SKRIPSI

DZATI ILLIYAH ISTIQOMI

OPTIMASI EKSTRAK KENTAL ETANOL

KULIT BUAH DELIMA (Punica granatum L)

PADA BERBAGAI KONSENTRASI UNTUK

MENGHAMBAT ENZIM TIROSINASE DALAM

BASIS COLD CREAM

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2016

ii

iii

iv

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala rahmat dan

hidayah seta karunia-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang

berjudul “Optimasi Ekstrak Kental Etanol Kulit Buah Delima (Punica Granatum

L) Pada Berbagai Konsentrasi Untuk Menghambat Enzim Tirosinase Dalam Basis

Cold Cream “ untuk memenuhi salah satu persyaratan akademik dalam

menyelesaikan program Sarjana Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas

Muhammadiyah Malang.

Dalam penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari berbagai pihak

yang memberikan bimbingan, bantuan serta doa sehingga penulis dapat

menyelesaikan dengan baik. Pada kesempatan ini, penulis mengucapkan terima

kasih sedalam-dalamnya kepada:

1. Kedua orang tua saya Abd.Ghofar dan Ika Faizatin yang dengan penuh

kasih sayang, ketulusan dan kesabaran selalu memberikan sepenuhnya

semangat, nasihat, dukungan moral dan materi, serta yang paling

utama adalah doa yang berlimpah sehingga saya dapat menjalani studi

farmasi dengan baikdan menyelesaikan skripsi ini dengan lancer.

2. Dra. Esti Hendradi M.Si., Apt., Ph.D. selaku dosen pembimbing I yang

penuh semangat dan kesabaran dalam mendukung, mengarahkan dan

membimbing serta selalu memberikan motivasi.

3. Dra. Uswatun Chasanah, M.Kes., Apt. selaku dosen pembimbing II

yang penuh kesabaran dan selalu berkenan membimbing dan

mengarahkan penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

4. Dian Ermawati, M.Farm., Apt. selaku penguji yang senantiasa dengan

sabar memberikan bimbingan, dan nasehat yang diberikan kepada

saya.

5. Enggrid Juni Astuti, M.Farm., Apt. selaku penguji yang memberikan

saran, masukan, dan kritik yang membangun terhadap skripsi yang

telah saya kerjakan.

6. Yoyok Bekti P., M.Kep, Sp.Kom. selaku Dekan Fakultas Ilmu

Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang, yang telah

v

memberikan kesempatan kepada penulis untuk mengikuti program

sarjana.

7. Sovia Aprina Basuki selaku Kepala Laboratorium Sediaan Farmasetika

dan Laboratorium Kimia Terpadu, yang telah memberikan izin dan

kesempatan kepada penulis untuk melakukan penelitian. Serta

memberikan saran dan masukan yang membangun dalam

menyelesaikan skripsi ini

8. Siti Rofida, S.Si., M.Farm., Apt selaku Pembantu Dekan I yang selalu

membantu dan memberikan dorongan, saran, dan kritik yang

membangun guna kelancaran dalam mengerjakan tugas skripsi.

9. Agustin Rafikayanti, S.Farm selaku Dosen Wali yang telah

memberikan asuhan akademik, bimbingan moral dan nasehat selama

menjalankan studi di Universitas Muhammadiyah Malang.

10. Seluruh staf pengajar Program Studi Farmasi Universitas

Muhammadiyah Malang yang telah mendidik dan mengajarkan ilmu

pengetahuan hingga saya dapat menyelesaikan pendidikan sarjana.

11. Para laboran Laboratorium Teknologi Sediaan Farmasi dan

Laboratorium Kimia Terpadu II : Mas Ferdi yang telah banyak

membantu saya.

12. Rochmad Riyadhus Sholichin yang selalu memberikan motivasi,

dorongan, dan menjadi penyemangat dalam menyelesaikan peneltian

dan penulisan skripsi.

13. Navisa dan M. Akbar Wirawan teman seperjuangan dalam

mengerjakan skripsi ini, mereka selalu memberikan motivasi dan

dukungan serta masukan dalam mengerjakan skripsi ini.

14. Rosida Fajrin, Ayu Linda, Ririn Puspita yang selalu memberikan

semangat dalam mengerjakan skripsi.

