resist en cia a de staphylococcus aureus islados de leche de vacas con mastitis de tjaro michoacn

UNIVERSIDAD MICHOACANA DE SAN NICOLÁS DE HIDALGO

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

TESIS

RESISTENCIA ANTIBIÓTICA DE Staphylococcus aureus AISLADOS DE LECHE DE VACAS CON MASTITIS DE TÉJARO MICHOACÁN

QUE PRESENTA

EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCÍA

PARA OBTENER EL TÍTULO DE

MÉDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA

MORELIA, MICHOACÁN., OCTUBRE DE 2011.

UNIVERSIDAD MICHOACANA

DE SAN NICOLÁS DE HIDALGO

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

TESIS

RESISTENCIA ANTIBIÓTICA DE Staphylococcus aureus

AISLADOS DE LECHE DE VACAS CON MASTITIS DE TÉJARO MICHOACÁN

QUE PRESENTA


PARA OBTENER EL TÍTULO DE

MÉDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA

ASESOR: MC. José Luis Carlos Bedolla Cedeño

COASESORES: QFB. Rosalva Mejía Alfaro

DR. José Herrera Camacho

MORELIA, MICHOACÁN., OCTUBRE DE 2011.

Resistencia antibiótica de Staphylococcus aureus aislados de leche de vacas con mastitis de Téjaro Michoacán


La presente investigación titulada “Resistencia antibiótica de Staphylococcus aureus

aislados de leche de vacas con mastitis de Téjaro Michoacán”, forma parte del proyecto

de investigación 14.10-2011. “Uso de extractos de semillas de cítricos para el control

de la mastitis bovina”, financiado por la Coordinación de la Investigación Científica de la

Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo.



DEDICATORIA

Quisiera iniciar brindándoles las gracias a mis padres José Luis Carlos Bedolla Cedeño

y Edith García Cedeño por el apoyo que me han dado para la realización de mis

estudios y por siempre estar ahí cuando los necesito.

A mis hermanos José Carlos, Brenda y Karla por haberme apoyado en toda mi carrera.



AGRADECIMIENTOS

A mis padres y a todas aquellas personas que al paso del tiempo de esta carrera me

hicieron y brindaron su apoyo y dedicación para que pudiese hoy terminar mis estudios

y presentar el siguiente trabajo.

Gracias a mis maestros, por compartir sus conocimientos y vivencias conmigo.



CURRICULUM VITAE

Eduardo Austreberto Bedolla García

Fecha de Nacimiento: 29 de septiembre de 1986

Lugar de Nacimiento: Morelia Michoacán Pascasio Ortiz de Letona No. 189 Col. Agustín Arriaga Rivera. Morelia Michoacán. Tel. 3 26 70 19 Cel. 4432571919

E-mail: [email protected]

FORMACIÓN ACADÉMICA

1993-1998. Primaria. Escuela Primaria “18 de Marzo”. Morelia, Michoacán.

1999-2001. Secundaria. Escuela Secundaria Federal No. 6 “Dr. Alfonso García Robles”.

Morelia, Michoacán.

2001- Bachillerato. Centro de Bachillerato Tecnológico Agropecuario No. 7

La Huerta, Michoacán.

2002- Preparatoria. Colegio de San Nicolás de Hidalgo. Universidad Michoacana

de San Nicolás de Hidalgo.

2003-2006. Bachillerato. Colegio de Bachilleres del Estado de Michoacán. Plantel

Quiroga. Quiroga, Michoacán.

2006-2011. Licenciatura. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad

Michoacana de San Nicolás de Hidalgo.



ASISTENCIA A CURSOS, TALLERES O SEMINARIOS DE ACTUALIZACIÓN

PROFESIONAL

Curso de Capacitación de Informática. Realizado de Febrero a Julio de 2006, en el

Colegio de Bachilleres “Plantel Quiroga”, con un total de 56 créditos.

6° Curso Internacional Avances en el Diagnóstico y Control de la Mastitis, realizado del

17 al 20 de 0ctubre de 2006 en el Centro Universitario de Ciencias Biológicas y

Agropecuarias de la Universidad de Guadalajara, Jalisco. México (valor curricular de 40

horas).

XII Congreso Veterinario de León. Realizado del 5 al 8 de Septiembre del 2007, en la

ciudad de León Guanajuato. Con una duración de 32 horas.

Primer Congreso Regional de Buiatría. Realizado los días 21 y 22 de Septiembre de

2007, por la Asociación Michoacana de Médicos Veterinarios Zootecnistas Especialistas

en Bovinos A. C., en Morelia, Michoacán.

VI Ciclo de Conferencias AMVEC de la Piedad. Realizado por la Asociación de Médicos

Veterinarios Especialistas en Cerdos de la Piedad, A. C., el 28 de Septiembre del 2007,

en la ciudad de La Piedad Michoacán. Con una duración de 8 horas.

Seminario de “anestesia y manejo del dolor”, Realizado por Especialidades Virbac

CANIGEN 2008, el 14 de Marzo de 2008, en la ciudad de Morelia, Michoacán. Con una

duración de 5 horas.

XIV Congreso Veterinario de León. Realizado del 2 al 5 de Septiembre del 2009, en la

ciudad de León Guanajuato.

Curso Internacional Diagnóstico y Control de la Mastitis Bovina, realizado del 12 al 15

de Abril de 2010 en el Centro Universitario de Ciencias Biológicas y Agropecuarias de

la Universidad de Guadalajara, Jalisco. México (40 horas de duración).



3er. Congreso Regional de Buiatría. Realizado los días 10 y 11 de Junio del 2010, en la

Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Michoacana

de San Nicolás de Hidalgo.

Participación en la segunda semana nacional de vacunación antirrábica canina de

reforzamiento, llevada a cabo del20 al 24 de Septiembre de 2010, en la ciudad de

Morelia, Michoacán.

Curso de Capacitación “Reconocimiento de la principales enfermedades exóticas y

emergentes de los animales, su vigilancia, prevención y control”, efectuado los días 20

al 23 de Junio de 2011.

3er Congreso Internacional y 12º Congreso Nacional de Investigación Socioeconómica

y Ambiental de la Producción Pecuaria, Realizado los días 18,19 y 20 de Mayo del 2011

en la ciudad de Morelia Michoacán.

Curso de Inseminación Artificial en Bovinos, realizado los días 8 y 9 de Julio de 2010 en

el municipio de Tarímbaro con una duración de 25 horas. Gobierno del Estado de

Michoacán y Secretaría de Desarrollo Rural.

10º Precongreso Internacional de Actualización Veterinaria. Realizado el día 10 de

agosto del 2011 en la ciudad de León Guanajuato México.

2° Congreso Internacional de Inocuidad Pecuaria. Realizado los días 1 y 2 de

Septiembre de 2011 en la ciudad de Morelia Michoacán.

ASISTENCIA A CURSOS, TALLERES O SEMINARIOS DE ACTUALIZACIÓN

PEDAGÓGICA

VIII Curso-Taller Estatal del Educador Popular. Sección XVIII SNTE-CNTE. Realizado

del 18 al 22 de Julio de 2011 en la Ciudad de Morelia, Michoacán.



PARTICIPACIÓN EN ARTÍCULOS EN EXTENSO Artículo ”Prevalencia de mastitis bovina en Téjaro, Michoacán. Publicado en las

memorias del XVII Encuentro de Investigación Veterinaria y producción Animal.

Realizado los días 6 y 7 de Diciembre de 2006 en la FMVZ-UMSNH.

Artículo “Técnicas de inseminación artificial en ovinos”. Publicado el 24 de Abril de 2007

en Monografías.com Área: Biología.

Artículo “Frecuencia y etiología de la mastitis subclínica en el municipio de Cherán

Michoacán, presentado en el V Encuentro Participación de la Mujer en la Ciencia.

Realizado del 21 al 23 de mayo de 2008, por el Centro de Investigaciones en Óptica, A.

C. León, Guanajuato.

Artículo “Frecuencia y etiología de la mastitis bovina en Cotzio municipio deTarímbaro

Michoacán, presentado en el V Encuentro Participación de la Mujer en la Ciencia.

Realizado del 21 al 23 de mayo de 2008, por el Centro de Investigaciones en Óptica, A.

C. León, Guanajuato.

Artículo “Incidencia y etiología de la mastitis bovina en Maravatío Michoacán,

Presentado en el XXI Congreso panamericano de Ciencias Veterinarias. Realizado del

12 al 16 de octubre de 2008 en la ciudad de Guadalajara, Jalisco.

Artículo “Etiología de la mastitis bovina en Maravatío Michoacán, presentado en el VI

Encuentro Participación de la Mujer en la Ciencia. Realizado del 13 al 15 de mayo de

2009, por el Centro de Investigaciones en Óptica, A. C. León, Guanajuato.

Artículo “Prevalencia de mastitis subclínica en Pátzcuaro Michoacán, presentado en el

VI Encuentro Participación de la Mujer en la Ciencia. Realizado del 13 al 15 de mayo

de 2009, por el Centro de Investigaciones en Óptica, A. C. León, Guanajuato.

Artículo “Determinación de consumo de alimento y ganancia de peso en conejos

(oryctolagus cuniculus) durante la etapa de engorda con dos diferentes dietas

comerciales” Presentado en el VII Encuentro Participación de la Mujer en la Ciencia.



Realizado en el Centro de Investigaciones en Óptica, A. C. del 26 al 28 de Mayo de

2010 en la Ciudad de León Guanajuato.

Artículo “Manejo del becerro recién nacido hasta el destete en un hato lechero en el

GGAVATT Ganaderos Unidos de Téjaro, Michoacán” Presentado en el VII Encuentro

Participación de la Mujer en la Ciencia. Realizado en el Centro de Investigaciones en

Óptica, A. C. del 26 al 28 de Agosto de 2010 en la Ciudad de León Guanajuato.

Artículo “Origen y aislamiento microbiológico de mastitis clínica en el ganado lechero en

el municipio de Tarímbaro Michoacán” Presentado en el V Congreso Universitario de

Ciencias Veterinarias. Realizado en Puerto Vallarta, Jalisco, del 24 al 26 de Septiembre

de 2008.

