ricerche in medicina trasfusionale del cane e del gatto. determinazione gruppo sanguigno 2. prove di...

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Ricerche in medicina trasfusionale del cane e del gatto Dott.ssa Eva Spada DMV, PhD Ricercatore in Scienze Cliniche Veterinarie Specialista in Patologia e Clinica degli animali d’affezione VESPA Università degli Studi di Milano

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Ricerche

in medicina trasfusionale

del cane e del gatto Dott.ssa Eva Spada

DMV, PhD

Ricercatore in Scienze Cliniche Veterinarie

Specialista in Patologia e Clinica degli animali d’affezione

VESPA – Università degli Studi di Milano

http://users.unimi.it/rev

Prof. Elisabetta Ferro

Prof. Daniela Proverbio

Dott. Eva Spada

Dott. Roberta Perego

Dott. Giada Bagnagatti De Giorgi

Dott. Alessandra Della Pepa

Dott. Emanuela Valena

Dott. Luciana Baggiani

Reparto di medicina Emotrasfsuionale Veterinaria (REV) http://users.unimi.it/rev

• inaugurato Ottobre 2010

• nato grazie alle donazioni privato

• principali attività e obiettivi:

1. Selezione donatori di sangue

2. Banca del sangue

3. Servizi emotrasfusionali

4. Formazione in medicina emotrasfusionale

1. Selezione dei donatori

• Identificare donatore ideale

• Razze canine

• Razze feline

Gruppi sanguigni - CANE

• SISTEMA DEA

• DEA: Dog Erythrocyte Antigen

• DEA 1.1 POS

• DEA 1.1 NEG

Razze canine

• Bovaro del Bernese

• Golden Retriever

• Cane Corso

• Prevalenza gruppo

• Dea 1.1 negativo

• Dea 1.1 positivo

Bovaro del Bernese

41 cani: 100% DEA 1.1 pos

Golden Retriever 67 cani: 93% DEA 1.1 pos, 7% DEA 1.1 neg

Cane corso 41 cani: 68% DEA 1.1 neg, 32% DEA pos

Gruppi sanguigni - GATTO

• SISTEMA AB

• A (+++)

• B (++)

• AB (+)

• Alloanticorpi preformati

Epidemiologia gruppi sanguigni

Gatti comuni europei:

• 90,7% gruppo A

• 7,1% gruppo B

• 2,1% gruppo AB

Razze feline: Ragdoll

• Caratteristiche fisiche

• Indole

• Gestione

• prevalenza gruppi sanguigni 61 soggetti

• 77% A, 5% B, 18% AB

• Plasma AB: universale

Malattie trasmesse per via ematica

Prevalenza di malattie infettive emergenti trasmesse da vettore nei gatti di Milano

• 260 campioni di sangue in EDTA testati

• Real time PCR (IZS Sicilia - Centro di Referenza Nazionale per Anaplasma, Babesia, Rickettsia e Theileria)

• 33,1% Mycoplasma haemofelis e M. haemominutum

• 31,9% Rickettsia spp.

• 17,7% Anaplasma phagocitophylum

Prospettive future

• PCR su unità ematiche

per indagare malattie trasmesse con sangue

2. Banca del sangue

Controlli di qualità

• unità di sangue intero felino

1. contaminazione batterica

2. ammoniemia

3. quantità e qualità cellulare

Controllo di qualità

• Raccolta sangue con sistema aperto

• Unità sangue felino: 50-60ml

• Valutazione della conservabilità di sacche di sangue intero di gatto

Controllo di qualità

Analisi effettuate

• D0 e D35

• Unità sangue intero con

anticoagulante CPDA1

• conservate in

frigoemoteca a T

controllata 4±2°C

• per 35 giorni

Controllo di qualità

• Contaminazione: controllo colore e torbidità

e con emocoltura (Tryptic Soy Broth)

• Ammoniemia: microdiffusione

• Conta: citometria a laser e a impedenza

• Morfologia cellulare: striscio ematico

(ingrandimento 1000x)

Materiali e Metodi

DISCOCITA

ECHINOCITA

SFEROCITA

REVERSIBILE

con il processo di

ringiovanimento

IRREVERSIBILE

Risultati

26 unità di sangue intero felino

Assenza di contaminazione

batterica sia a D0 che a D35 nel

100% delle sacche.

