CONTROL BIOLOGICO DE Tecia solanivora MEDIANTE MICROORGANISMOS ENTOMOPATOGENOS

ALEJANDRA BASTIDAS LEYTON

UNIVERSIDAD COLEGIO MAYOR DE CUNDINAMARCA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO

TRABAJO DE GRADO

BOGOTA D.C Septiembre de 2014

CONTROL BIOLOGICO DE Tecia solanivora MEDIANTE MICROORGANISMOS ENTOMOPATOGENOS

ALEJANDRA BASTIDAS LEYTON

Asesor metodolgico

SILVIO ALEJANDRO LPEZ PAZOS Ph.D.UNIVERSIDAD COLEGIO MAYOR DE CUNDINAMARCA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO

TRABAJO DE GRADO

BOGOTA D.C. Septiembre de 2014Contenido5RESUMEN

61.INTRODUCCION

82.ANTECEDENTES

113.MARCO REFERENCIAL

115.1 CULTIVO DE LA PAPA

115.1.1 Generalidades

125.1.2 Clasificacion taxonomica (national center for biotechnology information taxonomy)

133.1.3Importancia

145.2 Principales enfermedades que afectan la papa en Colombia.

155.2.1 Gota o Tizn Tardo

165.2.3 Phthorimaea operculella

165.2.4 Gusano blanco de la papa Premnotrypes vorax

175.2.5 Chisa

175.2.6 Gusano tiroteador de la papa

185.3 Tecia solanivora

185.3.1 Origen

185.3.2 Evolucin de T. solanivora

205.3.3 Generalidades

215.3.4 Clasificacin taxonomica (national center for biotechnology information taxonomy)

225.3.5 Importancia en Colombia

235.3.6 Ruta invasiva de T. Solanivora Colombia

235.3.7 Ciclo de vida

255.3.7.1 HUEVOS

RESUMENLa papa (Solanum tuberosum) constituye el cuarto cultivo alimenticio de mayor importancia a nivel mundial, debido a la gran cantidad de consumo y produccin. Contiene un alto valor alimenticio en contenido de carbohidratos, protenas, minerales, vitaminas y un gran porcentaje de agua. En Colombia los principales departamentos productores son Antioquia, Boyac, Cundinamarca y Nario. Desafortunadamente el cultivo de la papa se ve afectado por plagas y enfermedades como gota o tizon tardo, patologas causadas por Phthorimaea operculella, Premnotrypes vorax, y otras patologas de origen viral causadas por los virus Potato virus, afectando su produccin ya que causan prdidas comerciales de XXXX.La polilla guatemalteca de la papa Tecia solanivora (Lepidptera: Gelechiidae), representa uno de los problemas entomolgicos ms importantes para el sector de la papa debido a que afecta los cultivos en campo y la semilla en almacenamiento. En el afn de contrarrestar dichas prdidas los agricultores se han visto en la necesidad de aplicar insecticidas qumicos, y aunque estos han mostrado resultados favorables para el control de la polilla guatemalteca de la papa, son causa de efectos perjudiciales como la alteracin en el ambiente, resistencia por parte del insecto llevando a aumento indiscriminado de las dosis usadas, afeccin de la salud del agricultor, adems de ser una amenaza para los enemigos naturales de los insectos plaga. La implementacin del control biolgico mediante el uso de enemigos naturales de la plaga juega un papel muy importante, ya que estos pueden actuar como bioinsecticidas. Entre estos se incluyen bacterias, virus y algunos hongos debido a la capacidad que estos poseen de causar enfermedad en el insecto, y de ser especficos en cuanto al insecto plaga susceptible sin comprometer la salud del agricultor, adems son fciles de cultivar lo cual beneficia su aplicacin peridica; por otro lado se ha observado que generan mayor beneficio frente al impacto causado por estas plagas, generando mejores ingresos, menores costos en cuanto a la disminucin del uso de agroqumicos, generando mayores rendimientos y mejores precios debido a la calidad del producto.El empleo de microorganismos entomopatgenos como agentes de control biolgico involucra diferentes actividades biolgicas entre los que se destacan la bacteria Bacillus thurigiensis y el empleo de granulovirus.En esta revisin bibliogrfica se pretende hacer hincapi a las caractersticas que como plaga la polilla guatemalteca de la papa representa, como afecta al cultivo de la papa, y el papel que desempean los microrganismos entomopatogenos como biocontroladores de T. solanivora, a travs de la revisin de informacin en diferentes bases de datos como Pubmed, ScienceDirect, Biblioteca digital de la Pontificia Universidad Javeriana, Redalyc, Scielo, y documentos tcnicos institucionales de Colombia entre otros. Los resultados se clasificaron por tipo de documento, ao, fuente, pas, temtica y autores. Se espera que este documento sirva como aporte para el conocimiento y posibilidades de control biolgico de T. solanivora en Colombia mediante microorganismos y/o sus partes.Palabras clave: Solanum tuberosum, Polilla guatemalteca de la papa, microorganismo entomopatgeno, Bacillus thuringiensis, Granulovirus de Phthorimaea operculella

1. INTRODUCCION

La papa (Solanum tuberosum) se encuentra distribuida desde el sur del can del colorado de Estados Unidos (USA) hasta el archipilago de los Chonos en el sur de Chile, abarcando todos los pases de la cordillera Andina. Actualmente se cultivan ms de 2000 variedades diferentes de papa en todo el mundo, y su importancia en el consumo humano radica en la alta produccin de protenas y caloras. El rea de produccin se ubica a diversidad de altitudes que favorecen el desarrollo de los tubrculos, entre las que se incluyen zonas que van desde 1500 m hasta 3000 m. La importancia alimenticia este cultivo representa una de las actividades que genera gran demanda de empleo en los sectores rurales en los que se cultiva la papa (1,2). En Colombia cerca de 90.000 familias estn vinculadas con la explotacin directa de este cultivo, generando as alrededor de 15 millones de jornales al ao, en los departamentos de Boyac, Cundinamarca y Nario se cultiva el 80% del total del rea sembrada y de produccin nacional, por ende representa uno de los ejes fundamentales de la economa regional (3, 4).La calidad y sanidad del producto se ha visto afectado por mltiples factores entre los que se mencionan la humedad, la temperatura, y uno de los ms importantes, las plagas y enfermedades. Dentro de las plagas que afectan el cultivo en Centro y Suramrica se menciona a Tecia solanivora (Lepidoptera: Gelichiidae) la cual representa uno de los principales problemas fitosanitarios debido a las prdidas significativas generadas en los cultivos, y en el tubrculo en condiciones de almacenamiento (5).A pesar de la gran cantidad de uso de plaguicidas, alrededor de 500 mil toneladas de ingrediente activo a nivel mundial, la disminucin del rendimiento de los cultivos ocasionado por las plagas oscila entre 20-30%. Esta es otra de las actividades que afecta la cadena de produccin de la papa, ya que se menciona su asociacin a las prcticas agrcolas que comprometen la estabilidad de los enemigos naturales de la plaga, la resistencia a estos insecticidas, problemas ambientales y afecciones a la salud del productor y consumidor. Esto ha generado la necesidad de contrarrestar este problema buscando nuevas alternativas entre las que se destaca el uso del control biolgico, que constituye una alternativa para el manejo de insectos plaga, el cual esta conformado por el uso de enemigos naturales como depredadores, parasitoides, patgenos y fitfagos, los cuales permiten mantener el nivel de poblaciones nocivas para los cultivos en mnimas cantidades evitando grandes daos en los cultivos, sin generar consecuencias de tipo econmico para el agricultor (6, 7). Dentro de las estrategias de control biolgico se mencionan el uso de feromonas en trampas como atrayentes para los machos de la polilla guatemalteca de la papa es una de las propuestas mencionadas en los avances de la investigacin (8). Adems se encuentra el uso de microrganismos, entre los que se menciona a Bacillus thuringiensis, aprovechando la capacidad de esta bacteria para producir protenas Cry de efectos txicos sobre esta plaga (9), y el aislamiento del Granulovirus de Phthorimaea operculella que ha permitido enfocarse en la utilizacin de este virus para combatir especies de insectos incluyendo a la polilla guatemalteca de la papa (10). En esta monografa se revisa los parmetros cientficos bibliogrficos asociados al uso de microorganismos entomopatgenos para el control de T. solanivora.2. ANTECEDENTES

La papa es considerada uno de los productos agrcolas de mayor consumo en el pas sobre todo en las poblaciones donde los ingresos econmicos son menos favorecidos; ya que este representa una de las fuentes de mayor contenido de carbohidratos, fcil de obtener y de un precio bajo. Se cultiva durante todos los meses del ao y alrededor de este sistema de produccin se benefician alrededor de 90000 familias de agricultores (11). Desde hace muchos aos se sabe que la papa es vulnerable a la agresin, tanto de factores abiticos como biticos. Dentro de los factores biticos la especie ms importante y que ha generado grandes daos a los cultivos se encuentra el insecto T. solanivora (12). Dichas prdidas han generado un gran inters debido a la necesidad de buscar nuevas y mejores alternativas para controlar este insecto plaga sin comprometer la estabilidad econmica, ambiental y la salud del agricultor (6).

