en NH3) . . . . . . . . . . 10 mlAgua PA-ACS. . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 ml

45.4. Procedimiento.45.4.1. Determinación de colorantes de carácter

básico.Poner 200 ml de vino en un Erlenmeyer de 500 ml

y llevar a ebullición hasta que el vino se reduzca a untercio de su volumen. Enfriar y neutralizar con lasolución de Sodio Hidróxido al 5% hasta claro vira-je del color natural del vino. Extraer dos veces, con30 ml de Eter Dietílico estabilizado con p6 ppm deBHT PA-ACS-ISO cada vez, y juntar las dos fasesetéreas; en ellas se encuentran eventualmente loscolorantes básicos; el residuo de la extracción debeser conservado con objeto de investigar los colo-

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Page 79: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

rantes ácidos. Lavar dos veces el Eter Dietílico esta-bilizado con p6 ppm de BHT PA-ACS-ISO emplea-do en la extracción con 5 ml de Agua PA-ACS, conel objeto de eliminar el Sodio Hidróxido; a continua-ción, añadir 5 ml de Acido Acético diluido a la faseetérea; la presencia de un colorante básico coloreala fase ácido-acuosa; la presencia de este coloran-te puede confirmarse por su fijación sobre lana mor-dentada.

La fase ácido-acuosa obtenida se alcaliniza conAmoníaco 20% (en NH3) PRS previamente diluido al5% con Agua PA-ACS; añadir 0,5 g de lana mor-dentada y llevar a ebullición durante un minuto;aclarar la lana bajo el chorro de agua fría; de per-manecer coloreada, el vino contiene un colorantebásico.

45.4.1.1. Caracterización por cromatografía depapel. A partir de la fase acético-acuosa que con-tiene el colorante básico, concentrar hasta 0,5 ml.Si el colorante ha sido fijado sobre lana, añadir aésta 10 ml de Agua PA-ACS, 10 gotas de AcidoAcético glacial PA-ACS-ISO y llevar a ebullición, yuna vez retirada la lana previamente escurrida, con-centrar la solución hasta 0,5 ml.

Depositar sobre papel de cromatografía 20microlitros de la anterior solución concentrada a3 cm del borde lateral y a 2 cm del borde inferior.Introducir dicho papel en una cubeta que conten-ga el solvente 45.3.7. de forma que su borde infe-rior esté sumergido en el solvente 1 cm. Retirar ydejar secar al aire cuando se haya alcanzado unaaltura del frente del solvente comprendido entre 20o 25 cm. Identificar el colorante por medio desoluciones de colorantes sintéticos básicosdepositados simultáneamente sobre el cromato-grama.

45.4.2. Determinación de colorantes de carácterácido.

Partir del residuo de vino concentrado a un ter-cio y neutralizado después de su extracción conEter Dietílico estabilizado con p6 ppm de BHTPA-ACS-ISO; si no se realizó la determinación decolorante de carácter básico, poner 200 ml de vinoen un Erlenmeyer de 500 ml y llevar a ebulliciónhasta que el vino se reduzca a un tercio de su volu-men. En uno u otro caso, añadir 3 ml de Acido Clor-hídrico diluido (45.3.5) y 0,5 g de lana blanca; hervirdurante cinco minutos, decantar el líquido y lavar lalana con Agua PA-ACS abundante. En el Erlenme-yer que contiene la lana, añadir 100 ml de Agua PA-ACS y 2 ml de Acido Clorhídrico diluido (45.3.5);hervir durante cinco minutos, decantar el líquidoácido y repetir esta operación hasta que el líquidode lavado sea incoloro. Después de haber lavadobien la lana, para eliminar completamente el líquidoácido añadir 50 ml de Agua PA-ACS y 10 gotas deAmoníaco 20% (en NH3) PRS; llevar a ebulliciónsuave durante diez minutos a fin de disolver la mate-ria colorante artificial que eventualmente se haya

fijado sobre la lana. A continuación, retirar la lana delErlenmeyer, llevar el volumen de líquido a 100 ml yhervir hasta evaporación completa del AmonioHidróxido; una vez conseguida dicha evaporación,añadir 2 ml de Acido Clorhídrico diluido (45.3.5)(comprobar que el líquido haya adquirido reacciónfrancamente ácida, llevando una gota de éste sobreel papel indicador). Poner en el Erlenmeyer 60 mgde lana blanca y llevar a ebullición durante cincominutos; retirar la lana y aclararla bajo el chorro deagua fría. Si después de esta operación la lana tomacoloración roja, cuando se trata de vino tinto, oamarilla, si se trata de vino blanco, confirma la pre-sencia de materia colorante orgánica artificial denaturaleza ácida. Si la coloración adquirida es débilo dudosa, repetir el tratamiento con Amoníaco 20%(en NH3) PRS y hacer una segunda fijación sobreuna hebra de lana de 30 mg. Si transcurrida estasegunda fijación se obtiene una coloración rosa,aunque sea débil, se deduce la presencia de colo-rante ácido. Recurrir para un análisis más completoa nuevas fijaciones-eluciones (hasta 4 o 5), operan-do siempre de forma idéntica a la empleada para lasegunda fijación hasta que se obtenga una colora-ción rosácea que, aunque sea pálida, no ofrecelugar a dudas.

45.4.2.1. Caracterización por cromatografía depapel.

Añadir sobre la hebra de lana coloreada 10 ml deAgua PA-ACS, 10 gotas de Amoníaco 20% (en NH3)PRS y llevar a ebullición; retirar la lana previamenteescurrida y concentrar la solución amoniacal hasta0,5 ml. Depositar sobre papel de cromatografía 20microlitros de la anterior solución concentrada, a3 cm del borde lateral y a 2 cm del borde inferior;introducir dicho papel en una cubeta que contengael solvente 45.3.8 de forma que su borde inferioresté sumergido en el solvente 1 cm. Retirar y dejarsecar al aire cuando se haya alcanzado una alturadel frente del solvente comprendida entre 20 o25 cm. Identificar el colorante por medio de solu-ciones de colorantes sintéticos ácidos depositadossimultáneamente sobre el cromatograma.

45.5. Referencia.45.5.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. A43k, páginas 1-6.

46. MERCURIO

46.1. Principio.Oxidación de la materia orgánica con ácido nítri-

co y crómico, reducción de las sales mercúricas poracción de Sn2+, volatilización del Hg metálico, arras-tre del mismo por corriente de aire y determinaciónde su absorbancia a 253,7 nanómetros.

Este método es aplicable a concentraciones demercurio superiores a 0,05 mg/l.

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Page 80: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

46.2. Material y aparatos.46.2.1. Espectrofotómetro de absorción.46.2.2. Lámpara de mercurio.46.2.3. Aparato para la reducción del ion mercú-

rico a mercurio metal y posterior arrastre de éstecon corriente de aire (figura 46.1).

46.2.4. Matraces de reacción de forma cónicade 100 ml de capacidad.

46.2.5. Bomba peristáltica accionada con motorprovisto de vaciador de velocidad.

46.2.6. Llave de purga en T de teflón.46.2.7. Tubo flexible de tigón de 1/8 pulgada de

diámetro interior y un metro, aproximadamente, delongitud.

46.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO471058 Acido Sulfúrico 95-98%

(máx 0,0000005% de Hg) PA-ACS-ISO

131074 Agua PA-ACS471153 Cromo VI Oxido

(máx 0,000005% de Hg) PA-ACS471303 Estaño ll Cloruro

(máx 0,000005% de Hg) PA-ACS-ISO121925 Hidroxilamonio Sulfato PA313186 Mercurio solución patrón

Hg = 1,000 ± 0,002 g/l AA251450 Parafina P. F. 55-60º C en pastilla DC

46.3.1. Acido Sulfúrico 95-98% (máximo0,0000005% Hg) PA-ACS-ISO, exento de mercurio.

46.3.2. Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS.46.3.3. Cromo VI Oxido (máx 0,000005% Hg)

PA-ACS exento de mercurio.46.3.4. Cromo VI Oxido (máx 0,000005% Hg)

PA-ACS exento de mercurio.46.3.5. Solución de Acido Crómico al 5%. Llevar

a un vaso de 500 ml 25 g de Cromo VI Oxido y

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Figura 46.l. Esquema de la instalación

Page 81: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

disolverlos en 25 ml de Agua PA-ACS. Añadir lenta-mente y agitando Acido Sulfúrico concentradohasta enrasar a 500 ml cuando la solución esté fría.

46.3.6. Solución reductora.- Solución al 40% deEstaño II Cloruro en Agua PA-ACS, acidulada conAcido Sulfúrico.

46.3.7. Solución patrón.- Mercurio soluciónpatrón Hg = 1,000 ± 0,002 g/l AA o preparar disol-viendo 1,080 g de 131426 Mercurio ll oxido amari-llo PA en 100 ml de 131019 Acido Clohídrico 35%PA-ISO a 1000 ml. En ambos casos, mediante dilu-ción 1/1.000 se obtiene la solución de 1 mg/l.

46.4. Procedimiento.46.4.1. Preparación de la muestra.Tomar 1 ml de muestra y colocarla dentro de un

matraz cónico. Añadir 2 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO. Cerrar con película de Parafina P. F. 55-60°C en pastilla DC y dejarlo en digestión durantesesenta minutos a temperatura ambiente. Añadir 5 mlde Acido Crómico al 5%, refrigerando durante la adi-ción en baño de hielo. Tapar el matraz y dejarlodurante sesenta minutos, agitando cada diez minu-tos. Transcurrido este tiempo, añadir 15 ml de AguaPA-ACS, enfriando durante la adición con baño dehielo. Una vez fríos los matraces, añadir 2 g, aproxima-damente, de Hidroxilamonio Sulfato PA, agitar y aco-plar los matraces al aparato de medida. Añadir 10 mlde solución reductora. Continuar como en 46.4.3.

46.4.2. Construcción de la curva patrón.A partir de 46.3.7, tomar 0; 5; 10; 15; 20 y 25 ml.Tratarlas a continuación como se indica en 46.4.1.Estas soluciones contienen 0; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 y0,5 partes por millón de Hg. Anotar las absorban-cias obtenidas frente a las concentraciones corres-pondientes.

46.4.3. Determinación.Efectuar la lectura de la absorbancia de la mues-

tra. Una vez preparada según 46.4.1.

46.5. Referencias.46.5.1. A. Bouchard: “Determination of mercury

aftersoon temperature digestion by flamaless ato-mic absorption.” Atom. Absorpt. Newsletter, vol. 12,número 5 (115-117), 1973.

46.5.2. A. García de Jalón y J. Frías: “Un méto-do para la determinación de mercurio en vinos me-diante espectrofotometría de absorción atómica sinllama.” Ministerio de Agricultura. Abril 1972.

47. PLOMO

47.1. Principio.Determinación del plomo por A. A. después de

una concentración previa con objeto de conseguirresultados suficientemente precisos.

47.2. Material y aparatos.47.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.

47.2.2. Lámpara de plomo.47.2.3. Cápsula de platino de 100 ml de capaci-

dad o similar.47.2.4. Baño de arena.47.2.5. Mufla con circulación de aire.47.2.6. Matraces de 10; 100 y 1.000 ml de

capacidad.

47.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313189 Plomo solución patrón

Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA

47.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.47.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.47.3.3. Acido Nítrico al 1%. Diluir Acido Nítrico

70% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.47.3.4. Plomo solución patrón

Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA o preparar disolviendo1,598 g de 131473 Plomo ll Nitrato PA enrasando a1.000 ml con Acido Nítrico al 1%.

47.4. Procedimiento.47.4.1. Preparación de la muestra. Poner 100 ml

de la muestra en una cápsula de platino y llevarla aevaporación hasta consistencia siruposa en bañode arena. Añadir a continuación 2 ml de Acido Sul-fúrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en elbaño de arena. Seguidamente introducir la cápsulaen la mufla y mantenerla durante dos horas a450°C; transcurrido dicho tiempo, sacarla y dejarlaenfriar. Añadir 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO,evaporar en el baño de arena e introducir en lamufla, repitiendo esta operación hasta obtener ceni-zas blancas. Disolver a continuación las cenizas con1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml deAgua PA-ACS, una vez disueltas filtrar y recoger elfiltrado en un matraz de 10 ml, lavando la cápsula yel filtro con Agua PA-ACS hasta el enrase.

47.4.2. Construcción de la curva patrón.- A par-tir de la solución patrón 47.3.4, tomar alícuotas de0,2; 0,4; 0,6; 0,8 y 1 ml, y llevar a 100 ml con AcidoNítrico al 1% (v/v).

El contenido en plomo de estas soluciones es,respectivamente, 2; 4; 6; 8 y 10 ppm Anotar lasabsorbancias obtenidas frente a las concentracio-nes correspondientes.

47.4.3. Determinación.- Efectuar la lectura direc-ta de la muestra preparada según 47.4.1 a 283,3 nm.

47.5. Cálculo.Calcular el contenido en plomo, expresado en

ppm mediante comparación con la correspondientecurva patrón y teniendo en cuenta el factor de dilu-ción.

81

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48. RELACION P/a

48.1. Principio.Estimación de los contenidos relativos de gluco-

sa y fructosa, en mostos, vinos dulces y mistelas,mediante el establecimiento de la relación entre azú-cares reductores y desviación polarimétrica a 20°C.

48.2. Material y aparatos.48.2.1. Como en 7(a).2; 7(b).2, o 7(c).2.48.2.2. Polarímetro con luz monocromática ama-

rilla (lámpara de vapor de sodio) y tubo de 20 cm.

48.3. Procedimiento.48.3.1. Determinar el contenido en azúcares

reductores según el método 7(a), 7(b) o 7(c).48.3.2. Medida de la desviación polarimétrica.Una vez verificado el correcto reglaje del polarí-

metro, comprobando la correspondencia del valor“cero” con la existencia de un campo luminoso uni-forme, ajustándolo si es necesario, introducir en eltubo del polarímetro el líquido de defecación, sindiluir, incoloro y limpio, utilizando para la determina-ción de azúcares reductores, evitando la formaciónde burbujas de aire. Anotar la temperatura del líqui-do que debe ser lo más próxima posible a 20°C.

Efectuar la lectura de la desviación polarimétricavarias veces sucesivas, tomando la media de losresultados obtenidos.

48.4. Cálculo.Determinar el poder rotatorio y la relación P/a

aplicando las fórmulas siguientes:a20 = at+ at (t - 20) x KP/a20 (expresado con su correspondiente signo)

siendo:

P = g/l de azúcares reductores.

at = poder rotatorio en divisiones sacarimétricasa t°C (un grado polarimétrico = 4,615 divisionessacarimétricas).

a20 = poder rotatorio en divisiones sacarimétri-cas a20°C.

t = temperatura del líquido en el momento de lalectura.

K = coeficiente variable con la naturaleza de losazúcares, dado por la tabla I en función del valorP / at .

48.5. Referencias.48.5.1. J. Blouin. Manual practique d’analyse

des Moûts et Vins. 1977.48.5.2. J. Ribereau Gayon, E. Peynaud. Scien-

ces et Techniques du Vin. Tome I. 1972.

49. ANHIDRIDO CARBONICO(Método aprobado pero nopublicado en el B.O.E.)

49.1. Principio.Después de la oxidación en frío del anhídrido

sulfuroso por el hidrógeno peróxido en presenciadel ion de cobre II, el anhídrido carbónico desplaza-do del vino por una solución tampón de fosfato yácido fosfórico es arrastrado en frío en circuitocerrado por una corriente de aire mediante unapequeña bomba de circulación hacia una soluciónvalorada de bario hidróxido. El exceso de esta basese determina inmediatamente con una soluciónvalorada de ácido clorhídrico en presencia de unindicador mixto de timolftaleína-fenolftaleína.

Aplicable a contenidos inferiores a 6 g/l.

49.2. Material y aparatos.49.2.1. Aparato de vidrio para extracción del

CO2 en circuito cerrado (fig. l) compuesto de:- un matraz de 250 ml (1) provisto de una bola

antiespuma sobre la que va adaptada unabureta (5);

- dos barboteadores (2) y (3);- una bomba (4) que garantice la circulación del

aire en el circuito (2 a 10 burbujas por segundo).

49.3. Reactivos.181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO121085 Etanol 96% v/v PA131325 Fenolftaleína PA-ACS141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)

PRS

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TABLA I

p/at K

- 1,19 0,006- 1,41 0,007- 1,73 0,008- 2,24 0,009- 2,64 0,012- 3,20 0,012- 4,06 0,013- 5,56 0,014- 8,8 0,022- 21 0,042

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121677 Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato PA131687 Sodio Hidróxido lentejas 97%

PA-ACS-ISO182157 Sodio Hidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV171739 Timolftaleína RE

49.3.1. Solución de Sodio Hidróxido 0,2N: En unmatraz aforado diluir exactamente a 1:1 SodioHidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV con Agua PA-ACS.

49.3.2. Solución de Bario Cloruro de 90 g deBaCl2. 2H20 por litro. Disolver Bario Cloruro 2-hidra-to PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.

49.3.3. Solución de Bario Hidróxido.Mezclar 2 volúmenes de la solución de Bario

Cloruro de 90 g/l con 1 volumen de solución deSodio Hidróxido 0,2N. Conservar en recipiente queevite la carbonatación.

49.3.4. Solución tampón:Disolver en Agua PA-ACS recientemente hervida

400 g de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato PA yañadir 50 ml de Acido orto-Fosfórico (d 20°C =1,63): Diluir Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISOcon Agua PA-ACS hasta la densidad indicada quecorresponde a, aproximadamente, 79,4% y com-pletar hasta 1 l con Agua PA-ACS recientementehervida.

49.3.5. Sodio Hidróxido al 50% (p/p).Solución acuosa (d = 1,525) que contenga 50 g

de Sodio Hidróxido lentejas 97% PA-ACS-ISO en100 g de solución.

Utilizarla 15 días después de su preparaciónpara lograr la decantación del eventual Na2CO3.Esta solución debe ser transparente.

49.3.6. Hidrógeno Peróxido en solución de 10volúmenes. Esta solución contiene 30,4 g de H2O2por litro y libera 10 veces su volumen de oxígenopor descomposición catalítica con MnO2 en medioalcalino.

49.3.7. Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO,pulverizado.

49.3.8. Disolver 1 g de Fenolftaleína PA-ACS y0,5 g de Timolftaleína RE en Etanol 96% v/v PA,neutro y completar hasta 100 ml.

49.3.9. Acido Clorhídrico 0,2N. En un matrazaforado diluir a 1:5 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SVcon Agua PA-ACS y determinar el factor de la solu-ción 0,2N obtenida.

49.4. Procedimiento.49.4.1. Vinos que contienen menos de 4 g de

CO2 por litro.La botella de vino se debe mantener en posición

horizontal durante una noche a 0°C.Colocar en el barboteador (2) 150 ml exacta-

mente medidos de solución de Bario Hidróxido.Introducir en el matraz (1) algunos cristales de

Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml deHidrógeno Peróxido de 10 volúmenes. Poner, concuidado, en un matraz previamente enjuagado y

enfriado a 0°C, 50 ml de vino. Colocar el matraz (1)en el circuito y esperar 10 minutos.

Conectar la bomba, e introducir mediante labureta (5) 20 ml de solución tampón. Dejar en fun-cionamiento 30 minutos.

Parar la bomba y tomar del barboteador (2), 50 mlde la solución de Bario Hidróxido; valorarla con Aci-do Clorhídrico 0,2N con indicador mixto. Sea V2 elnúmero de ml gastados.

Es indispensable valorar diariamente el BarioHidróxido utilizando 150 ml. Sea V1 el número de mlde Acido Clorhídrico 0,2N necesarios.

49.4.2. Vinos que contienen más de 4 g de CO2por litro.

La botella debe mantenerse en posición horizon-tal a 0°C durante una noche. Abrir la botella conprecaución. Para botellas de 750 ml sustituir 50 mldel vino por 50 ml de Sodio Hidróxido al 50%haciendo resbalar suavemente la solución por elcuello de la botella. Cerrar ésta inmediatamente yhomogeneizar su contenido agitándola; colocarlaseguidamente en un baño de agua a 20°C.

Colocar en el barboteador (2) 300 ml exactos desolución de Bario Hidróxido.

Introducir en el matraz (1) unos cristales deCobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml deHidrógeno Peróxido de 10 volúmenes.

Introducir lentamente la pipeta en la botella paraevitar desprendimiento de CO2 y tomar 50 ml delvino y echarlos al matraz. Conectarlo al aparato ydejarlo reposar 10 minutos.

El volumen del vino tomado se deberá reducir a25 ml, si éste contiene más de 8 g/l de anhídridocarbónico.

Conectar la bomba, e introducir en el matraz (1)con una bureta (5), 40 ml de solución tampón.Ponerla en funcionamiento durante 30 minutos.

Parar la bomba y tomar del barboteador (2) 50 mlde la solución de Bario Hidróxido. Valorarla con Aci-do Clorhídrico 0,2N en presencia de indicador mix-to. Sea V2 el número de ml utilizados. Sea V1 elnúmero de ml de Acido Clorhídrico 0,2N consumi-dos para valorar 150 ml de solución de Bario Hidró-xido.

49.5. Cálculo.49.5.1. Para vinos que contienen menos de 4 g

de CO2 por litro.Cantidades de CO2 en gramos por l en el vino.CO2(g/l) = 0,088 (V1- 3V2).

49.5.2. Para vinos que contienen más de 4 g deCO2 por litro.

Medir el volumen de líquido que queda en la bote-lla y añadir 50 o 25 ml de la muestra tomada para ladeterminación. Sea V el volumen total así determina-do. Calcular seguidamente el factor de corrección f,necesario para tener en cuenta los 50 ml de SodioHidróxido al 50% introducidos en la botella:

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Vf = ————

V - 50

Si la muestra para la determinación es de 50 ml,la cantidad de anhídrido carbónico en g/l es (2V1 -6V2) . 0,088 . f.

Este resultado debe multiplicarse por 2 si latoma de muestra es de 25 ml.

49.6. Referencias.49.6.1. Jaulmes (P.), Meth. An. 1972, n° 422;

Ann. Fals. Exp. chim. 1973, n° 708, 96-109.49.6.2. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. O. I. V. A-39, 1978.

50. ETANAL(Método aprobado pero nopublicado en el B.O.E.)

50.1. Principio.El etanal se determina en el vino, previamente

decolorado con carbón, midiendo a 570 nm la colo-ración verde o violeta que da con el sodio nitropru-siato y la piperidina.

50.2. Material y aparatos.50.2.1. Espectrofotómetro capaz de efectuar

lecturas a 570 nm.

50.3. Reactivos.131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO131064 Acido Sulfuroso solución 6% PA-ACS131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121237 Carbón Activo polvo PA

Etanal171327 Fenolftaleína solución 1% RE162377 Piperidina PS

182415 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV121705 Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA181772 Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV

50.3.1. Solución de Piperidina al 10% (v/v).Preparar antes de cada medida la mezcla de 2 mlde Piperidina PS con 18 ml de Agua PA-ACS.

50.3.2. Solución de Sodio Nitroprusiato al 0,4%(p/v).

En un matraz aforado de 250 ml disolver 1 g deSodio Nitroprusiato 2-hidrato PA, pulverizado.Completar hasta el enrase con Agua PA-ACS.

50.3.3. Carbón Activo polvo PA.50.3.4. Acido Clorhídrico diluido al 25% (v/v)

(aproximadamente 102 g/l). Diluir convenientemen-te Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PA-ACS.

50.3.5. Solución alcalina.Disolver 8,75 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO en

400 ml de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV. Comple-tar hasta un litro con Agua PA-ACS.

50.4. Procedimiento.50.4.1. Determinación del Etanal. Colocar 25 ml de líquido a analizar en un Erlen-

meyer de 100 ml, adicionar unos 2 g de CarbónActivo polvo PA. Agitar enérgicamente durantealgunos segundos, dejar reposar durante 2 minutosy filtrar sobre un filtro de pliegues de poro fino paraobtener un filtrado claro.

2 ml de filtrado incoloro se colocan en un Erlen-meyer de 100 ml y se adiciona agitando 5 ml de solu-ción de Sodio Nitroprusiato y 5 ml de solución dePiperidina, mezclar y colocar inmediatamente la mez-cla en la cubeta de lectura de 10 mm de espesor. La

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Figura 1

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coloración obtenida que varía del verde al violeta, semide a 570 nm con relación al aire. Esta coloraciónaumenta para disminuir seguidamente con rapidez.Elegir como valor definitivo la máxima absorbanciaque se obtiene al cabo de unos 50 segundos.

La cantidad de Etanal contenido en el líquidoanalizado se deduce de una curva patrón.

50.4.2. Construcción de la curva patrón.Solución patrón de Etanal combinado con el

Anhídrido Sufuroso.Tomar Acido Sulfuroso solución 6% PA-ACS,

valorar en SO2 determinar su cantidad exactamidiéndola con Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV.

En un matraz aforado de 1 litro colocar el volu-men de esta solución que corresponda a 1.500 mgde SO2. Introducir en el matraz, ayudados con unembudo, alrededor de 1 ml de Etanal destiladorecientemente y recogido sobre una mezcla refrige-rante. Enrasar a 1 litro con Agua PA-ACS, mezclar ydejar durante la noche.

La cantidad exacta de esta solución patrón deEtanal combinada con el SO2 debe determinarsecomo sigue:

En un Erlenmeyer de 500 ml, colocar 50 ml desolución patrón de Etanal, adicionar 20 ml del AcidoClorhídrico diluido y 100 ml de Agua PA-ACS. Oxi-dar el SO2 libre con Yodo 0,05 mol/l (0,1) SV en pre-sencia de solución de Almidón soluble RE hastacoloración azul débil.

Añadir unas gotas de Fenolftaleína solución 1%RE y la suficiente solución alcalina hasta la desapa-rición de la coloración azul y aparición de color rosa.Valorar el SO2 combinado al Etanal con el Yodo0,05 mol/l (0,1) SV hasta coloración azul débil. Sien-do n el volumen gastado, la solución patrón de Eta-nal combinado con el SO2 contiene: 44,05 n mg deEtanal por litro.

Preparación de la curva patrón: En matraces aforados de 100 ml colocar sucesi-

vamente 5-10-15-20 y 25 ml de la solución patrón.Enrasar con Agua PA-ACS. Estas diluciones corres-ponden a cantidades de Etanal próximas a 40-80-120-160 y 200 mg/l. La cantidad exacta de las dilu-ciones debe calcularse a partir del contenido enEtanal de la solución patrón determinada anterior-mente.

Proceder a la medida del Etanal sobre 2 ml decada una de estas soluciones como se indica ante-riormente. La representación gráfica de las absor-bancias de estas soluciones en función de la canti-dad de Etanal es una recta que no pasa por elorigen.

50.5. CálculoCalcular el contenido en Etanal mediante com-

paración con la correspondiente curva patrón.

50.6. Observaciones.Si, de forma excepcional, el líquido a analizar

contiene Etanal libre, no combinado con el SO2 seránecesario, antes de empezar a determinar el Etanaltotal, pasarlo previamente al estado de combina-ción con el SO2. Para efectuar esto, adicionar a unaparte del líquido a analizar un pequeño exceso deSO2 libre y esperar algunas horas antes de proce-der a la determinación.

50.7. Referencias.50.7.1. H. Rebelein (1970), Dtsch. Lebensmit.

Rdsch 1970. 66, 5-6.50.7.2. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. O. I. V. A-37, 1978.

51. PRESION DEL ANHIDRIDOCARBONICO

51.1. Principio.Medida de la presión gaseosa de un recipiente

cerrado herméticamente mediante un aparato ade-cuado que disponga de un manómetro.

51.2. Material y aparatos.51.2.1. Equipo manométrico que conste de las

siguientes partes:51.2.1.1. Aguja perforadora del tapón o del reci-

piente, hueca, con válvula que obture el orificio deentrada de gas a la misma y sistema estancode adaptación al tapón o recipiente.

51.2.1.2. Conducto que ponga en comunica-ción la aguja con el manómetro.

51.2.1.3. Manómetro que permita lecturas dehasta 10 kg/cm2.

51.3. Procedimiento.Mantener la muestra en reposo durante dos

horas al menos. Llevar la temperatura aproximada-mente a 20°C y perforar el tapón o el recipientesegún el caso. Abrir la válvula con lo que el gaspasa al manómetro. Leer la presión que indica elmanómetro.

51 4. Expresión de los resultados.La presión se expresará en atmósferas a 20°C.

1 atm. = 760 mm de Hg = 1.034 kg/cm2

52. ANTISEPTICOS Y ANTIFERMENTOS(Método microbiológico)

52.1. Principio.Comparación del desarrollo, en vino problema y

testigo, de las levaduras contenidas en láminas deagar-extracto de levadura glucosado, tras perma-necer sumergidas 48 horas en ellos.

52.2. Material y aparatos.52.2.1. Hematímetro.

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52.2.2. Cajas Petri.52.2.3. Portaobjetos rayados en zig-zag.52.2.4. Varilla en forma de U de unos 0,5 cm de

diámetro.52.2.5. Tubos de ensayo aforados a 10 ml.52.2.6. Tubos capaces de contener portaobje-

tos normales de microscopía.52.2.7. Autoclave.52.2.8. Microscopio.52.2.9. Estufa de cultivo.

52.3. Reactivos y medios de cultivo.141792 Agar (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX131074 Agua PA-ACS

Etanal403687 Extracto de levadura CULTIMED121341 D(+)-Glucosa PA

52.3.1. Solución acuosa de Etanal de 6,9 g/l (1 mlde esta solución combina 10 mg de SO2).

52.3.2. Mosto de 10º Bé. peptonado al 1 por1.000. Esterilizar en autoclave a 112°C durante 20minutos.

52.3.3. Agar-extracto de levadura glucosado:Extracto de levadura CULTIMED. . . . . 5 gD(+)-Glucosa PA . . . . . . . . . . . . . . . . 20 gAgar (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX . 17,5 gAgua PA-ACS . . . . . . . . . . . . . . . . 1.000 g

Una vez fundido en baño de agua, distribuir a razónde 10 ml por tubo y esterilizar a 120°C durante 20minutos.

52.3.4. Capa de levadura: Saccharomycesbayanus.

52.4. Procedimiento.52.4.1. Preparación del vino problema: Si la

dosis de SO2 libre es superior a 15 mg/l, proceder acombinación del exceso mediante la solución acuo-sa de Etanal, dejando transcurrir 24 horas, desdesu adición. Comprobar de nuevo que el contenidode SO2 libre es inferior a 15 m/l.

52.4.2. Preparación del vino testigo: Utilizar unvino de características lo más parecidas posibles alvino problema, especialmente en grado alcohólico.Respecto al SO2 libre se procederá como en 52.4.1

52.4.3. Siembra del Agar (USP, BP, F. Eur.)PRS-CODEX y formación de la película: Una vezfundidos en baño de agua los tubos con 10 ml deagar-extracto de levadura glucosado y cuando latemperatura baja a 45-50°C, sembrar, tras conteocon hematímetro, 5 millones de levaduras/ml (50millones por tubo) de un cultivo de 72 horas enmosto peptonado de 10° Bé.

Tras homogeneizar rápidamente los tubos sem-brados, verter su contenido sobre los portaobjetosrayados, situados en posición inclinada, apoyadossobre un brazo de la varilla en U colocada dentro dela caja Petri; el agar fundido deslizará uniformemen-

te sobre la superficie de cada portaobjeto, forman-do una lámína de agar. Acto seguido colocar hori-zontalmente los portaobjetos apoyando sobre losdos brazos de la varilla en U y dejar en reposodurante un par de horas.

52.4.4. Formación de colonias: Asegurada lasolidificación del medio sembrado, sumergir com-pletamente los portaobjetos en los tubos que con-tienen el vino problema y el vino testigo. Tapar noherméticamente los tubos y mantener en la estufade cultivo a 25°C durante 48 horas.

Finalizado este período eliminar el vino de lostubos, dejando los portaobjetos en el interior deellos en contacto con el aire y a 25°C.

52.4.5. Observación microscópica: Observar lasláminas inmediatamente después de sacadas delvino. Si no se aprecia desarrollo de colonias incubaren estufa a 25°C y repetir la observación microscó-pica a las 24, 48 y 72 horas si es necesario.

En los vinos de alto grado alcohólico puederetrasarse aún más el desarrollo de las colonias,como se comprueba en el vino testigo.

52.5. Interpretación de los resultados.La presencia franca de colonias indica la ausen-

cia de antisépticos y antifermentos.

52.6. Referencia.52.6.1. Método biológico español-argentino

para la investigación de la presencia de antisépticosen los vinos. E. Feduchy An. INIA. Serv. Tecnol. agr.N 2. 1975.

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Productos derivadosde la uva:Zumos de uva

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METODOS DE ANALISIS

1. GRADO BRIX

1.1. Principio.Medida del índice de refracción y conversión en

grados Brix mediante las tablas adjuntas.

1.2. Material y aparatos.1.2.1. Refractómetro provisto del equipo nece-

sario para mantener la temperatura a 20ºC.1.2.2. Matraces o recipientes de vidrio que cie-

rren herméticamente.

1.3. Procedimiento.Colocar el refractómetro en un lugar iluminado

con luz difusa o frente a una fuente de luz artificial.Circular agua a temperatura constante a 20°C a

través de los prismas del refractómetro. Ajustar elinstrumento colocando unas gotas de agua destila-da entre los prismas. El índice de refracción deberá

ser 1,3330; si no es así corregir adecuadamente lalectura.

Situar el zumo de uva en un envase hermética-mente cerrado en un baño a 20°C y esperar a quealcance dicha temperatura. Tomar con una pipetaun poco de zumo de uva y poner unas gotas entrelos prismas del refractómetro. Medir el índice derefracción.

1.4. Expresión de los resultados.A partir del valor obtenido del índice de refrac-

ción se obtiene el grado Brix mediante la tabla I.

1.5. Observaciones.1.5.1. Si se emplea otra temperatura para medir

el índice de refracción, utilizar la tabla II para lacorrección de temperatura a 20°C .

1.6. Referencias.Official Methods of Analysis, AOAC-1984.

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TABLA I

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

n Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

1,3330 0,0091,3331 0,0781,3332 0,1491,3333 0,2531,3334 0,2881,3335 0,3581,3336 0,4281,3337 0,4981,3338 0,5671,3339 0 6371,3340 0,7071,3341 0,7761,3342 0,8461,3343 0,9151,3344 0,9851,3345 1,0541,3346 1,1241,3347 1,1931,3348 1,2631,3349 1,3321,3350 1,4011,3351 1,4701,3352 1,5401,3353 1,6091,3354 1,6781,3355 1,7471,3356 1,815

1,3357 1,8851,3358 1,9541,3359 2,0231,3360 2,0921,3361 2,1611,3362 2,2301,3363 2,2991,3364 2,3671,3365 2,4361,3366 2,5051,3367 2,5741,3368 2,6421,3369 2,7111,3370 2,7791,3371 2,8481,3372 2,9171,3373 2,9851,3374 3,0531,3375 3,1221,3376 3,1901,3377 3,2591,3378 3,3271,3379 3,3951,3380 3,4631,3381 3,5321,3382 3,6001,3383 3,668

1,3384 3,7361,3385 3,8041,3386 3,8721,3387 3,9401,3388 4,0081,3389 4,0761,3390 4,1441,3391 4,2121,3392 4,2791,3393 4,3471,3394 4,4151,3395 4.4831,3396 4,5501,3397 4,6181,3398 4,6861,3399 4,7531,3400 4,8211,3401 4,8881,3402 4,9561,3403 5,0231,3404 5,0911,3405 5,1581,3406 5,2251,3407 5,2931,3408 5,3601,3409 5,4271,3410 5,494

1,3411 5,5621,3412 5,6291,3413 5,6961,3414 5,7631,3415 5,8301,3416 5,8971,3417 5,9641,3418 6,0311,3419 6,0981,3420 6,1651,3421 6,2311,3422 6,2981,3423 6,3651,3424 6,4321,3425 6,4981,3426 6,5651,3427 6,6321,3428 6,6981,3429 6,7651,3430 6,8311,3431 6,8981,3432 6,9641,3433 7,0311,3434 7,0971,3435 7,1641,3436 7,2301,3437 7,296

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90

1,3438 7,3621,3439 7,4291,3440 7,4951,3441 7,5611,3442 7,6271,3443 7,6931,3444 7,7591,3445 7,8251,3446 7,8911,3447 7,9571,3448 8,0231,3449 8,0891,3450 8,1551,3451 8,2211,3452 8,2871,3453 8,3521,3454 8,4181,3455 8,4841,3456 8,5501,3457 8,6151,3458 8,6811,3459 8,7461,3460 8,8121,3461 8,8781,3462 8,9431,3463 9,0081,3464 9,0741,3465 9,1391,3466 9,2051,3467 9,2701,3468 9,3351,3469 9,4001,3470 9,4661,3471 9,5311,3472 9,5961,3473 9,6611,3474 9,7261,3475 9,7911,3476 9,8561,3477 9,9211,3478 9,9861,3479 10,0511,3480 10,1161,3481 10,1811,3482 10,2461,3483 10,3311,3484 10,3751,3485 10,4401,3486 10,5051,3487 10,5701,3488 10,6341,3489 10,699

n Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

1,3490 10,7631,3491 10,8281,3492 10,8921,3493 10,9571,3494 11,0211,3495 11,0861,3496 11,1501,3497 11,2151,3498 11,2791,3499 11,3431,3500 11,4071,3501 11,4721,3502 11,5361,3503 11,6001,3504 11,6641,3505 11,7231,3506 11,7921,3507 11,8561,3508 11,9201,3509 11,9841,3510 12,0481,3511 12,1121,3512 12,1751,3513 12,2401,3514 12,3041,3515 12,3681,3516 12,4311,3517 12,4951,3518 12,5591,3519 12,6231,3520 12,6861,3521 12,7501,3522 12,8131,3523 12,8771,3524 12,9401,3525 13,0041,3526 13,0671,3527 13,1311,3528 13,1941,3529 13,2581,3530 13,3211,3531 13.3841,3532 13,4481,3533 13,5511,3534 13,5741,3535 13,6371,3536 13,7001,3537 13,7631,3538 13,8261,3539 13,8901,3540 13,9531,3541 14,016

1,3542 14,0791,3543 14,1411,3544 14,2041,3545 14,2671,3546 14,3301,3547 14,3931,3548 14,4561,3549 14,5181,3550 14,5811,3551 14,6441,3552 14,7071,3553 14,7591,3554 14,8321,3555 14,8941,3556 14,9571,3557 15,0191,3558 15,0821.3559 15.1441,3560 15,2071,3561 15,2691,3562 15,3321,3563 15,3941,3564 15,4561,3565 15,5181,3566 15,5811,3567 15,6431,3568 15,7051,3569 15,7671,3570 15,8291,3571 15,8911,3572 15,9531,3573 16,0161,3574 16,0781,3575 16,1401,3576 16,2011,3577 16,2631,3578 16,3251,3579 16,3871,3580 16,4491,3581 16,5111,3582 16,5731,3583 16,6341,3584 16,6961,3585 16,7581,3586 16,8191,3587 16,8811,3588 16,9431,3589 17,0041,3590 17,0651,3591 17,1271,3592 17,1891,3593 17,250

1,3594 17,3111,3595 17,3731,3596 17,4341,3597 17,4961,3598 17,5571,3599 17,6181,3600 17,6791,3601 17,7411,3602 17,8021,3603 17,8631,3604 17,9241,3605 17,9851,3606 18,0461,3607 18,1071,3608 18,1681,3609 18,2291,3610 18,2901,3611 18,3511,3612 18,4121,3613 18,4731,3614 18,5341,3615 18,5951,3616 18,6551,3617 18,7161,3618 18,7771,3619 18,8371,3620 18,8981,3621 18,9591,3622 19,0191,6223 19,0801,3624 19,1411,3625 19,2011,3626 19,2621,3627 19,3221,3628 19,3821,3629 19,4431,3630 19,5031,3631 19,5641,3632 19,6241,3633 19,6841,3634 19,7451,3635 19,8051,3636 19,8651,3637 19,9251,3638 19,9851,3639 20,0451,3640 20,1061,3641 20,1661,3642 20,2261,3643 20,2861,3644 20,3461,3645 20,406

Page 91: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

91

M

1,3646 20,4661,3647 20,5251,3648 20,5851,3649 20,6451,3650 20,7051,3651 20,7651,3652 20,8251,3653 20,8841,3654 20,9441,3655 21,0041,3656 21,0631,3657 21,1231,3658 21,1831,3659 21,2421,3660 21,3021,3661 21,3611,3662 21,4211,3663 21,4801,3664 21,5401,3665 21,5991,3666 21,6581,3667 21,7181,3668 21,7771,3669 21,8361,3670 21,8951,3671 21,9551,3672 22,0141,3673 22,0731,3674 22,1321,3675 22,1921,3676 22,2511,3777 22,3101,3678 22,3691,3679 22,4281,3680 22,4871,3681 22,5461,3682 22,6051,3683 22,6641,3684 22,7231,3685 22,7811,3686 22,8401,3687 22,8991,3688 22,9581,3689 22,0171,3690 23,0751,3691 23,1341,3692 23,1931,3693 23,2511,3694 23,3101,3695 23,3691,3696 23,4271,3697 23,486

n Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

1,3698 23,5441,3699 23,6031,3700 23,6611,3701 23,7201,3702 23,7781,3703 23,8361,3704 23,8951,3705 23,9531,3706 24,0111,3707 24,0701,3708 24,1281,3709 24,1861,3710 24,2441,3711 24,3021,3712 24,3611,3713 24,4191,3714 24,4771,3715 24,5351,3716 24,5931,3717 24,6511,3718 24,7091,3719 24,7671,3720 24,8251,3721 24,8831,3722 24,9411,3723 24,9981,3724 25,0561,3725 25,1141,3726 25,1721,3727 25,2301,3728 25,2871,3729 25,3451,3730 25,4031,3731 25,4601,3732 25,5181,3733 25,5761,3734 25,6331,3735 25,6911,3736 25,7481,3737 25,8061,3738 25,8631,3739 25,9211,3740 25,9781,3741 26,0351,3742 26,0931,3743 26,1501,3744 26,2071,3745 26,2651,3746 26,3221,3747 26,3791,3748 26,4361,3749 26,493

1,3750 26,5511,3751 26,6081,3752 26,6651,3753 26,7221,3754 26,7791,3755 26,8361,3756 26,8931,3757 26,9501,3758 27,0071,3759 27,0641,3760 27,1211,3761 27,1781,3762 27,2341,3763 27,2911,3764 27,3481,3765 27,4051,3766 27,4621,3767 27,5181,3768 27,5751,3769 27,6321,3770 27,6881,3771 27,7451,3772 27,8021,3773 27,8581,3774 27,9151,3775 27,9711,3776 28,0281,3777 28,0841,3778 28,1411,3779 28,1971,3780 28,2531,3781 28,3101,3782 28,3661,3783 28,4221,3784 28,4791,3785 28,5351,3786 28,5911,3787 28,6481,3788 28,7041,3789 28,7601,3790 28,8161,3791 28,8721,3792 28,9281,3793 28,9841,3794 29,0401,3795 29,0961,3796 29,1521,3797 29,2081,3798 29,2641,3799 29,3201,3800 29,3761,3801 29,432

1,3802 29,4881,3803 29,5441,3804 29,6001,3805 29,6551,3806 29,7111,3807 29,7671,3808 29,8231,3809 29,8781,3810 29,9341,3811 29,9291,3812 30,0451,3813 30,1011,3814 30,1561,3815 30,2121,3816 30,2671,3817 30,3231,3818 30,3781,3819 30,4341,3820 30,4891,3821 30,5441,3822 30,6001,3823 30,6551,3824 30,7111,3825 30,7661,3826 30,8211,3827 30,8761,3828 30,9321,3829 30,9871,3830 31,0421,3831 31,0971,3832 31,1521,3833 31,2071,3834 31,2621,3835 31,3171,3836 31,3721,3837 31,4281,3838 31,4821,3839 31,5371,3840 31,5921,3841 31,6471,3842 31,7021,3843 31,7571,3844 31,8121,3845 31,8671,3846 31,9221,3847 31,9761,3848 32,0311,3849 32,0861,3850 32,1401,3851 32,1951,3852 32,2501,3853 32,304

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92

1,3854 32,3591,3855 32,4141,3856 32,4681,3857 32,5231,3858 32,5771,3859 32,6321,3860 32,6861,3861 32,7411,3862 32,7951,3863 32,8491,3864 32,9041,3865 32,9581,3866 33,0131,3867 33,0671,3868 33,1211,3869 33,1751,3870 33,2301,3871 33,2841,3872 33,3381,3873 33,3921,3874 33,4461,3875 33,5001,3876 33,5551,3877 33,6091,3878 33,6631,3879 33,7171,3880 33,7711,3881 33,8251,3882 33,8791,3883 33,9331,3884 33,9871,3885 34,0401,3886 34,0941,3887 34,1481,3888 34,2021,3889 34,2561,3890 34,3101,3891 34,3631,3892 34,4171,3893 34,4711,3894 34,5241,3895 34,5781,3896 34,6321,3897 34,6851,3898 34,7391,3899 34,7931,3900 34,8461,3901 34,9001,3902 34,9531,3903 35,0071,3904 35,0601,3905 35,114

n Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

1,3906 35,1671,3907 35,2201,3908 35,2741,3909 35,3271,3910 35,3801,3911 35,4341,3912 35,4871,3913 35,5401,3914 35,5931,3915 35,6471,3916 35,7001,3917 35,7531,3918 35,8061,3919 35,8591,3920 35,9121,3921 35,9651,3922 36,0191 3923 36,0721,3924 36,1251,3925 36,1781,3926 36,2311,3927 36,2841,3928 36,3371,3929 36,3891,3930 36,4421,3931 36,4951,3932 36,5481,3933 36,6011,3934 36,6541,3935 36,7061,3936 36,7591,3937 36,8121,3938 36,8651,3939 36,9171,3940 36,9701,3941 37,0231,3942 37,0751,3943 37,1281,3944 37,1801,3945 37,2331,3946 37,2861,3947 37,3381,3948 37,3911,3949 37,4431,3950 37,4951,3951 37,5481,3952 37,6001,3953 37,6531,3954 37,7051,3955 37,7571,3956 37,8101,3957 37,862

1,3958 37,9141,3959 37,9671,3960 38,0191,3961 38,0711,3962 38,1231,3963 38,1751,3964 38,2281,3965 38,2801,3966 38,3321,3967 38,3841,3968 38,4361,3969 38,4881,3970 38 5401,3971 38 5921,3972 38,6441,3973 38,6961,3974 38,7841,3975 38,8001,3976 38,8521,3977 38,9041,3978 38,9551,3979 39,0071,3980 39,0591,3981 39,1111,3982 39,1631,3983 39,2141,3984 39,2661,3985 39,3181,3986 39,3701,3987 39,4211,3988 39,4731,3989 39,5251,3990 39,5761,3991 39,6281,3992 39 6791,3993 39 7311,3994 39,7821,3995 39,8341,3996 39,8851,3997 39,9371,3998 39,9881,3999 40,0401,4000 40,0911,4001 40,1421,4002 40,1941,4003 40,2451,4004 40,2951,4005 40,3481,4006 40,3991,4007 40,4501,4008 40,5011,4009 40,553

1,4010 40,6041,4011 40,6551,4012 40,7061,4013 40,7571,4014 40,8081,4015 40,8601,4016 40,9111,4017 40,9621,4018 41,0131,4019 41,0641,4020 41,1151,4021 41,1661,4022 41,2171,4023 41,2681,4024 41,3181,4025 41,3691,4026 41,4201,4027 41,4711,4028 41,5221,4029 41,5731,4030 41,6231,4031 41,6741,4032 41,7251,4033 41,7761,4034 41,8261,4035 41,8771,4036 41,9281,4037 41,9781,4038 42,0291,4039 42,0801,4040 42,1301,4041 42,1811,4042 42,2311,4043 42,2821,4044 42,3321,4045 42,3831,4046 42,4331,4047 42,4841,4048 42,5341,4049 42,5851,4050 42,6351,4051 42,6851,4052 42,7361,4053 42,7861,4054 42,8361,4055 42,8871,4056 42,9371,4057 42,9871,4058 43,0371,4059 43,0881,4060 43,1381,4061 43,188