PARTICIPACIÓN COMO PONENTE EN CONGRESOS Y OTROS EVENTOS INTERNACIONALES, NACIONALES Y ESTATALES Ponencias estatales

Ponencia “Prevalencia de mastitis en el ganado lechero del municipio de Tarímbaro,

Michoacán”, presentada en el marco de las actividades académicas del 2do. Congreso

Estatal de Ciencia y Tecnología, celebrado en el Colegio de Michoacán, A. C., el 10 de

noviembre de 2006. Zamora, Michoacán.

Ponencia “Prevalencia y etiología de la mastitis en el ganado lechero de Téjaro,

Michoacán”, presentada en el marco del II Congreso de Investigación Científica,

realizado del 21 al 24 de noviembre de 2006, en la ciudad de Morelia, Michoacán.

Ponencia “Prevalencia de mastitis bovina en el municipio de Tarímbaro, Michoacán”,

presentada en el marco del II Congreso de Investigación Científica, realizado del 21 al

24 de noviembre de 2006, en la ciudad de Morelia, Michoacán.



Ponencias nacionales

Ponencia “Prevalencia de mastitis bovina en el municipio de Tarímbaro, Michoacán”,

presentada en el III Congreso Universitario de Ciencias Veterinarias. Realizada los días

29 y 30 de septiembre de 2006 en Puerto Vallarta Jalisco. Centro Universitario de

Ciencias Biológicas y Agropecuarias. Universidad de Guadalajara y Universidad

Autónoma de Aguascalientes.

Ponencia “Prevalencia y etiología de la mastitis en el ganado lechero de Téjaro,

Michoacán”, presentada en el III Congreso Universitario de Ciencias Veterinarias.

Realizada los días 29 y 30 de septiembre de 2006 en Puerto Vallarta Jalisco. Centro

Universitario de Ciencias Biológicas y Agropecuarias. Universidad de Guadalajara y

Universidad Autónoma de Aguascalientes.

Ponencia “Frecuencia de mastitis bovina causada por estafilococos coagulasa

negativos en Téjaro Michoacán”, presentada en la XX Semana de la Investigación

Científica. Realizada del 23 al 27 de noviembre de 2009 en el Centro Universitario de

Ciencias Biológicas y Agropecuarias. Universidad de Guadalajara, Jalisco.

Ponencia “Determinación de la calidad de la leche del bote de recepción de los hatos

lecheros del municipio de Tarímbaro, Michoacán”. Presentado en el VII Encuentro

Participación de la Mujer en la Ciencia. Realizado en el Centro de Investigaciones en

Óptica, A. C. del 26 al 28 de Agosto de 2010 en la Ciudad de León Guanajuato.

Ponencia “Resistencia antibiótica de Staphylococcus aureus y estafilococos coagulasa

negativos aislados de leche de vacas con mastitis subclínica de Téjaro Michoacán”,

presentada en el XXXV Congreso Nacional de Buiatría en León, Guanajuato, realizado

los días 11 al 13 de Agosto del 2011.

Ponencias internacionales

Ponencia “Etiology of subclinic mastitis in Patzcuaro Michoacan, presentado in The

International Conference MASTITIS CONTROL 2008 „From Science to Practice‟.



Realizada del 30 de septiembre al 2 de Octubre de 2008. In The Hague, the

Netherlands.

Ponencia “Determinación del conteo de células somáticas con fossomatic en cabras

lecheras de Ecuandureo Michoacán”. Presentada en el XIV Congreso Latinoamericano

de Buiatría. Realizado del 15 al 17 de Septiembre de 2009 en Lima, Perú.

Ponencia “Determination of the quality of the milk cattle ranches of Tarimbaro

Michoacan”. Presentada en el XXVI World Buiatrics Congress 2010. Realizado del 14

al 18 de noviembre de 2010 en Santiago, Chile.

Ponencia “Etiological agents of the Mastitis in dairy cows of the municipality of Alvaro

Obregon Michoacán”. Presentada en el XXVI World Buiatrics Congress 2010.

Realizado del 14 al 18 de noviembre de 2010 en Santiago, Chile.

Ponencia “Somatic cell count and somatic cell score in goats from Ecuandero,

Michoacan”. Presentada en el XXVI World Buiatrics Congress 2010. Realizado del 14

al 18 de noviembre de 2010 en Santiago, Chile.

PARTICIPACIÓN EN CONFERENCIAS-TALLER

Colaborador de la Conferencia-Taller “Crianza de la codorniz” en el XII Tianguis de la

Ciencia, realizado los días 19 y 20 de abril de 2002, en la Unidad de Ciencias,

Ingenierías y Humanidades de Morelia, Michoacán, organizado por la Universidad

Michoacana de San Nicolás de Hidalgo y la Secretaria de Educación en el estado.

Colaborador de la Conferencia-Taller “Crianza del conejo doméstico” en el XII Tianguis

de la Ciencia, realizado los días 19 y 20 de abril de 2002, en la Unidad de Ciencias,



Colaborador de la Conferencia-Taller “Cría y explotación del conejo doméstico” en el

XII Tianguis de la Ciencia, realizado los días 4 y 5 de abril de 2003, en la Unidad de

Ciencias, Ingenierías y Humanidades de Morelia, Michoacán, organizado por la



Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo y la Secretaria de Educación en el

estado.

Colaborador de la Conferencia-Taller “Cría de Conejos” en el XIV Tianguis de la

Ciencia, realizado los días 23 y 24 de abril del 2004, en la Unidad de Ciencias,



Colaborador en la Conferencia-Taller “Cría del conejo doméstico” en el Tianguis de la

Ciencia 2005, realizado los días 22 y 23 de abril de 2005, en la Dirección General de

Bibliotecas de la Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Organizado por la

Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo, la Coordinación de la Investigación

Científica y el Departamento de Comunicación de la Ciencia.

Colaborador en la Conferencia-Taller “Embriogénesis animal” en el XVII Tianguis de la

Ciencia 2007, realizado el 27 de abril de 2007, en Ciudad Universitaria. Organizado por

la Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo, la Coordinación de la

Investigación Científica y el Departamento de Comunicación de la Ciencia.

Colaborador en la Conferencia-Taller “Sanidad de la ubre” en el XVII Tianguis de la

Ciencia 2007, realizado el 27 de abril de 2007, en Ciudad Universitaria. Organizado por

la Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo, la Coordinación de la

Investigación Científica y el Departamento de Comunicación de la Ciencia.

DISTINCIONES

Aprobación del examen EGEL de Medicina Veterinaria y Zootecnia, con testimonio de

desempeño SATISFACTORIO. Realizado el 26 de Agosto de 2011.



ÍNDICE

Páginas

RESUMEN

INTRODUCCIÓN…………………………………………………………........... 1

TIPOS DE MASTITIS……………………………………………………………. 1

Mastitis clínica……………………………………………………………………. 1

Mastitis subclínica……………………………………………………………….. 3

IMPACTO DE LA MASTITIS EN LA SALUD PÚBLICA……………………… 4

CLASIFICACIÓN DE LOS AGENTES PATÓGENOS CAUSANTES

DE LA MASTITIS BOVINA……………………………………………………… 5

Patógenos causantes de la mastitis contagiosa……………………………... 6

Patógenos causantes de la mastitis ambiental………………………………. 7

Género Staphylococcus………………………………………………………… 9

Habitat de los estafilococos…………………………………………………….. 9

División de los estafilococos……………………………………………………. 10

Aislamiento e identificación …………………………………………………… 11

Staphylococcus aureus…………………………………………………………. 12

Resistencia del Staphylococcus aureus a los antibióticos………………….. 15

FARMACOS EMPLEADOS PARA EL TRATAMIENTODE LA MASTITIS

BOVINA…………………………………………………………………………… 17

Aminoglucósidos………………………………………………………………… 18

Cefalosporinas…………………………………………………………………… 18

Fenicoles………………………………………………………………………….. 18



Macrólidos………………………………………………………………………… 19

Penicilinas………………………………………………………………………... 19

Quinolonas………………………………………………………………………. 20

Sulfamidinas-Trimetoprim……………………………………………………… 20

Tetraciclinas……………………………………………………………………… 21

DESVENTAJAS DE LOS ANTIBIÓTICOS EN SALUD PÚBLICA……..….. 21

PRUEBAS DE SENSIBILIDAD ANTIBIÓTICA……………………………….. 23

Pruebas de difusión en gel de agar o método de Kirby – Bauer…………… 23

Pruebas de dilución o concentraciones inhibitorias mínimas (C.I.M.)……. 23

OBJETIVO ……………………………………………………………………….. 26

MATERIAL Y MÉTODOS………………………………………………………. 27

Prueba de California y toma de muestras de leche…………………………. 27

Aislamiento e identificación de cepas de S. aureus…………………………. 28

Prueba de sensibilidad a antibióticos…………………………………………. 28

RESULTADOS Y DISCUSIÓN ………………………………………………… 30

CONCLUSIÓN ………………………………………………………………….. 34

LITERATURA CITADA …………………………………………………………. 35



RESISTENCIA ANTIBIÓTICA DE Staphylococcus aureus AISLADOS DE LECHE

DE VACAS CON MASTITIS DE TÉJARO MICHOACÁN

RESUMEN

El objetivo del presente trabajo fue determinar la resistencia antibiótica de Staphylococcus aureus aislados de leche de vacas con mastitis de Téjaro, Michoacán. El estudio se realizó de septiembre de 2010 a enero de 2011 en 16 hatos lecheros de la población de Téjaro municipio de Tarímbaro, Michoacán, los cuales cuentan con 8 vacas en promedio. La mastitis subclínica se determinó mediante la prueba de California de acuerdo con Wolter et al (2004), se obtuvieron 484 muestras de leche de 122 vacas en producción. La identificación de los estafilococos se llevó a cabo a través de su morfología colonial, prueba de catalasa, tinción Gram, prueba de coagulasa, prueba de manitol gelatina y hemólisis. La prueba de susceptibilidad antibiótica se llevó a cabo a través del método de difusión en disco en agar Mueller-Hinton con 102 cepas de estafilococos (41 S. aureus y 61 Estafilococos Coagulasa Negativos) aisladas de las muestras de leche que se obtuvieron de los casos de mastitis subclínica de los hatos lecheros. Se encontró que de las 41 cepas de S. aureus estudiadas, 26 (63.41%) fueron resistentes a cuatro antibióticos, de las cuales 12 (29.2%) fueron resistentes a la penicilina, 9 (21.9%) a la ampicilina, 4 (9.7%) a la eritromicina y solamente 1 (2.4%) resultó resistente a las tetraciclinas. Se concluye que las cepas de Staphylococcus aureus aisladas en este trabajo mostraron mayor resistencia in vitro a los antibióticos de uso frecuente en la terapia de la mastitis bovina como son la Penicilina y Ampicilina. Resistencia que trae como consecuencia una disminución en la respuesta al tratamiento en caso de mastitis clínica y la transmisión de bacterias resistentes a antibióticos a los consumidores a través de la cadena alimentaria, cuando se consumen productos elaborados a partir de leche cruda, por lo que en el tratamiento de los animales infectados por S. aureus, es importante determinar a través de un antibiograma la resistencia que estos presentan a los antibióticos y así aplicar el tratamiento adecuado.

