//.2GZ UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO

PRECIPITACION EN CAPILAR: UNA NUEVA PPUEBA

SEROLOGICA PARA EL DIAGNOSTICO DE

FIEBRE TIFOIDEA EN NI:ftOS

T E s 1 s OUE PARA OBTERBa BL TITULO DS:

MAESTRO EN CIENCIAS: AREA INFECTOLOGIA

• R E 8 E • T Al

UNAM – Dirección General de Bibliotecas

Tesis Digitales

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Ante ta impo6ibitidad de canta~ en nue6t~o6 pa~4e6 en de6a~~otto con todo6 to4 ~ecu~6o6 11ece6a~io6 pa~a ta e~~a­dicaci6n de ta 6ieb~e ti6oidea, un paliativo e6 hace~ un­diagn64tico en 6o~ma opo~tuna.

E4te pequeño e46ue~zo e6 dedicado a to6 niño6 quiene6 bajo mi ~e6pon6abitidad mldica han 6attecido po~ comptica­cione6 de ta 6ieb~e ti6oidea. E6peciatmente at niño Oavid G6me4 Bauti6ta.

Mlxico, O.F., Ene~o de 19•4.

•PREC1P1TAC10N" EN CAPILAR: UNA NUEVA PRUE6A SEROLOGICA PARA EL OlAGNOSTlCO OE FIEBRE TJFOIOEA EN Nui.os.

T~4b4jO de ~e4i4 que p~e4en~4 et o~. F~4nCi4CO J4u.ie~

Alu4~4do Atem4n 4n~e l4 Oiui4i4n de E4~udio4 Supe~io­~e4 de l4 f4cul~4d de Medicin4 de l4 UNAM, como uno -de lo4 ~equi4.i~o4 p4-ta ob~ene~ el 9~4do de M4e4~·'1.0 en Cienci44 Mld.ic44, e4pec.i4lid4d 1n&ec~ologl4.

OR. JESUS KUMATE R. Je&e de l4 Oiui4i6n de lnmunoqulmic4 Unidad de lnue4~igaci4n B.iomldica, Cen~~o Mldico Nacional ln4~i~u~o Mex.icano del Segu~o Social.

EL p~e4en~e ~~abajo 4e LLev6 a cabo 9~acia4 a La co-­tabo~aci6n de Lo4 V~4. MaximiL4ano Ru~z Ca4~añeda y Je4d4 Kuma~e R., je&e4, del Labo~a~o~4o de Ve4a~~oLlo del Ho4pi­~al 1n&an~4L de Mlxico "Fede~ico G6•e:", y de La Vivi4i6n­de Znmunoqu~m¡ca de la Unidad de Inve4~4gaci6n BiomEd¡ca -deL Cen~~o Mldico Nacional del IMSS, 4e4pec~4va•en~e, a -­quiene4 doy •¡ a9~adecimien~o po~ 4u am44~ad y con&4anza.

Ag~adezco a La S~i~a. Q.S.P. Emilia G6mez y aL S~. M.V.Z. An~onio Ram~4ez V., 4u 4en..tido de compa~e~i4•0 y p~o6e4ionaLi4•0.

\

C O N T E N l , O

1.- TlTUl.0

11.- OBJETIVOS. J

111 • - RESUMEN. • J

IV.- INTROOU~CION • ••••••••••••

V.- PRUEBAS UTll.IZAOAS EN El. OIAGNOSTICO OE l.A FI! BRE Tl FOIOEA. . 5

VI.- ANTECEOENTES. 6

A. - ASPECTOS REl.AClONAOOS CON lt.l:.tUNIOAO HlllORAI... 7 8. - ASPECTOS REl.AClONADCS CON El. ANTlGENO SOMAnco.. 9

Vll.- MATERIAi. Y METOOOS. • • • • • • • • • • • • •• 11

A. - OBTENClON OE 1.0S SUEROS. • • • • ·• • • • ·• I I

8.- CARACTERlSTlCAS OE l.A MUESTRA....... 12

C.- TECNICA OE INMUNIZACION OEI. CONEJO. • • •• 12

l.- FIJACION EN SUPERFICIE (FS). • • • • • . • IJ 2.- PRUEBA lNMUNOENZIMATlCA (El.ISA). • • • • • IS

2.1.- PREPARACION OE 6ACTERIAS INACTIVAOAS CON ACETONA. • • • • • • • • • • • • . • 1 S

2.f.- EXTRACClON OEI. l.IPOPOl.ISACARIOO POR 1.A TECNICA FENOl.-AGUA. • • • • • • • • • •• 16

f.J.- UNION OEI. 1.1POPOl.1SACAR100 A 1.A Pl.ACA. . 16 2.4.- PRIMERA UNION ANTIGENO ANTICUERPO. 11

2.S.- UNION OEI. SEGUNOO ANTICUERPO Al. PRIMERO. 11

2.6.- ACTIVACION OEI. SUBSTRATO. • • • • • • •• 19

J.- HEMOAGLUTINAClON lNOlRECTA • . J.1.- PREPARAClON OEI. ANTIGENO • • J.2.- PREPARACION VE l.OS Gl.OBUl.OS ROJOS OE CA!

NERO • •••.••••••• . .. '

ro ' to

J.J.- SENS181L1ZAC10N OE LOS GLOBULOS RO-JOS OE CARNERO • • f O

f.- PRECJPITACION EN CAPILAR (PCJ. fJ

VIII.- VALORACION ESTA01ST1CA. • • • • • • • • • fJ

JJC. -

J(. -

Xl.-

J(Jl. -

1.- OEF1NICIOHES OE: • • • • • • • • • •• %4 SEHSlBILIOAO. ESPEC1F1C10AO. EFICIEN-CIA. VALOR PRE01CTIVO PARA UH RESULT~ 00 POSITIVO. VALOR PRE01CT1VO PARA UH RESULTAOO NEGATIVO.

RESULTAOOS. . . . . . r.- HEllOAGLUTlNAClOH INOlRECTA (ffAlJ. f.- FJJACJON EN SUPERFICIE I FS). J.- PRUEBA 1NMUNOENZ1 MA T1 CA (fLJSAI. 4.- PREC1PlTAC10N EN CAPILAR IPC).

COMENTARlOS. . . . CONCLUSIONES.

BlBUOGRAFIA.

f5

fS

f5

f6 27

f9

Jf

H

JI. - OBJETIVOS

L4 et4b0~4cldn de un4 nuev4 p~ueba 4e~otdglc4 p4~a -­apOf4~ 4t ct.Cnlco en eL d.é.agn66tlco de La 4leb~e t.é.4olde4, que p~e6ente La6 C4~4cte~L6tlc46 de: 6en6lbiLldad f &6pec±

6i6id4d aLt46, 64clL inte~p~et4ci6n f 6enclLL4 en 6u ~e4L± Z4Cidn.

J I1. - RESUMEN

EL 4ntlgeno utlLiz4da po~ Rulz C46t4ñed4 en 6u p~ueb4

de " Fljacldn en Supe~'lcie ", 4 concen~aci6n, p~&clpita en 6~~m4 inmediata (306&gundo6J, at •ezcL4~6& dent~a de un tubo C4piL4~ con eL 6ue~o p~ovenlente de p4ciente6 con 64! b~e ti6olde4.

E6ta nueva p~u&ba LLa.4d4 d& L~ •, 6e co•p4~6 can L.u p~ueba6 ~&eta ( HAI 1, in•uno&nzl•dtlca en Sup&~6lcle 1 FS J.

• "P~eclpU4cl6n"&n C4p.é.­de: He•oagLutln4c.é.6n ln­

IELISA I f La f.é.j4cldn

La p~u&ba de P~&clp.é.t•cldn &n c4plL4~, •06~6 una 6&~ 6lblLldad f e6pecl,.é.cldad CO•P4~4bL&6 4 L46 d&•'6 f'o'Uebcu, con L4 v&ntaj4 en &L co6to, ~dpld&z f L4 'ac.é.L.é.dad d& LL&­va~& a cabo, p~4ct.é.ca•&llt&, a La cabec&~• d&L &n'&~•o.

1V.· 1HTKOOUCC10H

La 6.C:.e.bJl.e. .t.c'.60.ide.a e.4 una e.n 6e.J1.111e.dad p11.oduc.C:da poll. -­Sah1one.tta .t!lph.c'., un bac.C:to 911.am ne.9a.t.C:vo • •ov.C:t • pe.11..te.ne.­c.C:e.n.te. a ta .tJL.c'.bu Satmone.ttae. de. ta 6a..il.c'.a Ente.11.obac.te.-­Jl..c'.ace.ae.. Pe.11.te.ne.ce. at 911.upo O de. ta cla4.C:6.C:cac.iOn de. Kau66•an - Wh.C:.te. de. la4 4al•one.La4 !/ co•paJL.te. con 96 e.4pe.­c.i.e.4 de. ue. g11.upo Lo4 an.t.Cge.no4 401111f.U.co4 9 • 12. lo4 6Lag!_ Lo4 ccn.t.C:e.ne.n e.t ant.l9e.110 " d "• 1J e.n La 4upe.Jt.6.i.c.C:e. po4e.e._ e.L ant.Cge.no " V.e'. " 1 1 ) •

La 6.i.e.bll.e. .t.C:óo.C:de.a e.4 con4.i.de.J1.ada como un .C:mpoJL.tan.te._ p11.oble.111a de. 4atud p((bt.C:ca, e.4 e.ndl111.C:ca e.n 111ucho4 p4"4e.4 -­e.n de.4a1t.J1.ollo. EL 101 de. La4 .C:n6e.cc.i.one.4 4011 te.ve.4 o 4ub-­cL.Cn.C:ca4.