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93

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1,4062 43,2381,4063 43,2881,4064 43,3381,4065 43,3881,4066 43,4391,4067 43,4891,4068 43,5391,4069 43,5891,4070 43,6391,4071 43,6891,4072 43,7391,4073 43,7891,4074 43,8381,4075 43,8881,4076 43,9381,4077 43,9881,4078 44,0381,4079 44,0881,4080 44,1381,4081 44,1871,4082 44,2371,4083 44,2871,4084 44,3371,4085 44,3861,4086 44,4361,4087 44,4861,4088 44,5351,4089 44,5851,4090 44,6351,4091 44,6841,4092 44,7341,4093 44,7831,4094 44,8331,4095 44,8821,4096 44,9321,4097 44,9811,4098 45,0311,4099 45,0801,4100 45,1301,4101 45,1791,4102 45,2281,4103 45,2781,4104 45,3271,4105 45,3761,4106 45,4261,4107 45,4751,4108 45,5241,4109 45,5741,4110 45,6231,4111 45,6721,4112 45,7211,4113 45,770

n Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

1,4114 45,8201,4115 45,8691,4116 45,9181,4117 45,9671,4118 46,0161,4119 46,0651,4120 46,1141,4121 46,1631,4122 46,2121,4123 46,2611,4124 46,3101,4125 46,3591,4126 46,4081,4127 46,4571,4128 46,5061,4129 46,5551,4130 46,6041,4131 46,6521,4132 46,7011,4133 46,7501,4134 46,7991,4135 46,8481,4136 46,8961,4137 46,9451,4138 46,9941,4139 47,0431,4140 47,0911,4141 47,1401,4142 47,1881,4143 47,2371,4144 47,2861,4145 47,3341,4146 47,3831,4147 47,4311,4148 47,4801,4149 47,5281,4150 47,5771,4151 47,6251,4152 47,6741,4153 47,7221,4154 47,7711,4155 47,8191,4156 47,8681,4157 47,9161,4158 47,9641,4159 48,0131,4160 48,0611,4161 48,1091,4162 48,1581,4163 48,2061,4164 48,2541,4165 48,302

1,4166 48,3501,4167 48,3991,4168 48,4471,4169 48,4951,4170 48,5431,4171 48,5911,4172 48,6391,4173 48,6871,4174 48,7351,4175 48,7841,4176 48,8321,4177 48,8801,4178 48,9281,4179 48,9761,4180 49,0231,4181 49,0711,4182 49,1191,4183 49,1671,4184 49,2151,4185 49,2631,4186 49,3111,4187 49,3591,4188 49,4071,4189 49,4541,4190 49,5021,4191 49,5501,4192 49,5981,4193 49,6451,4194 49,6931,4195 49,7411,4196 49,7881,4197 49,8361,4198 49,8841,4199 49,9311,4200 49,9791,4201 50,0271,4202 50,0741,4203 50,1221,4204 50,1691,4205 50,2171,4206 50,2641,4207 50,3121,4208 50,3591,4209 50,4071,4210 50,4541,4211 50,5021,4212 50,5491,4213 50,5961,4214 50,6441,4215 50,6911,4216 50,7381,4217 50,786

1,4218 50,8331,4219 50,8801,4220 50,9281,4221 50,9751,4222 51,0221,4223 51,0691,4224 51,1161,4225 51,1641,4226 51,2111,4227 51,2581,4228 51,3051,4229 51,3521,4230 51,3991,4231 51,4461,4232 51,4931,4233 51,5401,4234 51,5871,4235 51,6341,4236 51,6811,4237 51,7281,4238 51,7751,4239 51,8221,4240 51,8591,4241 51,9161,4242 51,9631,4243 52,0101,4244 52,0571,4245 52,1041,4246 52,1501,4247 52,1971,4248 52,2441,4249 52,2911,4250 52,3381,4251 52,3841,4252 52,4311,4253 52,4781,4254 52,5241,4255 52,5711,4256 52,6181,4257 52,6641,4258 52,7111,4259 52,7581,4260 52,8041,4261 52,8511,4262 52,8971,4263 52,9441,4264 52,9901,4265 53,0371,4266 53,0831,4267 53,1301,4268 53,1761,4269 53,223

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94

1,4270 53,2691,4271 53,3161,4272 53,3621,4273 53,4081,4274 53,4551,4275 53,5011,4276 53,5481,4277 53,5941,4278 53,6401,4279 53,6861,4280 53,7331,4281 53,7791,4282 53,8251,4283 53,8711,4284 53,9181,4285 53,9641,4286 54,0101,4287 54,0561,4288 54,1021,4289 54,1481,4290 54,1941,4291 54,2411,4292 54,2871,4293 54,3331,4294 54,3791,4295 54,4251,4296 54,4711,4297 54,5171,4298 54,5631,4299 54,6091,4300 54,6551,4301 54,7011,4302 54,7461,4303 54,7921,4304 54,8381,4305 54,8841,4306 54,9301,4307 54,9761,4308 55,0221,4309 55,0671,4310 55,1131,4311 55,1591,4312 55,2051,4313 55,2501,4314 55,2961,4315 55,3421,4316 55,3881,4317 55,4331,4318 55,4791,4319 55,5241,4320 55,5701,4321 55,616

n Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

1,4322 55,6611,4323 55,7071,4324 55,7521,4325 55,7981,4326 55,8441,4327 55,8891,4328 55,9351,4329 55,9801,4330 56,0261,4331 56,0711,4332 56,1161,4333 56,1621,4334 56,2071,4335 56,2531,4336 56,2981,4337 56,3431,4338 56,3891,4339 56,4341,4340 56,4791,4341 56,5251,4342 56,5701,4343 56,6151,4344 56,6601,4345 56,7061,4346 56,7511,4347 56,7961,4348 56,8411,4349 56,8871,4350 56,9321,4351 56,9771,4352 57,0221,4353 57,0671,4354 57,1121,4355 57,1571,4356 57,2021,4357 57,2471,4358 57,2921,4359 57,3371,4360 57,3821,4361 57,4271,4362 57,4721,4363 57,5171,4364 57,5621,4365 57,6071,4366 57,6521,4367 57,6971,4368 57,7421,4369 57,7871,4370 57,8321,4371 57,8771,4372 57,9211,4373 57,966

1,4374 58,0111,4375 58,0561,4376 58,1011,4377 58,1451,4378 58,1901,4379 58,2351,4380 58,2791,4381 58,3241,4382 58,3691,4383 58,4131,4384 58,4581,4385 58,5031,4386 58,5471,4387 58,5921,4388 58,6371,4389 58,6811,4390 58,7261,4391 58,7701,4392 58,8151,4393 58,8591,4394 58,9041,4395 58,9841,4396 58,9931,4397 59,0371,4398 59,0821,4399 59,1261,4400 59,1701,4401 59,2151,4402 59,2591,4403 59,3041,4404 59,3481,4405 59,3921,4406 59,4371,4407 59,4811,4408 59,5251,4409 59,5691,4410 59,6141,4411 59,6581,4412 59,7021,4413 59,7461,4414 59,7911,4415 59,8351,4416 59,8791,4417 59,9231,4418 59,9671,4419 60,0111,4420 60,0561,4421 60,1001,4422 60,1441,4423 60,1881,4424 60,2321,4425 60,276

1,4426 60,3201,4427 60,3641,4428 60,4081,4429 60,4521,4430 60,4961,4431 60,5401,4432 60,5841,4433 60,6231,4434 60,6721,4435 60,7161,4436 60,7591,4437 60,8031,4438 60,8471,4439 60,8911,4440 60,9351,4441 60,9791,4442 61,0231,4443 61,0661,4444 61,1101,4445 61,1541,4446 61,1981,4447 61,2411,4448 61,2851,4449 61,3291,4450 61,3721,4451 61,4161,4452 61,4601,4453 61,5031,4454 61,5471,4455 61,5911,4456 61,6341,4457 61,6781,4458 61,7211,4459 61,7651,4460 61,3091,4461 61,8521,4462 61,8951,4463 61,9391,4464 61,9831,4465 62,0261,4466 62,0701,4467 62,1131,4468 62,1561,4469 62,2001,4470 62,2431,4471 62,2871,4472 62,3301,4473 62,3731,4474 62,4171,4475 62,4601,4476 62,5031,4477 62,547

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95

M

1,4478 62,5901,4479 62,6331,4480 62,6771,4481 62,7201,4482 62,7631,4483 62,8061,4484 62,8491,4485 62,8931,4486 62,9361,4487 62,9791,4488 63,0221,4489 63,0651,4490 63,1081,4491 63,1521.4492 63,1951,4493 63,2381,4494 63,2811,4495 63,3241,4496 63,3671,4497 63,4101,4498 63,4531,4499 63,4961,4500 63,5391,4501 63,5821,4502 63,6251,4503 63,6681,4504 63,7111,4505 63,7541,4506 63,7971,4507 63,8401,4508 63,8821,4509 63,9251,4510 63,9681,4511 64,0111,4512 64,0541,4513 64,0971,4514 64,1391,4515 64,1821,4516 64,2251,4517 64,2681,4518 64,3111,4519 64,3531,4520 64,3961,4521 64,4391,4522 64,4811,4523 64,5241,4524 64,5671,4525 64,6091,4526 64,6521,4527 64,6951,4528 64,7371,4529 64,780

n Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

1,4530 64,8231,4531 64,8651,4532 64,9081,4533 64,9501,4534 64,9921,4535 65,0351,4536 65,0781,4537 65,1201,4538 65,1631,4539 65,2051,4540 65,2481,4541 65,2901,4542 65,3331,4543 65,3751,4544 65,4171,4545 65,4601,4546 65,5021,4547 65,5441,4548 65,5871,4549 65,6291,4550 65,6721,4551 65,7141,4552 65,7561,4553 65,7981,4554 65,8411,4555 65,8831,4556 65,9251,4557 65,9671,4558 66,0101,4559 66,0521,4560 66,0941,4561 66,1361,4562 66,1781,4563 66,2211,4564 66,2631,4565 66,3051,4566 66,3471,4567 66,3891,4568 66,4311,4569 66,4731,4570 66,5151,4571 66,5571,4572 66,5991,4573 66,6411,4574 66,6831,4575 66,7251,4576 66,7671,4577 66,8091,4578 66,8511,4579 66,8931,4580 66,9351,4581 66,977

1,4582 67,0191,4583 67,0611,4584 67,1031,4585 67,1451,4586 67,1861,4587 67,2281,4588 67,2701,4589 67,3121,4590 67,3541,4591 67,3961,4592 67,4371,4593 67,4791,4594 67,5211,4595 67,5631,4596 67,6041,4597 67,6461,4598 67,6881,4599 67,7291,4600 67,7711,4601 67,8131,4602 67,8541,4603 67,8951,4604 67,9381,4605 67,9791,4606 68,0211,4607 68,0631,4608 68,1041,4609 68,1461,4610 68,1871,4611 68,2291,4612 68,2701,4613 68,3121,4614 68,3531,4615 68,3951,4616 68,4361,4617 68,4781,4618 68,5191,4619 68,5611,4620 68,6021,4621 68,6431,4622 68,6851,4623 68,7261,4624 68,7681,4625 68,8091,4626 68,8501,4627 68,8921,4628 68,9331,4629 68,9741,4630 69,0161,4631 69,0571,4632 69,0981,4633 69,139

1,4634 69,1811,4635 69,2221,4636 69,2631,4637 69,3041,4638 69,3461,4639 69,3871,4640 69,4281,4641 69,4691,4642 69,5101,4643 69,5511,4644 69,5931,4645 69,6341,4646 69,6751,4647 69,7161,4648 69,7571,4649 69,7981,4650 69,8391,4651 69,8801,4652 69,9211,4653 69,9621,4654 70,0031,4655 70,0441,4656 70,0851,4657 70,1261,4658 70,1671,4659 70,2081,4660 70,2491,4661 70,2901,4662 70,3311,4663 70,3721,4664 70,4131,4665 70,4531,4666 70,4941,4667 70,5351,4668 70,5761,4669 70,6171,4670 70,6581,4671 70,6981,4672 70,7391,4673 70,7801,4674 70,8211,4675 70,8611,4676 70,9021,4677 70,9431,4678 70,9841,4679 71,0241,4680 71,0651,4681 71,1061,4682 71,1461,4683 71,1871,4684 71,2281,4685 71,268

Page 96: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

96

1,4686 71,3091,4687 71,3491,4688 71,3901,4689 71,4311,4690 71,4711,4691 71,5121,4692 71,5521,4693 71,5931,4694 71,6331,4695 71,6741,4696 71,7141 4697 71,7551 4698 71,7951,4699 71,8361,4700 71,8761,4701 71,9171,4702 71,9571,4703 71,9981,4704 72,0381,4705 72,0781,4706 72,1191,4707 72,1591,4708 72,1991,4709 72,2401,4710 72,2801,4711 72,3201,4712 72,3611,4713 72,4011,4714 72,4411,4715 72,4821,4716 72,5221,4717 72,5621,4718 72,6021,4719 72,6431,4720 72,6831,4721 72,7231,4722 72,7631,4723 72,8031,4724 72,8431,4725 72,8841,4726 72,9241,4727 72,9641,4728 73,0041,4729 73,0441,4730 73,0841,4731 73,1241,4732 73,1641,4733 73,2041,4734 73,2441,4735 73,2851,4736 73,3251,4737 73,365

n Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

1,4738 73,4051,4739 73,4451,4740 73,4851,4741 73,5241,4742 73,5641,4743 73,6041,4744 73,6441,4745 73,6841,4746 73,7241,4747 73,7641,4748 73,8041,4749 73,8441,4750 73,8841,4751 73,9241,4752 73,9631,4753 74,0031,4754 74,0431,4755 74,0831,4756 74,1231,4757 74,1621,4758 74,2021,4759 74,2421,4760 74,2821,4761 74,3211,4762 74,3611,4763 74,4011,4764 74,4411,4765 74,4801,4766 74,5201,4767 74,5601,4768 74,5991,4769 74,6331,4770 74,6781,4771 74,7181,4772 74,7581,4773 74,7971,4774 74,8371,4775 74,8761,4776 74,9161,4777 74,9561,4778 74,9951,4779 75,0351,4780 75,0741,4781 75,1141,4782 75,1531,4783 75,1931,4784 75,2321,4785 75,2721,4786 75,3111,4787 75,3501,4788 75,3901,4789 75,429

1,4790 75,4691,4791 75,5081,4792 75,5471,4793 75,5871,4794 75,6261,4795 75,6661,4796 75,7051,4797 75,7441,4798 75,7841,4799 75,8231,4800 75,8621,4801 75,9011,4802 75,9411,4803 75,9801,4804 76,0191,4805 76,0581,4806 76,0981,4807 76,1371,4808 76,1761,4809 76,2151,4810 76,2541,4811 76,2941,4812 76,3331,4813 76,3721,4814 76,4111,4815 76,4501,4816 76,4891,4817 76,5281,4818 76,5671,4819 76,6071,4820 76,6461,4821 76,6851,4822 76,7241,4823 76,7631,4824 76,8021,4825 76,8411,4826 76,8801,4827 76,9191,4828 76,9581,4829 76,9971,4830 77,0361,4831 77,0751,4832 77,1131,4833 77,1521,4834 77,1911,4835 77,2301,4836 77,2691,4837 77,3081,4838 77,3471,4839 77,3861,4840 77,4251,4841 77,463

1,4842 77,5021,4843 77,5411,4844 77,5801,4845 77,6191,4846 77,6571,4847 77,6961,4848 77,7351,4849 77,7741,4850 77,8121,4851 77,8511,4852 77,8901,4853 77,9281,4854 77,9671,4855 78,0061,4856 78,0451,4857 78,0831,4858 78,1221,4859 78,1601,4860 78,1991,4861 78,2381,4862 78,2761,4863 78,3151,4864 78,3531,4865 78,3921,4866 78,4311,4867 78,4691,4868 78,5081,4869 78,5461,4870 78,5851,4871 78,6231,4872 78,6621,4873 78,7001,4874 78,7391,4875 78,7771,4876 78,8161,4877 78,8541,4878 78,8921,4879 78,9311,4880 78,9691,4881 79,0081,4882 79,0461,4883 79,0841,4884 79,1231,4885 79,1611,4886 79,1991,4887 79,2381,4888 79,2761,4889 79,3141,4890 79,3531,4891 79,3911,4892 79,4291,4893 79,468

Page 97: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

97

M

1,4894 79,5061,4895 79,5441,4896 79,5821,4897 79,6201,4898 79,6591,4899 79,6971,4900 79,7351,4901 79,7731,4902 79,8111,4903 79,8501,4904 79,8881,4905 79,9251,4906 79,9641,4907 80,0021,4908 80,0401,4909 80,0781,4910 80,1161,4911 80,1541,4912 80,1921,4913 80,2311,4914 80,2691,4915 80 3071,4916 80 3451,4917 80,3831,4918 80,4211,4919 80,4591,4920 80,4971,4921 80,5341,4922 80,5721,4923 80,6101,4924 80,6481,4925 80,6861,4926 80,7241,4927 80,7621,4928 80,8001,4929 80,8381,4930 80,8761,4931 80,9131,4932 80,9511,4933 80,9891,4934 81,0271,4935 81,0651,4936 81,1031,4937 81,1401,4938 81,1781,4939 81,2161,4940 81,2541,4941 81,2911,4942 81,3291,4943 81,3671,4944 81,4051,4945 81,442

n Grado n Grado n Grado n Grado20° Brix 20° Brix 20º Brix 20° Brix

TABLA I (Continuación)

Conversión de Indice de Refracción a Grados Brix

1,4946 81,4801,4947 81,5181,4948 81,5551,4949 81,5931,4950 81,6311,4951 81,6681,4952 81,7061,4953 81,7441,4954 81,7811,4955 81,8191,4956 81,8561,4957 81,8941,4958 81,9321,4959 81,9691,4960 82,0071,4961 82,0441,4962 82,0821,4963 82,1191,4964 82,1571 4965 82,1941 4966 82,2321,4967 82,2691,4968 82,3071,4969 82,3441,4970 82,3811,4971 82,4191,4972 82,4561,4973 82,4941,4974 82,5311,4975 82,5691,4976 82,6061,4977 82,6431,4978 82,6811,4979 82,7181,4980 82,7551,4981 82,7931,4982 82,8301,4983 82,8671,4984 82,9051,4985 82,9421,4986 82,9791,4987 83,0161,4988 83,0541,4989 83,0911,4990 83,1281,4991 83,1651,4992 83,2021,4993 83,2401,4994 83,2771,4995 83,3141,4996 83,3511,4997 83,388

1,4998 83,4251,4999 83,4631,5000 83.5001,5001 83,5371,5002 83,5741,5003 83,6111,5004 83,6481,5005 83,6851,5006 83,7221,5007 83,7591,5008 83,7961,5009 83,8331,5010 83,8701,5011 83,9071,5012 83,9441,5013 83,9811,5014 84,0181,5015 84,0551,5016 84,0921,5017 84,1291,5018 84,1661,5019 84,2031,5020 84,2401,5021 84,2771,5022 84,3141,5023 84,3511,5024 84,3331,5025 84,4241,5026 84,4611,5027 84,4981,5028 84,5351,5029 84,5721,5030 84,6091,5031 84,6451,5032 84,6821,5033 84,7191,5034 84,7561,5035 84,7921,5036 84,8291,5037 84,8661,5038 84,9031,5039 84,9391,5040 84,9761,5041 85,0131,5042 85,0491,5043 85,0861,5044 85,1231,5045 85,1591,5046 85,1951,5047 85,2331,5048 85,2691,5049 85,306

1,5050 85,3431,5051 85,3791,5052 85,4161,5053 85,4521,5054 85,4891,5055 85,5251,5056 85,5621,5057 85,5981,5058 85,6351,5059 85,6721,5060 85,7031,5061 85,7441,5062 85,7811,5063 85,8171,5064 85,8541,5065 85,8901,5066 85,9271,5067 85,9631,5068 86,0001,5069 86,0361,5070 86,0721,5071 86,1091,5072 86,1451,5073 86,1821,5074 86,2181,5075 86,2541,5076 86,2911,5077 86,3271,5078 86,3631,5079 86,399

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2. DENSIDAD

2.1. Principio.La densidad (20°/20ºC) del líquido a analizar

se determina por medio del picnómetro.

2.2. Material y aparatos.2.2.1. Estufa.2.2.2. Desecador.2.2.3. Baño a 20°C.2.2.4. Balanza analítica sensible a 0,1 mg.2.2.5. Picnómetro Reischauer de 50 ml o si-

milar.El picnómetro Reischauer consiste en un

matraz de 50 ml de capacidad, cerrado conun capuchón esmerilado provisto de un cuello de6 cm de longitud y 4 mm de diámetro interior.

2.2.6. Erlenmeyer de 500 ml.2.2.7. Embudo de 10 cm de diámetro.2.2.8. Tubos capilares.

2.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS502612 DERQUIM Mezcla crómica

Papel de filtro

2.4. Procedimiento.Si el líquido a analizar contiene una apreciable

cantidad de gas carbónico, conviene eliminarcompletamente éste agitando fuertemente en unErlenmeyer y filtrarlo a continuación por medio deun filtro cubierto de un vidrio de reloj.

2.4.1 Determinación del peso del picnómetrovacío: Limpiar el picnómetro con Mezcla crómicaDERQUIM, caliente si es necesario; despuésenjuagar cuidadosamente con Agua PA-ACS.Secar durante tres horas en la estufa a 105-108ºC. Enfriar en desecador hasta temperaturaambiente y expresar el resultado con cuatro cifrasdecimales.

2.4.2. Determinación del peso del picnómetrolleno de agua. Llenar el picnómetro hasta la marcacon Agua PA-ACS. Tapar y ponerlo en un baño deagua a 20ºC durante veinte minutos. Estando latemperatura equilibrada, enrasar el picnómetro(siempre sumergido en el baño de agua) con laayuda de un capilar.

Secar la parte vacía del cuello del picnómetropor medio del papel de filtro.

Colocar el tapón, retirar el picnómetro delbaño de agua y secar cuidadosamente. El peso

98

TABLA Il

GRADO BRIX

Temp.°C 0 5 10 15 20 25 30 40 50 60 70

10 0,50 0,54 0,58 0,61 0,64 0,66 0,68 0,72 0,74 0,76 0,7911 0,46 0,49 0,53 0,55 0,58 0,60 0,62 0,65 0,67 0,69 0,7112 0,42 0,45 0,48 0,50 0,52 0,54 0,56 0,58 0,60 0,61 0,6313 0,37 0,40 0,42 0,44 0,46 0.48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,5514 0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,46 0,48

RESTAR15 0,27 0,29 0,31 0,33 0,34 0,34 0,35 0,37 0,38 0,39 0,4016 0,22 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,28 0,30 0,30 0,31 0,3217 0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,21 0,21 0,22 0,23 0,23 0,24 18 0,12 0,13 0,13 0,14 0,14 0,14 0,14 0,15 0,15 0,16 0,1619 0,06 0,06 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,08 0,08 0,08

21 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,08 0,08 0,08 0,08 0,0822 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,15 0,15 0,15 0,16 0,16 0,1623 0,19 0,20 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,2424 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,30 0,31 0,31 0,31 0,32 0,3225 0,33 0,35 0,36 0,37 0,38 0,38 0,39 0,40 0,40 0,40 0,40

SUMAR26 0,40 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47 0,48 0,48 0,48 0,4827 0,48 0,50 0,52 0,53 0,54 0,55 0,55 0,56 0,56 0,56 0,5628 0,56 0,57 0,60 0,61 0,62 0,63 0,63 0,64 0,64 0,64 0,6429 0,64 0,66 0,68 0,69 0,71 0,72 0,72 0,73 0,73 0,73 0,7330 0,72 0,74 0,77 0,78 0,79 0,80 0,80 0,81 0,81 0,81 0,81

Page 99: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

del picnómetro lleno de agua debe ser determina-do con una precisión de cuatro cifras decimales.

2.4.3. Determinación del peso del picnómetrolleno de muestra: Después de haber vaciado elpicnómetro, lavar varias veces con la muestra yproceder como en 2.4.2., sustituyendo el AguaPA-ACS por zumo de uva.

2.5. Cálculos.Calcular la densidad 20º/20°C aplicando la

siguiente fórmula:

c - ad = ———

b - a

Siendo:a = Peso picnómetro vacío.b = Peso picnómetro lleno de agua hasta la

marca.c = Peso picnómetro lleno de líquido para

analizar hasta la marca.La densidad obtenida debe expresarse con

una precisión de cuatro cifras decimales.

2.6. Referencias.Federation Internationale des Producteurs de

Jus de Fruits. Método número 1, 1968.

3. pH

3.1. Principio.Medida potenciométrica a 20ºC, previa elimi-

nación del dióxido de carbono por agitación enfrío y con vacío parcial.

3.2. Material y aparatos.3.2.1. pH-metro.3.2.2. Electrodo/s para medida de pH.

3.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS131481 Potasio Hidrógeno Ftalato PA-ISO272168 Tampón, Solución pH 4,00 ± 0,02

(20ºC) ST272170 Tampón, Solución pH 7,00 ± 0,02

(20ºC) ST

3.3.1. Tampón, Solución pH 4,00 ± 0,02(20ºC) ST o prepararla disolviendo 10,211 g dePotasio Hidrógeno Ftalato PA-ISO (KHC6H4O4)(secado una hora a 105ºC) en un litro de Agua PA-ACS a 20ºC.

3.4. Procedimiento.Introducir un volumen adecuado de muestra

en un kitasato. Conectar a vacío agitando al mis-mo tiempo el matraz, hasta eliminación del gascarbónico.

Tomar un volumen de muestra exento de dióxi-do de carbono y determinar el pH.

3.5. Expresión de los resultados.Expresar el pH medido a 20ºC con uno o dos

decimales, según la precisión del aparato.

3.6. Observaciones.3.6.1. Antes de cada nueva medida, limpiar los

electrodos con agua destilada y secarlos conpapel de filtro.

3.6.2. El electrodo de calomelanos debe serllenado de tiempo en tiempo de solución saturadade ClK.

3.6.3. El electrodo de vidrio debe ser conser-vado en agua y el de calomelanos en soluciónsaturada de ClK. Los electrodos combinadosdeben ser conservados en solución saturada deClK.

3.6.4. El calibrado se hace con ayuda de lassoluciones tampones siguiendo las indicacionesparticulares del fabricante del aparato.

3.7. Referencias.Federation International des Producteurs de

Jus de Fruits. Método número 11, año 1968.

4. ACIDEZ TOTAL

4.1. Principio.Valoración potenciométrica a pH=8,1 de la aci-

dez del zumo de uva, previa eliminación del dióxi-do de carbono.

4.2. Material y aparatos.4.2.1. pH-metro con electrodo/s para medidas

de pH.4.2.2. Agitador magnético.

4.3. Reactivos.171694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE

4.4. Procedimiento.Tomar 20 ml del zumo de uva, exento de dióxi-

do de carbono, obtenido como en 3.4, y llevar aun vaso de unos 100 ml de capacidad. Poner enmarcha el agitador y valorar con solución 4.3 has-ta pH 8,1 a 20ºC.

Mantener en marcha el agitador durante laoperación, que debe durar, como mínimo, cincominutos.

4.5. Cálculos.Calcular la acidez total expresada en meq/l,

con una aproximación de 0,1 meq/l, o en gramosde ácido tartárico/l.

99

M

Page 100: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

VAcidez total (meq/l) = 10 ——

2

VAcidez total (g ac.tartárico/l) = 0,75 ——

2

Siendo:V= Volumen, en ml, de solución de Sodio

Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) RE

4.6. ReferenciasRecuil des Méthodes Internationales d’Analyse

des Vins O.I.V. A 10 (1969), 1-3.

5. ACIDEZ VOLATIL

5.1. Principio.Separación de los ácidos volátiles del zumo de

uva por arrastre con vapor de agua, evitando lapresencia de dióxido de carbono en el destilado.Valoración con solución de sodio hidróxido, des-contando los contenidos de ácido sórbico y dedióxido de azufre libre y total.

5.2. Material y aparatos.5.2.1. Aparato para destilación (ver figura 21.I

pág. 52).5.2.1.1. Matraz generador de vapor de 3.500 ml

(a). El agua condensada en el tubo de unión delmatraz con el borboteador, se purga por el purga-dor (c).

5.2.1.2. Borboteador (b). Tubo cilíndrico de3 cm de diámetro y 27 cm de altura. Este tuboreposa sobre un disco de amianto de 15 cm dediámetro con un orificio central de 29 mm. El tubo(d) por el que entra el vapor en el borboteadordebe llegar a 1cm del fondo.

5.2.1.3. Columna rectificadora (e). De 20 mmde diámetro y 50 cm de altura.

5.2.1.4. Refrigerante de West (f). De 40 cm delongitud útil, colocado verticalmente.

5.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131066 Acido L(+) Tartárico PA-ACS-ISO171073 Agua de Cal solución saturada RE

(o 171071 Agua de Barita solución saturada RE)

131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121085 Etanol 96% PA131325 Fenolftaleína PA-ACS131542 Potasio Yoduro PA-ISO131644 di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato

PA-ACS-ISO182153 Sodio Hidróxido 0,05 mol/l (0,05N) SV

181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV5.3.1. Sodio Hidróxido 0,05 mol/l (0,05N) SV5.3.2. Solución de Fenolftaleína al 1% en Eta-

nol 96% PA. Usese Fenolftaleína PA-ACS y diluirconvenientemente.

5.3.3. Solución de Yodo 0,01N. Diluir Yodo0,01 mol/l (0,02N) SV con Agua PA-ACS a 1:1 ydeterminar el factor.

5.3.4. Almidón soluble RE.

5.4. ProcedimientoAlimentar el generador de vapor con Agua de

Cal solución saturada RE o Agua de Barita soluciónsaturada RE limpia, manteniéndolo lleno hastaunos 2/3 de su volumen. Poner en el borboteador20 ml de zumo de uva exento de gas carbónico,como en 3.4. Añadir al zumo de uva unos 0,5 g deAcido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO, poner en marchael generador de vapor, manteniendo abierta la sali-da del tubo purgador del vapor; después de cerraréste, calentar el borboteador. Durante la operaciónse regula el calentador de forma que el volumen dellíquido en el borboteador no pase sensiblementede los veinte ml iniciales.

Destilar en unos doce-quince minutos 250 ml.Valorar con Sodio Hidróxido 0,05 mol/l (0,05N)

SV en presencia de dos gotas de Fenolftaleínacomo indicador.

Valorar el dióxido de azufre libre en este mismodestilado, añadiendo al terminar la valoraciónanterior una gota de Acido Clorhídrico 37%PA-ACS-ISO, para acidular nuevamente, valoran-do el dióxido de azufre libre con solución de Yodo0,01N, añadiendo también 2 ml de Almidón solu-ble RE como indicador y un cristal de PotasioYoduro PA-ISO.

Para determinar el dióxido de azufre combina-do con el Acetaldehído, añadir 20 ml de soluciónsaturada de di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PA-ACS-ISO (el liquido toma un color rosa pálido) yvalorar nuevamente con solución de Yodo 0,01N.

5.5. Cálculos.Calcular la acidez volátil expresada en meq/l o

en g de ácido acético/l.Acidez volátil (meq/l)=5(V/2-V’/10-V’’/20)

Acidez volátil (g/l ácido acético)=0,3(V/2-V’/10-V”/20)

Siendo:V = Volumen en ml utilizados de solución de

sodio hidróxido 0,05N.V’ = Volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en

la oxidación del dióxido de azufre libre.V” = Volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en

la oxidación del dióxido de azufre combi-nado con el acetaldehído.

100

Page 101: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

5.6. Observaciones.5.6.1. La determinación de la acidez volátil se

efectuará inmediatamente después de la aperturadel envase.

5.6.2. En la destilación del zumo de uva parala determinación de la acidez volátil, el ácido sór-bico pasa casi en su totalidad al destilado, fal-seando el resultado del análisis. Efectuar lacorrección.

100 mg de ácido sórbico equivalen a 0,892meq = 0,0535 g de ácido acético.

5.6.3. La corrección de la acidez volátil se rea-

liza según la norma Jaulmes, descontándose Iatotalidad del contenido en dióxido de azufre libre yla mitad del contenido de dióxido de azufre total.

6. SOLIDOS SOLUBLES

El contenido en sólidos solubles expresado eng/l se calcula a partir del valor de la densidad,obtenida según el método oficial número 2 y utili-zando la tabla adjunta.

101

M

10

1,00 0 2,6 5,1 7,7 10,3 12,9 15,4 18,0 20,6 23,2

1,01 25,8 28,4 31,0 33,6 36,2 38,8 41,3 43,9 46,5 49,11,02 51,7 54,3 56,9 59,5 62,1 64,7 67,3 69,9 72,5 75,11,03 77,7 80,3 82,9 85,5 88,1 90,7 93,3 95,9 98,5 101,11,04 103,7 106,3 109,0 111,6 114,2 116,8 119,4 122,0 124,6 127,2

1,05 129,8 132,4 135,0 137,6 140,3 142,9 145,5 148,1 150,7 153,3

1,06 155,9 158,6 161,2 163,8 166,4 169,0 171,6 174,3 176,9 179,51,07 182,1 184,8 187,4 190,0 192,6 195,2 197,8 200,5 203,1 205,81,08 208,4 211,0 213,6 216,2 218,9 221,5 224,1 226,8 229,4 232,01,09 234,7 237,3 239,9 242,5 245,2 247,8 250,4 253,1 255,7 258,4

1,10 261,0 263,6 266,3 268,9 271,5 274,2 276,8 279,5 282,1 284,8

1,11 287,4 290,0 292,7 295,3 298,0 300,6 303,3 305,9 308,6 311,21,12 313,9 316,5 319,2 321,8 324,5 327,1 329,8 332,4 335,1 337,81,13 340,4 343,0 345,7 348,3 351,0 353,7 356,3 359,0 361,6 364,31,14 366,9 369,6 372,3 375,0 377,6 380,3 382,9 385,6 388,3 390,9

1,15 393,6 396,2 398,9 401,6 404,3 406,9 409,6 412,3 415,0 417,6

1,16 420,3 423,0 425,7 428,3 431,0 433,7 436,4 439,0 441,7 444,41,17 447,1 449,8 452,4 455,2 457,8 460,5 463,2 465,9 468,6 471,31,18 473,9 476,6 479,3 482,0 484,7 487,4 490,1 492,8 495,5 498,21,19 500,9 503,5 506,2 508,9 511,6 514,3 517,0 519,7 522,4 525,1

1,20 527,8 530,5 533,3 536,0 538,7 541,4 544,1 546,8 549,6 552,3

1,21 555,0 557,7 560,4 563,1 565,8 568,5 571,2 573,9 576,6 579,3

TABLA 6.1

Estracto seco total (g/l)

Densidadrelativacon dosdecimales

Tercer decimal de la densidad relativa

2 3 4 5 6 7 8 9

Gramos por litro del extracto

Page 102: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

102

0 1

1,22 582,0 584,8 587,5 590,2 593,0 595,7 598,4 601,1 603,9 606,61,23 609,3 612,1 614,8 617,5 620,3 623,0 625,7 628,4 631,2 633,91,24 636,6 639,4 642,1 644,9 647,4 650,3 653,1 655,8 658,6 661,3

1,25 664,0 666,8 669,5 672,3 675,0 677,7 680,5 683,2 686,0 688,7

1,26 691,4 694,2 697,0 699,8 702,5 705,3 708,1 710,8 713,6 710,41,27 719,1 721,9 724,7 727,4 730,2 732,9 735,7 738,5 741,2 744,01,28 746,7 749,5 752,3 755,1 757,8 760,6 763,4 766,1 768,9 771,71,29 774,4 777,2 780,0 782,8 785,6 788,3 791,1 793,9 796,7 799,5

1,30 802,3 805,0 807,8 810,6 813,4 816,2 819,0 821,8 824,6 827,4

1,31 830,2 833,1 835,9 838,7 841,5 844,3 847,1 849,9 852,7 855,51,32 858,3 861,2 864,0 866,8 869,6 872,4 875,3 878,1 880,9 883,71,33 886,5 889,4 892,2 895,0 897,9 900,7 903,5 906,4 909,2 912,01,34 914,8 917,7 920,5 923,3 926,2 929,0 931,8 934,7 937,5 940,31,35 943,1

TABLA 6.1

(Continuación)

Densidadrelativacon dosdecimales

Tercer decimal de la densidad relativa

2 3 4 5 6 7 8 9

Gramos por litro del extracto

TABLA DE INTERPOLAR

4° decimalde la densidad

relativa g/l del extracto seco

1 0,262 0,523 0,784 1,045 1,306 1,567 1,828 2,089 2,34

Page 103: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

7. AZUCARES TOTALES Y REDUCTORES

7.1. Principio.Eliminación previa de todas las materias reducto-

ras distintas de los azúcares por defecación, inver-sión y posterior valoración basada en la acciónreductora de los azúcares sobre una solucióncupro-alcalina.

7.2. Material y aparatos.7.2.1. Material necesario para volumetrías.7.2.2. Baño de agua.7.2.3. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerante de

reflujo.

7.3. Reactivos131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131018 Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACS-ISO131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO121085 Etanol 96% v/v PA131325 Fenolftaleína PA-ACS131505 Potasio Hexacianoferrato III 3-hidrato

PA-ACS131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO131542 Potasio Yoduro PA-ISO172174 Reactivo de Luff-Schoorl RE131648 Sodio Carbonato anhidro PA-ACS-ISO181723 Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV121787 Zinc Sulfato 7-hidrato PA

7.3.1. Solución de Acido Sulfúrico al 25 % envolumen. Diluir convenientemente Acido Sulfúrico96% PA-ISO con Agua PA-ACS.

7.3.2. Acido Clorhídrico 35% PA-ISO.7.3.3. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.7.3.4. Solución de Potasio Hidróxido al 30%.

Disolver unos gramos de Potasio Hidróxido 85%lentejas PA-ISO en el volumen conveniente de AguaPA-ACS.

7.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30%. Use-se Potasio Yoduro PA-ISO, disuelto con Agua PA-ACS hasta la concentración deseada. Conservar enfrasco topacio.

7.3.6. Solución de Almidón al 1%. Disolver 1 gde Almidón soluble RE con Agua PA-ACS, enra-sando a 100 ml.

7.3.7. Solución de Carrez I:Disolver 150 g de Potasio Hexacianoferrato III 3-hidrato PA-ACS en un litro de Agua PA-ACS.

7.3.8. Solución de Carrez II:Disolver 300 g de Zinc Sulfato 7-hidrato PA en unlitro de Agua PA-ACS.

7.3.9. Reactivo de Luff-Schoorl RE, o bien pre-pararlo de la siguiente forma:

Disolver 50 g de Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACS-ISO en 500 ml de Agua PA-ACS y 143,7 g de SodioCarbonato anhidro PA-ACS-ISO en 350 ml de AguaPA-ACS tibia; cuando se haya enfriado, mezclarcon cuidado ambas soluciones. Disolver 25 g deCobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 mlde Agua PA-ACS. Añadir a la solución anterior yenrasar con Agua PA-ACS hasta 1 l.

7.3.10. Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV.7.3.11. Solución de Fenolftaleína: Disolver 0,1 g

de Fenolftaleína PA-ACS en 100 ml de Etanol 96%v/v PA.

7.4. Procedimiento.7.4.1. Preparación de la muestra: Tomar con

pipeta 25 ml de la muestra en matraz aforado de500 ml. Añadir 150 ml de Agua PA-ACS y 5 ml de lasolución Carrez I; mezclar y añadir 5 ml de la solu-ción Carrez II. Mezclar y enrasar con Agua PA-ACS.Dejar en reposo diez minutos y filtrar.

7.4.2. Inversión de los azúcares: Tomar conpipeta 25 ml de la muestra preparada según (7.4.1.)y llevar a un matraz de 100 o 200 ml, según la dilu-ción a emplear. Diluir con Agua PA-ACS hasta 75 mly añadir 5 ml de Acido Clorhídrico 1-hidrato PA-ACS-ISO. Antes de 5 minutos llevarlo a 67-70°C enun baño de agua, mantenerlo durante cinco minu-tos a esa temperatura. Comprobar la temperaturacon un termómetro introducido en la disolución.Enfriar inmediatamente el matraz a 20°C, quitar eltermómetro y aclararlo. Neutralizar el contenido consolución de Potasio Hidróxido al 30%, utilizandoFenolftaleína como indicador. Añadir unas gotas deAcido Acético glacial PA-ACS-ISO hasta que elcolor de la Fenolftaleína desaparezca. Enrasar elmatraz con Agua PA-ACS.

7.4.3. Determinación de los azúcares totales:La solución de la muestra no debe contener másde 50 mg de azúcares reductores. Tomar conpipeta 25 ml de la muestra preparada según(7.4.2.) sobre un matraz que contenga 25 ml de lasolución de Luff-Schoorl (7.3.9.). Añadir al matrazunas perlas de vidrio y conectar el refrigerante dereflujo. Calentar el matraz con llama potentedurante dos minutos y mantener a ebullicióndurante diez minutos exactos. Enfriar inmediata-mente en agua. Cuando esté completamente frío,añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduro(7.3.5.) y, con cuidado, 25 ml de la solución deAcido Sulfúrico (7.3.1.). Añadir 2 ml de la soluciónde Almidón (7.3.6.) y valorar el contenido delmatraz con solución de Sodio Tiosulfato 0,1mol/l(0,1N) SV (7.3.10.) hasta obtener una coloraciónblanca cremosa. Si se hubieran empleado menosde 5 ml en la valoración, repetir la determinaciónutilizando una dilución de la muestra más ade-cuada.

Realizar en paralelo una determinación en blan-co, empleando 25 ml de Agua PA-ACS.

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7.4.4. Azúcares reductores: Para la determina-ción de azúcares reductores seguir el mismo proce-dimiento suprimiendo la inversión (7.4.2.).

7.5. Cálculos.Sea D la diferencia entre lo gastado de Sodio

Tiosulfato por el blanco y lo gastado por la muestra.La concentración de azúcares totales expresadosen glucosa se obtiene del valor D en la tabla, inter-polando en caso necesario y multiplicando por elfactor de dilución.

7.6. Referencias.Federation International des Producteurs de Jus

de Fruits. Método número 4. Año 1985.

8. ACIDO ASCORBICO

8.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación del

ácido ascórbico por cromatografía de líquidos dealta eficacia, detectándolo en el ultravioleta a268 nm.

8.2. Material y aparatos.8.2.1. Equipo de filtración de muestra y disolven-

te para eliminar partículas superiores a 0,5 mm.8.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado con

detector de ultravioleta de longitud de onda variabley registrador.

8.2.3. Columna NH2 - Lichorsob de 250 x4,6 mm fr 10 mm o similar.

8.3. Reactivos.263093 Acetonitrilo-gradiente HPLC131013 Acido L(+)-Ascórbico PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato

PA-ACS-ISO

8.3.1. Solución patrón de Acido Ascórbico de300 mg/l, preparada con Acido L(+) - AscórbicoPA-ACS-ISO y Agua PA-ACS y conservada enmatraz color topacio.

8.3.2. Solución A: Tampón fosfato pH 3,5. Diso-lución 0,005M de Potasio di-Hidrógeno FosfatoPA-ACS-ISO (KH2PO4): Filtrar esta solución con(8.2.1.).

8.3.3. Solución B: Acetonitrilo-gradiente HPLC.

8.4. Procedimiento.8.4.1. Condiciones cromatográficas orientativas:

Fase móvil: Tampón Potasio di-Hidrógeno Fosfa-to/Acetonitrilo-gradiente HPLC: 60/40 (v/v).Flujo : 1 ml/minuto.

8.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatógrafoentre 10 y 20 ml de la solución patrón (7.3.1.) y cal-cular el factor de respuesta.

CoFactor de respuesta (F) = ––––

Ap

Siendo:Co = Concentración en mg/l de ácido ascór-

bico.Ap = Area del pico en el cromatograma de la

solución patrón.

8.4.3. Determinación: Homogeneizar. Filtrarmediante (8.2.1.) e inyectar de 10 a 20 ml en el cro-matógrafo.

8.5. Cálculos.El contenido de ácido ascórbico, expresado en

104

Tabla 7,1

Para 25 ml de reactivo de Luff-Schoorl

D = ml de Tiosulfato mg de Glucosa Diferencia

1 2,4 2,42 4,8 2,43 7,2 2,54 9,7 2,55 12,2 2,56 14,7 2,67 17,2 2,68 19,8 2,69 22,4 2,6

10 25,0 2,611 27,6 2,712 30,3 2,713 33,0 2,714 35,7 2,715 38,5 2,816 41,3 2,917 44,2 2,918 47,1 2,919 50,0 3,020 53,0 3,021 56,0 3,022 59,1 3,123 62,2

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mg/l (sin decimales), se obtendrá mediante lasiguiente fórmula:

Acido ascórbico (mg/l) = F x Ac

Siendo:F = Factor de respuesta.Ac = Area del pico del ácido ascórbico en la

muestra.

8.6. Observaciones.8.6.1. La determinación del ácido ascórbico se

realizará inmediatamente después de la aperturadel envase.

8.6.2. Con este método no se determina ácidodehidroascórbico.

9. RELACION GLUCOSA-FRUCTOSA

9.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación de

glucosa y fructosa por cromatografía de líquidos dealta eficacia con detector de índice de refracción.

9.2. Material y aparatos.9.2.1. Equipos de filtración de muestra y disol-

ventes para eliminar partículas superiores a 0,5 mm.9.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado con

detector de índice de refracción y registrador.9.2.3. Columna Sugar-Pack u otra columna que

permita la separación de glucosa y fructosa.9.2.4. Horno para columna.

9.3. Reactivos.124559 Acido Etilendiaminotetraacético Sal

Disódico Cálcica PA131074 Agua PA-ACS212236 Agua Desionizada QP121211 Calcio Acetato x-hidrato PA142728 D (-)-Fructosa (F.Eur., BP, USP)

PRS-CODEX121341 D(+)-Glucosa PA

9.3.1. Soluciones patrón de Glucosa y Fructosaal 10% (p/v). Preparar ambas soluciones disolvien-do 10 g de D (-)-Fructosa (F.Eur., BP, USP) PRS-CODEX y D(+)-Glucosa PA en 100 ml de Agua PA-ACS.

9.4. Procedimiento.9.4.1. Condiciones cromatográficas orientativas

para la columna Sugar-Pack:Fase móvil: Solución de 20 mg/l de Calcio Ace-

tato x-hidrato PA o Acido EtilendiaminotetraacéticoSal Disódico Cálcica PA en Agua Desionizada QP y

Agua PA-ACS.Flujo : 0,4-0,5 ml/min.Temperatura del horno : 90-95° C.

9.4.2. Calibrado: inyectar en el cromatógrafo unacantidad conocida de la solución patrón y calcularlos factores de respuesta.

CoFactor de respuesta (F) = ––––

Ap

Siendo:Co = Concentración en g/l del patrón.Ap = Area del pico patrón en el cromatograma.

9.4.3. Determinación: Filtrar la muestra mediantelos equipos del apartado (9.2.1.) e inyectar una can-tidad conocida en la columna.

9.5. CálculosEl contenido en glucosa y fructosa, expresado

en g/l, se obtiene mediante la siguiente fórmula:

Glucosa (g/l) = F1 x A1 x f

Fructosa (g/l) = F2 x A2 x f

Siendo:F1 = Factor de respuesta de la glucosa.F2 = Factor de respuesta de la fructosa.f = Factor de dilución.A1 = Area del pico de glucosa en la muestra.A2 = Area del pico de fructosa en la muestra.

9.6. Observaciones.Los factores de respuesta deben calcularse

varias veces durante una sesión. Es pues recomen-dable tener termostatizado el detector.

10. NITROGENO TOTAL

10.1. Principio.Digestión del producto con ácido sulfúrico con-

centrado, en presencia de catalizador, en la cual setransforma el nitrógeno orgánico en iones amonio,que en medio fuertemente básico es desplazado enforma de amoníaco, y recogido sobre ácido bórico.

La posterior valoración con ácido clorhídrico per-mite el cálculo de la cantidad inicialmente presentede nitrógeno orgánico y amoniacal en la muestra.

10.2. Material y aparatos.10.2.1. Aparato Kjeldahl.

10.3. Reactivos.131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO182107 Acido Clorhídrico 0,05 mol/l (0,05N) SV131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS122726 Cobre II Sulfato anhidro PA121085 Etanol 96% v/v PA

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171327 Fenolftaleína solución 1% REPapel Tornasol

131532 Potasio Sulfato PA-ACS-ISO171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS141625 Selenio metal polvo PRS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO171759 Verde de Bromocresol indicador

RE-ACS

10.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.10.3.2. Catalizador de selenio. Mezclar bien pulve-

rizados 80 g de Potasio Sulfato PA-ACS-ISO, 20 g deCobre II Sulfato anhidro PA y 5 g de Selenio metal pol-vo PRS.

10.3.3. Fenolftaleína solución 1% RE y Papel Tor-nasol.

10.3.4. Indicador: Pesar 105 mg de Rojo de Metilo(C.I. 13020) RE-ACS y 150 mg de Verde de Bromo-cresol indicador RE-ACS y disolver a 100 ml con Eta-nol 96% v/v PA.

10.3.5. Solución de Acido Bórico al 1%. Pesar10 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO, disolver con AguaPA-ACS, añadir 10 ml del indicador (10.3.4.) y enrasara 1 litro con Agua PA-ACS.

10.3.6. Solución de Sodio Hidróxido al 40%. Disol-ver Sodio Hidróxido 97% lentejas PA-ACS-ISO enAgua PA-ACS hasta la concentración deseada.

10.3.7. Acido Clorhídrico 0,05 mol/l (0,05N) SV.

10.4. Procedimiento.Poner en el matraz Kjeldahl 5-10 ml de zumo de

uva y añadir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.Evaporar hasta consistencia siruposa. Añadir 10 mlde Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y 7 g de catalizador(10.3.2.), continuar calentando primero lentamente ydespués enérgicamente hasta decoloración, prose-guir unos minutos más. Si es necesario se van aña-diendo nuevas dosis de Acido Sulfúrico 96% PA-ISOde 5 en 5 ml.

