昭 和43年1月20日 375

Rickettsiaの 免 疫 学 的 研 究

Rickettsia orientalisの エ ー テ ル 処 理 抗 原

に よ る補 体 結 合 反 応

九州大学医学部第一内科教室(主 任:柳 瀬敏幸教授)

長 井久 仁雄 小 林 譲 橘 宣 祥

1は じめに

Rickettsia orientalis感 染卵黄襞乳剤を出発材

料 として,こ れに分画遠心,つ いで陽イオン交換

樹脂 およびエーテル処理を加えることによつて,

従来,難 しいとされていた群(種)特 異性の可溶

性抗原 と型(株)特 異性の粒子抗原の精製が可能

であることはさきに報告 した1).

本論文では,こ れ ら可溶性抗原ならびに粒子抗

原を用いて,R. orientalis感染マウスにおける抗

体の出現状況を検討し,か つ,恙 虫病患者血清に

ついても補体結合反応を行なつたのでその成績を

報告す る.ま たWassermann反 応陽性血清に対 し

てみられ る非特異的反応についても若干の検討を

加えたので,そ の結果 もあわせて述べることにし

た.

II実 験材料な らびに実験方法

1.抗 原

R. orientalisと しては,代 表株 と されている

Gilliam株,Karp株 および加藤株を使用したが,

これ らはいずれ も国立予防衛生研究所か ら分与 さ

れ,当 研究室で継代保存されているものである.

抗原の精製法の詳細は前報1)に述べたごとくで

あるが,そ の概要は次の通 りである.

R. orientalis感染卵黄襞のPGS2)に よる50%

乳剤を出発材料 とし,こ れ に等量の りん酸緩衝

庶糖液を加えて25%乳 剤 としたのち,1,500廻 転

で10間 分遠心した.液 は3属 に分れるが,そ の中

闇層をとつてさらに10,000廻 転で30分 間遠心する

と,卵 黄クリーム層,液 層,お よび沈渣の3層 が

えられる.こ の沈渣をとつて りん酸緩衝庶糖液に

再浮遊せしめ,こ れに媒質を等 しくする陽イオン

交換樹脂Amberlite XE-64を,も との卵黄襞に対

して1/10量 の割に加え,よ く振盪後,1,500廻 転

で10分 間遠心して,陽 イオン交換樹脂を除いた.

この遠心上清を分液漏斗に移し,こ れに1.5倍 量

の麻酔用工ーテルを加え,よ く振盪後,18時 間氷

室に放置すると,分 れてエーテル層,中 間屠,お

よび液層となる.こ の液層を10,000廻 転で30分 間

遠心 して上清と沈渣とに分離し,上 清はベロナー

ル緩衝食塩液に対 して透析ののち,限 外濾過法で'

濃縮 して可溶性抗原 として用い,ま た沈渣はベロ

ナール緩衝食塩液で洗滌 してから粒子抗原として

使用 した.

精製抗原の最終濃度は可溶性抗原および粒子抗

原ともに,Gilliam株,Karp株 ではもとの卵黄

嚢に対して400%,加 藤株では800%と なし,使 用

するまで一70QCに 保存 した.こ のようにしてえら

れた各株由来の両抗原は,オ モロガスのマウス免

疫血清に対 して抗原価を測定 し,実 際に補体結合

反応を行な うに際 してはその4単 位を使用した.

対照抗原としては,正 常14日 卵の卵黄襞乳剤か

ら,上 記 と同様の方法で,可 溶性ならびに粒子抗

原を作成 し,こ れを対照卵黄襞抗原とした.

Wassermann反 応陽性血清にみられる非特異的

反応をみる場合は,対照卵黄襞抗原およびGilliam

株由来の抗原を使用 したが,そ の際は,い ずれ も

200%抗 原になるよう稀釈して用いた.

脚 注:本 論 文 の 要 旨 は 第40回 日本伝 染 病 学 会 総 会

(1966年4月 福 岡)に おい て 発表 した.Con-

tribution No.67-35.