Palabras clave: Mastitis bovina | Staphylococcus aureus | Resistencia antibiótica


EDUARDO AUSTREBERTO BEDOLLA GARCÍA 1

INTRODUCCIÓN

La mastitis es un proceso inflamatorio de la glándula mamaria y es comúnmente una

consecuencia de una infección microbiana causada por patógenos que penetran a la

glándula a través del canal del pezón (Seegers et al, 2003; Zhao y Lacasse, 2008). Es

considerada una enfermedad altamente prevaleciente en el ganado lechero, y es una

de las más importantes que afecta mundialmente la industria lechera; pues ocasiona

pérdidas económicas muy fuertes a todos los productores de leche en el mundo debido

a la disminución de la calidad y cantidad de leche producida y un aumento en los costos

de tratamiento y servicios veterinarios, y pérdida de animales (Correa et al., 2002;

Ceron-Muñoz et al., 2002; Wellenberg et al., 2002; Tomasinsig et al., 2010).

La mastitis bovina como ya se menciono arriba, normalmente se da como resultado de

la infección intramamaria por bacterias que pueden producir la enfermedad de manera

clínica o subclínica (Leigh, 1999; Dos Santos et al., 2002). Es decir, puede ser

acompañada de signos clínicos o no. Una inflamación intramamaria está asociada con

un aumento en el conteo de células somáticas (CCS) en la leche. Sin embargo, la

magnitud del aumento en el conteo de células somáticas varía de acuerdo a la

bacteria involucrada en la infección intramamaria (Djabri et al., 2002).

TIPOS DE MASTITIS

Mastitis clínica

En algunos casos la inflamación de los cuartos mamarios es acompañada de signos

clínicos (signos pronunciados de inflamación mamaria y de enfermedad sistémica),

por lo que es diagnosticada entonces como mastitis clínica (Djabri et al., 2002).



La mastitis clínica es una anormalidad fácilmente observada por los granjeros en

cualquiera de los dos casos: la leche y/o la ubre (de Mol, 2000). Es un problema que

subsiste en muchos hatos lecheros (Barkema et al., 1999).

Se caracteriza por la tumefacción o dolor en la ubre, enrojecimiento, la leche presenta

una apariencia anormal y, en algunos casos, hay aumento de la temperatura rectal,

letargo, anorexia e incluso la muerte. Además, las bacterias están presentes en la

leche, el rendimiento es muy reducido, y su contenido está alterado

considerablemente (Heringstad et al., 2000; Schrick et al., 2001).

La mastitis clínica debida a Escherichia coli (E. coli), estreptococos ambientales, y

Staphylococcus aureus (S. aureus) continua siendo un problema importante

(Schukken et al., 1999). Y puede ser una condición aguda y dolorosa que afecta el

comportamiento animal (Zadoks, 2002). Durante la primera lactación, este tipo de

mastitis, resulta en obvias pérdidas como son disminución en la producción de leche y

alteraciones en la composición de la misma (Barker et al., 1998).

En un estudio realizado por Barker et al. (1998), demostraron que las vacas con

mastitis clínica durante la primera lactación presentaron un prolongado intervalo hasta

el primer servicio (94 días) comparado con animales que no presentaron mastitis

clínica (71 días).

Además, las vacas con mastitis clínica entre el primer servicio y el establecimiento de

la gestación tuvieron un aumento en el número de días abiertos y un doble aumento

de servicios por concepción (Hockett et al., 2000).

La mastitis clínica es una enfermedad costosa en las granjas lecheras de los Estados

Unidos, con una tasa promedio de incidencia lactacional de 14.2% de acuerdo a un

análisis retrospectivo de 62 reportes realizados (Smith et al., 2001).



En el Reino Unido, la incidencia de mastitis clínica es aproximadamente de 40 casos

por cada 100 vacas por año o un millón de casos anualmente (Hillerton y Kliem,

2002).

Según Heringstad et al. (2000) en 1993, el número de casos de mastitis clínica por

100 vacas al año fue de 56, 32, 30 y 21 en Dinamarca, Finlandia, Noruega y Suiza

respectivamente. En varios estudios realizados en California, Michigan y Ohio las

incidencias de mastitis que se encontraron fueron de 30, 33 y 37 casos por 100 vacas

por año respectivamente. Estas estimaciones incluyen las mastitis reportadas por los

dueños y tratadas por los veterinarios.

Los costos estimados por mastitis clínica varían dependiendo del país y presupuesto

e incluyen los costos del tratamiento y veterinario, la reducida producción de leche

durante la parte restante de la lactación, las pérdidas de leche que ha sido desechada

debido a contaminación con antibióticos, eliminación temprana, labor extra,

disminución de la calidad de la leche e incremento de los riesgos de la enfermedad en

el futuro. Los costos estimados por caso de mastitis clínica en Noruega son de 460

dólares americanos, en base a todos los costos arriba mencionados.

Las pérdidas económicas estimadas en Finlandia debido a un caso de mastitis clínica

fueron de 215 dólares americanos en base al valor de leche desechada, costos en

veterinario, medicina y de labor extra. Los costos de la mastitis clínica reportados por

granjeros de Estados Unidos varían de 108 a 122 dólares por caso, en base a

medicamentos y veterinario, preventivos, de trabajo extra, desecho y pérdidas de

leche (Heringstad et al., 2000).

Mastitis subclínica.

La mastitis subclínica es definida como la presencia de un microorganismo en

combinación con un conteo elevado de células somáticas de la leche (de Mol, 2000).



El conteo elevado de células somáticas en la leche indica mastitis subclínica

(Hultgren, 2002).

Este tipo de mastitis no presenta cambios visibles en la leche o ubre. Se caracteriza

por el reducido rendimiento de leche (Schrick et al., 2001), composición alterada de la

leche y la presencia de componentes inflamatorios y bacterias en la leche (Heringstad

et al., 2000).

Cuando los signos no son visibles, la presencia de patógenos y las modificaciones

citológicas de la leche traen como resultado una mastitis subclínica (Djabri et al.,

2002), por lo que las técnicas de laboratorio como la medición del conteo de células

somáticas y el cultivo bacteriológico son necesarios para detectar inflamación e

infección (Barker et al., 1998).

La mastitis, particularmente subclínica y crónica, es la más persistente y más común

del grupo de enfermedades de importancia por la higiene de la leche en el ganado

lechero. La mastitis subclínica ocurre frecuentemente, y puede conducir a grandes

pérdidas económicas debido al reducido rendimiento de leche, y multas a causa de los

elevados conteos de células somáticas presentes en los tanques de leche. En la

práctica, los casos de mastitis subclínica con frecuencia no son detectados

rápidamente, o pueden incluso no ser reconocidas por el ordeñador (Wellenberg et al.,

2002).

Según Wellenberg et al. 2002, actualmente las pérdidas ocasionadas por ambos tipos

de mastitis clínica y subclínica pueden ascender a 20% de la producción potencial.

IMPACTO DE LA MASTITIS EN LA SALUD PÚBLICA

El amplio consumo de productos lácteos y las recientes epidemias de enfermedades

animales que reciben mucha publicidad ha aumentado la preocupación del



consumidor acerca de la calidad de alimentos de origen animal, coincidente con estas

tendencias, la globalización que ha influenciado la definición de leche de alta calidad

además que las expectativas del consumidor cada vez afectan más las prácticas de

manejo animal (Patiño, 2008).

La resistencia cuesta dinero, medios de subsistencia y vidas humanas, y amenaza

con socavar la eficacia de los programas de atención de la salud. Se ha descrito

recientemente como un problema para la estabilidad mundial y la seguridad de los

países. Pocos estudios han indicado que los clones resistentes se pueden reemplazar

por otros susceptibles; sin embargo, en general, tarda en revertirse o es irreversible

(Organización Mundial de la Salud, 2001).

La leche contaminada pone en peligro la salud de quienes la consumen, en el caso

del hombre cobra gran importancia la diseminación de bacterias causantes de

enfermedades tales como: tuberculosis, brucelosis, faringitis estreptocócica, entre

otras (Ávila et al., 2004; Ruiz y Romero, 2003; Patiño, 2008).

Según Reinemann, (1998) las dos fuentes más importantes de bacterias en la leche

cruda son: 1) Los patógenos de la mastitis de la ubre. 2) Los patógenos ambientales

que contaminan la máquina de ordeño (Patiño, 2008).

CLASIFICACIÓN DE LOS AGENTES PATÓGENOS CAUSANTES DE LA MASTITIS

BOVINA

En la glándula mamaria bovina se han identificado hasta 140 especies, subespecies y

serovariedades microbianas. Las técnicas microbiológicas han permitido la

determinación precisa de la identidad de muchos microorganismos patógenos de la

mastitis. Tomando como base la epidemiología y la fisiopatología, se han clasificado

estos microorganismos como causantes de la mastitis contagiosa o ambiental, en

base a su asociación epidemiológica con la enfermedad y a su proclividad de causar



la infección oportunista, persistente o transeúnte, respectivamente (Bedolla y

Castañeda, 2003; Radostits et al., 2002; Riffon et al., 2001; Rossitto et al., 2002;

Gallegos y Moncada, 2011).