Nessuna variazione di colore e

di torbidità

Emocoltura

0

50

100

150

200

250

300

350

400

450

500

NH3_D0 NH3_D35

Ammoniemia

NH3 D0 NH3 D35

µg/dL

MEDIA±

DS

118,2 464,2

±76,6 ±3,3

MIN -MAX

28,3 451,8

250,6 465

p value <0,0001

NH3

Conta cellulare

MEDIA± D.S. MIN MAX p value

RBC D0 X 10³/µl 7595,6 ± 1423,2 5470 10700

0,4 RBC D35 X 10³/µL 7218,5 ± 1784,3 5320 12000

HGB D0 g/dL 10,5 ± 2,2 6,83 14,9

0,3 HGB D35 g/dL 9,8 ± 2,4 6,7 15,3

HCT D0 % 29,5 ± 6,2 20,6 44,6

0,3 HCT D35 % 27,8 ± 6,0 18,1 43,5

RDW D0 % 18,3 ± 1,7 15,5 23,5

0,5 RDW D35 % 18,7 ± 2,1 15,9 23,9

MCV D0 fL 38,8 ± 2,5 32,4 44,4

0,8 MCV D35 fL 38,6 ± 2,2 34 43,3

MCH D0 pg 13,8 ± 1,1 11,2 15,4

0,4 MCH D35 pg 13,5 ± 0,8 12,1 15

MCHC D0 g/dL 35,6 ± 1,9 30,5 38,8

0,5 MCHC D35 g/dL 35,1 ± 2,0 30,3 38,1

WBC D0 /µL 9621,6 ± 3631,3 3550 18000

<0,0001 WBC D35 /µL 1047,6 ± 860,4 123 4030

0

50

100

150

200

250

300

350

ECHINOCITI_D0 ECHINOCITI_D35

Morfologia cellulare

ECHINOCITI

D0 /hpf

ECHINOCITI

D35/hpf

MEDIA

±

D.S. 164,3 ± 70,6 350,0 ± 0,0

MIN -

MAX 44,4 - 250 350 - 350

p value 0,0002

ECHINOCITI

Prospettive future

• Valutare in vivo la qualità delle cellule trasfuse

• Valutare nuovi parametri (Hb libera, emolisi, pH, K, LDH)

3. Servizi emotrasfuionali

• Trasfusioni di sangue

• Valutazione emocompatibilità

1. determinazione gruppo sanguigno

2. prove di cross-matching minor e major

Trasfusioni

IMHA IPOTIROIDISMO

Trasfusioni sangue o emocomponenti

FIV PARVOVIROSI

Tecniche di emotipizzazione

• Determinazione del gruppo sanguigno

• DEA 1.1 cane

• A,B, AB gatto

ID Gel-Test Micro Typing System - Diamed

Immunomigrazione

Quick-LabTEST A+B - Alvedia

• Performance

• Confronto con card

• Se, Sp, VPP, VPN 100% per gruppo A, B e AB

• Concordanza con card (Kappa test) molto buona (K=0.854) A, buona per B (K=0.776) scarsa per AB (K=0.167)

• Test ripetibile, di facile e veloce esecuzione e semplice lettura eseguibile su campioni fino ad un mese dal prelievo

Versione

QUICK LAB

Quick-LabTEST DEA 1.1 - Alvedia

• Performance RIM su cartina

• Confronto con card

• Studio in esecuzione

RIM CARD

RapidVet-H IC - Agrolabo

Versus

Prospettive future

• Determinazione gruppo sanguigno con citofluorimetria

• Anticorpi policlonali DEA 1.x (DEA1.1, DEA 4, DEA 7)

Plasma ricco di piastrine - PRP

• Proprietà rigenerative fattori crescita piastrinica

• Dermatologia, oculistica, traumatologia

4. Formazione

Corsi di

aggiornamento

Formazione

all’estero

(Spagna, USA)

4. Formazione in medicina trasfusionale

• Studenti (lezioni al V anno e nei modulo di clinica medica)

• Neolaureati (specializzandi, dottorato)

• Liberi professionisti (corso di perfezionamento, incontri con ordini, intraclinic)

4. Formazione in medicina trasfusionale

Royal Canin Italia S.r.l.