Los daos ocasionados por la polilla guatemalteca de la papa como se sabe ocurren en campo y en condiciones de almacenamiento, constituyndose como un importante problema para los agricultores, las prdidas en los pases del rea Andina oscilan entre el 25-50%, y en ocasiones estas pueden llegar hasta a alcanzar el 100% si no se toman medidas de control. Debido a que este problema no se ha manejado de manera adecuada en las zonas productoras. Una de las primeras iniciativas consisti en el uso de la feromona de T. solanivora, y muchos estudios se basaron en la implementacin de esta como atrayente de machos adultos para el control del insecto sobre los tubrculos de la papa. Esto se evalu con el nmero de trampas provistas con la feromona sexual a distribuir para lograr una mayor captura, y los resultados obtenidos permitieron concluir que la distribucin de 10 trampas/ha es ms conveniente en el mantenimiento de los cultivos (13). En los laboratorios de la Universidad Nacional de Colombia se analiz la respuesta de 10 variedades comerciales de papa y tres clones interespecficos del programa de Fitomejoramiento de la Facultad de Agronoma, frente a la infestacin masiva de larvas de T. solanivora, el objetivo del estudio fue valorar la incidencia de respuesta del dao generado por el insecto plaga a los tubrculos de las variedades comerciales y el clon experimental. Los resultados obtenidos demostraron que las variedades de papa mejoradas son altamente susceptibles a la plaga, las variedades nativas son menos susceptibles y los hbridos son ms resistentes al ataque de la polilla guatemalteca de la papa (14).Entre la informacin suministrada para el manejo integrado de plagas destaca el comportamiento alimentario de los insectos, sabiendo que muchos de estos se alimentan de extractos vegetales. En este sentido, se realiz un nuevo experimento enfocado a evaluar la actividad insecticida de diferentes extractos de cinco plantas las cuales pertenecen a las familias Myrtaceae, Solanaceae y Berberidaceae de un agrocultivo de Solanum phureja para determinar los efectos sobre la polilla guatemalteca de la papa cuando esta se expone a tubrculos impregnados con extractos naturales. Los resultados demostraron que los extractos vegetales de Eucaliptus globulus, Berberis samacana, y Nycandria physaloydes pueden usarse como control del insecto ya que afectan el estado de empupamiento de T. solanivora (15).Un nuevo trabajo de investigacin se llev a cabo en el ao 2006 el cual estudio el desarrollo de la infeccin y el efecto de la formulacin de aislamiento de granulovirus sobre T. solanivora y P. operculella, se purificaron aislamientos de granulovirus nativos encontrados en los departamentos de Cundinamarca, Nario y Norte de Santander y granulovirus de referencia del Per, donde se estudi los efectos infecciosos de estos agentes sobre el desarrollo de las dos polillas de la papa anteriormente mencionadas. Las variables evaluadas fueron el ancho de la capsula ceflica, los signos de infeccin viral y la mortalidad adems de evaluar el efecto de la formulacin biocontroladora de los aislamientos. Los resultados obtenidos mostraron mayor produccin de partculas virales en P. operculella, aunque la infeccin con granulovirus en larvas de las dos especies de insectos ocasion efectos notorios en el desarrollo de las larvas y signos caractersticos de la infeccin, estos resultados permitieron elegir al virus aislado de Norte de Santander como promisorio para el desarrollo de un bioplaguicida (57).En el ao 2008 se realiz un nuevo experimento, la caracterizacin preliminar de un virus isomtrico denominado Anchilibi virus (Anch V) aislado de T. solanivora, para este fin se utilizaron papas infestadas por la polilla guatemalteca de la papa y se llev a cabo un procedimiento de infeccin cruzada con P. operculella y Symmetrischema plaesiosema (Lepidptera: Gelechiidae) con resultados que mostraron que el virus causa gran mortalidad en larvas de T. solanivora y en los insectos como P. operculella y S. plaesiosema Los autores concluyeron que aparte de generar gran inters acadmico este estudio podra ofrecer perspectivas prometedoras como un agente biocontrolador de la plaga (16).

Para el ao 2009 se realiz un nuevo experimento basado en el uso de protenas Cry recombinantes de B. thuringiensis como estrategia de control biolgico sobre insectos plaga de lepidpteros y colepteros, donde se demostr la importancia y ventajas de la implementacin de nuevas estrategias en el control de plagas, debido a que estos permiten manejar la resistencia de T. solanivora frente a otras estrategias de control (17). En el mismo ao se desarroll otra alternativa de control biolgico mediante el uso de virus entomopatogenos para el manejo sostenible y eficiente de la polilla, se investig el efecto de granulovirus sobre el desarrollo del insecto (18).

AQU SE CAMBIO LA PARTE DE LA CITA 19, AS QUE HAY QUE CUADRAR LA BIBLIOGRAFA NUMERO 19.AQU SE CAMBIO LA PARTE DE LA CITA 46, AS QUE HAY QUE CUADRAR LA BIBLIOGRAFA NUMERO 46.Para el ao 2013 se llev a cabo un nuevo trabajo en Costa Rica el cual tuvo como objetivo la evaluacin del comportamiento de una cepa altamente patgena de granulovirus de P. operculella, en condiciones de campo contra poblaciones de los insectos T. solanivora y P. operculella. Los resultados obtenidos demostraron que en condiciones de almacenamiento el control ms eficiente se logr con la formulacin en polvo aplicado dentro de las bolsas reduciendo la lesin de la papa en un 70%, y las formulaciones liquidas aplicadas en campo reducen las lesiones entre 56 y 81%, adems los resultados permitieron obtener datos en cuanto a la temperatura en que se almacenan las formulaciones, tales como las altas temperaturas y condiciones prolongadas de almacenamiento y su efecto en reducir la patogenicidad del virus. Los autores sugieren que las formulaciones a base granulovirus de P. operculella, pueden incluirse en el manejo integrado de plagas (34).En el mismo ao se realiz otro estudio en el que buscaron, en 12 pases, virus entomopatogenos que afecten a los insectos plaga de los cultivos de la papa. Se pudo aislar un virus de T. solanivora y de otros insectos que pertenecientes a la familia Gelechiidae, y a partir del aislamiento de los virus se busc el gen ecdysteroid UDP- glucosyltransfrerasa (egt) el cual est relacionado con la toxicidad hacia estos insectos plaga, los resultados obtenidos mostraron que en los diferentes virus aislados el gen se encuentra presente en tres diferentes tamaos de pares de bases. Llamo la atencin el virus JLZ9f proveniente de individuos de T. solanivora del Ecuador, cuya caracterstica principal fue la gran capacidad insecticida. Se realiz una mezcla de un portador seco de carbonato de calcio y lecitina de soya con este virus para realizar un nuevo pesticida, el cual presento ms del 98% de mortalidad de los insectos en la papa donde se aplic este producto (cita 12).3. MARCO REFERENCIAL

5.1 CULTIVO DE LA PAPA

5.1.1 Generalidades

La papa representa uno de los vegetales ms producidos y consumidos en todo el mundo, es originaria de los Andes, considerndose como uno de los cultivos ms importantes de Suramrica, se cultiva en climas templados el intervalo altitudinal comprende los 1500 y 3300 msnm, aunque muchas especies se pueden adaptar a otras altitudes, es el cuarto cultivo alimenticio a nivel mundial se estima que la produccin es de aproximadamente 300 millones de toneladas en el mundo. En Colombia aproximadamente 90000 familias del pas se encuentran vinculadas con la explotacin del cultivo generando cerca de 20 millones de jornales por ao; el uso principal es la alimentacin humana, cerca del 75%, y aunque representa uno de los cultivos de mayor produccin la elevada incidencia de daos externos e internos generan bajos rendimientos, ocasionando grandes prdidas del tubrculo (20, 21,22). La clasificacin taxonmica de la papa es:SUPERREINO: Eucariontes

REINO: Viridiplantae

PHYLUM: Streptophyta

SUBCLASE: AsteridsORDEN: Solanales

FAMILIA: Solanaceae

SUBFAMILIA: Solanoideae

TRIBU: Solaneae

GENERO: Solanum (National Center for Biotechnology Information NCBI, base de datos Taxonomy)

El aporte nutricional da la papa esta dado por la alta cantidad de protenas, carbohidratos, vitaminas y su alto contenido de agua ( Solanum t1: 23)Tabla 1. Aporte nutricional de la papa fresca, tomado de (27).COMPONENTEFAO

Caloras Kcal87

Agua77

Protena1.29

Carbohidratos20.1

Lpidos0.10

Vitamina c13

Hierro0.31

Calcio5

Fosforo44

La papa est distribuida ampliamente desde Venezuela hasta el centro de Bolivia, presentando como caractersticas importantes tubrculos pequeos, adaptacin a das cortos y ausencia de dormancia (24) dentro de las cuales solo 15 variedades son comerciales entre las que se destacan: Parda pastusa, Tuquerrea, DIACOL capiro, ICA PURACE, ICA Nario, diferentes materiales de criolla e ICA UNICA (25).3.1.3 ImportanciaEl cultivo de la papa en Colombia representa una de las actividades agrcolas ms destacadas a nivel rural, representa un promedio del 32% de los cultivos transitorios. Se ha reportado que en el pas se siembran en todo el ao alrededor de 133865 ha las cuales estn distribuidas 25 municipios de 14 departamentos sobresaliendo los sitios ubicados en altitudes entre los 2500 y 3000 m de los departamentos de Cundinamarca, Boyac, Cauca, Nario y Antioquia (26, 27, 28). Esta especie representa una produccin alrededor de 2721396 toneladas en aproximadamente 162000 ha cosechadas (29) En nuestro pas la papa representa un producto de gran importancia en la canasta familiar, por su caracterstica de poseer un gran valor alimenticio, esto hace que el producto se encuentre presente en todas las escalas sociales, representa una de las culturas alimentarias ms importantes, el promedio de consumo en el pas es alrededor de 62 kg/habitante al ao, por ende se dice que es el producto de consumo intensivo, sobretodo en la dieta de familias de estratos de menor ingreso (26,.27, 30,31).

En el pas se producen alrededor de 30 variedades de especies diferentes de papa cultivada, pero se dice que solo 10 de estas variedades tienen importancia comercial. La mayor produccin est concentrada en las variedades Parda pastusa esta variedad es la ms cultivada y de mayor consumo en su estado fresco, en importancia le sigue Diacol capira la cual es utilizada como materia prima y para el consumo en fresco, la ICA- Purace es cultivada sobretodo en climas templados y clidos especialmente para el consumo en fresco, le siguen la tuquerrea o sabanera la cual es consumida principalmente en Bogot, y la papa criolla (S. phureja) la cual es cultivada mayormente en los departamento de Cundinamarca, Boyac y Nario, y pastusa suprema, en la regin de los Andes. Estas variedades son conocidas como papa comercial (27, 32,). De manera indirecta constituye uno de los promotores de los sectores de la economa entre los que se menciona el transporte, la industria, distribuidores de agroqumicos, produccin de empaques y otros (30). 5.2 Principales enfermedades que afectan la papa en Colombia.Las prdidas en la produccin agrcola mundial por plagas segn la FAO se estima que se presentan entre el 20 y 40% y al menos 10% de estos se destruye por la presencia de roedores e insectos en los sitios de almacenamiento (33).Entre las principales plagas y enfermedades que atacan el cultivo de la papa en Colombia se destacan las polillas entre las que se incluye T. solanivora (que afecta nicamente los tubrculos) y P. operculella (afecta tubrculos, tallos y hojas). Se ha descrito el ataque del coleptero Premnotrypes vorax en campo. El oomicete Phytophthora infenstans causante del tizn tardo es otro importante factor de prdidas econmicas en el cultivo. Tambin se han descrito otras patologas de origen viral causadas por los virus Potato virus Y (PVY), Potato leafroll (PLRV), Potato Yelow Vrin (PYVV) y Potato virus X (PVX) (32, 35 art p.infestans)5.2.1 Gota o Tizn Tardo

Es una de las enfermedades ms importantes y limitantes del cultivo de la papa causada por el fitopatogeno P. infestans, debido a su distribucin en zonas de clima hmedo y frio, destruyendo totalmente el cultivo en poco tiempo (30 art p.infestans). Pertenece al gnero oomycota, orden peronosporales, familia pythiacea (36).5.2.3 Phthorimaea operculellaPerteneciente al complejo de polillas de la familia Gelechiidae del orden Lepidptera es tambin una de las plagas importantes que afectan los cultivos de la papa, se encuentra distribuida por una gran variedad de zonas a nivel mundial, destacndose principalmente en las zonas donde se encuentra tambin la polilla guatemalteca de la papa (37, 38).Las hembras ponen sus huevos en los follajes o tubrculos durante todo el proceso del cultivo de la papa, al igual que en el campo, durante el transporte y almacenamiento del producto. Despus de eclosionar los huevos, las larvas hacen tneles o minas en las hojas, tallos y peciolos ocasionando prdidas en los tubrculos de los cultivos (37,39).5.2.4 Gusano blanco de la papaP. vorax (Coleoptera: Curculinoidae), tambin conocido como el gorgojo de la papa, representa otra de las plagas ms importantes que afectan la papa, ocasionando graves problemas los cuales se ven reflejados en la produccin y la calidad del tubrculo. En su forma adulta es capaz de alimentarse de las de las hojas de la planta, aunque el dao ms grave es generado por las larvas, ya que estas penetran el tubrculo el cual sirve como alimento para esta, causando hasta un 60% del dao en los cultivos, asociando mano de obra, gastos adicionales de administracin, insumos y maquinaria entre otros (40, 41, 42).

