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Técnica de FISHHibridación In Situ Fluorescente
Max CidEstudiante de Tecnología MédicaAyudante de AnatomíaUNAB, Concepción
Profesora Silvana MartínezBiología Molecular y Genética
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¿Que es la Técnica de FISH?
• ADN
• Estructuras anómalas
• “Sonda"
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Características de la Técnica de FISH
• No requiere células en división
• Solo aporta información de la sonda que se utiliza
• Moderado coste económico• Requiere un microscopio de fluorescencia
• Menor tiempo de procesado
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Preparación de la muestra
• a) Generación de ácidos nucleicos marcados para una detecciónsubsecuente.
• b) Fijación de tejidos (seccionados), preparación de cromosomas.
• c) Preparación del tejido para incrementar el acceso del ácido nucleicomarcado.
• d) Hibridación de la sonda marcada en cromosomas o tejidos.
• e) Lavados selectivos que remuevan las sondas que no hibridan.
• f) Detección de la sonda marcada, revelando la localización celular delos ácidos nucleicos.
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Sondas
FISH utiliza tres tipos de sonda
• Sondas específicas de un locus
•
Sondas alfoides o centroméricas
• Sondas para cromosomas completos
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Tipos de FISH
• FISH de Metafase
• FISH de Interface
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• FISH de Metafase
Tipos de FISH
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• FISH de Interface
Tipos de FISH
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Bibliografía
• http://www.terra.com/salud/articulo/html/sal7589.htm
• http://biomodel.uah.es/citogene/dynacare/intfish.htm
• http://www.institutomarques.com/es/reproduccion_asistid
a/infertilidad_masculina/tecnicas_de_estudio/hibridacion _in_situ_fluorescente_fish.html
• http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/hibridacion_in _situ.pdf