Enfriar el matraz a temperatura ambiente, adicionarunas gotas de Fenolftaleína solución 1% RE y llevarloal aparato de destilación. En un vaso cilíndrico deunos 200 ml añadir 25 ml de Acido Bórico PA-ACS-ISO (10.3.5.). Añadir al matraz solución de SodioHidróxido (10.3.6.) en cantidad suficiente para virajede la Fenolftaleína solución 1% RE. Conectar el apa-rato de destilación con el generador de vapor de aguay comenzar el arrastre del Amoníaco recogiendo eldestilado en la solución de Acido Bórico (10.3.5.).

Después de quince-veinte minutos, comprobarcon Papel de Tornasol si una gota del destilado noacusa reacción alcalina. En este caso separar el vasoy proceder a la valoración. Valorar con Acido Clorhídri-co 0,05 mol/l (0,05N) SV (10.3.7).

10.5. Cálculo.El contenido en nitrógeno expresado en mg/l

vendrá por la siguiente fórmula:

700 (V1- V0)Nitrógeno (mg/l) = –––––––––––––

VSiendo:V = Volumen, en ml, utilizados de muestras.V1 = Volumen, en ml, de solución de ácido clor-

hídrico empleado en la valoración.V0 = Volumen, en ml, de solución de ácido clor-

hídrico empleado en el blanco.

10.6. Observaciones.Para efectuar el procedimiento Kjeldahl podrán

utilizarse sistemas automáticos o semiautomáticos,adaptándose a las especificaciones del equipo.

10.7. Referencias.Recueil des Methodes Internationales d’Analyse

des Vins. O. I. V. A. (40). 1969.

11. ETANOL

11.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación del

etanol por cromatografía gaseosa.

11.2. Material y aparatos.11.2.1. Cromatógrafo de gases equipado con

detector de ionización de llama.11.2.2. Columna cromatográfica. Columna de

2 m de longitud y 2 mm de diámetro interno, rellenode Porapak Q 80-100 mallas o cualquier otracolumna que permita la separación y cuantificacióndel etanol.

11.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS351085 Etanol 96% v/v CG354457 2-Propanol CG

11.4. Procedimiento.11.4.1. Condiciones cromatográficas: Las condi-

ciones cromatográficas orientativas para la columnade Porapak son: Gas portador nitrógeno 35 ml/min.;temperatura del horno: 130° C; temperatura delinyector y del detector: 180° C.

11.4.2. Calibrado.11.4.2.1. Patrón interno: Solución al 10% (v/v) de

2-Propanol CG en Agua PA-ACS11.4.2.2. Solución patrón: Preparar una solución

de Etanol 96% v/v CG-Agua PA-ACS que contenga elporcentaje de Etanol que se supone tiene la muestra.

11.4.2.3. Solución de calibrado: A 100 ml de lasolución patrón (11.4.2.2.) se le ha de añadir 1 ml dela solución del patrón interno (11.4.2.1.) y se inyecta1 microlitro en el cromatógrafo.

11.4.2.4. Muestra problema: A 100 ml de la mues-tra añadir 1 ml de la solución patrón interno(11.4.2.1.) e inyectar 1 microlitro en el cromatógrafo.

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11.5. Cálculos.Calcular el factor de respuesta y la concentra-

ción de etanol en la muestra, aplicando las fórmulassiguientes:

Ci x ApFactor de respuesta (FR) = –––––––––

AiConcentración en la muestra

Aim(% en volumen) = FR x –––––––

Apm

Siendo:Ci = Porcentaje en volumen del etanol en la

solución patrón.Ap = Area del patrón interno en la solución

patrón.Ai = Area del etanol en la solución patrón.Aim = Area del etanol en la muestra problema.Apm = Area del patrón interno en la muestra

problema.

11.6 Observaciones.La determinación de etanol se efectuará inme-

diatamente después de la apertura del envase.

12. INDICE DE FORMOL

12.1. Principio.Valoración de la acidez de los compuestos for-

mados por la reacción del formaldehído con los a-aminoácidos.

12.2. Material y aparatos.pH metro.

12.3. Reactivos.131328 Formaldehído 36,5-38% p/v

estabilizado con metanol PA-ACS141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)

PRS182155 Sodio Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV

12.3.1. Sodio Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV.12.3.2. Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)

PRS.12.3.3. Solución de Formaldehído. Llevar el For-

maldehído 36,5-38% p/v estabilizado con metanolPA-ACS, a pH 8,1 mediante la solución de SodioHidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV (12.3.1.), utilizandoel pH-metro. Comprobar cada hora.

12.4. Procedimiento.Poner 25 ml de zumo de uva en un vaso de pre-

cipitados y neutralizar con Sodio Hidróxido0,25 mol/l (0,25N) SV (12.3.1.) hasta pH 8,1, utili-zando el pH-metro. Añadir 10 ml de la solución de

Formaldehído (12.3.3.) y mezclar. Al cabo de unminuto efectuar la valoración potenciométrica de lasolución problema con la solución de Sodio Hidróxi-do 0,25 mol/l (0,25N) SV hasta pH 8,1.

Si se hubieran utilizado más de 20 ml de la solu-ción de Sodio Hidróxido 0,25 mol/l (0,25N) SV,deberá realizarse de nuevo la valoración empleando15 ml de solución de Formaldehído, en lugar de10 ml.

Si la muestra contiene Anhídrido Sulfuroso, aña-dir algunas gotas de Hidrógeno Peróxido 30% p/v(100 vol.) PRS antes de la neutralización.

12.5 Expresión de los resultados.El índice de formol de la muestra analizada es

igual a la cantidad de solución alcalina utilizada en lavaloración expresada en ml de sodio hidróxido 0,1Ny que corresponden a 100 ml de zumo de uva.

12.6. Referencias.Federation Internationale des Producteurs de

Jus de Fruits. Analyses F.I.P.J.F. No. 30 Año 1984.

13. PROLINA

13.1. Principio.Determinación cuantitativa de la prolina por reac-

ción con ninhidrina en medio ácido.

13.2. Material y aparatos.13.2.1. Tubos de ensayo con tapón de rosca.13.2.2. Espectrofotómetro o colorímetro que

permita efectuar lecturas a 517 nm.

13.3. Reactivos.131030 Acido Fórmico 98% PA-ACS131074 Agua PA-ACS141897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PRS132362 Ninhidrina PA-ACS131090 2-Propanol PA-ACS-ISO

13.3.1. Ninhidrina al 3% en Eter mono-Metílicodel Etilenglicol PRS

13.3.2. Acido Fórmico 98% PA-ACS13.3.3. 2-Propanol PA-ACS-ISO-Agua PA-ACS

1:1 (v/v).

13.4. Procedimiento.Diluir la muestra hasta que contenga de 5 a

50 mg/l de prolina. Tomar 0,5 ml de muestra diluidae introducirla en un tubo de ensayo con tapón derosca, añadir 0,25 ml de Acido Fórmico 98% PA-ACS y 1 ml de solución de Ninhidrina al 3%. Cerrarherméticamente el tubo e introducirlo en un baño deagua hirviendo durante catorce o quince minutos,añadiendo mientras se enfría 5 ml de solución de2-Propanol PA-ACS-ISO- Agua PA-ACS 1:1 (v/v).

A continuación efectuar la lectura de la absor-ción a 517 nm después de cinco minutos y antes

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de treinta minutos. Efectuar un blanco siguiendo elprocedimiento anterior, pero usando 0,5 ml de AguaPA-ACS en vez de la solución problema.

13.5. Interpretación de los resultados.Calcular el contenido en prolina por compara-

ción con una curva patrón que comprenda concen-traciones entre 5 y 50 mg/l.

13.6. Referencias.C.S. Dugh J. of Food Science 34 (1969). 228.

14. ACIDO SORBICO

14.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación del

ácido sórbico por cromatografía de líquidos de altaeficacia y detección en ultravioleta a 230 nm.

14.2. Material y aparatos.14.2.1. Equipos de filtración de muestra y de

solventes, para eliminar partículas superiores a0,5 mm.

14.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado condetector de ultravioleta de longitud de onda variabley registrador.

14.2.3. Columna C-18 de 250x4,6 mm de 10 mmo similar.

14.3. Reactivos.141055 Acido Sórbico (USP-NF) PRS-CODEX131074 Agua PA-ACS261091 Metanol HPLC122333 di-Potasio Hidrógeno Fosfato 3-hidrato

PA131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato

PA-ACS-ISO

14.3.1. Solución patrón de 50 mg/l de AcidoSórbico (USP-NF) PRS-CODEX en Metanol HPLC.

14.3.2. Solución tampón de fosfatos de pH =6,6. Disolver 2,5 g de di-Potasio Hidrógeno Fosfato3-hidrato PA (K2HPO4.3H2O) y 2,5 g de Potasio di-Hidrógeno Fosfato PA-ACS-ISO (KH2PO4) en unlitro de Agua PA-ACS. Filtrar esta solución con(12.4.1.).

14.3.3. Metanol HPLC.

14.4. Procedimiento.14.4.1. Condiciones cromatográficas orientati-

vas: Fase móvil: Metanol HPLC-tampón fosfato10:90 (v/v).Flujo : 1 ml/min.

14.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatógrafoentre 10 y 20 ml de la solución patrón (14.3.1.) ycalcular el factor de respuesta.

CoFactor de respuesta (F) = –––––

ApSiendo:Co = Concentración en mg/l de ácido sórbico.Ap = Area del pico en el cromatograma de la

solución patrón.14.4.3. Determinación: Poner 10 ml de zumo de

uva en un matraz de 50 ml y enrasar con MetanolHPLC. Homogeneizar. Filtrar con 14.2.1. e inyectarentre 10 y 20 µl en el cromatógrafo.

14.5. Cálculos.El contenido en ácido sórbico expresado en mg/l

se obtendrá mediante la siguiente fórmula:Acido Sórbico (mg/l) = F x A1 x f

Siendo:F = Factor de respuesta.A1 = Area del pico del ácido sórbico en la

muestra.f = Factor de dilución de la muestra.

14.6. Observaciones.La sensibilidad puede aumentarse efectuando

lecturas a 250 nm.

14.7. Referencias.T. Stijve and Hischenhuber-Deutsche Lebensmit-

tel-Rundschau 80, Jahrf/Heft 3/1984.

15. ACIDO BENZOICO

15.1 Principio.Separación, identificación y cuantificación del

ácido benzoico por cromatografía de líquidos dealta eficacia y detección en el ultravioleta a 230 nm.

15.2. Material y aparatos.Como en 14.2.

15.3. Reactivos.121014 Acido Benzoico PA131074 Agua PA-ACS261091 Metanol HPLC122333 di-Potasio Hidrógeno Fosfato 3-hidrato

PA131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato

PA-ACS-ISO

15.3.1. Solución patrón de Acido Benzoico PAen Metanol HPLC de 50 mg/l.

15.3.2. Como en 14.3.2.15.3.3. Como en 14.3.3.

15.4 Procedimiento.Como en 14.4., siendo en este caso Co la concen-tración en mg/l de Acido Benzoico en la soluciónpatrón (15.3.1.).

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15.5. Cálculos.El contenido en ácido benzoico expresado en

mg/l se obtendrá mediante la siguiente fórmula:Acido benzoico (mg/l) = F x A1 x f

Siendo:F = Factor de respuesta.A1 = Area del pico del ácido benzoico en la

muestra.f = Factor de dilución de la muestra.

15.6. Observaciones.La sensibilidad puede aumentarse efectuando

lecturas a 217 nm.

15.7. Referencias.Como en 14.7.

16. HIDROXIMETILFURFURAL

16.1 Principio.Separación, identificación y cuantificación del

hidroximetilfurfural por cromatografía de líquidos dealta eficacia y detección en el ultravioleta a 285 nm.

16.2. Material y aparatos.16.2.1. Equipos de filtración de muestra y de

solventes, para eliminar partículas superiores a0,5 µm.

16.2.2. Cromatógrafo de líquidos equipado condetector ultravioleta de longitud de onda variable yregistrador.

16.2.3. Columna C-18 de 200 x 4,6 mm de 5 µmo similar.

16.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS

Hidroximetilfurfural261091 Metanol HPLC

16.3.1. Solución patrón: Solución de 20 mg/l deHidroximetilfurfural recientemente destilado enMetanol HPLC.

16.4. Procedimiento.16.4.1. Condiciones cromatográficas orientati-

vas: Fase móvil: Agua Destilada y Desionizada.tiempo de retención aproximado: 7 minutos. Flujo 1 ml/min.

16.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatógrafo20 µl de la solución patrón (16.3.1.) y calcular el fac-tor de respuesta.

CoFactor de respuesta (F) = ––––––

Ap

Siendo:Co = Concentración, en mg/l, de hidroximetilfur-

fural.Ap = Area del pico en el cromatograma de la

solución patrón.

16.4.3. Determinación: Inyectar en el cromató-grafo 20 µl de la muestra filtrada.

16.5. Cálculos.El contenido en hidroximetilfurfural expresado en

mg/l se obtendrá mediante la siguiente fórmula:Hidroximetilfurfural (mg/l) = F x A1 x f

Siendo:F = Factor de respuestaA1 = Area del pico de HMF en la muestraf = Factor de dilución de la muestra.

17. CENIZAS

17.1 Principio.Incineración del residuo obtenido tras la evapo-

ración del zumo de uva realizada de manera que sepuedan obtener todos los cationes (excepto amo-nio) en forma de carbonatos y otras sales mineralesanhidras.

17.2. Material y aparatos.17.2.1. Cápsulas de platino o cuarzo, de unos

80 mm de diámetro, con fondo plano.17.2.2. Baño de agua y arena.17.2.3. Horno eléctrico regulable.17.2.4. Balanza analítica con sensibilidad de

0,1 mg.

17.3. Procedimiento.Poner 25 ml de zumo de uva en cápsula tarada.

Evaporar con precaución en baño de agua (17.2.2.)hasta consistencia siruposa.

Añadir al residuo unas gotas de aceite de oliva,calentar lentamente en baño de arena (17.2.2.),hasta que la mayor parte de la sustancia orgánicaesté carbonizada. Introducir la cápsula en el horno(17.2.3.) a 525° C hasta que el residuo esté blanco(generalmente a las seis u ocho horas). Enfriarenseguida la cápsula en un desecador (unos treintaminutos) y pesar rápidamente.

Puede, ocurrir, a veces, que el carbono no sequema completamente. En este caso, humidificarlas cenizas con Agua PA-ACS, evaporar de nuevo ycalcinar. Si fuera necesario, repetir esta operaciónvarias veces.

17.4. Cálculos.El contenido en cenizas, expresado en gramos

por litro, vendrá dado por la siguiente fórmula:Cenizas (g/l) = 40 x P

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Siendo:P = Peso en g de las cenizas contenidas en

25 ml de zumo de uva.

17.5. Observaciones.Un ligero color marrón rojizo de las cenizas, posi-

blemente de Fe2O3 es aceptado y no requiere unposterior tratamiento.

17.6. Referencias.Federation International des Producteurs de Jus

de Fruits. Método N° 9. Año 1962.

18. MATERIAL MINERAL INSOLUBLEEN ACIDO CLORHIDRICO AL 10%

18.1. Principio.Tratamiento de las cenizas con ácido clorhídrico

al 10%, en las condiciones que se especifica en elmétodo.

18.2. Material y aparatos.18.2.1. El mismo que en (17.2.).18.2.2. Papel de filtro, sin cenizas, de porosidad

media o crisol filtrante número 3.

18.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO

18.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.18.3.2. Solución de Acido Clorhídrico al 10%

(p/p).18.3.3. Solución de Plata Nitrato de 100 g/l.

Disolver Plata Nitrato PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta la concentración deseada.

18.4. Procedimiento.Añadir a las cenizas totales en la misma cápsula

que se ha utilizado para su preparación, de 15 a25 ml de la solución de Acido Clorhídrico (18.3.2.).Llevar la cápsula y mantener a ebullición durantediez minutos. Recubrir la cápsula con vidrio de reloj,para impedir cualquier proyección.

Dejar enfriar y filtrar el contenido de la cápsula através del papel del filtro o crisol (18.2.2.). Lavar elpapel de filtro o crisol con Agua PA-ACS hasta quelas aguas de lavado estén exentas de Acido Clorhí-drico, lo que se comprueba con la solución de PlataNitrato (18.3.3.).

Evaporar cuidadosamente e incinerar en el hor-no regulado a 525° C durante una hora. Dejarenfriar la cápsula o el crisol y pesar con una preci-sión de 0,001 g. Repetir las operaciones de incine-ración hasta que la diferencia de masa entre dosdeterminaciones sucesivas sea inferior a 0,001 g.

18.5. Cálculos.El contenido en cenizas insoluble en ácido,

expresadas en mg/l, vendrá dado por la siguienteexpresión:

Cenizas insolubles mg/l = (P1-P0) x 40

Siendo:P0 = Peso, en mg, de la cápsula vacía o el crisol

vacío.P1 = Peso, en mg, de la cápsula o crisol con las

cenizas insolubles en ácido.

18.6. Referencias.Instituto de Racionalización y Normalización del

Trabajo, UNE 34-096-81.

19. FOSFORO TOTAL

19.1. Principio.Transformación de los compuestos fosforados y

posterior valoración espectrofotométrica como fos-fomolibdovanadato.

19.2. Material y aparatos.19.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro de

efectuar lecturas a 400 nm.19.2.2. Cápsula de platino, cuarzo o similar.

19.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131134 Amonio Molibdato 4-hidrato

PA-ACS-ISO122352 Amonio meta-Vanadato PA131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato

PA-ACS-ISO

19.3.1. Solución patrón de fosfatos. Disolver0,2397 g de Potasio di-Hidrógeno Fosfato PA-ACS-ISO (KH2PO4), desecado previamente en estufadurante dos horas a 105° C, en Agua PA-ACS y enra-sar a 250 ml.

19.3.2. Solución de Amonio Molibdato. Disolver60 g de Amonio Molibdato 4-hidrato PA-ACS-ISO en900 ml de Agua PA-ACS caliente, enfriar y enrasar a1 litro.

19.3.3. Solución de Amonio meta-Vanadato.Disolver 1,5 g de Amonio meta-Vanadato PA en690 ml de Agua PA-ACS caliente, añadir 300 ml deAcido Nítrico 70% PA-ACS-ISO, enfriar y enrasar a 1litro.

19.3.4. Solución de metamolibdovanadato. Añadirlentamente la solución de Amonio Molibdato (19.3.2.)sobre la solución de Amonio meta-Vanadato(19.3.3.), agitando. Conservar la solución en frascosde polietileno.

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19.3.5. Solución de Acido Clorhídrico. AcidoClorhídrico 37% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS en(1 + 3) (v/v).

19.3.6. Solución de Acido Clorhídrico. AcidoClorhídrico 37% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS en(1 + 9) (v/v).

19.4. Procedimiento.19.4.1. Curva de calibrado. A partir de la solu-

ción patrón (19.3.1.) preparar una serie de solucio-nes que contengan 0,00; 0,05; 0,10; 0,15; 0,20;0,25; 0,30 y 0,35 mg de P2O5/10 ml respectiva-mente. A continuación poner alícuotas de 10 ml decada solución en matraz aforado de 50 ml. Rápida-mente añadir a cada matraz 5 ml del reactivo deMetamolibdovanadato (19.3.4.), mezclar, enrasar ytapar. Dejar reposar al menos treinta minutos.

Efectuar las lecturas de los patrones frente a lasolución 0,00 antes de una hora, a 400 nm. Repre-sentar gráficamente concentraciones frente aabsorbancias leídas.

19.4.2. Preparación de la muestra. Tomar 25 mlde zumo de uva y obtener las cenizas según méto-do oficial número 17. Disolver las cenizas en 10 mlde solución de Acido Clorhídrico (19.3.5.) y evapo-rar en baño de agua. Disolver el residuo obtenido en10 ml de solución de Acido Clorhídrico (19.3.6.)calentar en baño maría y transferir a matraz de100 ml, enfriar y enrasar con Agua PA-ACS. Agitar yfiltrar para eliminar las materias insolubles presen-tes.

19.4.3. Determinación. Tomar 10 ml de filtrado ycontinuar como en la curva de calibrado (19.4.1.).

Si el contenido de P2O5 en las cenizas es supe-rior a 3,5 mg, llevar a matraz aforado superior a 100ml o efectuar diluciones hasta que el contenido deP2O5 en la alícuota sea menor a 0,35 mg.

19.5. Cálculos.El contenido en mg de P2O5 en 100 ml de mues-

tra se obtendrá mediante la curva de calibrado,teniendo en cuenta las diluciones efectuadas.

Para expresar el resultado como mg de P en100 ml de muestra, multiplicar el resultado anteriorpor 0,437.

19.6. Referencias.Official Methods of Analysis of the AOAC, 14ª edi-ción, 1984.

20. SULFATOS

20.1. Principio.Previa eliminación del dióxido de azufre por ebu-

llición, se precipitan los iones sulfato como BarioSulfato, se calcina y se pesa.

20.2. Material y aparatos.20.2.1. Matraz Erlenmeyer de 500 ml provisto de

ampolla con llave de 100 ml y tubo de desprendi-miento de vapor, atravesando ambos el tapón. Elmatraz se coloca sobre disco metálico de 15 cm dediámetro con abertura circular de 8 cm de diámetro.

20.2.2. Baño de agua y plancha caliente.

20.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO182108 Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV131074 Agua PA-ACS131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO

20.3.1. Acido Clorhídrico 2 mol/l (2N) SV.20.3.2. Bario Cloruro. 100 g de Bario Cloruro

2-hidrato PA-ACS-ISO en 1.000 ml de Agua PA-ACS.

20.3.3. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO

20.4. Procedimiento.20.4.1. Eliminación del dióxido de azufre del

zumo de uva. Introducir en el Erlenmeyer del aparatodescrito 50 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de AcidoClorhídrico 37% PA-ACS-ISO. Hervir esta soluciónpara eliminar el aire del aparato. Introducir 100 ml dezumo de uva por la ampolla de llave evitando que laebullición se pare durante esta adición. Continuar laebullición hasta reducir el volumen del líquido a unos100 ml eliminando todo el dióxido de azufre.

20.4.2. Precipitación de Bario Sulfato. Llevar elresiduo de la evaporación anterior a un vaso de400 ml, enjuagando el matraz con la cantidad deAgua PA-ACS suficiente para llevar el volumen totala 200 ml. Añadir 5 ml de Acido Clorhídrico 2 mol/l(2N) SV y llevar a ebullición. Adicionar gota a gota10 ml de solución de Bario Cloruro, con la precau-ción de no parar la ebullición y dejar reposar encaliente, colocando el vaso sobre placa a 60°Cdurante cuatro horas y en baño de agua hirviendodurante dos horas. En el caso de pequeñas canti-dades de precipitado, se recomienda un segundoreposo en frío durante 12 horas. Filtrar por filtro sincenizas, lavar el vaso y precipitado con Agua PA-ACS caliente hasta que no dé reacción con PlataNitrato PA-ACS-ISO, llevar el filtro cuidadosamenteplegado a crisol de porcelana tarado, desecar, cal-cinar y, después de enfriar en un desecador, pesar.

20.5. Cálculos.Calcular el contenido de sulfatos expresado en

meq/l o en g/l de potasio sulfato con una aproxima-ción de ± 0,05 g/l.Sulfato = 85,68 P meq/l.Sulfato = 7,465 P g/l de potasio sulfato.P = peso de las cenizas en g.

20.6. Referencias.Recueil des Méthodes Internationales d’Analyse

des Vins. O.I.V., A 14, 1-4. 1969.

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21. ANHIDRIDO SULFUROSO

21.1. Principio.Liberación del sulfuroso “libre” por acidificación

del zumo de uva, arrastre por corriente de aire,oxidación por borboteo en agua oxigenada neutray valoración con sosa del ácido sulfúrico formado.Liberación por ebullición moderada del sulfuroso“combinado”, que queda en el zumo de uva des-pués de la extracción del sulfuroso “libre” y análo-go tratamiento que en la determinación del sulfu-roso “libre”. El sulfuroso “total” es la suma delsulfuroso “libre” y el sulfuroso “combinado”. Puededeterminarse acidificando el zumo de uva y calen-tando y procediendo como en los dos casos ante-riores.

Este método es aplicable para contenidos enanhídrido sulfuroso superiores a 10 mg/l.

21.2. Material y aparatos.Como en 28 (a).2. de Métodos de Análisis de

Vinos pág. 59.

21.3. Reactivos.Como en 28 (a).3. de Métodos de Análisis de

Vinos pág. 59.

21.4. Procedimiento.21.4.1. Análisis del anhídrido sulfuroso libre. En

el matraz de 100 ml del aparato, poner 10 ml dezumo de uva y añadir 5 ml de Acido Fosfórico al25%, colocando acto seguido el matraz en su sitio.Si la riqueza en SO2 del vino es pequeña, se empleael matraz de 250 ml y se ponen 20-25 ml de uva.

Sumergir el matraz en un baño de agua a 10° C.Colocar 2-3 ml de Hidrógeno Peróxido de 0,3 volú-menes y dos gotas del reactivo indicador en elmatraz B y neutralizar el Hidrógeno Peróxido conSodio Hidróxido 0,01N.

Adaptar el matraz B al aparato y hacer borbotearaire (o, nitrógeno) durante 12-15 minutos. Retirar elmatraz B y valorar el ácido sulfúrico formado conSodio Hidróxido 0,01 N.

21.4.2. Análisis de anhídrido sulfuroso combina-do. Después de terminar la valoración del anhídridosulfuroso libre, colocar en el matraz B, ya limpio, los2-3 ml de Hidrógeno Peróxido neutralizado y conlas dos gotas del indicador. Calentar con llamapequeña hasta llevar a la ebullición el zumo de uvaque quedó en el matraz después de la determina-ción anterior. Aplicar el fuego directo sobre el fondodel matraz, que descansará sobre chapa metálicaperforada con orificio de 30 mm de diámetro, paraevitar la pirogenación de los azúcares del zumo deuva sobre las paredes del matraz.

Mantener el paso del aire o nitrógeno durante laebullición que durará 12-15 minutos, tiempo que seconsidera suficiente para arrastrar todo el sulfurosocombinado y después oxidarlo. Retirar el matraz B

y valorar el ácido sulfúrico formado con SodioHidróxido 0,01N.

21.4.3. Anhídrido sulfurososo total. Puede deter-minarse por la suma del anhídrido sulfuroso libremás el anhídrido sulfuroso combinado, pero tam-bién puede determinarse directamente, actuandodesde un principio con corriente de aire o nitrógenoy con calor.

21.5. Cálculos.Calcular el contenido en anhídrido sulfuroso

expresado en mg/l, con una aproximación de10 mg/l.

320 V1Anhídrido sulfuroso = –––––––– mg/l

V2

Siendo:V1 = Volumen, en ml, de NaOH 0,01N gastados

en la valoración.V2 = Volumen, en ml, de muestra para el análi-

sis.

21.6. Referencias.21.6.1. Paul, F. “Mitteinlungen Klosternenberg”,

A : 8, 21, 1958.21.6.2. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. O.I.V., A17, 1-8, 1969.

22. POTASIO

22.1. Principio.El potasio se determina por fotometría de llama

previa adición de litio cloruro, para evitar la ioniza-ción parcial de los metales en la llama.

22.2. Material y aparatos.22.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-

mica.22.2.2. Material de uso normal en laboratorio.

22.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS141392 Litio Cloruro PRS313190 Potasio solución patrón

K = 1,000 ± 0,002 g/l AA

22.3.1. Potasio solución patrón K = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,907 g de131494 Potasio Cloruro PA-ACS-ISO en un litro deAgua PA-ACS.

22.3.2. Solución de Litio Cloruro: Disolver 37,3 gde Litio Cloruro PRS en 100 ml de Agua PA-ACS.

22.3.3. Soluciones de Potasio de 0; 1; 2; 3; 5 y7 mg/l preparadas a partir de la solución de Pota-sio, previa adición de la cantidad necesaria de LitioCloruro PRS, para que el Litio se encuentre en unaproporción de aproximadamente 2.000 mg/l.

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22.4. Procedimiento.Tomar 1 ml de la muestra y llevar a 200 ml con

Agua PA-ACS (previa adición de la cantidad necesa-ria de Litio Cloruro PRS para que el Litio se encuen-tre en una proporción de aproximadamente2.000 mg/l), leyéndose en fotometría de llama frentea las soluciones de referencia a 766-770 nm.

22.5. Cálculos.El contenido de potasio se calcula a partir del

valor obtenido en el espectrofotómetro por compa-ración con la curva patrón, teniendo en cuenta ladilución efectuada. Los resultados se expresan enmg de Potasio/ 100 ml de la muestra.

22.6. Observaciones.Puede utilizarse una solución de 40 g/l de cloruro

de cesio en lugar de cloruro de litio, siendo en estecaso la concentración adecuada de cloruro de cesioen las disoluciones de la muestra y patrones entre0,1-0,4%.

22.7. Referencias.22.7.1. Federation International des Producteurs

de Jus de Fruits, Método núm. 33. Año 1984.

23. SODIO

23.1. Principio.El Sodio se determina por fotometría de llama

previa adición de litio cloruro, para evitar la ioniza-ción parcial de los metales en la llama.

23.2. Material y aparatos.23.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.23.2.2. Material de uso normal en laboratorio.

23.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS141392 Litio Cloruro PRS313192 Sodio solución patrón

Na = 1,000 ± 0,002 g/l AA

23.3.1. Sodio solución patrón Na = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 2,542 g de131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO (NaCl) en unlitro de Agua PA-ACS.

23.3.2. Solución de Litio Cloruro: Disolver 37,3 gde Litio Cloruro PRS en 100 ml de Agua PA-ACS.23.3.3. Soluciones de Potasio de 0; 1; 2; 3 y 5 mg/lpreparadas a partir de la solución de Sodio, previaadición de la cantidad necesaria de Litio CloruroPRS, para que el Litio se encuentre en una propor-ción de aproximadamente 2.000 mg/l.

23.4. Procedimiento.Tomar 1 ml de la muestra y llevar a 100 ml (ver

23.6.2.) con Agua PA-ACS (previa adición de la can-

tidad necesaria de Litio Cloruro PRS para que el Litiose encuentre en una proporción de aproximada-mente 2.000 mg/l), leyéndose en fotometría de llamafrente a las soluciones de referencia a 589 nm.

23.5. Cálculos.El contenido de sodio se calcula a partir del valorobtenido en el espectrofotómetro por comparacióncon la curva patrón, teniendo en cuenta la diluciónefectuada. Los resultados se expresan en mg desodio/l de la muestra.

23.6. Observaciones.23.6.1. Puede utilizarse una solución de 40 g/l de

cloruro de cesio en lugar de cloruro de litio, siendoen este caso la concentración adecuada de clorurode cesio en las disoluciones de la muestra y patro-nes entre 0,1 y 0,4%.

23.6.2. Efectuar las diluciones necesarias paraque la muestra esté en el rango de la curva.

23.7. Referencias.23.7.1. Federation International des Producteurs

de Jus de Fruits, Método núm. 33. Año 1984.23.7.2. Métodos Associations of Official Analyti-

cal Chemist. Ed. 1984.

24. ARSENICO

24.1. Principio.La muestra se somete a una digestión ácida con

una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.La determinación del arsénico se realiza por

espectrofotometría de absorción atómica, congenerador de hidruros.

24.2. Material y aparatos.24.2.1. Material de uso normal en laboratorio.24.2.2. Matraces Kjeldahl de 250 ml.24.2.3. Espectrofotómetro de absorción atómica

equipado con sistema generador de hidruros.24.2.4. Lámpara de descarga sin electrodos.24.2.5. Fuente de alimentación para lámpara de

descarga sin electrodos.

24.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal

Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313171 Arsénico solución patrón

As = 1,000 ± 0,002 g/l AA131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas

PA-ISO123314 Sodio Borohidruro PA131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO

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24.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO. 24.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico al 32%

v/v. Disolver 32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.

24.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico al 1,5%.Disolver 15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de1.000 ml.

24.3.4. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO24.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.24.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%

(p/v): Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta unvolumen de 100 ml.

24.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%(p/v): Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro ydisolverlo hasta 100 ml con la solución de SodioHidróxido al 1%.

24.3.8. Disolución de EDTA Sal Disódica 2-hidra-to al 1%. Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetraacé-tico Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO y disolver-lo hasta 100 ml con Agua PA-ACS.

24.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.Pesar 23,5 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volu-men de 100 ml.

24.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO(24.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.

24.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1%(v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO conAgua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.

24.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000± 0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsé-nico III Oxido EQP en 2,5 ml de Potasio Hidróxido al20% (24.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico al20% (24.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfú-rico 1% (24.3.11.).

24.3.13. Solución patrón de Arsénico de con-centración 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la soluciónpatrón de Arsénico (24.3.12.), en un matraz aforadode 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.

24.3.14. Solución patrón de Arsénico de con-centración 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución deArsénico (24.3.13.), en un matraz aforado de100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.

24.4. Procedimiento.24.4.1. Preparación de la muestra: En un matraz

Kjeldahl, de 250 ml introducir 2 g de muestra con20 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 5 ml deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO. Llevar a ebulliciónhasta reducir el volumen a 5 ml. Dejar enfriar y disol-ver con Agua PA-ACS en un matraz de 50 ml lasolución resultante.

24.4.2. Preparación de los patrones de trabajosy del blanco. En un matraz Kjeldahl, introducir 5 ml

de la solución de Arsénico (24.3.14.) y someterlo almismo tratamiento que la muestra. 1 ml de la solu-ción contiene 10 nanogramos de Arsénico. Prepa-rar un blanco con todos los reactivos utilizadossiguiendo el tratamiento dado a la muestra.

24.4.3. Condiciones del espectrofotómetro:Encender la fuente de alimentación de las lámparasde descarga sin electrodos con el tiempo suficientepara que se estabilice la energía de la lámpara.Encender el espectrofotómetro, ajustar la longitudde onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de acuerdocon las condiciones del aparato. Encender el gene-rador de hidruros, colocando la temperatura de lacelda a 900° C, esperando hasta que se alcanzadicha temperatura. Se ajustan las condiciones delgenerador de hidruros según las especificacionesdel aparato. Ajustar el flujo de argón de acuerdocon las características del aparato.

24.4.4. Determinación: Las determinaciones dela concentración de Arsénico se realizan por elmétodo de adición de patrones, por medio demedidas duplicadas en el espectrofotómetro en lascondiciones especificadas en (24.4.3.), añadiendoal matraz de reacción 3 ml de la solución (24.3.8.).Como patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng deArsénico. Lavar los matraces antes y después decada uso, con Acido Clorhídrico 1,5% (24.3.3.). Alconstruir la gráfica de adición hay que descontar elvalor de absorbancia del blanco obtenido en lasmismas condiciones anteriores, pero añadiendo3 ml de la solución blanco. En estas condiciones ellímite de detección de la técnica es de 5 ng.

25. HIERRO

25.1. Principio.Determinación del hierro por absorción atómica

previa mineralización de la muestra.

25.2. Material y aparatos.25.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-

mica.25.2.2. Lámpara de hierro.25.2.3. Los utilizados para el plomo en (26.2.3.),

(26.2.4.) y (26.2.5.).

25.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313182 Hierro solución patrón

Fe = 1,000 ± 0,002 g/l AA

25.3.1. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.25.3.2. Acido Nítrico al 1%. Diluir Acido Nítrico

70% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta la con-centración indicada.

25.3.3. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.

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25.3.4. Hierro solución patrón Fe = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1g de 131365Amonio Hierro III Sulfato 12-hidrato PA en 50 ml dela solución de Acido Nítrico (1+1) y diluir hasta1.000 ml con Acido Nítrico 1% (v/v).

25.4. Procedimiento.25.4.1. Preparación de la muestra. Como en

(26.4.1.).25.4.2. Curva de calibrado. A partir de la solu-

ción patrón (25.3.4.), preparar una serie de solucio-nes conteniendo de 0,5 a 5,0 mg de hierro por litro,con Acido Nítrico al 1% (v/v).

25.4.3. Determinación. Igual que para el Plomo.Efectuar las lecturas a 248,3 nm.

25.5. Cálculos.Obtener el contenido de hierro de la muestra por

interpolación a partir de la curva de calibrado yteniendo en cuenta las diluciones efectuadas.

26. PLOMO

26.1. PrincipioDeterminación del plomo por absorción atómica

previa mineralización de la muestra.

26.2. Material y aparatos.26.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-

mica.26.2.2. Lámpara de plomo.26.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar.26.2.4. Baño de arena o placa calefactora.26.2.5. Horno eléctrico (mufla) con dispositivo de

control de temperatura.

26.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313189 Plomo solución patrón

Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA

26.3.1. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.26.3.2. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS.26.3.3. Plomo solución patrón Pb = 1,000

± 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a1000 ml con Acido Nítrico al 1%.

26.3.4. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.

26.4 Procedimiento.26.4.1. Preparación de la muestra.- Poner

100 ml de la muestra en una cápsula de platino ocuarzo y llevarla a evaporación hasta consistenciasiruposa en baño de arena. Añadir a continuación2 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar elresiduo en el baño de arena. Seguidamente introdu-

cir la cápsula en la mufla y mantenerla durante doshoras a 450°C. Transcurrido dicho tiempo, sacarla ydejarla enfriar.

Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en elbaño de arena o placa e introducir en la mufla, repi-tiendo esta operación hasta obtener cenizas blan-cas. Un ligero color marrón rojizo en éstas, posible-mente de Fe2O3 es aceptado y no requiere unposterior tratamiento.

Disolver a continuación las cenizas con 1 ml deAcido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-ACS, una vez disueltas filtrar y recoger en un matrazde 10 ml, lavando la cápsula y el filtro con Agua PA-ACS hasta el enrase.

26.4.2. Curva patrón.- Diluir alícuotas apropia-das de la solución patrón con Acido Nítrico al 1%para obtener una curva de concentraciones 2; 4; 6;8 y 10 mg/l.

26.4.3. Determinación.- Operar según las espe-cificaciones del aparato, usando llama de aire-aceti-leno. Medir las absorbancias de la muestra y patro-nes a 283 nm. Si la solución está muy concentrada,diluirla con Acido Nítrico al 1%.

26.5. Cálculos.Calcular el contenido en plomo, expresado en

mg/l mediante comparación con la correspondientecurva patrón y teniendo en cuenta el factor dilu-ción.

26.6. Referencias.26.6.1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos.

Ministerio de Agricultura, pág. 134 (I), 1976.

27. ESTAÑO

27.1. Principio.Determinación de estaño por absorción atómica,

previa digestión ácida.

27.2. Materiales y aparatos.27.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-

mica.27.2.2. Lámpara de estaño.27.2.3. Material de uso normal en laboratorios.

27.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO212236 Agua Desionizada QP313180 Estaño patrón Sn = 1,000 ± 0,002 g/l AA

27.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.27.3.2. Solución de Acido Clorhídrico 7N. Diluir

Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta la concentración deseada.

27.3.3. Agua Desionizada27.3.4. Estaño solución patrón Sn = 1,000 ±

0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de

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141304 Estaño metal, granalla PRS en 100 ml deAcido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO y diluir hasta1.000 ml con Agua Desionizada.

27.4. Procedimiento.27.4.1. Preparación de la muestra.- Medir de 1 a

5 ml de la muestra directamente en un Erlenmeyer.Añadir 25 ml de solución de Acido Clorhídrico 7N.Llevar a ebullición y mantenerla a fuego lento duran-te cinco minutos. Enfriar y transferir cuantitativamen-te a un matraz de 50 ml, enrasando con Agua PA-ACS. Agitar y filtrar con papel Watman número 1.

27.4.2. Curva de calibrado.- A partir de la solu-ción patrón de Estaño, preparar una serie de solu-ciones conteniendo 50; 100; 150 y 250 mg/l deEstaño.

27.4.3. Determinación.- Operar según las espe-cificaciones del aparato usando una llama reductorade óxido nitroso-acetileno. Medir las absorbanciasde la muestra y patrones a 286 nm.

27.5. Cálculos.Obtener el contenido de estaño de la muestra

por interpolación a partir de la curva de calibrado.

28. COBRE

28.1. PrincipioDeterminación del cobre por absorción atómica,

previa mineralización de la muestra.

28.2. Material y aparatos.28.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-

mica.28.2.2. Lámpara de cobre.28.2.3. Los utilizados para el Plomo, en (26.2.3.),

(26.2.4.) y (26.2.5.).

28.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313178 Cobre solución patrón

Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA

28.3.1. Los utilizados para el plomo en (26.3.1.),(26.3.2.) y (26.3.4.)

28.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g deCobre puro en el mínimo volumen necesario de Aci-do Nítrico 70% PA-ACS-ISO 1:1. Diluir después aun litro con Acido Nítrico al 1%.

28.4 Procedimiento.28.4.1. Preparación de la muestra.- Como para

el Plomo en (26.4.1.).28.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir

partes alícuotas de la solución patrón de Cobre

con Acido Nítrico al 1% para obtener solucionesque contengan de 1 a 5 mg de Cobre.

28.4.3. Determinación.- Igual que para el Plomo.Medir a 324,7 nm.

28.5 Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancia obteni-

dos para la muestra, hallar mediante la curva patrónlas concentraciones de Cobre de la muestra,teniendo en cuenta el factor de dilución.

29. ZINC

29.1. Principio.Determinación del zinc por absorción atómica,

previa mineralización de la muestra.

29.2. Material y aparatos.29.2.1. Espectrofotómetro de absorción ató-

mica.29.2.2. Lámpara de zinc.29.2.3. Los utilizados para el Plomo en (26.2.3.),

(26.2.4.) y (26.2.5.).

29.3 Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313193 Zinc solución patrón

Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA

29.3.1. Los utilizados para el Plomo en (26.3.1.),(26.3.2.) y (26.3.4.).

29.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ± 0,002g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141783Zinc metal, polvo PRS en el mínimo volumen nece-sario de Acido Nítrico diluido con Agua PA-ACS(1:1) y diluir a un litro con Acido Nítrico al 1% (v/v).

29.4. Procedimiento.29.4.1. Preparación de la muestra.- Como para

el Plomo (26.4.1.).29.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir

partes alícuotas de la solución patrón (29.3.2.), conAcido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5a 1 mg/l.

29.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.La lectura se efectuará a 213,5 nm.

29.5 Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancias obteni-

dos, hallar las concentraciones de Zinc para lamuestra, teniendo en cuenta el factor concentra-ción o dilución.

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Productos derivadosde la uva: Vinagres

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1. EXTRACTO TOTAL

1.1. Principio.El extracto seco total se define como el conjunto

de todas las sustancias que, en condiciones físicasdeterminadas, no se volatilizan. En estas condicio-nes físicas deben fijarse de tal manera que las sus-tancias componentes del extracto sufran el mínimode alteración.

El método está basado en una evaporación delvinagre en baño de agua con secado posterior enestufa regulable a 100 - 105°C.

1.2. Material y aparatos.1.2.1. Balanza con aproximación de 0,001 g.1.2.2. Estufa con ventilación de aire regulable de

100 a 105°C.1.2.3. Desecador de vidrio con ácido sulfúrico

concentrado o gel de sílice (sílice amorfa impreg-nada con sustancia reveladora) como sustanciadesecadora.

1.2.4. Baño de agua.1.2.5. Cápsulas de fondo plano de 5 cm de diá-

metro construidas en platino, níquel o cuarzo.1.2.6. Pipetas aforadas de 10 ml con doble en-

rase.

1.3. Procedimiento.Agitar la muestra y filtrar a través de un papel de

filtro plegado (tipo jarabe). Medir 10 ml del vinagrefiltrado en una cápsula previamente tarada. Evapo-rar en baño de agua hirviente durante 30 minutos ymantener en la estufa durante dos horas y media a105°C. Dejar secar la cápsula en el interior deldesecador y, una vez fría, pesar en la balanza deprecisión.

1.4. Cálculo.El valor del extracto total del vinagre , en porcen-

taje, se hallará mediante la fórmula siguiente:Extracto total: (M - m) 10en la que:

M = masa, en gramos, de la cápsula con elextracto seco.

m = masa, en gramos, de la cápsula vacía.

1.5. Referencias.1.5.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.

Una norma española 33.101.1.5.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.

11a. ed., página 519, 30.061.

2. ACIDEZ TOTAL(Grado acético)

2.1. Principio.La acidez total se define como la totalidad de los

ácidos volátiles y fijos que contiene el vinagre expre-sada en gramos de ácido acético por 100 ml devinagre.

La determinación se efectúa mediante una volu-metría de neutralización en presencia de soluciónalcohólica de fenolftaleína como indicador.

2.2. Material y aparatos.2.2.1. Bureta de 50 ml graduada en décimas de

ml.2.2.2. Pipeta aforada de 10 ml con doble enrase.2.2.3. Matraces Erlenmeyer de 250 ml de capa-

cidad.

2.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131325 Fenolftaleína PA-ACS181692 Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV

2.3.1. Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV.2.3.2. Solución indicadora de Fenolftaleína. Se

disuelven 10 g de Fenolftaleína PA-ACS en Etanol96% v/v PA y se completa a un litro con el mismosolvente.

2.4. Procedimiento. Medir 10 ml de vinagre, previamente filtrado, en

un Erlenmeyer de 250 ml. Diluir con 100 o 150 mlde Agua PA-ACS recién hervida y fría hasta conse-guir una solución débilmente coloreada. Añadir seisgotas de la solución indicadora de Fenolftaleína yagregar Sodio Hidróxido 0,5 mol/l (0,5N) SV conte-nido en la bureta gota a gota y agitando hasta virajedel indicador.

2.5. Cálculo.El valor de la acidez total o grado acético del

vinagre en porcentaje se hallará mediante la fórmulasiguiente:

Acidez total o grado acético = a x 10 x 0,0300en la que :

a =volumen, en ml, de sodio hidróxido 0,5N.

2.6. Referencias.2.6.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.

Una norma española 33.101.2.6.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.

11a. ed , página 520, 30. 068.

3. ACIDEZ FIJA

3.1. Principio.La acidez fija se define como la totalidad de los áci-dos fijos que contiene el vinagre, expresada en gra-mos, de ácido acético por 100 ml de vinagre.

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3.2. Material y aparatos.3.2.1. Baño de agua.3.2.2. Bureta de 10 ml de capacidad graduada

en décimas de ml.3.2.3. Pipeta aforada de 10 ml con doble enrase.3.2.4. Cápsulas de 200 ml de capacidad.

3.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131325 Fenolftaleína PA-ACS181694 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV

3.3.1. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV.3.3.2. Disolución indicadora de Fenolftaleína PA-

ACS al 1% en Etanol 96% v/v PA.

3.4. Procedimiento.Medir 10 ml de vinagre previamente filtrado y lle-

varlo a una cápsula de porcelana. Evaporar asequedad en baño de agua. Añadir de 5 a 10 mlAgua PA-ACS recientemente hervida y volver a eva-porar a sequedad, repitiendo esta operación cincoveces más. Añadir, aproximadamente, 180 ml deAgua PA-ACS recientemente hervida y fría, añadirseis gotas de la solución indicadora de Fenolftaleínay agregar Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV con-tenido en la bureta, gota a gota y agitando, hastaviraje del indicador.

3.5. Cálculo.El valor de la acidez fija del vinagre, expresado

en gramos de ácido acético por 100 ml, se hallarámediante la fórmula siguiente:

Acidez fija = a x 10 x 0,00600en la que:

a = volumen, en ml de sodio hidróxido 0,1N.

3.6. Referencias.3.6.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.

Una norma española 33.101.3.6.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.

11a. ed., página 520, 30.069.

4. ACIDEZ VOLATIL

4.1. Principio.Se define convencionalmente como valor de la

acidez volátil de un vinagre la diferencia entre losvalores de su acidez total y fija, expresadas ambasen gramos de ácido acético por 100 ml de vinagre.

4.2. Cálculo.El valor de la acidez volátil del vinagre, expresa-

do en gramos de ácido acético por 100 ml, se halla-rá mediante la fórmula siguiente:

At - Af = acidez volátilen la que :

At = acidez total o grado acético, expresado engramos de ácido acético por 100 ml.

Af = acidez fija de la misma muestra de vinagre,expresada en gramos de ácido acético por100 ml.

4.3. Referencias.4.3.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.

Una norma española 33.101.4.3.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.

11a. ed., página 520, 30.070.

5. SULFATOS

5.1. Principio.Precipitación del bario sulfato en medio ácido.

5.2. Material y aparatos.5.2.1. Vasos de precipitado de 250 ml.5.2.2. Baño de agua.5.2.3. Estufa.5.2.4. Desecador.

5.3. Reactivos.181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV131074 Agua PA-ACS131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO171461 Plata Nitrato solución 0,1% p/v RE

5.3.1. Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV.5.3.2. Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO.