El ciclo de vida de P. vorax puede completarse entre los 95 y 283 das dependiendo de la temperatura, la altitud sobre el nivel del mar, la calidad y cantidad de alimento entre otras. Los estadios van desde huevos, larvas (las cuales pasan por cinco estadios y son las responsable de eclosionar el tubrculo y utilizar la pulpa como alimento), las larvas de ltimo instar vuelve al suelo para convertirse en pupa y posteriormente desarrollarse a adulto, este es un pequeo gorgojo de aproximadamente 5 a 7 mm de largo y 2 a 4 mm de ancho. Una de las caractersticas de este es que en ausencia de papa puede alimentarse de otros residuos de cosechas, u otras plantas como el trbol blanco o, la yerba mora entre otras (43).5.2.5 ChisaTambin conocido como gusano mojojoy (Colombia), morrongos, gallinas ciegas, cudzos, pertenecen al orden Coleptera, familia Melolothidae. Se han reportado alrededor de 582 especies de 107 gneros incluidos en 18 tribus, su importancia radica en los daos ocasionados en cultivos de diversos pisos trmicos, entre los que se incluyen pastos, flores ornamentales hortalizas, maz, leguminosas y papa (en clima frio). Este insecto se alimentan del sistema de raz de la planta ocasionando debilitamiento, disminucin en el rendimiento del cultivo y perdidas de estas, e incremento en los costos de los sistemas de produccin. El ciclo de vida dura comprende 12 y 18 meses dependiendo de la especie y las condiciones ambientales en las que se encuentre, una vez la hembra ha sido copulada se introduce en el suelo y deposita alrededor de 200 y 300 huevos, las larvas son los responsables de causar dao en los tubrculos, estas comprenden tres estadios, en su ltimo estadio evoluciona a pupa las cuales se introducen en el suelo alrededor de cuatro meses o hasta la llegada de nuevas lluvias (43,44).5.2.6 Gusano tiroteador de la papaUna de la especies ms destacadas es Asymmathetes vulcanorum (Coleoptera: Curculionidae), cuyo mayor dao es ocasionado por las larvas, las cuales forman pequeos orificios circulares, los cuales pueden ser superficiales, el ciclo de vida comprende entre los 475 y 500 das, comprende una metamorfosis completa pasando por cuatro estadios de desarrollo, los huevos son puestos en tallos secos de gramneas o en el suelo cerda de la planta de papa, las larvas poseen cinco instares. Cuando ataca los cultivos de papa esta es capaz de penetrar parcialmente al tubrculo generando orificios de mediana profundidad, la pupa se desarrolla en el ltimo instar, la cual termina de alimentarse y posteriormente se profundiza en el suelo (43).5.3 Tecia solanivora5.3.1 Origen

La polilla guatemalteca de la papa es uno de los insectos plaga ms importantes que afectan el cultivo de la papa en Centro, Noroeste y Sur Amrica, los pases en los que se registra la mayor prevalencia del insecto se encuentra Colombia, Venezuela y Ecuador (39, 45). El insecto afecta a tubrculos destinados para semilla en condiciones de almacenamiento y tambin tubrculos en campo (46). T. solanivora es originaria de Centroamrica. Se report por primera vez en Guatemala en el ao de 1956 cuando la Comisin Interamericana de Servicio Cooperativo de Desarrollo Agrcola (SCIDA) noto daos en los cultivos de papa, los cuales se atribuyeron a una pequea polilla, y con esta informacin la gobernacin de la ciudad de Guatemala cre una delegacin que permitiera controlar y mejorar la produccin local de semillas de papa. Para el ao de 1968 las semillas certificadas producidas en esta regin se exportaron a otros pases de Centroamrica como Honduras y Costa Rica (47).

5.3.2 Evolucin de T. solanivoraEn Costa Rica la presencia de T. solanivora se report en el ao de 1970, cuando esta destruy un gran nmero de cultivos. Aunque ya se haba descrito los daos en los cultivos causados por la polilla no fue sino hasta el ao de 1973 que Dadibor Povolny describi la presencia de larvas y polillas en los productos de los cultivos de Centroamrica (Panam, Honduras y Salvador) (16, 26, 47,31).

En 1980 se reportaron nuevamente daos importantes en los cultivos de papa en la ciudad de Guatemala causados por la plaga. En los aos 1982 y 1983 se report en Panam y Honduras, donde la literatura reporta que esta caus prdidas de hasta un 20% de los cultivos (47).

Hasta la dcada de 1980 an no haba registro de la presencia de T. solanivora en Suramrica. Fue hasta el ao de 1983 que se report en Venezuela debido a una importacin de semilla de la variedad de papa Atzimba trada desde Costa Rica (35,45).

En 1985, la plaga llego a la zona frontera entre Venezuela y Colombia, diseminndose as por las zonas del centro y sur de Colombia. En nuestro pas el primer reporte oficial de la polilla guatemalteca de la papa se dio por primera vez en el ao 1985, en el departamento de Norte de Santander (18, 47, 31), as fue que para el ao de 1994 ya se haban reportados daos causados por el insecto en otros departamentos paperos del pas. La diseminacin geogrfica del insecto est directamente relacionada por la comercializacin de los tubrculos afectados entre los pases vecinos, adems este suceso se ha favorecido por la capacidad que posee la polilla guatemalteca de la papa para adaptarse a una gran variedad de condiciones agroecolgicas, lo cual favorece su diseminacin hacia otras zonas del pas (48, 31), ocasionando un gran impacto econmico en los cultivos de la papa (8).

Para el ao de 1989 se registr la presencia de la polilla guatemalteca de la papa en Nicaragua (47). En la Provincia del Carchi (Ecuador) se registr en el ao 1996 y finalmente para el ao 1999 se desplaz a otras latitudes registrando su presencia en la zona noroeste de Tenerife, Islas Canarias (Espaa), aunque no hay informacin precisa de cmo la polilla llego a estos pases, algunos autores sealan que esta se dio debido a una importacin de papa procedente de Suramrica, de alguno de los pases afectados: Venezuela, Colombia o Ecuador (47,49).

Figura 1. Dispersin geogrfica de T. solanivora durante el periodo de 1973 y 1996. Tomada de (32).

5.3.3 Generalidades

T. solanivora es un insecto perteneciente al complejo de polillas de la familia Gelechiidae del orden Lepidptera (16,50). La plaga ataca a una gran variedad de especies de papa cultivada y tubrculos en almacenamiento, impidiendo el uso de esta como semilla y/o como fuente de consumo alimenticio para el humano y los animales (12,51). Aunque no se sabe con exactitud acerca del origen de la planta husped de la polilla guatemalteca de la papa, los estudios reportan que S. tuberosum es de mayor preferencia por el insecto, ya que esta planta tiene la capacidad de emitir sustancias que atraen a los adultos del insecto sobretodo en el proceso de tuberizacin (51).

La polilla guatemalteca de la papa a nivel mundial es conocida por una gran variedad de nombres como son polilla gigante, palomilla grande, polilla centroamericana, gusano guatemalteco y polilla guatemalteca de la papa (26, 47), la diversidad de nombres se ha dado por las caractersticas que el insecto presenta, pero a pesar de esto no se ha podido designar con exactitud el origen de la especie, algunos estudios genticos basados en marcadores mitocondriales y datos del primer reporte describen a Guatemala como el lugar de origen del insecto (16, 47).

La relacin del insecto plaga con el tubrculo se da porque este es considerado como el nico sustrato alimenticio para las larvas lo cual tiene como consecuencia daos de hasta un 100% por cada tubrculo (52, 16, 49).

Las condiciones ambientales que favorecen el desarrollo del insecto reportan que la plaga presenta mayores tasas de crecimiento a los 15C considerndose as un problema grave para los cultivos de papa en todas las poblaciones, sobre todo en los pases de Amrica Central y la regin Andina de Amrica del Sur, en altitudes menores de 2700 m favorecen la viabilidad de T. solanivora (47,32). Su clasificacin taxonmica es:SUPERREINO: Eucariontes (Eukaryota)

REINO: Metazoos (metazoa)

PHYLUM: Artrpodos

SUPERCLASE: HexpodaCLASE: InsectaSUBCLASE: NeopteraORDEN: LepidpteraSUBORDEN: Glossata

SUPERFAMILIA: GelechioideaFAMILIA: GelechiidaeSUBFAMILIA: GelechiinaeGENERO: TeciaESPECIE: Tecia solanivora

(National Center for Biotechnology Information NCBI, base de datos Taxonomy)

5.3.5 Importancia en Colombia

En nuestro pas el mayor limitante en la produccin de los cultivos de papa se da por el ataque de plagas y enfermedades, cobrando mayor importancia T. solanivora ya que se presenta en ms del 80% de las zonas de mayor produccin de papa, los departamentos de Cundinamarca, Boyac, Nario y Antioquia, ocasionando grandes prdidas superiores al 20% en la produccin del tubrculo cosechado y en almacenamiento (10, 31).

En 1998, El Ministerio de Agricultura y Desarrollo rural de Colombia, en respuesta del riesgo fitosanitario que la polilla guatemalteca de la papa representa para los cultivos, declar la emergencia fitosanitaria sobre todo en los departamentos de Boyac y Cundinamarca, para poder as disminuir las consecuencias econmicas, sociales y ambientales generadas por la plaga (31).

A pesar de los grandes daos causados por la polilla guatemalteca de la papa en Colombia se han registrado pocos insecticidas para el control de esta plaga, pero su eficacia es variable, adems algunos autores han informado que estos productos podran ocasionar efectos adversos sobre los enemigos naturales del insecto, el medio ambiente, y se pueden encontrar restos de los insecticidas en el producto (35, 53).5.3.6 Ruta invasiva de T. Solanivora ColombiaEl punto de origen de la polilla guatemalteca de la papa es Amrica Central, en el ao de 1983 entro a Venezuela por semillas que fueron importadas desde Costa Rica. En 1985 se inform por primera vez en el noroeste de Colombia, seis aos ms tarde el insecto ya estaba presente en el centro del pas en las principales zonas de produccin (Choconta, Carmen de Carupa y Funza). Para 1996 se report en el suroeste del pas (Tuquerres) junto a la frontera con Ecuador. Durante su migracin, la polilla guatemalteca de la papa ha colonizados zonas donde P. opercuella es endmica y hasta la fecha los dos insectos se han reportado en varias zonas del pas en diferentes proporciones (38).