Según Riffon et al. 2001, las bacterias responsables de la mastitis bovina pueden ser

clasificadas como contagiosas y ambientales, dependiendo de su reservorio primario y

el ambiente contra el cuarto de la glándula mamaria infectada.

Patógenos causantes de la mastitis contagiosa

Los patógenos contagiosos de primera importancia incluyen al Staphylococcus

aureus, Streptococcus agalactiae, Corynebacterium spp., y al Mycoplasma spp.

(Riffon et al., 2001; Rossitto et al., 2002; Djabri et al., 2002). Son organismos

transmitidos de vaca a vaca a través de los paños utilizados para limpiar las ubres, la

leche residual en las pezoneras y un equipo de ordeño inadecuado donde el

reservorio primario que alberga los patógenos es el animal infectado o el cuarto de la

ubre (Bedolla y Castañeda, 2003; Rossitto et al., 2002; Zadoks et al., 2001; Radostits

et al., 2002), y la exposición de los cuartos mamarios no infectados se restringe al

proceso de la ordeña (Zadoks et al., 2001; Zadoks, 2002; Gallegos y Moncada, 2011;

Bedolla, 2011).

Los patógenos contagiosos de la mastitis como el Staphylococcus aureus y

Streptococcus agalactiae que son infecciosos a nivel individual y a nivel de población

(Zadoks, 2002), han sido reportados bajo control en los hatos lecheros a través del

uso de prácticas de manejo que utilizan la desinfección de las tetas después de la

ordeña, terapia de la vaca seca, desecho, mantenimiento del equipo de ordeño, y

terapia antibiótica de las infecciones intramamarias (Rossitto et al., 2002; Bedolla,

2011).



A pesar de que la mastitis por organismos contagiosos (especialmente Streptococcus

agalactiae) ha disminuido por mejoramiento en el manejo, las pérdidas económicas

debido a la enfermedad pueden continuar porque los organismos causales no pueden

ser erradicados del medio ambiente de las vacas lecheras (Nash et al., 2002).

En general, un programa de control de la mastitis concienzudo puede erradicar a

Streptococcus agalactiae de la mayoría de los rebaños lecheros. Es mucho más difícil

tratar los rebaños en los que Staphylococcus aureus tiene una prevalencia alta

(Radostits et al., 2002).

Patógenos causantes de la mastitis ambiental

Los patógenos principales en este grupo son los bacilos entéricos Gramnegativos

(Escherichia coli, Klebsiella spp.), Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus uberis, y

Enterococcus spp. (Rossitto et al., 2002). Otros microorganismos patógenos se

incluyen en la clase ambiental de este tipo de infecciones.

Se trata generalmente de oportunistas que invaden la glándula mamaria cuando los

mecanismos de defensa están disminuidos o cuando se introducen inadvertidamente

en la glándula mamaria al realizar un tratamiento intramamario. Este grupo de

microorganismos oportunistas incluyen a Pseudomona spp., levaduras, Prototheca

spp., Serratia marcescens y Nocardia spp. Cada uno de estos agentes poseen

características de cultivo, mecanismos patógenos y consecuencias clínicas singulares

(Radostits et al., 2002).

La fuente de estos agentes patógenos es el entorno de la vaca. La forma de

transmisión principal es del ambiente a la vaca a través de un manejo inadecuado del

primero. Algunos ejemplos incluyen la cama húmeda, terrenos sucios, ubres mojadas

por la leche, preparación inadecuada de la ubre y los pezones antes del ordeño y

sistemas de estabulación que favorecen las lesiones en los pezones (Radostits et al.,



2002). Y la exposición de los cuartos no infectados a los patógenos ambientales que

puede ocurrir en cualquier momento durante la vida de una vaca (Zadoks et al., 2001).

Estas infecciones generalmente ocurren de forma esporádica. Sin embargo, se

pueden producir brotes en los rebaños o en una región entera, normalmente como

consecuencia de problemas con la higiene o el tratamiento. Por ejemplo, se ha

producido mastitis causada por Pseudoma aeruginosa en brotes relacionados con la

contaminación de las conducciones de goma en las salas de ordeño (Radostits et al.,

2002).

La mastitis ocasionada por patógenos ambientales es el principal problema que afecta

a muchos hatos lecheros bien manejados, que aplican un programa de control de los

patógenos contagiosos de la mastitis (Calvinho et al., 1998; Phuektes et al., 2001).

Debido a que en la actualidad estos patógenos no han sido bien controlados por los

métodos arriba mencionados, ahora están surgiendo como la causa más frecuente de

mastitis en muchos hatos, particularmente bien manejados, hatos con bajo conteo de

células somáticas (<200,000 cs/ml) (Rossitto et al., 2002).

Tradicionalmente, los agentes más comunes causantes de la mastitis también han

sido clasificados como patógenos principales (mayores) y menores según el grado de

inflamación que estos producen en la glándula mamaria (Ariznabarreta et al., 2002).

Los patógenos principales son definidos como los patógenos responsables, la mayoría

de las veces, de las mastitis clínicas o de fuertes respuestas inflamatorias (conteos

elevados de células somáticas en la leche) y comprenden al Staphylococcus aureus,

estreptococos (S. uberis, S. agalactiae, S. dysgalactiae) y coliformes (Ariznabarreta et

al., 2002; White et al., 2001; Djabri et al., 2002).

Los patógenos menores son definidos como los patógenos que infectan la glándula

mamaria, causando conteos moderados de células somáticas, pero en lo general no

causan signos clínicos. Estas infecciones, son especialmente frecuentes, debidas



sobre todo a estafilococos coagulasa negativos (principalmente S. chromogenes, S.

hyicus, S. epidermidis, y S. xylosus) o por Corynebacterium bovis y Micrococcaceae

coagulasa-negativos (Ariznabarreta et al., 2002; White et al., 2001; Djabri et al., 2002).

Género Staphylococcus

El género Staphylococcus se ha clasificado tradicionalmente en la familia

Micrococcaceae junto con, entre otros, el género Micrococcus.

Los estafilococos son cocos grampositivos (de 0.5 a 1.5 um de diámetro) que se

presentan sueltos, en parejas, en pequeñas cadenas (de 3 ó 4 células) y mas

característicamente en grupos irregulares en forma de racimos (su denominación

procede del griego staphyle, racimo de uvas) (Vadillo et al., 2002).

Son anaerobios facultativos, catalasas positivos, generalmente oxidasa negativos, no

esporulados, inmóviles y generalmente no forman cápsula o tienen una limitada

formación capsular.

En la actualidad en el género Staphylococcus se reconocen 32 especies y varias

subespecies, si bien solo algunas de ellas tienen importancia desde el punto de vista

clínico (Vadillo et al., 2002).

Hábitat de los Estafilococos

Los estafilococos están ampliamente difundidos en la naturaleza. Su hábitat natural es

la piel y las membranas mucosas de los mamíferos y las aves. También pueden

encontrarse de forma transitoria en el tracto intestinal.



La presentación de varias de las especies de estafilococos coagulasa negativos

descritas en los últimos años como está prácticamente restringida a la especie animal a

la que se hace referencia su denominación latina. Otras especies, como

Staphylococcus hyicus, Staphylococcus chromogenes, Staphylococcus sciuri y

Staphylococcus lentus tienen una difusión algo más amplia y se presenta en los

ungulados (Vadillo et al., 2002).

División de los estafilococos

Los estafilococos, según produzcan o no la enzima coagulasa, se dividen en dos

grandes grupos:

1. Estafilococos coagulasa positivos (ECP) (Staphylococcus aureus,

Staphylococcus intermedius, Staphylococcus hyicus).

2. Estafilococos coagulasa negativo (ECN) (Staphylococcus chromogenes,

Staphylococcus heamolyticus, Staphylococcus hominis, Staphylococcus

simulans, Staphylococcus epidermidis y Staphylococcus hyicus).

Existe una buena correlación entre la producción de coagulasa y la capacidad

patógena de los estafilococos, de tal manera que, en general, se considera que los ECP

son patógenos y que los ECN no lo son (Cuadro 1) (Vadillo et al., 2002).



Cuadro 1. Familia micrococacceae

Familia Género Especie

Micrococacceae Staphylococcus Staphylococcus aureus

S. intermedius Coagulasa +

S. hyicus

Staphylococcus chromogenes

S. heamolyticus

S. hominis Coagulasa -

S. hyicus

S. simulans

Otros

Micrococcus M. roseus

M. varians

Planococcus

Stomatococcus

(Fuente: Saran y Chaffer, 2000).

En el grupo de ECP se incluyen S. aureus, S. intermedius, S. hyicus (aunque solo entre

un 24 y 56 % de las cepas son coagulasa positivas) (Vadillo et al., 2002).

Aislamiento e identificación

Los estafilococos crecen en los medios de cultivo ordinarios, como el agar nutritivo, si

bien para la siembra de muestras clínicas (exudados, pus de abscesos, leche

mamítica, raspados de piel, orina, etc.) se utiliza habitualmente el agar sangre

(preferentemente de oveja), medio en que puede apreciarse la capacidad hemolítica

producido por las bacterias.

Existen varios medios selectivos para los estafilococos, como el agar sal manitol y el

medio de Baird-Parker, que se utiliza principalmente para análisis de alimentos. Las



colonias aparecen normalmente a las 24 horas de incubación pueden alcanzar los 4

mm de diámetro. Estas colonias son redondas, lisas y brillantes y en agar sangre

opacas, lo que las diferencia de las colonias de los estreptococos beta-hemolíticos,

que son más pequeñas y translúcidas. Las colonias pueden ser o no pigmentadas

mostrando en este caso distintas tonalidades, desde el crema pálido al amarillo vivo

(Vadillo et al., 2002).