1376 日本伝染 病学会雑 誌 第41巻 第10号

2.抗 血 清

2. 1 R. orientalis感 染 マ ウス 血 清

R. orientalisの 代表 株 と してGilliam株 を 用 い

た.す なわ ち,Gilliam株 感 染 マ ウス の 脾 にPG

S2)を9倍 量 加 え,Waringブ レン ダ ーで1分 間

処 理 して 乳 剤 と し,1,500廻 転 で5分 間 遠 心 した

上 清 をPGSで10-3に 稀 釈 した もの を,生 後2カ

月 前 後 のdd系 成 熟 マ ウス の背 部 皮 下 に0.2mlず

つ 接 種 した.接 種 後12日 目 よ り20日 目ま で,毎 日1

5匹 ず つ 心 穿 刺 に よつ て 全 採 血 を行 な い,そ の

後 は,42日 目お よび60日 目に 各5匹 ず つ,90日 目

お よび180日 目に は 各3匹 ず つ 採 血 した.各 感染

マ ウス よ りえた 血液 は,一 夜 氷 室 に 置 いた の ち

血 清 を 分離 し,使 用 す る まで 一20℃ に凍 結保 存 し

た.使 用 に際 して は600Cで20分 間 加温 して非 働 化

した.

Fig. 1 Complement Fixation Titers of Sera from Mice Infected with Rickettsiaorientalis (Gilliam strain) against Soluble and Particle Antigens

Soluble Antigen Particle Antigen

* Days after inoculation** Reciprocal of serum

, dilution

昭和43年1月20日 377

Table 1 Complement Fixation Test with Soluble Antigens on Convalescent

Sera from Patients with Tsutsugamuchi Disease and Homologous

Mouse Antisera

* Original concentration: Gilliam and Karp 400%, Kato 800%.** All of the used mouse antiserums: the 56th day after the first

injection (hyperimmune serum)*** Yamashita: the 23rd day after illness

Kaetsu: the 32nd day after illness**** VBS: Veronal buffered saline (pH 7.3)

2.2恙 虫病患者血清

1961年7月 か ら8月 にかけて,新 潟県下で罹患

した8例(

および),1961年10月 大分県下で罹

患 した1例(金 子),お よび1963年 と1964年 の秋か

ら初冬にかけて宮崎県高原町で罹患 した6例(

および),計

15例の恙虫病患者血清34検 体について抗体価を検

討 した.新 潟県下の症例の血清は,新 潟大学斉藤

秀晃博士の御好意で分与されたものである.

上記被検血清はいずれも一20℃ に凍結保存 し,

使用に際 しては56℃ で30分 間加温 し非働化 して用

いた.

3.Wassermann反 応 陽 性 血 清

1965年8月 か ら9月 に か け て,九 州 大 学 医 学 部

附属 病 院 の外 来 を受 診 した 患 者,お よび 入 院 中 の

患者 で,Wassermann反 応(緒 方 法)を 行 な い え

た48検 体 を 用 い た.そ のWassermann抗 体 価 の 内

訳 は,10倍 以下2例,10倍4例,20倍9例,40倍

9例,80倍10例,160倍5例,320倍4例,640

倍3例,1,280倍2例 で あつ た.

これ らの血 清 も,使 用 に際 して は56℃ で30分 間

非働 化 して用 いた.

4. .補 体 結 合 反 応

術 式 の詳 細 は前 報1)と 同 じ く微 量 法 に よつ た 。

378 日本伝染病学会雑誌 第41巻 第10号

Table 2 Complement Fixation Test with Particle Antigens on Convalescent

Sera from Patients with Tsutsugamushi Disease and Homologous

Mouse Antisera

* Original concentration: Gilliam and Karp 400%, Kato 800%.** All of the used mouse antiserums: the 56th day after the firstinjection (hyperimmune serum)

*** Yamashita: the 23rd day after illne ssKaetsu: the - 32nd day after illness

**** VBS: Veronal buffered saline (pH 7 .3)

III実 験 成 績

1.R. orientalis感 染 マ ウス の補 体 結 合 抗 体 価

の消 長

Gilliam株 を 用 いて 可 溶 性 抗 原 な らび に 粒 子 抗

原 に対 す る抗 体 の 出 現 な らび に 上 昇 の 様 相 を み

た.R. orientalisの 接 種 を うけた マ ウ ス は14～15

日 目頃 か ら 発 症 して きた が,図1に 示 した よ う

に,抗 体 価 は発 症 とほ とん ど時 を 同 じ く して 出現

し始 め,比 較 的 す みや か に上 昇 して,19～20日 目

頃 に は,128倍 な い し256倍 に達 した.さ らに42

日 目,お よび60日 目に は1,024倍 と,非 常 に高 い

抗 体 価 を示 す マ ウス もみ られ た.ま た90日 目,お

よび180日 目で は,多 少 抗 体 価 は 低 下 して ゆ く傾

向が 認 め られ た が,な お か な り高 い値 を 保 持 して

い た.可 溶 性 抗 原 に対 す る抗 体 と粒 子 抗 原 に 対 す

る抗 体 とで は,そ の 出現 時 期 に つ いて は ほ とん ど

差は認められなかつたが,総 体的に粒子抗原に対

する抗体価の方が高いように見受けられ,ま た低

下し始めるのも可溶性抗原に対する抗体の方が,

少し早いように思われた.