5.4. Procedimiento.A 100 ml de muestra en vaso de precipitado de

250 ml añadir 2 ml de Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N)SV, calentar a ebullición e ir añadiendo gota a gota10 ml de Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO (1 g/100 ml de BaCl2.2H2O) sin que deje de hervir lasolución. Continuar hirviendo cinco minutos mante-niendo el volumen constante, añadiendo Agua PA-ACS caliente siempre que sea necesario. Dejar enreposo hasta que el sobrenadante esté claro (unanoche es suficiente, aunque no conviene sobrepa-sar ese tiempo). Filtrar por papel sin cenizas de porofino, lavar con Agua PA-ACS caliente hasta que nodé reacción con Plata Nitrato solución 0,1% p/v RElas aguas del lavado, secar, calcinar, enfriar endesecador y pesar.

5.5. Cálculo.La proporción de sulfatos = 7,465 P g/l de K2SO4siendo;P = peso, en g, del producto de la calcinación.

5.6. Referencias.5.6.1. A. O. A. C. Official Methods of Analysis.

11a. ed. (1970).

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5.6.2. Instituto de Racionalización del Trabajo.Una norma española 33-104-73.

6. ACETILMETILCARBINOL (ACETOINA)

6.1. Principio.Determinación cuantitativa de la acetoína por

cromatografía de gases.

6.2. Material y aparatos.6.2.1. Equipo de cromatografía de gases com-

puesto por:6.2.1.1. Detector de ionización de llama. 6.2.1.2. Horno con temperatura regulable. 6.2.1.3. Registrador.6.2.1.4. Gases: Aire-nitrógeno.6.2.1.5. Columna: FFAP 2,5% sobre Chromo-

sorb G (HP), añadiéndose un 0,5 de un reductor decolas (p. e., Carbowax 1.500) y de dimensiones 2 mde longitud y 1/8 de pulgada de diámetro externode la columna.

6.2.2. Microjeringa de 1 a 10 µl.

6.3. Reactivos.Acetoína

131074 Agua PA-ACS121884 1-Pentanol PA121086 Etanol absoluto PA142400 Calcio Hidróxido polvo 90% (USP)

PRS-CODEX

6.3.1. Acetoína. 6.3.2. 1-Pentanol PA.6.3.3. Etanol absoluto PA.6.3.4. Calcio Hidróxido polvo 90 % (USP) PRS-

CODEX.

6.4. Procedimiento.6.4.1. Disolución patrón.6.4.1.1. De Acetoína: A partir de Acetoína purifi-

cada de su posible contenido en Diacetilo mediantedestilación, obtener soluciones de Acetoína quecubran un rango de concentraciones de 10 a500 mg/l en Agua PA-ACS.

6.4.1.2. De patrón interno: Añadir 2 ml de 1-Pentanol PA en 100 ml de Solución Hidroalcohóli-ca al 50%.

6.4.2. Determinación.6.4.2.1. Condiciones cromatográficas. Gas por-

tador: Nitrógeno (flujo de 12,5 mg/min.).Temperatura horno: 70° C.Temperatura inyector: 180° C.Inyección : 4 o 2 µl.Patrón interno: 1-Pentanol PA.

6.4.2.2. Método operatorio.A cada una de las soluciones patrón de Acetoína

preparadas en 6.4.1.1., añadir solución de 1-Penta-

nol PA de tal forma que a las soluciones que con-tengan de 10 a 50 mg/l de Acetoína se le añadan15 µl y a las que contengan de 50 a 500 mg/l se leañadan 35 µl e inyectarlas a continuación, obtenien-do la curva de calibrado (se deben efectuar doscurvas de calibrado, una que cubra el rango de 0-50 mg/l de Acetoína y otra de 50 a 300 mg/l).

La inyección de la muestra puede efectuarsedirectamente del vinagre, una vez añadido el patróninterno, pero teniendo en cuenta que el tiempo deretención es elevado y la concentración del acéticoes muy grande, obliga a esperar un largo períodode tiempo entre dos inyecciones sucesivas. Paraevitar esta dificultad, deben neutralizarse a pH = 7las muestras, preferiblemente con Calcio Hidróxidopolvo, 90% (USP) PRS-CODEX para evitar variacio-nes de volumen. Téngase en cuenta que la concen-tración de Acetoína en el medio neutro puede variarcon tiempo, por lo que la neutralización debe hacer-se inmediatamente antes de inyectar en el cromató-grafo.

6.5. Cálculo.Los cromatogramas obtenidos de las distintas

soluciones patrón permiten representar gráfica-mente la relación existente entre el cociente:

Area del pico de la acetoína–––––––––––––––––––––––––––––––Area del pico del alcohol n-amílico

La relación de áreas obtenida para la muestra secompara con la curva de calibrado (concentraciónde acetoína /relación de áreas ), obteniéndose lacantidad de acetoína de la muestra.

6.6. Referencia.6.1.1. E. F. Gorostiza, M. L. Gil de la Peña y M.

C. Gómez Cordobés. Instituto de FermentacionesIndustriales.

7. CENIZAS

7.1. Principio.Se denominan cenizas de un vinagre el conjunto

de los productos de incineración del residuo deevaporación de un volumen conocido del vinagre,realizada de manera que se puedan obtener todoslos cationes en forma de carbonatos y otras salesminerales anhidras.

7.2. Material y aparatos.7.2.1. Horno eléctrico regulable.7.2.2. Baño de agua y baño de arena.7.2.3. Lámpara de infrarrojo.7.2.4. Cápsula de platino o de cuarzo de 70 mm

de diámetro y 25 mm de altura, fondo plano.

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7.3. Procedimiento.Colocar 20 ml de vinagre en una cápsula tarada

en balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar conprecaución en baño de agua hasta consistenciasiruposa, continuar el calentamiento sobre baño dearena con moderación y durante una media hora.Es conveniente ayudar a la evaporación con la apli-cación de rayos infrarrojos hasta carbonización.Cuando ya no se desprendan vapores, llevar la cáp-sula al horno eléctrico a 525 ± 25° C y con aireacióncontinua. Después de cinco minutos de carboniza-ción completa, sacar la cápsula del horno, dejarenfriar y añadir 5 ml de Agua PA-ACS, que se eva-poran en baño de agua, y llevar de nuevo al horno a525°C.

Si la combustión de las partes carbonosas nose consigue en 15 minutos, volver a comenzar laoperación de adición de Agua PA-ACS, evapora-ción y recalcinación.Después de enfriar en el desecador, pesar la cápsu-la con las cenizas.

7.4. Cálculo.Calcular el contenido en cenizas expresado

en g/l.

Cenizas = 50 P g/l.

P = peso, en g, de las cenizas contenidas en20 ml de vinagre.

Dar los resultados con una aproxinación de0,03 g/l.

7.5. Referencias.7.5.1. Recueil des Méthodes Internationales

d'Analyse des Vins. O. I. V., AGI, 1969.7.5.2. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos,

Ministerio de Agricultura, 1971, pág. 66.

8. INDICE DE OXIDACION

8.1. Principio.Oxidación con potasio permanganato de las

sustancias volátiles fácilmente oxidables de losvinagres.

8.2. Materiales y aparatos.8.2.1. Matraz de destilación de 250 ml de capa-

cidad provisto de dispositivo de entrada de vaporde agua para destilación por arrastre de vapor.

8.2.2. Matraz Erlenmeyer de 50 ml de capacidadprovisto de boca esmerilada y tapón.

8.2.3. Matraz aforado de 50 ml de capacidad.8.2.4. Refrigerante de serpentín de 25 cm de

capacidad útil.8.2.5. Calderín generador de vapor.8.2.6. Pipeta aforada con doble enrase de 10;

20; 25 y 50 ml de capacidad.

8.2.7. Bureta de 50 ml de capacidad graduadaen décimas de ml.

8.3. Reactivos.131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS171096 Almidón Soluble RE181528 Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N) SV131542 Potasio Yoduro PA-ISO181722 Sodio Tiosulfato 1mol/l (1N) SV

8.3.1. Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N) SV8.3.2. Disolución valorada de Sodio Tiosulfato

1 mol/l (1N) SV. En un matraz aforado diluir a 1:1Sodio Tiosulfato 1 mol/l (1N) SV con Agua PA-ACSy determinar el factor de la solución 0,5N obtenida.

8.3.3. Disolución de Potasio Yoduro PA-ISO al50%. Ver 8.6.2. Disolver Potasio Yoduro PA-ISO enAgua PA-ACS y ajustar a la concentración indicada.

8.3.4. Disolución indicadora de Almidón. Disol-ver 5 g de Almidón soluble RE en 20 ml de AguaPA-ACS y se vierte en 1 ml de Agua PA-ACS hir-viente. Se continúa la ebullición durante cinco minu-tos y se deja enfriar antes de su empleo. Convieneguardarla en frascos esterilizados.

8.3.5. Disolución de Acido Sulfúrico al 50% envolumen. Diluir Acido Sulfúrico 96% PA-ISO conAgua PA-ACS.

8.4. Procedimiento.Ajustar el vinagre a 4 g por 100 de acidez total,

expresada en ácido acético. Tomar 50 ml de vina-gre, con la acidez debidamente ajustada, e introdu-cir en el matraz de destilación. Pasar a su travésuna corriente de vapor de agua procedente del cal-derín descrito, a una velocidad regulada, de maneraque cuando se hayan recogido 50 ml de destiladose conserven en el matraz de destilación aproxima-damente 45 ml. Comprobar que la temperatura deldestilado no sobrepase 25°C. Pasar los 50 ml deldestilado al matraz Erlenmeyer de 500 ml. Añadir10 ml de la solución de Acido Sulfúrico 96% PA-ACS y 25 ml Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N)SV. Mantener el matraz durante una hora en el bañode agua a 25°C.

Trascurrido ese tiempo, añadir 20 ml de la diso-lución de Potasio Yoduro. Tapar el matraz y mezclarbien su contenido. Inmediatamente valorar el yodoliberado con la dilolución de Sodio Tiosulfato 1 mol/l(1N) SV. Simultáneamente, a la muestra de vinagrellevar, en las mismas condiciones, un blanco en queel destilado se sustituya por 50 ml de Agua PA-ACS.

8.5. Cálculo.El valor del índice de oxidación de hallará

mediante la fórmula siguiente:

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a -bI = –––––– x grado acético del vinagre original

8

donde:I = índice de oxidación.a = volumen, en ml, de sodio tiosulfato 1 mol/l

(1N) SV consumido en la valoración de la muestra en blanco.

b = volumen, en ml, de sodio tiosulfato 1 moll (1N) SV consumido en la valoración de la muestra de vinagre diluido.

8.6. Observaciones.8.6.1. Si el índice de oxidación resulta mayor que

15, ha de repetirse la determinación, usando 25 mldel vinagre ajustando a 4 grados acéticos, aña-diendo 25 ml de agua. Repetir esta reducción a lamitad hasta que el índice de oxidación sea menorque 15. Calcular el índice de oxidación, teniendo encuenta las diluciones efectuadas.

8.6.2. Esta disolución no se debe usar si presen-ta color amarillento.

8.7. Referencias.8.7.1. Instituto de Racionalización del Trabajo.

Una norma española 33-102-73.8.7.2. Métodos Oficiales de Análisis de la Asso-

ciation of Official Agricultural Chemists de EstadosUnidos (ed. 1970).

9. METANOL (Alcohol Metílico), METODO DEL ACIDOCROMOTROPICO

9.1. Principio.Como en 37.1 de los métodos oficiales de análi-

sis de vinos.

9.2. Material y aparatos.Como en 37.2 de los métodos oficiales de análi-

sis de vinos y matraz aforado de 25 ml.

9.3 Reactivos.171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica

2-hidrato RE131032 Acido orto-Fosfórico 85%

PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA 131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO131698 Sodio Disulfito PA-ACS141717 Sodio Sulfito anhidro (BP, F. Eur.)

PRS-CODEX

9.3.1. Como 37.3.1 de los métodos oficiales deanálisis de vinos.

9.3.2. Idem.

9.3.3. Idem.9.3.4. Etanol 96% v/v PA.

9.4. Procedimiento.Tomar 25 ml de vinagre, destilar en destilador

simple y recoger 15 ml de destilado en matraz afo-rado de 25 ml sumergido en baño de hielo. Añadirel Etanol 96% v/v PA suficiente para que una vezenrasado a 25 ml con Agua PA-ACS la concentra-ción del Etanol 96% v/v PA sea del 5-6% (9.6.1.).Continuar como en 37.4. de los métodos oficialesde análisis de vinos.

9.5.Cálculo.Como en 37.5 de los métodos oficiales de análi-

sis de vinos.

9.6. Observaciones.9.6.1. En vinagres normales suele ser suficiente

añadir 1,5% de Etanol 96% v/v PA.

9.7. Referencia.9.7.1. Association of Official Agricultural Che-

mists Official Methods of Analysis,1965, página138.

10 (a). ACIDO TARTARICO(Método cualitativo)

10 (a).1. Principio.Precipitación del ácido tartárico en forma de po-

tasio bitartrato.

10 (a).2. Material y aparatos.10 (a).2.1. Centrífuga.

10 (a).3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131494 Potasio Cloruro PA-ACS-ISO121526 di-Potasio Oxalato 1-hidrato PA131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato

PA-ACS-ISO

10 (a).3.1. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.10 (a).3.2. Solución de Precipitación. Disolver

300 g de Potasio Cloruro PA-ACS-ISO; 5,75 g dePotasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACS-ISO y1,25 g de di-Potasio Oxalato 1-hidrato PA y enrasara 1.000 ml con Agua PA-ACS.

A baja temperatura la solución deposita peque-ños cristales, por lo que se debe calentar ligera-mente antes de emplearse.

10 (a).3.3. Etanol 96% v/v PA.

10 (a).4. Procedimiento.Poner en un tubo de centrífuga 10 ml de vinagre,

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0,4 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO, 7,5 mlde la solución de Precipitación y 2 ml de Etanol96% v/v PA. Agitar con una varilla de vidrio hastaque aparezca un enturbiamiento cristalino aproxi-madamente a los diez segundos. Mantener el tubodurante una hora a 8°C aproximadamente. Al cabode este tiempo agitar enérgicanente el contenidodel tubo con una varilla de vidrio, con la precauciónde mezclar bien con la solución que sobrenada.Dejar en reposo aproximadamente a 8°C duranteuna hora. Transcurrido este tiempo centrifugar.

10 (a).5. Interpretación de resultados.La aparición de precipitado indica la presencia

de ácido tartárico en la muestra.

10 (a) .6. Referencia.10 (a).6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d'Analyse des Vins. O. I. V. A-12-h.

10 (b). ACIDO TARTARICO(Método cuantitativo)

10(b).1 Principio.Aislamiento del ácido tartárico mediante colum-

na de resinas cambiadoras de aniones y posteriorvaloración colorimétrica.

10(b).2. Material y aparatos.10(b).2.1. Resinas aniónicas de basicidad fuerte

(III Merck o equivalente). Las resinas deben deencontrarse en forma de acetato. Para ello debenestar al menos veinticuatro horas en contacto conuna solución de ácido acético al 30 %.

10(b).2.2. Columnas de vidrio de 10-11 mm dediámetro y 30 cm de longitud con llave en la parteinferior.

10(b).3. Reactivos.131008 Acido Acetico glacial PA-ACS-ISO181061 Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV181059 Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N)SV182105 Acido Sulfúrico 1mol/l (2N) SV131066 Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS122352 Amonio meta-Vanadato PA141339 Glicerina (USP,BP,F. Eur.) PRS-CODEX211376 Lana de Vidrio, lavada QP

Resina Lewatit MP 600 (aniónica fuerte I)131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS181691 Sodio Hidróxido 1mol/l 1N SV121700 Sodio meta-Peryodato PA121716 Sodio Sulfato anhidro PA

10(b).3.1. Acido Acético al 30 % (v/v).- Introducir300 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO en unmatraz aforado y completar a 1.000 ml con AguaPA-ACS.

10(b).3.2. Acido Acético al 0,5 % (v/v).- Introdu-cir 5 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO en unmatraz aforado y completar hasta 1.000 ml conAgua PA-ACS

10(b).3.3. Solución de Sodio Sulfato al 7,1 %(0,5N).- Disolver 71 g de Sodio Sulfato anhidro PA ycompletar hasta 1.000 ml con Agua PA-ACS.

10(b).3.4. Reactivo Vanádico.- Disolver 10 g deAmonio meta-Vanadato PA en 150 ml de SodioHidróxido 1 mol/l (1N) SV. Pasar esta solución a unmatraz aforado de 500 ml, añadir seguidamente200 ml de una solución de Sodio Acetato anhidroPA diluido al 27 % en Agua PA-ACS y llevar luego a500 ml con Agua PA-ACS.

10(b).3.5. Acido Sulfúrico 1 mol/l (2N) SV.10(b).3.6. Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N) SV.10(b).3.7. Solución de Acido Peryódico 0,1N

(0,05M).- Introducir 10,696 g de Sodio meta-Peryo-dato PA en un matraz aforado de 1.000 ml, añadir50 ml de Acido Sulfúrico 0,5 mol/l (1N) SV y com-pletar hasta 1.000 ml con Agua PA-ACS.

10(b).3.8. Solución de Glicerina al 10 %.- Pesar10 g de Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX,bidestilada y llevarla a 100 ml con Agua PA-ACS.

10(b).3.9. Solución de Acido Tartárico de 1 gpor l.- En un matraz aforado de 500 ml disolver500 mg de Acido L(+)-Tartárico PA-ACS-ISO en 6,6ml de Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV y enrasar consolución de Sodio Sulfato al 7,1% a 500 ml.

10(b).4. Procedimiento.10(b).4.1. Preparación de las columnas de resi-

nas aniónicas. Colocar en el fondo de la columna[10(b).2.2.] Lana de Vidrio lavada QP formandotapón de 2-3 mm de altura, aproximadamente, yañadir Agua PA-ACS hasta una altura de unos5 mm sobre el tapón de Lana de Vidrio lavada QP.Añadir la Resina Lewatit® MP 600 aniónica (*) con-servada en Acido Acético al 30 %, agitar esta sus-pensión y agregar rápidamente un volumen de unos10 ml, evitando la formación de burbujas de aire,depositando en la superficie un tapón de Lana deVidrio lavada QP, que se conduce con una varilla devidrio con el fin de no remover las resinas en lossucesivos lavados anteriores en su superficie. Lasresinas solamente pueden servir para una sola vez.

10(b).4.2. Aislamiento del Acido Tártarico.- Abrirla llave inferior de la columna y dar salida al AcidoAcético diluido hasta unos 2-3 ml por encima deltapón superior de Lana de Vidrio lavada QP. Añadirseguidamente unos 10 ml de Acido Acético al 0,5%y vaciar hasta igual altura; efectuar estos lavadoscuatro veces.

Después del último lavado y con la llave cerrada,adicionar 10 ml de vinagre a analizar y señalar laaltura alcanzada con un lápiz graso, abrir a conti-nuación la llave y dejar salir vinagre goteando arazón de 1-1,5 gotas por segundo (25-30 ml porminuto) hasta un poco por encima del tapón supe-

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rior de Lana de Vidrio lavada QP. Llenar de nuevo lacolumna con Acido Acético al 0,5 % hasta la señaldel lápiz graso y dejar salir a la misma velocidad quela vez anterior y lavar después en la misma formasiete veces con 10 ml de Agua PA-ACS.

Al terminar el último lavado, cerrar la llave cuan-do el nivel del líquido se encuentre un poco másarriba del tapón superior de Lana de Vidrio lavadaQP.Colocar un matraz receptor aforado de 100 ml. Eluirlos ácidos fijados en el cambiador de aniones,mediante adiciones de solución de Sodio Sulfato[10(b).3.3.] hasta la señal trazada en el tubo.

Para hacer esta operación resulta práctico colo-car un frasco con solución de Sulfato unido por elcuello a la columna mediante un manguito de cau-cho y con unas pinzas para regular la caída del líqui-do en la bureta o tubo. Puestos así en comunica-ción los dos aparatos (frasco y bureta o tubo), abrirlas pinzas del caucho de unión y la llave inferior,dejando caer el líquido a la bureta unos 10 cm dealtura y sin que queden huecos vacíos. Regular lasalida del líquido en la proporción de 2-3 gotas porsegundo, para llenar el matraz receptor hasta elenrase.

10(b).4.3. Determinación del ácido Tartárico.- Endos matraces cónicos de 100 ml (A) y (B) introducir20 ml del eluido. El matraz (A) sirve para la medida yel matraz (B), en el cual el Acido Tartárico es destrui-do por el Acido Peryódico, constituye el testigo.Añadir al matraz (A) 2 ml de Acido Sulfúrico 1 mol/l(2N) SV, 5 ml de Acido Sulfúrico 0,05 mol/l (0,1N)SV y 1 ml de Glicerina (USP,BP,F.Eur) PRS-CODEXal 10%.

En el matraz (B), añadir 2 ml de Acido Sulfúrico1 mol/l (2N) SV, 5 ml de Acido Peryódico 0,1N,esperar quince minutos y añadir 1 ml de Glicerina al10 % para destruir el exceso de Acido Peryódico.Esperar dos minutos.

Verter a continuación, agitando, primero en elmatraz (B) e inmediatamente después en el matraz(A), 5 ml del Reactivo Vanádico. Disparar inmediata-mente un cronómetro e introducir el contenido dedichos matraces en las cubetas de caras paralelasde 10 mm de espesor del espectrofotómetro. Alcabo de un minuto y treinta segundos medir la den-sidad óptica a 490 nm del líquido procedente delmatraz (A) (medida) después de haber reglado elaparato para obtener la transmisión al 100 % con lacubeta conteniendo el líquido testigo (B).

10(b).5. Cálculo10(b).5.1. Preparación de la curva patrón.-

Tomar 10; 20; 30; 40 y 50 ml de la solución10(b).3.9. e introducir cada alícuota en un matrazaforado de 100 ml. Enrasar con solución de sodiosulfato al 7,1%. Las diferentes diluciones corres-ponden a eluidos del vinagre conteniendo 1; 2; 3; 4y 5 g de ácido tartárico por litro.

En dos matraces (A) y (B) de 100 ml poner 20 mlde cada una de estas soluciones y tratarlas idénti-camente igual a los eluidos del vinagre anteriormen-te descrito.

La representación gráfica de las densidadesópticas de estas soluciones está en función de lacantidad de ácido tartárico. Para ello es recomen-dable y más preciso partir de concentraciones 0,1;0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9 y 1 g/l de ácidotartárico.

10(b).5.2. Comprobar los valores obtenidos en elensayo con los correspondientes de la curvapatrón.

10(b).6. Referencia.10(b).6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. A12h.(*). En el original indica “Resina cambiadora de

aniones”, entendemos que es apropiada la ResinaLewatit“ MP 600 aniónica fuerte I.

11. COBRE

11.1. Principio.Determinación directa por espectrofotometría de

absorción atómica.11.2. Material y aparatos.

Espectrofotómetro de absorción atómica, con lám-para específica de cobre.

11.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS313178 Cobre solución patrón

Cu = 1,000 + 0’002 g/l AA

11.3.1 Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±0’002 g/l AA o preparar disolviendo 1’000 g deCobre puro en el mínimo volumen necesario de Aci-do Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1 + 1) y diluir a 1 litrocon Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO previamentediluido al 1 % (v/v) con Agua PA-ACS.

11.3.2. Soluciones que contengan de 1 a 10 mg/lde Cobre.- Diluir partes alícuotas de la soluciónpatrón con Acido Acético al 5 % en Agua PA-ACS.

11.4. Procedimiento.11.4.1. Calibrado del aparato.- Ajustar el aparato

a una longitud de onda de 324,7 nm en condicio-nes tales que se obtenga una respuesta lineal alintroducirse las series de patrones preparados.

11.4.2. Determinación.- Efectuar la lectura direc-ta de la absorbancia.

11.5. Interpretación de los resultados.Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos,hallar mediante la curva de patrón las concentracio-nes de cobre de la muestra.

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11.6. Referencias.11.6.1 G. Charlot et D. Bezier: “Analyse quanti-

tative minerale”. El Masson, París (1955), 749-752.11.6.2. H.E. Parker: “Atomic Absorption News-

letter” (1963), 1311.6.3. Standart Conditions for Zn and Cu.

Analytical Methods for atomic absorbtion spectro-photometry “Perkin-Elmer”.

11.6.4. F. Rousselet: “Spectrophotometrie parabsorption atomique Boudin”. Ed. Paris (1968),págs 59-144.

12. CLORUROS

12.1. Principio. Determinación directa de cloruros por potencio-

metría utilizando el electrodo Ag/AgCl.

12.2. Material y aparatos.12.2.1. pH-metro con escala que permita apre-

ciar 2 mV.12.2.2. Agitador magnético.12.2.3. Electrodo Ag/AgCl con una solución

saturada de potasio nitrato como electrolito.12.2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml.

12.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO

Potasio Cloruro (máx. 0,005% de Br)

12.3.1. Solución patrón de Cloruros.- Disolver2,1027 g de Potasio Cloruro (máx. 0,005% de bro-mo), para análisis, previamente desecado en AguaPA-ACS hasta 1 litro; 1 ml de esta solución contiene1 mg de ion Cloro.

12.3.2. Solución de Plata Nitrato.- Disolver4,7912 g de Plata Nitrato PA-ACS-ISO en Etanol al10% (v/v) hasta un litro. Diluir Etanol 96% v/v PAcon Agua PA-ACS. 1 ml de esta solución corres-ponde a 1 mg de ion Cloro.

12.3.3. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.

12.4. Procedimiento.12.4.1. Determinación del potencial del punto de

equivalencia.- Introducir 5,0 ml de la soluciónpatrón de Cloruros en un vaso de 150 ml. Diluiraproximadamente a 100 ml con Agua PA-ACS yacidificar con 1,0 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (12.3.3.). Introducir los electrodos. Añadir lasolución de Plata Nitrato agitando moderadamente.

Los cuatro primeros ml se adicionan en fraccio-nes de 1 ml y se leen las correspondientes lecturasen milivoltios; los dos siguientes ml, en fraccionesde 0,2 ml y se continúa adicionando en fraccionesde 1 ml hasta que se hayan alcanzado un total de

10 ml. Después de cada adición se debe esperarunos treinta segundos antes de hacer la correspon-diente lectura en minivoltios. Los valores así obteni-dos se llevan sobre un papel milimetrado en funciónde los correspondientes ml de solución de PlataNitrato, y a partir del punto singular de la curvaobtenida, determinar el potencial del punto de equi-valencia.

Para comprobar el potencial del punto de equi-valencia, llevar a un vaso de 150 ml, 5,0 ml de lasolución patrón de Cloruros, 95 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de Acido Nítrico 70 % PA-ACS-ISO.Introducir el electrodo y valorar agitando, justamen-te hasta el potencial del punto de equivalencia.

Repetir esta operación hasta obtener una buenaconcordancia con los resultados.

Este control debe efectuarse antes de determi-nar la concentración de cloruros en cada serie demuestras a analizar.

12.4.2. Determinación.- Llevar a un vaso de150 ml, 50,0 ml de vinagre. Añadir 50 ml de AguaPA-ACS y 1 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.Valorar a continuación, siguiendo el procedimientodescrito anteriormente, hasta alcanzar el potencialdel punto de equivalencia.

12.5. Cálculo.La cantidad de cloruros se determina mediante

las expresiones:0,02 n en gramos de ion cloro.0,5633 n en miliequivalentes por litro de ion clo-

ro.0,0329 n en gramos de sodio cloruro por litro.

Siendo:n = volumen en ml de solución de plata nitrato

necesario para alcanzar el potencial delpunto de equivalencia.

12.6. Referencia.12.6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyse des Vins. OIV A-15j.

13. GRADO ALCOHOLICO

13.1. Principio.Separación del alcohol por destilación, oxidación

del mismo por potasio dicromato y determinacióndel contenido por valoración del exceso de dicro-mato.

13.2. Material y aparatos.Como en los apartados 5(a).2.1; 5(a).2.1.1;

5(a).2.1.2; 5(a).2.1.3 y 5(a).2.1.4 de los MétodosOficiales de Análisis de Vinos.

13.3. Reactivos.131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO

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131074 Agua PA-ACS131368 Amonio Hierro II Sulfato 6-hidrato

PA-ISO211229 Calcio Hidróxido natural, polvo QP171321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS131362 Hierro II Sulfato 7-hidrato PA-ACS-ISO131500 Potasio Dicromato PA-ISO131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO

13.3.1. Solución de Potasio Dicromato.- Disolver33,608 g de Potasio Dicromato PA-ISO en una can-tidad suficiente de Agua PA-ACS y completar hastaun litro a 20° C. Esta solución corresponde al gradoalcohólico internacional O.I.V. 1 ml de esta soluciónoxida 7,8934 mg de alcohol.

13.3.2. Solución de Amonio Hierro II Sulfato.-Disolver 135 g de Amonio Hierro II Sulfato 6-hidratoPA-ISO y 20 ml de Acido Sulfúrico 96 % PA-ISO enuna cantidad de Agua PA-ACS suficiente y comple-tar hasta 1 litro, un volumen de esta solucióncorresponde a medio volumen de solución de Pota-sio Dicromato cuando está recientemente prepara-da. Esta solución se oxida lentamente, por lo quedebe ser valorada frecuentemente en la misma quese realiza la determinación del alcohol, sustituyendola disolución alcohólica por Agua PA-ACS.

13.3.3. Solución de Potasio Permanganato.-Disolver 1,088 g de Potasio Permanganato PA-ACS-ISO en una cantidad suficiente de Agua PA-ACS y completar hasta 1 litro.

13.3.4. Solución de Acido Sulfúrico diluido.- A500 ml de Agua PA-ACS añadir, poco a poco y agi-tando, 500 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO. Des-pués de enfriado, completar hasta 1 litro con AguaPA-ACS.

13.3.5. Reactivo de Hierro II orto-Fenantrolina.-Disolver 0,695 g de Hierro II Sulfato 7-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS, añadir 1,485 gde 1,10-Fernantrolina 1-hidrato RE-ACS. Calentarpara favorecer la disolución.

13.3.6. Lechada de cal 4N.- Desleír en la con-centración conveniente, Calcio Hidróxido natural,polvo QP con Agua PA-ACS.

13.4 Procedimiento.13.4.1. Destilación.- Medir 200 ml de vinagre en

matraz aforado y anotar la temperatura. Introducir elvinagre en el matraz de destilación que contengaunos fragmentos de material poroso. Lavar elmatraz cuatro veces con 5 ml de Agua PA-ACS.Alcalinizar con un ligero exceso de Lechada de cal4N. Recoger el destilado en el matraz aforado de100 ml. Enrasar con Agua PA-ACS a la misma tem-peratura que se midió el vinagre inicialmente.

13.4.2. En un matraz Erlenmeyer, con tapónesmerillado, de 250 ml, poner 20 ml de soluciónvalorada en Potasio Dicromato, 20 ml de Acido Sul-fúrico diluido y agitar. Añadir 10 ml de destilado

exactamente medidos. Tapar el Erlenmeyer, agitar yesperar por lo menos treinta minutos, agitando devez en cuando.

13.4.3. Valoración.- Valorar el exceso de Dicro-mato con la solución de Amonio Hierro II Sulfato.Cuando la coloración verde de la solución vire a ver-de azulado, añadir cuatro gotas de reactivo de1,10-Fenantrolina. Detener la adición de solución deAmonio Hierro II cuando el líquido vire a marrón.

A menudo se puede llegar a pasar el viraje, sien-do entonces necesario volver al punto preciso adi-cionando solución de Potasio Permanganato. Undécimo del volumen empleado de esta solución seresta del volumen de empleado de Hierro II Sulfato.Hacer una prueba en blanco sustituyendo los 10 mlde destilado por Agua PA-ACS.

13.5. Cálculo.

n’ - nGrado alcohólico = –––––––

n’

Siendo:n = volumen, en ml, gastados en la valoración.n’ = volumen, en ml, gastados en la prueba en

blanco.

13.6. Observaciones.Si el grado alcohólico del vinagre es superior a

0,8°, repetir la oxidación utilizando 10 ml de destila-do diluido a 1/2.

13.7. Referencia.13.7.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyses des vins. O. I. V. A-2-16.

14. ARSENICO

14.1. Principio.Reducción del arsénico a arsenamina gaseosa

que reacciona con plata dietilditiocarbamato (disuel-to en piridina), dando un complejo de color rojo.

14.2. Material y aparatos.14.2.1. Aparato Quickfit (figura I)14.2.2. Espectrofotómetro o colorímetro que

permita lecturas a 538 nm.

14.3. Reactivos.131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfurico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS

Arsénico131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO131303 Estaño II Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO131457 Piridina PA-ACS

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122382 Plata Dietilditiocarbamato PA131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO131542 Potasio Yoduro PA-ISO

Zinc metal, granulado, exentode Arsénico.

14.3.1. Solución de Plata DietilditiocarbamatoPA.- Disolver 1.000 g de este reactivo en 200 ml dePiridina PA-ACS. Esta solución puede conservarsealgunas semanas.

14.3.2. Plomo II Acetato en algodón.- Impregnarel algodón hidrófilo en solución acuosa de Plomo IIAcetato 3-hidrato PA-ACS-ISO al 10%, escurrir ellíquido en exceso y desecar al vacío.

14.3.3. Solución acuosa de Potasio Yoduro PA-ISO al 15%.

14.3.4. Solución acuosa de Cobre II Sulfato5-hidrato PA-ACS-ISO al 2%

14.3.5. Solución de Estaño Cloruro.- Disolver0,33 g de Estaño II Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISOen 100 cc de Acido Clorhídrico al 32% (d=1,16).Diluir Acido Clorhídrico 35 % PA-ISO con Agua PA-ACS.

14.3.6. Zinc metal granulado, exento de Arséni-co.

14.3.7. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO14.3.8. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.14.3.9. Solución de 100 mg/l de Arsénico.

14.4. Procedimiento.14.4.1. Preparación de la muestra.- En un matraz

Kjeldahl de 500 ml, introducir 100 ml de vinagre con100 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO, para evi-tar las pérdidas de As. Llevar a ebullición hasta redu-cir el volumen a 10 ml, añadir 5 ml de Acido Sulfúrico96% PA-ISO y continuar la ebullición adicionandoAcido Nítrico 70% PA-ACS-ISO gota a gota hasta latotal decoloración. Después de la expulsión de losvapores nitrosos dejar enfriar, diluir con 10 ml deAgua PA-ACS y calentar hasta casi sequedad. Unavez frío el matraz, trasvasar el residuo al matraz devaloración utilizando 40 ml de Agua PA-ACS.

14.4.2. Valoración.- Poner en el tubo en U, 3 mlde la solución de Plata Dietilditiocarbamato. Colocaren la parte superior del tubo intermedio del aparatoel algodón impregnado en Plomo II Acetato al 10 %con objeto de retener el sulfhídrico y la fosfaminaque puedan desprenderse al mismo tiempo que laarsenamina.

Introducir la muestra preparada en el Erlenmeyerde 100 ml del aparato descrito y añadir sucesiva-mente 10 ml de la solución de Estaño II Cloruro, 5 mlde la solución de Potasio Yoduro y 1 ml de la solu-ción de Cobre II Sulfato. Después de quine minutosañadir 5 g de Zinc granulado y cerrar rápidamente elaparato. Colocarlo en la oscuridad y dejar pasarvapores por lo menos durante una hora.

14.4.3. Preparación de la curva de patrón.- Apartir de una solución 14.3.9, preparar solucionesque contengan 0,5; 1; 2; 3; 4; 5; 6; 7; 8; 9; 10; 11;12 mg de Arsénico por litro.

14.5. Cálculo.Calcular el contenido en arsénico utilizando la

correspondiente curva patrón.

14.6. Observaciones.14.6.1. Interfiere en la determinación el antimonio

cuyo complejo absorbe a 510 nm.14.6.2. La Ley de Lambert-Beer se cumple entre

las concentraciones de 0 y 15 microgramos de As.14.6.3. Este método tiene un límite de detección

de 0,2 microgramos.

14.7. Referencias.14.7.1. Vasak, V y Sedivec, V (1952) Chem. Listy

46, 341, citado por M.D. Garrido, M.L. Gil y C. Lla-guno. An. Bromatología XXVI-2 (1974), 167-176.

14.7.2. Recueil des Méthodes Internationalesd’Analyses des Vins. O. I. V. A-34f.

15. ZINC

15.1. Principio.Determinación directa por espectrofotometría de

absorción atómica.

128

Figura 14.1

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15.2. Material y aparatos.15.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómica.15.2.2. Lámpara de zinc.

15.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313193 Zinc solución patrón

Zn = 1,000 + 0,002 g/l AA

15.3.1. Zinc solución patrón Zinc = 1,000 +0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de zincpuro en el mínimo volumen necesario de AcidoNítrico 60% PA-ISO (1+1) y diluir a 1 litro con AcidoNítrico al 1% (v/v) (diluir Acido Nítrico 60% PA-ISOcon Agua PA-ACS).

15.4. Procedimiento.15.4.1. Preparación de la muestra.- No se nece-

sita preparación especial. En caso de elevada con-centración, realizar una o varias diluciones hastaquedar dentro del rango de medida.

15.4.2. Determinación.- Diluir partes alícuotas dela solución (15.3.1.) con Acido Acético al 5% (diluirAcido acético glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS) para obtener soluciones de 0, 0,5, 1, 1,5 y 2 ppm. Aspirar las soluciones patrón y a continua-ción la muestra, anotando las absorbancias obteni-das a 213,8 nm.

15.5. Interpretación de resultados.Partiendo de los valores de absorbancia obteni-

dos, hallar las concentraciones de zinc de la muestra.

15.6. Referencias.15.6.1. H. E. Parker, Atomic Absorptions News-

letter (1963), 13.15.6.2. Standart conditions for Zn and Cu.

Analytical Methods for atomic absorption spectro-photometry “Perkin-Elmer”.

16. PROLINA

16.1. Principio.Determinación cuantitativa de la prolina por reac-

ción con ninhidrina en medio ácido.

16.2. Material y aparatos.16.2.1. Tubos de ensayo con tapón de rosca.16.2.2. Espectrofotómetro o colorímetro que

permita efectuar lecturas a 517 nm.

16.3. Reactivos.131030 Acido Fórmico 98% PA-ACS131074 Agua PA-ACS141897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PRS

132362 Ninhidrina PA-ACS131090 2-Propanol PA-ACS-ISO

16.3.1. Ninhidrina al 3% en Eter mono-Metílicodel Etilenglicol PRS.

16.3.2. Acido Fórmico 98% PA-ACS.16.3.3. 2-Propanol PA-ACS-ISO - Agua PA-ACS

1:1 (v/v)

16.4. Procedimiento.Diluir la muestra hasta que contenga de 0,05 a

0,5 milimoles/ml de prolina. Tomar 1/2 ml de mues-tra diluida e introducirla en un tubo de ensayo contapón de rosca, añadir 0,25 ml de Acido Fórmico98% PA-ACS y 1 ml de solución de Ninhidrina al3%. Cerrar herméticamente el tubo e introducirlo enun baño de agua hirviendo durante catorce o quin-ce minutos. Enfriarlo a unos 200°C de cinco a diezminutos, añadiendo mientras se enfría 5 ml de solu-ción de 2-Propanol PA-ACS-ISO - Agua PA-ACS1:1 (v/v).

A continuación efectuar la lectura de la absor-ción a 517 nm después de cinco minutos y antesde treinta minutos.

Efectuar un blanco siguiendo el procedimientoanterior, pero usando 0,5 ml de Agua PA-ACS envez de la solución problema.

16.5. Interpretación de resultados.Calcular el contenido en prolina por comparacióncon una curva patrón que comprenda concentra-ciones entre 0,05 y 0,50 milimoles/ml.

16.6. Referencia.16.6.1. C.S.Ough J. of Food Science 34 (3),

pág. 228 (1969).

17. ACIDO ACETICO DE SINTESIS

17.1. Principio.Separación del ácido acético mediante extrac-

ción con éter iso-propílico y medida de su conteni-do en C14 mediante espectrofotometría de cente-lleo líquido.

17.2. Material y aparatos.17.2.1. Pipeta automática de 100 µl.17.2.2. Pipeta aforada de 10 ml.17.2.3. Viales para conteo, de vidrio con bajo

contenido en potasio, dotados de un sistema decierre de material plástico para evitar el ataque delácido acético.

17.2.4. Extractor líquido-líquido en continuo, concapacidad para 2 litros de muestra y 3,5 litros dedisolvente orgánico.

17.2.5. Columna rectificadora de 1 cm de longi-tud y 3 cm de diámetro interno, rellena de anillos

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rasching (0,7 x 0,4 cm) con camisa aislante cerradaal vacío.

17.2.6. Columna de destilación fraccionada de40 cm de longitud y 3 cm de diámetro interno, relle-na de anillos rasching (0,7 x 0,4 cm) con camisaaislante cerrada al vacío y llave de salida a los20 cm.

17.2.7. Espectrofotómetro de centelleo líquido.

17.3. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO

Butil-PBD.131314 Eter Di-iso-Propílico estabilizado con

~50 ppm de BHT PA-ACSTolueno marcado con C14

17.3.1. Eter Di-iso-Propílico estabilizado con~ 50 ppm de BHT PA-ACS.

17.3.2. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.17.3.3. Tolueno marcado con C14.17.3.4. Solución de 8 g/l de Butil-PBD en Tolue-

no para centelleo.

17.4. Procedimiento.17.4.1. Extracción y purificación del ácido acéti-

co.- Extraer 2 litros de vinagre de 5 grados acéticos(o la cantidad correspondiente si se trata de vina-gres de otra graduación) en continuo con 3,5 litrosde Eter Di-iso-Propílico estabilizado con ~ 50 ppmde BHT PA-ACS durante 24 horas al menos con loque se obtiene un extracto que debe conteneraproximadamente el 70% de ácido acético presen-te en el vinagre.

Eliminar el disolvente por destilación en la colum-na 17.2.5. y rectificar el residuo en la columna17.2.5. Recoger, por la salida situada en el centrode la columna, la fracción que destila a 114° des-preciando las primeras gotas de destilado. El desti-lado debe tener una riqueza de ácido acético mayordel 95% en peso.

17.4.2. Medidas espectrofotométricas.17.4.2.1. Fondo: En un vial se introducen 10,5 g

de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO y 10 ml dellíquido del centelleo (17.3.4.).

17.4.2.2. Muestra problema: Introducir, en losviales de conteo, 10,5 g de cada destilado y 10 mlde líquido de centelleo (17.3.4.) Preparar al menos2 viales por cada muestra problema y uno para elfondo de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO. Cadavial se lee 300 minutos como mínimo.

Una vez efectuado el conteo añadir a cada vialun volumen de patrón interno (17.3.3.) que dé apro-ximadamente 40.000 dpm y contar durante 4 minu-tos.

17.5. Cálculo.Actividad específica (dpm C14/g de C) = A1 - A2

siendo:

cpm(M)A1 = –––––––––––––––

0,4 x E1 x g x e

cpm(F)A2 = –––––––––––––––

0,4 x E2 x g x c

cpm (M+P) - cpm(M)E1 (Eficacia de la muestra) = –––––––––––––––––

dpm (P)

cpm (F+P) - cpm(F)E2 (Eficacia del fondo ) = –––––––––––––––––––

dpm (P)

g= gramos de la muestra o fondo en el vial.c= gramos de ácido acético por gramo de muestra

o de fondo.cpm (M+P) = cuentas por minuto de la muestra

más el patrón.cpm (F+P) = cuentas por minuto del fondo más el

patrón.cpm (M) = cuentas por minuto de la muestra.cpm (F) = cuentas por minuto del fondo.dpm (P) = desintegraciones por minuto del patrón.

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Productos Derivadosde la Uva:Orujo, Heces y Lías.

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METODOS DE ANALISIS

1. CONTENIDO ALCOHOLICO ENORUJOS, HECES Y LIAS.

1.1. Principio.Se determina por destilación de la muestra alca-

linizada y medida del contenido alcohólico por alco-hometría.

1.2. Material y aparatos.1.2.1. Aparato de destilación.- Consta de las

siguientes partes:1.2.1.1. Matraz de destilación de 1.000 ml con

rodaje esmerilado. Se puede utilizar de boca anchao de boca estrecha.

1.2.1.2. Columna de rectificación de 20 cm delargo.

1.2.1.3. Disco metálico o de amianto con un ori-ficio de 8 cm de diámetro.

1.2.1.4. Refrigerante de West de 40 cm de longi-tud con circulación rápida de agua.

1.2.2. Equipo de medida.1.2.2.1. Alcohómetros.1.2.2.2. Termómetros.- Graduados en grados y

décimas de grado y comprendiendo el intervalo de0 a 30°.

1.2.2.3. Probeta cilíndrica de 36 mm de diáme-tro y 320 mm de altura.

1.2.3. Granatorio.1.2.4. Matraz aforado de 200 ml.1.2.5. Vaso de precipitados.

1.3. Reactivos.131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS211234 Calcio Oxido natural, escoriforme QP171748 Tornasol tintura RE

1.3.1. Lechada de Cal. Solución de 120 g deCalcio Oxido natural, escoriforme QP en 1.000 mlde Agua PA-ACS.

1.3.2. Acido Sulfúrico al 10%. Diluir Acido Sulfú-rico al 96% PA-ISO con Agua PA-ACS.

1.4. Procedimiento.El producto a analizar es vertido en un vaso de

precipitados donde es agitado para su homogenei-zación y al mismo tiempo para favorecer la expul-sión de CO2 que pueda contener.

En el caso de orujos, el muestreo se realiza deforma que la muestra sea lo más homogénea posi-ble.

Pesar 200 g de muestra homogeneizada y vaciaren el matraz de destilación, añadiendo 200 ml deAgua PA-ACS, parte de los cuales se utilizan paraenjuagar el vaso que ha contenido la muestra y acontinuación se añade Lechada de Cal hasta neu-tralizar el exceso (10 ml aproximadamente).

Destilar a continuación recogiendo 200 ml, obien las tres cuartas partes de este volumen(150 ml).

Añadir al destilado más gotas de Tornasol tinturaRE y comprobamos que el destilado toma colorazul, de franca alcalinidad, debida al NH3 que con-tiene.

Seguidamente, con una pipeta se adiciona Aci-do Sulfúrico al 10% en cantidad suficiente para queel destilado vire a rojo, añadiendo un poco más(0,5 ml) para que el medio quede francamente áci-do.

Completar con Agua PA-ACS el contenido delos 200 ml del matraz y se procede a una segundadestilación, como si de un vino se tratase.

El destilado recogido de esta segunda destila-ción está ya en condiciones para determinar su gra-do alcohólico por aerometría y efectuar la correc-ción a 20° C.

1.5. Expresión de los resultados.El resultado se puede expresar:- cm3 de alcohol absoluto / 100 g de muestra.

1.6. Referencias.1.6.1. Recueil des Méthodes Internationales d’A-

nalyses des Vins. O. I. V. 1969, A2 1-19.1.6.2. De Bernadi, P.; García Viana, E. 1969.

“Determinación de grado alcohólico de heces ylías”. Estación Enológica de Requena.

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Figura 1.1

Page 134: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

Aguardientescompuestos: Whisky

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METODOS DE ANALISIS

1. OBTENCION DEL DESTILADO

1.1. Principio.Destilación de la muestra en condiciones deter-

minadas.

1.2. Material y aparatos.1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad

de fondo redondo y boca esmerilada.1.2.2. Alargadera tipo Kjeldahl o similar.1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth, (20-30 cm de

longitud) o similar.1.2.3. Matraces aforados de 100 y 200 ml de

capacidad.1.2.5. Manta eléctrica o mechero de gas.

1.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS

1.4. Procedimiento.1.4.1. Muestras con menos de 60% de etanol.

Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado queantes de enrasar se mantiene en baño de agua de20°C durante media hora. Enrasar con pipeta, lim-piando el interior del cuello del matraz de posiblesgotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarseque queden burbujas de aire adheridas a las pare-des del matraz.

Pasar cuantitativamente el volumen medido almatraz de destilación, lavando tres veces consecu-tivas el matraz aforado de 200 ml con 20 ml deAgua PA-ACS cada vez, añadiendo las aguas delavado al matraz de destilación. Cuando se trate debebidas siruposas, por su gran contenido en azú-car, el lavado debe efectuarse consecutivamentecon tres porciones de 50 ml de Agua PA-ACS. Pro-ceder a la destilación.

Es conveniente añadir bolitas de vidrio para faci-litar la ebullición suave. En algunos casos, si seteme la formación de espuma, añadir un antiespu-ma inerte (como silicona).

El matraz de recogida del destilado es el mismoen que se efectuó la medida. Se le añaden 10 ml deAgua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado,de forma que el destilado resbale por la pared sinsalpicadura, dentro de un baño de hielo o agua fríaa menos de 10°C. El refrigerante debe ir dotado deuna alargadera que penetre por lo menos 4-6 cmen el cuello del matraz.

Cuando se hayan recogido aproximadamente190 ml, llevar el matraz tapado al baño de agua a20°C. Cuando se alcance dicha temperatura, den-tro del mismo baño, enrasarse con Agua PA-ACSmediante pipeta.

Tapar el matraz e invertirlo varias veces parahomogeneizar su contenido, antes de proceder a ladeterminación del etanol.

