日本のサツマイモから検出されたSweet potato feathery

mottle virus common系統に属する分離株の諸特性

誌名 日本植物病理學會報 = Annals of the Phytopathological Society of JapanISSN 00319473著者名 山崎,修一

酒井,淳一上曽山,茂花田,薫

発行元 日本植物病理學會巻/号 75巻3号掲載ページ p. 156-163発行年月 2009年8月

農林水産省 農林水産技術会議事務局筑波産学連携支援センターTsukuba Business-Academia Cooperation Support Center, Agriculture, Forestry and Fisheries Research CouncilSecretariat

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日横病報 75: 156-163 (2009) Jpn. J. Phytopathol. 75: 156-163 (2009)

日本のサツマイモから検出された Sweetpotato featheηmottle virus common系統に

属する分離株の諸特性

山崎修一 1，ヨ・酒井淳一2・上曽山茂 1・花田 薫3

ABSTRACT

Y品!lASAKI，S.1ぺSAKAI，]人 KAMISOYAMA，S.1 and HANADA， K.3 (2009). Characterization of an isolate of the common strain

group of Sweet pot，αto feathery mottle virus from sweet potato in ]apan. ]pn.]. Phytopathol. 75: 156-163.

A new isolate of Sweet potato feathery mottleむirus(SPFMV) was obtained from IPo明 oeαbatatasin Oita Prefecture in ]apan. The symp-

toms of 1. nil infected with this new isolate differed from those of plants infected with the severe (S)， ordinary (0)， or Tokushima (T)

strains of SPFMV. In addition， reverse transcripta田町polymerasechain reaction-r巴strictionfragment length polymorphism (RヱPCR-

RFLP) analysis revealed that this isolate was distinct from these other three strains of SPFMV. The coat protein (CP) of this isolate is

composed of 313 amino acids， which have over 90% homology with those in the CPs of SPFMV common strain (C)， SPFMV-CH2，

SPFMV6 and SPFMV-SOR. On the basis of a phylogenetic analysis of the amino acid sequences of the Cp， the isolate was c1assified as

a group C strain， among other strains of SPFMV isolated from sweet potato in other parts of the world. This is the first report on the

detection of the SPFMV田 Cstrain in]apan， and we have named this isolate SPFMV-Bungo.

(Received]une 20， 2008; Accepted November 26， 2008)

Key words: IPomoea batatas， RT-PCR-RFLp， virus identification， Sweet potato feathery mottle virus

市者 首

サツマイモ (Ipomoeabatatas (L.) Lam)は，世界中では年

間1.2億トンが生産されている重要作物の一つである その

中で日本では 2007年には約 100万トンが栽培されており，

世界第 6位の生産高となっている (FAO，2008) .

サツマイモ斑紋モザイクウイルス (Sωeetpotato featheηy

mottle virus， SPFMV) は，帯状粗皮病の発生を機に注目され

てきたウイルスである.本病は 1980年に初めて九州、|で発生

が報告された(新海ら， 1980). その後各地で発生が認めら

れるようになり，青果用サツマイモにおいて問題となった.

本病は，サツマイモ斑紋モザ、イクウイルス強毒系統 (SPFMV-

S)によって引き起こされるウイルス病であり，モモアカア

ブラムシ (j¥⑪'zusμrsicae(Sulzer))をはじめとしたアブラム

シ類によって非永続伝搬する (Usugiet al.， 1994). SPFMV-S

は，ポティウイルス科に属する 850~ 880 x 13 nmのひも状

粒子であり，その RNAは約 10.8kbからなる (Moriet al.， 1995;

Sakai et al.， 1997) .病徴は，塊根表面に帯状に生じる細かい

ひび割れ，退色ゃくびれ症状である.また，激しい時は，症

状が塊根全面に及び，肥大が悪くなり，外観が著しく劣って

商品価値が低下する.一方，葉には，ほとんど病徴を示さな

いが，まれにモザイク症状を呈する.

