repaso d diapos modificadas 24%5 b1%5 d.9.07 %28dra. bastos%29

SISTEMA RhSISTEMA RhDra. Fabiana BastosDra. Fabiana Bastos

[email protected]@fmed.uba.arDepartamento de Hemoterapia e Departamento de Hemoterapia e

InmunohematologíaInmunohematologíaHospital de Clínicas “José de San Martín”Hospital de Clínicas “José de San Martín”

HISTORIAHISTORIA

1939 Levine y Stetson describen RHPT en una paciente obstetrica.

1940 Landsteiner y Wiener describen un Ac desarrollado en cobayos inmunizados con eritrocitos de Mono Rhesus, que además aglutinaba el 85% de los eritrocitos humanos

Factor Rh

GENÉTICAGENÉTICA

WienerWiener un solo gen con múltiples alelos un solo gen con múltiples alelos cada gen produciría un antígeno cada gen produciría un antígeno

sobre el cual podrían identificarse sobre el cual podrían identificarse varios factoresvarios factores

GENÉTICAGENÉTICA

Fisher-RaceFisher-Race 3 genes estrechamente ligados 3 genes estrechamente ligados

producen antígenos Dproducen antígenos D/d, C/c y E/e/d, C/c y E/e Complejo génico o haplotipos Complejo génico o haplotipos

• DCe, Dce, DCE, DcE, DCe, Dce, DCE, DcE, • dce, dCe, dcE dCE. dce, dCe, dcE dCE.

WienerWiener Fisher- Race Fisher- Race

Gen cromosómico Gen cromosómico Gen Gen cromosómicocromosómico

R1 Rh1

Rhorh´

hr´´

DC

e

DC

e

GENÉTICAGENÉTICA

GENÉTICAGENÉTICA Colins: el locus del Rh está compuesto Colins: el locus del Rh está compuesto

por 2 genes, ubicados en el cromosoma 1 por 2 genes, ubicados en el cromosoma 1 y organizado en 10 exones.y organizado en 10 exones.• Gen Gen RHDRHD Ag DAg D• Gen Gen RHCERHCE Ags C,c,E,e Ags C,c,E,e

Los individuos RhD negativo:Los individuos RhD negativo:• Sólo tienen el gen RHCE, y la ausencia del Sólo tienen el gen RHCE, y la ausencia del

alelo del RHD puede deberse a una deleción.alelo del RHD puede deberse a una deleción.• Pueden tener un genPueden tener un gen RHD RHD no funcional no funcional

En cromosoma 6 se ubica gen En cromosoma 6 se ubica gen RHAGRHAG que que codifica una proteína relacionada con Rhcodifica una proteína relacionada con Rh

NOMENCLATURASNOMENCLATURAS

Fisher-RaceFisher-Race WienerWienerComplejo Complejo genéticogenético

AntígenosAntígenos GenesGenes AglutinógenosAglutinógenos

cDecDe cDecDe RhoRho RhoRho

CDeCDe CDeCDe R1R1 Rh1Rh1

cDEcDE cDEcDE R2R2 Rh2Rh2

CDECDE CDECDE RzRz RhzRhz

cdecde cdecde rr rhrh

CdeCde CdeCde r´r´ rh´rh´

cdEcdE cdEcdE r´´r´´ rh´´rh´´

CdECdE CdECdE ryry rhyrhy

NOMENCLATURASNOMENCLATURAS

Fisher-RaceFisher-Race WienerWiener RosenfieldRosenfield

DD RhoRho Rh1Rh1

CC rh´rh´ Rh2Rh2

EE rh´´ rh´´ Rh3Rh3

cc hr´hr´ Rh4Rh4

ee hr´´ hr´´ Rh5Rh5

PRODUCCION DE ANTIGENOSPRODUCCION DE ANTIGENOS

Gen RHAG:• Produce glicoproteína asociada al Rh• Debe estar presente para la correcta