1.4.2. Muestras con más de 60% de etanol.El procedimiento anteriormente descrito, difiere

únicamente en que la muestra se mide en matrazaforado de 100 ml, que se lava varias veces conagua hasta alcanzar un volumen de aproximada-mente 230 ml. El destilado se recoge en matrazaforado de 200 ml, y se enrasa con Agua PA-ACSdentro del baño de agua a 20°C.

1.5. Observaciones.1.5.1. El sistema de destilación debe compro-

barse en ambos casos como sigue:Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohólica al

10% en volumen 5 veces sucesivas. Determinar enla última destilación el título alcohométrico del desti-lado que no debe ser menor de 9,9% en volumende etanol.

1.5.2. La destilación debe efectuarse procuran-do que el flujo del destilado sea uniforme.

1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estarácomprendido entre 45 y 90 minutos.

1.6. Referencia.1.6.1. Instituto Español de Normalización.

UNE 33-112-75.

2. FURFUROL

2.1. Principio.Destilación y posterior medida espectrofotométricade su absorción a 277 nm.

2.2. Material y aparatos.2.2.1. Pipetas de doble enrase de 1,5 y 25 ml.2.2.2. Matraces aforados de 100, 200 y 500 ml.2.2.3. Espectrofotómetro ultravioleta visible.2.2.4. Aparato de destilación por arrastre de

vapor, según figura I.

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Figura 2.1

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2.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS121085 Etanol v/v 96% PA141334 Furfuraldehído PRS

2.3.1. Disolución patrón de furfurol (furfuraldehí-do) de aproximadamente 116 mg/l. Destilar Furfu-raldehído PRS recogiendo solamente la fracción depunto de ebullicion, 161,2°C. De este destiladotomar 1 ml, llevarlo a un matraz aforado de 100 mlenrasando con Etanol 96% v/v PA. Tomar 5 ml deesta disolución y diluir con alcohol al 50% en volu-men en un matraz aforado de 500 ml.

2.3.2. Disoluciones de referencia. A partir de(2.3.1.) obtener disoluciones de 0; 1 ;2; 3; 4 y5 mg/l de Furfuraldehído PRS.

2.4. Procedimiento.2.4.1. Preparación de la muestra.Destilar 25 ml de la muestra en el aparato descri-

to en (2.2.4.) recogiendo 200 ml.Si se observa turbidez en el destilado añadir un

volumen conocido de Etanol 96 % v/v PA, hastalograr total limpidez en el destilado.

2.4.2. Determinación.Leer la absorbancia en el espectrofotómetro a

277 nm, comparando con las lecturas efectuadas alas disoluciones de referencia o bien calculando laabsorbancia de una disolución que contenga 1 mg/lde Furfuraldehído PRS (valor aproximado 0,15).

2.5. Cálculo.El contenido en furfuraldehído se obtiene me-

diante la fórmula:

A Furfuraldehído (mg/l) = ––– x F

A’

Siendo:A = Absorbancia de la muestra.A’ = Absorbancia de una disolución que contie-

ne 1 mg/l de furfuraldehído.F = Factor de dilución.

2.6. Observaciones.2.6.1. La disolución de referencia se debe pre-

parar inmediatamente antes de efectuar la medida.

2.7. Referencia.2.7.1. Instituto Español de Normalización.

UNE 33-109-74.

3. EXTRACTO SECO

3.1. Principio.Evaporación de la muestra a 105° C y pesada

posterior del residuo.

3.2. Material y aparatos.3.2.1. Estufa de aire regulable de 95°C a 105°C.3.2.2. Cápsulas de platino o cuarzo de fondo

plano, de 77 mm de diámetro interno y 18 mm dealtura.

3.2.3. Desecador de vidrio que contenga ácidosulfúrico concentrado o gel de sílice como sustan-cias desecadoras.

3.2.4. Baño de agua.3.2.5. Balanza analítica.

3.3. Procedimiento.Medir 25 ml de muestra a 20°C. Evaporar a

sequedad, en las cápsulas correspondientes pre-viamente desecadas y taradas, en baño de aguahirviente y mantener en la estufa a 105° C durante30 minutos.

Dejar enfriar las cápsulas en el interior del dese-cador y una vez frías pesar en la balanza.

3.4. Cálculo.El valor del extracto total de la muestra, en gra-

mos por litro, se hallará mediante la fórmula si-guiente:

Extracto total (g/l) = ( M - m ) x 40

Siendo:M = Peso, en g, de la cápsula con el extracto

seco.m = Peso, en g de la cápsula vacía.

3.5. Referencia.3.5.1. Instituto Español de Normalización.

UNE 33-106-74.

4. ESTERES

4.1. Principio.Reacción cuantitativa de los ésteres con hidroxi-

lamina en solución alcalina, formación de ácidohidroxámico, acidificación, formación de un com-plejo coloreado con iones férricos y medida delcolor desarrollado a 525 nm.

4.2. Material y aparatos.4.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro que per-

mita lecturas a 525 nm.4.2.2. Tubos de ensayo de longitud 20 cm y diá-

metro interno 2,5 cm.

4.3. Reactivos.131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131318 Etilo Acetato PA-ACS-ISO131914 Hidroxilamino Cloruro PA-ACS-ISO141358 Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos PRS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO

136

Page 137: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

4.3.1. Disolución de Hidroxilamina Clorhidrato2M. Conservar en nevera.

4.3.2. Disolución de Sodio Hidróxido 3,5N.4.3.3. Disolución de Hidroxilamina Clorhidrato

1M en Sodio Hidróxido 1,75 N. Mezclar inmediata-mente antes de su uso, volúmenes iguales del reac-tivo (4.3.1.) y (4.3.2.). Desechar a las seis horas.

4.3.4. Disolución de Acido Clorhídrico 4N.4.3.5. Disolución de Hierro Tricloruro 0,37M.

Disolver 50 g de Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozosPRS en unos 400 ml de Agua PA-ACS en un matrazaforado de 500 ml. Añadir 12,5 ml de Acido Clorhí-drico 4N y enrasar con agua.

4.4. Procedimiento.4.4.1. Construcción de la curva patrón.4.4.1.1. Solución patrón. Pesar 5 g de Etilo Ace-

tato PA-ACS-ISO y llevar a un litro con alcohol de50° (preparar a partir de Etanol 96% v/v PA y AguaPA-ACS).

4.4.1.2. Soluciones de 50, 100, 150, 200, 250 y300 mg/l de Etilo Acetato. Tomar de la solución(4.4.1.1.), 2,5; 5,0; 7,5; 10,0; 12,5 y 15,0 ml intro-duciéndolos en matraces de 250 ml de capacidad ycompletar con alcohol de 50° hasta el enrase.

4.4.1.3. Solución de referencia. Tomar 4 ml de lasolución (4.3.3.) y 2 ml de la disolución (4.3.4.) mez-clándolas en un tubo de ensayo (4.2.2.). Mezclar yañadir 2 ml de una cualquiera de las soluciones(4.4.1.2.). Introducir en una serie de tubos de ensa-yo (4.2.2.), 2 ml de cada una de las soluciones(4.1.2.) y 4 ml de (4.3.3.).

Agitar y dejar reaccionar entre uno y 20 minutos.Añadir 2 ml de la disolución de Acido Clorhídrico 4Ny mezclar. Añadir 2 ml de la disolución de Hierro IIICloruro 0,37 M a cada uno de los matraces, tanto alde la solución de referencia como a los de las solu-ciones (4.4.1.2.). Efectuar las lecturas colorimétricasa una longitud de onda de 525 nm.

Obtener las gráficas de calibrado mediante larepresentación de las diferencias de absorción delas soluciones (4.4.1.2.), respecto a la solución dereferencia, en función de la concentración de EtiloAcetato.

4.4.2. Preparación de la muestra.Destilar siguiendo el procedimiento descrito en el

método oficial nº 1.4.4.3. Determinación.Introducir en un tubo (4.2.2.) 2 ml del destilado y

4 ml de disolución de Hidroxilamina Clorhidrato(4.3.3.), agitar y dejar reaccionar entre 1 y 20 minu-tos. Añadir 2 ml de la disolución de Acido Clorhídri-co (4.3.4.) y mezclar. Añadir 2 ml de la disolución deHierro III Cloruro (4.3.5.) Efectuar la lectura colori-métrica a 525 nm inmediatamente, tomando comoblanco la solución de referencia preparada de lasiguiente forma:

Introducir en un tubo (4.2.2.) 4 ml de la disolu-ción de Hidroxilamina Clorhidrato (4.3.3.) y 2 ml de

la solución de Acido Clorhídrico (4.3.4.), mezclar yañadir 2 ml de destilado. Añadir 2 ml de la disolu-ción de Hierro III Cloruro (4.3.5.) y mezclar.

4.5. Cálculo.A partir de las lecturas obtenidas se halla el con-

tenido en ésteres expresados en etilo acetato,mediante las gráficas de calibrado.

4.6. Observaciones.4.6.1. El mismo blanco puede ser usado para

una serie de muestras de distinto contenido enésteres, pero de semejente graduación alcohólica.

4.7. Referencias.4.7.1. Association of Official Analytical Chemists.

Edición 1975-9053-59.4.7.2. Instituto Español de Normalización. UNE

33-111-77.

5. ALCOHOLES SUPERIORES

5.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación de los

alcoholes superiores al etanol, por cromatografía degases.

5.2. Material y aparatos.5.2.1. Cromatógrafo de gases equipados con

detector de ionización de llama.5.2.2. Columna cromatográfica.- Columna de

4 m de longitud de 1/8” de diámetro interno rellenade Carbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W80-100 mallas, lavado a los ácidos.

5.2.3. Microjeringas de 1 ml.

5.3. Reactivos. 5.3.1. Patrones cromatográficos:351082 1-Butanol CG354330 iso-Butanol CG353851 2-Butanol CG354539 2-Metil-1-Butanol CG351079 3-Metil-1-Butanol CG352516 4-Metil-2-Pentanol CG351885 1-Propanol CG

5.3.2. Etanol pureza cromatográfica.

5.4. Procedimiento.5.4.1. Condiciones cromatográficas.- Las condi-

ciones cromatográficas orientativas son: Gas porta-dor nitrógeno 20 ml/min., temperatura del horno35°C, temperatura del inyector y del detector150°C.

5.4.2. Calibrado.5.4.2.1. Patrón interno : Solución de 5 g/l en eta-

nol de 40° de 4-Metil-2-Pentanol.

137

M

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5.4.2.2. Solución patrón: Preparar una soluciónen etanol de 40° en las proporciones que se indicanen la Tabla 1.

5.4.2.3. Solución de calibrado: A 10 ml de lasolución patrón (5.4.2.2.) se le añade 1 ml de lasolución del patrón interno (5.4.2.1.) y se inyecta1 ml en el cromatógrafo.

5.4.3. Muestra problema.- A 10 ml de la muestrallevada a 40°C se le añade 1 ml de patrón interno(5.4.2.1.) e inyectar 1 mlitro en las mismas condicio-nes en que se hizo para el calibrado.

5.5. Cálculo.Una vez identificados los picos por sus retencio-

nes relativas al patrón interno se calculan los facto-res de respuesta para cada uno de ellos y las con-centraciones en la muestra problema aplicando lasfórmulas:

Ci x ApFactor de respuesta (Fr) = ––––––––

Ai

AimConcentración en la muestra (mg/l) = Fr x ––––– x f

Apm

Siendo:Ci = Concentración del compuesto en la solu-

ción patrón.Ap = Area del patrón interno en la solución

patrón.Ai = Area del compuesto en la solución

patrón.Aim = Area del compuesto en la muestra pro-

blema.Apm = Area del patrón interno en la muestra

problema.f = Factor de dilución de la muestra.

El contenido en alcoholes superiores vendrádado por la suma de los valores individuales obteni-dos de cada uno de ellos y se expresará en mg/100ml de alcohol absoluto.

5.6. Referencia.5.6.1. Association of Official Agricultural Che-

mists

TABLA 1––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––

Compuesto Concentración (mg/l)––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––

2-Butanol 101-Propanol 125iso-Butanol 1751-Butanol 152-Metil-1-Butanol 1003-Metil-1-Butanol 300

––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––

6. METANOL

6.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación del

alcohol metílico por cromatografía gaseosa.

6.2. Material y aparatos.Como en (5.2.).

6.3. Reactivos.Etanol pureza cromatográfica.Metanol pureza cromatográfica

352516 4-Metil-2-Pentanol CG

6.4. Procedimiento.6.4.1. Condiciones cromatográficas. Como en (5.4.1.)6.4.2. Calibrado.6.4.2.1. Patrón interno.- Como en (5.4.2.1.).6.4.2.2. Solución patrón.- Preparar una solución

de Metanol, en Etanol a 40º C, de concentraciónsimilar a la esperada en la muestra.

6.4.2.3. Solución de calibrado.- A 10 ml de lasolución patrón (6.4.2.2.) se le añade 1 ml de lasolución del patrón interno (6.4.2.1.), y se inyecta1 ml en el cromatógrafo.

6.4.3. Muestra problema.Como en (5.4.3.).

6.5. Cálculo.Como en (5.5.).

7. GRADO ALCOHOLICO

7.1. Principio.Se determina por destilación del producto y

medida de la densidad del destilado por areometría.Para bebidas con un contenido en extracto seco

menor o igual a 600 mg en 100 ml, se efectuarádirectamente, sin destilación.

7.2. Material y aparatos.7.2.1. Aparatos de destilación como en (1.2.).7.2.2. Alcohómetro con graduación de 0,1° de

d 20/20 debidamente contrastado.

138

Page 139: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

7.2.3. Termómetro con graduación de 0,1°C.7.2.4. Probeta transparente de 36 mm de diá-

metro interior y 320 mm de altura.7.2.5. Baño termostático a 20°C.

7.3. Procedimiento.7.3.1. Obtención del destilado.- Según método

oficial nº 1 en el caso de bebidas con extracto seco,sea mayor de 600 mg/100 ml.

7.3.2. Determinación areométrica.- Limpiar ysecar el alcohómetro antes de su empleo. Dejar queel alcohómetro, termómetro, probeta y muestra,alcancen en el baño termostatizado la temperaturade 20ºC.

Aclarar 2 o 3 veces con la muestra la probetaque contiene el termómetro. Echar la muestra en laprobeta hasta un volumen conveniente, inclinarlaunos 45° para evitar la agitación y las burbujas (alintroducir luego el alcohómetro, el nivel del líquidodebe estar justo por debajo del borde de la probe-ta). Tapar la probeta con la palma de la mano, einvertirla 3 o 4 veces para igualar las temperaturasde la probeta y del líquido. Secar el líquido de laparte exterior de la probeta (no poner las manossobre la probeta para no calentar el líquido conte-nido).

Introducir el alcohómetro en el líquido de arriba aabajo 5 o 6 veces, de manera que alcance la mismatemperatura y que se distribuya cualquier cambiode temperatura en todo el líquido. Mantener el bul-bo del alcohómetro en el líquido, secar el vástago,dejarlo en reposo de modo que sólo unas pocasdécimas de grados estén mojadas.

Leer en el alcohómetro, luego en el termómetro.Para leer en la escala del alcohómetro situar el ojojusto debajo del plano de la superficie del líquido,levantar lentamente la cabeza manteniendo la visualperpendicular al alcohómetro, hasta que la superfi-cie varíe de elipse a una línea recta.

Anotar el punto en que esta línea interseccionacon la escala del alcohómetro, siendo ésta la lectu-ra del alcohómetro.

Levantarlo ligeramente por encima de dicha lec-tura y dejarlo en reposo de nuevo. Volver a leer en elalcohómetro y en el termómetro, comprobando asílas primeras lecturas. Hacer la lectura del alcohó-metro con aproximación de 0,05° y la del termóme-tro con 0,1°. Sacar el alcohómetro y secarlo. Invertirla probeta con la muestra varias veces para que seequilibre térmicamente todo el conjunto. Volver aatemperar el alcohómetro, secar el vástago y reali-zar nuevas lecturas en el alcohómetro y en el termó-metro. Los valores calculados son válidos si tienenaproximación de 0,1 grados alcohólicos, si no fueraasí, realizar lecturas adicionales y calcular la media.

7.4. Cálculo.7.4.1. Muestras con extracto seco mayor de

600 mg en 100 ml:

El grado alcohólico real es el leído en el destiladoobtenido según (7.3.1.).

Si en la obtención del destilado, 100 ml demuestra se destilaron hasta 200 ml, la lectura obte-nida, debe ser multiplicada por 2.

7.4.2. Muestras con extracto seco menor o iguala 600 mg en 100 ml:

Para obtener el grado alcohólico real, adicionaral grado alcohólico aparente (leído directamente enla muestra sin destilar) 0,2 grados alcohólicos porcada 100 mg de extracto/100 ml.

7.5. Referencia.7.5.1. Association of Official Analytical Chemist.

Edición 1980-9015-9.

8. ALDEHIDOS

8.1. Principio.Reacción de los aldehídos con sodio bisulfito.

Oxidación del ácido sulfuroso con yodo y valoracióndel exceso de yodo con sodio tiosulfato.

8.2. Material y aparatos.8.2.1. Bureta de 25 ml graduada en décimas de

mililitro.

8.3. Reactivos131074 Agua PA-ACS211642 Sodio Hidrógeno Sulfito solución 40%

p/v QP182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV

8.3.1. Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV.8.3.2. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.8.3.3. Disolución de Sodio Bisulfito 0,05N. Pre-

parar esta disolución a partir de Sodio HidrógenoSulfito solución 40% p/v QP y Agua PA-ACS.

8.4. Procedimiento.Poner 100 ml del destilado (obtenido según

Método Oficial 1) en un matraz de 500 ml. Añadir100 ml de Agua PA-ACS y un exceso de la diso-lución (8.3.3.) calculado de modo que equivalgapor lo menos a 25 ml de Yodo 0,025 mol/l(0,05N) SV.

Dejar el matraz bien tapado, durante 30 minutosagitando de vez en cuando.

Añadir 50 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.Valorar el exceso de Yodo añadido con Sodio Tio-sulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV, hasta decoloracióncompleta.

Debe hacerse simultáneamente un ensayo enblanco, para comprobar en cada serie de ensayosla estabilidad de las disoluciones de Yodo y Tiosul-fato por ser tan diluidas.

139

M

Page 140: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

8.5. Cálculo.El contenido en aldehídos, expresado como

acetaldehído, vendrá dado por la siguiente fórmula:

Aldehídos (mg/100 ml 1,1 x 100

de etanol absoluto) = (V2 - V1 ) x –––––––––––A

Siendo:V1 = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato

gastado en la muestra.V2 = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato

gastado en el blanco.A = Grado alcohólico.

8.6. Observaciones.8.6.1. La disolución de sodio bisulfito tiene

mayor tiempo de estabilidad si se le añade un 10 %de alcohol. En cualquier caso esta solución es esta-ble como máximo una semana.

8.7. Referencias.8.7.1. Association of Official Agricultural Che-

mists 1980-9052.8.7.2. Instituto Español de Normalización. UNE

33-107-74.

9. ACIDEZ VOLATIL

9.1. Principio.Se define convencionalmente como la diferencia

entre los valores de la acidez total y fija, expresadasambas en mg de ácido acético por 100 ml de alco-hol absoluto.

9.2. Material y aparatos.9.2.1. Bureta de 10 ml graduada en décimas.9.2.2. pH-metro.9.2.3. Cápsulas de platino o porcelana.

9.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS121086 Etanol absoluto PA181693 Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV

9.3.1. Disolución de Sodio Hidróxido 0,01N.Diluir a 1:10 en matraz aforado Sodio Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS.

9.3.2. Etanol absoluto PA.

9.4. Procedimiento.9.4.1. Acidez Total.

Valorar 50 ml de la muestra con la disolución deSodio Hidróxido (9.3.1.), a pH 8,2 utilizando el pH-metro.

9.4.2. Acidez fija. Evaporar, al baño maría, enuna cápsula (9.2.3.), 50 ml de la muestra, desecarla

a 100°C durante 30 minutos. Disolver y transferir elresiduo con varias porciones de alcohol (llevandopreviamente a pH 8,2) de una graduación similar ala muestra usando 50 ml de Etanol absoluto PA entotal.

Valorar con la disolución de Sodio Hidróxido(9.3.1.) a pH = 8,2 utilizando el pH-metro.

9.5. Cálculo.

9.5.1. Acidez total (en V1 x 1,2 x 100

mg/100 ml de etanol absoluto) = ––––––––––––––A

Siendo :V1 = Volumen, en ml de sodio hidróxido

empleados en (9.4.1.).A = Grado alcohólico de la muestra.

9.5.2. Acidez fija (en V2 x 1,2 x 100

mg/100 ml de etanol absoluto) = ––––––––––––––A

Siendo:V2 = Volumen, en ml, de sodio hidróxido

empleados en (9.4.2.)A = Grado alcohólico de la muestra.

9.5.3. El valor de la acidez volátil, expresado enmg de ácido acético por 100 ml de etanol absoluto,vendrá dado por la fórmula:Acidez volátil = Acidez total - Acidez fija.

9.6. Referencia.9.6.1. Association of Official Analytical Chemists.

Edición 1980-9046-9045.

10. CENIZAS(Materia mineral total)

10.1. Principio.Se denominan cenizas de un whisky, al conjunto

de los productos de incineración del residuo deevaporación de un volumen conocido del whisky.

10.2. Material y aparatos.10.2.1. Horno eléctrico regulable.10.2.2. Baño de agua y baño de arena.10.2.3. Lámpara de infrarrojo.10.2.4. Cápsula de platino o de cuarzo de

77 mm de diámetro interno y 18 mm de altura, fon-do plano.

10.2.5. Balanza analítica.

10.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS

140

Page 141: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

10.4. Procedimiento.Colocar 25 ml de whisky en una cápsula tarada

en balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar conprecaución en baño de agua hasta consistenciasiruposa, continuar el calentamiento sobre baño dearena con moderación y durante una media hora.Es conveniente ayudar a la evaporación con la apli-cación de rayos infrarrojos hasta carbonización.Cuando ya no se desprendan vapores, llevar la cáp-sula al horno eléctrico a 525°C ± 25°C y con airea-ción continua.

Después de cinco minutos de carbonizacióncompleta, sacar la cápsula del horno, dejar enfriar yañadir 5 ml de Agua PA-ACS, que se evapora enbaño de agua, y llevar de nuevo al horno a 525° C.

Si la combustión de las partes carbonosas no seconsigue en quince minutos, volver a comenzar laoperación de adición de Agua PA-ACS, evapora-ción y recalcinación.

Después de enfriar en el desecador, pasar lacápsula con las cenizas.

10.5. Cálculo.El contenido en cenizas vendrá dado por la

siguiente fórmula:Cenizas (g/l) = 40 x P

Siendo:P = Peso, en gramos, de las cenizas contenidas

en 25 ml de whisky.

10.6. Referencias.10.6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyses des Vins. O.I.V., AGI, 1969.10.6.2. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos,

Ministerio de Agricultura, 1971, pág 66.

11. PLOMO

11.1. Principio.Determinación del plomo por A.A., previa mine-

ralización de la muestra.

11.2. Material y aparatos.11.2.1. Espectrofotómetro de A.A.11.2.2. Lámpara de plomo.11.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar.11.2.4. Baño de arena o placa calefactora con

regulación de temperatura o estufa con control detemperatura en el rango de 50 a 150°C.

11.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro devitrina de extracción de humos.

11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1.000 ml decapacidad.

11.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO

131074 Agua PA-ACS313189 Plomo solución patrón

Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA

11.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.11.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.11.3.3. Acido Nítrico al 1% v/v en Agua PA-ACS.11.3.4. Plomo solución patrón Pb = 1,000 ±

0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a1.000 ml con Acido Nítrico al 1%.

11.4. Procedimiento.11.4.1. Preparación de la muestra.- Poner

100 ml de la muestra en la cápsula (11.2.3.) y llevar-la a evaporación hasta consistencia siruposa enbaño de arena (11.2.4.). Añadir a continuación 2 mlde Acido Sulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el resi-duo en el baño de arena o placa. Seguidamenteintroducir la cápsula en la mufla y mantenerla duran-te dos horas a 450°C, transcurrido dicho tiempo,sacarla y dejarla enfriar.

Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en elbaño de arena o placa e introducir en la mufla, repi-tiendo esta operación hasta obtener cenizas blan-cas. Un ligero color marrón-rojizo en las cenizas(posiblemente de Hierro III Oxido) es aceptado y norequiere un tratamiento posterior.

Disolver a continuación las cenizas con 1 ml deAcido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-ACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml, lavarla cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas dellavado hasta el enrase, filtrando posteriormente.

11.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluiralícuotas apropiadas de la solución patrón (11.3.4.)con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obtener una curvade concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l.

11.4.3. Determinación.- Operar según las espe-cificaciones del aparato; usando llama de aire-aceti-leno. Medir las absorbancias de la muestra y patro-nes a 283 nm. Si la solución está muy concentradadiluirla con Acido Nítrico al 1%.

11.5 Cálculo.Calcular el contenido en plomo, expresado en mg/lmediante comparación con la correspondiente cur-va patrón y teniendo en cuenta el factor de concen-tración o dilución.

11.6. Referencia.11.6.1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos.

Ministerio de Agricultura, pág 134 (I), 1976.

12. ZINC

12.1. Principio.Determinación del Zinc por A.A. previa mineraliza-

ción de la muestra.

141

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12.2. Material y aparatos.12.2.1. Espectrofotómetro de A.A.12.2.2. Lámpara de Zinc.12.2.3. Los utilizados para el Pb en (11.2.3.),

(11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.).

12.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313193 Zinc solución patrón

Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA

12.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.),(11.3.2.) y (11.3.3.).

12.3.2. Zinc solución patron Zn = 1,000 ± 0,002g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782 Zincmetal , granalla PRS en el mínimo volumen necesariode Acido Nítrico (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Nítricodel 1% (v/v).

12.4. Procedimiento.12.4.1. Preparación de la muestra.- Como en

(11.4.1.).12.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir

partes alícuotas de la solución patrón (12.3.2.), conAcido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5;1; 1,5 y 2 mg/l.

12.4.3. Determinación.- Igual que para el Plomo.La lectura se efectuará a 213,8 nm.

12.5 Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancias obteni-

dos, hallar las concentraciones de Zinc para la mues-tra, teniendo en cuenta el factor concentración o dilu-ción.

12.6. Referencia.12.6.1. H. E. Parker. Atomic Absorption Newslet-

ter (1963), 13.

13. COBRE

13.1. Principio.Determinación del cobre por A.A., mineralización

por cenizas a ≤ 450°C y concentración previa a lalectura con objeto de conseguir resultados suficiente-mente precisos.

13.2. Material y aparatos.13.2.1. Espectrofotómetro de A.A.13.2.2. Lámpara de cobre.13.2.3. Los utilizados para el plomo en (11.2.3.),

(11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.).

13.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS

313178 Cobre solución patrónCu = 1,000 ± 0,002 g/l AA

13.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.),(11.3.2.) y (11.3.3.).

13.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ± 0,002g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de Cobre puroen el mínimo volumen necesario de Acido Nítrico (1:1)y diluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1% (v/v).

13.4. Procedimiento.13.4.1. Preparación de la muestra.- Como en

(11.4.1.).13.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir

partes alícuotas de la solución patrón (13.3.2.) conAcido Nítrico del 1% para obtener soluciones quecontengan de 1 a 5 mg de cobre/l.

13.4.3. Determinación.- Igual que para el plomo.Medir a 324,7 nm.

13.5. Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancia obteni-

dos para la muestra, hallar mediante la curva patrónlas concentraciones de cobre de la muestra.

13.6. Referencias.13.6.1. H. E. Parker: “Atomic Absorption Newslet-

ter (1963),13”.13.6.2. F. Rousselet: “Spectrophotometrie par

absorption atomique Boudin”. Ed. París (1968), pág59-144.

14. ARSENICO

14.1. Principio.La muestra se somete a una digestión ácida con

una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.La determinación del arsénico se realiza por

espectrofotometría de absorción atómica, con gene-rador de hidruros.

14.2. Material y aparatos.14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g de 0,1 g.14.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml de

capacidad.14.2.3. Pipetas de doble aforo.14.2.4. Matraces Kjedahl de 250 ml.14.2.5. Espectrofotómetro de absorción atómica

equipado con sistema generador de hidruros.14.2.6. Lámpara de descarga sin electrodos.14.2.7. Fuente de alimentación para lámpara de

descarga sin electrodos.14.2.8. Registro gráfico.

14.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131669 Acido Etilendiaminotetraacético sal

Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO

142

Page 143: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico PA-ISO131074 Agua PA-ACS313171 Arsénico solución patrón

As = 1,000 ± 0,002 g/l AA131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO123314 Sodio Borohidruro PA131687 Sodio Hidróxido 97%, lentejas

PA-ACS-ISO

14.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO (d= 1,19 g/ml).

14.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico 32% v/v.Disolver 32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO (d= 1,19 mg/l) con Agua PA-ACS hasta unvolumen de 100 ml.

14.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico 1,5% v/v.Disolver 15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO (d=1,19 mg/l) con Agua PA-ACS hasta un volu-men de 1.000 ml.

14.3.4. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO14.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (d=1,84).14.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%.

Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISOy disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.

14.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disolverlohasta 100 ml con Sodio Hidróxido al 1%.

14.3.8. Disolución de Acido Etilendiaminotetra-acético al 1%. Pesar un gramo de Acido Etilendia-minotetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO y disolverlo hasta 100 ml con Agua PA-ACS.

14.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volu-men de 100 ml.

14.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISOcon Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.

14.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1%(v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO conAgua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.

14.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 ±0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 ArsénicoIII Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxidoal 20% (14.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico al20% (14.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfú-rico 1% (14.3.11.).

14.3.13. Solución patrón de Arsénico de con-centración 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la soluciónpatrón de Arsénico (14.3.12.), en un matraz aforadode 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.

14.3.14. Solución patrón de Arsénico deconcentración 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de lasolución de Arsénico (14.3.13.), en un matrazaforado de 100 ml. Diluir hasta el enrase conAgua PA-ACS.

14.4. Procedimiento.14.4.1. Preparación de la muestra. En un matraz

Kjeldahl, de 250 ml introducir 10 ml de muestra con20 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 5 ml deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO.

Llevar a ebullición hasta reducir el volumen a5 ml.

Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en unmatraz de 50 ml la solución resultante.

14.4.2. Preparación del blanco y patrones detrabajo. En un matraz Kjedahl, introducir 5 ml de lasolución de Arsénico (14.3.14.) y someterlo al mis-mo tratamiento que la muestra.

1 ml de la solución contiene 10 nanogramos deArsénico.

Preparar un blanco con todos los reactivos utili-zados siguiendo el tratamiento dado a la muestra.

14.4.3. Condiciones del espectrofotómetro.Encender la fuente de alimentación de las lámparasde descarga sin electrodos con el tiempo suficientepara que se estabilice la energía de la lámpara.

Encender el espectrofotómetro, ajustar la longi-tud de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla deacuerdo con las condiciones del aparato.

Encender el generador de hidruros, colocando latemperatura de la celda a 900°C, esperando hastaque se alcanza dicha temperatura.

Se ajustan las condiciones del generador dehidruros según las especificaciones del aparato.

Ajustar el flujo de Argón de acuerdo con lascaracterísticas del aparato.

Encender el registrador.14.4.4. Determinación.- Las determinaciones de

la concentración de Arsénico se realizan por elmétodo de adición de patrones, por medio demedidas duplicadas en el espectrofotómetro en lascondiciones especificadas en (14.4.3.), añadiendoal matraz de reacción 3 ml de la solución (14.4.1.),más 3 ml de la solución (14.3.2.), y 10 ml de la solu-ción (14.3.8.). Como patrones internos se usan 10,20 y 50 ng de Arsénico.

Lavar los matraces antes y después de cadauso, con Acido Clorhídrico 1,5% (14.3.3.).

Al construir la gráfica de adición hay que des-contar el valor de absorbancia del blanco obtenidoen las mismas condiciones anteriores, pero aña-diendo 3 ml de la solución blanco.

En estas condiciones el límite de detección de latécnica es de 5 ng.

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Aguardientescompuestos:Ron

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METODOS DE ANALISIS

1. OBTENCION DEL DESTILADO

1.1. Principio.Destilación de la muestra en condiciones deter-

minadas.

1.2. Material y aparatos.1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad

de fondo redondo y boca esmerilada.1.2.2. Alargadera tipo Kjedahl o similar.1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth (20-30 cm de

longitud) o similar.1.2.4. Matraces aforados de 100 y 200 ml de

capacidad.1.2.5. Manta eléctrica o mechero de gas.

1.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS

1.3.1. Agua PA-ACS

1.4 Procedimiento.1.4.1. Muestras con menos del 60% de Etanol.

Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado queantes de enrasar se mantiene en baño de agua a20°C durante media hora. Enrasar con pipeta, lim-piando el interior del cuello del matraz de posiblesgotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarseque queden burbujas de aire adheridas a las pare-des del matraz.

Pasar cuantitativamente el volumen medido almatraz aforado de 200 ml con 20 ml de Agua PA-ACS cada vez, añadiendo las aguas del lavado almatraz de destilación. Cuando se trate de bebidassiruposas, por su gran contenido en azúcar, el lava-do debe efectuarse consecutivamente con tres por-ciones de 50 ml de Agua PA-ACS.

Proceder a la destilación.Es conveniente añadir bolitas de vidrio para faci-

litar la ebullición suave. En algunos casos, si seteme la formación de espuma, añadir un antiespu-mante inerte (como silicona).

El matraz de recogida del destilado es el mismoen que se efectuó la medida. Se le añaden 10 ml deAgua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado,de forma que el destilado resbale por la pared sinsalpicadura, dentro de un baño de hielo o agua fría,a menos de 10° C. El refrigerante debe ir dotado deuna alargadera que penetra por lo menos 4-6 cmen el cuello del matraz.

Cuando se hayan recogido aproximadamente190 ml, llevar el matraz tapado al baño de agua a20°C. Cuando se alcance dicha temperatura, den-tro del mismo baño, enrasar con Agua PA-ACSmediante pipeta.

Tapar el matraz e invertirlo varias veces para

homogeneizar su contenido antes de proceder a ladeterminación del etanol.

1.4.2. Muestras con más del 60% de etanol. Elprocedimiento anteriormente descrito difiere única-mente en que la muestra se mide en matraz afora-do de 100 ml, que se lava varias veces con AguaPA-ACS hasta alcanzar un volumen de aproximada-mente 230 ml. El destilado se recoge en matrazaforado de 200 ml, y se enrasa con Agua PA-ACSdentro del baño de agua a 20°C.

1.5 Observaciones.1.5.1. El sistema de destilación debe compro-

barse en ambos caso como sigue:Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohólica al

10% en volumen cinco veces sucesivas. Determinaren la última destilación el título alcohométrico deldestilado, que no debe ser menor del 9,9% en volu-men de etanol.

1.5.2. La destilación debe efectuarse procuran-do que el flujo del destilado sea uniforme.

1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estarácomprendido entre cuarenta y cinco y noventaminutos.

1.6. Referencia.1.6.1. Instituto Español de Normalización. UNE

33-112-75.

2. FURFUROL(Furfuraldehído)

2.1. Principio.Destilación y posterior medida espectrofotomé-

trica de su absorción a 277 nm.

2.2. Material y aparatos.2.2.1. Pipetas de doble enrase de 1,5 y 25 ml.2.2.2. Matraces aforados de 100, 200 y 500 ml.2.2.3. Espectrofotómetro ultravioleta visible.2.2.4. Aparato de destilación por arrastre de

vapor, según figura 1.

2.3. Reactivos131074 Agua PA-ACS121086 Etanol absoluto PA141334 Furfuraldehído PRS

2.3.1. Disolución patrón de Furfuraldehído deaproximadamente 116 mg/l. Destilar FurfuraldehídoPRS recogiendo solamente la fracción del punto deebullición 161,2°C. De este destilado tomar 1 ml,llevarlo a un matraz aforado de 100 ml, enrasandocon Etanol al 95% en volumen. Tomar 5 ml de estadisolución y diluir con Etanol al 50% en volumen enun matraz aforado de 500 ml.

2.3.2. Disoluciones de referencia. A partir de(2.3.1.) obtener disoluciones de 0, 1, 2, 3, 4 y5 mg/l de Furfuraldehído.

145

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2.4. Procedimiento.2.4.1. Preparación de la muestra. Destilar 25 ml

de la muestra en el aparato descrito en (2.2.4.),recogiendo 200 ml.

Si se observa turbidez en el destilado, añadir unvolumen conocido de Etanol 95% hasta lograr totallimpidez en el destilado.

2.4.2. Determinación. Leer la absorbancia en elespectrofotómetro a 277 nm, comparando con laslecturas efectuadas a las disoluciones de referenciao bien calculando la absorbancia de una disoluciónque contenga 1 mg/l de Furfuraldehído PRS (valoraproximado 0,15).

2.5. Cálculo.El contenido en Furfuraldehído se obtiene mediantela fórmula:

A Furfuraldehído (mg/l) = ––– x F

A’

Siendo:A = absorbancia de la muestra.A’ = absorbancia de una disolución que

contiene 1 mg/l de Furfuraldehído.F = factor de dilución.

2.6. Observaciones.2.6.2. La disolución de referencia se debe prepa-

rar inmediatamente antes de efectuar la medida.

2.7. Referencia.2.7.1. Instituto Español de Normalización. UNE

33-109-74.

3. EXTRACTO SECO REDUCIDO

3.1. Principio.Evaporación de la muestra a 105°C y pesada

posterior del residuo, y aplicación de una fórmulaempírica.

3.2. Material y aparatos.3.2.1. Estufa de aire regulable de 95°C a los

105°C.3.2.2. Crisoles de platino o cuarzo de fondo pla-

no, de 77 mm de diámetro interno y 18 mm de altura.3.2.3. Desecador de vidrio que contenga ácido

sulfúrico concentrado o gel de sílice como sustan-cia desecadora.

3.2.4. Baño de agua.3.2.5. Balanza analítica.

3.3. Procedimiento.Medir 25 ml de muestra a 20°C. Evaporar a

sequedad, en las cápsulas correspondientes pre-viamente desecadas y taradas, en baño de aguahirviente y mantener la estufa a 105ºC, durantetreinta minutos.

Dejar enfriar las cápsulas en el interior del dese-cador y una vez frías pesar en la balanza de preci-sión.

3.4. Cálculo.El valor del extracto total de la muestra, en gra-

mos por litro, se hallará mediante la fórmula siguiente:

Extracto total (g/l) = (M-m)x40

Siendo:M = peso, en g, de la cápsula con el extracto

seco.m = peso, en g, de la cápsula vacía.

El extracto seco reducido se calcula mediante lafórmula siguiente:

Extracto seco reducido = ESR en (g/l)Extracto seco total = EST en (g/l)Azúcares totales = AT en (g/l) = sacarosa +

azúcares reductoresESR = EST - AT

3.5. Referencia.3.5.1. Instituto Español de Normalización. UNE

33-106-74.

146

Figura 2.1

Page 147: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

4. ESTERES

4.1. Principio.Reacción cuantitativa de los ésteres con hidro-

xilamina en solución alcalina, formación de ácidohidroxámico, acidificación, formación de un com-plejo coloreado con iones férricos y medida delcolor desarrollado a 525 nm.

4.2. Material y aparatos.4.2.1. Espectrofotómetro o colorímetro que

permita lectura a 525 nm.4.2.2. Tubos de ensayo de longitud 20 cm y

diámetro interno 2,5 cm.

4.3. Reactivos131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA131318 Etilo Acetato PA-ACS-ISO131914 Hidroxilamonio Cloruro PA-ACS-ISO141358 Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos

PRS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO

4.3.1. Disolución de Hidroxilamonio Cloruro2M. Diluir convenientemente Hidroxilamonio Clo-ruro PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS. Conservaren nevera.

4.3.2. Disolución de Sodio Hidróxido 3,5 N.Diluir convenientemente Sodio Hidróxido lentejasPA-ACS-ISO con Agua PA-ACS.

4.3.3. Disolución de Hidroxilamonio Cloruro 1Men Sodio Hidróxido 1,75N: mezclar inmediata-mente antes de su uso, volúmenes iguales delreactivo (4.3.1.) y (4.3.2.). Desechar a las seishoras.

4.3.4. Disolución de Acido Clorhídrico 4N.Diluir convenientemente Acido Clorhídrico 35%PA-ISO en Agua PA-ACS.

4.3.5. Disolución de Hierro III Cloruro 0,37M.Disolver 50 g de Hierro III Cloruro 6-hidrato, tro-zos PRS en unos 400 ml de Agua PA-ACS en unmatraz aforado de 500 ml. Añadir 12,5 ml de Aci-do Clorhídrico 4N y enrasar con agua.

4.4. Procedimiento.4.4.1. Construcción de la curva patrón.4.4.1.1. Solución patrón. Pesar 5 g de Etilo

Acetato PA-ACS-ISO y llevar a un litro con Etanol96% v/v PA convenientemente diluido en AguaPA-ACS hasta concentración 50º.

4.4.1.2. Soluciones de 50, 100, 150, 200, 250y 300 mg/l de Etilo Acetato PA-ACS-ISO. Tomarde la solución (4.4.1.1.), 2,5; 5,0; 7,5; 10,0; 12,5 y15,0 ml introduciéndolos en matraces de 250 mlde capacidad y completar con Etanol de 50° has-ta el enrase.

4.4.1.3. Solución de referencia. Tomar 4 ml de

la solución (4.3.3.) y 2 ml de la disolución (4.3.4.)mezclándolas en un tubo de ensayo (4.2.2.). Mez-clar y añadir 2 ml de una cualquiera de las solu-ciones (4.4.1.2.).

Introducir en una serie de tubos de ensayo(4.2.2.), 2ml de cada una de las soluciones(4.4.1.2.) y 4 ml de (4.3.3.).

Agitar y dejar reaccionar entre uno y veinteminutos. Añadir 2 ml de la disolución de AcidoClorhídrico 4N y mezclar. Añadir 2 ml de la disolu-ción de Hierro III Cloruro 0,37M a cada uno de losmatraces, tanto al de la solución de referenciacomo a los de las soluciones (4.4.1.2.).

Efectuar las lecturas colorimétricas a una longi-tud de onda de 525 nm.

Obtener las gráficas de calibrado mediante larepresentación de las diferencias de absorción delas soluciones (4.4.1.2.), respecto a la solución dereferencia, en función de la concentración de EtiloAcetato.

4.4.2. Preparación de la muestra. Destilarsiguiendo el procedimiento descrito en el métodooficial número 1.

4.4.3. Determinación. Introducir en un tubo(4.2.2.), 2 ml del destilado y 4 ml de disolución deHidroxilamonio Cloruro (4.3.3.), agitar y dejarreaccionar entre uno y veinte minutos. Añadir 2 mlde la disolución de Acido Clorhídrico (4.3.4.) ymezclar. Añadir 2 ml de la disolución de Hierro IIICloruro (4.3.5.)

Efectuar la lectura colorimétrica a 525 nminmediatamente, tomando como blanco la solu-ción de referencia preparada de la siguiente for-ma:

Introducir en un tubo (4.2.2.) 4 ml de la disolu-ción de Hidroxilamonio Cloruro (4.3.3.) y 2 ml dela solución de ácido clorhídrico (4.3.4.), mezclar yañadir 2 ml del destilado. Añadir 2 ml de la disolu-ción de Hierro III Cloruro (4.3.5.) y mezclar.

4.5 Cálculo.A partir de las lecturas obtenidas se halla el con-tenido en ésteres, expresados en mg de etilo ace-tato por 100 ml de alcohol absoluto, mediante lasgráficas de calibrado.

4.6. Observaciones.4.6.1. El mismo blanco, puede ser usado para

una serie de muestras de distinto contenido enésteres, pero de semejante graduación alcohóli-ca.

4.7. Referencias.4.7.1. Association of Official Analytical Che-

mists. Edición 1975-9053-594.7.2. Instituto Español de normalización. UNE

33-111-77.

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5. ALCOHOLES SUPERIORES

5.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación de los

alcoholes superiores al etanol por cromatografía degases.

5.2. Material y aparatos.5.2.1. Cromatógrafo de gases equipado con

detector de ionización de llama.5.2.2. Columna cromatográfica. Columna de 4 m

de longitud de 1/8” de diámetro interno rellena deCarbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W80-100 mallas, lavado a los ácidos.

5.2.3. Microjeringas de 1 µl.

5.3. Reactivos.5.3.1. Patrones cromatográficos:131082 1-Butanol PA-ACS-ISO354330 iso-Butanol CG353851 2-Butanol CG354539 2-Metil-1-Butanol CG351079 3-Metil-1-Butanol CG

4-Metil-2-Pentanol (patrón interno)351885 1-Propanol CG

5.3.2. Etanol pureza cromatográfica.

5.4. Procedimiento.5.4.1. Condiciones cromatográficas. Las condi-

ciones cromatográficas orientativas son: gas porta-dor nitrógeno 20 ml/min., temperatura del horno85°C, temperatura del inyector y del detector150°C.

5.4.2. Calibrado.5.4.2.1. Patrón interno : Solución de 5 g/l en eta-

nol de 40° C 4-Metil-2-Pentanol.5.4.2.2. Solución patrón: Preparar una solución

en alcohol de 40° en las proporciones que se indi-can en la tabla 1.

5.4.2.3. Solución de calibrado: A 10 ml de lasolución patrón (5.4.2.2.) se le añade 1 ml dela solución patrón interno (5.4.2.1.) Y se inyecta 1 µlen el cromatógrafo.

5.4.3. Muestra problema. A 10 ml de la muestrallevada a 40°C se le añade 1 ml de patrón interno(5.4.2.1.) e inyectar un litro en las mismas condicio-nes en que se hizo para el calibrado.

5.5. Cálculo.Una vez identificados los picos por sus retencio-

nes relativas al patrón interno se calculan los facto-res de respuesta para cada uno de ellos y las con-centraciones en la muestra problema aplicando lasfórmulas.

ApFactor de respuesta ( Fr ) = Ci x –––––

Ai

AimConcentración en la muestra (mg/l) = Fr x –––––– x f

Apm

Siendo:Ci = concentración del compuesto en la solu-

ción patrón.Ap = área del patrón interno en la solución

patrón.Ai = área del compuesto en la solución patrón.Aim = área del compuesto en la muestra proble-

ma. Apm = área del patrón interno en la muestra pro-

blema.f = factor de dilución de la muestra.

El contenido en alcoholes superiores vendrádado por la sumo de los valores individuales obteni-dos de cada uno de ellos y se expresará en mg/100ml de alcohol absoluto.

5.6. Referencia.5.6.1. Association of Official Agricultural Che-

mists 1980, 9075.

TABLA 1–––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––

Compuesto Concentración (mg/l)–––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––

2-Butanol 101-Propanol 125iso-Butanol 1751-Butanol 152-Metil-1-Butanol 1003-Metil-1-Butanol 300

–––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––

6. METANOL(Alcohol Metílico)

6.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación del

metanol por cromatografía gaseosa.

6.2. Material y aparatos.Como en 5.2.

6.3. Reactivos.Metanol pureza cromatográfica.4-Metil 2-Pentanol (Patrón interno).Etanol pureza cromatográfica.

6.4. Procedimiento.6.4.1. Condiciones cromatográficas.- Como en

5.4.1.6.4.2. Calibrado.6.4.2.1. Patrón interno. Como en 5.4.2.1.6.4.2.2. Solución patrón. Preparar una solución

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de Metanol en Etanol a 40°, de concentración simi-lar a la esperada en la muestra.

6.4.2.3. Solución de calibrado. A 10 ml de lasolución del patrón interno (6.4.2.2.), se le añade1 ml de la solución del patrón interno (6.4.2.1.) y seinyecta 1 µl en el cromatógrafo.

6.4.3. Muestra problema. Como en 5.4.3.

6.5. Cálculo.Como en 5.5.6.6. Referencia.Como en 5.6.

7. GRADO ALCOHOLICO

7.1. PrincipioSe determina por destilación del producto y

medida de la densidad del destilado por areometría.

7.2. Material y aparatos.7.2.1. Aparatos de destilación como en 1.2.7.2.2. Alcohómetro con graduación de 0,1° de

d 20/20 debidamente contrastado.7.2.3. Termómetro con graduación de 0,1°C.7.2.4. Probeta transparente de 36 mm de diá-

metro interior y 320 mm de altura.7.2.5. Baño termostático a 20°C.

7.3. Procedimiento.7.3.1. Obtención del destilado. Según método

oficial número 1.7.3.2. Determinación areométrica. Limpiar y

secar el alcohómetro antes de su empleo.Echar el destilado en la probeta, inclinarla unos

45° para evitar la agitación y las burbujas. Tapar laprobeta con la palma de la mano, e invertirla 3 o 4veces para igualar las temperaturas de la probeta yel líquido.

Dejar que el alcohómetro, termómetro, probeta ydestilado, alcance en el baño termostatizado latemperatura de 20°C.