Figura 2. Ruta invasiva de T. solanivora en Colombia. Tomada de (38).

5.3.7 Ciclo de vida

El tiempo de duracin del ciclo de vida oscila entre 65 y 93 das en el que se incluye como factor substancial la temperatura ambiental y la humedad relativa, (26, 45). Una caracterstica importante de T. solanivora es que esta hace metamorfosis completa, es decir tiene la capacidad de pasar por los estados de huevo, larva, pupa y adulto (34).

La hembra de la polilla guatemalteca de la papa deposita inicialmente los huevos en el suelo, cuando est en campo lo hace cerca de la base o tallo de la planta, y cuando el producto est en almacenamiento lo hace sobre el tubrculo (54, 13). Despus de eclosionar los huevos, las larvas tienden a salir y se dirigen hacia el tubrculo, la literatura menciona que el mecanismo por el cual la larva localiza el tubrculo es que estas lo hacen a travs de seales qumicas que emiten las plantas (denominadas kairomonas) (52), para as poder penetrarlo y completar su posterior desarrollo (26, 49).

El insecto raspa la superficie y penetra la corteza o epidermis marcando el camino, posteriormente alcanza mayor profundidad y forma varias galeras verticales y horizontales dentro del tubrculo, de esta manera las larvas permanecen dentro del tubrculo, aqu se pueden alimentar y crecer protegidas de los daos causados por el ambiente, agentes qumicos, enemigos naturales y microorganismos entomopatgenos utilizados para el control, hasta que llega el momento de pupar. Se conoce que en un solo tubrculo se pueden encontrar hasta 40 larvas (52, 12, 13).

El insecto disminuye la calidad parcial o total del tubrculo al dejar residuos de alimentos y excrementos entre las galeras, lo cual le da a este una tonalidad oscura permitiendo as la entrada de microorganismos como bacterias, ocasionando pudriciones secundarias (47, 49, 53). A pesar de las grandes pudriciones que el tubrculo presenta, las larvas son capaces de alimentarse de este (26).

Figura 3. Tubrculos atacados por T. solanivora. Tomada de (32).

HUEVOSMiden 0.5 mm de dimetro, de forma semiesfrica u ovalados, en un principio presentan un color blanco y ms adelante se tornan de un color amarillento (34, 31). El tiempo transcurrido en pasar de huevo a adulto corresponde a 42 y das a una temperatura relativa de 25C, si este se encuentra a una temperatura de 15.5C el tiempo transcurrido es de 95 das. Esta es una caracterstica favorable ya que esto hace este se adapte a nuevas condiciones ambientales, lo cual podra explicar porque el insecto se ha venido estableciendo en varios pases a lo largo del tiempo (49).

Figura 4. Huevos de la polilla guatemalteca de la papa. Tomada de (32).

LARVAS.Cuando la larva emerge del huevo, esta pasa por cuatro instares. Inicialmente poseen forma alargada con tres pares de patas torcicas, cuatro pares de patas abdominales y un par anales. El escudo protorcico ocupa casi todo el dorso del primer segmento abdominal. Una caracterstica importante de las larvas es que estas presentan lunares denominados pinaculas con forma trapezoidal sobre el dorso en cada uno de los segmentos, lo cual facilita su diferenciacin de otros insectos plaga (31, 34).

LARVAS PRIMER INSTAR:

Inicialmente son de color hialino pero con el tiempo van adquiriendo un color amarillo verdoso y tienen un tamao de 1.3 mm de largo (31, 34).

LARVAS SEGUNDO INSTAR:Presentan un color crema con puntos caf, con un tamao de aproximadamente 3.6 mm (55). LARVAS TERCER INSTAR:

Toman un color amarillo verdoso y con puntos ya ms visibles que en el anterior estadio, la cabeza presenta un color marrn oscuro, con la caracterstica ms destacada del estadio es que esta es una larva muy voraz (55). LARVAS ULTIMO INSTAR:

En esta fase toman un color purpura en la parte dorsal, adems de presentar una cabeza definida de color pardo oscuro y alcanzan un tamao de 14 mm (34,27).

Despus de emerger la larva del huevo comienzan la fase de migracin activa hacia el tubrculo, al entrar hacia este deja un orificio casi que imperceptible (34), esta se alimenta del contenido del tubrculo forma pasillos y deja sus heces ah, de tal manera que al aumentar la profundidad de los pasillos a medida que la larva crece y aumenta su densidad (34).En el ltimo instar la larva emite una especie de seda mediante la cual es capaz de formar un capullo, dentro de este ocurre el proceso de metamorfosis pasando del estadio de pupa a adulto. Sale del tubrculo a travs de los tubrculos circulares, la papa afectada por la polilla guatemalteca de la papa tiene una apariencia limpia cuando esta afeccin es moderada (31).

Figura 5 Larvas de T. solanivora en diferente fase de desarrollo, Arriba larva en cuarto instar y abajo larva en segundo instar. Tomada de (32)

PUPA:

Posee forma ahusada y presenta una coloracin caf (34), tienen la capacidad de desarrollarse tanto en el suelo, dentro del tubrculo o en el saco donde se almacena la papa (47).

ADULTO:

Es una polilla pequea, presenta un color que va de pardo oscuro a gris, el dimorfismo sexual est directamente relacionado con el tamao, las hembras presentan mayor tamao miden alrededor de 12 mm, y los machos miden 9.7 mm (47, 31).

Las hembras presentan unas alas anteriores amplias de color marrn claro, con un patrn de lneas longitudinales de aspecto ntido con una terminacin de forma de manchas marginales (31).

Las hembras presentan un abdomen abultado y claro y los machos presentan un abdomen delgado y oscuro. En los dos sexos se observa la forma de las alas en forma de copa con flecos y tienen la capacidad de volar, esto le permite desplazarse a distancias bastante amplias. (31).

Los adultos tienen la peculiaridad de ser activos al atardecer, en la noche y durante el da permanecen ocultos en sitios oscuros, bajo el follaje de las plantas (31, 34).

Una de las caractersticas ms importantes que presenta el adulto hembra es la capacidad de producir feromonas lo cual atrae fuertemente a los machos para el proceso de copula, se sabe que esta puede ser detectada a grandes distancias, estas opositan sus huevos durante los 10 primeros das, y el nmero de ovoposicin va desde 156 y 360 huevos (31).

Figura 6. Apariencia del adulto de la polilla guatemalteca de la papa. Tomada de (32). Medidas de Control del insecto

Debido a las grandes prdidas ocasionadas por el insecto las alternativas de control son diferentes (49). Una de las caractersticas importantes que se tienen en cuenta para el control de T. solanivora es el corto periodo de exposicin de las larvas al ambiente, por ende el control del insecto se orienta principalmente hacia los estadios adultos, a pesar de saber que el estado ms vulnerable son las larvas (52).

En Colombia el manejo del insecto se enfoc inicialmente en el uso de productos qumicos, los cuales estn registrados en el Instituto Colombiano Agropecuario (ICA), pero estudios recientes reportan que estos son insuficientes para el control de la plaga. Adems su toxicidad y uso inadecuado a generado como consecuencia contaminacin ambiental. Por lo tanto, buscando solucin a estos problemas en nuestro pas se ha implementado el Programa de Manejo Integrado de plagas (MIP) el cual propone una diversidad de estrategias frente al uso inadecuado de plaguicidas, adems de la implementacin de microorganismos entomopatogenos para el control biolgico del insecto (31, 56).

Entre las estategias de MIP tenemos:

Control Etolgico

Dentro de las propuestas implementadas para el control del insecto se encuentra las trampas con feromonas sexuales de las hembras, las cuales atraen a los machos tanto en el campo como en silo o bodega. Esta alternativa est enfocada en la interrupcin del apareamiento de los insectos plaga con el fin de contrarrestar los daos ocasionados por estos (53, 57). La feromona sexual de T. solanivora fue descrita en 1980, y desde entonces se ha venido utilizando con gran xito como atrayente de machos adultos, ya que tiene bajo costo, la mano de obra requiere poca inversin, no causa ninguna alteracin en el equilibrio ecolgico y biolgico del medioambiente, favoreciendo la accin de los enemigos naturales del insecto (13).Por otro lado, se sabe las hembras de la polilla guatemalteca de la papa colocan sus huevos en el suelo, y teniendo en cuenta esta caracterstica se llev a cabo un estudio en el que se evala compuestos voltiles correspondientes a metilfenilacetato y sulcaton los cuales producen respuesta en el insecto ocasionado por receptores nerviosos presentes en las antenas, esto facilita la atraccin de las hembras hacia las plantas en el proceso de tuberizacin y maduracin (flores). Se estudi el efecto que producen estos compuestos en las plantas hospederas y la respuesta del comportamiento del insecto, en condiciones de jaula y olfatometro, donde haban trampas de captura cebadas con estos compuestos. Los resultados mostraron que se produce mayor captura de hembras en trampas cebadas con metilfenilacetato ( cita 46).CUADRAR LA CITA NUMERO 46.

Control cultural

Este enfocado principalmente a destruir las fuentes que puedan causar infestacin de la plaga que generan condiciones desfavorables para interrumpir y evitar el desarrollo de nuevas sucesiones de generaciones de insectos. Dentro de estas actividades se describen la seleccin de tubrculos (semilla sana), las cuales se pueden utilizar en la elaboracin de compostaje o abonos orgnicos e incluso en muchos casos como ensilaje aprovechando el tubrculo no comercial como alimento suplementario del ganado, en pocas de escases de pastos y forrajes. Tambin puede ser utilizadas en la construccin de silos para el almacenamiento de la papa, control de malezas, riego por aspersin, preparacin adecuada del suelo, cosecha oportuna, limpieza del lugar de almacenamiento, eliminacin de residuos de cosecha y rotacin de cultivos (43,57).

Control Qumico

Este tipo de control, en los ltimos aos, ha representado una de las alternativas de mayor uso para los agricultores. Se sabe que estas estrategias de naturaleza qumica funcionan en base al comportamiento del insecto a diferentes ambientes, las condiciones y dosis de aplicacin. Muchos datos estadsticos reportan que Colombia representa uno de los pases con mayor demanda de insecticidas con un gasto de al menos 107000 millones de pesos. En nuestro pas la papa se considera como el producto de origen agrcola que mayor demanda de insecticidas genera despus del caf (50, 54).

Esta alternativa ha mostrado ser una de las actividades ms favorables para contrarrestar los efectos causados por los insectos plaga, pero su uso indiscriminado y dosificacin inadecuada ha trado como consecuencia grandes impactos econmicos incrementando los costos de produccin (43, 48); adems esto ha generado otros riesgos entre los que se destacan la contaminacin del agua, aire y suelo causados por los residuos txicos de los plaguicidas (39), el aumento de la fitotoxicidad produciendo cambios a nivel fisiolgico como son la infertilidad, incluso en especies silvestres, predadores, parsitos e insectos benficos estos productos ocasionan graves daos; en las personas encargadas de llevar a cabo las actividades de aplicacin los problemas de salud se han visto en gran aumento debido a la toxicidad debida al contacto directo, ocasionando serias afecciones en los rganos (50). Adems es importante mencionar que las consecuencias que se presenta con mayor frecuencia por el uso de agroqumicos es la resistencia generada por las plagas hacia los productos qumicos, y la presencia de estos residuos en la papa (12, 39).

