Corynebacterium spp.

Medicinski fakultet Univerziteta u Beogradu Katedra za mikrobiologiju kolska 2014/15. godina

Corynebacterium - opte osobine-

Gram pozitivni

bacili, proireni krajevi (oblik palice)

intracitoplazmatske granule: neorganski

polifosfati

specijalno bojenje

Corynebacterium - opte osobine-

raspored: kineska slova, X, V, palisade, ...

ostaju spojeni nakon deobe

Corynebacterium - opte osobine-

Corynebacterium - opte osobine-

fakultativno anaerobni

nesporogeni

nepokretni

rastu na obogaenim hranljivim podlogama

neke vrste su deo fizioloke mikroflore

Corynebacterium spp.

Corynebacterium diphtheriae

striktno patogena i najvanija vrsta izaziva difterije (respiratorna, kutana)

difteroidi

ostale vrste roda

izazivai oportunistikih infekcija

Difterijski toksin

adherencija pili kolonizacija + umnoavanje + produkcija toksina

AB

C domen R i T domeni

C

T

R

Corynebacterium diphtheriae

- faktori virulencije -

- prvi opisan faktor virulencije bakterija

- prototip bakterijskih AB egzotoksina

Endocitoza difterijskog toksina

Receptor: prekursor heparin-vezujueg epidermalnog faktora rasta

Difterijski

toksin C domen

R domen T domen

Vezivanje za receptor

Endocitoza

Insercija Translokacija C domen

u

citosolu

citosol

Acidifikacija konformacione promene

toksina

subjedinica A: ADP ribozil transferaza

transfer ADP ribozil rezidue na EF-2

normalno: EF-2: GDP + P energija za ugradnju amino

kiseline u nascentni polipeptidni lanac

toksin: EF-2-ADP-ribozil NEAKTIVAN

inhibicija sinteze proteina

ta radi A subjedinica?

ADP ribozilacija EF2

prekid sinteze proteina

smrt elije

Toksigenost C. diphtheriae

tox gen bakteriji donosi lizogeni bakteriofag ( fag)

samo lizogeni sojevi produkuju toksin

tox gen

Regulacija gena koji kodiraju sintezu toksina

aktivnost tox gena koncentracija Fe jona

regulator: dtxR (diphtheria toxin regulation)

Fe zavisan represorski protein

Toksigenost C. diphtheriae

tox gen: virusni

ekspresija tox gena: protein bakterije

visok nivo Fe: dtxR + Fe

vezuje se za DNA

toksin

nizak nivo Fe: dtxR bez Fe

ne vezuje se za DNA

toksin

uloga toksina: sistem za akviziciju gvoa

Respiratorna difterija

patogeneza:

adherencija multiplikacija i produkcija

toksina lokalni i sistemski efekti toksina

Corynebacterium diphtheriae

- bolesti -

lokalna infekcija sa sistemskom intoksikacijom

Kutana difterija predominantno lokalni efekti toksina

lokalni efekti toksina:

nekroza epitelnih elija inflamacija pseudomembrane

sistemski efekti toksina:

apsorpcija toksina miokard, periferni nervni sistem (paralize), bubrezi, jetra, slezina,...

Corynebacterium diphtheriae

- bolesti -

pseudomembrane "bull-neck"

inkubacija 2 4 dana poinje kao faringitis/tonzilitis (bolovi u grlu, poviena temperatura)

pseudomembrane opasnost od mehanike opstrukcije disajnih puteva; cervikalni adenitis

Sistemski efekti toksina:

miokarditis - tokom druge i tree nedelje bolesti; najozbiljnija komplikacija

reverzibilne paralize (meko nepce, miii oka)

kutana difterija

humani patogen

kapljina infekcija; direktan kontakt nagli pad morbiditeta posle uvoenja imunizacije

Corynebacterium diphtheriae

- epidemiologija -

2012. podaci SZO

4489 prijavljenih sluajeva 2500 smrtnih ishoda (2011.)

Corynebacterium diphtheriae

- terapija -

difterijski antitoksin antitela za neutralizaciju egzotoksina koji se nije

vezao za receptore na elijama

antibiotik (penicilin ili eritromicin) eliminacija bakterije i prekid sinteze toksina

vakcina:

toksoid (anatoksin) difterijskog toksina

DiTePer; DTP

Corynebacterium diphtheriae

- prevencija -

Relativno odsustvo difterije je posledica

uspenog sprovoenja vakcinacije

Corynebacterium diphtheriae

- dijagnostika - Uzorci

bris tonzilofaringealne regije

bris nazofarinksa

bris pseudomembrane sa periferije (pseudomembrana)

bris lezije na koi

Direktni preparat (Gram, specijalno bojenje za metahromatske granule)

Corynebacterium diphtheriae

- dijagnostika -

bris rane

Kultivisanje

- krvni agar

- Lffler podloga (konjski serum, govei ekstrakt, peptoni, dekstroza, NaCl)

- selektivne podloge sa teluritom

- 37C; 16 24h

Corynebacterium diphtheriae

- dijagnostika -

Identifikacija

ispitivanje mikroskopskih osobina

Corynebacterium diphtheriae

- dijagnostika -

metahromatske

granule

(specijalno bojenje

po Neisser-u)

ispitivanje kulturelnih osobina

C. diphtheriae: kolonije na krvnom

agaru

C. diphtheriae: kolonije na podlozi

sa teluritom

ispitivanje fizioloko biohemijskih osobina

ispitivanje toksigeninosti izolata C. diphtheriae toksigeni C. diphtheriae vs. netoksigeni C. diphtheriae

toksigeni C. diphtheriae vs. netoksigeni difteroidi

Elekov test

PCR

(detekcija tox gena u

uzorcima, kulturi)

Elekov test:

imunoprecipitacija

Difteroidi oportunisti

deo fizioloke mikroflore kliniki znaaj u porastu

Znaajne vrste: C. jeikeium

C. amycolatum

C. urealyticum

C. pseudotuberculosis

C. ulcerans

bolniki oportunistiki patogeni

urinarne infekcije

mogu da

nose tox

gen

sepsa, endokarditis, infekcije

rana, infekcije posredovane

stranim telima

limfadenitis, limfangitis,

difterija (retko)

difterija (retko)

kultivisanje (krvni agar, podloge sa teluritom)

identifikacija: razlikovanje na osnovu

biohemijskih testova

izvetaj iz laboratorije: a) identifikacija na nivou vrste

b) ee Difteroidi

antibiogram (u zavisnosti od situacije) - problem

rezistencije na antibiotike

Difteroidi

bakterioloka dijagnostika

Tumaenje nalaza: procena znaajnosti (deo NBF)!