2.恙 虫病患者血清の補体結合反応

2.1 Box titration

エーテル処理法によつてえられた可溶性抗原な

らびに粒子抗原は,マ ウス免疫血清に対 して,そ

れぞれ,群(種)特 異性および型(株)特 異性を

示すとい うことは前報1)で 述べた通 りである.そ

こで,こ れ らのことが,実 際に恙虫病患者血清に

ついてもいえるかどうかをみるために,2例 の恙

虫病患者の恢復期血清(山 下および嘉悦)を 用い

て,各 株由来の可溶性ならびに粒子抗原に対 して

box titrationを行ない,オ モロガスのマウス免疫

血清に対 してみられる反応パターンと比較検討 し

昭和43年1月20日 379

Table 3 Complement Fixation Test with Soluble and Particle Antigens on 32 Sera from

13 Patients with Tsutsugamushi Disease

All sera were diluted two-fold serially. First dilution is 1:8.* Both soluble and particle antigens: 4 units.

** Soyama, Yonemoto, Tokunaga and Kandabashi: Takaharu-machi, Miyazaki prefecture.Akaida, Ohi, Kato, Puruyama, Tsuchida, Ishii, Ito and Yamasaki:Niigata prefecture.Kaneko: Oita prefecture.

***VBS: Veronal buffered saline(pH 7.3)

た.そ の結果,表1お よび表2に 示すように,可溶

性抗原に対 しては,山 下,嘉 悦 ともに,い ずれの

株に対 しても同じ抗体価を示 してお り,か つ,そ

の反応パターンはジオモロガスのマウス免疫血清

ときわめて類似 していた.他 方,粒子抗原に対 して

は,株 によつて反応パターンが異なつてお り,山

下,嘉 悦ともGilliam株 に最も強く反応を示 した.

これらのこと.かち,恙 虫病患者血清に対 しても

可溶性抗原は群(種)特 異性であ り,ま た粒子抗

原では,マ ヴス免疫血清に対するほど明瞭ではな

380 日本伝染病学会 雑誌 第41巻 第10号

いが,や は り型(株)特 異性を示す ものと考えら

れた.

2.2Linetest

ついで,Gilliam株,Karp株 および加藤株由

来の可溶性ならびに粒子抗原の4単 位を用いて,

山下および嘉悦をのぞいた13例 の恙虫病患者血清

32検体に対 してline testによる補体結合反応を行

なつた.表3に みられるように,い ずれの症例で

も,恢 復期血清では抗体価 の 上昇 が 認め られた

が,各 抗原に対する反応の様式は次のようであつ

た.す なわち,1群 に分類 した例では,い ずれの

株 の可溶性抗原に対 しても抗体価の上昇が認め ら

れ,し かもその抗体価は各株の抗原に対 してほぼ

同様の値を示してお り,可 溶性抗原が群(種)特

異性であることを裏付けた.他 方,粒 子抗原に対

しては,Ia群 およびII群 に示 したように,株 に

よつて抗体価に相違がみられ,こ れ は 粒子抗原

が型(株)特 異性であることから,最 も抗原構造

の近い株に対 して最 も強 く反応 したものであろ う

と推測 した.し かし,抗 体価の低いIb群 ではそ

の差は上記の群ほど明瞭でなく,ま たIc群 のよ

うに,粒 子抗原に対 して全 く反応のみ られない例

もあつた.

これ ら1群 の血清学的性状とは異な り,II群 に

分類 した5例 では,粒 子抗原に対 しては明らかに

抗体価 の 上昇を認めたにもかかわ らず,可 溶性

抗原に対 しては,い ずれも全 く反応を示さなかつ

た.

3.Wassermann反 応陽性血清にみられる非特

異的反応について.

