slobodni radikali i asntioksidansi laboratorijska dijagnostika

8/4/2019 Slobodni Radikali i Asntioksidansi Laboratorijska Dijagnostika

http://slidepdf.com/reader/full/slobodni-radikali-i-asntioksidansi-laboratorijska-dijagnostika 1/12

SLOBODNI RADIKALI I ANTIOKSIDANSI – LABORATORIJSKA DIJAGNOSTIKA

Dr.sc Mirjana Đukić, vanredni profesor

Institut za toksikologiju akademik Danilo Soldatović Farmaceutski fakultet Univerziteta u Beogradu

Broj časova

Teorijska nastava: 30

Praktična nastava: 30

Broj ESPB: 6

VI MF-MB



Razlozi da se studenti opredele ZA:

1. Prisustvo slobodnih radikala (SR) ubiološkom materijalu otkriveno jekasnih 1950-ih*.

2. Kod nas nije zaživela rutinskakliničko-laboratorijska (KL) praksaodređivanja parametara oksidativnogstresa

3. Edukacija na ovu temu je nova i odfakulteta zdravstvene struke u RSrbiji obavlja se samo naFarmaceutskom fakultetu u okvirustudijskog programa

4. Radnici zdravstvene struke kod nasgotovo da ne poznaju ovu materiju

5. U razvijenim zemljama ove analizerade se u rutinskoj svakodnevnoj KLpraksi

6. Savremen oblik nastave (e-learning)

teorijska nastava

uvodna predavanja (nastavnik)

priprema i odbrana seminarskog rada - timski rad i javna prezentacija (studenti)

priprema ispitnih test pitanja - za svaku nastavnu jedinicu (studenti)

praktična nastava

– poseta laboratorijama u kojima se rade ove analize(samo u okviru naučno istraživačkog rada)

– učenje i vežbanje korišćenja e-learning programaza spremanje prezentacija i pitanja

7. Aktivnost

javna diskusija po svakoj nastavnoj jedinici

nedeljni domaći zadaci: odgovaranje na pitanja e-putem

8. Ishod ovog predmta:

Kvalifikovanost farmaceuta-medicinskog biohemičara da

ovlada tehnikama za određivanje bioloških parametaraoksidativnog/nitrozativnoh stresa

da doprinesu uvođenju ovih analiza u rutinsku KL praksu

* Nešto kasnije hipoteza Denhama Harmana bila je da kiseonični radikali verovatno nastaju kaosporedni produkti u enzimski kontrolisanim reakcijama i opisao ih je kao Pandorinu kutiju zla,odgovorne za velika ćelijska oštećenja, mutagenezu, kancer, degenerativne procese, itd.



Slobodni radikali Reaktivne vrste

SR su atomi, molekuli ili joni kojisadrže jedan ili više nesparenihelektrona u zadnjojmolekulskoj/atomskoj orbitali.

Prisustvo nesparenog elektrona činiih vrlo reaktivnim, što omogućava

da oštete sve klase biomolekula ućeliji.

Obeležavanje: tačka ispredvalentnog statusa jona (O2

).

Reaktivne vrste podrazumevaju svaona jedinjenja koja imaju karakterslobodnih radikala (SR), mada posvojoj hemijskoj strukturi to nemoraju biti.

Stoga se pored SR i nestabilna jedinjenja, lako podložna redukcijiili autooksidaciji (H2O2, dopamin),

takođe smatraju reaktivnimvrstama (RS).

Aktivni centri u RS mogu biti: O, N,S i C.



Medijatori brojnih patologija(diabetes mellitus, HIV infekcija, autoimunih, neurodegenerativnih,koronarnih, malignih, plućnih, inflamatornih i mnogih drugih bolesti)

Jedan od uzročnika starenja

Pokrenut lanac reakcija SR ima osobinu prostornog i vremenskog širenja uzpojačavanje efekta. Ova propagacija se ogleda u nastanku sekundarnih SRkoji nastavljaju da šire kaskadu lančanih rekcija.

U reakciji sa biomolekulama SR remete ćelijsku morfologiju, funkciju, jonsku homeostazu i enzimsku aktivnost

U organizmu se stalno stvaraju i pri niskim koncentracijama imaju fiziološkufunkciju



Antioksidativna zaštita Aerobne ćelije se štite od toksičnog efekta SR

kompleksnim sistemom antioksidativne zaštite (AOZ)

Sačinjavaju ga dva segmenta: enzimski (superoksidna dizmutaza, katalaza, glutation

peroksidaza itd) i neenzimski (peptidi sa SH grupama kao što je glutation imetalotioneini, vitamin E i C, koenzim Q, urea, proteini kojiheliraju metale sa promenljivom valencom i brojna druga

jedinjenja).