Control Biolgico

La definicin de esta accin involucra el uso de enemigos naturales y uso de organismos benficos sobre organismos considerados plaga para disminuir de forma temporal o permanente estos insectos; se emple inicialmente en el siglo XIX en el que muchos naturistas de varios pases destacaron el papel importante que tenan los organismos entomfagos sobre la naturaleza, el control biolgico posee varias ventajas sobre otros tipos de controles ya que este es ms seguro, permanente, econmico, adems pretende reestablecer el desequilibrio ecolgico a travs del uso de organismos, microrganismos vivos o sus metabolitos para reducir los daos generados por microorganismos perjudiciales (33, 58, 59).

Los bioplaquicidas son derivados naturales de animales, plantas, microorganismos y minerales siendo estos altamente especficos contra el insecto plaga, lo cual permite mantener y disminuir las poblaciones plaga a niveles inferiores, favoreciendo la calidad de los cultivos con el objetivo de disminuir el riesgo para las personas y el medio ambiente generado por otros tipos de control; el desarrollo de nuevos bioplaguicidas tiene como objetivo estimular la modernizacin de la agricultura y reemplazar de forma gradual el uso de plaguicidas qumicos (34, 58).

El uso de virus y bacterias en los ltimos aos se ha constituido como alternativa provisoria para el control de los insectos plaga, aunque se sabe que estos tienen mayor afinidad con unos insectos ms que otros (60).Principales enemigos naturales

Generalidades

La gran mayora de plagas posee varios enemigos naturales, cabe resaltar que la abundancia de estos es muy grande, de ah la importancia de utilizar enemigos naturales para el control de plagas constituye una de las herramientas fundamentales para la agronoma ya que esta actividades constituyen un importante proceso a la hora de llevar a cabo el control de una determinada plaga sobre un cultivo, por tal motivo el xito de esta accin depende principalmente del conocimiento de la taxonoma, biologa, ecologa y el comportamiento del insecto de control de inters, adems del tipo de enemigo natural sobre dicho artrpodo que se quiere controlar (37, 59).

A lo largo del tiempo los enemigos naturales se han clasificado en tres grandes grupos: parasitoides, depredadores (entomfagos) y patgenos (entomopatgenos). En este ltimo grupo se encuentran hongos, bacterias, virus, nematodos y protozoarios (37).

1. PARASITOIDES:Este grupo hace referencia a insectos entomfagos que parasitan a otros insectos, poseen la caracterstica principal de atacar un solo hospedero, el cual culmina dicho proceso con la muerte del hospedero, tienen la caracterstica de desarrollarse sobre o dentro de otro insecto fitfago, dicho parasitoide es capaz de comerse vivo al insecto plaga, toman a otros insectos como hospedantes y viven a expensas de estos durante sus estadios larvarios, tienen la habilidad de romper el tegumento, la larva se convierte en pupa y posteriormente en adulto, completa su ciclo de vida en el hospedero y en el estadio adulto este vive libremente y se alimenta de nctares, residuos vegetales y comienza un nuevo ciclo ya que el estadio adulto busca nuevamente un husped sobre el que nuevamente pone uno o varios huevos y continua su desarrollo en larva sea dentro o fuera del husped; dentro de este grupo pertenecen los dpteros o himenpteros, de ah que estos parasitoides ejercen un papel muy importante en el control de plagas (59).Otros estudios se han basado en la caracterizacin ecolgica de nematodos entomopatgenos del gnero Heterorhabditis aislados de T. solanivora, ya que estos se han considerado como una de las alternativas favorables para el control biolgico, tomando como referencia la caracterstica comn de las plagas de insectos, ya que estos pasan alguna parte de su ciclo biolgico en el suelo, por tanto estos nematodos pueden generar gran virulencia en la polilla guatemalteca de la papa (19).

CUADRAR LA CITA NUMERO 19.2. DEPREDADORES:Son un tipo de insectos o caros los cuales no causan dao al cultivo pero poseen la capacidad de capturar y alimentarse de otros insectos o caros fitfagos plaga, a diferencia de los parasitoides estos son capaces de atacar varias presas durante todo el ciclo de su vida; las larvas y los adultos de dichos depredadores son los que buscan a las presas por ende se alimentan de ellas, la presa a la cual atacan generalmente son de menor tamao, estos realizan un control biolgico natural ya que necesitan consumir ms de una presa, estos se alimentan tanto de insectos dainos como benficos (59).3. ENTOMOPATOGENOS:Los microrganismos entomopatogenos incluye virus, bacterias, hongos, nematodos y protozoos, estos poseen la capacidad de producir enfermedades a los insectos aunque generalmente poseen escasa toxicidad sobre otros organismos del ambiente, estos actan como insecticidas biolgicos ya que poseen la capacidad de penetrar en la especie plaga mediante el tubo digestivo o el tegumento ocasionando as la expresin de la enfermedad provocando la muerte del hospedero, estos microrganismos son los nicos que no buscan de forma activa a las presas, pueden ser tratados de forma fcil en la industria; se cultivan, formulan, empaquetan, almacenan y son comercializados como otros insecticidas convencionales (59).A pesar del beneficio de los enemigos naturales estos se han visto afectados negativamente debido a las prcticas agrcolas modernas ya que afectan la capacidad de reproduccin y por ende no pueden suprimir biolgicamente a los insectos plaga de los cultivos (34).

Virus

Los virus son patgenos intracelulares obligados y su distribucin es muy amplia, estos se encuentran en varios tipos de organismos tanto procariotas como eucariotas (61), estos estn incluidos en el primer plano de los organismos causantes de enfermedades en insectos debido a la frecuencia de epizootias. Poseen las caractersticas comunes de otros entomopatgenos como la especificidad de husped (62).

Se han encontrado alrededor de 450 especies de virus patgenos para insectos y caros, pero las familias de virus ms estudiadas debido a su accin entomopatgena son: Baculoviridae (virus de la poliedrosis nuclear el cual ataca a lepidpteros e Himenpteros), Reoviridae (virus de la poliedrosis citoplasmtica especfico para Lepidpteros y Dpteros), y Poxoviridae (virus entomopox el cual ataca Lepidpteros y Colepteros) (59).El primer virus fue reportado en Sri Lanka en el ao de 1967, el cual se aisl de P. opercuella, aos ms tarde se reportaron otros aislamientos del virus en distintas partes del mundo como Australia, Per y Bolivia, donde se lleva a cabo la produccin de papa con presencia de P. opercuella. Estos virus parecen estar genticamente relacionados por ende este conjunto de virus fue llamado los granulovirus de P. opercuella (PhohGV). Estos hallazgos demostraron que PhohGV controla y previene la proliferacin de la polilla de la papa en condiciones de almacenamiento, sin llegar producir dao alguno sobre organismos benficos (54).

Inicialmente las cepas de granulovirus demostraron su eficacia en especies de insectos de P. operculella. Posteriormente los resultados de varios estudios han demostrado que este tiene una alta eficacia sobre la polilla guatemalteca de la papa, y se han descrito varios aislamientos de genotipos virales los cuales poseen caractersticas mayores de eficacia que en sus huspedes originales, aunque se pueden presentar infecciones mixtas ocasionadas por diversos genotipos, ya sea por una sola especie viral o diferentes especies de virus. Este antagonismo tiene como consecuencia cambios en los parmetros biolgicos como son la virulencia y patogenicidad, aunque se ha visto que en algunos casos la mezcla de genotipos virales tiene mejor eficacia (35,38).

El uso de granulovirus de P. opercuella se ha convertido en una importante herramienta como insecticida, debido a los resultados que se han obtenido en el control de la plaga hospedera, tanto en condiciones de campo como almacenamiento. Estas deducciones sirven como perspectiva promisoria para el control de otras plagas como es el caso de T. solanivora, ya que trabajos realizados con el virus frente a este insecto sugieren que tambin es un patgeno de esta (63, 64, 65). Desde el ao 1964 se ha reportado la presencia del virus de la granulosis en diferentes partes del mundo como Australia, Bolivia y Per infectado larvas de P. operculella. El Centro Internacional de La Papa (CIP) en el Per desarrollo un bioplaguicida a base de este granulovirus. En el ao 2000 la Corporacin Colombiana de Investigacin Agropecuaria (Corpoica) fabric un bioplaguicida investigaron una cepa del granulovirus proveniente del Per con el propsito de responder a los problemas causado por la polilla guatemalteca de la papa. Para el ao 2004 nicamente se haba reportado un aislamiento de virus de la granulosis, el cual estaba infectando naturalmente, en condiciones de campo, larvas de la polilla guatemalteca de la papa en la ciudad de Mrida (Venezuela), entre los aos 2004 y 2005. Adems Corpoica realiz una bsqueda de aislamientos nativos de virus de la granulosis que estuvieran afectando de forma natural a larvas de T. solanivora, los cuales se aislaron e identificaron en cinco muestras de los departamentos de Cundinamarca, Nario y Norte de Santander, estos aislamientos se identificaron como virus de la granulosis (54).Descripcin del granulovirus de Phthorimaea opercuellaEs un virus de ADN de doble cadena de tamao de 90 y 180 kpb, el genoma esta empacado en viriones en forma de bastn los cuales estn ocluidos dentro de una matriz proteica la que se conoce como cuerpo de inclusin, la cual les confiere proteccin frente a condiciones ambientales extremas, este afecta invertebrados especialmente insectos (38).

Figura 7. Apariencia granular de granulovirus de Phthorimaea opercuella bajo microscopia electrnica. Tomada de (54).

La clasificacin taxnomica del este granulovirus es:

SUPERREINO: Virus FAMILIA: Baculoviridae

GENERO: Betabaculovirus(National Center for Biotechnology Information NCBI, base de datos Taxonomy)

Las transmisin del virus a los insectos por los general de realiza mediante va oral, ya sea por la presencia del virus en el alimento que toma el insecto, porque estos ingieren partculas virales que pueden estar presentes en excrementos de larvas, por inyeccin del inoculo en el hemocelo del insecto. Tambin la infeccin puede ocurrir a travs de la hembra infectada, o por infeccin transovarica (59, 62).