SPFMVに関しては，世界では， SPFMV-russet crack strain

(SPFMV-RC; Cali and Moyer; 1981)や SPFMV-commonstrain

(SPFMV-C; Abad et al.， 1992) を皮切りに， 111の分離株が

DDB]!EMBL/GenBankヌクレオチドデータベースに登録さ

れている.日本では， SPFMV-Sの他に普通系統 (SPFMV-O;

Usugietal.， 1991)と徳島系統 (SPFMV-T;字杉・真向， 1993)

1大分県農林水産研究センター(〒 872-0103大分県宇佐市大字北宇佐 65) Oita Prefectural Agriculture， Forestry and Fisheries Research

Center， 65， Kitausa， Usa， Oita 872-0103 Japan

2東北農業研究センター(千 020司0198岩手県盛岡市下厨)11字赤平 4) National Agricultural Research Center for Tohoku Region， 4，

Akahira， Shimo-kur・iyagawa，Morioka， lwate 020-0198， Japan

3中央農業総合研究センター(干 305-8666茨城県つくば市観音台 2-1-2) National Agricultura1 Research Cent問 2-1-2Kannondai， Tsukuba，

lbaraki 305-8666， Japan * Corれr噂巴s叩po∞n吋dinga剖ut白ho釘r(但E目m呂ail江1:y戸amaおsakiト司屯寸s討ぬh湖1U1凶lC出hi@p戸rモ巴ef.o尚i江ta.叫.1ほg.必)DDB町J厄MBL/G 巴釘凹nBar此1註北kaccession numb 巴叫r，AB435071

]pn.]. Phytopatho1. 75 (3). August， 2009 157

の発生が知られている. このうち， SPFMV骨 Oはサツマイモ

塊根に軽微な退色を示すものの，これまでに， SPFMV-S以

外でサツマイモに顕著な病徴を示す SPFMVは発見されてい

ない.

SPFMVに対する遺伝学的類縁関係が検討されてきた結

果，現在世界の SPFMVはRC，0， Cおよび eastAfrican (EA)

の4つの系統グループに分類されている (Untiveroset al.，

2008). これによると，日本の SPFMVは， SPFMV-SがRC系

統グループに， SPFMV心が O系統グループに属する.また，

SPFMV-Tはゲノム情報が公開されておらず不明である.一方，

C系統グループおよび EA系統グループに属する SPFMVは

わが国では発見されていない

今回，大分県のサツマイモに発生している SPFMVの特性

を解析したところ，わが国では未報告の系統に属する分離株

が発見されたため，その特性について報告する

材料及び方法

SPFMVの分離大分県で採取したサツマイモ塊根の症状

の激しい激症株 7株(平成 11年度採取)と症状の軽い軽症

株 6株(平成 7年度採取)に感染している SPFMVの系統を

調査するために，花田ら (1997)による RT-PCR-RFLPに供

試した.

また，軽症株からは以下の手順でウイルスの分離を行っ

た.すなわち，アサガオ (Jtomoeanil (1.) Roth)健全苗をサ

ツマイモの茎に接木し，症状の現れたアサガオ上位葉を

O.lMリン酸緩衝液 (pH7.0) 中で磨砕し，同緩衝液を用い

て 1，000倍希釈汁液を作製し，アサガオ健全株に汁液接種し

た. 250C， 16時間日長下で 14臼間栽培後，症状の現れた上

位葉の 1，000倍希釈汁液をアサガオ健全株に汁液接種しこ

れをさらに 6回反復した.最後に，症状が既知ウイルスと異

なる上位葉のみを花田ら (1997)の報告に基づく既報のプラ

イマー (Tab!e1) と，制限酵素BamHI及び、EcoRIを用いた

RT-PCR-RFLP vこ供試し，元のサツマイモや既知ウイルスと

バンドパターンを比較して単一のウイルス株が分離されて

いることを確認した.

宿主範囲 SPFMVの分離株をアサガオに接種し，病徴観

察した.また，特徴的な分離株は，アサガオ感染株による接

木接種によりサツマイモ塊根への病徴を観察するとともに，

10科 16種の植物に汁液接種し宿主範囲を検討した (Tab!e

2) なお，無病徴感染は，大貫・花田 (1996)の設計したプ

ライマー (Tab!e1)による RT-PCRによりウイルスの存否を

確認した.

粒子形態と虫媒接種分離株が感染したアサガオ葉をす

ンタングステン酸 (2%水溶液)で磨砕し， DN法により電子

顕微鏡]EM-1200EX(日本電子)で粒子形態を観察した.

また，モモアカアブラムシによる虫媒接種は， Yamasaki et al.

(2009) の方法に準じた.