15. Teman-teman angkatan 2012 yang senantiasa memberikan motivasi

dan semangat serta semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu-

persatu, terima kasih atas bantuan, dukungan, dan semangat serta doa

yang telah diberikan.

vi

vii

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II.1 Konstituen Utama dari Pohon dan Buah Punica granatum .......................7

II.2 Kandungan Kimia dan Bioaktivitas Pada Kulit Delima ............................8

IV.1 Formula Basis Cold Cream .....................................................................32

IV.2 Formula Krim Ekstrak Kental Etanol Kulit Buah Delima ........................33

V.1 Hasil pemeriksaan senyawa polifenol ekstrak kental etanol

kulit buah delima ..................................................................................... 46

V.2 Hasil pemeriksaan tipe emulsi sediaan cold cream ekstrak kental

etanol kulit buah delima (Punica granatum L) .........................................47

V.3 Hasil pengamatan organoleptis sediaan cold cream ekstrak

kental etanol kulit buah delima (Punica granatum L) ..............................48

V.4 Hasil pengukuran ph sediaan cold cream ekstrak kental etanol

kulit buah delima (Punica granatum L) ...................................................49

V.5 Hasil pengukuran daya sebar sediaan cold cream ekstrak kental

etanol kulit buah delima (Punica granatum L) .........................................50

V.6 Hasil pengukuran viskositasi sediaan krim pemutih ekstrak kental

etanol kulit buah delima (Punica granatum L) .........................................52

V.7 Perbandingan parameter aseptabilitas sediaan cold cream ekstrak

kental etanol kulit buah delima (Punica granatum L) ...............................53

V.8 Hasil pengujian nilai efektifitas penghambatan ekstrak kental etanol

kulit buah delima (Punica granatum L) ...................................................55

V.9 Hasil pengujian nilai efektifitas penghambatan sediaan krim ekstrak

kental etanol kulit buah delima (Punica granatum L) ...............................56

V.10 Hasil pengujian nilai efektifitas penghambatan hidroquinon ...................58

viii

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

2.1 Buah delima ............................................................................................. 6

2.2 Struktur Ellagic Acid ................................................................................. 9

2.3 Struktur Kulit ............................................................................................ 12

2.4 Struktur Melanosit..................................................................................... 14

2.5 Sintesis Melanin ....................................................................................... 15

2.6 Skema Ilustrasi Melanogenesis .................................................................. 16

3.1 Skema Kerangka Konseptual ..................................................................... 27

4.1 Bagan Alur Kerja Penelitian ...................................................................... 30

4.2 Skema Pembuat Basis Cold Cream ........................................................... 32

4.3 Cara pembuatan larutan dapar fosfat pH 6,8 .............................................. 36

4.4 Cara Pembuatan Larutan Sampel ............................................................... 37

4.5 Cara Pembuatan Larutan Enzim Tirosinase ............................................... 37

4.6 Cara Pembuatan Larutan L-tyrosinase ....................................................... 38

4.7 Cara Pembuatan Larutan Blanko ............................................................... 38

4.8 Cara Pembuatan Larutan Uji ..................................................................... 39

4.9Cara Pembuatan Larutan Untuk Mengevaluasi Penghambatan Enzim

Tirosinase .................................................................................................... 41

4.10 Cara Pembuatan Larutan Kontrol Positif ................................................. 43

5.1 Ekstrak Kental ETanol Kulit Buah Delima ............................................... 45

5.2 Hasil Pengamatan Pemeriksaan Polifenol .................................................. 46

5.3 Hasil pengamatan mikroskop pewarnaan Sudan III sediaan cold cream

ekstrak kental etanol kulit buah delima (Punica granatum L). Berturut-

turut pada kadar 3% (Formula I), 6 % (Formula II), 9 % (Formula III). ...... 47

5.4 Sediaan Cold Cream Ekstrak Kental Etanol Kulit Buah Delima (Punica

granatum L) .............................................................................................. 48

5.5 Histogram harga pH formula I (1), formula II (2), dan formula III (3)

sediaan cold cream ekstrak kental etanol kulit buah delima (Punica

granatum L). Data merupakan rerata dari 3 kali Replikasi ± SD……….. 49

ix

5.6 Histogram harga daya sebar formula I (1), formula II (2), dan formula III

(3) sediaan cold cream ekstrak kental etanol kulit buah delima (Punica

granatum L). Data merupakan rerata dari 3 kali Replikasi ± SD ................ 51

5.7 Histogram viskositas formula I (1), formula II (2), formula III (3)

sediaan cold cream ekstrak kental etanol kulit buah delima (punica

granatum l). data merupakam rerata dari 3 kali Replikasi ± SD................. 52

5.8 Histogram persentase nilai kelembutan saat dioleskan formula I (1),

formula II (2), formula III (3) sediaan cold cream ekstrak kental etanol

kulit buah delima (Punica granatum L). ................................................... 53