expresión de los antígenos Rh• Muy similar en estructura al polipéptido

Rh• Forma complejos dentro de la

membrana con el polipéptido Rh


Gen RHD:• Produce glicoproteína RHD

Gen RHCE:• Produce glicoproteína

RHCe RHCE RHcE RHcd


Gen RHD y RHCE tiene 10 exones y son 97% idénticos

Proteínas codificadas difieren en 32 a 35 aa de los 416

Son proteínas integrales de membrana

Atraviesan la membrana 12 veces


C y c difieren en 4 aa solo uno extracelular

E y e difieren solo en 1 aa 3 aa polimórficos en RhC son

idénticos a RhD expresan antígeno G

ESTRUCTURA BIOQUÍMICAESTRUCTURA BIOQUÍMICA

Esquema de los genes y proteínas RHCE, RHD y RHAG.En RHD se representan las diferencias de aminoácidos entre

RHD y RHCE. En RHCE se indican los aminoácidos críticos para la expresión de los antígenos C/c y E/e.

El número de sitios antigénicos varia El número de sitios antigénicos varia dependiendo de los fenotiposdependiendo de los fenotipos

Es el de mayor inmunogenicidad Es el de mayor inmunogenicidad entre todos los antígenos entre todos los antígenos eritrocitarios.eritrocitarios.

Mosaico compuesto por varios Mosaico compuesto por varios epitopes, actualmente se sugiere la epitopes, actualmente se sugiere la existencia de 9 (Dexistencia de 9 (DII a D a DIXIX))

Presenta Presenta variaciones cuantitativas variaciones cuantitativas y cualitativasy cualitativas

ANTIGENO DANTIGENO D

NUMERO DE SITIOS DNUMERO DE SITIOS D

Fenotipo RhFenotipo Rh Número de sitios Número de sitios antigénicosantigénicos

RR11rr 9.900 a 14.6009.900 a 14.600

RRoorr 12.000 a 20.00012.000 a 20.000

RR22rr 14.000 a 16.60014.000 a 16.600

RR11RR11 14.500 a 19.30014.500 a 19.300

RR11RR22 23.000 a 31.00023.000 a 31.000

RR22RR22 15.800 a 31.00015.800 a 31.000

D--D-- 110.000 a 202.000110.000 a 202.000

CUANTITATIVAS:CUANTITATIVAS: D Débil genético: D Débil genético:

• Codifica menos sitios antigénicos Codifica menos sitios antigénicos • Antígeno D completoAntígeno D completo• Mutación de polipéptido RhMutación de polipéptido Rh• Mas frecuente en individuos de raza Mas frecuente en individuos de raza

negranegra

VARIACIONES EXPRESION DVARIACIONES EXPRESION D

CUANTITATIVAS:CUANTITATIVAS: Por efecto de posición C trans: Por efecto de posición C trans:

• Alelo portador de D en haplotipo opuesto Alelo portador de D en haplotipo opuesto al alelo portador de C (posición trans) al alelo portador de C (posición trans) Dce/dCeDce/dCe

• Alteración de la expresión de D debido a Alteración de la expresión de D debido a cambios en la relación espacial en la cambios en la relación espacial en la moleculamolecula

• No ocurre cuando D y C se encuentra en No ocurre cuando D y C se encuentra en el mismo haplotipo (posición cis) DCe/dceel mismo haplotipo (posición cis) DCe/dce


CUALITATIVAS:CUALITATIVAS: D parcial (D mosaico):D parcial (D mosaico):

• Disminución de la expresión de uno o Disminución de la expresión de uno o mas epitopes del polipéptidomas epitopes del polipéptido

• Teoría propuesta por Wiener y UngerTeoría propuesta por Wiener y Unger• Individuos D+ portadores de anti-DIndividuos D+ portadores de anti-D


CUALITATIVAS:CUALITATIVAS: D parcial (D mosaico):D parcial (D mosaico):

• El fenotipo DEl fenotipo DVIVI carece de la mayoría de carece de la mayoría de los epitopes, y es el que reviste mayor los epitopes, y es el que reviste mayor importancia clínicaimportancia clínica

• Los GR DLos GR DVIVI no reaccionan con el anti-D no reaccionan con el anti-D policlonal por la presencia de sólo 3 policlonal por la presencia de sólo 3 epitopes, y puede ser positivo con epitopes, y puede ser positivo con antisueros monoclonales.antisueros monoclonales.