El criterio generalmente utilizado para la identificación de las especies patógenas es la

capacidad de coagular el plasma. Esta capacidad se determina bien con una prueba

de tubo, o bien con una prueba en portaobjetos. La prueba en tubo, permite detectar

la coagulasa libre y se realiza añadiendo a 0.5 ml de plasma de conejo citratado o con

EDTA un par de gotas bien en un cultivo líquido de 18 horas, o bien de una

suspensión densa preparada a partir de un cultivo de agar. La lectura de la prueba se

hace a las 4 y a las 24 horas.

La prueba de la coagulasa en parte permite detectar el clumping factor y se realiza

preparando una suspensión muy densa de bacterias en una gota de agua depositada

en un portaobjetos y sobre la suspensión se añade con un asa de platino una gota de

plasma de conejo y se mezcla rotando el asa (Vadillo et al., 2002).

Staphylococcus aureus

El Staphylococcus aureus (S. aureus) es la principal causa de infección intramamaria

en los rumiantes (Bayles et al.,1998; Yugueros et al.,1999; Zadoks et al., 2000;

Mullarky et al., 2001) por lo que se le considera el agente causal más importante y

frecuente de la mastitis bovina (Ferens et al., 1998; Lammers et al., 2000; Sordelli et

al., 2000; Tollersrud et al., 2000; Fitzgerald et al., 2001; dos Santos et al., 2002).

Aunque varios patógenos bacterianos pueden causar la mastitis, el S. aureus es el

primer agente etiológico en la mayor parte del mundo (Tollersrud et al., 2000), ha



surgido como el más prevaleciente, y una vez establecido en la glándula mamaria es

muy difícil de erradicar (Sordelli et al., 2000) y causa las pérdidas económicas más

considerables en la industria de la leche (Lammers et al., 2000).

En muchos países el S. aureus es un patógeno de la ubre, muy importante que causa

la mastitis (Bjorland et al., 2001). En 1998 Smith, informo de un brote de mastitis

causada por S. aureus, en el estado de Washington, en un hato lechero (Middleton et

al., 2002); el S. aureus y las bacterias estreptococales son los agentes etiológicos más

comunes involucrados en los casos clínicos y subclínicos de mastitis en los hatos

lecheros de Nueva Zelanda (Douglas et al., 2000).

El S. aureus es el patógeno principal responsable de una amplia gama de infecciones

agudas y crónicas. El primer paso en las infecciones por S. aureus es la adherencia a

las diferentes superficies y colonización de tejidos del organismo infectado. Para este

propósito el S. aureus presenta una familia de adherencias llamada MSCRMMs

(componentes de la superficie microbiana que reconocen las moléculas adhesivas de

la matriz).

Estas interacciones permiten al S. aureus adherirse a una variedad de líneas celulares

y promover la invasión y muerte por apoptosis de células epiteliales infectadas. Otro

paso en la colonización del S. aureus es la formación de una biopelícula. La formación

de esta biopelícula es una inquietud importante en las infecciones porque protege a

los microorganismos de los leucocitos y antibióticos, llevando a la infección crónica y

septicemia. Fenómenos similares ocurren con otras bacterias patógenas, como

Staphylococcus epidermidis, Streptococcus pneumoniae, Klebsiella pneumoniae,

Neisseria meningitisdis, Escherichia coli y Haemophylus influenzae (Cucarella et al.,

2002).

El S. aureus se reconoce mundialmente como una causa frecuente de infecciones

intramamarias subclínicas en las vacas lecheras (Riollet et al., 2001). El reservorio

principal del S. aureus parece ser el cuarto infectado y la transmisión entre las vacas,



normalmente, ocurre durante la ordeña (Akineden et al., 2001), la interacción del S.

aureus con las células de la glándula mamaria bovina es considerada esencial en el

rol que desempeña en la patogénesis de la mastitis (Lammers et al., 1999).

Recientemente se ha demostrado que el S. aureus induce la apoptosis en las células

epiteliales de la glándula mamaria bovina, indicando que este proceso pudiera estar

involucrado en la persistencia o patogénesis de este patógeno (Wesson et al., 1998).

En recientes experimentos que evalúan la invasión y supervivencia intracelular del S.

aureus en las células del tejido endotelial, epitelial y osteoblasto; se ha indicado que la

supervivencia intracelular pudiera contribuir a la persistencia del patógeno, induciendo

endocarditis, mastitis bovina y osteomielitis (Gresham et al., 2000).

El S. aureus es actualmente uno de los patógenos más difíciles de controlar porque

puede extenderse rápidamente entre el hato y puede responder pobremente a una

terapia antibiótica convencional (Soltys y Quinn, 1999); la naturaleza crónica de la

mastitis bovina por S. aureus, indica que algunos productos o componentes de este

patógeno pueden interferir en el desarrollo de la inmunidad protectora (Ferens et al.,

1998).

Este patógeno puede causar muchas enfermedades en los humanos y animales

(Fitzgerald et al., 2001), es el agente causal de muchas infecciones oportunas en los

humanos y los animales (Yugueros et al., 1999). Las infecciones debidas al S. aureus

es de la mayor importancia en la medicina veterinaria y humana (Zadoks et al., 2000).

En el humano el S. aureus es un patógeno responsable de la septicemia, endocarditis

y el síndrome del shock tóxico; ocasionando la mastitis en las vacas y ovejas

(Fitzgerald et al., 2001).

El S. aureus exporta una gran variedad de enzimas, algunas de las cuales tienen

factores de virulencia conocidos (Reed et al., 2001), algunas de estas enzimas son



capaces de incrementar las características invasoras del microorganismo y lo

protegen de los mecanismos corporales de defensa.

El S. aureus sigue siendo un patógeno persistente alrededor del mundo que causa

serias infecciones. Las enfermedades que se han asociado con el S. aureus son

diversas, yendo de las infecciones en heridas menores a las enfermedades más

serias, incluso la endocarditis, osteomielitis y el shock séptico (Wesson et al., 1998).

Resistencia del Staphylococcus aureus a los antibióticos

La resistencia no es un fenómeno nuevo; al principio se reconoció como una

curiosidad científica y luego como una amenaza a la eficacia del tratamiento. Sin

embargo, el desarrollo de nuevas familias de antimicrobianos en décadas de 1950 y

1960, y las modificaciones de esas moléculas en las de 1960 y 1980 nos indujo a

creer que siempre podríamos adelantarnos a los agentes patógenos. Al comenzar el

nuevo siglo, estamos pagando muy cara esa complacencia. La generación de

medicamentos nuevos se está estancando y son pocos los incentivos para elaborar

antimicrobianos nuevos que permitan combatir los problemas mundiales de la

farmacorresistencia (Patiño, 2008).

Las bacterias adquieren la capacidad de resistir la acción de los antibióticos a través

de varios mecanismos como lo son:

La variabilidad genética

La modificación de la permeabilidad de la membrana interna

La extracción del compuesto y la inhibición enzimática

La modificación del blanco ribosomal o la alteración de la composición y el contenido

de glicoproteínas de la pared bacteriana.

Esta resistencia es transmitida entre microorganismos de un mismo género

(transmisión horizontal) y entre microorganismos de géneros diferentes (transmisión



vertical). A todo lo anterior se adiciona el hecho de que se dispone de escasos datos

de susceptibilidad a los antimicrobianos y la vigilancia de la resistencia no se lleva a

cabo en todos los países (Patiño, 2008)

La mastitis causada por S. aureus es casi imposible de controlar con terapia de

antibióticos únicamente.

La efectividad de la terapia tiene un rango de un 20 a un 70%, dependiendo de si las

infecciones son crónicas y/o acompañadas de formaciones grandes de tejido de

cicatrizante. Sin embargo, muchas infecciones persisten, provocando manifestaciones

clínicas durante el inicio de la lactancia. Los animales que presentan estos signos

deben separarse del hato pues representan una reserva significativa de contagio a

otras vacas.

El tratamiento con antibióticos en la lactancia es de poco beneficio. Sólo de un 10 a un

30% de los cuartos infectados serán curados. La infusión de drogas puede reducir

temporalmente el conteo de células somáticas y hasta mejorar la apariencia de la

leche en cuartos clínicamente infectados, pero realmente no eliminan muchas

infecciones. Esto se debe a que los microorganismos quedan amurallados con el

tejido cicatrizante el cual los protege de los antibióticos (Patiño, 2008).

El S. aureus también desarrolla una resistencia a ciertos antibióticos y puede producir

una enzima (penicilinasa) que inactiva a la penicilina. Por eso el método para

infecciones subclínicas usando terapia convencional durante la lactancia, no debe

recomendarse.

Se han descrito a lo menos, tres mecanismos de resistencia del S. aureus a los B-

lactámicos, en muchas ocasiones relacionados entre sí: producción de B-lactamasas,

fenómenos de tolerancia, y resistencia por proteínas fijadoras de penicilina

modificadas o supernumerarias, conocida como resistencia intrínseca a meticilina

(Patiño, 2008).



Cuando se detecta una cepa resistente a oxacilina, ninguna otra penicilina resistente a

penicilinasa, cefalosporina, combinación de B-lactámicos, con inhibidores de B-

lactamasa o incluso imipenem, serán eficaces para el tratamiento del S. aureus,

independientemente de que las distintas cepas muestren sensibilidad in vitro en los

estudios de laboratorio (Patiño, 2008).

FÁRMACOS EMPLEADOS PARA EL TRATAMIENTO DE LA MASTITIS BOVINA

Los antimicrobianos son sustancias producidas por fermentación de microorganismos o

en forma sintética y que se utilizan para curar infecciones bacterianas, favorecen la

recuperación de los animales enfermos y alivian el sufrimiento y las lesiones asociados

con la enfermedad.

El tratamiento de los animales con antibióticos debe tener una adecuada relación costo-

beneficio, un claro ejemplo es el tratamiento de todas las glándulas mamarias de todas

las vacas que finalizan lactación.

Las mastitis subclínicas por lo general no se tratan ya que realizando medidas de

higiene y desinfección, buen ordeño y buen funcionamiento de la máquina de ordeño se

corrigen estos problemas (Patiño, 2008).

Si bien existe una gran variedad de medidas de control de la enfermedad, la terapia con

antibióticos desempeña un papel determinante en la eliminación de la mastitis bovina.