EL .t.Cp.i.co pa.tJ1.6n e.p.i.de...iol6g.C:co 111ue.4.tJl.a pll.e.do..inan-­c.i.a e.n ta pobtac.i.6n e.4colaJI.. Et ho111b11.e. e.4 e.t J1.e.4e.J1.vo11..C:o -­natuJLat de. S • .t!lph.i.. Et .i.n6cuto .i.n6e.c.tante. SOi e.4 de. 10 1 -

bacte.11..C:a4 PO.JI. rnt.

En nue.4.tJl.o pa.C. La 6.C:e.bll.e. t.c'.60.i.de.a pJl.e.4e.nta te.nde.nc.ia hac.c'.a La d.c'.4rn.i.nuc.i.6n, e.n 1971 La •oJl.talidad 6ul de. 2.3 !/ -

La •011.biLidad de. 4.1 poli. 100,000 hab.c'.~ante.4. En 1912 •e. JI.~

poJ1.ta11.on 6•101 ca4o4 e.n toda La Jl.e.pllbL.icct 121.

La pll.e.4e.nc.C:a de. pac.i.e.nte.4 convale.4c.C:e.nte.4 !/ cJ1.6n.c'.co4, ta e.Jt.c'.4.te.nc.C:a de. •ane.jadoJLe.4 de. at4•e.nto4 poJ1.tadoJ1.e.6, La -ocuJ1.J1.e.nc.C:a de. e.p.C:de...C:a4 poli. S. tf1Phi Jl.&4.c'.4.te....te.4 a cLoJl.a~

6e.n.C:cot • !/ La caJl.acte......C4t.C:ca de.t bac.C:to efe. pe.J1.-ne.ce.J1. via­ble. e.n e.t 4ue.to 6 e.n to4 de.p64.ito4 de. agua dUJl.ante. 4&.Cna4, pe.JL..C:te. que. e.n Ml•.C:co 1J e.n otJ1.06 pa.C4e.4 con 4Ane.a..C:ento ·~ bie.ntal de.6.C:c.i.e.nte., p11e.4e.nte. d.iclia e.n6e.J1.•e.dad, caJ1.acte.11.l4-t.ica6 e.ndl•ico - e.p.idl111.C:ca4 1 3, 4, 5 ).

TESIS cea FALLA DE ORIGEN

V.- PRUEBAS UTHJZAPAS EN EL 01AGUOST1CO PE LA FU:óRt

'J'.JFOJPEA

La .i.n,e.cc.i.4n poil S. ~fpiu: e.11 e.t ho•b!le.. da o....Cge.11 a -~Jl4ul6 de. 6u6 an~.Cge.1106 6o•tf.t..i.co6 9. 12 y de Ju 4Jtacc.i.6n -'t•se.t~ • d •. 4 ta 'ºilll4c.i.6n de. •nt.i.cue.Jtpo6. LA de.te.c--­ci6n 1J cwr.nt.i.6.i.cAc.i.611 de. to~ IU.Jú.9.i.do6 co~Jl4 et 4~.Cge.110_ 601114.t.i.co • O •. 6011 de. un 9il411 uato!l co•o •e.dio paila e.6ta­bte.ce.Jl un d.i.a91166t.i.co de p!lobAbit.i.dad 1J de. .i.n.i.cia'l u11a te.­'l«p.i.a «ft.t..i•.i.cilob.i.a11a, ante.6 de. ta con4.i.Jt.aci6n bacte.Jl.i.ot6-9.i.c4.

La6 pJtueba6 de agtu.t.inac.i.611 co110 ta de W.i.dat ut.i.l.i.z4-da6 dude 1' 96 1J 6 U6 111odi4.i.cac.i.one.a han a.ido ta6 11tfa e.11- -pteadaa 1 6 J. 0tJta6 tlc11.i.caa de. 11ar¡o'l ae.116.i.b.i.l.i.dad co•o: ta dete.cc.i.611 de. ant.i.cue.Jlpoa .i.11co11ptetoa po'l 111ed.i.o de.t lle.a~

t.i.uo de Coo111b6 que 111uu.tJta11 .Ca pJte.aenc.i.a de. a11t.i.cue.Jtpo6 110 a9.Cu.t.i.11ante6 aaociadoa a to•.a9tu.t.i.na11.te.6 cttf6.i.co6 ( 7 J. La6 tlcn.i.caa de. he.111oa9tu.t.i.11ac.i.611 IJ 6u6 d.i.ueJl6a6 ua.ll.i.ante.6. u.t.i.t.i.zan eJt.é..t'loc.é..to6 con a11.t.C9e.1106 bacte.Jt.i.ano6 ad6oJtb.i.do6 en 6u aupe.Jt6.i.c.é.e: e.n e.ate ca6o t.i.popot.i.6ac4Jt.i.do6 cJludo6 1 a. 9, 10. 11 J. La p.llue.ba de Tat11a9e 1J FJte.te.Jt. que con--6.i.6.te. en u.11« .i.11h..i.b.i.c.i.611 de. la co11b.i.nac.i.6n; to6 an.ticue.Jtpo6 de.t Jue.Jto p.llobte11a co111p.é..te.11 co11 lo• 4n.t.i.cue.Jtpo6 11~cadoa -1tad.i.oactiua11e.n.te, la ..agn.i.tud de.t e.4e.cto btoque.AdoJt •e. 111.i.­

de con un contadoJt de. "ª"º' 9a•111a IJ e.t ctftcuto de un.i.dade6 Jc 1tcal.i.:a e.n la zcna t.i.ne.at at SOi ( 12 J. La p'lueba de. -F.i.jaciSn cn Supe.Jt6.ic.i.e. de RuCz - Ca6tañe.d4, con la que. •e puede dc1106tU·' e.11 60Jt111« c_ape.c.C&.i.ca anticue.tpo6 de •u!I ua­.tútda lndolc '"cdiante. ta acci6n de.t ~ ue.Jto 6i• .i.ot69.i.co 'º -b'c '"c:cCa6 de antlge.110 a11ticuc11po ( 13. 14 J. la cont!la.i.!!. 111rnccil?ct1tcác'C6 i.6 1 ClE 1 en donde. ta cotocac.i.611 det llP!!. ~·••tia11ctf11idc• 1 LPS J 1J del auc11n p11obtu1a en d.i.tuc.i.011e6. -

!

'

en po6iClo6 de placa de a9a~o6a a un 1 pH J alcalino, al -paaa~ una co~~ientc ctlct~ica, la6 p~otctna4 ca~gada6 neg! tiva•cntc cmig~an hacia et 4nodo, 60~.ando a~co6 de p~eci­pitaci6n al c6cctua~ae Ca •-.ncci6n anttgcnc anticue~po 1 15 J. Reciente•entc ae ha deac~ito una p~ueba in•unoen­

zi•4tica 1 ~nzymc !inked !~•1L110 !o~bent !aaay J pa~a ta detccci6n de anticuc~poa ~l~icoa tipo JgG d~9idoa cont~a et LPS cxt~aido de S. tvphi. La p~ueba depend~ de que un -antt9cno, en cate caao et LPS adao~bido a una placa de po­lieati~cno pueda ac~ ~cconocido po~ et anticue~po del pa-­cicntc. Un ~c9undo anticuc~po p~oducido en ot~a eapecie animal conjugado a una enzima, ~cconoce al P~•~ anticuci

po y que al adiciona~ el aubat~ato el coto~ que ae 'º-•e -ae pueda vato~a~ ya aca viaual.•ente, coto~mct~ica•ente e eapcct~o6otomc.:t~icamcntc 1 16, 11 J.

~cbido a que la p~oducci6n de anticue~poa ante la a9~caidn bacte~iana no ca in•ediata aino que ae inicia au p~oducci6n a nivclca cuanti6icablca al quinto dta ap-oxi•! da•entc, una p~opo~ci6n i•po~ante de la4 tlcnicaa ta~o -de la Mic-obiologta e 1nmunotogta contc•po-4ne44 ae baaan en ta dc.:tecci6n de anttgenoa en toa p-i•e~oa dtaa ne ta -evotuci6n de la cn'e~•edad. En et c46o de la 6ieb-e ti6oi­dea, la p~ueba de coaglutinacidn ut4liza StapkrtococcU6 -!.!!!!.!!!. Cowan 1, cuya p-otetna A une et Fe 1 ,_a9•e...to c-i! talizable 1 de taa JgG. La auapenai4n de s. au-eU6 cubie-­to con ant4cue~po6 cont-a s. trpki ae ka utilizado pa-a d~ tecta- anttgenoa en o-ina r hecea I rl, r9 J. Ta•b¿f• ae -ka ut4lizado, la inkibici6n de la kemoa9lu.tinaciln 1 ro J.

v.- ANTECEOENTES

7

e.•tlitica poit lo• ctlnico6 6itance.•e.• de.4de. lo• inicio• de.t •tglo XIX. lite.tonne.au v Cho•e.l de.•c ... ibie.iton ta• le.•ione.• -anat6ac'.c••• 11.e.conocte.ndo ta• s-ue.4 co•Pticacione.4 co•o ta p~'o4&ci6n intutinat. Pie.11..._e. Loui• e.•tud.é.6 lo• de.t•tle.• liutot.6gic04 de. 151 pacie.ntu. duc ... ibi6 la• te.•ionu del inte.•tino. ganglio• v bazo. W.c:t.l.lo.• Wood Ge.41ia.._d de. Fita­d&t,i•. hizo ta p.._¿.~4 di6e.ite.nciaci6n e.fttite. e.t ti6o v ta 'ie.b.._e. ti6oide.a. En ta •.i.Cad del 4igto XIX W.c:t.tia• ludd. -•ugi ... i6 que. ta e.n6e. ... •e.dad 6e. t-Uac:.t.C4 po.._ .t46 " dUc4Jl-­g44 iftte.4tinale.6 •. En rttO Ebe.....C duc ... ibi6 el bacilo ti-­'oLdico e.n co ... te.6 li.i.6tot6g.i.co• de. 9an9t.io• •e.6e.fttl.._ico6 V b4zo. apite.ciando l4 .toc4tiz4ci6n iftt ... ace.lula.... P6e.i6,e.it e.n ftt4 lo auttf po4 p.._iMe.4a OC44i6n de. l44 he.ce.4.