1954年,Wertman3)は,正 常卵黄嚢および正

常鶏胎児の組織の中には,梅 毒患者血清に対 して

非特異的に反応する補体結合抗原が含まれている

ことを報告 している.可 溶性抗原および粒子抗原

とも,エ ーテル処理により精製されたとはいえ,

卵黄嚢由来の成分をなお多少とも含 ん で い るの

で,同 様に梅毒患者血清に対 して非特異的に反応

する可能性があると思われた.そ こで,正 常卵黄

嚢か ら精製 した対照抗原を用い,48例 のWasser-

mann反 応陽性血清に対して補体結合反応を行な

つた.図2は その結果をWassermann抗 体価 と対

比 してまとめたものであるが,対 照可溶性抗原に

対しては,わ ずか5例 のみが反応 を示 し,か つ,

いずれも4倍 の低値であつた.し かし対照粒子抗

原に対 しては15例 が反応を示 し,最 高値は16倍 で

あ り,か つWassermann抗 体価 とほぼ正の相関

関係を示 した.

ついで,Wassermann抗 体価80倍 以上の血清24

検体につき,Gilliam株 由来の可溶性抗原ならび

に粒子抗原を用いて補体結合反応を行なつたとこ

Fig. 2 Complement Fixation Test with Normal Yolk Sac Control Antigens on

Wassermann Positive Human Sera

昭和43年1月20日 381

Fig. 3 Complement Fixation Test with Antigens of the Gilliam Strain on

Wassermann Positive Human Sera

ろ,図3の ように,対 照抗原 の 場合とほぼ同様

に,Wassermann抗 体価 との正の相関関係を示す

非特異的反応が認められた.

1V総 括ならびに考按

R.orientalis感 染卵黄嚢からエーテル処理法に

よつてえられた,群(種)特 異性の可溶性抗原な

らびに型(株)特 異性の粒子抗原を用い,R.ori-

entalis感染マウスおよび恙虫病患者血清に対 して

補体結合反応を行なつた.そ の結果,マ ウスでは

感染後14～15日 目頃より抗体の上昇が認められ,

その後比較的速かに最高値に達 し,90日 目,180

日目になつてもなおかな り高い値を保持 している

ことが明らかとなつた.両 抗原に対する抗体出現

の時期についてはほとんど差は認め られなかつた

が,低 下 し始めるのは可溶性抗原に対する抗体の

方が少 し早いように見受けられた.橘 ら4)は,R.

orientalis感染卵黄嚢乳剤から,デ オキシコール

酸 ソーダ処理法によつて作成 した精製粒子抗原を

用い,同 様にR.orientalis感 染マウスにおける

抗体の出現および上昇の様相をみているが,こ の

抗原に対 しても,15日 目頃より抗体の出現が認め

られ,そ の後急激に上昇して,21日 目頃には最高

値に達することを観察してお り,ほ ぼ一致 した成

績を報 じている.

新潟県,大 分県,宮 崎県高原町において発生し

た恙虫病患者血清に対して補体結合反応を行な う

と,粒 子抗原に対しては,13例 中11例 に,ま た可

溶性抗原に対 しては,13例 中8例 に抗体価の上昇

が認められた.可 溶性抗原 に対する抗体価は,

Gilliam株,Karp株,お よび加藤株由来の各抗

原に対して,ほ ぼ同様の値 を示 したが,粒 子抗原

では,ほ とんどの例において,各 株に対する抗体

価に相違がみられた.こ れ らのことは,恙 虫病患

者血清についても,可 溶性抗原は群(種)特 異性で

あ り,ま た粒子抗原は型(株)特 異性であるとい

うことを示 していると思われ,さ らに,2例 の代

表的な恙虫病患者の恢復期血清について行なつた

box titrationの成績もこれを裏付けている.し か

しなが ら,以 上の成績 うち,粒 子抗原では13例 中

2例 に,ま た可溶性抗原では13例 中5例 に,そ れ

ぞれ抗体価の上昇を示さないものがあつた.こ れ

らの原因 につ い ては現在のところ明らかでない

が,Bengtson5)は じめ,多 くの研究者6)7)8)によつ

て報告されているように,R.orientalisの 抗原構

造の多様性を反映しているものか も知れないし,

また,同 一の抗原刺激に対 しても,そ の反応性に

は著しい個体差のみられる生体側の因子や,さ ら

には治療のため用いた抗生剤の影響があるかも知

れない.こ の問題については今後 さらに検討を重

ねる必要があろう.