Introducir el alcohómetro en el líquido de arriba aabajo 5 o 6 veces, de manera que alcance la mismatemperatura y que se distribuya cualquier cambiode temperatura en todo el líquido. Mantener el bul-bo del alcohómetro en el líquido, secar el vástago,dejarlo en reposo de modo que sólo unas pocasdécimas de grados estén mojadas.

Leer en el alcohómetro, luego en el termómetro.Para leer en la escala del alcohómetro situar el ojojusto debajo del plano de la superficie del líquido,levantar lentamente la cabeza manteniendo la visualperpendicular al alcohómetro, hasta que la superfi-cie varíe de elipse a una línea recta.

Anotar el punto en que esta línea interseccionacon la escala del alcohómetro, siendo ésta la lectu-ra del alcohómetro.

Levantarlo ligeramente por encima de dicha lec-tura y dejarlo en reposo de nuevo. Volver a leer en el

alcohómetro y en el termómetro, comprobando asílas primeras lecturas. Hacer la lectura del alcohó-metro con aproximación de 0,05° y la del termóme-tro con 0,1°. Sacar el alcohómetro y secarlo. Invertirla probeta con la muestra varias veces (el termóme-tro quede en su sitio), para que se equilibre térmica-mente todo el conjunto. Volver a atemperar el alco-hómetro, secar el vástago y realizar nuevas lecturasen el alcohómetro y en el termómetro. Los valorescalculados son válidos si tienen aproximación de0,1 grado alcohólico, si no fuera así, realizar lectu-ras adicionales y calcular la medida.

7.4. Cálculo.El grado alcohólico real es el leído en el destilado

obtenido según 7.3.1.Si en la obtención del destilado, 100 ml de

muestra se destilaron hasta 200 ml, la lectura obte-nida, debe ser multiplicada por 2.

7.5. Referencia.7.5.1. Association of Official Analytical Chemists.

Edición 1980-9015-9.

8. ALDEHIDOS

8.1. Principio.Reacción de los aldehídos con sodio bisulfito.

Oxidación del ácido sulfuroso con yodo y valoracióndel exceso de yodo con sodio tiosulfato.

8.2. Material y aparatos.8.2.1. Bureta de 25 ml graduada en décimas de

ml.

8.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS211642 Sodio Hidrógeno Sulfito solución

40% p/v QP182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV

8.3.1. Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV.8.3.2. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV8.3.3. Disolución de Sodio Bisulfito 0,05N. Diluir

convenientemente Sodio Hidrógeno Sulfito solución40% p/v QP en Agua PA-ACS.

8.4. Procedimiento.Poner 100 ml del destilado (obtenido según

Método oficial número 1) en un matraz de 500 mlde Agua PA-ACS y un exceso de la disolución(8.3.3.) calculado de modo que equivalga, por lomenos, a 25 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.

Dejar el matraz, bien tapado, durante treintaminutos, agitando de vez en vez.

Añadir 50 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV.Valorar el exceso de yodo añadido con Sodio Tio-

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sulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV hasta decoloracióncompleta.

Debe hacerse simultáneamente un ensayo enblanco, para comprobar en cada serie de ensayosla estabilidad de las soluciones de Yodo y Tiosulfatopor ser tan diluidas.

8.5. Cálculo.El contenido en aldehídos, expresado como

acetaldehído, vendrá dado por la siguiente fórmula:

Aldehídos (mg/100 ml 1,1 x 100

de alcohol absoluto) = (V2 - V1) x ––––––––––A

Siendo:V1 = volumen, en ml, de sodio tiosulfato gasta-do en la muestra.V2 = volumen, en ml, de sodio tiosulfato gasta-do en el blanco.A = grado alcohólico.

8.6. Observaciones.8.6.1. La solución de sodio bisulfito tiene mayor

tiempo de estabilidad si se le añade un 10% dealcohol. En cualquier caso esta solución es estable,como máximo una semana.

8.7. Referencias.8.7.1. Association of Official Agricultural Che-

mists 1980-9052.8.7.2. Instituto Español de Normalización. UNE

33-107-74.

9. ACIDEZ VOLATIL

9.1. Principio.Se define convencionalmente como la diferencia

entre los valores de la acidez total y fija, expresadasambas en mg de ácido acético por 100 ml de alco-hol absoluto.

9.2. Material y aparatos.9.2.1. Bureta de 10 ml graduada en décimas.9.2.2. pH-metro.9.2.3. Cápsulas de platino o porcelana.

9.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS121086 Etanol absoluto PA131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO

9.3.1. Disolución de Sodio Hidróxido 0,01N.Diluir convenientemente Sodio Hidróxido lentejasPA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.

9.3.2. Etanol absoluto PA.

9.4. Procedimiento.9.4.1. Acidez total. Valorar 50 ml de la muestra

con la disolución de Sodio Hidróxido (9.3.1.) apH 8,2 utilizando el pH-metro.

9.4.2. Acidez fija. Evaporar, al baño María, enuna cápsula (9.2.3.), 50 ml de la muestra, desecarlaa 100° C durante treinta minutos. Disolver y transfe-rir el residuo con varias porciones de Etanol absolu-to PA (llevando previamente a pH 8,2) de una gra-duación similar a la muestra usando 50 ml de Etanolabsoluto PA en total.

Valorar con la disolución de Sodio Hidróxido(9.3.1.) a pH = 8,2 utilizando el pH-metro.

9.5. Cálculo.

9.5.1. Acidez fija (en V1 x 1,2 x 100

mg/100 ml de etanol absoluto) = –––––––––––––––A

Siendo:V1 = volumen, en ml, de sodio hidróxido em-

pleados en 9.4.1.A = grado alcohólico de la muestra.

9.5.2. Acidez fija ( en V2 x 1,2 x 100

mg/100 ml de etanol absoluto) = ––––––––––––––A

Siendo:V2 = volumen, en ml, de sodio hidróxido em-

pleados en 9.4.2.A = grado alcohólico de la muestra.

9.5.3. El valor de la acidez volátil, expresado enmg de ácido acético por 100 ml de etanol absoluto,vendrá dado por la fórmula :

Acidez volátil = acidez total - acidez fija.

9.6. Referencia.9.6.1. Association of Official Analytical Chemists.

Edición 1980-9046-9048.

10. AZUCARES REDUCTORES

10.1 Principio.Eliminación previa de todas las materias reduc-

toras distintas de los azúcares reductores por defe-cación y posterior valoración basada en la acciónreductora de los azúcares sobre una solucióncupro-alcalina.

10.2. Material y aparatos.10.2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigeración

de reflujo.10.2.2. Material necesario para volumetría.10.2.3. Baño de agua.

10.3. Reactivos.131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO

150

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131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121212 Calcio Carbonato precipitado PA131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO211835 Piedra Pómez gránulos QP131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO131542 Potasio Yoduro PA-ISO122032 Sodio Carbonato 1-hidrato PA131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV

10.3.1. Solución de Plomo II Acetato 3-hidratoPA-ACS-ISO (aproximadamente saturada). Añadir a250 g de Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO,Agua PA-ACS caliente hasta 0,5 l y agitar hastadisolución completa.

10.3.2. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.10.3.3. Calcio Carbonato precipitado PA.10.3.4. Solución cupro-alcalina. Disolver por

separado 25 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS; 50 g de Aci-do Cítrico anhidro PA-ACS en 300 ml de Agua PA-ACS y 388 g de Sodio Carbonato 1-hidrato PA en300-400 ml de Agua PA-ACS caliente. Mezclar lasolución de Cobre Sulfato y completar el volumencon Agua PA-ACS hasta un litro.

10.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30%.Diluir convenientemente Potasio Yoduro PA-ISOcon Agua PA-ACS. Conservar en frasco topacio.

10.3.6. Solución de Acido Sulfúrico al 25 % envolumen. Diluir convenientemente Acido Sulfúrico96% PA-ISO en Agua PA-ACS.

10.3.7. Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV.10.3.8. Engrudo de almidón de 5 g/l. Diluir con-

venientemente 5 g de Almidón soluble RE en 1 l deAgua PA-ACS; contendrá 200 g/l de Sodio CloruroPA-ACS-ISO para asegurar su conservación. Estasolución debe ser mantenida diez minutos en ebulli-ción en el momento de su preparación.

10.4. Procedimiento.10.4.1. Defecación plúmbica. Llevar 100 ml de

ron a un matraz aforado de 125 ml. Añadir agitando5 ml de solución saturada de Plomo II Acetato y 1 gde Calcio Carbonatado precipitado PA, agitar variasveces y dejar sedimentar, por lo menos quinceminutos, enrasar con Agua PA-ACS, añadir 0,6 mlmás de Agua PA-ACS y filtrar.

10.4.2. Valoración. Poner en el Erlenmeyer de300 ml 25 ml de la solución cuproalcalina y 25 mlde ron previamente defecado. Añadir unos gramosde Piedra Pómez granulos QP y llevar a ebullición,que debe ser alcanzada en dos minutos, adaptan-do a Erlenmeyer al refrigerante de reflujo y mantenerexactamente durante diez minutos la ebullición.

Enfriar inmediatamente bajo corriente de aguafría. Añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduroal 30%, 25 ml de la solución de Acido Sulfúrico al

25% y 2 ml de Engrudo de Almidón. A continuaciónvalorar con Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV.

Efectuar una prueba en blanco, sustituyendo los25 ml de muestra, por igual volumen de Agua PA-ACS y tratar como se ha indicado para la muestra.

10.5. Cálculo.La cantidad de azúcar, expresada en azúcaresreductores contenida en la muestra analizada, seobtiene en la tabla adjunta en función del númeron’ - n de ml de tiosulfato utilizado.

Siendo:n = volumen, en ml, de solución de sodio tiosul-

fato 0,1 N, utilizados para la valoración de la muestra.n’ = volumen, en ml, de solución de sodio tiosul-

fato 0,1 N, utilizados en la prueba en blanco.

Expresar el contenido en gramos de azúcaresreductores por litro, teniendo en cuenta las dilucio-nes efectuadas en el curso de la defecación delvolumen de la muestra analizada.

10.6. Referencia.10.6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyses des Vins. O. I. V. A4e 106-107 (defeca-ción y 126-127 (valoración).

151

M

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152

TABLA 10.IAzúcares reductores expresados en mg de glucosa

Primera cifra decimal

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

0 0,0 0,3 0,6 1,0 1,3 1,6 1,9 2,2 2,6 2,91 3,2 3,5 3,8 4,2 4,5 4,8 5,1 5,4 5,7 6,12 6,4 6,7 7,1 7,4 7,7 8,1 8,4 8,7 9,0 9,43 9,7 10,0 10,4 10,7 11,0 11,4 11,7 12,0 12,3 12,74 13,0 13,3 13,7 14,0 14,4 14,7 15,0 15,4 15,7 16,15 16,4 16,7 17,1 17,4 17,8 18,1 18,4 18,8 19,1 19,56 19,8 20,1 20,5 20,8 21,2 21,5 21,8 22,2 22,5 22,97 23,2 23,5 23,9 24,2 24,6 24,9 25,2 25,6 25,9 26,38 26,6 26,9 27,3 27,6 28,0 28,3 28,6 29,0 29,3 29,79 30,0 30,3 30,7 31,0 31,3 31,7 32,0 32,4 32,7 33,0

10 33,4 33,7 34,1 34,4 34,8 35,1 35,4 35,8 36,1 36,511 36,8 37,2 37,5 37,9 38,2 38,6 38,9 39,3 39,6 40,012 40,3 40,7 41,0 41,4 41,7 42,1 42,4 42,8 43,1 43,513 43,8 44,2 44,5 44,9 45,2 45,6 45,9 46,3 46,6 47,014 47,3 47,7 48,0 48,4 48,7 49,1 49,4 49,8 50,1 50,515 50,8 51,2 51,5 51,9 52,2 52,6 52,9 53,3 53,6 54,016 54,3 54,7 55,0 55,4 55,8 56,2 56,5 56,9 57,3 57,617 58,0 58,4 58,8 59,1 59,5 59,9 60,3 60,7 61,0 61,418 61,8 62,2 62,5 62,9 63,3 63,7 64,0 64,4 64,8 65,119 65,5 65,9 66,3 66,7 67,1 67,5 67,8 68,2 68,6 69,020 69,4 69,8 70,2 70,6 71,0 71,4 71,7 72,1 72,5 72,921 73,3 73,7 74,1 74,5 74,9 75,3 75,6 76,0 76,4 76,822 77,2 77,6 78,0 78,4 78,8 79,2 79,6 80,0 80,4 80,823 81,2 81,6 82,0 82,4 82,8 83,2 83,6 84,0 84,4 84,824 85,2 85,6 86,0 86,4 86,8 87,2 87,6 88,0 88,4 88,825 89,2 89,6 90,0 90,4 90,8 91,2 91,6 92,0 92,4 92,8

ml sodiotiosulfato 0,1N

Page 153: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

11. PLOMO

11.1. Principio.Determinación del plomo por A.A., previa mine-

ralización de la muestra.

11.2. Material y aparatos.11.2.1. Espectrofotómetro de A.A.11.2.2. Lámpara de plomo.11.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar.11.2.4. Baño de arena o placa calefactora con

regulación de temperatura o estufa con control detemperatura en el rango de 50 a 150° C.

11.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro devitrina de extracción de humos.

11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1000 ml de capa-cidad.

11.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313189 Plomo solución patrón

Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA

11.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.11.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.11.3.3. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS

(v/v).11.3.4. Plomo solución patrón Pb = 1,000 ±

0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,589 g de131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a1.000 ml con Acido Nítrico al 1%.

11.4. Procedimiento.11.4.1. Preparación de la muestra. Poner 100 ml

de la muestra en la cápsula (11.2.3.), llevarla a eva-poración hasta consistencia siruposa en baño dearena (11.2.4.). Añadir a continuación 2 ml de AcidoSulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en elbaño de arena o placa. Seguidamente introducir lacápsula en la mufla y mantenerla durante dos horasa 450° C, transcurrido dicho tiempo, sacarla ydejarla enfriar.

Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en elbaño de arena o placa e introducir en la mufla, repi-tiendo esta operación hasta obtener cenizas blan-cas. Un ligero color marrón-rojizo en las cenizas(posiblemente de Fe2O3 ) es aceptado y no requiereun tratamiento posterior.

Disolver a continuación las cenizas con 1 ml deAcido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-ACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml, lavarla cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas delavado hasta el enrase, filtrando posteriormente.

11.4.2. Construcción de la curva de patrón.Diluir alícuotas apropiadas de la solución patrón(11.3.4.) con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obteneruna curva de concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l.

11.4.3. Determinación. Operar según las especi-ficaciones del aparato, usando llama de aire-acetile-no. Medir las absorbancias de la muestra y patro-nes a 283 nm. Si la solución está muy concentradadiluirla con Acido Nítrico al 1%.

11.5. Cálculo.Calcular el contenido en plomo, expresado en

mg/l mediante comparación con la correspondientecurva patrón y teniendo en cuenta el factor de con-centración o dilución.

11.6. Referencia.11.6.1. “Métodos Oficiales de Análisis de Vinos”.

Ministerio de Agricultura, pág 134 (I), 1976.

12. ZINC

12.1. Principio.Determinación del zinc por A.A. previa minerali-

zación de la muestra.

12.2. Material y aparatos.12.2.1. Espectrofotómetro de A.A.12.2.2. Lámpara de zinc.12.2.3. Los utilizados para el plomo en 11.2.3.,

11.2.4., 11.2.5. y 11.2.6.

12.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO313193 Zinc solución patrón

Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA

12.3.1. Los utilizados para el plomo en 11.3.1.,11.3.2. y 11.3.3.

12.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ± 0,002g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782Zinc metal granalla PRS en el mínimo volumennecesario de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) ydiluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1% (v/v).

12.4. Procedimiento.12.4.1. Preparación de la muestra. Como en

11.4.1.12.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluir

partes alícuotas de la solución patrón (12.3.2.) conAcido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,2;1; 1,5 y 2 mg/l.

12.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.La lectura se efectuará a 213,8 nm.

12.5. Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancias obteni-

dos, hallar las concentraciones de Zn para la mues-tra, teniendo en cuenta el factor concentración odilución.

153

M

Page 154: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

12.6. Referencia.12.6.1. H. E. Parker. “Atomic Absorption News-

letter” (1963),13.

13. COBRE

13.1. Principio.Determinación del cobre por A.A., mineralización

por cenizas a < 450° C y concentración previa a lalectura con objeto de conseguir resultados suficien-temente precisos.

13.2. Material y aparatos.13.2.1. Espectrofotómetro de A.A.13.2.2. Lámpara de cobre.13.2.3. Los utilizados para el plomo, en 11.2.3.,

11.2.4., 11.2.5. y 11.2.6.

13.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO313193 Cobre solución patrón

Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA

13.3.1. Los utilizados para el plomo en 11.3.1.,11.3.2. y 11.3.3.

13.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g deCobre puro en el mínimo volumen necesario de Aci-do Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y diluir a 1 litrocon Acido Nítrico del 1% (v/v).

13.4. Procedimiento.13.4.1. Preparación de la muestra. Como en

11.4.1.13.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluir

partes alícuotas de la solución patrón (13.3.2.) conAcido Nítrico del 1%, para obtener soluciones quecontengan de 1 a 5 mg de Cu/l.

13.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.Medir a 324,7 nm.

13.5. Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancia obteni-

dos para la muestra, hallar mediante la curva patrónlas concentraciones de cobre de la muestra.

13.6. Referencia.13.6.1. H. E. Parker “Atomic Absorption News-

letter” (1963),13.13.6.2. F. Rousselet “Spectrophotometrie par

absorption atomique Boudin”. Edición París (1968),páginas 59-144.

14. ARSENICO

14.1. Principio.La muestra se somete a una digestión ácida con

una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.La determinación del arsénico se realiza por

espectrofotometría de absorción atómica, con gene-rador de hidruros.

14.2. Material y aparatos.14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g y de

0,1 g.14.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml de

capacidad.14.2.3. Pipetas de doble aforo.14.2.4. Matraces Kjedahl de 250 ml.14.2.5. Espectrofotómetro de absorción atómica

equipado con sistema generador de hidruros.14.2.6. Lámpara de descarga sin electrodos.14.2.7. Fuente de alimentación para lámpara de

descarga sin electrodos.14.2.8. Registrador gráfico.

14.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal

Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS313171 Arsénico solución patrón

As = 1,000 ± 0,002 g/l AA131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO123314 Sodio Borohidruro PA131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO

14.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.14.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico 37% PA-

ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.

14.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de1000 ml.

14.3.4. Acido Nítrico 60% PA-ISO.14.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.14.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%.

Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO ydisolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.

14.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.Pesar 3 g de Sodio Borohidruro PA y disolverlo hasta100 ml con Sodio Hidróxido al 1%.

14.3.8. Disolución al 1% de Acido Etilendiamino-tetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO.Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetraacético SalDisódica 2-hidrato PA-ACS-ISO y disolverlo hasta100 ml con Agua PA-ACS.

14.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO

154

Page 155: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

y disolverlo con Agua PA-ACS hasta el volumen de100 ml.

14.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO conAgua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.

14.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1% (v/v).Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO con AguaPA-ACS hasta un volumen de 100 ml.

14.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 ±0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 ArsénicoIII Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxido al20% (14.3.9), neutralizar con Acido Sulfúrico al 20%(14.3.10), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfúrico 1%(14.3.11.).

14.3.13. Solución patrón de Arsénico de concen-tración 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de Arsé-nico (14.3.12.) en un matraz aforado de 100 ml. Diluirhasta el enrase con Agua PA-ACS.

14.3.14. Solución patrón de Arsénico de concen-tración 0,1mg/l. Pipetear 1 ml de la solución de Arsé-nico (14.3.13.) en un matraz aforado de 100 ml. Diluirhasta el enrase con Agua PA-ACS.

14.4. Procedimiento.14.4.1. Preparación de la muestra. En un matraz

Kjeldahl, de 250 ml, introducir 10 ml de muestra con20 ml de Acido Nítrico (14.3.4.) y 5 ml de Acido Sulfú-rico (14.3.5.).

Llevar a ebullición hasta reducir el volumen a 5mlDejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en un

matraz de 50 ml la solución resultante.14.4.2. Preparación del blanco y patrones de tra-

bajo. En un matraz Kjedahl, introducir 5 ml de la solu-ción de Arsénico (14.3.14.), y someterlo al mismo tra-tamiento que la muestra.

Un ml de la solución contiene 10 nanogramos deArsénico.

Preparar un blanco con todos los reactivos utiliza-dos siguiendo el tratamiento dado a la muestra.

14.4.3. Condiciones del espectrofotómetro. En-cender la fuente de alimentación de las lámparas dedescarga sin electrodos con el tiempo suficiente paraque se estabilice la energía de la lámpara.

Encender el espectrofotómetro, ajustar la longitudde onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de acuerdocon las condiciones del aparato.

Encender el generador de hidruros, colocando latemperatura de la celda a 900°C, esperando hastaque se alcance dicha temperatura.

Se ajustan las condiciones del generador de hidru-ros según las especificaciones del aparato.

Ajustar el flujo de argón de acuerdo con las carac-terísticas del aparato.

Encender el registrador.14.4.4. Determinación. Las determinaciones de la

concentración de Arsénico se realizan por el métodode adición de patrones por medio de medidas dupli-cadas en el espectrofotómetro en las condicionesespecificadas en 14.4.3., añadiendo al matraz de

reacción 3 ml de la solución 14.4.1., más 3 ml de lasolución 14.3.2. y 10 ml de la solución 14.3.8. Comopatrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de As.

Lavar los matraces antes y después de cada uso,con Acido Clorhídrico (14.3.3.).

Al construir la gráfica de adición hay que descon-tar el valor de absorbancia del blanco obtenido en lasmismas condiciones anteriores, pero añadiendo 3 mlde la solución blanco.

En estas condiciones el límite de detección de latécnica es de 5 ng.

15. SACAROSA

15.1. Principio.La sacarosa se determina por la diferencia de los

poderes reductores antes y después de la hidrólisisclorhídrica del líquido procedente de la defecación delron.

15.2. Reactivos131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO15.2.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO15.2.2. Sodio Hidróxido 12 N. Diluir convenien-temente Sodio Hidróxido lentejas

PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS

15.3 Procedimiento.Poner en dos matraces Erlenmeyer, de 200 ml

cada uno, el mismo volumen del líquido defecadosegún el método oficial número 10. Añadir a cadamatraz 0,3 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO, por cada 10 ml de líquido defecado.

En uno de los matraces añadir inmediatamente0,3 ml de Sodio Hidróxido 12 N, por cada 10 ml delíquido defecado, procediendo a la valoración de losazúcares reductores según el método oficial número10.

Llevar el otro matraz con el contenido sin neutrali-zar a baño de agua hirviendo durante 3 minutos. Aña-dir entonces el mismo volumen de Sodio Hidróxido12 N que al otro matraz y valorar como en el casoanterior.

15.4. Cálculo.La diferencia entre las cantidades de azúcares

reductores encontrada en los resultados de estas dosvaloraciones, multiplicada por 0,95 de la riqueza ensacarosa de la muestra de estudio.

Este resultado se expresa en g/l de ron teniendopresentes las diluciones efectuadas eventualmente enel curso de la defecación y del volumen de la muestrade ron que se sometió a la defecación.

15.5. Referencia.15.5.1. Recueil des Méthodes Internationales d’A-

nalyses des Vins. O. I. V. AS, 4, 1969.

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Aguardientescompuestos:Ginebra

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METODOS DE ANALISIS

1. OBTENCION DEL DESTILADO

1.1. Principio.Destilación de la muestra en condiciones deter-

minadas.

1.2. Material y aparatos.1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad,

de fondo redondo y boca esmerilada.1.2.2. Alargadera tipo Kjedahl o similar.1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth (20-30 cm de

longitud) o similar.1.2.4. Matraces aforados de 100 y 200 ml de

capacidad.1.2.5. Manta eléctrica o mechero de gas.

1.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS

1.3.1. Agua PA-ACS.

1.4. Procedimiento.1.4.1. Muestras con menos de 60% de etanol.

Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado queantes de enrasar se mantiene en baño de agua a20°C durante media hora. Enrasar con pipeta, lim-piando el interior del cuello del matraz de posiblesgotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarseque queden burbujas de aire adheridas a las pare-des del matraz.

Pasar cuantitativamente el volumen medido almatraz de destilación lavando tres veces consecuti-vas el matraz aforado de 200 ml con 20 ml de AguaPA-ACS cada vez, añadiendo las aguas de lavadoal matraz de destilación. Cuando se trate de bebi-das siruposas, por su gran contenido en azúcar, ellavado debe efectuarse consecutivamente con tresproporciones de 50 ml de Agua PA-ACS.

Proceder a la destilación.Es conveniente añadir bolitas de vidrio para faci-

litar la ebullición suave. En algunos casos, si seteme la formación de espuma, añadir un antiespu-mante inerte (como silicona).

El matraz de recogida del destilado es el mismoen que se efectuó la medida. Se le añaden 10 ml deAgua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado,de forma que el destilado resbale por la pared sinsalpicadura, dentro de un baño de hielo o agua fríaa menos de 10°C. El refrigerante debe ir dotado deuna alargadera que penetre, por lo menos, 4-6 cmen el cuello del matraz.

Cuando se hayan recogido, aproximadamente,190 ml, llevar el matraz tapado al baño de agua a20°C. Cuando se alcance dicha temperatura, den-tro del mismo baño, enrasar con Agua PA-ACSmediante pipeta.

Tapar el matraz e invertirlo varias veces para

homogeneizar su contenido antes de proceder a ladeterminación del etanol.

1.4.2. Muestras con más del 60% de etanol. Elprocedimiento anteriormente descrito difiere única-mente en que la muestra se mide en matraz afora-do de 100 ml, que se lava varias veces con AguaPA-ACS hasta alcanzar un volumen de, aproxima-damente, 230 ml. El destilado se recoge en matrazaforado de 200 ml y se enrasa con Agua PA-ACSdentro del baño de agua a 20°C.

1.5. Observaciones.1.5.1. El sistema de destilación debe compro-

barse en ambos casos como sigue:Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohólica al

10% en volumen cinco veces consecutivas. Deter-minar en la última destilación el título alcoholimétricodel destilado, que no debe ser menor del 9,9% envolumen de etanol.

1.5.2. La destilación debe efectuarse procuran-do que el flujo del destilado sea uniforme.

1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estarácomprendido entre cuarenta y cinco y noventaminutos.

1.6. Referencia.1.6.1. Instituto Español de Normalización. UNE

33-112-75.

2. FURFUROL(Furfuraldehído)

2.1. Principio.El furfurol se combina con la anilina en presencia

del ácido acético para dar un compuesto de colorrojo.

2.2. Reactivos.131008 Acido Acético glacial PA-ACS-ISO141156 Anilina PRS

2.2.1. Acido Acético glacial PA-ACS-ISO.2.2.2. Anilina PRS recientemente destilada. Al

destilar debe pasar, como mínimo, un 95% entre183°C y 185°C.

2.3. Procedimiento.Poner 10 ml de destilación de ginebra (obtenido

según el método oficial número 1) o la ginebradirectamente, si no contiene ni extracto ni color, enun tubo de tapón esmerilado. Añadir 0,5 ml de Ani-lina PRS y 2 ml de Acido Acético glacial PA-ACS-ISO. Agitar.

2.4. Cálculo.Si antes de veinte minutos no aparece ninguna

coloración rosa salmón, la muestra se consideraexenta de furfurol.

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2.5. Referencia.2.5.1. Codex Oenologique International. OIV.

3. EXTRACTO SECO

3.1. Principio.Evaporación de la muestra a 105°C y pesada

posterior del residuo.

3.2. Material y aparatos.3.2.1. Estufa de aire regulable de 95°C a 105°C.3.2.2. Cápsulas de platino o cuarzo de fondo

plano, de 77 mm de diámetro interno y 18 mm dealtura.

3.2.3. Desecador de vidrio que contenga141058 Acido Sulfúrico 95-98% (USP-NF,BP) PRS-CODEX o 211335 Gel de Sílice 3-6 mm con indica-dor QP.

3.2.4. Baño de agua.3.2.5. Balanza analítica.

3.3. Procedimiento.Medir 25 ml de muestra a 20°C. Evaporar a

sequedad, en cápsulas correspondientes previa-mente desecadas y taradas, en baño de agua hir-viente y mantener la estufa a 105°C durante treintaminutos.

Dejar enfriar las cápsulas en el interior del dese-cador y una vez frías pesar en la balanza.

3.4. Cálculo.El valor del extracto total de la muestra, en gra-

mos por litro, se hallará mediante la fórmula si-guiente:

Extracto total (g/l) = (M - m) x 40

Siendo:M = Peso en g de la cápsula con el extracto

seco.m = Peso en g de la cápsula vacía.

3.5. Referencia.3.5.1. Instituto Español de Normalización. UNE

33-106-74.

4. BASES NITROGENADAS

4.1. Principio.Fijación del amoníaco y las bases nitrogenadas

mediante ácido fosfórico, seguida de una primeradestilación. Liberación del amoníaco y las basesnitrogenadas con sodio hidróxido, segunda destila-ción y posterior valoración con ácido clorhídrico delsegundo destilado.

El límite de detección del método es de 1 mg/l.

4.2. Material y aparatos.4.2.1. Matraz de 200 ml de capacidad.4.2.2. Según (1.2.2.), (1.2.3.), (1.2.4.) y (1.2.5.).

4.3. Reactivos.131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO121660 Acido orto-Fosfórico 50% PA131074 Agua PA-ACS121086 Etanol absoluto PA171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS171688 Sodio Hidróxido solución 10% p/v RE

4.3.1. Acido orto-Fosfórico 50% PA.4.3.2. Sodio Hidróxido solución 10% p/v RE.4.3.3. Solución de Acido Clorhídrico 0,01N.

Diluir convenientemente Acido Clorhídrico 35% PA-ISO en Agua PA-ACS.

4.3.4. Solución de Rojo de Metilo (C.I. 13020)RE-ACS, disolver con 50 ml de Etanol absoluto PAal 90% de volumen.

4.4. Procedimiento.En un matraz de 200 ml, introducir 50 ml de

muestra, adicionar 40 ml de Agua PA-ACS y dosgotas de Acido orto-Fosfórico 50% PA; destilar ydesechar los primeros 80 ml.

Enfriar el matraz y al residuo frío adicionar 2 mlde Sodio Hidróxido solución 10% p/v RE (o 20 mlde solución de sodio hidróxido al 1%, si hay pro-yecciones). Destilar de nuevo recogiendo alrededorde 7 ml de destilado en un tubo de ensayo en elque previamente se han introducido 2 ml de AguaPA-ACS y una gota de solución de Rojo de Metilo,procurando que el destilado caiga en el fondo deltubo con la ayuda de una alargadera. Valorar acontinuación con una solución de Acido Clorhídri-co 0,01N hasta que el indicador vire a rojo.

4.5. Cálculo.Nitrógeno (mg de nitrógeno/litro) = 2,8 n.

Siendo:n = volumen, en ml, de solución de ácido clorhí-

drico, 0,01N gastados en la valoración.

4.6. Referencia.4.6.1. Codex Oenologique International. OIV,

1978, pág. 17.

5. ALCOHOLES SUPERIORES

5.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación de los

alcoholes al etanol, por cromatografía de gases.

5.2. Material y aparatos.5.2.1. Cromatógrafo de gases equipado con

detector de ionización de llama.

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5.2.2. Columna cromatográfica. Columna de 4 mde longitud de 1/8” de diámetro interno rellena deCarbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W80-100 mallas, lavado a los ácidos.

5.2.3. Microjeringas de 5 µl.

5.3. Reactivos.5.3.1. Patrones cromatográficos:353851 2-Butanol CG351885 1-Propanol CG354330 iso-Butanol CG131082 1-Butanol PA-ACS-ISO354539 2-Metil-1-Butanol CG351079 3-Metil-1-Butanol CG352516 4-Metil-2-Pentanol CG

5.3.2. Etanol pureza cromatográfica.

5.4. Procedimiento.5.4.1. Condiciones cromatográficas. Las condi-

ciones cromatográficas orientativas son : Gas porta-dor nitrógeno 20 ml/min., temperatura del horno85°C, temperatura del inyector y del detector 150°C.

5.4.2. Calibrado.5.4.2.1. Patrón interno: Solución de 5 g/l en Eta-

nol de 40° de 4-Metil-2-Pentanol.5.4.2.2. Solución patrón: Preparar una solución

en alcohol de 40° en las proporciones que se indi-can en la tabla 1.

5.4.2.3. Solución de calibrado: A 10 ml de lasolución patrón (5.4.2.2.) se le añade 1 ml dela solución patrón interno (5.4.2.1.) y se inyecta 1µlen el cromatógrafo.

5.4.3. Muestra problema. A 10 ml de la muestrallevada a 40° se le añade 1 ml de patrón interno(5.4.2.1.) e inyectar un µl en las mismas condicionesen que se hizo para el calibrado.

5.5. Cálculo.Una vez identificados los picos por sus retencio-

nes relativas al patrón interno se calculan los facto-res de respuesta para cada uno de ellos y las con-centraciones en la muestra problema aplicando lasfórmulas:

ApFactor de respuesta (Fr) = Ci x ––––

Ai

AimConcentración en la muestra (mg/l) = Fr x ––––– x f

Apm

Siendo:Ci = concentración del compuesto en la

solución patrón.Ap = área del patrón interno en la solución

patrón.Ai = área del compuesto en la solución patrón.

Aim = área del compuesto en la muestraproblema.

Apm = área del patrón interno en la muestraproblema.

f = factor de dilución de la muestra.

El contenido en alcoholes superiores vendrádado por la suma de los valores individuales obteni-dos de cada uno de ellos y se expresará enmg/100 ml de alcohol absoluto.

5.6. Referencia.5.6.1. Association of Official Agricultural Che-

mists 1980, 9075.

TABLA 1––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––

Compuesto Concentración (mg/l)––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––

2-Butanol 101-Propanol 1252-Metil-1-Propanol 1751- Butanol 152-Metil-1-Butanol 1003-Metil-1-Butanol 300

––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––

6. METANOL(Alcohol Metílico)

6.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación del meta-nol por cromatografía gaseosa.

6.2. Material y aparatos.Como en 5.2.

6.3. Reactivos6.3.1. Metanol pureza cromatográfica6.3.2. 4-Metil-2-Pentanol (patrón interno)6.3.3. Etanol pureza cromatográfica

6.4. Procedimiento.6.4.1. Condiciones cromatográficas. Como en

5.4.1.6.4.2. Calibrado.6.4.2.1. Patrón interno. Como en 5.4.2.1.6.4.2.2. Solución patrón. Preparar una solución

de Metanol pureza cromatográfica a 40°C, de con-centración similar a la esperada en la muestra.

6.4.2.3. Solución de calibrado. A 10 ml de lasolución patrón (6.4.2.2.) se le añade 1 ml dela solución del patrón interno (6.4.2.1.) y se inyecta1 µl en el cromatógrafo.

6.4.3. Muestra problema. Como en 5.4.3.

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6.5. Cálculo.Como en 5.5.

6.6. Referencia.6.6.1. Association of Official Agricultural Che-

mists 1980, 9075.

7. GRADO ALCOHOLICO

7.1. Principio.Se determina por destilación del producto y

medida de la densidad del destilado por areometría.

7.2. Material y aparatos.7.2.1. Aparatos de destilación como en 1.2.7.2.2. Alcohómetro con graduación de 0,1°C de

d 20/20 debidamente contrastado.7.2.3. Termómetro con graduación de 0,1°C.7.2.4. Probeta transparente de 36 mm de diá-

metro interior y 320 mm de altura.7.2.5. Baño termostático a 20°C.

7.3 Procedimiento.7.3.1. Obtención del destilado. Según método

oficial número 1.7.3.2. Determinación areométrica. Limpiar y

secar el alcohómetro antes de su empleo.Echar el destilado en la probeta, inclinar a unos

45° para evitar la agitación y las burbujas. Tapar laprobeta con la palma de la mano, e invertirla tres ocuatro veces para igualar las temperaturas de laprobeta y del líquido.

Dejar que el alcohómetro, termómetro, probeta ydestilado, alcance en el baño termostatizado latemperatura de 20°C.

Introducir el alcohómetro en el líquido de arriba aabajo cinco o seis veces, de manera que alcance lamisma temperatura y que se distribuya cualquiercambio de temperaturas en todo el líquido. Mante-ner el bulbo del alcohómetro en el líquido, secar elvástago, dejarlo en reposo de modo que sólo unaspocas décimas de grados estén mojadas.Leer en el alcohómetro, luego en el termómetro.Para leer en la escala del alcohómetro situar el ojojusto debajo del plano de la superficie del líquido,levantar lentamente la cabeza manteniendo la visualperpendicular al alcohómetro, hasta que la superfi-cie varíe de elipse a una línea recta.

Anotar el punto en que esta línea interseccionacon la escala del alcohómetro, siendo ésta la lectu-ra del alcohómetro.

Levantarlo ligeramente por encima de dicha lec-tura y dejarlo en reposo de nuevo. Volver a leer en elalcohómetro y en el termómetro, comprobando asílas primeras lecturas. Hacer la lectura del alcohó-metro con aproximación de 0,05° y la del termóme-tro con 0,1°. Sacar el alcohómetro y secarlo. Invertirla probeta con la muestra varias veces (el termóme-tro queda en su sitio), para que se equilibre térmica-

mente todo el conjunto. Volver a atemperar el alco-hómetro, secar el vástago y realizar nuevas lecturasen el alcohómetro y en el termómetro. Los valorescalculados son válidos si tienen aproximación de0,1 grado alcohólico, si no fuera así, realizar lectu-ras adicionales y calcular la media.

7.4. Cálculo.El grado alcohólico real es el leído en el destilado

según 7.3.1.Si en la obtención del destilado, 100 ml de

muestra se destilaron hasta 200 ml, la lectura obte-nida, debe ser multiplicada por 2.

7.5. Referencia.7.5.1. Association of Official Analytical Chemists.

Edición 1980-9015-9

8. SACAROSA

8.1. Principio.La sacarosa se determina por la diferencia de los

poderes reductores antes y después de la hidrólisisclorhídrica del líquido procedente de la defecaciónde la ginebra.

8.2. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO

8.2.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.8.2.2. Sodio Hidróxido 12N. Diluir conveniente-

mente Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO enAgua PA-ACS

8.3. Procedimiento.Poner en dos matraces Erlenmeyer de 200 ml

cada uno, el mismo volumen del líquido defecadosegún el método oficial número 10. Añadir a cadamatraz 0,3 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO por cada 10 ml de líquido defecado.

En uno de los matraces, añadir inmediatamente0,3 ml de Sodio Hidróxido 12N, por cada 10 ml delíquido defecado, procediendo a la valoración de losazúcares reductores, según el método oficial núme-ro 10.

Llevar el otro matraz con el contenido sin neutra-lizar a baño de agua hirviendo durante tres minutos.Añadir entonces el mismo volumen de Sodio Hidró-xido 12N que al otro matraz y valorar como en elcaso anterior.

8.4. Cálculo.La diferencia entre las cantidades de azúcaresreductores encontrada en los resultados de estasdos valoraciones, multiplicadas por 0,95, da lariqueza en sacarosa de la muestra de estudio.

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Este resultado se expresa en g/l de ginebra,teniendo presentes las diluciones efectuadas even-tualmente en el curso de la defecación y del volu-men de la muestra de ginebra que se sometió a ladefecación.

8.5. Referencia.8.5.1. Recueil des Méthodes Internationales d’A-

nalyses des Vins. OIV, A5, 4. 1968.

9. ACIDEZ TOTAL

9.1. Principio.La acidez total de la ginebra se considera como

la suma de los ácidos titulables cuando se lleva laginebra a pH=7 por adición de un licor alcalino valo-rado. El ácido carbónico no se considera compren-dido en la acidez total.

El gas carbónico se elimina previamente de laginebra por agitación en frío y con vacío parcial.

9.2. Material y aparatos.9.2.1. Potenciómetro con electrodo de vidrio.9.2.2. Agitador magnético9.2.3. Kitasato de un litro.

9.3. Reactivos131074 Agua PA-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO

9.3.1. Disolución de Sodio Hidróxido 0,01Nrecientemente preparada.

9.4. Procedimiento.Poner 150 ml de ginebra en un Kitasato de 1 l de

capacidad, conectar al vacío agitando al mismotiempo el matraz. El desprendimiento de CO2 seaprecia a los pocos momentos. Observar atenta-mente el momento en que dejan de desprenderselas burbujas, desconectar del vacío.

Tomar 100 ml de la ginebra sin CO2 y llevar a unvaso de unos 250 ml de capacidad, introducir elelectrodo del vidrio en la ginebra.

Poner en marcha el agitador procurando que nose formen burbujas y añadir desde bureta soluciónde Sodio Hidróxido (9.3.1.) a la ginebra hasta que laaguja del potenciómetro marque pH=7, mantenien-do el agitador en marcha durante la operación, queno debe durar más de cinco minutos.

9.5. Cálculo.Calcular la acidez total expresada en meq/l con unaaproximación de 0,1 meq/l o en mg de ácido acé-tico.Acidez total = 6 v mg ácido acético /lv = volumen en ml de sodio hidróxido 0,01N.

9.6. Referencias.

9.6.1. Recueil des Méthodes Internationales d’A-nalyses des Vins. OIV, A 10, 1 3, 1969.

9.6.2. Jaulmes, P.: “La mesure de l’acidité totaldes Vins”. Annal des Falsifications et des Fraudes,556, 1955.

10. MATERIAS REDUCTORAS(Azúcares reductores)

10.1. Principio.Eliminación previa de todas las materias reduc-

toras distintas de los azúcares por defecación yposterior valoración basada en la acción reducto-ra de los azúcares sobre una solución cupro-alca-lina.

10.2. Material y aparatos.10.2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerante de

reflujo.10.2.2. Material necesario para volumetría.10.2.3. Baño de agua.

10.3. Reactivos.131808 Acido Cítrico anhidro PA-ACS131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121212 Calcio Carbonato precipitado PA131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO211835 Piedra Pómez gránulos QP131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO131542 Potasio Yoduro PA-ISO122032 Sodio Carbonato 1-hidrato PA131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO181691 Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV

10.3.1. Solución de Plomo II Acetato 3-hidrato(aproximadamente saturada). Añadir a 250 g dePlomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO Agua PA-ACS caliente hasta 0,5 l y agitar hasta disolucióncompleta.

10.3.2. Sodio Hidróxido 1 mol/l (1N) SV.10.3.3. Calcio Carbonato precipitado PA.10.3.4. Solución cupro-alcalina. Disolver por

separado: 25 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS; 50 g de Aci-do Cítrico anhidro PA-ACS en 300 ml de Agua PA-ACS y 388 g de Sodio Carbonato 1-hidrato PA en300-400 ml de Agua PA-ACS caliente. Mezclar lasolución de Cobre Sulfato y completar el volumencon Agua PA-ACS hasta 1 l.

10.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30%.Diluir convenientemente Potasio Yoduro PA-ISO enAgua PA-ACS. Conservar el frasco en topacio.

10.3.6. Solución de Acido Sulfúrico 25% envolumen. Diluir convenientemente Acido Sulfúrico96% PA-ISO en Agua PA-ACS.

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10.3.7. Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV.10.3.8. Engrudo de almidón de 5 g/l; contendrá

200 g/l de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO para asegu-rar su conservación. Esta solución debe ser mante-nida diez minutos en ebullición en el momento desu preparación.

10.4. Procedimiento.10.4.1. Defecación plúmbica.Llevar 100 ml de ginebra a un matraz aforado de

125 ml. Añadir agitando 5 ml de solución saturadade Plomo II Acetato 3-anhidro PA-ACS-ISO y 1 g deCalcio Carbonato precipitado PA, agitar variasveces y dejar sedimentar, por lo menos quinceminutos, enrasar con Agua PA-ACS, añadir 0,6 mlmás de agua y filtrar.

10.4.2. Valoración.Poner en el Erlenmeyer de 300 ml 25 ml de la solu-ción cupro-alcalina y 25 ml de ginebra previamentedefecado. Añadir unos gramos de Piedra PómezQP y llevar a ebullición, que debe ser alcanzada endos minutos, adaptando el Erlenmeyer al refrigeran-te de reflujo y mantener exactamente durante diezminutos la ebullición.

Enfriar inmediatamente bajo corriente de aguafría. Añadir 10 ml de la solución de Potasio Yoduroal 30%, 25 ml de la solución de Acido Sulfúrico al25% y 2 ml de Engrudo de Almidón. A continuación

valorar con Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV.Efectuar una prueba en blanco, sustituyendo los

25 ml de muestra, por igual volumen de Agua PA-ACS y tratar como se ha indicado para la muestra.

10.5. Cálculo.La cantidad de azúcar, expresada en azúcaresreductores contenida en la muestra analizada, seobtiene en la tabla adjunta en función del númeron’-n de ml de tiosulfato utilizado.

Siendo:n = volumen, en ml, de solución de sodio tiosul-

fato 0,1 mol/l (0,1N) utilizados en la valora-ción de la muestra.

n’ = volumen, en ml, de solución de sodio tiosul-fato 0,1 mol/l (0,1N) utilizados para la pruebaen blanco.

Expresar el contenido en gramos de azúcaresreductores por litro, teniendo en cuenta las dilucio-nes efectuadas en el curso de la defecación delvolumen de la muestra analizada.

10.6. Referencia.10.6.1. Recueil des Méthodes Internationales

d’Analyses des Vins. OIV, A4e, 106-107 (defeca-ción) y 126-127 (valoración).

162

0 0,0 0,3 0,6 1,0 1,3 1,6 1,9 2,2 2,6 2,91 3,2 3,5 3,8 4,2 4,5 4,8 5,1 5,4 5,7 6,12 6,4 6,7 7,1 7,4 7,7 8,1 8,4 8,7 9,0 9,43 9,7 10,0 10,4 10,7 11,0 11,4 11,7 12,0 12,3 12,74 13,0 13,3 13,7 14,0 14,4 14,7 15,0 15,4 15,7 16,15 16,4 16,7 17,1 17,4 17,8 18,1 18,4 18,8 19,1 19,56 19,8 20,1 20,5 20,8 21,2 21,5 21,8 22,2 22,5 22,97 23,2 23 5 23,9 24,2 24,6 24,9 25,2 25,6 25,9 26,38 26,6 26,9 27,3 27,6 28,0 28,3 28,6 29,0 29,3 29,79 30,0 30,3 30,7 31,0 31,3 31,7 32,0 32,4 32,7 33,0

10 33,4 33,7 34,1 34,4 34,8 35,1 35,4 35,8 36,1 36,511 36,8 37,2 37,5 37,9 38,2 38,6 38,9 39,3 39,6 40,012 40,3 40,7 41,0 41,4 41,7 42,1 42,4 42,8 43,1 43,513 43,8 44,2 44,5 44,9 45,2 45,6 45,9 46,3 46,6 47,014 47,3 47,7 48,0 48,4 48,7 49,1 49,4 49,8 50,1 50,515 50,8 51,2 51,5 51,9 52,2 52,6 52,9 53,3 53,6 54,016 54,3 54,7 55,0 55,4 55,8 56,2 56,5 56,9 57,3 57,617 58,0 58,4 58,8 59,1 59,5 59,9 60,3 60,7 61,0 61,418 61,8 62,2 62,5 62,9 63,3 63,7 64,0 64,4 64,8 65,119 65,5 65,9 66,3 66,7 67,1 67,5 67,8 68,2 68,6 69,020 69,4 69,8 70,2 70,6 71,0 71,4 71,7 72,1 72,5 72,921 73,3 73,7 74,1 74,5 74,9 75,3 75,6 76,0 76,4 76,822 77,2 77,6 78,0 78,4 78,8 79,2 79,6 80,0 80,4 80,823 81,2 81,6 82,0 82,4 82,8 83,2 83,6 84,0 84,4 84,824 85,2 85,6 86,0 86,4 86,8 87,2 87,6 88,0 88,4 88,825 89,2 89,6 90,0 90,4 90,8 91,2 91,6 92,0 92,4 92,8

Primera cifra decimal

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

ml sodiotiosulfato

0,1N

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11. PLOMO

11.1. PrincipioDeterminación del plomo A.A., previa mineraliza-

ción de la muestra.

11.2. Material y aparatos.11.2.1. Espectrofotómetro de A.A.11.2.2. Lámpara de plomo.11.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar.11.2.4. Baño de arena o placa calefactora con

regulación de temperatura o estufa con control detemperatura en el rango de 50 a 150°C.

11.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro devitrina de extracción de humos.

11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1.000 ml decapacidad.

11.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313189 Plomo solución patrón

Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA

11.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.11.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO.11.3.3. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS.11.3.4. Plomo solución patrón Pb = 1,000 ±

0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a 1.000ml con Acido Nítrico al 1%.

11.4 Procedimiento.11.4.1. Preparación de la muestra. Poner 100 ml

de la muestra en la cápsula (11.2.3.) llevarla a eva-poración hasta consistencia siruposa en baño dearena (11.2.4.). Añadir a continuación 2 ml de AcidoSulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en elbaño de arena o placa. Seguidamente introducir lacápsula en la mufla y mantenerla durante dos horasa 450°C, transcurrido dicho tiempo, sacarla y dejar-la enfriar.

Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en elbaño de arena o placa e introducir en la mufla, repi-tiendo esta operación hasta obtener cenizas blan-cas. Un ligero color marrón-rojizo en las cenizas(posiblemente de Fe2O3) es aceptado y no requiereun tratamiento posterior.

Disolver a continuación las cenizas con 1 ml deAcido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-ACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml, lavarla cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas dellavado hasta el enrase, filtrando posteriormente.

11.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluiralícuotas apropiadas de la solución patrón (11.3.4.)con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obtener una curvade concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l.

11.4.3. Determinación. Operar según las especi-ficaciones del aparato, usando llama de aire-acetile-no. Medir las absorbancias de la muestra y patro-nes a 283 nm. Si la solución está muy concentradadiluirla con Acido Nítrico al 1%.

11.5. Cálculo.Calcular el contenido en plomo, expresado en

mg/l mediante comparación con la correspondientecurva patrón y teniendo en cuente el factor de con-centración o dilución.

11.6. Referencia.11.6.1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos.

Ministerio de Agricultura, pág. 134 (I), 1976.

12. ZINC

12.1. Principio.Determinación del zinc por A.A. previa mineraliza-ción de la muestra.

12.2. Material y aparatos.12.2.1. Espectrofotómetro de A.A.12.2.2. Lámpara de zinc.12.2.3. Los utilizados para el Pb en (11.2.3.),

(11.2.4.) (11.2.5.) y (11.2.6.)

12.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313193 Zinc solución patrón

Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA

12.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.),(11.3.2.) y (11.3.3.)

12.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ± 0,002g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782Zinc metal granalla PRS en el mínimo volumennecesario de Acido Nítrico (1:1) y diluir a 1 litro conAcido Nítrico del 1 % (v/v).

12.4. Procedimiento.12.4.1. Preparación de la muestra. Como en

(11.4.1.).12.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluir

partes alícuotas de la solución patrón (12.3.2.), conAcido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5;1; 1,5 y 2 mg/l.

12.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.La lectura se efectuará a 213,8 nm.

12.5 Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancias obteni-

dos, hallar las concentraciones de Zn para la mues-tra, teniendo en cuenta el factor concentración odilución.

163

M

Page 164: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

12.6. Referencia.12.6.1. H. E. Parker. Atomic Absorption News-

letter (1963), 13.

13. COBRE

13.1. Principio.Determinación del cobre por A.A., mineralización

por cenizas a ≤ 450°C y concentración previa a lalectura con objeto de conseguir resultados suficien-temente precisos.

13.2. Material y aparatos.13.2.1. Espectrofotómetro de A.A.13.2.2. Lámpara de cobre.13.2.3. Los utilizados para el plomo, en (11.2.3.),

(11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.).

13.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313178 Cobre solución patrón

Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA

13.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.),(11.3.2.) y (11.3.3.)

13.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g deCobre puro en el mínimo volumen necesario deHNO3 (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1 %(v/v).

13.4. Procedimiento.13.4.1. Preparación de la muestra. Como en

(11.4.1.).13.4.2. Construcción de la curva patrón. Diluir

partes alícuotas de la solución patrón (13.3.2.), conAcido Nítrico del 1% para obtener soluciones quecontengan de 1 a 5 mg de Cobre/l.

13.4.3. Determinación. Igual que para el plomo.Medir a 324,7 nm.

13.5 Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancia obteni-

dos para la muestra, hallar mediante la curva patrónlas concentraciones de cobre de la muestra.

13.6 Referencias.13.6.1. H. E. Parker: “Atomic Absorption News-

letter (1963),13”13.6.2 F. Rousselet: “Spectrophotometrie par

absorption atomique Boudin”. Ed Paris (1968), pág.59-144

14. ARSENICO

14.1. Principio.La muestra se somete a una digestión ácida con

una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.La determinación del arsénico se realiza por

espectrofotometría de absorción atómica, congenerador de hidruros.

14.2. Material y aparatos.14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g de

0,1 g.14.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml de

capacidad.14.2.3. Pipetas de doble aforo.14.2.4. Matraces Kjeldahl de 250 ml.14.2.5. Espectrofotómetro de absorción atómica

equipado con sistema generador de hidruros.14.2.6. Lámpara de descarga sin electrodos.14.2.7. Fuente de alimentación para lámpara de

descarga sin electrodos.14.2.8. Registrador gráfico.

14.3. Reactivos.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal

Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313171 Arsénico solución patrón

As = 1,000 ± 0,002 g/l AA131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO123314 Sodio Borohidruro PA131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO

14.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO. 14.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico. Disolver

32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO conAgua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.

14.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico. Disolver15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO conAgua PA-ACS hasta un volumen de 1.000 ml.

14.3.4. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO14.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO.14.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%.

Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISOy disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.

14.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disolverlohasta 100 ml con Sodio Hidróxido al 1%.

14.3.8. Disolución al 1 % de Acido Etilendiami-notetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO.Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetra-acético PA-ACS-ISO y disolverlo hasta 100 ml con Agua PA-ACS.

14.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%.Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-

164

Page 165: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volu-men de 100 ml.

14.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%(v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO(14.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.

14.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1%(v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO conAgua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml.

14.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 ±0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arséni-co III Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxi-do al 20% (14.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúricoal 20% (14.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sul-fúrico 1% (14.3.11.).

14.3.13. Solución patrón de Arsénico de con-centración 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la soluciónpatrón de Arsénico (14.3.12.), en un matraz aforadode 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.

14.3.14. Solución patrón de Arsénico de con-centración 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la solución deArsénico (14.3.13.), en un matraz aforado de100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS.

14.4. Procedimiento.14.4.1. Preparación de la muestra. En un matraz

Kjeldahl, de 250 ml introducir 10 ml de muestra con20 ml de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 5 ml deAcido Sulfúrico 96% PA-ISO.

Llevar a ebullición hasta reducir el volumen a 5 ml.Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en un

matraz de 50 ml la solución resultante.14.4.2. Preparación del blanco y patrones de

trabajo. En un matraz Kjeldahl, introducir 5 ml de lasolución de Arsénico (14.3.14.) y someterlo al mis-mo tratamiento que la muestra.

1 ml de la solución contiene 10 nanogramos deArsénico.

Preparar un blanco con todos los reactivos utili-zados siguiendo el tratamiento dado a la muestra.

14.4.3. Condiciones del espectrofotómetro.Encender la fuente de alimentación de las lámparasde descarga sin electrodos con el tiempo suficientepara que se estabilice la energía de la lámpara.

Encender el espectrofotómetro, ajustar la longi-tud de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla deacuerdo con las condiciones del aparato.

Encender el generador de hidruros, colocando latemperatura de la celda a 900°C, esperando hastaque se alcance dicha temperatura.

Se ajustan las condiciones del generador dehidruros según las especificaciones del aparato.

Ajustar el flujo de Argón de acuerdo con lascaracterísticas del aparato.

Encender el registrador.14.4.4. Determinación.- Las determinaciones de

la concentración de Arsénico se realizan por elmétodo de adición de patrones, por medio demedidas duplicadas en el espectrofotómetro en las

condiciones especificadas en (14.4.3.), añadiendoal matraz de reacción 3 ml de la solución (14.4.1.),más 3 ml de la solución (14.3.2.), y 10 ml de la solu-ción (14.3.8.). Como patrones internos se usan 10,20 y 50 ng de Arsénico.

Lavar los matraces antes y después de cadauso, con Acido Clorhídrico (14.3.3.).

Al construir la gráfica de adición hay que des-contar el valor de absorbancia del blanco obtenidoen las mismas condiciones anteriores, pero aña-diendo 3 ml de la solución blanco.

En estas condiciones el límite de detección de latécnica es de 5 ng.

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M

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Aguardientescompuestos:Anís

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1. OBTENCION DEL DESTILADO

1.1. Principio.Destilación de la muestra en condiciones deter-

minadas.

1.2. Material y aparatos.1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad

de fondo redondo y boca esmerilada.1.2.2. Alargadera tipo Kjeldahl o similar.1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth (20-30 cm de

longitud) o similar.1.2.4. Matraces aforados de 100 y 200 ml de

capacidad.1.2.5. Manta eléctrica o mechero de gas.

1.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS

1.3.1. Agua PA-ACS

1.4. Procedimiento.1.4.1. Muestras con menos del 60% de Etanol.

Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado queantes de enrasar se mantiene en baño de agua a20°C durante media hora. Enrasar con pipeta, lim-piando el interior del cuello del matraz de posiblesgotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarseque queden burbujas de aire adheridas a las pare-des del matraz.

Pasar cuantitativamente el volumen medido almatraz de destilación, lavando tres veces consecu-tivas el matraz aforado de 200 ml con 20 ml deAgua PA-ACS cada vez, añadiendo las aguas dellavado al matraz de destilación. Cuando se trate debebidas siruposas, por su gran contenido en azú-car, el lavado debe efectuarse consecutivamentecon tres porciones de 50 ml de Agua PA-ACS.

Proceder a la destilación.Es conveniente añadir bolitas de vidrio para faci-

litar la ebullición suave. En algunos casos, si seteme la formación de espuma, añadir un antiespu-mante inerte (como silicona).

El matraz de recogida del destilado es el mismoen que se efectuó la medida. Se le añaden 10 ml deAgua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado,de forma que el destilado resbale sin salpicadurapor la pared del matraz, que debe estar dentro deun baño de hielo o agua fría, a menos de 1°C.

El refrigerante debe ir dotado de una alargaderaque penetra por lo menos 4-5 cm en el cuello delmatraz.

Cuando se hayan recogido aproximadamente190 ml, llevar el matraz tapado al baño de agua a20°C.

Cuando se alcance dicha temperatura, dentrodel mismo baño, enrasar con Agua PA-ACSmediante pipeta.

Tapar el matraz e invertirlo varias veces para

homogeneizar su contenido antes de proceder a ladeterminación del etanol.

1.4.2. Muestras con más del 60% del Etanol. El procedimiento anteriormente descrito difiere úni-camente en que la muestra se mide en matraz afo-rado de 100 ml, que se lava varias veces con AguaPA-ACS hasta alcanzar un volumen de aproximada-mente 230 ml. El destilado se recoge en matrazaforado de 200 ml, y se enrasa con Agua PA-ACSdentro del baño de agua a 20°C.

1.5. Observaciones.1.5.1. El sistema de destilación debe compro-

barse en ambos caso como sigue: Destilar 200 mlde una mezcla hidroalcohólica al 10 por 100 envolumen cinco veces sucesivas. Determinar en laúltima destilación el título alcohométrico del destila-do, que no debe ser menor del 9,9% en volumen deetanol.

1.5.2. La destilación debe efectuarse procuran-do que el flujo del destilado sea uniforme.

1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estarácomprendido entre 45 y 90 minutos.

1.5.4. El destilado podrá tener aspecto lechosocomo consecuencia de la emulsión de los aceitesesenciales.

1.6. Referencias.1. Métodos Oficiales de análisis del ron, ginebra ywhisky.

2. PESO ESPECIFICO DEL ACEITEESENCIAL NATURAL(En materia prima)

2.1. Principio.Se basa en la determinación de la densidad rela-

tiva del aceite esencial respecto al agua a la mismatemperatura.

Se determinará esta densidad relativa a 25°Cpara evitar la posible solidificación de la muestra.

2.2. Material y aparatos.2.2.1. Baño de agua termostatizado a 25 ± 0,1°C.2.2.2. Picnómetro de 50 ml, según figura adjunta

(fig. 2.1.).2.2.3. Termómetro de 10°C- 30°C, graduado en

décimas de grado.2.2.4. Tubo capilar.2.2.5. Balanza analítica.

2.3. Procedimiento.2.3.1. Llenar completamente el picnómetro con

agua recientemente destilada, tapar y colocar en2.2.1., de forma que el nivel del agua del baño estéligeramente por encima del nivel de enrase del pic-nómetro.

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M

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2.3.2. Después de treinta minutos quitar el tapóny con 2.2.4. ajustar el nivel del agua hasta que laparte inferior del menisco sea tangente con la señalde enrase del picnómetro.

2.3.3. Sacar el picnómetro del baño. Con unpequeño rollo del papel de filtro secar el interior delcuello del picnómetro y el tapón. Introducirlo enbaño a temperatura ambiente durante quince minu-tos para acelerar la atemperación del líquido. Pasa-do este tiempo sacar el picnómetro del baño,secarlo cuidadosamente, dejarlo otros quince minu-tos a temperatura ambiente y pesar.

2.3.4. Vaciar el picnómetro, enjuagar con aceto-na y secar completamente con corriente de aire.Dejar quince minutos a temperatura ambiente,tapar y pesar.

Según lo descrito:

Pa = Peso aparente del agua = Peso del picnó-metro lleno - Peso del picnómetro vacío.

2.3.5. Del mismo modo que con el agua, se pro-cede con el líquido problema, siendo:

Pw = Peso del picnómetro lleno - Peso del pic-nómetro vacío.

2.4. Cálculos:

PaPeso específico : P 25/25 = –––––

Pw

2.5. Observaciones.Para evitar la solidificación de la muestra, es

conveniente que la temperatura de la habitaciónesté próxima a los 25° C.

2.6. Referencias.1. Official Methods of Analysis of the AOAC, 13ª

edición, 1984 : 9.020-9.022.

3. PUNTO DE FUSION DEL ACEITEESENCIAL NATURAL(En materia prima)

3.1. Principio.Observación, con un sistema adecuado, de la

temperatura a la que se produce la fusión del aceiteesencial, previamente congelado. Como el aceiteesencial no es un compuesto puro, no tendrá puntode fusión fijo, sino que fundirá en un rango determi-nado desde que se observan los primeros síntomasen los cristales hasta que la muestra se vuelve com-pletamente líquida.

3.2. Material y aparatos.3.2.1. Agitador.3.2.2. Termómetro de 10°C- 30°C, graduado en

décimas de grado.3.2.3. Tubos capilares de vidrio.3.2.4. Lupa o lente de aumento.3.2.5. Vaso de precipitado de 1.000 ml, forma baja.

3.3. Procedimiento.Se dispone de un sencillo sistema de medida

consistente en un agitador magnético con placa decalefacción variable, un vaso de precipitado de600 ml, un termómetro y una lupa.

Preparar un tubo capilar cerrado en su extremo,donde se hace llegar una gota del aceite esencialcon la ayuda de otro tubo capilar más fino.

Introducir la punta del tubo capilar en un baño dehielo, durante dos horas, para que se congele.

Llevar el vaso aproximadamente a la mitad conagua destilada e introducir la punta del capilar y eltermómetro de forma que queden al menos 30 milí-metros por debajo de la superficie.

Empezando 8-10°C por debajo del punto defusión de la muestra, calentar suavemente paraincrementar la temperatura del baño 0,5°C/minuto,aproximadamente, agitando simultáneamente elagua del baño con ayuda del agitador.

Anotar la temperatura a la que se produce lafusión completa de la muestra, que se observarácon la ayuda de una lupa o lente de aumento.

168

Figura 2.l

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3.4. Resultado.El punto de fusión del aceite esencial será la

media aritmética de tres determinaciones sucesivasque deberán coincidir en un rango de 0,5°C.

3.5. Referencias.1. Official Methods of Analysis of the AOAC, 14ª

edición, 1984: 28.014.

4. GRADO ALCOHOLICO

4.1. Principio.Destilación del producto y posterior medida de la

densidad del destilado por areometría.

4.2. Material y aparatos.4.2.1. Aparato de destilación como en el Método

Oficial número 1.4.2.2. Alcohómetro graduado en décimas de

grado de d 20/20, debidamente contrastado.4.2.3. Termómetro graduado en décimas de gra-

do centígrado.4.2.4. Probeta transparente de 36 mm de diá-

metro interior y 320 mm de altura.4.2.5. Baño termostático a 20°C.

4.3. Procedimiento.4.3.1. Obtención del destilado: Según Método

Oficial número 1.4.3.2. Determinación areométrica:Limpiar y secar el alcohómetro antes de su

empleo.Verter el destilado debidamente homogeneizado

en la probeta.Introducir el alcohómetro y el termómetro en el

líquido.Esperar veinte minutos para que el termómetro,

el alcohómetro y el destilado adquieran la tempera-tura del baño termostático.

Alcanzada esta temperatura, sacar el termóme-tro, secar el vástago del alcohómetro y dejarlo intro-ducir en el destilado con un ligero movimiento derotación.

Anotar el grado alcohólico leído.Repetir estas operaciones varias veces. Las lec-

turas obtenidas son válidas si tienen aproximaciónde 0,1 grados alcohólicos. Si no fuera así, realizarlecturas adicionales y calcular la media.

4.4. Cálculos.El grado alcohólico es la lectura obtenida en

4.3.2., expresada en grados y décimas de grado dealcohol.

Si en la obtención del destilado 100 ml de mues-tra se destilaron a 200 ml, la lectura hay que multi-plicarla por dos.

Nota: No quedando claro el párrafo anterior,interpretamos:

En el caso de muestras de más de 60% dealcohol, sólo se toman 100 ml que se diluyen a200 ml por lo cual, hay que multiplicar la lectura pordos.

4.5. Referencias.1. Official Methods of Analysis of the AOAC, 14ª

edición, 1984 : 9.023-9.024.

5. AZUCARES TOTALES

5.1. Principio.Dilución previa de la muestra, inversión y poste-

rior valoración basada en la acción reductora de losazúcares sobre una solución cuproalcalina.

5.2. Material y aparatos.5.2.1. Erlenmeyer de 250 ml con boca esmeri-

lada.5.2.2. Refrigerante de reflujo de 30 cm de longi-

tud útil.5.2.3. Material necesario para volumetría.5.2.4. Baño de agua con termostato.

5.3. Reactivos.131018 Acido Cítrico 1-hidrato PA-ACS-ISO131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS141270 Cobre II Sulfato 5-hidrato

(USP, BP) PRS-CODEX171327 Fenolftaleína solución 1% RE131542 Potasio Yoduro PA-ISO121647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO181693 Sodio Hidróxido 0,1mol/l (0,1N) SV181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV

5.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO.5.3.2. Solución de Sodio Hidróxido 12N, prepa-

rada a partir de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO y Agua PA-ACS.

5.3.3. Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV.5.3.4. Solución cuproalcalina:Disolver por separado 25 g de Cobre II Sulfato 5-

hidrato (USP,BP) PRS-CODEX (SO4Cu.5H2O) en100 ml de Agua PA-ACS, 50 g de Acido Cítrico1-hidrato PA-ACS-ISO en 300 ml de Agua PA-ACSy 388 g de Sodio Carbonato 10-hidrato PA en300-400 ml de agua caliente. Mezclar cuidadosa-mente las soluciones de Acido Cítrico y Sodio Car-bonato. Añadir enseguida la solución de Cobre Sul-fato y llevar a un litro.

5.3.5. Solución de Potasio Yoduro al 30% (p/v),preparada a partir de Potasio Yoduro PA-ISO yAgua PA-ACS.

169

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Page 170: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

Conservar en frasco topacio. Es aconsejable nopreparar más de lo que se vaya a consumir diaria-mente.

5.3.6. Solución de Acido Sulfúrico al 25% envolumen, preparada a partir de Acido Sulfúrico 96%PA-ISO.

5.3.7. Engrudo de almidón de 5 g/l. Para prepa-rar esta solución mantenerla en ebullición durantediez minutos. Añadir 200 g de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO por litro para asegurar su conservación.

5.3.8. Solución de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l(0,1N) SV.

5.4. Procedimiento.Pipetear 10 ml de anís ( o el volumen adecuado enfunción del contenido en azúcares) en un matraz de500 ml, enrasándose con Agua PA-ACS (soluciónA).En un matraz de 200 ml se pipetean 25 ml de lasolución A, enrasándose con Agua PA-ACS.

Se realiza la inversión de la forma siguiente:En un matraz de 50 ml pipetear 20 ml de solu-

ción B.Se añaden 3 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-

ACS-ISO, llevándose durante cinco minutos a unbaño a 75°C.

Se saca y se deja enfriar.Se añade Fenolftaleína solución 1% RE y se neu-

traliza con solución de Sodio Hidróxido 12N hastacerca del punto de viraje y posteriormente con solu-ción de Sodio Hidróxido 0,1 mol/l (0,1N) SV hastaviraje. Se enrasa con Agua PA-ACS y se procedeal análisis de los azúcares reductores totales(solución M).

En un Erlenmeyer se ponen 25 ml de la solu-ción cuproalcalina y 25 ml de la solución M, sesomete a ebullición con refrigerante de reflujomanteniendo la ebullición diez minutos; se enfríarápidamente, se añaden 2 ml de almidón, 10 mlde solución de Potasio Yoduro y 25 ml de AcidoSulfúrico al 25%, valorándose inmediatamentecon solución de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N)SV. Se repite la valoración con un blanco, sustitu-yendo los 25 ml de solución M por 25 ml de AguaPA-ACS.

5.5. Cálculos.Sea D la diferencia entre lo gastado por el

blanco y lo gastado por la muestra.La concentración de azúcares totales en la

muestra se obtiene a partir del valor D en la tabla,interpolando en cada caso necesario y multipli-cando el valor obtenido por 40 (factor de dilu-ción).

Concentración azúcares totales gramos/litros = Valor obtenido en tabla x 40.

5.6. Observaciones.5.6.1. En el caso de haber tomado un volumen

distinto de anís, tener en cuenta para los cálculosel factor de dilución.

5.7. Referencias1. Recueil des méthodes internationales d'analy-

se des vins OIV A4-126-127.

––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––D = ml

Mg Diferenciade tiosulfato––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––

1 2,4 2,42 4,8 2,43 7,2 2,54 9,7 2,55 12,2 2,56 14,7 2,67 17,2 2,68 19,8 2,69 22,4 2,6

10 25,0 2,611 27,6 2,712 30,3 2,713 33,0 2,714 35,7 2,715 38,5 2,816 41,3 2,917 44,2 2,918 47,1 2,919 50,0 3,020 53,0 3,021 56,0 3,022 59,1 3,123 62,2 ––

––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––

6. ANETOL

6.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación del

anetol por cromatografía de gases.

6.2 Material y aparatos.6.2.1. Cromatógrafo de gases equipado con

detector de ionización de llama.6.2.2. Columna de acero inoxidable de 3 m de

longitud de 1/8 pulgadas de diámetro interno,rellena de SE 52 al 4% sobre Chromosob. AW.DMCS, de 100-120 mallas.

6.2.3. Microjeringa de 1 µl.

6.3. Reactivos.131074 Agua PA-ACS121086 Etanol absoluto PA142961 L(-)-Mentol (USP, BP, F. Eur.)

PRS-CODEXTrans-anetol

170

Page 171: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

6.3.1. Trans-anetol patrón con un contenido encis-anetol menor de 0,5%.

6.3.2. L(-)-Mentol (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX6.3.3. Etanol absoluto PA.

6.4. Procedimiento.6.4.1. Curva de calibrado.6.4.1.1. Patrón interno.Pesar 0,25 g de L(-)-Mentol (USP, BP, F. Eur.)

PRS-CODEX y llevar a un matraz aforado de100 ml, disolver en 40 ml de Etanol absoluto PA yenrasar con Agua PA-ACS.

6.4.1.2. Solución patrón.Pesar 1 g de anetol y disolver en 400 ml de Eta-

nol absoluto PA, enrasar a 1 litro con Agua PA-ACS.Ese patrón debe estar en el momento de su utiliza-ción recientemente preparado.

6.4.1.3. Solución de calibrado. A partir de la solu-ción 6.4.1.2. preparar soluciones que contengan0,1; 0,25; 0,50; 0,75 y 1 g/l en alcohol de 40°C.

A 100 ml de estas soluciones se le añade 5 mlde la solución 6.4.1.1.

Estas soluciones se inyectan en el cromatógrafoobteniendo la curva de calibrado, representándose:

Area del Patrón––––––––––––––––––––– frente a concentraciones.Area del patrón interno

6.4.2. Condiciones cromatográficas aproxi-madas.Temperatura del horno: 130°C.Temperatura del inyector: 220°C.Temperatura del detector: 220°C.

6.4.3. Preparación de la muestra:Tomar 100 ml del destilado, según método 1.

Añadir 5 ml de patrón interno e inyectar en el cro-matógrafo.

6.5. Cálculos.

Aim 6.5.1. Calcular la relación –––– y llevar a la curva

Apmde calibrado, obteniéndose el valor de la concentra-ción de anetol en la muestra problema.

6.5.2. También se puede emplear un patrón deconcentración fija de anetol, calculándose el factorde respuesta y la concentración de la muestra apli-cando las fórmulas siguientes:

ApFr = Ci ––––

Ai

AimConcentración de la muestra g/l = Fr x –––– x f

Apm

Siendo :Ci = Concentración del anetol en la solución

patrón, que será similar a la esperada enla muestra problema.

Ap = Area del patrón interno en la solución patrón.

Ai = Area del anetol en la solución patrón.Aim = Area del anetol en la muestra problema.Apm = Area del patrón interno en la muestra

problema.F = Factor de dilución de la muestra.

Se debe realizar el cálculo de la concentraciónen anetol de la muestra con un patrón de riquezaaproximada a la esperada. En caso de no conocer-se ésta, se debe efectuar una inyección previa parafijar el nivel de anetol refiriéndola al patrón de 1g/l yuna vez evaluado se inyectará un patrón, si fuesenecesario, de concentración próxima a la de lamuestra, obteniendo el resultado final por referenciaa este segundo patrón.

6.6. Referencias.1. José Ramón García Hierro y Gertrudis Marín

Esteban. Informe del Laboratorio Arbitral de la Sub-dirección General de Laboratorios Agrarios.

7. METANOL

7.1. Principio.Separación, identificación y cuantificación del

metanol por cromatografía gaseosa.

7.2. Material y aparatos.7.2.1. Cromatógrafo de gases equipado con

detector de ionización de llama.7.2.2. Columna cromatográfica.Columna de 4 m de longitud, de 1/8 pulgadas

de diámetro interno, rellena de Carbowax 1500, al15% sobre Chromosorb W, 80-100 mallas, lavada alos ácidos.

7.2.3. Microjeringas de 1 µl.

7.3. Reactivos.7.3.1. Metanol pureza cromatográfica 7.3.2. 352516 4-Metil-2-Pentanol CG 7.3.3. Etanol pureza cromatográfica

7.4. Procedimiento.7.4.1. Obtención del destilado como en el méto-

do oficial número 1. 7.4.2. Condiciones cromatográficas:Las condiciones cromatográficas orientativas

son: Gas portador; nitrógeno, 20 ml/min, tempera-tura del horno, 85°C; temperatura del inyector y deldetector, 150°C.

171

M

Page 172: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

7.4.3. Calibrado:7.4.3.1. Patrón interno: Solución de 5 g/l de

4-Metil-2-Pentanol CG en etanol de 40°C. 7.4.3.2. Solución Patrón: preparar una solución

de metanol en etanol de 40°, de concentraciónsimilar a la esperada en la muestra. A 10 ml de estasolución añadir 1 ml de la solución de patrón interno7.4.3.1. e inyectar 1 µl en el cromatógrafo.

7.4.4. Muestra problema: A 10 ml del destiladode anís llevado a 40°, se le añade 1 ml de patróninterno 7.4.4.1. e inyectar 1 µl en las mismas condi-ciones en que se hizo para el calibrado.

7.5. Cálculos.Calcular el factor de respuesta y la concentra-

ción de metanol aplicando las siguientes fórmulas:

ApFactor de respuesta (Fr) = Ci ––––

Ai

AimConcentración de la muestra (mg/l) = Fr ––––– f ,

Apmsiendo:Ci = Concentración del metanol en la solución

patrón.Ap = Area del patrón interno en la solución

patrón.Ai = Area del metanol en la solución patrón.Aim = Area del metanol en la muestra problema.Apm = Area del patrón interno en la muestra

problema.f = Factor de dilución de la muestra.

7.6. Referencias.1. "Official Methods of Analysis of the A.O.A.C"

14ª edición, 1984 : 5.008-5.011.

8. BASES NITROGENADAS

8.1. Principio.Fijación de las bases nitrogenadas y del amonía-

co mediante el ácido fosfórico en el destilado de lamuestra.

Liberación de éstos mediante solución de sodiohidróxido y valoración con ácido clorhídrico.

El límite de detección de este método es de1 mg/l.

8.2. Material y aparatos.8.2.1. Destilador simple con dispositivos para

adición (figura 8.1.).8.2.2. Probeta de 100 ml de capacidad.8.2.3. Tubos de ensayo de boca esmerilada de

30 ml de capacidad.8.2.4. Bureta de 25 ml de capacidad.8.2.5. Pipetas de 50 ml de capacidad.8.2.6. Matraz de 50 ml.

8.3. Reactivos.182107 Acido Clorhídrico 0,05 mol/l (0,05N) SV121660 Acido orto-Fosfórico 50% PA131074 Agua PA-ACS121085 Etanol 96% v/v PA171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO

172

Figura 8.lDestilador simple con dispositivo para adición

Page 173: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

8.3.1. Acido orto-Fosfórico 50% PA (d= 1,34g/ml).

8.3.2. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%, pre-parada a partir de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO y Agua PA-ACS.

8.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico 0,01N,preparada a partir de Acido Clorhídrico 0,05 mol/l(0,05N) SV y Agua PA-ACS.8.3.4. Disolución de Rojo de Metilo: Pesar 0,1 g deRojo de Metilo RE-ACS y disolver en 50 ml de Eta-nol 90% v/v, preparado por dilución previa de Eta-nol 96% v/v PA.

8.3.5. Agua Destilada PA (pH 6,5-7,5).

8.4. Procedimiento.Obtener el destilado de 100 ml de muestra, ope-

rando según método de análisis número 1.En un matraz de fondo redondo de 250 ml intro-

ducir 60 ml del destilado, 40 ml de Agua PA-ACS y2 gotas de Acido orto-Fosfórico 50% PA; destilar,recogiendo los primeros 80 ml del destilado en8.2.2. y desecharlos.

Enfriar el matraz y al residuo frío añadir 20 ml dedisolución de Sodio Hidróxido al 1%. Destilar denuevo, recogiendo alrededor de 10 ml de destiladoen un tubo de ensayo, en el que previamente sehan introducido 2 ml de Agua PA-ACS y una gotade disolución de Rojo de Metilo, procurándose queel destilado caiga en el fondo del tubo con la ayudade una alargadera.

Valorar a continuación con disolución de AcidoClorhídrico 0,01N hasta viraje del indicador.

Efectuar el mismo procedimiento sobre un blan-co de etanol al 40%.

8.5. Cálculos.Concentración de bases nitrogenadas expresa-

das como hidróxido de amonio (mg/l) = 2,8 (v - v').Siendo:

v = Volumen, en mililitros, de disolución de Aci-do Clorhídrico 0,01N gastados en la valora-ción.

v' = Volumen, en mililitros, de disolución de Aci-do Clorhídrico 0,01 N gastados en el blanco.

8.6. Referencias.1. "Codex Oenologique International, O.I.V.",

1978, página 17

9. ACEITES ESENCIALES

9.1. Principio.Extracción de los aceites esenciales y cuantifica-

ción.

9.2. Material y aparatos.9.2.1. Embudos de decantación de 500 ml.9.2.2. Desecador con dispositivos para hacer

vacío o rotavapor.

9.2.3. Matraces de 100 ml de forma corazóncon boca adecuada para adaptar al rotavapor.

9.3. Reactivos131074 Agua PA-ACS

Anetol Patrón132770 Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm

de BHT PA-ACS-ISO122006 n-Pentano PA131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO121716 Sodio Sulfato anhidro PA

9.3.1. n-Pentano PA.9.3.2. Sodio Cloruro PA-ACS-ISO.9.3.3. Eter Dietílico estabilizado con ~6 ppm de

BHT PA-ACS-ISO.9.3.4. Anetol Patrón.

9.4. Procedimiento.Tomar 40 ml de anís e introducir en un embudo

de decantación añadiendo 160 ml de Agua PA-ACS, 40 g de ClNa y 60 ml de n-Pentano PA. Agitary dejar decantar durante unos diez minutos.

Una vez separadas las fases, tomar la corres-pondiente al Pentano. Añadir Sodio Sulfato anhidroPA. Filtrar. Llevar al rotavapor para evaporar el Pen-tano, sin que la temperatura del baño alcance los30° C.

Disolver el residuo obtenido en 5 ml de EterDietílico estabilizado con ~6 ppm de BHT PA-ACS-ISO e inyectar en el cromatógrafo en las mis-mas condiciones del método número 6. Normali-zar esta inyección obteniendo el porcentaje deAnetol.

9.5 Cálculos.El contenido en aceites esenciales totales expre-

sado en gramos por litro vendrá dado por lasiguiente fórmula:

100Aceites esenciales (g/l) = A –––––

B

Siendo :A = Contenido de anetol, expresado en g/l,

obtenido en el método 6.B = Contenido en porcentaje de anetol obtenido

en la normalización.

9.6. Referencias.1. "Dosaje des huilles essentielles totales dans

les liqueurs anissés". A. Maurel. Annales des Falsifi-cations et L'Expertise Chimique et Toxicologuique,1941

2. Informe interno del Grupo de Trabajo deMétodos Oficiales de análisis del Ministerio de Agri-cultura, Pesca y Alimentación.

173

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Page 174: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

10. HIDROXIMETILFURFURAL YFURFURAL

10.1. Principio.Separación y cuantificación por cromatografía

líquido-líquido de hidroximetilfurfural y furfural.

10.2. Material y aparatos.10.2.1. Cromatógrafo líquido-líquido con detec-

tor U.V.10.2.2. Columna Sherisorb ODS 5 µ de 20 x

0,46 cm o columna similar de fase reserva.10.2.3. Microjeringa de 25 o 50 µl o cualquier

sistema de inyección adecuado según loop e in-yector.

10.2.4. Equipo de filtración de disolventes paracromatografía líquido-líquido con filtro de 0,45 µm osimilar.

10.2.5. Equipo de filtración de muestras con fil-tros de 0,5 µm o similar.

10.3. Reactivos.261091 Metanol HPLC141334 Furfuraldehído PRS

Hidroximetilfurfural131509 Potasio di-Hidrógeno Fosfato

PA-ACS-ISO122333 di-Potasio Hidrógeno Fosfato 3-hidrato

PA

10.3.1. Metanol HPLC.10.3.2. Solución tampón de Potasio di-Hidróge-

no Fosfato PA-ACS-ISO y di-Potasio HidrógenoFosfato 3-hidrato PA. Disolver 1,25 g de KH2PO4 y1,25 g de K2HPO4 en agua hasta un litro.

10.3.3. Hidroximetilfurfural patrón y Furfuraldehi-do recientemente destilado.

10.4. Procedimiento.10.4.1. Condiciones cromatográficas orientati-

vas:Fase móvil. Solución de metanol al 10% (v/v) en

disolución tampón (10.3.2.).Flujo: 0,8 ml/mn.Longitud de onda. 285 nm. Tiempo de retención aproximado: Siete minutos

para Hidroximetilfurfural y diez minutos para el Fur-fural.

10.4.2. Soluciones patrón:Prepara soluciones de Hidroximetilfurfural y Fur-

fural en Metanol de concentraciones aproximadas a5 mg/l.

10.4.3. Diluir 5 ml de la muestra en Metanol a25 ml.

Filtrar e inyectar directamente.

10.5. Cálculos.Calcular la concentración de Hidroximetilfurfural

y Furfural expresada en mg/l, mediante las siguien-tes fórmulas.

AmHidroximetilfurfural o Furfural (mg/l) = ––––– x C

ApSiendo:Am = Area de la muestra. Ap = Area del patrón externo.C = Concentración en mg/l del patrón.

10.6. Observaciones.10.6.1. Observación. - La preparación del patrón

de Hidroximetilfurfural debe efectuarse cada día.Para evitar esta preparación se puede utilizar el mis-mo patrón, pero controlando su riqueza actual,midiendo la absorbancia en U.V. a 284 nm, em-pleando la siguiente fórmula:

Ac = –––– x 100

E x l

Siendo:c = Concentración en moles/l de Hidroximetil-

furfural.E = Coeficiente de absorción Molar, 1,82 x 104.l = Longitud de paso de la cubeta en cm.A = Absorbancia del patrón a 284 nm.

11. ARSENICO

11.1. Principio.La muestra se somete a una digestión ácida con

una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico.La determinación del arsénico se realiza por

espectrofotometría de absorción atómica, congenerador de hidruros.

11.2. Material y aparatos.11.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g y de

0,1 g11.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml de

capacidad.11.2.3. Pipetas de doble aforo.11.2.4. Matraces "Kjeldahl" de 250 ml.11.2.5. Espectrofotómetro de absorción atómica

equipado con sistema generador de hidruros.11.2.6. Lámpara de descarga sin electrodos.11.2.7. Fuente de descarga sin electrodos.11.2.8. Registrador gráfico.

11.3. Reactivos.Se utilizan solamente reactivos de grado de

pureza para análisis y Agua Destilada.131020 Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO131669 Acido Etilendiaminotetraacético Sal

Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO

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Page 175: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

131036 Acido Nítrico 60% PA-ISO131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313171 Arsénico solución patrón

As = 1,000 ± 0,002 g/l AA131515 Potasio Hidróxido 85% lentejas PA-ISO123314 Sodio Borohidruro PA131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO

11.3.1. Acido Clorhídrico 37% PA-ACS-ISO(d=1,19 g/ml).

11.3.2. Disolución de Acido Clorhídrico.Disolver 32 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-

ACS-ISO (d=1,19 g/ml), con Agua PA-ACS hastaun volumen de 1.000 ml.

11.3.3. Disolución de Acido Clorhídrico. Disolver 15 ml de Acido Clorhídrico 37% PA-

ACS-ISO (d=1,19 g/ml), con Agua PA-ACS hastaun volumen de 1.000 ml.

11.3.4. Acido Nítrico 60% PA-ISO (d=1,40 g/ml).11.3.5. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (d=1,84

g/ml).11.3.6. Disolución de Sodio Hidróxido al 1%.Pesar 1 g de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-

ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volu-men de 100 ml.

11.3.7. Disolución de Sodio Borohidruro al 3%.Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disol-

verlo hasta 100 ml con Sodio Hidróxido al 1%, pre-parada a partir de Sodio Hidróxido lentejas PA-ACS-ISO y Agua PA-ACS.

11.3.8. Disolución al 1 % de Acido Etilendiami-no-tetraacético Sal Disódica 2-hidrato PA-ACS-ISO(EDTANa2). Pesar 1 g de EDTANa2 y disolverlo has-ta 100 ml con Agua PA-ACS.

11.3.9. Disolución de Potasio Hidróxido al 20%. Pesar 20 g de Potasio Hidróxido 85% lentejas

PA-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta unvolumen de 100 ml.

11.3.10. Disolución de Acido Sulfúrico al 20%(v/v).

Diluir 20 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO(11.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.

11.3.11. Disolución de Acido Sulfúrico al 1% (v/v).Diluir 1 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO

(11.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de100 ml.

11.3.12. Arsénico solución patrón As = 1,000 ±0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arséni-co Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidróxidoal 20% (11.3.9.), neutralizar con Acido Sulfúrico al20% (11.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfú-rico 1% (11.3.11.).

11.3.13. Solución patrón de Arsénico de con-centración 10 mg/l.

Pipetear 1 ml de la solución patrón de Arsénico(11.3.12.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluirhasta el enrase con Agua PA-ACS.

11.3.14. Solución patrón de Arsénico de con-centración 0,1 mg/l.

Pipetear 1 ml de la solución de Arsénico(11.3.13.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluirhasta el enrase con Agua PA-ACS.

11.4. Procedimiento.11.4.1. Preparación de la muestra.En un matraz "Kjeldahl", de 250 ml introducir 4 g

de muestra con 20 ml de Acido Nítrico 60% PA-ISO(11.3.4.) y 5 ml de Acido Sulfúrico 96% PA-ISO(11.3.5.).

Llevar la ebullición hasta reducir el volumen a5 ml. Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS enun matraz de 50 ml la solución resultante.

11.4.2. Preparación del blanco y patrones detrabajo. En un matraz "Kjeldahl", introducir 5 ml dela solución de Arsénico (11.3.14.) y someterlo almismo tratamiento que la muestra.

1 ml de la solución contiene 10 nanogramos dearsénico.

Preparar un blanco con todos los reactivos utili-zados siguiendo el tratamiento dado a la muestra.

11.4.3. Condiciones del espectrofotómetro. Encender la fuente de alimentación de las lám-

paras de descarga sin electrodos con el tiemposuficiente para que se estabilice la energía de lalámpara.

Encender el espectrofotómetro, ajustar la longi-tud de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla deacuerdo con las condiciones del aparato.

Encender el generador de hidruros, colocando latemperatura de la celda a 900°C, esperando hastaque se alcance dicha temperatura.

Se ajustan las condiciones del generador dehidruros según las especificaciones del aparato.

Ajustar el flujo de argón de acuerdo con lascaracterísticas del aparato.

Encender el registrador.11.4.4. Determinación. Las determinaciones de la concentración de

Arsénico se realizan por el método de adición depatrones, por medio de medidas duplicadas en elespectrofotómetro en las condiciones especificadasen (11.4.3.), añadiendo al matraz de reacción 3 mlde la solución (11.4.1.), más 3 ml de la solución(11.3.2.), y 10 ml de la solución (11.3.8.). Comopatrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de As.

Lavar los matraces antes y después de cadauso, con Acido Clorhídrico (11.3.3.).

Al construir la gráfica de adición hay que des-contar el valor de absorbancia del blanco obtenidoen las mismas condiciones anteriores, pero aña-diendo 3 ml de la solución blanco.

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12. PLOMO

12.1. PrincipioDeterminación del plomo por absorción atómica.

12.2. Material y aparatos.12.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómi-

ca.12.2.2. Lámpara de plomo.12.2.3. Cápsulas de platino, cuarzo o similar (de

150 ml de capacidad, aproximadamente)12.2.4. Baño de arena o placa calefactora con

regulación de temperatura o estufa con control detemperatura en el rango de 50 a 150°C.

12.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro devitrina de extracción de humos.

12.2.6. Matraces de 10, 100 y 1.000 ml decapacidad.

12.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO

Acido Nítrico al 1%131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313189 Plomo solución patrón

Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA

12.3.1. Acido Sulfúrico 96% PA-ISO (d= 1,835g/ml).

12.3.2. Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (d=1,413 g/ml).

12.3.3. Acido Nítrico al 1% en Agua PA-ACS.12.3.4. Plomo solución patrón Pb = 1,000 ±

0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a1.000 ml con Acido Nítrico al 1%.

12.4. Procedimiento.12.4.1. Preparación de la muestra.- Pesar 20 g

de la muestra en la cápsula (12.2.3.); llevarla a eva-poración hasta consistencia siruposa en baño dearena (12.2.4.). Añadir a continuación 2 ml de AcidoSulfúrico 96% PA-ISO y carbonizar lentamente elresiduo en el baño de arena o placa. Seguidamenteintroducir la cápsula en la mufla y mantenerla duran-te dos horas a 450°C; transcurrido dicho tiempo,sacarla y dejarla enfriar.

Añadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en elbaño de arena o placa e introducir en la mufla, repi-tiendo esta operación hasta obtener cenizas blan-cas. Un ligero color marrón-rojizo en las cenizas(posiblemente de Fe2O3) es aceptado y no requiereun tratamiento posterior.

Disolver a continuación las cenizas con 1 ml deAcido Nítrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-ACS. Llevar la solución a un matraz de 10 ml, lavarla cápsula con Agua PA-ACS y añadir las aguas dellavado hasta el enrase, filtrando posteriormente.

12.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir

alícuotas apropiadas de la solución patrón (12.3.4.)con Acido Nítrico al 1% (v/v) para obtener una curvade concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l.

12.4.3. Determinación. Operar según las especi-ficaciones del aparato, usando llama de aire-acetile-no. Medir las absorbancias de la muestra y patro-nes a 283 nm. Si la solución está muy concentradadiluirla con Acido Nítrico al 1%.

12.5. Cálculos.Calcular el contenido en plomo, expresado en

mg/l mediante comparación con la correspondientecurva patrón y teniendo en cuenta el factor de con-centración o dilución.

12.6. Referencia.1. Métodos Oficiales de Análisis de Vinos. Minis-

terio de Agricultura, pág. 134 (I), 1976.

13. ZINC

13.1. Principio.Determinación del zinc por absorción atómica

previa mineralización de la muestra.

13.2. Material y aparatos.13.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómi-

ca.13.2.2. Lámpara de zinc.13.2.3. Los utilizados para el Pb en (12.2.3.),

(12.2.4.) (12.2.5.) y (12.2.6.)

13.3. Reactivos.131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO

Acido Nítrico al 1%131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313193 Zinc solución patrón

Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AA

13.3.1. Los utilizados para el plomo en (12.3.1.),(12.3.2.) y (12.3.3.)

13.3.2. Zinc solución patrón Zn = 1,000 ± 0,002g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782Zinc metal granalla PRS en el mínimo volumennecesario de Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) ydiluir a 1 litro con Acido Nítrico del 1 % (v/v).

13.4. Procedimiento.13.4.1. Preparación de la muestra.- Como en

(12.4.1.).13.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir

partes alícuotas de la solución patrón (13.3.2.), conAcido Nítrico al 1% para obtener soluciones de 0,5;1; 1,5 y 2 mg/l.

13.4.3. Determinación. Igual que para el plomo. La lectura se efectuará a 213,8 nm.

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13.5. Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancias obteni-

dos, hallar las concentraciones de Zinc para lamuestra, teniendo en cuenta el factor concentra-ción o dilución.

13.6. Referencia.1. H.E. Parker. “Atomic Absorption Newsletter”

(1963), 13.

14. COBRE

14.1 PrincipioDeterminación del cobre por absorción atómica

previa mineralización de la muestra.

14.2. Material y aparatos.14.2.1. Espectrofotómetro de absorción atómi-

ca.14.2.2. Lámpara de Cobre.14.2.3. Los utilizados para el plomo, en (12.2.3.),

(12.2.4.), (12.2.5.) y (12.2.6.).

14.3. Reactivos131037 Acido Nítrico 70% PA-ACS-ISO

Acido Nítrico al 1%131058 Acido Sulfúrico 96% PA-ISO131074 Agua PA-ACS313178 Cobre solución patrón

Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA

14.3.1. Los utilizados para el plomo en (12.3.1.),(12.3.2.) y (12.3.3.)

14.3.2. Cobre solución patrón Cu = 1,000 ±0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g deCobre puro en el mínimo volumen necesario de Aci-do Nítrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y diluir a 1 litrocon Acido Nítrico del 1 % (v/v).

14.4. Procedimiento.14.4.1. Preparación de la muestra.- Como en

(12.4.1.).14.4.2. Construcción de la curva patrón.- Diluir

partes alícuotas de la solución patrón (14.3.2.), conAcido Nítrico al 1% para obtener soluciones quecontengan de 1 a 5 mg de Cobre/litro.

14.4.3. Determinación.- Igual que para el plomo.Medir a 324,7 nm.

14.5. Cálculo.Partiendo de los valores de absorbancia obteni-

dos para la muestra, hallar mediante la curva patrónlas concentraciones de Cobre de la muestra.

14.6 Referencias.1. H.E. Parker: "Atomic Absorption Newsletter"

(1963).13.2 F. Rousselet: "Spectrophotometrie par absorp-

tion atomique Boudin". Ed Paris (1968), pág. 59-144.

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Sidras:Sidras y otras bebidasderivadas de laManzana

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METODOS DE ANALISIS

1. ELIMINACION DEL ANHIDRIDOCARBONICO

1.1. Principio.Desgasificación de la sidra mediante agitación y

filtración.

1.2. Material y aparatos.1.2.1. Matraz Erlenmeyer.1.2.2. Papel de filtro.1.2.3. Embudo.

1.3. Procedimiento.El volumen de sidra que vaya a utilizar, previa-

mente llevada a 17-20°C, verterlo en un matrazErlenmeyer de capacidad doble del volumen utiliza-do. Agitar durante diez minutos y filtrar a continua-ción a través de un embudo cubierto de papel de fil-tro seco.

2. GRADO ALCOHOLICO ADQUIRIDO

Eliminar el anhídrido carbónico como se indicaen el método 1 y proceder como se indica en losmétodos oficiales de vinos número 5(a) ("Boletín Ofi-cial del Estado" de 22 de julio de 1977) y 5(b)("Boletín Oficial del Estado" del 23 de julio de 1977).

3. AZUCARES REDUCTORES

Eliminar el anhídrido carbónico como se indicaen el método número 1 y proceder como se indicaen los métodos oficiales de vinos números 7(a) y7(b) ("Boletín Oficial del Estado" de 23 de julio de1977) y 7(c) ("Boletín Oficial del Estado" de 30 deagosto de 1979).

4. ANHIDRIDO SULFUROSO

Proceder como se indica en el método oficial devinos números 28(a) y 28(b) ("Boletín Oficial delEstado" de 26 de julio de 1977).