Lo6 •.i.6te.4.i.06 6e. ... o.t6g.i.co6 CO•e.nza40ll a &'tCla ... a!tJe. CU4,!!. do P6e..i.66e.4 V Kotte. mo6~4Jl.011 que. e.t 6ue..._a de. P4c.i.e.nte.6 conuate.6c.i.e.nte.6 p4ote.gl4 a cob4yo• cont~4 do•i• te.tate.• -­de. bac..é.to• t.i.6old.i.ca6, e.6to6 w cue.4po4 p4ate.cto ... e.6 " 6ue.­iton de.•o•tit4do6 e.n e.t ho•blle. once. d.Cu dupul• de. ta .i.noc.!! l4c.i.6n de. b4cte.it.i.46 mue.11.t••· Si•ult4ne.4•e.nte. ~4ube.4 v OU4h•• Jte.po ... ta ... on que. e.t •ue..._o de. cob4UO• .i.n•unizado6 •e.z­ct4da4 con bacte..._.i.46, p4aducl4 ta plitdid4 de. •Ouit.i.dad V -l4 unitfn 6011.••ndo w agtutini••• •. En e.t •i••o affo de. rt9~ Widat affadi6 •ue.4o de. p4cie.ntu e.•,e.it•o• a cultivo• de. S. t11phi e.n ditucione.6 4e. ... i«d44. e.ncont4ando 49lut.inaci6n_ de.•pul• de. 24 h46. de. incub4ci6n 1 rr 1.

Vl.-A.- ASPECTOS RELACIONAOOS CON INMUNIOAO HUMORAL

L4 .. foit paitte. de. to• anticue.itpo• pitoducido• co•o 4&!, pue.•ta a lo• antL9e.no• 6ollitico• de. S. t,,Phi e.•tan conte.nf

•

do4 en ta 6Jt.acci6n ga••a de ta• gtobulina4 19S ( Unidade4 Svedbe!l de 4edimentacidn 1 en et conejo. fnde!l.4 en 1944 Jt.epo!l.td que ca4C todo• to4 anticucJt.po6 anti • O • 1 6om4tf co4 J 6e cncontJt.aban en ta 6Jt.accidn III-I de Cohn at e4tu­dia!I. et pla41114.Pike habCa ob4e!l.vado que ta inyeccidn Sube~ t4nea en lo6 cojinete6 ptanta!l.e4 de io6 conejo• pu..itCa -66to la p!l.oduccidn de macJt.ogtobulina4 195 con p!l.oduccidn -!!.educida de 1s. to que cob1cid.i6 con lo5pattu.to en 1962 al e6tudia!I. 6ueJt.o6 de lactante•. e6cota!le6 !{ adulto•. encon­tJt.ando agtut.in.ina4 19S exctu4ivamen.te ( 22. 23 ).

lo.6 cone."jo6 in•un.izado.6 con S • .C!iphi mueua con acet.!!_ na y tJt.atado e.t ./iueJt.o po!I. medio de tevigacidn con OEA ( cJt.omatogJt.a6Ca de inte.Jt.cambio i61l.ico 1 !{ tJt.atamiento con me!l.captoetanot ( de.6tJt.uccidn de gJt.upo6 .6ut6.ih.idJt.ito6 1 •o~ tJt.6 la pJt.oducci6n de. amba4 agtu..tinina4 con apa!l..C:c.i6n te.m-­pJt.ana· de 195 •e.guida de 15 e.n 6oJt.ma lenta !{ me.no• .inten6a. Lo.6 conejo• inye.ctado.6 po!I. vla intJt.ave.no4a pJt.odujeJt.on ma-­!{o!I. cantidad de 75 ( 24 l.

At e.6tud.ia!I. la !l.e.6pue.6ta en ni~o4 pJt.e•atuJt.06 inmun.iz~ do6 at nacillliento po!I. vea intJt.a•u6cutaJt. con una vacuna OY A y B 1 m.it mittone6 de s. tvphi po!I. •t. !f fSO mittone6 de s. pa!l.at!fphi A!{ B/mt l. 19 •ue!l.06 de to4 43 .inmun.izado•. mo4t!l.a!l.on aglut.in.C:na6 a uno o 11146 de to6 antCgeno•. todo• del tipo 1S. N.inguno p!1.e6ent6 enticue!lpo6 tJt.an6,e!l..ido4 •a­te!l.nat•ente. paJt.a el antegeno " O •. no 6e p!le6ent6 una JI.e~

pue6ta adecuada en ta p!!.oducci6n de ant.icueJt.po6 paJt.a antc­geno • O •. S6to uno de cada cuat!l.o n.iio6 .in•unizado• Jt.e6-pondi6 con tetuto6 cuant.C:6.C:cabte6. ta• agte&t.ln.ina6 anti • O "• 6ue!lon 6.C:e•p!le det t.C:po 19S y a tltuto• 6.ie•p!le ba­jo• ( 25 J. En votuntaJt..io4 ftu.cno6. ut.it.izando una vacuna oJt.at con S. t11ph.i •ue!l.ta po!I. c:Al.o.t ( 109 o.\gan.C:6•06 po.\ lll 1 mo6t!l.6 ta p!1.oducc.C:6n de anticueJt.po• ant.C:,tagelo6 al 6exto dla. anti - antlgeno4 6om4t.C:co6 al onceavo dlr. po6teJt.io!I. -

9

A tA in•uniz«ci6n, con tttulo6 e.l.e.u«d06 cont.._A • O • At -­t ... e.iftt«uo dtA. 1 26 1 Ro6en en J967 ob6e. ... u6 t« p ... oducci4n de lgG o 6eA t« ll«1t11d« ante~o ... •e.nte. 7S, e JgM ttA1t11dA rts. e JgA, cont ... « • o • en ... e6pue.6t« 4 e.6ti•ul.o6 de S. t•tplti iftt ... 4ueno64 1 t1 J. L4 •.c'..4- ob6e. ... u4cid'11 '"e lteclt4 po" Clte."nokltuo6tou4 1 t• l. Ku•4"- "e.po ... t4 un e6tuc:Li.o .iu1unot6'9ico que co11p ... e11did' 4de.ll46 de. la6 .i1111u1109tobut.i1146; co11pte11e.nto 1 C3 l. inlt.ib.ic.i611 de t4 11i9"4c.i611 de. to6 te.u­co6.i.to6 ( IML l. t4nto en p4c.ie.llte6 co11 '.ie.b"e. t.i6oide.4 -­co110 e.11 u4cu11ado6, 45 pAcie11te.6 con cultivo po6.i.tiuo, to­do• P"Ue.llt4"011 et inicio u11 4ume.11to 6i911.i,ic4tiuo de JGM y de6pul6 de tA te. ... ce.._a 6e.114114 de. lgG co11 u114 bue114 co""e.­tAci611 de. anti " H • ( 6t4ge.l.4 ... e6 1 con 411t.i • o •. 1 t9 1 Ku114te. e11 1962 uato.._6 LA "e6pue.6t4 e.11 11iR06 en 60"-11« 6e"-.i~

da Pº" 11edio de t46 P"-Ue.b46 de Coo11b, lte11049tutinAc.i6n, Agtutin4ci6n Pº" Widal, 6ijAc.i6n en 6upe ... ,.ic.ie. y t4 P"-ueb4 de TAt1149e, e.11cont ... ando que to6 11.iño6 de6nut ... ido6 4ument4-"ºn to6 Ant.icue ... po6 .inco11pteto6 e.11 co11pa ... 4c.i6n a to6 n.iño6 eut"-6'&.ico6. Lo4 e4tud.io6 6e ... ot6'g.ico6 c4 ... e.c.ie."º" de. uato~ -Pª"-ª cAt.ib.._a ... LA magn.l.tud de l4 .in6e.cc.i611, l4 euotuc.i6'n -de la m.i4ma o p4 ... 4 P"-eve~ tUl4 co11pt.ic4c.i611. Fue co11an en-­cont ... a" euotuc.ione4 " no ... _te.6 • de LA e11'e. ... 11ed4d en p"e--6 enc.ia de. n.iuete6 bajo6 de agtut.in.ina6 o po.._ et co11t.._a~o ... eca.id46 con tCtuto6 ete.u4do6 de e.606 a11t.icue ... po6. ( 30 1