TIPIFICACION CORRECTA DTIPIFICACION CORRECTA DVIVI:: Tipificación con anti-D policlonal (D Tipificación con anti-D policlonal (D

débil)débil) Tipificación con anti-D monoclonal Tipificación con anti-D monoclonal

que no detecta la variante Dque no detecta la variante DVIVI y y reacciona con el resto de los D débilreacciona con el resto de los D débil


Sistema RhSistema RhVariaciones cualitativas del Ag DVariaciones cualitativas del Ag D

Bases molecularesBases moleculares::Intercambios de segmentos de ADN Intercambios de segmentos de ADN entre RHD y RHCE genes híbridos entre RHD y RHCE genes híbridos RHD-CE-D.RHD-CE-D.

Sustitución de aa localizados en la Sustitución de aa localizados en la porción extracelular de la proteína RhDporción extracelular de la proteína RhD

Modificación del epitope antigénicoModificación del epitope antigénico

Sistema RhSistema RhDelecionesDeleciones

RhRhnullnull (---/---): producido por un gen (---/---): producido por un gen supresor (Xsupresor (X11r)r)

RhRhmodmod: supresión incompleta de la : supresión incompleta de la expresión del gen Rh.expresión del gen Rh.

D- -D- -: falla en la codificación del : falla en la codificación del material Rh o codifican proteínas Rh material Rh o codifican proteínas Rh sin actividad en los sitios CcEesin actividad en los sitios CcEe

Sistema RhSistema RhAplicaciones de la biología Aplicaciones de la biología

molecularmolecular Estudios de Ags fetales a partir de Estudios de Ags fetales a partir de

células de líquido amniótico en la EHP.células de líquido amniótico en la EHP. Tipificación Rh en pacientes con AHAI, Tipificación Rh en pacientes con AHAI,

cuando los autoanticuerpos dificultan su cuando los autoanticuerpos dificultan su determinación.determinación.

Determiniación del fenotipo Rh en Determiniación del fenotipo Rh en pacientes recientemente transfundidos.pacientes recientemente transfundidos.

Tipificación de eritrocitos con variantes Tipificación de eritrocitos con variantes cuantitativas y cualitativascuantitativas y cualitativas

Sistema RhSistema RhCaracterísticas de los Características de los

anticuerposanticuerpos Resultan de la exposición al Ag (transfusión o Resultan de la exposición al Ag (transfusión o embarazos)embarazos)

Son de naturaleza IgGSon de naturaleza IgG Excepcionalmente pueden ser naturales (anti-E,anti-Excepcionalmente pueden ser naturales (anti-E,anti-

CCWW).). El inmunógeno más potente es el D, seguido del c y El inmunógeno más potente es el D, seguido del c y

E).E). Reaccionan preferentemente a 37º, en medio Reaccionan preferentemente a 37º, en medio

antiglobulínico o enzimático.antiglobulínico o enzimático. Persisten por años y pueden causar reacciones Persisten por años y pueden causar reacciones

hemolíticas postransfusionales tardías.hemolíticas postransfusionales tardías. Algunos anticuerpos presentan”Algunos anticuerpos presentan”efecto dosisefecto dosis” ”

Sistema RhSistema RhImportancia clínicaImportancia clínica

La inmunogenicidad del Ag D, hace que el La inmunogenicidad del Ag D, hace que el 70-80% de los individuos D- puedan 70-80% de los individuos D- puedan sensibilizarse, si reciben GR D +.sensibilizarse, si reciben GR D +.