Los virus al ser ingeridos tienen la habilidad de atravesar el epitelio intestinal hasta llegar al tejido, donde posteriormente inician la replicacin en el interior de las clulas del husped infectado, obteniendo como resultado final la muerte del insecto plaga que ocurre entre los 12 a 21 das. Los sntomas que manifiesta el husped afectado son muy variables, estos dependen principalmente del tipo de virus y del hospedero, inicialmente el insecto presenta perdida de actividad, lentitud de movimientos, falta de apetito, posteriormente se observan cambios en el tegumento y la cutcula, que se decolora llegando a tornarse en un aspecto blanquecino. Cuando la infeccin es grave los tejidos se vuelven flcidos y son destruidos fcilmente. Las larvas por lo general se desplazan al pice de la planta donde se desintegran y liberan el contenido infestado, este cae sobre las hojas inferiores las cuales pueden convertirse en alimento para las larvas sanas y as continuar el ciclo de infeccin con el virus (59, 62, 66).Una de las caractersticas importantes que presentan los granulovirus es que al momento de finalizar el proceso infeccioso sintetizan grandes cantidades de granulina, esta es una protena cristaliza la cual est formada por una matriz o cuerpo de inclusin con forma de granulo, y durante el proceso de morfognesis un virion es incluido dentro del cuerpo de inclusin lo cual le garantiza la preservacin de su capacidad infecciosa. Se dice que estos son insolubles al agua, poseen resistencia a la putrefaccin, desintegracin por agentes qumicos y algunos tratamientos fsicos lo cual les concede la capacidad de persistencia en el ambiente (48). Algunos estudios a partir de estos virus, para la formulacin de bioplaguicidas, reportan que una de las limitaciones del uso de este en campo es la rpida inactivacin causada por la radiacin UV (35, 64).El virus tiene la capacidad de controlar y prevenir la proliferacin de T. solanivora y de otros insectos plaga sin causar dao a los organismos benficos. El mecanismo de accin por el cual el virus afecta a la polilla guatemalteca de la papa se describe por la capacidad que este tiene de interactuar con el hospedero a nivel intestinal, ya que las partculas virales son ingeridas por el insecto, lo cual ocasiona retraso del crecimiento y movilidad lenta en las larvas, trayendo consigo la desintegracin de los tejidos internos y la muerte de la larva, impidiendo as que este llegue al estado de pupa (35, 67).

Segn informes de la FAO y la OMS durante los ltimos aos el virus se ha considerado como una herramienta temporal para el control de insectos plaga, y as contribuye a la solucin de los problemas generados por la resistencia de los insectos a los agroqumicos (35, 67).

Experiencia con el granulovirus de Phthorimaea opercuella en el EcuadorEn el Ecuador se han desarrollado diferentes mtodos de control para la plaga T. solanivora, uno de estos es la implementacin de bioplaguicidas, que se inici buscando diferentes virus entomopatgenos, y se encontr el PhopGV que fue aislado de T. solanivora y de otras 5 especies. Veinte de los virus aislados fueron genticamente caracterizados para encontrar el mejor candidato a un bioplaguicida. De ah se sacaron los ocho mejores candidatos para someterlos a prueba buscando un mayor tamao de ecdysteroid UDP-glucosyltransferase (egt) que es un gen que tiene un papel importante en la patogenicidad. El virus aislado ms patgeno encontrado fue el JLZ9f que presenta una concentracin letal media de 10 cuerpos de oclusin viral por milmetro cuadrado de piel de tubrculo consumido. Despus se probaron formulaciones de bioplaguicida mezclando un portador seco como el carbonato de calcio con lecitina de soya y cantidades especficas de JLZ9f, as durante los experimentos de laboratorio se encontraron muy buenos resultados con ms del 98% de mortalidad en comparacin a los tubrculos sin tratar.Bacterias

Varias especies de bacterias patgenas se han aislado en los ltimos aos, estas han sido utilizadas como pesticidas ocasionando as un gran xito como controladores biolgicos de insectos. Estas se introducen en los hospederos cuando estos consumen alimentos contaminados, al llegar al aparato digestivo del insecto se multiplican, producen enzimas (lecitinasas y proteinasas) y toxinas, que son capaces de daar las clulas del intestino medio facilitando la invasin por el homecele del insecto, la infeccin por lo general vara dependiendo del tipo de bacteria. Normalmente estas invaden, se multiplican y matan el insecto sea por septicemia, o por la accin de las toxinas, y en algunos casos por la accin de ambos mecanismos (52).Dentro de los microorganismos entomopatogenos ms utilizados para el control de la plaga se encuentra Bacillus thuringiensis. Desde su descubrimiento este ha constituido una alternativa viable para controlar los insectos plaga en el sector de la agricultura debido a la capacidad que este posee para producir protenas conocidas como Cry. La alta capacidad que este posee para sintetizar grandes cantidades de protenas con efectos insecticidas durante la fase de esporulacin, le ha concedido el convertirse en una importante herramienta para el control de plagas que afectan los cultivos. Varios estudios han reportado que al menos 700 genes cry se han secuenciado, y estas protenas se han clasificado en ms de 60 grupos organizados en subgrupos de acuerdo a la secuencia de aminocidos (68, 69).

B. thuringiensis es un bacilo Gram positivo, que esporula, aerobio facultativo, con 3 a 5 um de largo por 1 a 1.2 um de ancho. Es quimiorganotrofo y con actividad catalasa. Posee la caracterstica principal de desarrollar esporas de resistencia, las cuales no provocan hinchamiento del perfil bacilar. Es un agente natural del suelo, agua, hojas de plantas, insectos muertos, telaraas, etc. B. thuringiensis tiene capacidad de fermentar glucosa, fructosa, trealosa, maltosa y ribosa, adems hidroliza gelatina, almidn, glucgeno y esculina (70).

B. thuringiensis durante el ciclo de vida presenta dos etapas principales: crecimiento vegetativo y esporulacin, en la primera fase la bacteria de duplica por biparticin y durante la etapa de esporulacin se da la diferenciacin de bacteria a espora (71).Durante la fase de esporulacin B. thuringiensis produce una inclusin paraesporal cristal, la cual est formada por uno o ms cuerpos cristalinos de naturaleza proteica. Dicho cristal est formado por protenas denominadas Cry, las cuales tienen alta toxicidad y espectro de accin contra las clulas de algunos insectos plaga sobre todo en su estadio larval, de los rdenes Lepidptera, Coleptera, Dptera, Himenptera y Hemptera. La capacidad entomopatgena le ha permitido ser utilizado como biopesticida para actuar sobre varios insectos plaga que afectan los cultivos (71, 72, 73). Su clasificacin es la que sigue:SUPERREINO: Bacteria

PHYLUM: Firmicutes

CLASE: BaciloORDEN: BacillalesFAMILIA: BacillaceaeGENERO: BacillusESPECIE: B. thuringiensis(National Center for Biotechnology Information-base de datos Taxonomy)

PROTEINAS Cry: Estas protenas poseen pesos moleculares que oscilan entre 27 y 140 kDa, tiene efectos txicos sobre un organismo susceptible (74). Las protenas Cry forman inclusiones cristalinas que dependiendo de su composicin forma cristales de diversas formas, entre los que estn bipiramidales (Cry1), cuboidales (Cry2), rectangulares planos (Cry3), irregulares (Cry3B), esfricos (Cry4) y romboidales (Cry11A) (75).

Figura 8 Estructura tridimensional de las protenas Cry1A y Cry3A. Tomada de (75)

La estructura tridimensional de las protenas Cry poseen una organizacin molecular que esta directamente relacionada con su actividad. Posee tres dominios funcionales: el dominio I esta encargado de formar poros lticos en las clulas del intestino medio de la plaga, el dominio II reconoce a un receptor proteico en la superficie de celular intestinal media, y el dominio III conserva la estructura de la toxina y participa en la unin con el receptor (74).Durante los ltimos aos muchas investigaciones se han enfocado en la descripcin de los mecanismos insecticidas por los cuales las protenas Cry desencadenan la muerte en los insectos. Los cristales paraesporales son ingeridos por el organismo susceptible, en el lumen del intestino medio estos son solubilizados; en la luz del intestino enzimas como las proteasas activan el solubilizado (protoxinas) generando una toxina activada que se une a los receptores de la clula los cuales estn localizados en la membrana de las microvellosidades del intestino, entre los que se mencionan las caderinas y N-aminopeptidasas. Adems algunos estudios reportan que la protena Cry1Ac puede unirse a fosfatasas alcalinas, las cuales actan como receptores para estas; as el dominio I de la toxina se inserta en el borde de la membrana epitelial, esto produce una activacin de la protena por medio de la formacin de oligomeros, lo cual desencadena la formacin de canales o poros que causan toxicidad y muerte de las clulas mediante choque osmtico (70, 72, 76).

Las protenas Cry forman una gran familia en cuanto a la homologa que existe entre ellas, pero cada protena es diferente y con especificidades nicas, ya que cada protena es activa contra una o varias especies de insectos; Cry3, Cry7 y Cry8 son activas frente a insectos del orden Coleptera (entre los que se incluyen escarabajos y gorgojos), la protena Cry3Aa es mucho ms activa frente a la plaga de la papa Leptinotarsa decemlineata (escarabajo colorado de la papa) y Cry1 se ha demostrado que son altamente activos contra lepidpteros (77).Aplicaciones de las protenas Cry de B. thuringiensisLa mezcla entre protenas insecticidas y esporas de varias cepas de la bacteria ha permitido su utilidad como herramienta activa para formulaciones comerciales contra insectos lepidpteros, colepteros, y dpteros plaga en una gran variedad de cultivos, siendo utilizadas las protenas Cry del bacilo como aerosoles biopesticidas durante ms de 50 aos (8, 68).

La introduccin de genes cry de B. thuringiensis en plantas permite la expresin de protenas Cry en los tejidos internos de esta y por ende estos se podra controlar la plaga en todas las fases de crecimiento de la plaga (12). Los programas de MIP ha tenido varias dificultades en la implementacin de prcticas para combatir las plagas, por ende las investigaciones enfocadas en dar solucin a los efectos causados por dichos insectos se ha implementado como alternativa viable la produccin de plantas genticamente modificadas con genes de B. thuringiensis para resistencia a lepidpteros. Estudios realizados en la transformacin gentica de la variedad pastusa suprema, ofreci la posibilidad de desarrollar lneas transgnicas Cry1Ac potencialmente resistentes al ataque de la polilla guatemalteca de la papa (75, 78).Aunque esta variedad de lneas transgnicas a futuro prometen ser una de las alternativas viables para combatir el dao causado por la plaga, en la produccin agrcola la liberacin de estas plantas modificadas genticamente ha generado un gran debate en los que se incluye a biotecnologos, organizaciones internacionales de seguridad alimentaria y el pblico en general esto en cuanto a la preocupacin del posible riesgo que pueda generar las plantas modificadas genticamente al medio ambiente. Entre los riesgos biolgicos que se han mencionado se destaca la transferencia horizontal de genes con resistencia a antibiticos, posibles efectos adversos al organismo husped, resistencia de insectos, e impacto generado sobre la biodiversidad (29). B. thuringiensis y el control de T. solanivora

Con el fin de disminuir los efectos causados por el uso inadecuado de productos qumicos, en los ltimos aos varios estudios se han enfocado en implementar el uso de microorganismos entomopatgenos para el control biolgico del insecto, en nuestro pas se realiz un trabajo de investigacin, el cual tuvo como objetivo determinar la actividad toxica de las protenas recombinantes de Cry1Aa, Cry1Ac, Cry1B y Cry1C de B. thuringiensis en larvas de primer instar de T. solanivora, en esta investigacin utilizaron como metodologa un bioensayo, las protenas fueron evaluadas a diferentes concentraciones con el objetivo de obtener resultados que reflejen el porcentaje de mortalidad, los resultados obtenidos mostraron que las larvas de primer instar de la polilla guatemalteca de la papa son susceptibles las protenas recombinantes Cry1Aa, Cry1Ac, Cry1B y Cry1C de B. thuringiensis debido a la alta actividad insecticida de estas frente al insecto a pesar que el autor advierte que los resultados obtenidos son promisorios, esta puede ser la base para nuevas investigaciones en el campo de la ingeniera gentica con el fin de obtener cultivos de papas transgnicas resistentes al ataque de la polilla guatemalteca (55).