La mayoría de las drogas antimicrobianas utilizadas son β-lactámicos, aminoglucósidos

y macrólidos). La respuesta a estos antibióticos varía según el agente etiológico

(Patiño, 2008; Pellegrino et al., 2011).



Aminoglucósidos

Se denominan así, por estar formados por aminoazúcares unidos por enlaces

glucosídicos. Su mecanismo de acción incluye la inhibición de la síntesis proteica

bacteriana debido a la unión de la sub-unidad ribosómica 308 de la bacteria. Estos son

captados activamente por la bacteria mediante un proceso que requiere condiciones

aeróbicas. La resistencia bacteriana a estos antimicrobianos se desarrolla rápidamente

y se produce como resultado de la modificación enzimática del fármaco en varios

lugares. Un microorganismo resistente a un aminoglucósido puede ser todavía sensible

a otro del mismo grupo. Tienen una rápida absorción por la vía intramuscular y

subcutánea. Estos se distribuyen en los líquidos extracelulares, pero tienen una escasa

acumulación en el líquido cefalorraquídeo. Se inactivan rápidamente en altas

concentraciones de pus (Fuentes, 1992; Patiño, 2008). Los de mayor uso en el bovino

son la gentamicina, estreptomicina y dihidroestreptomicina (derivado sintético de la

estreptomicina).

Cefalosporinas

Este grupo está estrechamente relacionado con las penicilinas y tiene un núcleo 7–

amino-cefalosporánico, siendo similar a su modo de acción, disposición fisiológica y

toxicidad. Tienen una resistencia superior a la inactivación por las enzimas B-

lactamasas producidas por los estafilococos. Inhiben la formación de la pared celular

(Meyer, 1982; Patiño, 2008).

Fenicoles

Son compuestos bacteriostáticos de amplio espectro y presentan acción contra bacilos

gram-positivos y gram-negativos. Actúa interfiriendo con la síntesis proteica mediante el

bloqueo de la síntesis en el ribosoma. Se combina competitivamente con la subunidad



ribosómica 50S, bloqueando la entrada de aminoácidos en la cadena peptídica en

desarrollo. La conjugación del cloranfenicol tiene lugar en el hígado y la eliminación es

principalmente por vía urinaria. Actualmente la utilización del cloranfenicol está limitada

en México y otras partes del mundo debido a los casos de reacciones tóxicas,

provocando particularmente discrasias sanguíneas. Este compuesto inhibe el

metabolismo microsomal del fármaco en el hígado y por lo tanto prolonga los efectos de

otros fármacos, que normalmente son eliminados del organismo por oxidación. Además

de los efectos tóxicos de este compuesto, su utilización está restringida por su

implicación en las resistencias transmisibles (Meyer, 1982; Patiño, 2008).

Macrólidos

Este grupo de componentes antimicrobianos posee un gran anillo lactónico. Son activos

contra la mayoría de los microorganismos gram-positivos. La mayoría de los macrólidos

son bacteriostáticos, pero en altas concentraciones y contra determinadas bacterias

pueden ser bactericidas. Su modo de acción es por interferencia con la síntesis proteica

por alteración de los ribosomas bacterianos (Sumano y Ocampo, 1997; Fuentes, 1992).

Penicilinas

Se distribuyen en los líquidos extracelulares, incluyendo las articulaciones, los líquidos

de las heridas, la glándula mamaria y el feto en el animal gestante. Sin embargo,

cuando se administra parenteralmente no alcanza el líquido cefalorraquídeo ni el ojo.

En general presenta eficacia para la mayoría de las bacterias Gram-positivas como los

estafilococos. Su mecanismo de acción interfiere con la síntesis de la pared celular

bacteriana, siendo por tanto bactericida, es decir, interfiere con la síntesis de los

polipéptidos necesarios para la pared celular y presenta su eficacia máxima contra las

bacterias en rápido crecimiento. Presenta poco efecto contra las bacterias maduras que

no están en división. Determinadas cepas de las bacterias estafilocócicas producen



una penicilinasa (B-lactamasa), que transforma la penicilina en ácido peniciloico

inactivo. Este grupo de compuestos no son inactivados por la sangre, el pus, los

autolisados tisulares, ni por un gran número de bacterias. En algunos casos se pueden

observar reacciones de hipersensibilidad que van desde urticaria y prurito hasta

anafilaxia aguda (Sumano y Ocampo, 1997).

Quinolonas

Son el grupo farmacológico de mayor desarrollo en la actualidad. Se distinguen tres

generaciones con potencia antibacteriana y rasgos farmacológicos progresivamente

mayores. Las bacterias resistentes a las quinolonas aparecen en clínica como resultado

de la terapia con estos agentes. Su efecto citotóxico depende de que penetren a través

de la membrana bacteriana y alcancen su diana celular (DNA girasa o topoisomerasa

IV) para inducir la muerte de la bacteria. En principio, las resistencias a las quinolonas

puede deberse a mutaciones que afecten cualquier paso de este proceso. Así, los

mecanismos de resistencia bacteriana a las quinolonas pueden agruparse en tres

categorías: a) Resistencia de tipo cromosómico que dan lugar a mutaciones en

segmentos definidos de los genes que codifican la DNA girasa (especialmente en la

subunidad A y la topoisomerasa IV, dando lugar a las QRDR (regiones-determinantes-

de resistencia-a quinolonas); b) Resistencia por alteraciones en la membrana externa

bacteriana que disminuyen la presión intracelular del fármaco. Estas modificaciones se

originan en alteraciones de los genes que codifican los canales de las purinas, lo que

impide la entrada del quimioterápico en la bacteria; c) Resistencias basadas en la

expulsión del antibacteriano desde el medio intracelular al extracelular por acción de

transportadores endógenos activos (Sumano y Ocampo, 1997; Patiño, 2008).

Sulfamidinas-Trimetoprim

Las sulfonamidas son ácidos débiles y moderadamente solubles. Actúan interfiriendo

con la síntesis de acido fólico a partir de acido paraminobenzoico (PABA). Dado que las



sulfonamidas actúan de esta forma, los gérmenes que pueden utilizar el ácido fólico

transformado son insensibles. Ya que la síntesis de ácido fólico es necesaria para un

rango amplio de bacterias, las sulfonamidas tienen un amplio espectro de acción. Su

espectro incluye a bacterias Gram-positivas y Gram-negativas. La frecuente utilización

previa de sulfonamidas ha dado lugar a muchos gérmenes resistentes. Para evitar la

resistencia se ha utilizado exitosamente la incorporación de trimetoprim, que actúa

sinérgicamente con la sulfonamida bloqueando la síntesis de ácido fólico, por tanto esta

asociación es eficaz contra un amplio rango de gérmenes. También aumenta la

potencia utilizando mezclas múltiples (generalmente 3) de sulfonamidas las cuales ya

se encuentran disponibles comercialmente (Sumano, 1997; Patiño, 2008).

Tetraciclinas

Tienen el espectro más amplio que todos los antibióticos y actúa bien contra los cocos

Gram-positivos. Actúan interfiriendo la síntesis de proteica en la unidad ribosómica

30S, y en menor grado interfieren con la fosforilación oxidativa, con la oxidación de la

glucosa y con permeabilidad de la membrana celular. Este grupo se distribuye

ampliamente, atraviesan la placenta y alcanza el líquido cefalorraquídeo (Patiño, 2008).

DESVENTAJAS DE LOS ANTIBIÓTICOS EN SALUD PÚBLICA

Cada vez son más las pruebas científicas que relacionan la administración de

antimicrobianos a los animales destinados al consumo y el desarrollo de resistencia

de los agentes patógenos comunes (Patiño, 2008).

La resistencia de las bacterias a los antibióticos es un problema que tiene

consecuencias para la salud animal y humana cuando los agentes patógenos se

introducen en la cadena alimentaria. Grupos de expertos científicos tanto del Instituto

de Medicina, la Sociedad Americana de Microbiología y la Organización Mundial de la



Salud han expresado preocupación acerca del incremento global de las resistencias

(Patiño, 2008; Fedorka et al., 1998). En la pérdida de sensibilidad a un antibiótico

intervienen varios factores. Las dos fuerzas principales son la prevalencia de genes de

resistencia (que determinan proteínas que protegen a las bacterias de los efectos de los

fármacos) y la difusión del uso de antibióticos. Si la flora bacteriana de una comunidad

carece de genes que confieren resistencia contra un antibiótico, este podrá eliminar con

éxito toda la infección, pero si en la flora existen genes de resistencia y la comunidad

hace uso persistente de un antibiótico, las bacterias que escapen a la erradicación por

ese fármaco harán acto de presencia y proliferarán y además la resistencia puede

propagarse a lugares distantes.

Los antibióticos si bien son necesarios para el control de las infecciones bacterianas,

pueden tener efectos indeseables sobre la ecología microbiana. Pudiendo producir

cambios en las proporciones de las bacterias sensibles/resistentes a los antibióticos,

tanto en el individuo sometido al tratamiento como en el medio y la comunidad en

general (Stuart, 1998; Ruiz et al., 2001).

La contaminación de la leche con diferentes fármacos como son; antibióticos,

antisépticos, promotores del crecimiento, etc., es una secuela frecuente posterior al

tratamiento o prevención de enfermedades que afectan a los animales de producción.

Existen pérdidas evidentes si se retiran de la ordeña de manera muy estricta y sin

datos específicos a los animales tratados con fármacos. Por otro lado, la

consecuencia de permitir la distribución de esos productos para la población, puede

acarrear serios problemas de salud. Un claro ejemplo es la presencia de residuos

antibióticos en la leche, puede inducir alergias y resistencias bacterianas; a otro nivel

puede afectar los procesos de industrialización de la misma. Aunado a esto el aspecto

que más temor causa es la incertidumbre de que aun no se sabe cuáles y qué tan

graves efectos tendrán los residuos de tantos fármacos ingeridos de manera crónica.

Por ejemplo, se ha estimado que la presentación de anemia aplástica en humanos se

puede inducir con tan solo 1 ppm de cloramfenicol presente en productos de origen

animal (Doyle, 2008; Patiño, 2008).