1 ml de sangre D + tiene un 25% 1 ml de sangre D + tiene un 25% probabilidad de sensibilizar a un receptor probabilidad de sensibilizar a un receptor D –D –

Sólo un 7-8% de los individuos D – son Sólo un 7-8% de los individuos D – son completamente “no respondedores”completamente “no respondedores”

Mujeres con fenotipo DMujeres con fenotipo DIVIV no deben recibir no deben recibir unidades D +, y deben recibir profilaxis unidades D +, y deben recibir profilaxis para la EHP.para la EHP.

Sistema RhSistema RhImportancia clínicaImportancia clínica

Grupo sanguíneo más complejo y Grupo sanguíneo más complejo y polimórfico de la membrana eritrocitaria.polimórfico de la membrana eritrocitaria.

Compuesto por más de 45 antígenos.Compuesto por más de 45 antígenos. Interés clínicoInterés clínico

Obstetricia Obstetricia • EHPEHP

Medicina TransfusionalMedicina Transfusional• EHPEHP• AHAIAHAI• RHPTRHPT

ANTIGENOSANTIGENOS

D f Ew VS cE Rh32 Evans Crawford JAL

C Ce G CG hrH Rh33 Rh39 Nou STEM

E Cw Hro CE Rh29 HrB Tar Riv FPTT

c Cx Hr Dw Goa Rh35 Rh41 Sec MAR

e V hrS "c-like" hrB Bea Rh42 Dav BARC

ROL BIOLOGICOROL BIOLOGICO

Sugerencia de Sugerencia de Función EstructuralFunción Estructural: : Sujetos Rh Null (carecen Ag. Rh29) Sujetos Rh Null (carecen Ag. Rh29) padecen un Síndrome con estomatocitos.padecen un Síndrome con estomatocitos.

Disminución de la expresión Disminución de la expresión antigénicaantigénica de los Ags. del Sistema Rh de los Ags. del Sistema Rh en Leucemias y otras Enfermedades en Leucemias y otras Enfermedades Oncohematológicas.Oncohematológicas.

Función de TransporteFunción de Transporte en la en la Membrana: Aumento de permeabilidad Membrana: Aumento de permeabilidad catiónicacatiónica

ANTIGENOSANTIGENOS

son sintetizados en el glóbulo rojoson sintetizados en el glóbulo rojo son detectados solamente en los hematíesson detectados solamente en los hematíes sus sus determinantes proteicosdeterminantes proteicos están están

representando el producto primario representando el producto primario codificado por un gencodificado por un gen

se heredan como rasgos Codominantesse heredan como rasgos Codominantes

DEFINICIONESDEFINICIONES

Un Un antígenoantígeno de grupo sanguíneo es una de grupo sanguíneo es una estructura, localizada principalmente en la estructura, localizada principalmente en la membrana eritrocitaria, que es capaz de membrana eritrocitaria, que es capaz de reaccionar con el anticuerpo específicoreaccionar con el anticuerpo específico

Un Un fenotipofenotipo describe los antígenos que describe los antígenos que están presentes o ausentes en los están presentes o ausentes en los hematíes de un individuo, lo cual fue hematíes de un individuo, lo cual fue determinado por los anticuerpos determinado por los anticuerpos empleados en las pruebas de tipificación empleados en las pruebas de tipificación glóbulos rojosglóbulos rojos


Los términos “Los términos “genotipogenotipo” y “” y “fenotipofenotipo” ” tienen definiciones específicas y distintas. tienen definiciones específicas y distintas.

Los glóbulos rojos pueden ser fenotipificados.Los glóbulos rojos pueden ser fenotipificados. No pueden ser genotipificados a menos que No pueden ser genotipificados a menos que

se realice un estudio familiar con resultados se realice un estudio familiar con resultados concluyentes o un análisis de ADN.concluyentes o un análisis de ADN.