En los ltimos aos se ha llevado a cabo diferentes investigaciones que promueven la implementacin de papas transgnicas con el fin de minimizar los efectos adversos ocasionados por los insectos plaga; un importante estudio fue realizado en el ao 2007 dicho trabajo el cual tuvo como objetivo la elaboracin de una papa transgnica de la variedad S. tuberosum, estas las plantas contenan un gen de B. thuringiensis denominado cry1Ac, se produjo y se evalu la resistencia de larvas de T. solanivora en tubrculos de 43 lneas transgnicas de las variedades comerciales Dacol Capiro, parda pastusa y pan de azcar que contenan el gen cry1Ac. Dicho gen produca en las plantas una protena insecticida en ensayos biolgicos realizados en larvas de la polilla guatemalteca, en las variedades de papa transgnicas mostraron una mayor mortalidad que los realizados en papas no transgnicas, estos estudios permitieron a los autores dar una nueva expectativa para el control del insecto y contribuir as a la reduccin del uso de insecticidas qumicos (78).A partir de varias investigaciones se ha demostrado que la toxicidad de las protenas Cry hibridas es mayor en comparacin con sus protenas parentales, en el ao 2009 se construy una toxina hibrida SN1917 a partir de dos toxinas parentales (Cry1B y Cry1I, la cual fue probada contra los insectos plaga colombianos T. solanivora que mayormente ataca la papa e Hypothenemus hampei que ataca el caf. Se evaluaron los porcentajes de mortalidad y se demostr que las larvas de H. hampei son resistentes a la toxina, pero en el caso de la T. solanivora se encontr una tasa de mortalidad del 50% CON aproximadamente 350 ng/cm2 de dieta. Por ende los autores despus de un anlisis detallado de los resultados llegaron a la conclusin que SN1917 podra ser una opcin para el control biolgico y el manejo de posible resistencia de la polilla guatemalteca de la papa (17).

La capacidad de B. thuringiensis para producir protenas Cry se ha convertido en una importante herramienta para el control de insectos plaga debido a la gran toxicidad que estas generan sobre dichos organismos susceptibles; en el ao 2009 se llev a cabo un estudio en el que se evalu la actividad toxica de las protenas recombinantes Cry2Aa y Cry2Ab sobre las larvas de primer instar de T. solanivora, se disearon dos parejas de iniciadores para cada gen y se amplificaron mediante PCR a partir de ADN plasmidico de la bacteria, estos se ligaron de forma independiente a un vector de expresin y posteriormente fueron transformados en E. coli cepa TOP10. Despus el ADN plasmdico recombinante se transform en E. coli cepa BL21, donde se emple un inductor de expresin. La presencia de las protenas recombinantes fue detectada con el uso de tiras de inmunodeteccion y finalmente se evalu la eficacia de las protenas recombinantes presentes en el lisado total de E. coli BL21 de las construcciones pET151-cry2Aa y pEt151-cry2Ab sobre las larvas de primer instar de T. solanivora, el objetivo del estudio fue evaluar la eficacia de las protenas recombinantes, este bioensayo genero problemas como es (79). Este bioensayo tiene problemas, hay que describirlo y destacar los inconvenientesAqu hay que introducir un trabajo reciente sobre unas lneas androesteriles contra Tecia (te envio el artculo adjunto) (29)En el ao 2013 se realiz un nuevo trabajo en el que se dio a conocer el efecto de B. thuringiensis frente a la T. solanivora, el bacilo presenta su efectividad respecto al control de plagas gracias a unas protenas denominadas Cry, las cuales al ser ingeridas por un insecto susceptible, forma poros en las clulas intestinales causando la muerte del insecto, los autores recopilaron informacin detallada acerca de los diferentes estudios que se han realizado sobre el efecto del bacilo frente a la polilla guatemalteca de la papa, describiendo la actividad de las toxinas Cry exaltando la importancia de las toxinas Cry1Ac y Cry1B y una toxina hibrida (Cry1B- Cry1I) que presentan una importante mortalidad contra T. solanivora (80).

DISEO METODOLOGICO

Tipo de Investigacin:

Documental descriptivo, ya que a travs del acceso a artculos de diferentes bases de datos se pretende hacer nfasis en la importancia y el efecto del control biolgico de la polilla guatemalteca de la papa mediante microorganismos entomopatogenos.

Universo

Referencias bibliogrficas relacionadas con la implementacin de microorganismos entomopatogenos para el control biolgico de insectos plaga.

Poblacin

Referencias bibliogrficas relacionadas con el control biolgico de T. solanivora. Muestra:

Diferentes bases de datos bibliogrficas relacionadas con el control biolgico de T. solanivora mediante la implementacin de microorganismos entomopatogenos. Pubmed

Science Direct

Biblioteca digital Pontificia Universidad Javeriana.

Redalyc.org

Documentos tcnicos institucionales de Colombia

Base de datos Universidad Nacional de Colombia

Scielo.org

Documentos varios de acceso directo en la web.

Los documentos revisados fueron aceptados por que cumplen con los datos necesarios para ser clasificados bibliogrficamente (Autor, ao, titulo, revista, libro, institucin o editorial, volumen, numero o similares y paginacin).

Hiptesis

Documentos bibliogrficos describiendo la accin de microorganismos entomopatogenos con actividad toxica para T. solanivora permiten la descripcin del estado del arte acerca del control de la plaga. Variables

Variable Independiente:

Tipo de documento

Fecha de publicacin

Pas Revista Tipo de microorganismo Variable Dependiente:

Cantidad de trabajos relacionados con el control biolgico de T. solanivora a travs de microorganismos entomopatogenos. Indicadores:Datos estadsticos de los resultados de la consulta bibliogrfica.

Revisin bibliogrfica:Se consult las bases de datos de Pubmed, Science Direct, Biblioteca digital de la Pontificia Universidad Javeriana, Redalyc.org, documentos tcnicos institucionales de Colombia, Springerlink, Biblioteca digital de la Universidad Nacional de Colombia, Scielo y Documentos varios de acceso directo en la web.

Los artculos fueron descargados en formato pdf, Word y algunos fueron consultados en lnea, adems estos artculos se clasificaron segn el tipo de documento, base de datos, editorial, pas, autor e institucin, en relacin con control biolgico de T. solanivora, a travs de microorganismos entomopatogenos. RESULTADOSA continuacin se presentan los resultados estadsticos de la revisin bibliogrfica realizada para construir este documento. En primer lugar cabe decir que se consultaron un total de 84 fuentes bibliogrficas, de las cuales el mayor porcentaje de fuente consultada son artculos cientficos con un 83.3 % y los documentos consultados de menor porcentaje con 1.10% son pginas web, carta de investigacin y trabajo de grado.

Figura 9. Porcentaje promedio de la clasificacin del tipo de fuente consultada.

En cuanto a las fuentes consultadas se presenta un mayor porcentaje de publicacin para el ao 2010, con un 18.18%, y un porcentaje similar de 1.51% para los aos 1989 a 2014 (Figura 10).

Figura 10. Porcentaje promedio de la distribucin por fecha (aos) de publicacin de las fuentes bibliogrficas consultadas.

Los siguientes datos muestran un alto porcentaje de investigaciones realizadas en Colombia con un 58.80% del total de documentos revisados para la elaboracin de este trabajo (Figura 11).

Figura 11. Porcentaje de estudios por pases donde se han llevado a cabo investigaciones relacionadas con el control biolgico de la polilla guatemalteca de la papa.La revisin bibliogrfica muestra que la categora denominada otros en la que se incluye Revista Biociencias, Neotropical Entomology, Revista RaXimhai y Federation of European Microbiological Societies, el cual representa el mayor porcentaje, con un 48.64%, en comparacin con las otras revistas consultadas (Figura 12).

Figura 12. Revistas cientficas de donde fueron obtenidas las fuentes consultadas.Los datos presentados en la figura 13 muestran un alto porcentaje de trabajos de investigacin enfocados en la utilizacin de bacterias como herramienta para el control biolgico de la polilla guatemalteca de la papa, este porcentaje representa el 52.17% en comparacin con los virus que tambin se utilizan para dicho control, donde estos representan un porcentaje de 47.82%.

Figura 13. Porcentaje de microorganismos utilizados en el control biolgico de T. solanivora.

DISCUSIONLos resultados obtenidos en este trabajo responden a lo que inicialmente se propuso con los objetivos: la revisin de las diferentes fuentes bibliogrficas que estn relacionadas con el control biolgico de T. solanivora utilizando como herramienta biolgica el uso de microorganismos entomopatogenos, y como a travs de estos datos se pudo identificar diferentes puntos importantes en el momento de conocer la situacin actual acerca de los avances en la investigacin con relacin a este tema.En el marco de fuentes bibliogrficas analizadas, tal como lo muestra la Figura 9, se observa el tipo de fuente consultada, y el mayor porcentaje corresponde a artculos cientficos con un 83.3%, seguido de documentos tcnicos con un 10,7%, adems de estas fuentes los datos indican que el tem de tesis de maestra obtuvo un porcentaje de 2.3%, y en menor proporcin se encuentran pginas web, trabajos de grado y carta de investigacin con 1.10%. Estos resultados demuestran que los artculos cientficos representa una de las fuentes de consulta ms confiable al momento de extraer informacin, ya que estos presentan resultados de una investigacin, adems que son presentados de forma clara y precisa, lo cual facilita a los usuarios acceder a este tipo de fuentes como herramienta de consulta. Como se sabe, varios de los artculos consultados para la elaboracin de esta monografa presentan los resultados de la investigacin que se ha realizado en cuanto al control biolgico de la polilla guatemalteca de la papa en diferentes partes del mundo.