RT-PCRおよびRT・PCR・RFLPによる検出 RNA抽出は，

ISOGEN (ニッポンジーン)を用い， RT-PCRは GeneAmp

RNA kit (Applied Biosystems) を使用して行った.大貫・花

田 (1996，以下プライマー 1と呼ぶ)および花田ら (1997，

以下プライマー 2と呼ぶ)の設計したプライマーおよび

SPFMV-S， -0の外被タンパク質および3'末端非翻訳領域の塩

基配列を基に新たに設計し，約 490bpのcDNAの増幅が想

Tab!e l. List of primers used in this study

Primer Strand Sequencef)

1") Homo!ogous CACTTCAGTGACGTTGCTGA

Complementary GGCTCGATCACGAACCAAAA

2b) Homologous GACAACACACTTATGGTTGT

Complementary CGCGCAAGACTCATATCAGT

Complementarl) GATTTAGGTGACACTATAGTTTTTTTTTTTTTTTTTG

3 Homologouse) ATGAGTCTTGCGCGATATGC

Complementarye) GATTTAGGTGACACTATAG

Complementaryめ GATTTAGGTGACACTATAG(T)17V

4C) Homologouse) GGIAAYAAYAGTGGICARCC

Complementarye) GATTTAGGTGACACTATAG

a) Reported by Onuki and Hanad凶(1996)

b) Reported by Hanada et al. (1997)

。Modifiedthe‘potyvirid primer 1 and 2' (Gibbs and Mackenzie， 1997). d) Primer for RT.

e) Primers for PCR

。Symbolsrepresent as follows: I， inosine; R， A or G; Y， C or T; V， A or C or G.

平成 21年 8月第 3号第 75巻白木植物病理学会報158

Comparison of host range and symptoms on indicator plants caused by Sweet poωto j切therymottle virus Bungo (5-T) and the

published isolates S and 0

Table 2.

SPFMV-Od) SPFMVS) SPFMV-Bungo (5-T)

IPomoea nil

I. setosa

よbatatas

Chenopodium amaranticolor C. quinoa

Nicotiana benthamiana

N. glutinosa

N. tabacum

Vigna sesqu俳dalis

Solanum lyco.戸erszcumS. melongeηα

Capsicum annuum

Petunia hybrida

Cucumis sativus

C. melo Raphanus sativus

Brassica oleracea var. cajり1ωta

Mo，CS VC

SD

CS/

CS/

ー/一

一/ー

/

VC， VCh， Mo， CS

VC， VCh， Mo， CS

RC，SD

CS/-

CS/一

一/ー

イー

/

ー/一

一/一

一/ー

RT-PCRb)

+

+ + ー/一

一/一

一/一

一/一

一/ー

/

VC， BLE，LR

VC

Symptoma)

一一一一一一一一一一一一一一

/

/

/

/

/

/

/

/

/

/

f

/

/

/

一一一一一一一一一一一一一一

Scar1et O'Hara

Tosabeni

Xanthi-nc

Kurodane Sanjaku

Momotar08

Chikuyo

Sarara

Baccarat B1ue

Excellent II

Earls Seinu Shutou II

Taibyo Soubutori

Shutoku

Cultivar Plant

a) Symbols before and after a slash represent symptoms of the inoculated leaves and upper leaf， respectively: VC， vein c1earing; CS，

chlorotic spot; Mo， mott1ing; VCh， veinal chlorosis; LR， leaf ro11; RC， russet crack; SD， skin discoloration; BLE， blistered leaf

epidermis;一， no symptoms.

b) +， positive;一， negative

c) Isolate reported by Usugi et al. (1994).

d)Isolate r巴portedby Usugi et al. (1991).

してクローニングし， DNAシークエンサー (ABI373A，Applied

Biosystem) により塩基配列を決定した.得られた塩基配列

に基づいて決定した外被タンパク質領域のアミノ酸配列は，

FASTA 0こより既知の SPFMVとの相向性を比較するととも

に，近隣結合法 (Saitouand Nei， 1987) により， ClustalWを

用いて分子系統樹の作成を行った (Pearsonand Lipman， 1988;

Thompson et al.， 1994).