Un Un genotipogenotipo es es siempresiempre una interpretación una interpretación que es inferida a partir de los que es inferida a partir de los fenotiposfenotipos


Las dos principales razones por las Las dos principales razones por las cuales los hematíes no pueden ser cuales los hematíes no pueden ser genotipificados son:genotipificados son:• las pruebas serológicas revelan la las pruebas serológicas revelan la

presencia o ausencia de antígenos, presencia o ausencia de antígenos, nono de genes, y de genes, y

• los hematíes en circulación no poseen los hematíes en circulación no poseen núcleo y por lo tanto no expresan genesnúcleo y por lo tanto no expresan genes


Dado que un genotipo de grupo Dado que un genotipo de grupo sanguíneo es una interpretación del sanguíneo es una interpretación del fenotipo de un individuo, deberá fenotipo de un individuo, deberá calificarse como un genotipo calificarse como un genotipo probableprobable


Los Los homocigotashomocigotas son individuos con son individuos con dos genes idénticos.dos genes idénticos.

Los Los heterocigotasheterocigotas son aquellos con son aquellos con dos genes alélicos diferentes. dos genes alélicos diferentes.

Estos términos no son utilizados para Estos términos no son utilizados para describir eritrocitos; sino para describir eritrocitos; sino para describir situaciones genéticas. describir situaciones genéticas.


En este sistema las notaciones En este sistema las notaciones emplean simples letras (emplean simples letras (CDECDE), ), superíndices (superíndices (CCww, etc.) y términos , etc.) y términos numéricos (numéricos (Rh2Rh2))

Los genes se escriben en itálicas Los genes se escriben en itálicas empleando el nombre del sistema y empleando el nombre del sistema y el número del antígeno como un el número del antígeno como un superíndice, p. ej., superíndice, p. ej., RhRh44..

El fenotipo puede anotarse El fenotipo puede anotarse • con letras (con letras (D+C+E-c+e+D+C+E-c+e+) ) • con números (con números (Rh:1,2,-3,4,5Rh:1,2,-3,4,5). ).

Un complejo génico (Un complejo génico (haplotipohaplotipo) puede ) puede indicarse en términos CDE o mediante el indicarse en términos CDE o mediante el uso de un símbolo de gen. El uso de un uso de un símbolo de gen. El uso de un símbolo de gen solo se aplica cuando se símbolo de gen solo se aplica cuando se usa CDE taquigráfico (corto). usa CDE taquigráfico (corto).

El símbolo de gen El símbolo de gen RR denota la presencia denota la presencia de un gen de un gen DD; en tanto que ; en tanto que rr indica la indica la ausencia de un gen ausencia de un gen DD..


DENSIDAD ANTIGENICADENSIDAD ANTIGENICA

AntígenosAntígenos Copias por GRCopias por GR

DD 9.900 - 33.0009.900 - 33.000

CC 7.200 - 56.4007.200 - 56.400

EE 17.900 - 27.50017.900 - 27.500

cc 37.000 – 85.00037.000 – 85.000

ee 13.400 – 24.40013.400 – 24.400

La proteína Rh cruza la membrana del G.R.

Gen RHD :10 exones codificando regiones Código para

proteínas

3pares de bases

1 triplete =

1 aminoácido

BASE GENETICA DE LA PROTEINA RH

Rh Positivo Rh Negativo

Gen RHD

Gen RHCE

Proteína D

Proteína Cc y Ee Proteína Cc y Ee

Gen RHD Gen RHCE

Intrón 4, 600 pares de bases más largo que el Intrón 4 del gen RHD

IMPORTANCIA CLINICAIMPORTANCIA CLINICA

Rh NegativoRh Negativo productores de productores de Anti-Anti-DD::

80%80% de los receptores de grandes de los receptores de grandes volúmenes de sangre D positivovolúmenes de sangre D positivo

20%20% de los transfundidos con plaquetas de los transfundidos con plaquetas provenientes de donantes D positivoprovenientes de donantes D positivo

10%10% de las mujeres que han tenido de las mujeres que han tenido hijos D positivos ABO compatibleshijos D positivos ABO compatibles