AOS deluje protektivno, zaštitno ili reparativno.



Oksidativno oštećenje biomolekula

Oksidativni stres

Stepen odnosno fazaćeliskog oštećenja (ranaili poodmakla) zavisi od:

tipa i koncentracijereaktivnih vrsta (RV)

mesta i dužine delovanja

od energetskog iredoks statusa samećelije

kapaciteta AOS.

lipida (lipidna peroksidacija)

proteina (modifikovaniproteini)

DNK (oksidativno

modifikovana DNK)



pre-preklinika preklinika klinika

oksidativni stres

opšti laboratorijski parametri

simptomi

Stanje bolesti



nepoznavanje ove materije u kruguzdravstvenih radnika

nedovoljno se prate istraživanja naovu temu od strane kolega iz prakse(stoga se i ne shvata značaj)

nisu postavljene standardne metode urutinskoj analizi

ne postoji sistem referentnih vrednosti

ove analize se uglavnom kod nasobavljaju u okviru naučno-istraživačkog rada, primenom različitih metoda

na tržištu postoje komercijalni kitovi(veoma skupi) za merenje:

ukupnog oksidativnog stresa ili za pojedine parametre (aktivnost

enzima, modifikovane biomolekule iliSR)

generalno, osporava se specifičnostovakvih merenja u relaciji saodgovarajućim bolestima, i u KL praksise vrše merenja već usvojenihindikatora bolesti/trovanja,

međutim u razvijenom svetu rade seove analize

izmena red-oks stanja organizma sedetektuje u predkliničkoj fazi bolesti, apotvrđeno je da u trovanjima ovakveanalize imaju svoje utemeljeno mesto

Problemi u sprovođenju ovih analiza kod nas Izazov....

Izazov je da se stečenom

edukacijom prevaziđu ovi problemi i shvatiti značaj

ovakvih merenja, kako bi seuvela u rutinsku KL praksu.



Prednosti ovakvog izvođenja teorijske ipraktične nastave

Upoznavanje sa značajem kliničko-laboratorijskog merenja oksidativnog/nitorzativnog stresa

Upoznavanje sa dobrom laboratorijskom praksom u ovoj oblasti

Sticanje veštine prezentovanja materije

Sticanje samopuzdanja kroz vid držanja predavanja Timski rad (studenti se sami dogovaraju oko podele tematske jedinice i prezentovanja iste)

Studenti sami pripremaju ispitna pitanja za predavanu nastavnu jedinicu

sastavljaju pitanja sa tačnim odgovorima (različitih formi, sa više mogućih odgovora, esej pitanja,popunjavanje praznih prostora u test rečenicama)

Razmena iskustava, ideja, izvora informacija (web stranice, knjige), među studentima, prekoe-foruma

Konsultacije sa nastavnikom oko pripreme prezentacije

Najbolji vid učenja je kroz samoangažovanje i otvorenu diskusiju



Termini nastave

Predavanja:

3 časa/nedeljno sa pauzama od po 15 min (10termina), počinju oko 15 marta

Praktična nastava: 30h grupe od po 20 studenata

posete

laboratorijske vežbe

E-learning



Literatura

1. Oksidativni stres – kliničko-dijagnostički-značaj. Urednik: MirjanaĐukić . Izdavač: Mono i Manjana. Beograd. 2008.

2. Oksidativni stres – slobodni radikali, prooksidansi i antioksidansi.Urednik: Mirjana Đukić. Izdavač: Mono i Manjana. Beograd. 2008.

3. Đorđević V.: Biohemija slobodnih radikala. Medicinski fakultet, Niš,2000.

4. Wallace K. B.: Free Radical Toxicology. Ed.: Taylor & Francis Ltd.,London, 1997.

5. Halliwell B, Gutteridge J: Free radicals in biology and medicine.

Oxford University

6. Press, New York, 1985.



Bodovanje

Predispitne obaveze Poeni Završni

ispit

Poeni

Laboratorijski rad 20 Ispit test 55

Seminarski rad 20

Domaci zadaci 3

Aktivnost na predavanjima i

vežbama e-learninga

2

Ukupno: 45

slobodni radikali i asntioksidansi laboratorijska dijagnostika

Documents