VI.-B.- ASPECTOS RELACZONAVOS CON EL ANTIGENO • O•

Et antCgcno 4om4t.ico " O " &0~114 pa ... te. con6t.itut.iu4 -,fe. l4 C6t ... uctu"-4 11Ac ... 0111ote.cul4-' e.11 t4 po ... c.i6n e1tte""ª de. -ta pa ... cd bactc ... .iana de s. t9pl1.i. f6 un co11ptejo co11puuto Pº"-' Pot.i•ac«-'.ido C6pect6.ico O, ttp.ido y P"otetna. Puede -

"

6e11. ai6lado po11. ua11.io6 mltodo6, Hoiuin. ext11.ajo el co•ptc­jo po11. mediC' de <fcido .t11.iclo11.oact.tico, "odi5icacione.6 a 6u .clcnica 6ue11.011 l1ec/1a6 poll.• lrlalte11. T. J. ato11.9an en Londll.e6 y Walthe11. F. Goebel en Nueva Yo-k ( 31 J. 0.t-a6 tlcnica6 -6on ta de f.'l.ee•an y 6u modi6icacid'n po11. S.taub ( 32 • 33 J El mttodo m<f6 empleado ha 6ido el de We6.tphal y Lade11.itz -4u.iene6 en 1952 u.tiliza11.on 6enot - agua; e11 e6ta 6011.ma et LPS queda p11.ac.ticamen.te tib11.e de p11.o.te,na. La .tlcnica m~6

11.e.c.ien.te ha 6ido la de Galano6 con eu11.accid'n nenol - clo-11.o 6011.mo - i.te.11. de pe.C11.d'leo pa11.a calo11.la6 11.~906a6. IJ4J

f6.te complejo lipopoli4aca11.idico de alto pe6o molecu­la11. • .tiene ac.tiuidade6 ca11.ac.te.11..l4tica6. En lo6 animale6 6~ pe.11.io11.e6 y en el homb11.e a do6i6 de 0.0001 a 0.01 mg/Y.g pll.~

duce ent11.e otll.a6 co6a6• 6ieb11.e. ca•bio6 en el name11.o de -­teucoci.to6. aumento de ho11.mona6 y enzima6. e4timulacid'n de la 6agocito6i6 y de ot11.06 mecani6mo6 de de6en6a. A do6i6 -alta6 pll.ovoca to6 6end'meno6 de Shwa11.tzman y nec11.06i6 de .t~ mo11.e6. Oebido a e6.ta6 p11.opiedade6 el comp~ejo e6 tlamado -endo.toxina. palab11.a acuñada po11. P6e.i66e11. al ob6e11.ua11. que -et vib11.id'n del cd'le11.a. adem46 de ta toxina exc11.etada en et medio de cu..t.tivo llamada exotoxina p11.oduc'a o.t11.a d46e.11.en.te. que pe11.•anec'a unida a la palled de. t.a bac.teua. Toda6 ta6 ente11.obac.te11.iacea6 y la mayo~a de lo6 ge.11.•e.ne.6 911.a• nega­tivo6 p11.oduce.n endotoxina4.

La6 p11.opiedade6 anti9lnica6 y .t.a6 endo.t~xica6 e.4.tan -e4tll.e.chamente 11.el.acionada6. aunque. ta6 e.6t11.uc.tu11.44 11.e.6pon-4abt.e6 de la e6peci6ic.idad antiglnica 4e. pueden dia.tingu.ill.. de ta6 11.e6pon6able6 de la actividad e.ndot4xic•. 6e con.t.i-­naan u.tilizando como 6.ind'ni•o6.

El lPS e.4.t4 con6t.i.tuido po11. .tll.e.6 11.e.gione.6 di6.t.int46• 1.- Una po11.cid'n e.xte11.na o cadena late.11.at e6pe.c~6ica O, con6tituida poll. la polime11.izacid'n de un oti906ac411.ido de. -

"

TESIS CON '' FALLA DE ORIGEN

bcae, con u11.(.011ea 9Licoatdicca p11.opica e cada et.pe, '011.-­•cftdo unidadea de 11.epe.t.ic.i.6". En ea.te polL•e11.o ae Locali-­zc" Loa 'ªc~o11.ea c11.ti9l11.icoa • O •. f.- Una -'l.f.9.i.611 ce11--­.t.t.4L 'º-'l-dll po11. un nucLeo b.ucl f t.L ltpido A. J.- El lLpido A u ¿e pc-'l.tf. an.ti9enicc•en.te 9146 i•po-'l.tcn.Ce de le •oLlcuLc, co"a.tUu..é.do po-'I. W1 e6queLeto de di9lucoac&é."c6 -unidcu. en.t11.e at po-'I. puentea p.éA.o'ºª'C.Co, cadc 9-'lupo cmi"c­do ea.CIC auba.tUuido poi!. un llc..úlo be.te la.i.dlt.0U.111i-'l.U.C.ico e -.t.t.cvla de WICI u".i.6" crn.i.dc f Loa 9-'l.upoa la..é.d-'l.oit.iLo auba.tUu.i doa po-'I. 4c.idoa 9-'1.46 oa con uft.io11ea Ü.tt.-'l. EL .tl-'l•ino put.dt. -6f.-'I. u.t.iL.izado pCl-'l.a aeilcLc-'1. t.L co•po11en.te lLp.id.ico de le "'!. LlcuLc dt.l LPS, •it.ft.t.\46 eL Uc-do l.ip. A " L.ib-'1.t. • 6f. 11..!_

'iue cL a.iaLado pOJt. h.id.11.SL.ia.U. lle.id•. 1 35 1

Hace •46 de 25 añoa ae daba ta dt.6.i9"ac.id11 de L.ip. A

al p-'l.ec.ip.i.tado l.ipold.ico qut. ae '01t.111C1ba dt.apula deL .t11.a.ta­•ien.to del LPS con lle.ido. Ea Le pa.11..te •t.noa uclt..icbLe del -LPS, a.C:endo cona.tan.te paJt.a tu E11.te11.obcc.tf.-'1..i.ccect._. G•e.i.11e-'I. f cota., e11 1969 de•o6.t1t.a-'l.011 po-'I. p-'l..i.•e-'l• oc46.i6" que te -­ea.t11.uc.tu11.c del L.ip. A e6.tcba 'ºJt.••d• po-'I. 0-9tucoaa•.ina con u11.io11ea 8 I', 6' f 11.ea.iduo6 de 'ºª'e.to t.11 poa.ic.i.611 t,4, con u11.ione6 am.id46 a dc.idoa 91t.a606 d-J h.i.d11.ox.f.t.ico6. En -­aat•oneta f.l gil.upo h.id11.ox.iLo en CJ 1t.ep11.eaen.ta el pun.to de u11.idn de ta- pCl-'l..tf. pot.iaaca-'1.td.ica dt. Le •otlculc. En 11.eau-­•e" el l.ip. A ea un d.iaaca-'l..ido l.ipold.ico ace.t.iLado.

Vll.- MATERIAL V METOOOS

VJJ.-A.- OBTENClON PE LOS SUEROS.- Se ea.tudia11.o" 75 -aue11.oa p11.oue11.it.11.tea de pcc.i.e11.tea con cuad11.o c¿l11ico·y dia4 n6at.ico bac.te11.iot69.ico de '4eb1t.t. .ti,oidea. OeL to~aL de --

TESIS cr FALLA DE ORIGEN /

Jl.U!.llOJ, 20 de elloJ 6ue.Jton p11.opo.1tc.é.on11doJ po.\ M1.11ioz 1J 6u -911.upo de l11 1Uv.é.J.é.c1n de. lnuu.t.é.911c.é.6n en E116e.11.11ed11du ln--

6e.cc.é.oJa4 de.l Ho6p.é..t11l de Ped.é.11.t.1t.l11 del Cen.t.\o Ml.d.é.co Na- -c.é.011aL del lMSS. Lo6 11.e1>.t11n.teJ Je ob.tuv.é.e.1tc11 del Ve.paJt.ta­me.n.to de Pe.d.é.a.t.ll.la de.t. HoJp.é..tal. de. 1116e.c.toto9.la de.l. Cen.tJto Ml.d.é.co "La Raz11" del IMSS. LoJ 6ue.JtoJ Je. gua.1tda.1ton en al.f cuo.ta6 de 0.200 11l 11 me.no6 de 2o•c h116.t11 Ju u.t.é.l.é.z11c.é.6n en el. labo.1t11.to11..é.o.