INCIDENCIA ANTIGENOSINCIDENCIA ANTIGENOS

AntígenosAntígenos Frecuencia en %Frecuencia en %

DD 8585

CC 6868

EE 2929

cc 8080

ee 9898

HAPLOTIPOS RhHAPLOTIPOS Rh

RR11 CDeCDe

rr cdecde

RR22 cDEcDE

RRoo cDecDe

r’r’ CdeCde

r’’r’’ cdEcdE

RRzz CDECDE

rryy CdECdE

NOMENCLATURA NOMENCLATURA FISHER-RACE y WIENERFISHER-RACE y WIENER

DD RR D (ausente) D (ausente) rr

Considerando sólo los genes Considerando sólo los genes CC y/o y/o EE en el haplotipo en el haplotipo

Gen Gen RR Gen Gen rr CCEE 11 ’’ CCEE 22 ”” CECE oo CCEE zz yy

HERENCIA RhHERENCIA Rh

FENOTIPOS Y GENOTIPOSFENOTIPOS Y GENOTIPOS

Anti-DAnti-D Anti-Anti-CC

Anti-EAnti-E Anti-cAnti-c Anti-eAnti-e FenotipFenotipoo

Genotipo mas Genotipo mas probableprobable

++ ++ ++ ++ ++ DCEceDCEce CDe/cDECDe/cDE RR11RR22

++ ++ oo ++ ++ DCceDCce CDe/cdeCDe/cde RR11rr

++ oo ++ ++ ++ DEceDEce cDE/cdecDE/cde RR22rr

++ ++ oo oo ++ DCeDCe CDe/CDeCDe/CDe RR11RR11

++ oo ++ ++ oo DEcDEc cDE/cDEcDE/cDE RR22RR22

++ oo oo ++ ++ DceDce cDe/cdecDe/cde RRoorr

++ ++ ++ oo ++ DCEcDCEc CDE/CDeCDE/CDe RRzzRR11

++ ++ ++ ++ oo DCEeDCEe CDE/cDECDE/cDE RRzzRR22

++ ++ ++ oo oo DCEDCE CDE/CDECDE/CDE RRzzRRzz






++ ++ oo ++ ++ DCceDCce CDe/cdECDe/cdE RR11r’’r’’














++ oo ++ ++ ++ DEceDEce cDE/CdecDE/Cde RR22r’r’














++ ++ oo oo ++ DCeDCe CDE/cdeCDE/cde RRzzrr














++ oo ++ ++ oo DEcDEc CDE/cDeCDE/cDe RRzzRRoo













++ oo ++ ++ oo DEcDEc CDE/cDeCDE/cDe RRzzRRoo

++ oo oo ++ ++ DceDce cDe/CdEcDe/CdE RRoorryy










++ oo ++ ++ ++ DEceDEce CDe/cDeCDe/cDe RR11RRoo













++ oo ++ ++ ++ DEceDEce CDe/cDeCDe/cDe RR11RRoo

++ ++ oo oo ++ DCeDCe CDe/CdeCDe/Cde RR11r’r’













++ ++ oo oo ++ DCeDCe cDE/cDecDE/cDe RR22RRoo













++ ++ oo oo ++ DCeDCe cDE/cDecDE/cDe RR22RRoo

++ oo ++ ++ oo DEcDEc cDe/cdEcDe/cdE RRoor’’r’’













++ oo ++ ++ oo DEcDEc CDe/CdeCDe/Cde RR11r’r’














++ oo oo ++ ++ DceDce cDE/cdEcDE/cdE RR22r’’r’’














++ ++ ++ oo ++ DCEcDCEc cDe/cDecDe/cDe RRooRRoo













++ ++ ++ oo ++ DCEeDCEe CDE/CDeCDE/CDe RRzzRR11














++ ++ ++ ++ oo DCEeDCEe CDE/CdeCDE/Cde RRzzr’r’













++ ++ ++ ++ oo DCEeDCEe CDE/CdeCDE/Cde RRzzr’r’