Via A. Cechov, 50/2

20151 Milano

CON IL PATROCINIO DELL’ORDINE DEI MEDICI

VETERINARI DELLA PROVINCIA DI LODI

ORGANIZZA UNA SERATA

DI AGGIORNAMENTO VETERINARIO

DAL TITOLO:

AGGIO RNAMENTI IN MEDICINA

TRASFUSIO NALE NEL CANE E NEL GATTO

LODI, 13 OTTOBRE 2011

Relatrici:

PRO F.SSA DANIELA PRO V ERBIO

DO TT.SSA EV A SPADA

PRO F.SSA DANIELA PROVERBIO

MED. VET. MILANO

Laureata in Medicina Veterinaria c/ o l’Universi-

tà degli Studi di Milano nel 1988. Nel 1993

ha conseguito il titolo di Dottore di Ricerca. Dal

1995 è Ricercatore Universitario e dal 2005

Professore Associato presso il Dipartimento di

Scienze Cliniche Veterinarie dell’Università de-

gli Studi di Milano svolgendo attività di docen-

za e clinico assistenziale nel settore di Medicina

Interna. Dal 2010 è responsabile del Reparto

di Medicina Trasfusionale Veterinaria della Fa-

coltà. Autore di pubblicazioni su riviste nazio-

nali e internazionali e relatore a congressi na-

zionali e internazionali.

DOTT.SSA EVA SPADA

MED. VET. MILANO

Laureata in Medicina Veterinaria c/ o l’Universi-

tà degli Studi di Milano nel 2001. Nel 2006

ha conseguito il titolo di Dottore di Ricerca in

Scienze Cliniche Veterinarie. Nel 2007 ha con-

seguito la Specializzazione in Patologia e Clini-

ca degli Animali d’Affezione. Dal Luglio 2011

ricopre, per il settore scientif ico disciplinare

VET/ 08 (Clinica Medica Veterinaria), il ruolo

di Ricercatore Universitario c/ o il Dipartimento

di Scienze Cliniche Veterinarie dell’Università

degli Studi di Milano. Dal 2010 collabora al-

l'attività del Reparto di Medicina Trasfusionale

Veterinaria della Facoltà. Autore di pubblica-

zioni su riviste nazionali e internazionali e rela-

tore a congressi nazionali e internazionali.

Università degli Studi di Milano

Dipartimento di Scienze Veterinarie per la Salute, la Produzione animale

e la Sicurezza Alimentare

Reparto di Medicina Emotrasfusionale Veterinaria

Serata di medicina trasfusionale veterinaria

Relatori Prof.ssa Daniela Proverbio, Dott.ssa Eva Spada

Programma

20.15 Gruppi sanguigni nel cane e nel gatto

20.30 Impiego di sangue ed emocomponenti

20.45 Somministrazione degli emocomponenti e principali reazioni

trasfusionali

21.00 Reparto di medicina Emotrasfusionale Veterinaria (REV)

dell’Università degli Studi di Milano

21.15 Intervento Bayer

21.30 Domande/discussione e buffet

4. Formazione in medicina trasfusionale

Aimvet

• Associazione italiana medicina trasfusionale veterinaria

• 11 Settembre 2012

• Università Milano, Perugia, Bologna, Pisa

• Promuovere la crescita e la conoscenza della medicina trasfusionale

http://users.unimi.it/rev

NERONE

BLOOM

PLACIDUS

RAFA ETA

BILBERIA BABY

ALCUNI DEI NOSTRI

DONATORI…