PRUEBAS DE SENSIBILIDAD ANTIBIÓTICA

Los clínicos en cualquiera de las áreas de la salud, dependen ampliamente de los

datos microbiológicos de laboratorio para el tratamiento de sus pacientes. Por esto la

importancia de las pruebas de sensibilidad a antibióticos, ya que proveen una

información valiosa para las decisiones terapéuticas; y deben ser realizados en

condiciones óptimas para su eficiente interpretación (National Committee for Clinical

Laboratory Standars, 1999). Algunas de éstas son las siguientes:

1. Pruebas de difusión en gel de agar o método de Kirby - Bauer

Este método consiste en el cultivo de los agentes patógenos en medios apropiados

para su crecimiento, en el cual se colocan antibióticos en discos que dependiendo de

la concentración del antibiótico en este y de la sensibilidad del microorganismo al

antimicrobiano, da como resultado zonas donde el crecimiento bacteriano es inhibido

luego de varias horas de incubación (National Committee for Clinical Laboratory

Standars, 1999).

Este método da como resultado datos cualitativos ordinales (sensible, intermedio y

resistente), dichos resultados son la conclusión de varias consideraciones como la

especie de microorganismo, la clase de antibiótico, concentración del antibiótico en el

disco, el halo de inhibición del crecimiento (medido en mm) (Bauer et al., 1996).

2. Pruebas de dilución o concentraciones inhibitorias mínimas (C.I.M.)

La determinación de las Concentraciones Inhibitorias Mínimas (C.I.M.), para los

patógenos específicos, provee datos, que conjuntamente con los parámetros

farmacocinéticos de los agentes antibacteriales en el animal, permiten predecir la

eficacia ―in vivo‖ del compuesto en el tratamiento de una enfermedad específica.

Aunque existen regímenes terapéuticos para muchos agentes antibacteriales utilizados

en el tratamiento de infecciones intramamarias, la sensibilidad del germen puede variar



de tal manera que es necesario replantear el esquema terapéutico; de acuerdo al

patrón de sensibilidades desarrollado, y para esto las C.I.M. permiten a los veterinarios

monitorear la sensibilidad antimicrobial de las cepas en los hatos lecheros (Watts et al.,

1995).

La selección de los antibióticos se hace teniendo en cuenta el microorganismo a

evaluar y los diferentes grupos farmacológicos que serian de primera elección para la

terapéutica (de acuerdo con el espectro) y los resultados de los C.I.M. que se reportan

con criterios de interpretación definidos como: sensible, intermedio y resistente.

2.1. Sensible: Esta categoría aplica a las infecciones por cepas que pueden ser

apropiadamente tratadas con dosis de antibióticos recomendadas para ese tipo de

infección y especie infectada.

2.2. Intermedio: Ésta categoría incluye aislamientos bacteriales, evaluados con agentes

antibacterianos, cuyas C.I.M. se aproximan a los niveles alcanzables en tejidos y

sangre, y para los que la tasa de respuesta puede ser más baja que los de las cepas

sensibles. La categoría intermedia implica aplicabilidad clínica en los sitios corporales

en donde la droga es fisiológicamente concentrada (por ejemplo, Quinolonas y B-

lactámicos en orina) o cuando altas dosis de la droga pueden ser usadas (por ejemplo

B-lactámicos).

2.3. Resistente: Las cepas no son inhibidas por las concentraciones sistémicas

usualmente alcanzables de un agente con régimen terapéutico normal y/o fallas

atribuibles a mecanismos de resistencias (por ejemplo B-lactamasa) y cuya eficacia

clínica no es confiable en estudios terapéuticos (National Committee for Clinical

Laboratory Standars. 1999).

La determinación de las Concentraciones Inhibitorias Mínimas es una prueba con mejor

poder predictivo de la eficacia ―in vivo‖ que las pruebas de difusión en gel de agar

(Salomon et al., 1998).



Considerando pues lo anteriormente expuesto, el tratamiento de las mastitis bovina con

antibióticos, es una práctica que debe hacerse con criterios profesionales debido a que

son muchos los factores que intervienen no sólo para una eficiente terapéutica, sino

también para la prevención en la generación de resistencia bacterial y la presencia de

residuos de antibióticos en leche; problemas que competen no sólo a la salud animal

sino también a la salud humana. Por tales motivos el desarrollo de un programa de

control efectivo requiere un extenso conocimiento de la epidemiología de la mastitis

bovina, incluyendo la evaluación de la susceptibilidad a los antibióticos de los

microorganismos aislados de la glándula mamaria, así como programas de prevención

(Ruiz et al., 2001).



OBJETIVO

El objetivo del presente estudio fue determinar la resistencia antibiótica de

Staphylococcus aureus aislados de leche de vacas con mastitis de Téjaro, municipio de

Tarímbaro, Michoacán.



MATERIAL Y MÉTODOS

El presente trabajo se realizó de Septiembre de 2010 a Enero de 2011 en la comunidad

de Téjaro, municipio de Tarímbaro Michoacán, la cual se encuentra ubicada en las

coordenadas entre los paralelos 19°44‖ y 19°54‖ de latitud norte; los meridianos 101°03‖

y 101°17‖de longitud oeste; altitud entre 1 900 y 2 400 metros sobre el nivel del mar

(INEGI, 2002).

Prueba de California y toma de muestras de leche

Antes de la toma de muestras y de realizar la prueba de California, los pezones fueron

desinfectados con alcohol al 70% y secados con papel absorbente y el primer chorro de

leche descartado.

La prueba de California (CMT), se realizó utilizando para ello una paleta de plástico,

depositando en ella una muestra de leche de cada pezón, la cual se mezcló con un

reactivo de nombre comercial Diagmastin (aquil-aril sulfonato de sodio más purpura de

bromocresol), haciendo movimientos rotativos, la leche de los pezones infectados

forman un gel, la consistencia del gel se evalúo en forma visual, por lo que los

resultados fueron leídos como negativos, trazas, 1+, 2++, 3+++, y mastitis clínica.

Se recolectaron 484 muestras de leche, provenientes de 122 vacas en producción (de

16 establos). La toma de muestras se realizó de acuerdo a las instrucciones

recomendadas por el National Mastitis Council (NMC) (1999). Es decir, se utilizó para

ello tubos de ensayo estériles los cuales fueron llenados en dos tercios como máximo e

identificados previamente con el número de vaca y pezón. La toma de muestra se hizo

ejerciendo una sola vez una presión mínima del pezón. Posteriormente, las muestras

fueron colocadas inmediatamente dentro de una hielera cerrada herméticamente y

transportadas refrigeradas al Laboratorio de Bacteriología de la Facultad de Medicina

Veterinaria y Zootecnia de la UMSNH, en donde se mantuvieron a 4° C hasta su

procesamiento al día siguiente durante un tiempo inferior a 18 horas de su recolección.



Aislamiento e identificación de cepas de S. aureus

Las muestras de leche se homogeneizaron y se sembraron en agar 110 estafilococos

(Bioxon) y en placas de agar sangre de borrego (Agar sangre más sangre de borrego al

5%) y se incubaron durante 48 h a 37ºC. Los aislamientos fueron seleccionados de

acuerdo con Sears y McCarthy (2003), es decir, según su morfología, tamaño y

pigmentación de la colonia, prueba de catalasa, tinción Gram, prueba de coagulasa,

así como también a la presencia y tipo de hemólisis. Las colonias presuntivas de

pertenecer al género Staphylococcus se identificaron en base a su morfología y

características microscópicas: tinción de Gram, producción de catalasa y coagulasa,

crecimiento a 37ºC (Pellegrino et al., 2011). Los cocos Gram-positivos, catalasa,

manitol, gelatinasa, y coagulasa positivos y que presentaron hemolisis, fueron

clasificados como pertenecientes a la especie S. aureus.

Los casos de mastitis que mostraron al momento de realizar la prueba de California un

conteo de células somáticas arriba de 200.000 cel/ml, con o sin aislamiento de

microorganismo, se los consideró como afectados por mastitis subclínica. Por otro lado,

las vacas que presentaron signos clínicos, leche con presencia de coágulos o sangre,

alteraciones de la ubre (enrojecimiento, hinchazón, calentamiento, dolor) elevado

conteo de células somáticas y aislamiento de microorganismos se les consideró como

afectados por mastitis clínica.

Prueba de sensibilidad a antibióticos

Las cepas aisladas de S. aureus fueron analizadas con el método de difusión en disco

de BIO RAD de acuerdo con Torutoglu et al. (2006). 3 a 5 colonias de cada cepa

previamente identificada, fueron suspendidas en 2 ml de solución salina estéril a una

densidad aproximadamente igual a la densidad del estándar 0.5 de McFarland.

Enseguida, la suspensión bacteriana se homogenizó y se incubó a 37ºC por 24 horas.

Posteriormente, un hisopo estéril seco de algodón fue colocado en la suspensión,



enseguida se quitó el exceso de caldo presionando y girando el hisopo contra el interior

del tubo. La suspensión bacteriana fue inoculada sobre el agar Mueller-Hinton (Oxoid)

con el hisopo estéril realizando estrías en todas direcciones con el fin de cubrirla

completamente, de tal manera que la superficie entera del agar quedo cubierta.

Posteriormente los discos que contenían los siguientes antibióticos: ampicilina (Bio-Rad,

10 μg), cefalotina (Bio-Rad, 30 μg), cefotaxima (Bio-Rad, 30 μg), ceftazidima (Bio-Rad,

30 μg ), cefuroxime (Bio-Rad, 30 μg), Dicloxacilina (Bio-Rad, 1 μg), eritromicina (Bio-

Rad, 15 μg), gentamicina (Bio-Rad, 10 μg), pefloxacina (Bio-Rad, 5 μg), penicilina (Bio-

Rad, 10 UI), tetraciclina (Bio-Rad, 30 μg), y trimetoprim/sulfametoxazol (Bio-Rad, 25 μg)

fueron colocados en condiciones de esterilidad en la superficie del medio haciendo

presión sobre estos cuidadosamente para asegurar el completo contacto con la

superficie del agar e incubados aerobicamente a 37ºC por 18 horas. Los resultados

fueron registrados como sensibles (S) o resistentes (R) por el diámetro del halo de

inhibición de acuerdo a los estándares interpretativos de BIO-RAD (recomendaciones

de la FDA y CLSI, 2008) (Cuadro 2). La cepa de referencia utilizada para los ensayos

de susceptibilidad antibiótica fue la ATCC 25923 de S. aureus.