果

SPFMVの分離

大分県で採取したサツマイモ 13株をプライマー 2と制限

酵素BamHIおよびEcoRIを用いた RT悶 PCR長 FLPに供試し

たところ，激症株，軽症株に関わらず，検定したすべての株

から，BamHIおよびEcoRIのいずれの処理でも約1.3kbpの

位置に1本および約700bpの位置に2本の合計3本のバンド

が検出された.これらのバンドパターンは， SPFMV-S，心， -T

のパターンに類似しており，複数の SPFMVが重複感染して

いる可能性が示唆された

そこで，希釈分離を繰り返したアサガオを上述の RT-PCR-

RFLP 0こ供試したところ， 3種類のバンドパターンを示す

SPFMVが分離された.そのうち 2種類のバンドパターンは

定されるプライマー(以下プライマー 3と呼ぶ)を用いた

(Table 1).逆転写反応は 420C20分で行い，次いで 990C6分

処理で逆転写酵素を失話した.さらに，プライマー 1および

2による cDNAの増幅は， 950C 40秒， 530C 1.5分， 720C 2分

を 1サイクルとする反応を前者は 40サイクル，後者は 30サ

イクル行い，さらに 720C10分最終伸長反応を行った一方，

プライマー 3による増幅は， 950C 1分間のプレヒートの後，

940C 15秒， 450C 30秒， 720C 1分を 1サイクルとする反応を

35サイクル行い，さらに 720C7分最終伸長反応を行った.

なお，プライマー 2および3で増幅した cDNAは SPFMV-S，

-0，立の識別を可能とする制限酵素を含む各種制限酵素によ

るRFLP解析に用いた(花田ら， 1997; Fig. 2)

塩基配列の解析と分子系統樹の作成外被タンパク質領

域を含む 3'末端側領域の cDNAの増幅は，分離株の感染する

アサガオ葉より Moriet al. (1994) の方法に準じて抽出した

RNAを鋳型として， Gibbs and Mackenzie (1997)の方法に準

じて行った.なお，プライマーは， Gibbs and Mackenzie (1997)

による potyviridprimer 1および2を改変したものを用いた

(Table 1，プライマ-4). 増幅した断片はアガロースゲル電

気泳動を行い，自的とする断片は，ゲルから切り出して精製

後， pBluescript SKII( +) (Stratagene)のEcoRV部位に導入

]pn.]. Phytopatho1. 75 (3). August， 2009 159

SPFMV-S， -0と一致し，残る 1種類は PCR産物の大きさは

SPFMV-S， -0と同様に 1.3kbpであったが，BamHIおよび

EcoRIでの処理では SPFMV-Tに類似したパターンを示したー

また，これらに相当しないパターンのものは分離されなかっ

た.特に，軽症株 1株からは3種類のバンドパターンを示す

SPFMVがすべて分離された(以下，5-S， 5-0および 5-T分

離株とする) さらに，これら 3種類の分離株を一緒にサツ

マイモウイルスフリー株に戻し接種したところ，上記の 3種

類のバンドパターンがすべて再現され，これらの SPFMVが

1株のサツマイモに重複感染できることが確認された.

宿主範囲

5-S， 5-0および 5-T分離株を含む SPFMVの分離株をアサ

ガオに接種し病徴を観察したところ， 5-T分離株は SPFMV-

A

C D

S， -O，-Tのいずれとも異なる病徴を示した CFig.1).一方， 5-

S分離株の病徴は SPFMV-Sと， 5-0分離株の病徴は SPFMV-

Oとそれぞれ同様であった(データ未記載).5-T分離株の病

徴の特徴として，葉巻及び、葉脈問の隆起を伴う葉脈透過及び

モザイクが見られた. また， 5-T分離株の宿主範囲を検討し

たところ，上述のアサガオに加えて よse伽 αKer-Gawlに葉脈

透過を示し，サツマイモ(よbatatas)には無病徴感染したが，

他の植物に対する感染は見られなかった CTabl巴2) このよ

うに5-T分離株のみ既報の系統とは異なる特性を示したこと

から，以下の解析は 5-T分離株を中心に行った

粒子形態とアブラムシ伝搬

5-T分離株の粒子形態は SPFMV-S，-0， -Tと同様にひも状

であり，長さは約 850nmであった.

B

E

Fig. 1. Comparison of symptoms on 争omoeanil caused by Sweet potato j切therymottle virus-Bungo (5-T) and published isolates.

A， healthy; B， SPFMV-Bungo (5-T); C， SPFMV-S; D， SPFMV-O; E， SPFMV-T.