V 11. -B .. - CARACTER l STl CAS VE LA MUESTRA. - Ve l.01> 7 5 - -1>ue..1to6 Jc1lo en 67 6e ob.tuv.é.e.Jton lo6 d11.to6 .1telac.é.on11do6 con La .toma de. la mue1>.t.1ta, en J1.el11c.é.4n 11 ta e.voluc.é.6n de. la e.~

6 e..1tme.d11d .tomando e.11 cue.n.ta ta 6.é.ebJte. come 6.é.9110 ca11.11c.te.1t.l! .t.é.co. Ve Lo6 67 c11601> e.n que. 6e. ob.tuv.é.e11.on to6 da.to6, 21 -( 41.81 1 pe.1t.te.nec.é.e.1ton 11l. 6exo áe.me.n.é.no, 39 ( 51.21 1 at ma6cu~.é.no. L11 e.d11d comp.llend.é.6 de. 2 a 16 11íloJ d.é.1>.t11..é.bu.é.do1> e.n p.lle.-ucol.11.1te.6 h11J.t11 lol> S 11ño1>, 11 c11Jo1> ( 16.411, uco­taJte.6 ha6.ta l.ol> 12 11ño6, 41 caJoJ (61.211 11 11doteJce.n.teJ -ha6.ta l.01> 16 11ñoJ, IS c111>0J (22.411. En 11.e.l.11c.é.c1n a l.11 1>e-11ana de. evotuc.é.c1n 11p11.1te.n.te. en que. 1>e. .tomc1 l.11 mue.6.tJt.a; p11..é.-111e.J1.a be.mana, 7 caJoJ ( 10.411, 6e9und11 6em4n4, 24 C4606 (3611, .te.Jt.ceJl.4 6e11ana, 30 ca6o6 144.711, cu4Jt..t4 6e•4n4, 4-caJoJ (611 11 qu.é.n.ta Je.11111na, t C4406 1311. Lo que. concue.11.­da con .é.n911.e1>06 a Ho6p.é..tal.e6 de .te.11.ce.11. n.é.ve.l., con l.4 11a110-11..la de. c11606 en ta 1>e.gunda 11 .te.11.ce.11.a 6e.11111111 de e.vol.uc.é.6n.

Vll.-C.- lNMUNlZAClON VE CONEJOS PARA LOS CONTROLES -POSITIVOS.- lo6 .te.6.t.i.906 po6.é..t.i.uo6 p11J1.11 l.a6 p11.ue.b116 de.: -­"6.é.j11c.é.611" en 6upe.11.4.é.c.é.e. IFSI, he.•o49lu.t.é.1111c.é.611 .é.11d.é.J1.ec.t11-I HAl 1 y de "p11.e.c.é.p.é..t11c.é.c1n" e.11 c4p.é.l.a11. 1PC1 4 e.:r&e.pc.é.611 de. ta pJt.ue.ba .é.1111u11oe.11z.é.m4.t.é.c11 1 ELlSA 1 6e tte.u411.on 4 c11bo con 6ueJt.o de. ~one.jo h.é.pe..1t.é.1111u11e.. Una 6U6pe116.é.611 de. bac.te.-11..é.116 de. S • .typh.é. 0-901 .é.11ac.t.é.v11da6 poJt. c4to11. a 1oo•c du-11.11n.te. do6 h.ll6. • a un11 conce.11.t11.ac.é.611 de. t 1109 poll. •l.• 6e .é..!!.

13

TESIS CON F'.AJ..LA DE ORIGF.N

ye.ct4 a conl.J04 •acho6 Nue.va ltlanda de. tite.• ~~- de. pe.•o y

de. acue.itdo con e.l c•qut•a 4iguie.nte.:Pit.i.•tlla .i.n•unlz&c.i.4n.­Poit v.La lntitave.no•a: pit.i.•tll d.La O. 5 .i. • te.itcu d.La 1. o 111., quinto d.Ca. %.O~ •• •tptl•o d.la %.O .t .• nove.no 2.0 .t .• -once.avo %.O lllL, ite.po6o de. ocho d.Ca.• y a.L 11a.vo d.La. •a.ngita­do poit puncl4n caitd.i.aca. Segunda. .i.nmun.i.zacl4n.- Poit v.(a --6ubcu.t4ne.a.: pitlme.it d.Ca 0.5 .t. te.itce.it d.Ca 1.0 lllL, quinto -d.Ca. 1.U ..t, Lue.go poit v.La ln~a.ve.no•a.• •lpt.i.mo d.La. 1.0 .t, nove.no d.Ca. 2.0 .t. oncta.vo d.Ca 2.0 mt, 41.gu.i.do de. un ite.po-40 dt I d.Ca• y •angita.do poit punc.i.4n ca.itd.La.ca.. Re.po6o de. "" •t6. Te.itce.ita. ln•un.i.zacl4n.- EL ~••o e.•que..a de. La •1.gunda. Con tl 6Utllo 1.x.titaldo •e. Le. pita.ct.i.c4 una cuitua de. pittclp.i.­tac.i.4n con.tita poL~ac4itldo Fitte.•a.n de. La tlcnlca mod.i.6lca.­da. poit Staub 1 32, 33 l. e.L cual 4ue. pitopoitclona.do poit 16.i.ba•i de.l Laboita.toll.i.o de. Ca.itbohlditato• de. La. O.i.v.i.•.i.4n de. Jnmunoqütmlca, de. La Unidad de. Jnue.•t.i.gac.i.4n B.i.o•ld.i.ca de.L CMN de.L JMSS. Uno de. Lo• cene.jo• •aitcado con e.t No. 149

éue. e.L •e.Le.cc.i.onado, con 135 ug de. pitottlna/mt.

La• cua.tito pitue.ba• ut.i.L.i.zadiu e.n tL titabajo éue.iton:

Vll.1.- FlJACJON EN SUPERFICIE

E• una pitue.ba ll4p.i.da que. ite.•ul.ta. de. La me.zeta de. •ue.­Jlo •.in d.i.Lu.i.it, con ant.Lge.no• conce.ntitado•, cuyo• ite.6ulta-­do• pue.de.11 ob.&e.itvait•e. .inMe.d.i.ata•e.nte..

Et ant.Cge.no óue. pite.paitado e.n et Laboitatoit.i.o de Oua-­H.oL(o del Ho•p.i.tal 1n6ant.i.L de. Mllt.i.co " Fe.de.it.i.co Gi1mez ". Una cepa de. S. typlt.i. •t•bitada e.11 bote.LLa.• de. Roux, co•e.ch!!. da a t11.• 24 hit• con 4otuc.i611 de. cloituito de. •od.i.o 0.191 a -50 ml poll botella de. Roux. Se. agite.ga azul de. te.tita.zol.i.o --

,,

1 NutJ1..it.io11al Co1tp. 1 a 200 rng., poit t.it1to de. auapeiu.id'n -bacte.J1..iana ag.i.tando polt 12 l1J1.a., ae. lavd' .t1te.6 vece.6 aon 62_ luc.id'n de. clo1tu1to de. aod.io 0.&91 a 3000 1tprn, ae. 6u6pe.nd.i6 con alcohol abaotu.to volumen a volumen po1t 4& hita., ae. 60~

mal.in.iza con 601tmot a!. 371 du1tan.te. 41 - 72 h1t6, Se. lava con agua dea.t.i.lada 3 ve.ce.4 a 3000 1tpm., 6e. me.zeta con 6a­ca1to6~ p1tev.i.arne.n.te putve1t.izada a can.t.idad .igual e.n un mo1t­.te.1to. 1 11, 19 1 Se .i.mp1t.i.m.id' e.n pape.l 6.i.l.t1to de.janda man-­cha6 c.i.1tcula1te4 a una d.i.4.tanc.i.a de. o.s cm de.l bo1tde. .i.n6e.--1t.i.01t de.l papel e.l cual e.6 manu6ac.tu1tado po1t J. C. 8.i.nze.1t -Ha.tz6e.ld, Ede.1t Ale.man.ia, rna1tcado con la cal.i.dad O.P., 4e. -p1topo1tc.iond' pa1ta e.l t1tabajo e.n .t.i.1ta6 de. papel de. IZ po1t 14 cm con 10 rnancha6 de. an,t,Cge.no. Se. coloc6 una 90.ta de.l -6ue.1to p1tobLema 6ob1te. la mancha an.t.i.gln.i.ca, dejando e.l pa-­pe.l e.n &o1tma ve.1t.t.i.cal, pe.1tm.i..t.i.e.ndo que. e.t bo1tde. .i.n&e.1t.i.01t -.toma1ta con.tac.to con una 6oluc.i.d'n de. clo1tWto de 6od.i.a al o.ast la cual a6cend.i.d' po1t cap.ilalt.i.dad pa6ando 6ob1te. La -­me.zeta de. lo6 1te.ac.t.i.vo4. Cuando la •e.zeta de an.t.Cge.Ro y 6ue.1to no p1toduce. 1teacc.i.dn an.ecgeno an.t.i.cue.1tpo, amba6 6on -de.4alojado4 de.t 6.i.t.i.o donde. 6e. le.6 colocd'. S.i. La Jl.e.Acc.i.d'n_ .tuvo tuga1t e.L an.t.lge.no e.6 1te..te.n.ido po1t e.L pape.t como aina -•ancha de. .c..ln.ta .indete.bte., ya que. e..L an,t,Cge.no e6.ta coto1te.~

do en azul. ma1t.i.no. S.i e.l .t.l.tCLto de. an.t.i.cue.1tpo6 no e..6 e.le.u~

do, La &.i.jac.i.dn 6e.1t4 pa1tc.i.aL: paJl..te. de.L an.t.lge.no que.da e.n e.L 4.i..t.i.o de. La 1te.acc.i.d'n y e.t 1te.6.to 6e. de.6alaja e.a 'ª"'"'ª de. come.ta, 4.i.e.ndo La d.i.6.tanc.i.a 1te.co1t1t.i.da po1t la cota .i.Rve.1t64-•en.te. p1topo1tc.i.onat at .tLtCLto de.l 6ue.1to. Se. cona.i.de.1t4 una -1te.acc.id'n po6.i..t.i.va cuando La 6.i.jac.i.6n e.4 6upe.Jl..i.o'l a 501 .te­n.i.e.ndo e.n cue.n.ta_la d.i.6.tanc.i.a que. 6e.pa1t4 ta .aacha de.t bo~ de. 4upe.1t.i.o1t det pape.t 1 36 1 Cada pape.l caft e.t allblc.1to de_ 10 rnancha6 an.t.i.gln.ica6, 6e. u.t.i.t.i.z6 e.a ta 6.i.giúen.te 6o1t.a• ta p1t.ime1ta mancha pa1ta e.t .te.4.t.i.go po6.i.tivo-6ue1to de conejo h.ipe.1t.inrnune.-, La 4e.gunda pAJl.a el coa.t.\ot negativa - 6ue1to_ de n.iílo a6.i.ntomtf.t.ico y 6.in vacuna cont1ta ta 'ie.b1te .t.i.&o.i--