++ ++ ++ oo oo DCEDCE CDe/CdECDe/CdE RR11rryy











++ ++ ++ ++ oo DCEcDCEc CDE/cDECDE/cDE RRzzRR22

DCEeDCEe CDE/cDECDE/cDE RRzzRR22













DCEeDCEe CDE/cdECDE/cdE RRzzr’’r’’













DCEeDCEe CDE/cdECDE/cdE RRzzr’’r’’

++ ++ ++ oo oo DCEDCE cDE/CdEcDE/CdE RR22rryy













++ ++ ++ oo oo DCEDCE CDE/CdECDE/CdE RRzzrryy





oo oo oo ++ ++ cece cde/cdecde/cde r r r r

oo ++ oo ++ ++ CceCce Cde/cdeCde/cde r´ r r´ r

oo oo ++ ++ ++ cEecEe cdE/cdecdE/cde r” rr” r

oo ++ oo oo ++ CeCe Cde/CdeCde/Cde r´ r´ r´ r´

oo oo ++ ++ oo cEcE cdE/cdEcdE/cdE r” r”r” r”

oo ++ ++ ++ ++ CcEeCcEe Cde/cdECde/cdE r´ r” r´ r”

oo ++ ++ oo ++ CEeCEe CdE/CdeCdE/Cde rry y r´r´

oo ++ ++ ++ oo CcECcE CdE/cdECdE/cdE rry y r”r”

oo ++ ++ oo oo CECE CdE/CdECdE/CdE rry y rryy











oo ++ ++ oo ++ CEeCEe CdE/cdeCdE/cde rry y rr













oo ++ ++ oo ++ CEeCEe CdE/CdeCdE/Cde rry y r´r´



VARIACIONES CUANTITATIVASVARIACIONES CUANTITATIVAS

cDE/cDE (R2R2)cDE/cDE (R2R2) CDe/cDE (R1R2)CDe/cDE (R1R2) CDe/CDe (R1R1) CDe/CDe (R1R1) cDE/cde (R2r)cDE/cde (R2r) CDe/cde (R1r)CDe/cde (R1r) CDe/Cde (R1r’) - dcE (r”)- dCceCDe/Cde (R1r’) - dcE (r”)- dCcess


ANTÍGENOS D REALZADOSANTÍGENOS D REALZADOS D--D-- D(C)(e) Rh:-32,-35D(C)(e) Rh:-32,-35 D(C)(e) Rh:32D(C)(e) Rh:32 DDIVaIVacece DDIVaIVa(C)(C) Fenotipo En(a-)Fenotipo En(a-)


Antígenos D DébilAntígenos D Débil

El término DEl término Duu es amplio e impreciso es amplio e impreciso Los G.R. eran aglutinados por un anti-D Los G.R. eran aglutinados por un anti-D

pero no por otropero no por otro Incluía Ags. D débil y D parcialIncluía Ags. D débil y D parcial No existe un anticuerpo Anti-DNo existe un anticuerpo Anti-Duu

La identificación de DLa identificación de Duu depende de los depende de los reactivos y los métodos empleadosreactivos y los métodos empleados

VARIACIONES CUALITATIVASVARIACIONES CUALITATIVAS

Corresponden a Corresponden a Fenotipos D Fenotipos D ParcialParcial, con o sin variaciones , con o sin variaciones

cuantitativas asociadascuantitativas asociadas

Antígenos D ParcialAntígenos D Parcial Antígenos D Parcial DébilAntígenos D Parcial Débil

Eritrocitocon

Antígenos

Ag. constituídopor Epitopes

Anticuerpos dirigidoshacia sus correspondientesEpitopes

Differences between normal D, D-weak and partial-D phenotypesDifferences between normal D, D-weak and partial-D phenotypes