5.9 Histogram persentase nilai kemudahan saat dicuci formula I (1), formula

II (2), formula III (3) sediaan cold cream ekstrak kental etanol kulit

buah delima (Punica granatum L). .......................................................... 54

5.10 Histogram persentase nilai kemudahan diratakan formula I (1), formula

II (2), formula III (3) sediaan cold cream ekstrak kental etanol kulit

buah delima (Punica granatum L). ........................................................ 54

5.11 Histogram IC50 ekstrak kental etanol kulit buah delima (Punica

granatum L) replikasi 1 (1), replikasi 2 (2), replikasi 3 (3), dan rata-

rata (4) .................................................................................................. 56

5.12 Histogram nilai IC50 formula I (1), formula II (2), dan formula III (3)

sediaan cold cream ekstrak kental etanol kulit buah delima (Punica

granatum L). Data merupakan rerata dari tiga kali replikasi. .................. 57

5.13 Histogram Nilai IC50 hidroquinon replikasi 1 (1), replikasi 2 (2),

replikasi 3 (3), dan rata-rata (4) .............................................................. 58

x

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1.Daftar Riwayat Hidup ....................................................................................71

2.Surat Penyataan ............................................................................................. 72

3.Form Informed Conseni untuk Uji Aseptabilitas Surat

Pernyataan Persetujuan ..................................................................................... 73

4. Prosedur Uji Aseptabilitas ............................................................................. 74

5.Hasil Pengamatan Aseptabilitas Sediaan Krim Ekstrak

Kental Etanol Kulit Buah Delima (Punica granatum L) ................................... 75

6.Rincian Anggaran .......................................................................................... 77

7.Jadwal Pelaksanaan Penelitian ....................................................................... 78

8.Perhitungan Ekstrak yang Ditambahkan dalam Krim...................................... 79

9.Rincian Kebutuhan Bahan .............................................................................. 80

10.Data Uji Statistika Pengukuran Ph Sediaan Cold Cream Ekstrak

Kental Etanol Kulit Buah Delima (Punica granatum L)................................ 81

11.Data Uji Statistika Pengukuran Daya Sebar Sediaan Cold Cream

Ekstrak Kental Etanol Kulit Buah Delima (Punica granatum L) .................. 83

12.Data Uji Statistika Pengukuran Viskositas Sediaan Cold Cream

Ekstrak Kental Etanol Kulit Buah Delima (Punica granatum L) ................... 84

13.Data Uji Statistika Pengukuran Efektivitas Sediaan Cold Cream Ekstrak

Kental Etanol Kulit Buah Delima (Punica granatum L)................................ 85

14.Data Pengukuran Penyebaran Sediaan Cold Cream Ekstrak Kental

Etanol Kulit Buah Delima (Punica granatum L) ........................................... 86

15.Hasil Evaluasi Penghambatan Enzim Tirosinase........................................... 93

16.Tabel F....................................................................................................... 100

17.Sertifikat Bahan-Bahan Habis Pakai ........................................................... 101

18.Sertifikat Bua Delima ................................................................................. 104

xi

DAFTAR SINGKATAN

BM = Berat Molekul

DHI = 5,6-dihydroxyindole

DHICA = dihydroxyindole-2-carboxylic acid

DOPA = Dihidroxy-PhenilAlanin

EA = Ellagic Acid

HQ = Hidroquinone

M = Molaritas

PE = Pomegranate Ekstrak

UV = Ultraviolet

xii

DAFTAR PUSTAKA

Abdullah, Benny. 2009. Dermatologi. Surabaya. Airlangga Unversity Press.

Halaman : 5-9.

Ansel, H. C., 2008. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi. Jakarta : UI-Press.

Arung, E. T., K. Shimizu., and R. Kondo. (2006). “Inhibitory Effect of

Artocarpanone from Artocarpus heterophyllus on Melanin Biosynthesis”. J.

Biol. Pharm. Bull. 29 (9), 1966-1969.

Ascacio-Valdes, J. A., Buenrostro-Figueroa, J. J., Aguilera-Carbo, A.,

PradoBarragan, A., Rodriguez-Herrera, R., & Aguilar, C. N. 2011.

Ellagitannins: Biosynthesis, Biodegradation and Biological Properties.

Journal of Medicinal Plants Research. Vol. 5 (19), pp 4696-4703.

Astawan, M. 2008. Sehat Dengan Buah. Cetakan pertama. Jakarta. Penerbit Dian

Rakyat. Halaman: 40-45.