IS

dea. -. la.6 6.C:9u.le11teá···ocl10 1N11clta6 j.11"111 Zo6 6ue.1to6 ottt e6t!!, 1f.C:o po.1t dupt.lca.do. e11 cada .c.C:.1ta. de papct pa..1ta cua..t.1to 6 ue- -.1to4. Se p.1tac.t.C:c6 ta p.1tueba. e11 to6 75 6ue.1to6 p.1tobte914 e .C:9ua.t 111bie.1to de .tc6.C.C:906 11e9a..t.i.uo6. e11 6ue.1to6 de 11.C:rio6 que a.cud.C:e.1to11 a.t Ho6p.c:.ta.t l116a.11t.c:t de Mliúco • Fede.1t.C:co G6--­•e6 •. a.t La.bo.1ta.to.1t.C:o de Oe6a..1t.1totto. polt p.1tobte.a6 cüue.1t--606. no .1tela.c.lona.do6 co11 cuad.1to cl..Cn.C:co co•pa..t.C:bte con é.i.~

bite .t.l&o.ldea..

Vll.-2.- PRUEBA 1NMUNOENZ1MAT1CA 1 ELISA 1

Vll.-2.1.- PREPARACION OE BACTERIAS INACTJVAOAS CON -ACETONA.- S. typh.l Ty2 de ta cotecc.C:4n det tabo.1ta.to.1t.lo. --cult.lua.da. e11 •ed.C:o 64l.ldo.

Ell.t11.a.c.Co de ce.1teb.1to 200 9 Ext.1ta.c.to de co1ta.z611 de buey 200 9 Pepto11a. 10 9 CtoJtU.ltO de 6od.lo s 9 Fo6 &a.to d.i.64d.lco r.5 9 Gtuco6a. 2.0 9

El •ed.lo 6e .1tecon6.t.c:.tuy6 e11 a.gua. de6.t.lta.da en p.1topo.1t­c.C:6n !7 9/L. 6e e6tc11..C:t.C:z6 '-" a.utocta.uc a. IS t.C:b.lta.6 de p.1t~

4.C:6n du11.a.nte 15 •-lnuto6. 6e a.9.1tc96 a.9a..1t a.t 1.01 pa..1ta. 4ot.C:­di6.ic1111.to. 6e .é.nocut4 en botetl116 'de Roux. 6e dcj6 en .C:nc!!_ b11c.l6n du1tantc " hu.. co•plloba.11do6c 6u e6tu . .C:t.i.da.d. Et -•cd<..1 1tecon4t.it11.ido e11 a.gua. de6t.i.tada. 6c cotoc6 a. 100 •l -pe, botttta. e6.Cc.1t.i.t.C::a.da.. Ot.6pul• de 11 h.1t6 •• de incuba.-­c.é.611 a. n•c 6C co6cch4 con 25 •l de 6otuci611 .C:6otlfn.C:ca. de cl1,.'11111.o de 6od.io. Se de6p1te11d.ic.1to11 ta.6 coton.C:a.6 va.ciando -~n •a fo\ca c6.t~.c:t. laua11do tH do• oca.6.C:onc6. Se cent.1t.C:6u96

"

4:a 4u4pe.n4.i6n de. bac.te.Jl.ia4 a 12,000 X g 4"C, el 4e.d.ime.n.to 4e. lav6 tJle.4 vecea aon 4oluc.i6n i4ot6n.i­ca de cloJluJlo de 4odio. Se .inac.tivaJlon la4 bactCJlia4 con -ace.tona volumen a volumen y et 4ed.imu1.to 4e. colcc6 y 4ec6_ en caja de Petlli a 37•c.

V11.2,2.- EXTRACCION VEL LJPOPOLISACARIVO POR LA TEC­NICA VE FENOL-AGUA.- 30 g de la4 bactellia4 4eca4 en 500 ml de agua deat.ilada ae c.u'.entallon a 90"C poJl 30 ·•inuto4. Se añadid a.3 ml de 6enot al 901 quedando la 4uapenai6n al 451. Todo te antC-'lioJl 4e ttev6 a 6S"C dUJlante IS minuto4 -agitando continuamente. Se. en6Jli6 a choJlJlo de agua, 4e. ce~ tlli6ug6 en .tubo4 de. pl44tico Jle4i4tente4 al 6enol duJlante_ 40 minuto4 a S,000 llpm en una ce.ntlli6uga Vamo11 JE CPR. Se tom6 ta capa 4upellioll blanquecina poll medio de una pipeta_ Pa.1.teuJl, 4e ce.ntlli6ug6 doa ve.ce4 11144 haata obte.nC.\ un 4o-­bJle.nadante. clallo, Vel 4ed.imento 4e pllactic6 una 4egunda e.xtJlaccidn, ae mezclaJlon to4 4obJlenadante4 de laa do4 ex-­tJlaccione.4 y 4c dializ6 dullante do4 d!44 a choJlJlo de agua_ de ta llave y do4 d!a4 m44 contlla agua de4titada. Se cen-­tlli6ug6 dUJlante 40 111.inutoa a 5,000 llpm., 4e decan.t6 el 4obJlenadan.te en un matllaz bota de 24 poJl 40 de boca e4mellf lada concentJlado con vacio haata 10 .t. Se ce~i4ug6 a --40, 000 llpm en una ultllacentlli6uga Beckman Ll-10 po4 2 lvr.4. Se de.cant6 y 4e guaJldo el 4obllenadan.te, 4e tauo el botdn -con agua del lavado de.t matJlaz palla d.U.olvellto. Se calen.t6 a 40"c. 4e centlli6ug6 a 3,000 llpm palla eli•inaJl la4 atti-­ma4 impullezaa. El botdn 4e 4U4pencU.6 en agua de4.ti.lada ~ -4C lio6itiz6 en una lio6ilizado4a Labconco - 5.

VII.2.3.- UNION VEL LPS A LAS PLACAS OE IECUllJMIEN-­TO.- Placa4 de pol.ieA.tilleno VYNATECH l••unoton 1, de 96 p~ 4itlo4 inteJlcamb.iablea. Se di4olui6 el LPS ex.t4a..ido a una conce.ntJlac.i6n de. 25 ug/•l en amo4.tiguado4 de Jlecub4.iac'.en-­to: CaJlbona.to de 4odio 1.519& g, BicaJlbona.to de 4od4o

17

%.94 g. Azida de 6odio O.t g. agwi de4tilada 1 L. Se ajiu­~6 a pH Y.6 y 6illvi6 60lo pa~a IS dlaa, 4e colocallon 0.300 •L po~ po•itlo, 6e dej6 en ~epo6o en c4.alla hd•eda -du~ante La noche. Se lavo la placa con PSS-Tween-ZO: Tw&&!!, %0 I Sig•a I O.S lllL, azida de 6od4o O.% 9, PSS 1 L 1 NaCt-1.0 g, + l<H% P04 0.'1. g, + Na tH P04, 12 H%Q. '1..9 g, • KCL -0.2 g. J. Se colocallon palla et Lavado O.S mL en cada po4f Lto • dejando cinco •4n~o4 y a6p4.'lando con bo•ba de vac4o. Se ~epitio ta op&llac46n tlle4 vecea.

Vll.-2.4.- PRIMERA UNION ANTlGENO ANTICUERPO.- 1 LPS­J9G pllobte.a 1 Se pllac~c~on ditucionea de Lo6 6ue~o4 d& 1:50 a 1:1600 en a•olltiguadcll T~.i.4-HCt o.s M pH 1.1:

Sotuc46n A: T~6 O.'/. M %4.tJ 9/L t~44 ( hidlloxi~~ tit 1 - a•ino~etano.

Soluci6n 8: HCL 1 M IJ .t/l.