Cuadro 2. Interpretación del diámetro de las zonas de inhibición para patógenos de interés veterinario

Agente antimicrobiano Concentración Zona de inhibición (mm)

Sensible Intermedio Resistente

Ampicilina 10 μg ≥ 29 - ≤ 28

Cefalotina 30 μg ≥ 18 15-17 ≤ 28

Cefotaxima 30 μg ≥ 23 15-22 ≤ 14

Cefepime 30 μg ≥ 18 15-17 ≤ 14

Cefuroxima 30 μg ≥ 23 15-22 ≤ 14

Dicloxacilina 1 μg ≥ 13 11-12 ≤ 10

Eritromicina 15 μg ≥ 23 14-22 ≤ 13

Gentamicina 10 μg ≥ 15 13-14 ≤ 12

Levofloxacina 5 μg ≥ 17 14-16 ≤ 13

Penicilina 10 UI ≥ 29 - ≤ 28

Tetraciclina 30 μg ≥ 19 15-18 ≤ 14

Trimetropim- 25 μg ≥ 16 11-15 ≤ 10 Sulfametoxazol

* Diámetros del halo de inhibición según BIO RAD (recomendaciones de la FDA y CLSI), 2010.

Cuadro modificado de Pellegrino et al., 2011.



RESULTADOS y DISCUSIÓN

A partir del muestreo realizado a los 16 hatos lecheros, se obtuvieron 484 muestras de

leche (ya que 4 cuartos estaban ciegos y no se consideraron) de las cuales se aislaron

102 cepas bacterianas correspondientes al género Staphylococcus. De éstas,

41 (40.2%) fueron identificadas como S. aureus (Cuadro 3), mientras que el resto 61

(59.8%) correspondieron a estafilococos coagulasa negativos (ECN), mismas que se

obtuvieron de los casos de mastitis clínica y subclínica de los hatos lecheros de Téjaro

Michoacán.

Cuadro 3. Resistencia antibiótica de S. aureus aislados de leche de vacas con mastitis. ________________________________________________ S. aureus (n= 41) ________________________________________________ Antibiótico Susceptible Resistente n % n % Ampicilina 32 78.4 9 21.9 Cefalotina 41 100 0 0 Cefotoxina 41 100 0 0 Cefepime 41 100 0 0 Cefuroxima 41 100 0 0 Dicloxacilina 41 100 0 0 Eritromicina 37 90.2 4 9.7 Gentamicina 41 100 0 0 Levofloxacina 41 100 0 0 Penicilina 29 70.7 12 29.2 Tetraciclina 40 97.5 1 2.4 Trimetropim- 41 100 0 0 Sulfametoxazol _________________________________________________

En el presente trabajo se determino la resistencia a antimicrobianos de uso frecuente

en el tratamiento de la mastitis bovina de cepas de Staphylococcus aureus aisladas de

muestras de leche provenientes de 16 establos lecheros de la población de Téjaro,

Michoacán.



Para evaluar los perfiles de resistencia de las cepas de S. aureus, se realizaron

ensayos de resistencia in vitro frente a 12 agentes antimicrobianos de uso frecuente

para el tratamiento de la mastitis bovina. De las 41 cepas de S. aureus estudiadas, 26

(63.41%) fueron resistentes a cuatro antibióticos, de ellas el 100% fueron aisladas de

vacas con mastitis subclínica. El 29.2% (12) del total de las cepas aisladas de S.

aureus fueron resistentes a la penicilina, 21.9% (9) a la ampicilina, 9.7% (4) a la

eritromicina y solamente el 2.4% (1) de las cepas resultaron resistentes a las

tetraciclinas (Cuadro 1).

El análisis del comportamiento de las cepas de S. aureus aisladas frente a los

antimicrobianos de uso frecuente en mastitis bovina, mostró que el porcentaje de

resistencia encontrado para penicilina (29.2%) fue superior a lo encontrado por Faría et

al. (2005) en Venezuela (13%), y similar en comparación con lo informado por San

Martín. (2006) en Chile; Reinoso et al. (2008), y Pellegrino et al. (2011) en Argentina,

quienes informaron un 26%, 28% y 22.2%, respectivamente.

Este mismo resultado de resistencia a la penicilina fue relativamente menor a lo

reportado por Bezek, (1998) en un estudio realizado con vacas con mastitis en Estados

Unidos (44%), por Gentilini et al. (2002) en Argentina (40%), e inferior a lo observado

por Malinowski et al. (2002) en Polonia (66.7%), por Ruiz et al. (2001) en Colombia y

por Mylus et al. (1998) en Finlandia (50%).

Lo anterior, puede ser debido a que el S. aureus es una bacteria que desarrolla

rápidamente resistencia a antibióticos como la penicilina, sobre todo posterior a su uso

terapéutico en terreno como es el caso de los tratamientos de mastitis bovina, debido al

aumento de la presión de selección sobre las susceptibles lo que es de gran

preocupación en Medicina Veterinaria (Betancourt et al., 2003).

Esta resistencia observada en este estudio y en diversas investigaciones realizadas a

nivel mundial en donde reportan este fenotipo de resistencia como el más comúnmente

observado en cepas de origen bovino, también puede ser debido a que este antibiótico



representa el principal antibiótico recomendado para el tratamiento de la mastitis en las

vacas (Li et al., 2007; Turutoglu et al., 2006; Guardabassi y Courvalin, 2006).

Por otro lado, la resistencia observada en este estudio para ampicilina (21.9%) fue

inferior a lo encontrado por Ruiz et al., 2001) en Colombia (71.4%).

Debido a que la ampicilina pertenece a un extenso grupo de penicilinas conocido como

aminopenicilinas, similares en espectro de actividad a las penicilinas naturales, pero

más resistente a betalactamasa. Los resultados muestran que la actividad de este

antimicrobiano fue menos afectada que la de la penicilina, lo que concuerda con otros

autores (Betancourt et al., 2003).

En cuanto a los resultados de resistencia a eritromicina el valor obtenido (9.7%) se

encuentra por encima de lo obtenido por Valero et al. (2010) en Venezuela (3.7%), y fue

similar a lo observado por Valero et al. (2010) y por Gentilini et al. (2000) en Argentina

(11,6%). Sin embargo, la resistencia a este macrólido está por debajo de los resultados

encontrados por Aslantas et al. (2006) en Hatay (28%), por Patiño, (2008) en

Michoacán y por Adwan, (2006) en Palestina (40.9%).

Los resultados del presente estudio sobre la resistencia a tetraciclinas del 2.4% (1/41

cepas), son comparables a los obtenidos por Pitkälä, et al. (2004) en Finlandia (5,1%) y

por Anderson et al. (2006) en Carolina del Norte y Virginia (Estados Unidos de

Norteamérica) (0,5%). Sin embargo, es menor a la reportada por Faría et al. (2005)

previamente en la región (9,09%). Mientras que otras investigaciones efectuadas en

diferentes países revelan un mayor porcentaje de resistencia a tetraciclina desde un 9

hasta un 67% (Ruiz et al., 2001; Adwan, 2006; Aslantas et al., 2006; Malinowski et al.,

2002; Turutoglu et al., 2006).

Respecto a la sensibilidad de las cepas de S. aureus, se encontró que el 100% (41) de

estas fueron sensibles a la cefalotina, cefotoxina, cefepine, cefuroxima, dicloxacilina, lo

cual fue similar a lo obtenido en un estudio realizado por Morales y Huerta (2004), en un



estudio realizado de sensibilidad al Ceftiofur, que es uno de los principios activos de

mayor uso en medicina veterinaria. Lo anterior, probablemente se deba a que por el

elevado precio de esta familia de antimicrobianos no sea uno de los principios activos

de primera elección para el granjero y aun no se ha desarrollado tanta resistencia

(Patiño, 2008).

En cuanto a gentamicina, investigadores en Argentina (François et al., 2000; Gentilini et

al., 2000; Revelli et al., 2001,), Uruguay (Giannechini et al., 2002), Venezuela (Faría et

al., 2005) y Estados Unidos (Trinidad et al., 1990; Owens et al., 1997) observaron

también una sensibilidad total (100%) de las cepas de S. aureus, igual a lo obtenido en

este estudio.

Asimismo, mostró el 100% de sensibilidad hacia el trimetoprim-sulfametoxazol igual a lo

reportado por Myllys et al. (1998) y Ruiz et al. (2001). Sin embargo debemos tener en

cuenta que la eficacia de estos medicamentos en ubre bovina es limitada, debido a su

pobre distribución y la disminución de su potencia en medios lácteos (Ruiz et al., 2001).

Por otro lado, en cuanto a tetraciclinas este estudio mostró un 97.5% de susceptibilidad

similar a lo informado por Morales y Huerta (2004) y por Valencia y Ansalmeti, los

cuales reportaron una sensibilidad del 100% a la tetraciclina de Staphylococcus aureus

aislados de leche de vacas con mastitis subclínica en el estado de Veracruz, México

(Patiño, 2008).



CONCLUSIÓN

Se concluye que las cepas de Staphylococcus aureus aisladas en este trabajo

mostraron mayor resistencia in vitro a los antibióticos de uso frecuente en la terapia de

la mastitis bovina como son la Penicilina y Ampicilina.

Esta resistencia trae como consecuencia por un lado una disminución en la respuesta al

tratamiento en caso de mastitis clínica y por el otro, la transmisión de bacterias

resistentes a antibióticos a los consumidores a través de la cadena alimentaria, cuando

se consumen productos elaborados a partir de leche cruda, por lo que en el tratamiento

de los animales infectados por S. aureus, es importante determinar a través de un

antibiograma la resistencia que estos presentan a los antibióticos y así aplicar el

tratamiento adecuado.



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