382 日本伝 染病学会雑誌 第41巻 第10号

以上のことか ら,臨 床的 に血清診断 を 行な う

にあたつて,可 溶性抗原を用いれば,こ れは群

(種)特異性であるか ら,一 種類の抗原だけ用意す

れぱ充分であり,可 溶性抗原に対 して抗体価の上

昇が証明されれば,慈 虫病であることは確実であ

つて,さ らに型(株)特 異性の粒子抗原を用いれ

ぽ,病 原 リケツチアの型別を決定することが可能

である.し か し,す でに述べたように,可 溶性抗

原に対 して全 く抗体上昇の認め られない症例もあ

ることか ら,こ れに対 して陰性結果が得られた場

合には,さ らに各型の代表株による粒子抗原を用

いて補体結合反応を試みるべきであろ う.ま たさ

らに,分 離された病毒の同定や抗原分析 も,こ れ

ら両抗原を用いることによつてきわめて確実に行

ない うるものと思 う.

発疹チフス群 リケツチアや紅斑熱群 リケツチア

では,す でに古 くから群特異性の可溶性抗原 と種

特異性の粒子抗原 とが 開発されてお り,こ れ ら

を用いた補体結合反応は特異血清診断法 として繁

用 されている9)が,悪 虫病群 リケツチアにおいて

も,こ れ らエーテル処理抗原の開発により,そ れ

とほぼ同等の慾レベルにまで達することができたと

いえるであろ う.

可溶性抗原に対する抗体と粒子抗原に対する抗

体の異同については,R.orientalis感 染マウスに

おいて,そ の両抗体の出現時期にはほとんど差は

み られなかつたが,総 体的に粒子抗原に対する抗

体価が可溶性抗原に対するそれ よりもやや高いこ

とや,可 溶性抗原に対する抗体価がやや早 く低下

し始めるように見受けられたこと,あ るいは悪虫

病患者血清において,可 溶性抗原に対する抗体価

が上昇した例で粒子抗原に対する抗体価の上昇が

みられなかつた例や,ま たその逆の場合も認めら

れたこと,さ らに重要なことは,同 一血清に対し

て可溶性抗原は群(種)特 異性を,粒 子抗原は型

(株)特 異性とそれぞれ異なつた反応様式を示す

ことから,両 者は異なるものであろうと推測され

る.

正常卵黄嚢から作成 した対照抗原およびGill一

iam株 由来の抗原を用いて,Wassermann反 応陽性

血清に対 して補体結合反応を行なうと,可 溶性抗

原 も粒子抗原 も,と もにWassermann抗 体価の高

い血清では非特異的反応が認め られ,と くに粒子

抗原に対 しては,Wassermann抗 体価の高いもの

ほど,強 く反応する傾向 が み られた.こ のこと

はWertman3)も 指摘 しているように,正 常卵黄

嚢,と くにその卵黄の中に,エ ーテル不溶性でア

ルコール可溶性の リポイ ドを含む抗原が存在 して

いるためで,こ れが精製抗原中に混在 しているこ

とによるものであろう.こ の抗原は,抗 原精製に

際 して,エ ーテル処理を数回繰 り返して行な うこ

とにより,ほ とんど実際上は問題にならない程度

にまで除 くことが出来る9)が,こ のことは臨床的

に,こ れ ら両抗原 を 用いて血清診断 を 行な う場

合,常 に留意しておかねばならないことである.

Vむ すび

R.orientalis感 染卵黄嚢からエーテル処理法に

よつてえられた,群(種)特 異性の可溶性抗原 と

型(株)特 異性の粒子抗原を用い,R.orientalis

(Gilliam株)感 染マウス血清および13例 の慈虫

病患者血清に対 して補体結合反応を行なつた.そ

の結果,感 染マウスの補体結合抗体価は,感 染後

14～15日 目頃か ら出現 し始め,比 較的すみやかに

上昇 して,19～20日 目にはほぼ最高値に達 し,90

日目および180日 目でもなおかな り高い値を保持

していた.ま た,慈 虫病患者血清では,可 溶性抗

原に対 しては13例 中8例 に,粒 子抗原に対 しては

13例中11例 に抗体価の上昇が証明された .可 溶性

抗原では,い ずれの株に対 してもほぼ同様の抗体

価を示 し,ま た粒子抗原に対 しては,各 株で異な

る抗体価を示した.

正常卵黄嚢から精製した対照抗原およびGill-

iam株 由来の抗原を用い,Wissermann反 応陽性血

清に対 して補体結合反応を行なうと,Wassermann

抗体価の高い血清では非特異的反応が若干認め ら

れた.