160 日本植物病理学会報第 75巻第3号平成 21年 8月

また，モモアカアブラムシによる虫媒接種の結果， 5-T分

離株はサツマイモ 9株中 2株で， SPFMV-Sはサツマイモ 9

株中 5株で、それぞれ感染が確認された. このことから， 5-T

分離株は， SPFMV-Sと同様に，モモアカアブラムシにより

虫媒{云染された.

RT酬 PCRおよび RT開 PCR-RFLPによる検出

プライマー 1(Table 1)を用いた RT-PCRは， SPFMV-S，-O

では約 540bpのcDNA断片が検出されるのに対し， SPFMV-

Tでは検出できなかった (Fig.2) しかしながら， 5-T分離株

は， SPFMV-S，ーOと向様のサイズの断片が検出された.

プライマー 2(Table 1)による RT-PCRでは， SPFMV-S，-O

a Ml S 0 T 5S 50 B

540bp

b BamHI

Ml S o T 5S 50 B

1.3 kb 4・曜

700bp 4・a

よhoI

Ml S o T 5S 50 B

1.3 kb 4‘

800bp 4・a

300 bp

200bp コー

c AluI

M2 D S O B T

490bp

コ‘400bp

200bp 4咽

は約1.3kbのcDNA断片が検出され， SPFMV-Tでは約1.4kb

が検出された これに対し， 5-T分離株での増幅断片は，

SPFMV司 S，-0と両様に約1.3kbであった. また， 5-T分離株

のcDNA断片をBamHIで処理した結果，約 700bp付近に 2

本のバンドが検出され，EcoRlでの処理では切断されなかっ

た (Fig.2) この結果から， 5-T分離株の既報の制限酵素処理

におけるバンドパターンは SPFMV-Tに類似していた. しか

しXhoIでの処理では約 800，300及び200bpの位置に，HincII

での処理では約 800及び500bpの位置にバンドが確認され，

SPFMV-S， -0， -Tともバンドパターンは異なったー

プライマー 3(Table 1)を用いた RT-PCRにおいて， 5-T

EcoRI

Ml S 0 T 5S 50 B

HincII

Ml S o T 5S 50 B

800bp

500bp

HhaI

M2 D S O B T

490bp

380bp

110 bp

Fig. 2. Differentiation between Sweet potato feathery mottle virus isolates on the basis of RT-PCR with primer 1 (a) and RT♂CR-RFLP with

primer‘2 (b) and 3 (c).

Lane M1，入!HindIIIand HincIl; lane M2， 100-bp ladder marker; lane S， SPFMV-S; lane 0， SPFMV四 0;lane T， SPFMV-T; lane 5S， 5

S; lane 50， 5-0; lane B， SPFMV-Bungo (5-T); lane D， SPFMV-Bungo (5-T) (not c1eaved). Arrowheads indicate PCR products or

RFLP fragments， and numerals show each size.

]pn.]. Phytopathol. 75 (3). August， 2009 161

分離株は， SPFMV-S，】0，-Tと何様に約 490bpのcDNA断片

が検出された. しかし， 5-T分離株の cDNA断片は，AluIで

の処理では 400，50及び 40bpの位置に，HhaIでの処理では

380及び1l0bpの位置にそれぞれバンドが確認され，バンド

パターンは SPFMV-S，ー0，-Tとは異なった (Fig.2).

これらの結果， 5-T分離株の 3'末端の塩基配列は，既報の

SPFMV-S， -0， -Tと異なる可能性が示された.

なお， 5-Sおよび5-0分離株も同様に検討したところ，前

述のいずれの方法でも 5-S分離株は SPFMV-Sと， 5-0分離

株は SPFMV-Oと向様のバンド、パターンを示した.このこと

から， 5-S分離株の 3'末端の塩基自己列は SPFMV-Sと， 5-0分

離株のそれは SPFMV-Oと類似している可能性が示された

(データ未記載)•

塩基配列の解析と分子系統樹の作成

5-T分離株の感染アサガオ葉の貯.J'Aよりクローニングに

よって cDNAの増幅を行ったところ，約1.8kbのcDNA断片

が得られた.この cDNAの塩基配列を解析したところ， 1，789bp

からなり，外被タンパク質領域と 3'末端非翻訳領域を含んで

いた (DDB]IEMBL!GenBankaccession number， AB435071)

推定される外被タンパク質(ヌクレオチドポジション 626~

1，564)は313アミノ酸から構成されていた.