5. METANOL(Alcohol Metílico)

Eliminar el anhídrido carbónico como se indicaen el método número 1 y proceder como se indicaen el método oficial de vinos número 37 ("BoletínOficial del Estado" de 27 de julio de 1977).

6. ACIDEZ VOLATIL

Proceder como se indica en el método oficial devinos número 21 ("Boletín Oficial del Estado" de 23de julio de 1977).

7. EXTRACTO SECO TOTAL

Eliminar el anhídrido carbónico como se indicaen el método número 1 y proceder como se indicaen el método oficial de vinos número 6 ("Boletín Ofi-cial del Estado" de 23 de julio de 1977).

8. CENIZAS

Eliminar el anhídrido carbónico como se indicaen el método número 1 y proceder como se indicaen el método oficial de vinos número 11 ("BoletínOficial del Estado" de 23 de julio de 1977).

9. HIERRO

Eliminar el anhídrido carbónico como se indicaen el método número 1 y proceder como se indicaen el método oficial de vinos número 16 ("BoletínOficial del Estado" de 23 de julio de 1977).

10. ETANAL

10.1. Principio.El etanal se determina en la sidra, previamente

decolorada con carbón, midiendo a 570 nm, lacoloración verde o violeta que da con el sodio nitro-prusiato y la piperidina.

10.2. Material y aparatos.10.2.1. Espectrofotómetro capaz de efectuar

lecturas a 570 nm.

10.3. Reactivos.131015 Acido Bórico PA-ACS-ISO131019 Acido Clorhídrico 35% PA-ISO121064 Acido Sulfuroso solución 6% PA131074 Agua PA-ACS171096 Almidón soluble RE121237 Carbón Activo polvo PA

Etanal171327 Fenolftaleína solución 1% RE162377 Piperidina PS182415 Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV121705 Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA181772 Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV

10.3.1. Solución de Piperidina al 10% (v/v).Preparar antes de cada medida la mezcla de 2 ml

de Piperidina PS con 18 ml de Agua PA-ACS.

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Page 180: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

10.3.2. Solución de Sodio Nitroprusiato al 0,4%(p/v).

En un matraz aforado de 250 ml, disolver 1 g deSodio Nitroprusiato 2-hidrato PA, pulverizado.Completar hasta el enrase con Agua PA-ACS.

10.3.3. Carbón activo polvo PA.10.3.4. Acido Clorhídrico diluido al 25% (v/v)

(aproximadamente 102 g/l). Diluir convenientemen-te Acido Clorhídrico 35% PA-ISO con Agua PA-ACS.

10.3.5. Solución alcalina.Disolver 8,75 g de Acido Bórico PA-ACS-ISO en

400 ml de Sodio Hidróxido 1mol/l (1N) SV con AguaPA-ACS.

10.4. Procedimiento.10.4.1. Determinación de etanal.Colocar 25 ml de líquido a analizar en un erlen-

meyer de 100 ml, adicionar unos 2 g de CarbónActivo polvo PA. Agitar enérgicamente durantealgunos segundos, dejar reposar durante 2 minutosy filtrar sobre un filtro de pliegues de poro fino paraobtener un filtrado claro.

Dos ml de filtrado incoloro se colocan en unErlenmeyer de 100 ml y se adiciona, agitando, 5 mlde solución de Sodio Nitroprusiato y 5 ml de solu-ción de Piperidina; mezclar y colocar inmediata-mente la mezcla en la cubeta de lectura de 10 mmde espesor. La coloración obtenida que varía delverde al violeta, se mide a 570 nm con relación alaire. Esta coloración aumenta para disminuir segui-damente con rapidez. Elegir como valor definitivo lamáxima absorbancia que se obtiene al cabo deunos 50 segundos.

La cantidad de etanal contenido en el líquidoanalizado se deduce de una curva patrón.

10.4.2. Construcción de la curva patrón.Solución patrón de Etanal combinado con el Anhí-drido Sulfuroso.

Tomar Acido Sulfuroso 6% PA, valorar en SO2 ydeterminar su cantidad exacta midiéndola con Yodo0,05 mol/l (0,1N) SV.

En un matraz aforado de 1 litro colocar el volu-men de esta solución que corresponda a 1.500 mgde SO2. Introducir en el matraz, ayudados con unembudo, alrededor de 1 ml de Etanal destiladorecientemente y recogido sobre una mezcla refrige-rante. Enrasar a un litro con Agua PA-ACS, mezclary dejar durante la noche.

La cantidad exacta de esta solución patrón deEtanal combinada con el SO2 debe determinarsecomo sigue:

En un Erlenmeyer de 500 ml, colocar 50 ml desolución patrón de Etanal, adicionar 20 ml del AcidoClorhídrico diluido y 100 ml de Agua PA-ACS. Oxi-dar el SO2 libre con Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV enpresencia de Almidón soluble RE hasta coloraciónazul débil.

Añadir unas gotas de Fenolftaleína solución 1%

RE y la suficiente solución alcalina hasta la desapa-rición de la coloración azul y aparición de color rosa.Valorar el SO2 combinado al Etanal con el Yodo0,05 mol/l (0,1N) SV hasta coloración azul débil.Siendo n el volumen gastado, la solución patrón deEtanal combinado con el SO2 contiene : 44,05 n mgde Etanal por litro.

Preparación de la curva patrón:En matraces aforados de 100 ml colocar sucesi-

vamente 5-10-15-20 y 25 ml de la solución patrón.Enrasar con Agua PA-ACS. Estas diluciones corres-ponden a cantidades de Etanal próximas a 40-80-120-160 y 200 mg/l. La cantidad exacta de las dilu-ciones debe calcularse a partir del contenido enEtanal de la solución patrón determinada anterior-mente.

Proceder a la medida del Etanal sobre 2 ml decada una de estas soluciones como se indica ante-riormente. La representación gráfica de las absor-bancias de estas soluciones en función de la canti-dad de Etanal es una recta que no pasa por el origen.

10.5. Cálculo.Calcular el contenido en etanal mediante com-

paración con la correspondiente curva patrón.

10.6. Observaciones.Si, de forma excepcional, el líquido a analizar

contiene etanal libre, no combinado con el SO2 seránecesario, antes de empezar a determinar el etanaltotal, pasarlo previamente al estado de combina-ción con el SO2. Para efectuar esto, adicionar a unaparte del líquido a analizar un pequeño exceso deSO2 libre y esperar algunas horas antes de proce-der a la determinación.

10.7. Referencias.10.7.1. H. Rebelein (1970), Dtsch. Lebensmit.

Rdsch 1970. 66, 5-6.10.7.2. Recueil des Méthodes Internationales

d'Analyses des Vins. O. I. V. A-37, 1978.

11. ANHIDRIDO CARBONICO

11.1. Principio.Después de la oxidación en frío del anhídrido

sulfuroso por el hidrógeno peróxido en presenciadel ion de cobre II, el anhídrido carbónico despla-zado de la sidra por una solución tampón de fos-fato y ácido fosfórico es arrastrado en frío en cir-cuito cerrado por una corriente de aire medianteuna pequeña bomba de circulación hacia unasolución valorada de bario hidróxido. El exceso deesta base se determina inmediatamente con unasolución valorada de ácido clorhídrico en presen-cia de un indicador mixto de timolftaleína-fenolfta-leína.

Aplicables a contenidos inferiores a 6 g/l.

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11.2. Material y aparatos.11.2.1. Aparato de vidrio para extracción del

CO2 en circuito cerrado (fig. 1) compuesto de:- un matraz de 250 ml (1) provisto de una bola

antiespuma sobre la que va adaptada una bureta (5);- dos barboteadores (2) y (3);- una bomba (4) que garantice la circulación del

aire en el circuito (2 a 10 burbujas por segundo).

11.3. Reactivos.181021 Acido Clorhídrico 1 mol/l (1N) SV131032 Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO131074 Agua PA-ACS131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO121085 Etanol 96% v/v PA131325 Fenolftaleína PA-ACS141076 Hidrógeno Peróxido 30% p/v (100 vol.)

PRS121677 Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato

PA131687 Sodio Hidróxido lentejas PA-AC-ISO182157 Sodio Hidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV171739 Timolftaleína RE

11.3.1. Solución de Sodio Hidróxido 0,2N : Enun matraz aforado diluir exactamente a 1:1 SodioHidróxido 0,4 mol/l (0,4N) SV con Agua PA-ACS.

11.3.2. Solución de Bario Cloruro de 90 g deBaCl2.2H2O por litro. Disolver Bario Cloruro 2-hidra-to PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS.

11.3.3. Solución de Bario Hidróxido.Mezclar 2 volúmenes de la solución de Bario Cloru-ro de 90 g/l con 1 volumen de solución de SodioHidróxido 0,2N. Conservar en recipiente que evite lacarbonatación.

11.3.4. Solución tampón:Disolver en Agua PA-ACS recientemente hervida400 g de Sodio di-Hidrógeno Fosfato 2-hidrato PA y50 ml de Acido orto-Fosfórico (d 20° C = 1,63) :Diluir Acido orto-Fosfórico 85% PA-ACS-ISO conAgua PA-ACS hasta la densidad indicada quecorresponde a, aproximadamente, 79,4% y com-pletar hasta 1 l con Agua PA-ACS recientementehervida.

11.3.5. Sodio Hidróxido al 50% (p/p).Solución acuosa (d = 1,525) que contenga 50 g deSodio Hidróxido lentejas PA-AC-ISO en 100 g desolución.

Utilizarla 15 días después de su preparaciónpara lograr la decantación del eventual CO3Na2.Esta solución debe ser transparente.

11.3.6. Hidrógeno Peróxido en solución de 10volúmenes. Esta solución contiene 30,4 g de H2O2por litro y libera 10 veces su volumen de oxígenopor descomposición catalítica con MnO2 en medioalcalino.

11.3.7. Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO,pulverizado.

11.3.8. Disolver 1 g de Fenolftaleína PA-ACS y0,5 g de Timolftaleína RE en Etanol 96% v/v PAneutro, y completar hasta 100 ml.

11.3.9. Acido Clorhídrico 0,2 N. En un matrazaforado diluir a 1:5 Acido Clorhídrico 1mol/l (1N) SVcon Agua PA-ACS y determinar el factor de la solu-ción 0,2N obtenida.

11.4. Procedimiento.11.4.1. Sidras que contienen menos de 4 g de

CO2, por litro.La botella de sidra se debe mantener en posi-

ción horizontal durante una noche a 0°C.Colocar en el barboteador (2) 150 ml exacta-

mente medidos de solución de Bario Hidróxido.Introducir en el matraz (1) algunos cristales de

Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml deHidrógeno Peróxido de 10 volúmenes. Poner, concuidado, en un matraz previamente enjuagado yenfriado a 0°C, 50 ml de sidra. Colocar el matraz (1)en el circuito y esperar 10 minutos.

Conectar la bomba, e introducir mediante labureta (5) 20 ml de solución tampón. Dejar en fun-cionamiento 30 minutos.

Parar la bomba y tomar del barboteador (2),50 ml de la solución de Bario Hidróxido; valorarlacon Acido Clorhídrico 0,2N con indicador mixto.Sea V2 el número de ml gastados.

Es indispensable valorar diariamente el BarioHidróxido utilizando 150 ml. Sea V1 el número de mlde Acido Clorhídrico 0,2N necesarios.

11.4.2. Sidras que contienen más de 4 g de CO2por litro.

La botella debe mantenerse en posición horizon-tal a 0°C durante una noche. Abrir la botella conprecaución. Para botellas de 750 ml sustituir 50 mlde sidra por 50 ml de Sodio Hidróxido al 50%haciendo resbalar suavemente la solución por elcuello de la botella. Cerrar ésta inmediatamente yhomogeneizar su contenido agitándola; colocarlaseguidamente en un baño de agua a 20° C.

Colocar en el barboteador (2) 300 ml exactos desolución de Bario Hidróxido.

Introducir en el matraz (1) unos cristales deCobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml deHidrógeno Peróxido de 10 volúmenes.

Introducir lentamente la pipeta en la botella paraevitar desprendimiento de CO2 y tomar 50 ml de lasidra y echarlos al matraz. Conectarlo al aparato ydejarlo reposar 10 minutos.

El volumen de la sidra tomado se deberá reducira 25 ml, si ésta contiene más de 8 g/l de anhídridocarbónico.

Conectar la bomba, e introducir en el matraz (1)con una bureta (5), 40 ml de solución tampón.Ponerla en funcionamiento durante 30 minutos.

Parar la bomba y tomar del barboteador (2)50 ml de la solución de Bario Hidróxido. Valorarlacon Acido Clorhídrico 0,2N en presencia de indica-

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dor mixto. Sea V2 el número de ml utilizados. Sea V1el número de ml de Acido Clorhídrico 0,2N consu-midos para valorar 150 ml de solución de BarioHidróxido.

11.5. Cálculo.11.5.1. Para sidras que contienen menos de 4 g

de CO2 por litro.Cantidades de CO2 en gramos por l en la sidra.

CO2 (g/l) = 0,088 (V1 - 3V2).11.5.2. Para sidras que contienen más de 4 g de

CO2 por litro.Medir el volumen de líquido que queda en la

botella y añadir 50 o 25 ml de la muestra tomadapara la determinación. Sea V el volumen total asídeterminado. Calcular seguidamente el factor decorrección f, necesario para tener en cuenta los50 ml de Sodio Hidróxido al 50% introducidos en labotella:

Vf = ––––––

V - 50

Si la muestra para la determinación es de 50 ml,la cantidad de anhídrido carbónico en g/l es(2V1 - 6V2) x 0,088 x f.

Este resultado debe multiplicarse por 2 si latoma de muestra es de 25 ml.

11.6. Referencias.11.6.1. Jaulmes (P.), Metch. An. 1972, n° 422;

Ann. Fals. Exp. Chim. 1973, n°708, 96-109.11.6.2. Recueil des Méthodes Internationales

d'Analyse des Vins. O. I. V. A-39, 1978.

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Figura l

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183

M

Page 184: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

Relación de reactivosy productos auxiliaresque se utilizan en losmétodos analíticos.Productos derivados dela Uva, Aguardientesy Sidras.

184 NOTA: Algunos de los reactivos recomendados enlos métodos analíticos previamente descritos hanmodificado su código y mejorado su calidad.Además se han producido nuevas incorporaciones.Por favor, consulte este anexo antes de efectuarsu pedido. Es la versión actualizada de la oferta deproductos suministrables en Mayo de 1999.

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185

M

REACTIVOS Y PRODUCTOS AUXILIARES QUE HAN CAMBIADO DE CÓDIGO O DE CALIDAD

ANTERIOR ACTUAL

263093 Acetonitrilo gradiente HPLC 221881 Acetonitrilo (HLPC-gradiente) PAI171024 Acido Cromotrópico Sal Disódica 2-hidrato RE 121024 Acido Cromotrópico Sal Disódica 2-hidrato PA124559 Acido Etilendiaminoteraacético Sal Disódica 144559 Acido Etilendiaminoteraacético Sal Cálcica

Cálcica PA Disódica (RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX

171096 Almidón soluble RE 121096 Almidón de Patata soluble PA121118 Amonio Bromuro PA 131118 Amonio Bromuro PA-ACS171432 Anaranjado de Metilo solución 0,1% RE 281432 Anaranjado de Metilo solución 0,1% RV171168 Azul de Bromotimol solución 0,04% RE 281168 Azul de Bromotimol solución 0,04% RV351082 1-Butanol CG 361082 1-Butanol (UV-IR-HPLC) PAI354330 iso-Butanol CG 361089 iso-Butanol (UV-IR-HPLC) PAI353851 2-Butanol CG 123851 2-Butanol PA351086 Etanol absoluto CG 361086 Etanol absoluto (UV-IR-HPLC) PAI351085 Etanol 96% CG 361085 Etanol 96% (UV-IR-HPLC) PAI141897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PRS 131897 Eter mono-Metílico del Etilenglicol PA-ACS 171321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS 131321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato PA-ACS171327 Fenolftaleína solución 1% RE 281327 Fenolftaleína solución 1% RV141334 Furfuraldehído PRS 131334 Furfural estabilizado con ~0,1% de BHT

PA-ACS261091 Metanol HPLC 361091 Metanol (UV-IR-HPLC prep.) PAI351091 Metanol CG 321091 Metanol (PAR) PAI351079 3-Metil-1-Butanol CG 131079 3-Metil-1-Butanol PA-ACS352516 4-Metil-2-Pentanol CG 162516 4-Metil-2-Pentanol PS164542 4-Nitroanilina PS A10369 4-Nitroanilina, 98%171439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS 131439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) PA-ACS251450 Parafina P.F. 55-60°C en pastilla DC 253211 Parafina P.F. 56-58°C en lentejas DC121884 1-Pentanol PA 131884 1-Pentanol PA-ACS171495 Potasio Cloruro solución saturada RE 281495 Potasio Cloruro solución saturada RV351885 1-Propanol CG 361885 1-Propanol (UV-IR-HPLC) PAI354457 2-Propanol CG 321090 2-Propanol (PAR) PAI171615 Rojo de Fenol RE-ACS 131615 Rojo de Fenol PA-ACS171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS 131617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) PA-ACS171634 Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE 281634 Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RV171730 Tampón solución pH 10 RE 281730 Solución Tampón pH 10 RV171739 Timolftaleína RE 121739 Timolftaleína PA171748 Tornasol tintura RE 281748 Tornasol tintura RV171759 Verde de Bromocresol RE-ACS 131759 Verde de Bromocresol PA-ACS121787 Zinc Sulfato 7-hidrato PA 131787 Zinc Sulfato 7-hidrato PA-ACS

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ACETALDEHIDOA13752 3-HIDROXI-2-BUTANONA dímero,98%

(ACETOINA dímero)131007 ACETONA PA-ACS-ISO221881 ACETONITRILO (HPLC-gradiente) PAI131008 ACIDO ACETICO glacial PA-ACS-ISO

ACIDO ACETICO 2 mol/l (2N)131013 ACIDO L(+)- ASCORBICO PA-ACS-ISOA10934 ACIDO BARBITURICO, 98+%121014 ACIDO BENZOICO PA131015 ACIDO BORICO PA-ACS-ISO131808 ACIDO CITRICO anhidro PA-ACS131018 ACIDO CITRICO 1-hidrato PA-ACS-ISO131020 ACIDO CLORHIDRICO 37% PA-ACS-ISO131019 ACIDO CLORHIDRICO 35% PA-ISO182107 ACIDO CLORHIDRICO 0,05 mol/l

(0,05N) SV182318 ACIDO CLORHIDRICO 0,25 mol/l

(0,25N) SV181022 ACIDO CLORHIDRICO 0,5 mol/l

(0,5N) SV181021 ACIDO CLORHIDRICO 1 mol/l (1N) SV182108 ACIDO CLORHIDRICO 2 mol/l (2N) SVA15135 ACIDO 4-CLOROBENZOICO, 98+%121024 ACIDO CROMOTROPICO SAL

DISODICA 2-hidrato PA144559 ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICO

SAL CALCICA DISODICA (RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX

131669 ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICOSAL DISODICA 2-hidrato PA-ACS-ISO

182120 ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICOSAL DISODICA 0,05 mol/l (0,05N) SV

131030 ACIDO FORMICO 98% PA-ACS131032 ACIDO orto-FOSFORICO 85%

PA-ACS-ISO121660 ACIDO orto-FOSFORICO 50% PAA13700 ACIDO 4-HIDROXIBENZOICO, 99%131034 ACIDO L(+)- LACTICO PA-ACS131037 ACIDO NITRICO 69% PA-ACS-ISO131036 ACIDO NITRICO 60% PA-ISO121737 ACIDO NITRICO 53% PA

ACIDO NITRICO AL 1%ACIDO PERYODICO 0,05 M

121050 ACIDO PIROGALICO PA141045 ACIDO SALICILICO (RFE, USP, BP,

Ph. Eur) PRS-CODEX141055 ACIDO SORBICO (RFE, USP, BP,

Ph. Eur.) PRS-CODEX131057 ACIDO SULFANILICO PA-ACS471058 ACIDO SULFURICO 95-98%

(máx 0,0000005% Hg) PA-ACS-ISO131058 ACIDO SULFURICO 96% PA-ISO182102 ACIDO SULFURICO

0,01 mol/l (0,02N) SV181061 ACIDO SULFURICO 0,05 mol/l (0,1N) SV181059 ACIDO SULFURICO 0,5 mol/l (1N) SV182105 ACIDO SULFURICO 1 mol/l (2N) SV

131064 ACIDO SULFUROSOsolución 6% PA-ACS

131066 ACIDO L(+)- TARTARICO PA-ACS-ISOACIDO TIOBARBITURICO

A13401 ACIDO TIOSALICILICO,98%141792 AGAR (USP) PRS-CODEX131074 AGUA PA-ACS171071 AGUA DE BARITA solución saturada RE171073 AGUA DE CAL solución saturada RE212236 AGUA DESIONIZADA QP

ALILO iso-TIOCIANATO121096 ALMIDON DE PATATA soluble PA141101 ALUMINIO SULFATO 18-hidrato

(RFE, BP,Ph. Eur.) PRS-CODEXAMONIACO GAS

121129 AMONIACO 25% (en NH3) PA141128 AMONIACO 20% (en NH3) PRS131118 AMONIO BROMURO PA-ACS131121 AMONIO CLORURO PA-ACS-ISO131120 di-AMONIO HIDROGENO

CITRATO PA-ACS131368 AMONIO HIERRO (II) SULFATO

6-hidrato PA-ISO131365 AMONIO HIERRO (III) SULFATO

12-hidrato PA-ACS-ISO131134 AMONIO MOLIBDATO 4-hidrato

PA-ACS-ISO131135 AMONIO NITRATO PA-ACS-ISO121146 di-AMONIO TARTRATO PA132352 AMONIO meta-VANADATO PA-ACS281432 ANARANJADO DE METILO

solución 0,1% RVA13482 trans-ANETOL,98%+141156 ANILINA PRS211160 ARENA DE MAR lavada, grano fino QPA16992 ARSENICO POLVO -100 mesh, 99,99% 313171 ARSENICO solución patrón

As = 1,000 ± 0,002 g/l AA281168 AZUL DE BROMOTIMOL solución

0,04% RV251170 AZUL DE METILENO (C.I. 52015) DC131182 BARIO CLORURO 2-hidrato

PA-ACS-ISO131188 BARIO HIDROXIDO

8-hidrato PA-ACS-ISO2,3-BUTANODIOL

361082 1-BUTANOL (UV-IR-HPLC) PAI131082 1-BUTANOL PA-ACS-ISO361089 iso-BUTANOL (UV-IR-HPLC) PAI123851 2-BUTANOL PAA13159 BUTIL-PBD (2-(4-Bifenil)-5-

(4-tert-butilfenil)-1,3,4-oxadiazol121211 CALCIO ACETATO x-hidrato PA121212 CALCIO CARBONATO precipitado PA121221 CALCIO CLORURO

anhidro, polvo PACALCIO CLORURO 0,5 mol/l (0,05M)

186

Page 187: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

142400 CALCIO HIDROXIDO polvo,(RFE,USP, BP. Ph. Eur.) PRS-CODEX

211229 CALCIO HIDROXIDO natural, polvo QP211234 CALCIO OXIDO natural, trozos QP124537 CALCON (C.I. 15705) PA121237 CARBON ACTIVO polvo PA131245 CARBONO TETRACLORURO

PA-ACS-ISO251246 CARMIN DE INDIGO (C.I. 73015) DC121248 CERIO (IV) SULFATO 4-hidrato PA142323 CLORAMINA T 3-hidrato

(RFE, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX313178 COBRE solución patrón

Cu = 1,000 ± 0,002 g/l AA141266 COBRE METAL, polvo PRS122726 COBRE (II) SULFATO anhidro PA131270 COBRE (II) SULFATO 5-hidrato

PA-ACS-ISO141270 COBRE (II) SULFATO 5-hidrato

(RFE, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX471153 CROMO (VI) OXIDO

(máx. 0,000005% de Hg) PA-ACS502612 DERQUIM MC MEZCLA CROMICA121828 DIFENILAMINA PA313180 ESTAÑO solución patrón

Sn = 1,000 ± 0,002 g/l AA141304 ESTAÑO metal granalla PRS471303 ESTAÑO (II) CLORURO

(máx. 0,000005% de Hg) PA-ACS131303 ESTAÑO (II) CLORURO 2-hidrato

PA-ACSETANAL (ACETALDEHIDO)

121086 ETANOL ABSOLUTO PA361086 ETANOL ABSOLUTO (UV-IR-HPLC) PAI361085 ETANOL 96% v/v (UV-IR-HPLC) PAI121085 ETANOL 96% v/v PA132770 ETER DIETILICO estabilizado con

~6 ppm de BHT PA-ACS-ISO131314 ETER DI-iso-PROPILICO estabilizado

con ~50 ppm de BHT PA-ACS131897 ETER mono-METILICO DEL

ETILENGLICOL PA-ACS131318 ETILO ACETATO PA-ACS-ISO403687 EXTRACTO DE LEVADURA

Ingrediente CULTIMED131321 1,10-FENANTROLINA 1-hidrato PA-ACS131325 FENOLFTALEINA PA-ACS281327 FENOLFTALEINA solución 1% RVA13034 FLUOROGLUCINOL DIHIDRATO, 98%

(FLUOROGLUCINA)131328 FORMALDEHIDO 37-38% p/p

estabilizado con metanol PA-ACS142728 D (-)-FRUCTOSA

(RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX131334 FURFURAL estabilizado con

~ 0,1% de BHT PA-ACS141339 GLICERINA (RFE,USP, BP, Ph. Eur.)

PRS-CODEX

121341 D (+) - GLUCOSA PA132063 n-HEXANO PA-ACS141076 HIDROGENO PEROXIDO

30% p/v (100 vol.) estabilizado PRS131914 HIDROXILAMONIO CLORURO

PA-ACS-ISO121925 HIDROXILAMONIO SULFATO PAA12475 5-(HIDROXIMETIL)-2-

FURALDEHIDO, 97%313182 HIERRO solución patrón

Fe = 1,000 ± 0,002 g/l AA211934 HIERRO metal, granulado fino QP141358 HIERRO (III) CLORURO 6-hidrato trozos

PRS121793 HIERRO (II) SULFATO ~2-hidrato PA131362 HIERRO (II) SULFATO 7-hidrato

PA-ACS-ISO121360 HIERRO (III) SULFATO x-hidrato PA211376 LANA DE VIDRIO, lavada QP141392 LITIO CLORURO PRS131394 MAGNESIO ACETATO 4-hidrato PA-ACS211794 MAGNESIO CLORURO

~50% MgCl2 polvo QPMAGNESIO CLORURO 0,1 mol/l (0,1M)

211276 MAGNESIO OXIDO QP142367 MANGANESO (IV) OXIDO

precipitado PRS131413 MANGANESO (II) SULFATO 1-hidrato

PA-ACS142961 L(-)-MENTOL (RFE, USP, BP, Ph. Eur.)

PRS-CODEX131426 MERCURIO (II) OXIDO amarillo

PA-ACS121428 MERCURIO (II) YODURO rojo PA313186 MERCURIO solución patrón

Hg = 1,000 ±0,002 g/l AA361091 METANOL (UV-IR-HPLC prep.) PAI321091 METANOL (PAR) PAI131091 METANOL PA-ACS-ISO

2-METIL-1-BUTANOL131079 3-METIL-1-BUTANOL PA-ACS162516 4-METIL-2-PENTANOL PS131439 NEGRO DE ERIOCROMO T (C.I. 14645)

PA-ACS132362 NINHIDRINA PA-ACSA10369 4-NITROANILINA, 98%

PAPEL DE FILTRO(Ver Tarifa Panreac, Filtración MN)

91187 PAPEL DE TORNASOL neutro (rollo)253211 PARAFINA P.F. 56-58°C en lentejas DC122006 n-PENTANO PA131884 1-PENTANOL PA-ACS211835 PIEDRA POMEZ gránulos QP

PINACIANOL O AZUL DE QUINALDINA(YODURO DE 1,1’-DIETILCARBOCIANINA)

162377 PIPERIDINA PS131457 PIRIDINA PA-ACS

187

M

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132382 PLATA DIETILDITIOCARBAMATOPA-ACS

131459 PLATA NITRATO PA-ACS-ISOPLATA NITRATO solución 0,1% p/v

141801 PLATA SULFATO PRS313189 PLOMO solución patrón

Pb = 1,000 ± 0,002 g/l AA131466 PLOMO (II) ACETATO 3-hidrato

PA-ACS-ISO131473 PLOMO (II) NITRATO PA-ACS816610.1POLIAMIDA PARA CROMATOGRAFIA313190 POTASIO solución patrón

K = 1,000 ± 0,002 g/l AA121489 POTASIO BROMURO PA

POTASIO CLORURO(máx 0,005% de Br)

131494 POTASIO CLORURO PA-ACS-ISO281495 POTASIO CLORURO

solución saturada RV131500 POTASIO DICROMATO PA-ISO131505 POTASIO HEXACIANOFERRATO (II)

3-hidrato PA-ACS131503 POTASIO HEXACIANOFERRATO (III)

PA-ACS122333 di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO

3-hidrato PA131509 POTASIO di-HIDROGENO FOSFATO

PA-ACS-ISO131481 POTASIO HIDROGENO FTALATO

PA-ISO121486 POTASIO HIDROGENO TARTRATO PA121515 POTASIO HIDROXIDO 85% lentejas PA131524 POTASIO NITRATO PA-ISO121526 di-POTASIO OXALATO 1-hidrato PA131527 POTASIO PERMANGANATO

PA-ACS-ISO182114 POTASIO PERMANGANATO

0,01 mol/l (0,05N) SV181529 POTASIO PERMANGANATO

0,02 mol/l (0,1N) SV181528 POTASIO PERMANGANATO

0,2 mol/l (1N) SV121523 POTASIO meta-PERYODATO PA131729 POTASIO SODIO TARTRATO 4-hidrato

PA-ACS-ISO121531 POTASIO SORBATO PA131532 POTASIO SULFATO PA-ACS-ISO121534 POTASIO TIOCIANATO PA131540 POTASIO YODATO PA-ACS-ISO131542 POTASIO YODURO PA-ACS-ISO361885 1-PROPANOL (UV-IR-HPLC) PAI131090 2-PROPANOL PA-ACS-ISO321090 2-PROPANOL (PAR) PAI172174 REACTIVO DE LUFF-SCHOORL REA12130 RESINA DOWEX 1X2-100(Cl)

RESINA LEWATIT‚ MP 600(aniónica fuerte I)

816710 INDICADOR FLUORESCENTE UV254131615 ROJO DE FENOL PA-ACS131617 ROJO DE METILO (C.I.13020) PA-ACS131621 SACAROSA PA-ACS141625 SELENIO METAL polvo PRS313192 SODIO solución patrón

Na = 1,000 ± 0,002 g/l AA141669 SODIO METAL, barras

en atmósfera de argón PRS131633 SODIO ACETATO anhidro PA-ACS281634 SODIO ACETATO 1 mol/l (1M) RV131644 di-SODIO tetra-BORATO 10-hidrato

PA-ACS-ISO123314 SODIO BOROHIDRURO PA131648 SODIO CARBONATO anhidro

PA-ACS-ISO122032 SODIO CARBONATO 1-hidrato PA131647 SODIO CARBONATO

10-hidrato PA-ISO131659 SODIO CLORURO PA-ACS-ISO131668 SODIO DIETILDITIOCARBAMATO

3-hidrato PA-ACS131698 SODIO DISULFITO PA-ACS131675 SODIO FLUORURO PA-ACS-ISO121638 SODIO HIDROGENO CARBONATO PA131965 SODIO di-HIDROGENO FOSFATO

1-hidrato PA-ACS121677 SODIO di-HIDROGENO FOSFATO

2-hidrato PA131687 SODIO HIDROXIDO lentejas

PA-ACS-ISO171688 SODIO HIDROXIDO solución 10% p/v

RE182153 SODIO HIDROXIDO

0,05 mol/l (0,05N) SV171694 SODIO HIDROXIDO 0,1 mol/l (0,1N) RE181693 SODIO HIDROXIDO 0,1 mol/l (0,1N) SV181694 SODIO HIDROXIDO 0,1 mol/l (0,1N) SV182155 SODIO HIDROXIDO

0,25 mol/l (0,25N) SVSODIO HIDROXIDO 0,4 mol/l (0,4N)

181692 SODIO HIDROXIDO 0,5 mol/l (0,5N) SV181691 SODIO HIDROXIDO 1 mol/l (1N)

Indicador: Azul de Bromofenol SV182415 SODIO HIDROXIDO 1 mol/l (1N)

Indicador: Fenolftaleína SV182158 SODIO HIDROXIDO 2 mol/l (2N) SV182159 SODIO HIDROXIDO 5 mol/l (5N) SV131703 SODIO NITRITO PA-ACS121705 SODIO NITROPRUSIATO 2-hidrato PA131706 di-SODIO OXALATO PA-ACS131700 SODIO meta-PERYODATO PA-ACS141859 SODIO SALICILATO

(RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX131716 SODIO SULFATO anhidro PA-ACS-ISO141717 SODIO SULFITO anhidro PRS131721 SODIO TIOSULFATO 5-hidrato

PA-ACS

188

Page 189: 18530742 Metodos Oficiales de Analisis Bebidas Alcoholic As

189

M

182160 SODIO TIOSULFATO0,05 mol/l (0,05N) SV

181723 SODIO TIOSULFATO 0,1mol/l (0,1N) SV181722 SODIO TIOSULFATO 1 mol/l (1N) SV281730 SOLUCION TAMPON pH 10 RV272168 TAMPON SOLUCION

pH 4,00 ± 0,02 (20°C) ST272170 TAMPON SOLUCION

pH 7,00 ± 0,02 (20°C) ST272172 TAMPON SOLUCION

pH 9,00 ± 0,02 (20°C) STTETRACLOROETANO

121739 TIMOLFTALEINA PATOLUENO MARCADO CON C14

162378 p-TOLUIDINA PSTORIO NITRATO 4-hidrato

281748 TORNASOL TINTURA RV131252 TRICLOROMETANO estabilizado

con etanol PA-ACS-ISO131759 VERDE DE BROMOCRESOL PA-ACS181969 YODO 0,01 mol/l (0,02N) SV182161 YODO 0,025 mol/l (0,05N) SV181772 YODO 0,05 mol/l (0,1N) SV141782 ZINC METAL, granalla PRS313193 ZINC solución patrón

Zn = 1,000 ± 0,002 g/l AAA17368 ZINC, ALAMBRE, Ø 0,25 mm, 99,99+%141783 ZINC METAL, polvo PRS131787 ZINC SULFATO 7-hidrato PA-ACS

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190

Aditio

Aditivos y coadyuvantes tecnológicos para uso alimentario industrial

PANREAC QUIMICA, S.A., fabrica además delos reactivos para análisis PANREAC, una línea deaditivos y coadyuvantes tecnológicos para uso ali-mentario industrial, que cumplen las especifica-ciones de pureza prescritas por The Food Chemi-cals Codex 4ª ed., complementadas con las exi-gencias específicas fijadas por la legislación espa-ñola y comunitaria de la CEE.

En la relación que sigue se indica denomina-ción del producto, fórmula y número de identifica-ción. Para mayor información, solicite nuestrocatálogo ADITIO 1995.

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201003 ACEITE DE VASELINA204333 ACETOFENONA C8H8O201007 ACETONA CH3COCH3

201008 ACIDO ACETICO GLACIAL CH3COOH E-260202342 ACIDO ADIPICO (CH2CH2COOH)2 E-355201013 ACIDO L(+)-ASCORBICO C6H8O6 E-300202422 ACIDO DL-ASPARTICO C4H7NO4

202034 ACIDO L-ASPARTICO C4H7NO4

201014 ACIDO BENZOICO C6H5COOH E-210201808 ACIDO CITRICO anhidro C6H8O7 E-330201018 ACIDO CITRICO 1-hidrato C6H8O7.H2O E-330201020 ACIDO CLORHIDRICO 37% HCl E-507202019 ACIDO CLORHIDRICO 35% HCI E-507202785 ACIDO DECANOICO C10H20O2

202512 ACIDO ESTEARICO C18H36O2

(Mezcla de ácidos grasos)201669 ACIDO ETILENDIAMINOTETRA-

ACETICO SAL di-SODICA 2-hidrato Na2H2C10H12N2O8.2H2O201030 ACIDO FORMICO 98% HCOOH E-236201029 ACIDO FORMICO 85% HCOOH E-236201032 ACIDO orto-FOSFORICO 85% H3PO4 E-338202344 ACIDO FUMARICO HOOCCHCHCOOH E-297202042 ACIDO L-GLUTAMICO C5H9NO4 E-620201034 ACIDO L(+)-LACTICO CH3CHOHCOOH E-270202368 ACIDO LAURICO C12H24O2

202051 ACIDO DL-MALICO C4H6O5 E-296202591 ACIDO MIRISTICO CH3(CH2)12COOH203389 ACIDO NlCOTINlCO E-375202786 ACIDO OCTANOICO C8H16O2

202345 ACIDO PALMITICO201810 ACIDO PROPIONICO CH3CH2COOH E-280201055 ACIDO SORBICO C6H8O2 E-200201883 ACIDO SUCCINICO HOOCCH2CH2COOH E-363201058 ACIDO SULFURICO 95-98% H2SO4 E-513201065 ACIDO TANICO201066 ACIDO L(+)-TARTARICO (CHOH)2(COOH)2 E-334201792 AGAR E-406202035 DL-ALANINA C3H7NO2

202043 L-ALANINA C3H7NO2

201081 ALCOHOL BENCILICO C6H5CH2OH201103 ALUMINIO POTASIO SULFATO

12-hidrato AIK(SO4)2.12H2O E-522201130 AMONIACO 30% (en NH3) NH4OH E-527201129 AMONIACO 25% (en NH3) NH4OH E-527201119 AMONIO CARBONATO ~(NH4)3(CO3)2H+NH2COONH4 E-503i201121 AMONIO CLORURO NH4Cl E-510201116 AMONIO HIDROGENO CARBONATO (Amonio Bicarbonato) NH4HCO3 E-503ii201127 di-AMONIO HIDROGENO FOSFATO (NH4)2HPO4 E-342ii201126 AMONIO di-HIDROGENO FOSFATO NH4H2PO4 E-342i201140 AMONIO SULFATO (NH4)2SO4 E-517203464 L-ARGININA C6H4N4O2

204109 L-ASPARAGINA anhidra C4H8N2O3

202357 BENZOILO PEROXIDO humectadocon aprox. 25% de agua C14H10O4

203977 D (+)-BIOTINA

191

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201089 iso-BUTANOL C4H10O201082 1-BUTANOL201429 BUTANONA (Metiletilcetona) C4H8O204233 2-ter-BUTIL-4-METOXIFENOL (BHA, Butildroxianisol) C11H16O2 E-320201211 CALCIO ACETATO x-hidrato Ca(CH3COO)2.xH2O E-263201212 CALCIO CARBONATO precipitado CaCO3 E-170i201213 tri-CALCIO di-CITRATO 4-hidrato Ca3(C6H5O7)2.4H2O E-333iii201219 CALCIO CLORURO anhidro

escoriforme CaCl2 E-509201221 CALCIO CLORURO anhidro polvo CaCl2 E-509201215 CALCIO CLORURO 2-hidrato

escoriforme CaCl2.2H2O E-509201232 CALCIO CLORURO 2-hidrato polvo CaCl2.H2O E-509201214 CALCIO CLORURO 6-hidrato CaCl2.6H2O E-509202824 CALCIO CLORURO solución 45%

(en CaCl2.2H2O) E-509201818 CALCIO ESTEARATO ~Ca(C18H35O2)2 E-470a201224 CALCIO FORMIATO C2H2CaO4 E-238201228 tri-CALCIO FOSFATO ~Ca3(PO4)2 E-341iii201227 CALCIO HIDROGENO FOSFATO

anhidro CaHPO4 E-341ii201226 CALCIO HIDROGENO FOSFATO

2-hidrato CaHPO4.2H2O E-341ii201225 CALCIO bis (di-HIDROGENO

FOSFATO) 1-hidrato (Calcio Difosfato) CaH4(PO4)2.H2O E-341i202400 CALCIO HIDROXIDO polvo Ca(OH)2 E-526201230 CALCIO LACTATO 5-hidrato Ca(CH3CHOHCOO)2.5H2O E-327203238 CALCIO PROPIONATO E-282201235 CALCIO SULFATO 2-hidrato CaSO4.2H2O E-516201237 CARBON ACTIVO polvo202416 CARBOXIMETILCELULOSA SAL

SODICA (baja viscosidad) E-466204441 CARBOXIMETILCELULOSA SAL

SODICA (media viscosidad) E-466203922 CARBOXIMETLCELULOSA SAL

SODICA (alta viscosidad) E-466203645 L-CISTINA C6H12N2O4S2 E-921202825 2,6-Di-ter-BUTIL-4-METILFENOL (BHT, Butilhidroxitoluol) C15H24O E-321201286 1,2 DICLOROETANO ClCH2ClCH2

201254 DICLOROMETANOestabilizado con amileno CI2CH2

201877 1-DODECANOL C12H26O201303 ESTAÑO (II) CLORURO 2-hidrato SnCl2.2H2O E-512201086 ETANOL absoluto CH3CH2OH201085 ETANOL 96% v/v CH3CH2OH202695 ETANOL 70% v/v CH3CH2OH201318 ETILO ACETATO CH3COOC2H5

201319 ETILO S-(-)-LACTATO C5H10O3

202047 L-FENILALANINA C9H11NO2

202728 D(-)-FRUCTOSA C6H12O6

202060 GELATINA 80-100 Blooms201339 GLICERINA (Glicerol) C3H8O3 E-422202329 GLICERINA 87% (Glicerol) C3H8O3 E-422201922 GLICERINA tri-ACETATO C9H14O6 E-1518201340 GLICINA H2NCH2COOH E-640

192

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201341 D(+)-GLUCOSA C6H12O6

203140 D(+)-GLUCOSA 1-hidrato C6H12O6.H2O202061 GOMA ARABIGA polvo E-414201076 HIDROGENO PEROXIDO 30% p/v

(100 vol.) estabilizado H2O2

201362 HIERRO (II) SULFATO 7-hidrato FeSO4.7H2O202045 L-HISTIDINA C6H9N3O2

202198 L-HISTIDINA mono-CLORHIDRATO 1-hidrato C6H10ClN3O2.H2O201375 LACTOSA 1-hidrato C12H22O11.H2O202046 L-LEUCINA C6H13NO2

203385 D-(+)-LIMONENO C10H16

201396 MAGNESIO CLORURO 6-hidrato MgCl2.6H2O E-511202029 MAGNESIO ESTEARATO ~Mg(C18H35O2)2 E-470b201399 tri-MAGNESIO di-FOSFATO (Magnesio Mg3(PO4)2.5H2O

5-hidrato orto-fosfato)201927 MAGNESIO HIDROGENO FOSFATO

3-hidrato MgHPO4.3H2O E-343ii201395 MAGNESIO HIDROXI CARBONATO

5-hidrato (Magnesio Carbonato) E-504ii201404 MAGNESIO SULFATO 7-hidrato MgSO4.7H2O E-518201410 MANGANESO (ll) CLORURO 4-hidrato MnCl2.4H2O201413 MANGANESO (ll) SULFATO 1-hidrato MnSO4.H2O202067 D(-)-MANITA (Manitol) C6H14O6 E-421201091 METANOL CH3OH203332 METILO 4-HIDROXIBENZOATO C8H8O3 E-218203209 PARAFINA 51- 53°C lentejas201479 POTASIO ACETATO CH3COOK E-261201487 POTASIO BROMATO KBrO3 E-924201490 POTASIO CARBONATO K2CO3 E-501i201492 tri-POTASIO CITRATO 1-hidrato K3C6H5O7.H2O E-332ii201494 POTASIO CLORURO KCl E-508201522 POTASIO DISULFITO K2S2O5 E-224201513 tri-POTASIO FOSFATO 1-hidrato K3PO4.H2O E-340iii201505 POTASIO HEXACIANOFERRATO (II)

3-hidrato (Potasio Ferrocianuro) K4Fe(CN)6.3H2O E-536201480 POTASIO HIDROGENO CARBONATO (Potasio Bicarbonato) KHCO3 E-501ii201512 di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO

anhidro (di-Potasio orto-Fosfato) K2HPO4 E-340ii

202333 di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO3-hidrato K2HPO4.3H2O E-340ii

201509 POTASIO di-HIDROGENO FOSFATO (mono-Potasioorto-Fosfato) KH2PO4 E-340i

201486 POTASIO HIDROGENO TARTRATO (COO)2KH(CHOH)2 E-336i201515 POTASIO HIDROXIDO 85% lentejas KOH E-525201524 POTASIO NITRATO KNO3 E-252201855 POTASIO NITRITO KNO2 E-249201729 POTASIO SODIO TARTRATO

4-hidrato NaK(COO)2(CHOH)2.4H2O E-337201531 POTASIO SORBATO CH3(CHCH)2COOK E-202201532 POTASIO SULFATO K2SO4 E-515i201533 POTASIO SULFITO201537 POTASIO TARTRATO 1/2-hidrato K2(COO)2(CHOH)2.1/2H2O E-336ii201540 POTASIO YODATO KIO3

201542 POTASIO YODURO KI

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203646 L-PROLINA C5H9NO2

201545 1,2-PROPANODIOL CH2OHCHOHCH3

201090 2-PROPANOL CH3CH2CH2OH201633 SODIO ACETATO anhidro CH3COONa E-262i201632 SODIO ACETATO 3-hidrato CH3COONa.3H2O E-262i203865 SODIO L(+)-ASCORBATO C6H7NaO6 E-301201637 SODIO BENZOATO C6H5COONa E-211201648 SODIO CARBONATO anhidro Na2CO3 E-500i202032 SODIO CARBONATO 1-hidrato Na2CO3.H2O E-500i201647 SODIO CARBONATO 10-hidrato Na2CO3.10H2O E-500i201655 tri-SODIO CITRATO 2-hidrato Na3C6H5O7.2H2O E-331iii201656 tri-SODIO CITRATO 51/2-hidrato Na3C6H5O7.51/2H2O E-331iii201659 SODIO CLORURO NaCl201698 SODIO DISULFITO Na2S2O5 E-223202363 SODIO DODECILO SULFATO (Lauril Sulfato

Sódico) C12H25NaO4S201681 tri-SODIO FOSFATO 1-hidrato Na3PO4.H2O E-339iii201680 tri-SODIO FOSFATO 12-hidrato Na3PO4.12H2O E-339iii201665 SODIO HIDROGENO di-ACETATO (Sodio Diacetato) CH3COONaCH3COOH E-262ii201638 SODIO HIDROGENO CARBONATO (Sodio Bicarbonato) NaHCO3 E-500ii201654 di-SODIO HIDROGENO CITRATO 11/2 Hidrato C6H6Na2O7.11/2H2O E-331ii201679 di-SODIO HIDROGENO FOSFATO (di-Sodio

anhidro orto-Fosfato) Na2HPO4 E-339ii201678 di-SODIO HIDROGENO FOSFATO

12-hidrato Na2HPO4.12H2O E-339ii201965 SODIO di-HIDROGENO FOSFATO (mono-Sodio

1-hidrato orto-Fosfato) NaH2PO4.H2O E-339i201677 SODIO di-HIDROGENO FOSFATO

2-hidrato NaH2PO4.2H2O E-339i201709 di-SODIO di-HlDROGENO PIROFOSFATO H2Na2O7P2 E-450i201687 SODIO HIDROXIDO lentejas NaOH E-524201686 SODIO HIDROXIDO escamas NaOH E-524203307 SODIO LACTATO sol. 50% p/p C3H5NaO3 E-325201702 SODIO NITRATO NaNO3 E-251201703 SODIO NITRITO NaNO2 E-250201711 tetra-SODIO PIROFOSFATO anhidro (tetra-Sodio

Difosfato) Na4P2O7 E-450iii201710 tetra-SODIO PIROFOSFATO (tetra-Sodio

10-hidrato Difosfato) Na4P2O7.10H2O E-450iii201684 SODIO POLIFOSFATO (NaPO3)6 E-452i201716 SODIO SULFATO anhidro Na2SO4 E-514i201715 SODIO SULFATO 10-hidrato Na2SO4.10H2O E-514i201717 SODIO SULFITO anhidro Na2SO3 E-221201720 SODIO TARTRATO anhidro Na2(COO)2(CHOH)2 E-335ii201719 SODIO TARTRATO 2-hidrato Na(COO)2(CHOH)2.2H2O E-335ii201721 SODIO TIOSULFATO 5-hidrato Na2S2O3.5H2O203064 D(-)-SORBITA (Sorbitol) C6H14O6 E-420i201733 TALCO lavado E-553b202475 TIERRA SILICEA purificada y calcinada202101 TITANIO (IV) OXIDO TiO2 E-171202049 L-TRIPTOFANO C11H12N2O2

202048 VAINILLINA C8H8O3

201786 ZINC OXIDO ZnO201788 ZINC SULFATO 1-hidrato ZnSO4.H2O201787 ZINC SULFATO 7-hidrato ZnSO4.7H2O

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