A %50 •L d& ta 6oluc4~n A, •e adicion~on 22 mt de La 4oL~ ci6n B, 6& ttev6 a un Lit~o con agua de•tiLada. y 4e aju4-t6 a pH B.Z • Se cotoca1ton 0.500 fllL &n cada po4ilto de La placa d46tllibuido6 en La •4guiente 6ollma: La placa e6ta --6ollmada poll h4Le1ta6 hollizontale6 de 12 po64Llo6 que de iz­quicllda a de~echa colllle6ponden a lo6 ndmcllo6 del 1 at lt y

Lc6 velltic4L&4 de & po6illo6 colllle6pondcn de alllliba a aba­jo a la4 Let~a6 de La A a La H, poll to tanto la Llnea No. 1 de all~iba hacia abajo 6& d&jo COMO blanco palla La v~ Lollac46n po6tellioll de un46n ine4p&cl,ica del conjugado a -la placa. La4 llnea• 2 y 3 6e ut¿{izallon palla coloca~ La6 dilucione6 de lc6 tc6tigc6 po4itivo6 poll duplicado 1 coMo_ te6t490 po64tivo 6c utili:! La mezcla de diez 6uello6 de p~ ciente• con diagn66tico bacte1tioL69ico !/ cuya hemoa9Lutin!_ ci6n 411di1tccta di6 tltulo6 d& 1•100 • y co.10 t&6t.i90 negatf ~o el 6«ello de un ni~o e6colall 6in antecedent&4 de cuadllo_ .:C (11ico co•patible c<>n '4eb.t& ti,oid&a o vacunaci6n J. lo4

"

po4.il.Lo4 11.e.4tante.4 4e. ut.i..C.izallon pa~a Lo4 4ue11.04 pllvute.-a_ a la6 •i4•a4 ditucione.4. La placa 4e. de.jo e.n lle.po40 Po11. 6 h~ •• e.n c4•alla ha•e.da ~L •e.dio a•bie.nte.. 4e. tau6 ~~e.• -ue.ce4 con PBS-Twe.e.n o.soo·•L e.n cada po4itlo IJ a4pillando -con bo•ba de. uaclo. Se. de.j6 una ho~a con PBS-Twe.e.n IJ aLbú­•ina 4lllica bovina aL O.SI. Se. Lau4 con agua de.4.t.il«da.

VJJ.-2.S.- UNJON VE UN SEGUNOO ANTICUERPO CONJUGAOO A UNA ENZIMA AL PRIMER ANTICUERPO.- E4te. 4e.gundo anticue.~po_ e.4 una JgG de. cabila d~igida co~a JgG hu914na. La Que. '"e. pllopo~c-ionada poll Aco4ta de.t Labo~a~o~o de. 1n•unobi0Lo9La J de. La Viui4i6n de. ln•unoqul•ica de. La Unidad de. Jnue.4~i­

gaci6n Bio•tdica de.L CMN de.t lMSS.

Plle.pa~aci6n de.L conjugado.- EL •l.t.odo e.mple.ado 6ue. e.L adecuado palla 6o46ata4a alcalina 1 37 J ~po Vll-S de. in-­te.4tino bovino I Sigma Che.micat Co•panlj. S~. Loui4. Mo. J a una conce.ntllaci6n de. 6.6 mg de. pllote.Cna poll .t. EL con~~ nido de.L 61la4CO 4e. me.zct6 con La 4oLuci6n de. an~icue.llpo4 IJ

4e. diatiz6 contlla PBS palla e.Li•ina1t e.L 4ul6ato de. a•onio· EL cante.nido de. La boL4a de. ditÍLi4-i.l> 4e. "a_ju4t6 a un mi¿ IJ -

. 4e. te. aglle.g6 O.DIO mt de. gl~allaLde.h-i.do al 201. de.4PU(4 de. me.zclall 4e. de.j6 do4 hll4. a te.mpe.~a~ulla ambie.n~e. IJ 4e. dia­Liz6 con~lla dol> camb-i.o4 de. Tlli4-HCL a O.S M pH a.o • Oe.6-pul4 de. 1te.cupe.1tada 4e. aju4t6 a f.SS lll con a•Oll~i9uado1t áe. Tlli4-HCl 1J 4e. aaadie.llon O.ISO •l de. azida de. 40d-i.o al 101 y atba•ina •lll-i.ca bovina 1 Sigma 1 SO •9· Se. hic-i.e.llon aLf cuota4 de. un •l en 61la4co4 de. pL44~ico 1J 4e. con4e.1tua1ton a ,•e palla euitall ta conge.laci6n. EL conjugado diluido de. T\i4-HCt O.S M pH 8.1 diluido 1:100. 4e. a91teg6 a 0.300 •L poll po4illo a toda la placa. 4e. de.j6 e.n -i.ncubaci6n du1tan~e. ta noche a 4"C e.n c4•alla húmeda. Se. Lau6 ta placa con O. 5 •l de PBS-T1oce11 po11. inte.lluato de. cinco •inuto4 e.n aei4 ~ca4ione.•. a4pillando con bo•ba de. uaclo, 4e. lau6 ta -

·····----------------------------

"

placa do11 vece4 m44 con agua de4.tilada.

Vll.-2.6.- ACTlVAClON VEL SUBSTRATO.- El 11ub11.tita.to --p-ni.tito6enil6o46a.to SIGMA 1 en .table.ta4 de S mg 11e con--

4eitvd a -2o•c en ta 011cuitidad. Se di11olvid una .table.ta poit cada 5 ml del amo~.lguadoit del 6ub11.tita.to: V.le.tanolam.lna 97 ml, azida de 11od.lo 0.2 9, cloituito de ma9ne11io 6 H20 0.1 9, agua de11.tilada 300 ml, 4e aju4.td a pH 9.3 con HCl y 11e a6oitd a un ti.tito, 4e man.tuvo a .tempeita.tuita ambiente en bo­tella 011cuita. Se colocaiton 0.300 ml poit po6.lllo de la pla­-a y lle pitac.ticaiton la4 lec.tuita4 a pa~Jt de lo6 30 minu-­.to4 en un lec.to• Ti.teitll.en Mul.ti41l.an del Laboita.toitio de la­Viv.l4idn de ln6ec.tolog.<:a del Ho4pi.tal de Pedia.tit~a del -­CMN del IMSS. La iteaccidn 4e 4u4pendid a ta hoita con 0.050 ml de NaOH 3N cuando 4 e con4ideitd que el .t.<:.tul.o del conju­gado en la dilucidn 1: 200 del. .te4.tigo po11i.tivo, did una -­l.ec.tuita mayoit a 1.00 en ab6oitbancia, lo que lle hab~a valo­itado piteviamen.te 116lo con d.llucione11 del con.titol polli.tivo. Se el.iminaiton la4 d.llucione11 1:50 y 1:100, .titabaj4ndo11e 11~

lo con la11 dUuc.lonu 1:200, 1:400, 1:300 y 1:1600 poit co~ 11ideitait que con ella poitc.l6n de la cuitva eita 11u6.lcien.te pa­ila lo11 pitop611i.to11 del .titabajo; ya que d.l11ce.1tn~a en.tite .te11-.ti9011 po11i.tivo11 y el negativo. La den11.ldad 6p.t.lca lle ley6 a 405 n•.

Se pitac.ticd la pitueba a 75 11ue.1to4 pitoblema con 11u11 -.1te11pec.tivo11 con.titole4, en 11ue.1to11 de niño11 a11in.tom4.tico11 y 6in an.teceden.te11 de vacunacio~ an.ti.ti'o~dica.

VJJ.3.- ffEMVAGlUTJNACJON ( HAJ

VJJ. 3. J.- PREPARACJON VEl ANTJGENO ( LPS "CRUVO" ).­

S. typh.i 0-901, ce.pa 6.in 6¿age.to6, 6e. cul.t.iv6 e.n •e.dio de. Mutte.ll - H.inton e.n do6 caja• de. Pe.tll.i. Se. co6e.ch6 a ¿a6 --11 hll6 con 6e..i6 mt de. 6otuc.l6n de. ctoll~o de. 6od.lo at 0.91 po~ caja. la 6u6pe.n6.ldn bacte.~ana 6e. aju6td a 50 mt de. ta 11Ll6ma 6otuc.ldn. Se. cate.ntd a 1oo•c poll una halla, 6e. ce.ntllf 6u96 d.le.z m.lnuto6 a 6000 ~pm e.n una ce.nt~6uga Va•on JEC, 6e. tom6 e.t 4ob~e.nadante. po~ de.cantac.idn, 6e. ag~cg4 atcohot de.96"1•10.

VlJ.3.2.- PREPARAClON VE LVS GLOBUlOS ROJVS VE CARNE­RO ( GRC J.- lo6 GRC e.xtlla.ldo6 una 6e.mana ante.6 •e. habian_ cotoc~do e.n 6otuci4n de. At6e.ve.ll• gtuco6a 20.5 9, c.c'..tllato -de. 6od.io 1.5 g, 4cido c~t~ico 0.55 g, ctollullo de. 6odio 4.20 g, y agua de.6t.ltada un t.lt~o. lo6 GRC 6e. LavtVlon con a•o~iguado~ 6o•6ato 64tino pH 1.2: Sotucidn A.- Kff2 P04 -0.15 M ( 10.20 9 pa~a 500 mt de. H20 J. Sotuc.i6n B.- Na tH PQ4 1 10.64 9 palla 500 mt de. agua de. H20 J. Se. to•4 24 •L_ de. ta 6oluc.i4n A y 16 de. ta 6otuc.i4n 8 a to6 que. 6e. a9-e.9~ 11.on 100 lllt de. 6otuc.iOn de. cLo-u11.o de. 6od.io al 0.91. hac.ie.~

do un total de. 200 mt de.t a•o-t.iguado11.. Lo6 GP.C 6e. tava11.on a 1500 llpm poJt cinco m.inuto6 e.n t11.e.6 oca6.ione.6.