5-T分離株の外被タンパク質のアミノ酸配列を， これまで

に報告されている SPFMVの分離株と比較した結果， SPFMV-

C (Abad et al.， 1992;米国由来)， SPFMV-CH2 ( Colinet et al. ，

1998;中国由来)， SPFMV6 (Mukasa et al.， 2003;アルゼ、ンチ

ン由来)および SPFMV-SOR(Mukasa et al.， 2003;ウガンダ由

72

41

92

O.ld)

SPFMV伶C

SPFMV-Bny

SPFMV-RAK

SPFMV-ch 57

SPFMV5

PPV (outgroup)吟

Fig. 3. Phylogenetic analysis of the coat protein amino acid sequence of Sweet potato jeathery mottle virus isolates a) Plum pox virus (D13751) was used as the outgroup. b) The percentage of bootstrap support for 1，000 replicates is given at each of the major modes in the tree.

c) Isolates found in ]apan are underlined. d) Scale bar indicates Kimura amino acid distance. Horizontal branch length is drawn to scale with th巴barindicating 0.1 nt replacements per site.

Table 3. Amino acid comparison (%) of the coat protein region between Sweet potato jeathery mottle virus Bungo (5-T) and published isolates

Isolate Origin Accession Bungo

n山nber (5-T) Sa) Ob) RCc) CC) K1 d) K2d) CHe) CH2e) 5f) 6わ Bnyf) SORf) RAKg)

Bungo (5-T) ]apan AB435071 ~~ M~ ~2 %B ~ß ~~ M~ 96.5 80.6 93.6 82.9 97.1 82.2 S ]apan D86371 95.2 99.0 84.5 99.0 98.1 95.2 82s 93.7 80.3 96.8 81.9 96.2 o ]apan Dl6664 95.6 83.2 95.6 96.2 96.5 81.6 96.2 79.7 95.9 81.6 95.9 RC USA S43450 84.8 98.7 98.7 96.2 82.9 94.6 80.6 97.1 82.2 97.1 C USA S43451 84.2 84.5 82.1 97.7 81.4 93.2 84s 95.2 83.9 K1 Korea AF015540 97.8 95.6 82.2 94.0 80.0 97.1 81.6 96.5 K2 Kore坦 AF0l5541 96.2 82.5 95.2 80.3 96s 81.9 97.1 CH China Z98942 81.0 95.9 79.0 94.3 80.3 94.9 CH2 China A]001440 80.0 94.2 83.5 96.8 81.9 5 Argentina U96624 78.1 94.0 80.0 94.6 6 Arg巴ntinaU96625 81.3 93.6 79.7 Bny Uganda A]539130 83.5 97.8 SOR Uganda A]539129 81.9 RAK Uganda A]010706

司Isolatereport廷dby Mori et al. (1995). b) Isolate rep口rtedby Mori et al. (1994). c) Isolate reported by Abad et al. (1992). d) Isolate reported by Ryu et al. (1998). 。)Isolate reported byじolinetet al. (1998). f) Isolate reported by Mukasa et al. (2003).

g) Isolate reported by Kreuze et al. (2000).

162 日本植物病理学会報第 75巻第3号平成 21年8月

来)とそれぞれ 90%以上の高い相同性が認められた (Table

3) .また，近隣結合法に基づく分子系統樹を作成した結果，

5-T分離株は，これら 4種の既知の分離株が属する C系統グ

ループ (Unitiveros，2008)に位置する一方， 日本でこれまで

報告されている SPFMV-S(RC系統グループ)， SPFMV-O (0

系統グループ)とは独立した系統グループに属することがわ

かっTこ (Fig.3).

考察

大分県のサツマイモを RT-PCR -RFLPで検定したところ，

発病の有無にかかわらず， SPFMVの重複感染が確認された.