El porcentaje de documentos tcnicos revisados en este trabajo representa un valor significativo, ya que al momento de realizar la consulta estos se puede observar que la informacin depositada ah viene respaldada por instituciones que tienen experiencia y que llevan muchos aos de investigacin en el tema, como es el caso de la Federacin Colombiana para la cadena productiva de la papa (Fedepapa), entidad que desde hace varios aos atrs ha generado polticas de bienestar para el sector agropecuario mediante publicaciones tcnicas tales como el acuerdo de competitividad de la cadena agroalimentaria de la papa en Colombia, o la importancia de las plagas y enfermedades de la papa (3,11). Otras instituciones que generaron informacin valiosa para la elaboracin de este estudio fue el ICA, quien lidera investigaciones enmarcadas en el manejo fitosanitario del cultivo de la papa (4), y que aunque tuvieron porcentajes bajos no se pueden considerar insignificantes, ya que estas y otras entidades son una pieza clave al momento de brindar informacin confiable para complementar estudios como este, que necesitan de datos actualizados y corroborar informacin extrada de otras fuentes junto con la que estos documentos proporcionan.En cuanto a los documentos consultados que obtuvieron un porcentaje menor (aproximadamente 1.10%) entre las que se incluye pginas web, carta de investigacin y trabajo de grado, los datos obtenidos no podran generalizar una conclusin universal al decir que estas fuentes son menos consultadas, ya que en otros casos estas fuentes si se tienen en cuenta para la elaboracin de trabajos de investigacin, aunque para nuestro caso no fue una fuente importante.

En la Figura 10 se realiz una distribucin acerca de la fecha en que las fuentes consultadas fueron publicadas, para el ao 2010 se observa que el porcentaje correspondiente a 18.18% es uno de los valores ms altos encontrados en este estudio, se podra decir que este ao fue muy productivo en cuanto a la investigacin de estrategias para combatir T. solanivora, aunque en otros aos se observ un porcentaje menor como es el caso para los aos 1989, 1993, 1997, 2001, 2003 y 2014 (con un porcentaje de 1.51%) no se puede afirmar que en estos aos no se investig, ya que estos datos no abarcan la totalidad de las publicaciones para los aos mencionados, sino un grupo considerable que entro en la realizacin del presente trabajo, aunque si vale la pena resaltar que en los ltimos aos se ha hecho hincapi en los problemas generados por T. solanivora a la papa, adems de la problemtica social que se ha generado en el sector llevando a protestas campesinas, y esto ha conllevado a buscar alternativas para dar solucin a esta problemtica.

Otro aspecto que es muy importante a tener en cuenta es el pas donde ms investigaciones se llevan a cabo acerca del control biolgico de la polilla guatemalteca de la papa. Para obtener estos resultados fue ms complicado que para los otros casos ya que varias de las investigaciones que se realizan en cuanto a esta temtica no pertenecen a un solo autor, sino de un grupo integrado por personas procedentes de varios lugares, por ende se intent distribuir los pases de forma uniforme, aunque varios de estos corresponde a dos y tres pases, los resultados obtenidos muestran un alto porcentaje de investigaciones que se han realizado en Colombia con un 58.80% del total de documentos revisados, con estos datos no estamos diciendo que Colombia es el pas que ms investigacin ha hecho acerca de este tema, pero si aclarar que para la totalidad de nuestras fuentes bibliogrficas para realizar este estudio, Colombia es el pas del cual se han originado estas investigaciones. Un porcentaje menor de 1,47% corresponden investigaciones realizadas en pases como Chile, Brasil, Costa Rica, Argentina, Francia-Colombia, Canad-Colombia, Colombia Japn y Suecia y un grupo denominado otros que incluye Francia, Ecuador, Guatemala, Costa Rica, Venezuela e Islas Canarias. Si observamos estos datos podemos concluir que estos pases, a pesar de su bajo porcentaje en publicaciones, tambin se han interesado por la investigacin acerca de la polilla guatemalteca de papa y su control (47,49).En cuanto a la los datos obtenidos acerca de la revista de publicacin es muy importante mencionar que el mayor porcentaje corresponde a la categora otros entre las que se incluye: Revista Biociencias, Neotropical Entomology, Revista Ra Ximhai, Federation of European Microbiological Societies entre otras con un porcentaje de con un 48.64% seguido por la revista de agronoma colombiana con un porcentaje de 13.51%. Estos datos son importantes, ya que al hacer la comparacin, los datos son altos en cuanto a las publicaciones que se realizan en nuestro pas, si suponemos que la categora otros est integrada por revistas que no superan un mximo de dos publicaciones por tema.

Los datos estadsticos que se muestran en la Figura 13 muestran un alto porcentaje de trabajos de investigacin enfocados en la utilizacin de bacterias como herramienta para el control biolgico de la polilla guatemalteca de la papa, que representa el 52.17% en comparacin con los virus, que aunque tambin se utilizan como herramienta para dicho control, estos representan un porcentaje de 47.82%. Aun as, se conoce que las investigaciones publicadas en cuanto al control de T. solanivora con virus, cada da generan nuevos avances que contribuyen a mejorar las condiciones de los cultivos CONCLUSIONESFALTAN LAS CONCLUSIONES, POR LO MENOS 3 DE ESTAS

BIBLIOGRAFIA

1. Salomn y cols., 2010. Evaluacin de genotipos de papa (Solanum tuberosum L.) para caracteres reproductivos y agronmicos. Revista Cultivos tropicales. 31 (2): 1-3.2. Dane. 2013. Factores de produccin.3. Fedepapa. 2010. Acuerdo de competitividad de la cadena agroalimentaria de la papa en Colombia4. Instituto Colombiano Agropecuario ICA. 2011. Manejo Fitosanitario del cultivo de la papa.5. Bosa y cols., 2005. Evaluacin de la tcnica de la interrupcin de la copula de Tecia solanivora Povolny (Lepidptera: Gelechiidae). Revista Colombiana de entomologa. 31 (2): 1-36. Nava y cols., 2012. Bioplaguicidas: Una opcin para el control biolgico de plagas. Revista Ra Ximhai. 8 (3): 3 pp

7. Gutirrez y cols., 2013. Control biolgico como herramienta sustentable en el manejo de plagas y su uso en el estado de Nayarit, Mxico. Revista Bio Ciencias. 2 (3): 1-6

8. Bosa y cols., 2008. Control de Tecia solanivora (Lepidptera: Gelechiidae) mediante su feromona para la interrupcin del apareamiento. Revista Colombiana de entomologa. 34 (1): 68-75

9. Ruiz y cols. 2008. Toxicidad de -endotoxinas recombinantes de Bacillus thuringiensis sobre larvas de la polilla guatemalteca (Tecia solanivora) (Lepidptera: Gelechiidae). Revista colombiana de biotecnologia. 10 (2): 85-96

10. Correal y cols., 2009. Efecto de la infeccin con granulovirus en el desarrollo Tecia solanivora (Lepidptera: Gelechiidae). Revista facultad nacional de agronoma. 62 (1): 4797-4805.

11. Ministerio de ambiente - Fedepapa. 2004. Gua ambiental para el cultivo de la papa.12. Carpio y cols., 2013. Development of a viral biopesticide for the control of the Guatemala potato tuber moth Tecia solanivora. Journal of Invertebrate Pathology 112 (2013): 184191.13. Alvarado y cols., 1993. Evaluacin de la densidad de trampas de feromona en la captura de la polilla centroamericana de la papa (Tecia solanivora Povolny). Revista Latinoamericana de la papa. 5 (6): 77-78.14. Bejarano y cols., 1997. Respuesta de 10 variedades de papa (solanum tuberosum l.) y 3 hbridos interespecficos al ataque de la polilla (Tecia solanivora povolny), en condiciones de almacenamiento. Revista Agronoma Colombiana. 14 (2). 138-143

15. Castillo y cols., Evaluacin en condiciones de laboratorio de la actividad insecticida de extractos etanolicos de cinco especies de plantas sobre T. solanivora (Lepidptera: Gelechiidae). Revista Agronoma Colombiana. 15 (1): 34 -40.16. Zeddam y cols., 2008. An isometric virus of the potato tuber moth Tecia solanivora (Povolny) (Lepidoptera: Gelechiidae) has a tri-segmented RNA genome. Journal of Invertebrate Pathology. 99: 204211.

17. Lopez y cols., 2009. Activity of Bacillus thuringiensis hybrid protein against a Lepidoptera and a coleopteran pest. Federation of European Microbiological Societies. 302: 93-98.18. Espinel y cols., 2009. Efecto de la infeccin con granulovirus en el desarrollo Tecia solanivora (Lepidptera: Gelechiidae). Revista facultad nacional de agronomia. 62 (1): 4797- 4805.

19. Argotti y cols., 2010. Caracterizacin ecolgica de nematodos entomopatgenos del gnero Heterorhabditis aislados de Tecia solanivora. Laboratorios IASA I. 9 (6): 173-184

20. Loyola y cols., 2010. Evaluacin del contenido de almidn en papas (Solanum tuberosum, sp. Tuberosum cv. Desiree), producidas en forma orgnica y convencional en la provincia de Curico, regin del Maule. IDESIA. 28 (2): 2-321. Conabio. Sistema de informacin de organismos vivos modificados. Solanum tuberosum.22. Jerez y Martin, 2012. Comportamiento del crecimiento y el rendimiento de la variedad de pap (Solanum tuberosum L.) spunta. Revista Cultivos tropicales. 33 (4): 53-54.23. S24. Rodrguez L. Origen y evolucin de la papa cultivada. Una revisin. Revista Agronoma Colombiana. 28 (1): 9-12.25. Salazar y Betancourth, 2009. Evaluacin de extractos de plantas para el manejo de polilla guatemalteca (Tecia solanivora) en cultivos de papa en Nario, Colombia. Revista Agronomia Colombiana. 27 (2): 219-226.26. Domnguez y cols., 2009. Evaluacin del efecto de insecticidas sobre larvas de Tecia solanivora. Agricultura Andina. 17:61-73. (26 Fedepapa.2014 cultivo de la papa)27. Superintendencia de industria y comercio. Cadena productiva de la papa: Diagnostico de libre competencia: 1-4 28. Caracterizacion papa

29. Torres y cols., 2012. Development of transgenic lines from a male-sterile potato variety, with potential resistance to Tecia solanivora Povolny. Revista Agronomia Colombiana.30 (2): 163-171.

30. Cadena y cols., 2005. Evaluacin de la respuesta de 60 genotipos de Solanum phureja (Juz. et Buk.) al ataque de la Polilla guatemalteca (Tecia solanivora Povolny). Revista Agronomia Colombiana. 23 (1): 112-11631. Rodrguez y Moreno., Factores y mecanismos relacionados con la dormancia en tubrculos de papa. Revista Agronoma Colombiana. 28 (2): 2-5 32. Herrera F, 1998. La polilla guatemalteca de la papa: Biologa, comportamiento y prcticas de manejo integrado. Corpoica. 2-9

33. Horgan y cols., 2012. Life histories and fitness of two tuber moth species feeding on native Andean potatoes. Neotropical Entomology. 41: 1-5.

34. Gomez y cols., 2013. Granulovirus formulations efficiently protect store and field potatoes from Phthorimaea operculella and Tecia solanivora in Costa Rica. Revista Bio control. 58: 1-335. Dangles y cols., 2009. Crop damage increases with pest species diversity: evidence from potato tuber moths in the tropical Andes. Journal of applied ecology. 46: 1-5.36. Carreo y cols., 2007. Biotic constraints of the Solanaceae caused by Phytophor