文 献

1) 長 井 久仁 雄: Rickettsiaの 免 疫 学 的 研 究 エ ー

テ ル処 理 に よ るRickettsia orientalisの 補 体 結

昭和43年1月20日 383

合 抗 原 の精 製 に つ い て, 日伝 染 会 誌, 40: 323

～333,昭41 (1966) .

2) Bovarnick, M. R., Miller, J. C. and Snyder,

J.C.: The influence of certain salts, aminoacids, sugars, and proteins on the stabilityof rickettsiae, J. Bact., 59: 509-522, 1950.

3) Wertman, K.: Nonspecific complement-fix-ing antigen in embryonic egg tissues, J, Lab.and Clin. Med., 30: 112-118,1945.

4) 橘 宣 祥, 小林 譲: Rickettsiaの 免 疫学 的 研 究

デ オ キ シ コー ル 酸 ソ ー ダ 処 理抗 原 に よ るRi-

ckettsia orientalisの 補 体 結 合 反応,日 伝 染 会

誌, 40: 273～279, 昭41 (1966).

5) Bengtson, I.A.: Apparent serological hete-rogeneity among strains of tsutsugamushidisease (scrub typhus), Pub. Health Rep.,60: 1483-1488, 1945.

6) Smadel, J.E., Jackson, E.B., Bennett, B.L.and Rights, F.L.: A toxic substance asso-

ciated with the Gilliam strain of R. orien-talis, Proc. Soc. Exp. Biol. & Med., 62: 138

-140,1946.7) Rights, F.L., Smadel, J.E. and Jackson, E.

B.: Studies on scrub typhus (tsutsugamushidisease). III. Heterogenicity of strains of R.tsutsugamushi as demonstrated by cross-vac-cination studies, J. Exp. Med., 87 : 339-351,1948.

8) Bennet, B.L., Smadel, J.E. and Gauld, R.L.:Studies on scrub typhus (tsutsugamushi di-sease). IV. Heterogeneity of strains of R.tsutsugamushi as demonstrated by cross-neu-tralization tests, J. Immunol., 62: 453-461,1949.

9) Smadel. J. E.-: Diagnostic procedures forvirus and rickettsia' diseases, 2 nd edition,513-552, Am. Pub. Health Ass., New Yolk,

1956.

Immunological Studies of Rickettsia

Complement Fixation Test Using

Ether Extracted Antigens from Rickettsia Orientalis

Kunio NAGAI, Yuzuru KOBAYASHI and Nobuyoshi TACHIBANA

The First Department of Internal Medicine, Faculty of Medicine, Kyushu

University, Fukuoka, Japan.

(Director: Prof. Toshiyuki Yanase)

Complement fixation tests were performed by the use of group (species) -specific soluble antigens

and type (strain)-specific particle antigens obtained by ether extraction from yolk sac materials infected

with Gilliam, Karp, and Kato strains of Rickettsia (R) orientalis respectively. The results were as follows:

1. In mice infected with R. orientalis, complement fixing antibodies against the both soluble and par-

ticle antigens began to appear almost at the same time on 14th to 15th day after the infection, rose rapidly

thereafter, and reached almost maximum on 19th to 20th day. The titers tested on 90th and 180th day

still remained higher, though below the maximum in some degree. In general, the titers obtained with

particle antigens appeared to be a little higher than those with soluble antigens. On the other hand,these latter showed a tendency to decline somewhat earlier than the former in the course of infection.

2. On 32 sera obtained from 13 patients with tsutsugamushi disease (scrubtyphus), complement fixa-

tion tests were made. In all cases, an increase of complement fixing titers was demonstrated in the con-

valescent sera. Positive reaction against soluble antigens was shown in 8 out of 13 cases, while 11 out

of 13 were shown positive against particle antigens. The titers obtained with soluble antigens from

Gilliam, Karp, and Kato strains respectively were almost the same in all cases, however, those obtained with

particle antigens were more or less different from each other according to strains used. This finding in-dicates that soluble antigens are group (species) -specific and particle antigens are type (strain)-specific,in human cases, as is the case in mice.

384 日本伝染病学会雑誌 第41巻 第10号

Those test antigens and control antigens which were obtained from non-infected yolk sac materials

have shown slightly positive non-specific reaction against Wassermann positive human sera . This fact

should be taken into consideration in practising specific serological diagnosis of tsutsugamushi disease using

these antigens and securing the proper assessment of the results.