一般的には，ゲノムレベルで

感染初期には部分的に住み分けた重複感染していても全身

感染においてにはどちらか一つの分離株(系統)のみになる

(干渉f伶乍用)といわれているカが¥中には Turn争mosaicvirusの

場合のように複数の系統がその過程の中で，組換え体を含め

て重複感染している例も見られる (Ohshimaet al.， 2002) 特

に，サツマイモは栄養繁殖性作物のため，強制的にウイルス

フリー化しない限り，ウイルスは塊根等で感染し続けるた

め，複数の系統の重複感染は，長期的には一つの系統に終息

するかもしれないが，互いにゆるやかに干渉しあいつつサツ

マイモ体内で住み分けている可能性がある.しかし，今回供

試したサツマイモは 10年以上ウイルスフリー化されず栄養

繁殖を続けているものであり，いずれかの系統に淘汰される

ことなく 3系統とも長期にわたって保毒され続けていたとい

う現象については今後さらに詳しく解明する必要があると

思われる.

本研究によって， 5-T分離株は C系統グループに属するこ

とが明らかとなった (Abadet al.， 1992; Colinet et al.， 1998;

Mukasa et al.， 2003; Unitiveros， 2008). わが国において， C系

統に属する SPFMVの報告は初めてである.なお，本分離株

を今後 SPFMV-Bungoと命名したい.

SPFMV-Bungoの宿主範囲はヒルガオ科植物のみと極めて

狭く，サツマイモには無病徴感染であり，病徴を生じるのは

アサガオとよ setosaのみである.一方， ウイルスによっては

重複感染によって単独感染より激しい病徴を示す例が複数

報告されている.しかし SPFMV-Bungoが分離されたサツ

マイモも重複感染株であったが，塊根の病徴は軽微であっ

た.また， 5-Sおよび5-0分離株との戻し接種でもサツマイ

モでの発病は認められず，サツマイモ塊根に病原性を有する

SPFMV-Sとの重複接種でも SPFMV-S単独接種との差はみら

れなかった(山崎ら，未記載).そのため，たとえ今後 SPFMV-

Bungoが他の系統と重複感染していても，サツマイモに対す

る発病の可能性や農作物に対する影響は小さいことが予想、

される.

また， SPFMV-Bungoは，その外被タンパク質領域の塩基

配列から C系統グループに属する米国，中国，アルゼ、ンチン

およびウガンダ由来の分離株と近縁であった (Abadet al.，

1992; Colinet et al.， 1998; Mukasa et al.， 2003; Unitiveros，

2008). わが園において，サツマイモの輸出入禁止国やヒル

ガオ科の貿易取引のない閏で発生しているウイルスと近縁

のウイルスが発見された事例は今回の SPFMV-Bungo以外に

も， RC系統グループの SPFMV同 S(Mori et al.， 1995)とSPFMV-

RC (米国由来， Abad et al.， 1992)並びに O系統グループの

SPFMV-O (Mori et al.， 1994)とSPFMV-CH(中国由来， Colinet

et al.， 1998)および SPFMV5(アルゼンチン由来， Mukasaet

al.， 2003)が報告されている.これらの類似した分離株がな

ぜ遠く離れた国々で発生したかについては現時点では不明

である

現在，植物ウイルスの系統地理学的・集団遺伝学的研究が

世界各国の様々なウイルスで進んできており，その中で重複

感染や組換え等を繰り返す中でのウイルスの進化の過程や

伝染経路への基礎的な知見が蓄積されつつある (Tomimuraet

al.， 2004). この分野の研究のさらなる進展によって，サツマ

イモにおける SPFMVの各系統の重援感染の機構や遠く離れ

た園への類似したウイルス株の伝染経路が近い将来明らか

にされることを期待する.

摘要

大分県のサツマイモから分離された SPFMVv;こ類似する性

質を示すウイルスは，アサガオでの症状がわが国で既報の

SPFMV-S， -0， -Tが示す症状と明らかに異なっていた.本分

離株は， RT-PCR-RFLPにより SPFMV-S，-0， -Tとは異なるバ

ンドパターンを示した また 本分離株の外被タンパク質

(CP)を含む 3'末端部分を RT-PCRで増幅して，その塩基配

列を決定した結果，その CPは313アミノ酸より構成されて

おり， SPFMV-C， SPFMV-CH2， SPFMV6および SPFMV-SOR

と90%以上の相向性を示したことから SPFMVであることが

確認された.さらに，これを元にした分子系統樹により，本

分離株は C系統グループに属することが判明した.わが園に

おいて， C系統に属する SPFMVの間定はこれが初めてであ

り，本分離株を今後 SPFMV-Bungoと命名したい.

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