Aulia. 2012. Formulasi Krim Ekstrak Etanolik Buah Mahkota Dewa (Phaleria

macrocarpa (Scheff) Boerl.) Dengan Basis A/M Dan M/A. Skripsi

Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta Surakarta.

Aulton, M. E., 2003, Pharmaceutics The Science of Dosage Form Design,

Second Edition, 408, ELBS Fonded by British Goverment.

Avanti, Christina and Windono, Tri .2002. Uji Daya Hambat Aktivitas Tirosinase

Ekstrak Metanol Rimpang Temu Mangga ( Curcurna manggaval. et Zyp.

). Surabaya: Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XXI, 27-28

Maret 2002, Fakultas Farmasi Universitas Surabaya.

Barel, André o., Paye, Marc., Maibach, Howard i. 2009. Handbook of Cosmetic

Science And Technology. New York. Vol. 2, pp. 151-155.

Briganti, Stefania., Camera, Emanuela., Picardo, Mauro. 2003. Chemical and

Instrumental Approaches to Treat Hyperpigmentation. Roma, Italia.

Vol. 16 No. 2, pp 101-110.

Budiman, Muhammad Haqqi. 2008. Uji Stabilitas dan Aktivitas Antioksidan

Sediaan Krim yang Mengandung Ekstrak Kering Tomat. Skripsi.

Universitas Indonesia

Budka, F. 2008. Active Ingredients, Their Bioavaibility and The Health

Benefit of Punica Granatum Linn (Pomegranate). Accessed : 10-12-

2009.

xiii

Chandra, Surya. 2015. Pengertian, Fungsi, dan Struktur Kulit. 11 November 2015.

http://softilmu.blogspot.com/2015/02/Pengertian-Fungsi-Lapisan-Struktur-

Kulit-Adalah.html. Diakses tanggal 22 Januari 2016.

Desmond, T. 2007. Tropical Fruit of Indonesia. Archipelago Press. p 84-85.

Dwi Wahyuni, Febriana dkk. 2013. Pengaruh Ekstrak N-Heksana Daging

Buah Delima Putih (Punica Granatum) Terhadap Penurunan Kadar

Kolesterol Darah Pada Tikus Putih (Rattus Norvegicus L.) Dan

Pemanfaatannya Sebagai Buku Suplemen. Pancaran, Vol. 2, No. 4, hal

89-99.

Jurenka, Julie. 2008. Therapeutic Applications of Pomegranate (Punica

granatum L.). A Review. Vol. 13 No. 2, pp. 128-144.

Kamakshi, R. 2011. Fairness Via Formulations: A Review Of Cosmetic Skin-

Lightening Ingredients. India. Vol 63, pp. 43–54

Kim J, Lee KT . 1998. Inhibitory Effects of Ramulus mori extracts on

melanogenesis. Cosmetics Toiletries. Vol. 113 No 10, pp 65–70.

KumarM, Sushil., Usha, Talambedu., Pande, Veena. 2013. Edwin L. Cooper. A

Review On Antihyperglycemic And Antihepatoprotective Activity Of

Eco-Friendly Punica Granatum Peel Waste. India. pp. 1-3

Lin, Jen-Wen., Chiang, Hsiu-Mei., Lin, Yi-Chun And Wen, Kuo-CHING . 2007.

Natural Product with Skin – Whitening Effects. Department of

Cosmeceutics, China Medical University, Taichung 404, Taiwan (R.O.C.)

Vol. 16 No. 2, pp 1-10.

Lovrić, Šebojka Komorsky and Novak, Ivana. 2011. Determination of Ellagic

Acid in Strawberries, Raspberries and Blackberries by Square-Wave

Voltammetry. Croatia. Vol 6. pp 4638-4647

Martini, FH. 2001. Fundamental of Anatomy and Physiologi. Published by

Prentic-Hall Inc. Upper Saddle River: New Jerseyy, pp. 1-11

Mora PC., Baraldi PG. 2000. Dermocosmetic Applications of Polymeric

Biomaterials. In: Dumitru S, ed., Polymeric Biomaterials, 2nd ed. New

York and Basel, Marcel Dekker, pp. 459–490.

Nakayama H., Ebihara T., Satoh N., Jinnai T. 2000. Depigmenting Agents. In:

Elsner P, Maibach HI, eds., Cosmeceuticals Drugs vs. Cosmetics. New

York and Basel, Marcel Dekker, pp. 123–144.

