Colorante. Coloraciones y

AnticoagulantesLic, Christiam Albornos Andrade

Instituto Superior Tecnológico Daniel A. Carrión

Curso: Hematología I

Colorantes y Coloraciones

O Coloración: es el proceso mediante el cual un cuerpo es teñido por una sustancia colorante sin perder el color cuando es lavado con el disolvente utilizado al preparar la solución colorante.

O Colorante: son aquellas sustancias que pueden conferir color a otros cuerpos. Es una estructura molecular no saturada (sales neutras)

Tipos de ColoraciónOProgresiva: es aquella en donde se

hace actuar el colorante hasta que llegue a su punto optimo teniendo un control en los tiempos de coloración (Hematoxilina de Mayers)

ORegresiva: es en donde se realiza primero una sobre coloración y luego se elimina el resto del colorante por medio d diferenciadores. (Diferenciación)

O El mecanismo fisicoquímico de la coloración tisular esta vinculado a la formación de uniones intermoleculares por atracción electrostática (entre cargas contrarias-electro adsorción) o por fuerzas d tensión superficial (interacción molecular entre los líquidos por fuerzas de gravitación generadas al dispensar las moléculas muy próximas entres si)

Tinciones de Romanowsky

O Tinción Giemsa (protozoos)1g colorante, 66ml metanol y 66

ml glicerolBuffer a pH 6.8

O Tinción Wright0.3g colorante, 97ml metanol y

3 ml de glicerol.Buffer a pH 7.2

O Tinción de May-Grünwald o Jenner (variante del Wright), no produce efecto cromático pero si ayuda a observar las granulaciones leucocitarias.

Característica General

O 1879: Paul Ehrlich comenzó con una combinación de colorantes básicos y ácidos

O 1891: Ernst Malchowski y Dimitry Leonidovich Romanowsky

O Conformados por:O Colorante catiónico (Azur B)O Colorante aniónico (Eosina)O Metanol (disolvente) – Fijación => Leishman y

WrightO Adición de glicerol => Giemsa (aumentar

estabilidad)

Anticoagulantes usados en Hematología

O Anticoagulante: sustancia que bloquea el mecanismo de coagulación evitando la formación de fibrina (coagulo)

O Uso: obtención de plasmaO Mantienen la morfología y fisiología

sanguínea.O No usarlo por mas de 24h a 4°CO Los mas usado son: EDTA, Heparina

sódica, Heparina de litio, citrato trisodico, ACD, Oxalato de potasio.

EDTA (C10H16N2O8)O Presentación: disodica, dipotasica o tripotasica.

(etilendiaminotetraacético)O Acción quelante (Ca++)O Uso: recuentos celulares, Hematocrito y frotis

sanguíneo.O Sales de potasio tienen ventaja sobre las de sodio

(solubilidad)O ICSH recomienda la sal dipotasicaO K2EDTA .2H2O (PM:404,1g) 1g quela 100 mg de

calcio iónico y el pH para una solución al 1% es de 4.8+/-1,0

O Cantidad: 1.5 – 2.2 mg por ml de sangre

HEPARINA SODICA, HEPARINA DE LITIO

O Anticoagulante fisiológicoO Impide la transformación de

protrombina a trombina.O No es recomendado para el usado de

frotis sanguíneo.O Proporción es de 0.1 ó 0.2 mg a 1mg

por ml de sangreO Usado para pruebas de fragilidad

osmótica.

Citrato Sódico (C6H5O7Na3)

O Impide que el calcio se ionice.O Utilizado para las pruebas de

hemostasia y pruebas de sedimentación

O Proporción 9: 1 (hemostasia)O Proporción 4:1 (pruebas de

sedimentación)O Se utiliza en una concentración de

de 0.106 mol/l (31,3 g/L de C6H5O7Na3.2H2O).

ACDO Usado fundamentalmente en Banco

de Sangre para la conservación de unidades.

O Proporción usada: un volumen de ACD con 4 volúmenes de sangre

O Composición:O Acido Cítrico 0.9 g, Citrato disódico 2

g, Dextrosa 2 g, H2O destilada 120 ml.