Antígeno D Normal


Antígeno D Normal

Epitope Antígeno

Epitope: Normal

Cantidad de Ag: Normal


Epitope Antígeno

Epitope: Normal


Antígeno D Normal D Débil

Normal

Reducido


Epitope Antígeno

Epitope: Normal


Antígeno D Normal D Débil

Normal

Reducida

Variante D

Mutados

Normal o Reducida

TIPOS DE REACTIVOS ANTI-DTIPOS DE REACTIVOS ANTI-D

Policlonal c/ Alta Concentración Policlonal c/ Alta Concentración ProteicaProteica

Policlonal c/ Modificación QuímicaPoliclonal c/ Modificación Química Monoclonal Monoclonal Mezcla Policlonal/MonoclonalMezcla Policlonal/Monoclonal Mezcla Monoclonal/MonoclonalMezcla Monoclonal/Monoclonal

TIPIFICACION RhTIPIFICACION Rh

Técnica en placa/portaobjetosTécnica en placa/portaobjetos Técnica en tuboTécnica en tubo Detección de D débilDetección de D débil

Prueba de Coombs IndirectaPrueba de Coombs Indirecta

Sistema RhSistema RhTipificaciones falsas positivasTipificaciones falsas positivas

Uso inadvertido de reactivo Uso inadvertido de reactivo incorrecto.incorrecto.

Glóbulos rojos poliaglutinables.Glóbulos rojos poliaglutinables. Presencia de autoanticuerpos o Presencia de autoanticuerpos o

proteínas anormales en el suero del proteínas anormales en el suero del paciente.paciente.

Reactivos contaminadosReactivos contaminados

Sistema RhSistema RhTipificaciones falsas negativasTipificaciones falsas negativas

Uso inadvertido de reactivo Uso inadvertido de reactivo equivocadoequivocado

Ausencia u omisión del reactivoAusencia u omisión del reactivo Variantes del Ag DVariantes del Ag D Técnica incorrectaTécnica incorrecta Reactivos mal conservados o Reactivos mal conservados o

vencidosvencidos

ANTIGENOS D PARCIALANTIGENOS D PARCIAL

Ag D compuesto de alrededor de Ag D compuesto de alrededor de 37 37 epitopesepitopes

Patrones de reacciones serológicas Patrones de reacciones serológicas conformaron modelos de conformaron modelos de 66, , 88, , 99, , 1515, , 1616, , 3030 y y 3737 epitopes epitopes

Los individuos sin algún epitope y Los individuos sin algún epitope y expuestos a un Ag D completo pueden expuestos a un Ag D completo pueden producir un aloanti-D dirigido producir un aloanti-D dirigido contra la contra la parcela ausenteparcela ausente

REACTIVOS QUE DETECTEN DREACTIVOS QUE DETECTEN DVI VI

y D DEBILy D DEBIL Es importante tipificar todas las Es importante tipificar todas las

presentaciones de Ag. D que presentaciones de Ag. D que puedan causar inmunización en puedan causar inmunización en sujetos Rh Negativosujetos Rh Negativo

Ideales para tipificar a:Ideales para tipificar a:• DonantesDonantes• RN de madres Rh negativasRN de madres Rh negativas

REACTIVOS QUE REACTIVOS QUE NONO DETECTEN DETECTEN DDVI VI y D DEBILy D DEBIL

Es una política transfusional Es una política transfusional segura ya que serán segura ya que serán transfundidos con sangre Rh transfundidos con sangre Rh negativa aunque pertenezcan a negativa aunque pertenezcan a una clasificación D muy débiluna clasificación D muy débil

Ideales para tipificar a:Ideales para tipificar a:• Receptores de transfusiónReceptores de transfusión• Pacientes obstétricasPacientes obstétricas

GR + Anti-D

Incubación

30´a 37ºC

3 lavados y agregar SAGH

Positivo

Negativo

Centrifugar y leer

Muchas GraciasMuchas Gracias

repaso d diapos modificadas 24%5 b1%5 d.9.07 %28dra. bastos%29

Technology

d ia d

sitios d

d parcial d mosaico

d debido

antid variaciones expresion

d en haplotipo opuesto

d dbil gentico

y organizado en