Ozer, O dkk. 2007. Antityrosinase Activity of Some Plant Extracts and

Formulations Containing Ellagic Acid. Pharmaceutical Biology 2007,

Vol. 45, No. 6, pp. 519–524.

Parrott, Eugene L, Pharmaceutical Technology Fundamental Pharmaceutic,

Collage of pharmacy University of lowa.

xiv

Petit L., Pie´rard E. 2003. Skin-lightening Products Revisited. Int J Cosmet Sci

2: 169–181.

Prota, G. 1996. Melanins and melanogenesis. Cosmetics Toiletries. Vol 111

No.(55), pp 43–51.

Rahma, Chemist. 2012. Pentingnya Perawatan Kulit Tubuh pada Malam Hari. 25

Oktober 2012. http://chemistrahmah.com/pentingnya-perawatan-kulit-

tubuh-pada-malam-hari.html. Diakses tanggal 22 Januari 2016.

Ramsden, Christopher A and Riley, Patrick A. 2010. Studies of the competing

rates of catechol oxidation and suicide inactivation of tyrosinase. United

Kingdom. pp 248-254.

Ratnaningtyas, Novarina. 2010. Pengaruh Pemberian Ekstrak Kulit Delima Merah

(Punica granatum) Terhadap Jumlah Eritosit Dan Kadar Hemoglobin Pada

Tikus Putih (Ratus novergicus) Yang Dipapar Gelombang Elektromagnetik

Ponsel. Surakarta: Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas

Maret.

Rowe, R. C., Sheskey, P.J., Weller., 2009, Handbook of Pharmaceutical

Excipient, 4th

Edition, London : The Pharmaceutical Press and The

American Pharmaceutical Association.

Saba dan Yosipovitch, Gil. 2013. Skin pH: From Basic Science to Basic Skin

Care. Department of Dermatology, Wake Forest University Baptist

Medical Center, Winston-Salem, USA. Vol 93: 261–267.

Shimogaki, H., Tanaka, Y., Tamai, H., and Masuda, M., 2000. In Vitro and In

Vivo Evaluation of Ellagic Acid on Melanogenesis Inhibition. Int. J.

Cosmet. Vol 22, pp 291-303.

Shovyana , Hidayatu Hana dan Zulkarnain, A. Karim. 2013. Stabilitas Fisik

Dan Aktivitas Krim W/O Ekstrak Etanolik Buah Mahkota Dewa

(Phaleria Macrocarpha (Scheff.) Boerl,) Sebagai Tabir Surya. Fakultas

Farmsi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, Indonesia. Vol. 18 No. 2,

pp 109-117.

Sri Kuncari, Emma dkk. 2014. Evaluasi, Uji Stabilitas Fisik Dan Sineresis

Sediaan Gel Yang Mengandung Minoksidil, Apigenin Dan Perasan Herba

Seledri (Apium Graveolens L.). Jakarta. Pusat peneliti fakultas farmasi

UI.

Veni N, Krishna., S N, Meyyanathan., B, Suresh. 2012. Analysis of Ellagic Acid

In Fresh and Processed Fruit Products By High Performance Thin

Layer Chromatography. Tamilnadu, India. Vol. 3 No. 7, pp 201-204.

Wasitaatmadja, Sjarif M. 2010. Ilmu Penyakit Kulit Dan Kelamin. Fakultas

kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta. Edisi 6, hal 3-8.

xv

Wathoni, Nasrul., Septiani, Santi., Mita, Soraya. 2009. Formulasi Sediaan Masker

Gel Antioksidan Dari Ekstrak Etanol Biji Melinjo (Gnetun gnemon Linn.).

Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Padjadjaran.

Wulandari, Novia. 2008. Penggunaan Kompleks Polielektrolit Gelatin-Karagenin

Sebagai Basis Gel Topikal. Skripsi Universitas Indonesia

Yoshimura, Mineka., Watanabe, Yuko., Kasai, Kouichi., Yamakoshi, Jun., Koga,

Takuro. 2005. Inhibitory Effect of an Ellagic Acid-Rich Pomegranate

Extract on Tyrosinase Activity and Ultraviolet-Induced Pigmentation.

Japan. Vol. 1 No. 12, pp 2368-2373.

Zein,Umar. 2005. Pemanfaatan Tumbuhan Obat Dalam Upaya Pemeliharan

Kesehatan. Sumatera utara: Fakultas Kedokteran Universitas Sumatra

Utara.

Zhu, W., Gao, J. 2008. The use of botanical extracts as topical skin-lightening

agents for the improvement of skin pigmentation disorders. J. Investig.

Dermatol. Symp. Vol. 13, pp 20-24