Vll.3.3.- SENSlBJlJZACJON OE LOS GRC I GRCS J.- A 0.1 mt de. GRC Lavado• 6e. ag~e.94 o.i •t de.t aAL~9e.AO LPS c~do, 6& •e.zct4 1J agit4 e.n baño .a~a a 37•c po~ 30 •iA~06 1J 6e. de.6e.chd e.t 6ob1Le.nadante.. Se. t~va~on e.n e.t a•o~Li9uado~ 64-t~no tlle.6 ve.ce.6 polt cinco •.inuto6 a 1500 ~p•, 6e. -e.6u6pe.n­die.1ton e.n e.L m.i6•o a•o1tt.i9uado~ e.n 6otuc.i6A al ZI C 4.9 .t dcl amo1Lt.i9uado1t palla O. 1 •L de. to6 ,GRC 1 6e. me.zct•-011 IJ -6e. 6u6pe.nd.ie.1Lon cada ve.z ante.6 de. u6a~to6. Se. ut.itiza~on -

t.l llli6"'o d.ta.

TESIS CON FALLA DE ORIGEN

Co•o .tr.6.tigo po6.i.LLvo •t. u.t.U.iz6 t.l 6Uf.'IO de cont.JO -hipt.'lin•unt. "'t.ncionado f.ft M~f.Jlial f Ml.todo•.

Se p~r.paJZ.a~on dilucion,.,. dt. lo6 6ue~o6 t.n 'º~"'ª pJZ.o-­g'lt.6iua de l:SO •6dulo tX t.n .tubo6 dt. t.n6ayo con un uolu-­•t.n 6inal dt. 0.5 •l p~a cada .tubo. St. añadid O.OS •l dt. -la 6U6pt.n6idn de GRC, 6e incuba el 6i6tt.ma a 37°C duJZ.ante 30 aln~o6, la6 tubo6 6f. ct.~i6u9aJ1.on a 1000 'IP• poli. tJZ.e6 lllinuto6.

Se con6ideJZ.6 e..L t.t.tuto del anti6ut.ll.o como ta dituci6n m46 elevada que di6 una aglutinacidn de +++ a ++++ al gol­peaJZ. 6uavemente el 6ondo del .Cubo, la placa de l1emoa9luti­nacidn de de6pll.endi6 ca64 .l'n.teg~a. Se pJZ.actic6 la p'lut.ba -a 74 6ucJZ.o6 pJZ.oblema y lo6 'lt.6pectiuo6 te6ti906 utilizado6 en la6 pJZ.ueba6 111encionada6 an.tt.uoJZ.mente.

V11.4.- P~ECIPITACION EN CAPILAR ( PC 1

El an.ttgeno paJZ.a la p'lut.ba 6ut. pJZ.opoJZ.cionado poli. Ru.Cz Ca6tañeda f pJZ.epaJZ.ado en el LaboJZ.atoJZ.io de Vt.6all.~otlo dt.l Ho.!.pitat In6antit de Mlitico • FedeJZ.ico G6mez " 1 13, 14 J.

~e u.tiliz6 una tia 6ili:adoJZ.a labconco - S. Ei. puo .!.l!Co que mo6t.\l1' una '"eJOll. JZ.eactiuidad en ci. contJZ.ol po6itf uo 4ue de 140 •9 di6uelto en una 6olucidn de clo-'l.uJZ.o de 6.!!_ dio co.\.\C6pondit.nte a un •l, 6o'l•cu1do una 6u6pe•16idn de C.!!_ to'I a:ul •aJZ.ino. Ve c6ta 6u.!.pC1t6i6n 6f. to•a'lon 0.002 ,.t, -cquiualcn.Ct.6 a 2 "'"'de un tubo capital!. 1 KoJZ..Ceit - tSOO 1, 6e a911e9a11on 0.020 Ml del 6Ut.'lo cont11ol po6itiuo de conejo

h.C:pu.C:11•1U1e. 1J 4e 11e.zcla.11.on 4ua11e.•ei1.Le, l.a .11.eacc.C:611 que. 4e. 1106.LJ\6 'ue. .C:n11e.d.C:a.La, ca.11.ac.Le.11..C:zada po.11. la p.11.e6e.11c.C:a de p~ que.ño6 9.11.l11ulo4 de coto.11. azul .C:11.Le1160 que •e. ag.11.upa.11.011 'º~

111111do 911.u1104, l.06 que 4e. " p.11.ec.C:p.C:.LAJl.011 • al cotoca.11. et .L~ bo cap.C:ta.11. en po4.C:c.C:6n 11e.11.~.C:cat, apoyado en 4u ex.L.11.e•o .C:n-6e....C:o11. po.11. un pequeño 6opo.11.~e de pl.116~.c:t.C:na. 1 Fo~og.11.a'~ª­No. 1 J En ca6o de nega.L.C:v.C:dad, e.l ~ubo cap.c:ta.11. pr.JL4.C:4~.C:6

mo6~.11.a11do ""ª colo.11.ac.C:dn azul. claJ\o e11 .Lada 4u e~eft6.C:611. El ~e6~.C:go neg~.C:110 6e lte.v6 a cabo con l.o4 ..C:4•o6 6ueJ\o4 11enc.C:onado4 en La6 p~ueba4 ante.A..C:o.11.e.6. La p.11.ue.ba 4e e.6ec-­~u6 poJ\ ~.C:pl..C:cado a l.o4 75 4ueJ\o4 p.11.obl.e.11a, .11.ep~.C:endo e.L expe.11..C:•e~o e.n t.11.e6 oca4.C:one6 con .C:~e..11.vaLo de. un 11e4. Se con•.C:de.11.a.11.on co110 po4.C:t.C:vo4 l.06 4ue.11.06 que d.i.e.11.on ta p.11.ue.­ba en 60.11.11a .C:nme.d.iata, en un t.C:e.mpo no 11ayo.11. de 30 6e.gu11-do4.

VIII.- VALORACION ESTAOISTICA

La .C:n~e..11.p.11.etac.C:6n de lo4 Jte.4ul~ado4 6ue. hecha de. acue..11.do a Gate.n y Gamb.C:no, ba6ado6 e.n 6u 11odeto de. valo.11. -p.\e.d.C:ct.C:uo 1 38 1 el. que. 4e. u:p.11.e.64 a cont.C:nuac.C:On:

PACIENTES CON PACIENTES CON PRUEBA POSITIVA PRUEBA NEGATIVA TOTALES

PACIENTES CON ENFER~IEOAV VP FN VP+FN

PACIENTES SIN ENFEllMEVAO FP VN FP+VN

TOTALES VP + FP FN + VN VP+ FP+ VN+ FN

tJ

Fig. 111.- El capilar de la izquierda corresponde al control y el de la derecha al problema.

1

TESIS CON FALLA DE ORIGEN 1

.·

tn donde:

VP • VtRVAVE~OS POS1T1VOS.- Pac¿ente4 con en6e11.medad. cat.c'.d.c'.cado4 co11.11.ecta•ente poli. la p11.ueba,

FP • FALSOS POS1T1VOS.- Pac.c'.ente4 que no tienen en6e::!_ me.dad, c.at.c'.6.c'.c.adol> co1110 po4U-i.vo4 po11. ta p11.ueba • •

VN • VERVAVEROS NEGATIVOS.- Pac.ientel> 4.c'.n en6e11.medad. c.at.c'.6.c'.cadol> c.011.11.ectaMente.

FN • FALSOS NEGATIVOS.- Pac.c'.ente4 con en6t.ll.Medad. ca­Li6-i.cado4 e11.11.oneamente.

Ve donde 4e obtiene:

LA SENS181L1VAV.- La pol>itividad de La pll.ueba en La -en6e11.medad exp11.e4ada en po11.c..c'.ento. VP x 100 OP + FN

LA ESPECJFJCIVAV.- La ne.gat-i.v.c'.dad de. ta p11.ueba en 4u­Je..t.o4 4ano4 o en aU4enc.c'.a de una en6e11.Medad pa11.t-i.cuLa11.. e~ pll.e4ada en po11.c.-i.ento. VN x 100 OP + FN

LA EFJCIE.NCIA.- EL po11.c.c'.e11to de. Laa p11.ueba4 cat.c'.6-i.ca­da4 co11.11.ectamente COMO en6e11.11104 o coMo no en,e11.•o•. exp11.e-4ada en po11.c.C:ento. VP + VN x IOO

OP + FP + FR + OM

EL VALOR PREPJCTJVO VE UNA PRUEBA NEGATIVA.- EL po11.-­ciento de pac-i.entea que no tienen en6ell•edad r daR ta p11.u~

ba negat.iua. VN x 100 OR + FR

tL VALOR ~REOICTIV.O OE UNA PRUEBA ~OSITIVA.- EL PO'l-­cie..Uo de. pacie.K~e.• que. ~ie.fte.n e.n,e..t•e.dad y dan ta p.tue.ba_ po6Uiva. VP

OP • FP

rx. R E s u L T A o o s lX.1.- ffEMOAGLUTINACION 1 ffAI

se. con6~d~a.ton corno po6.i.t.ivo6 to6 6ue..to6 que. •06~'la­'lon .t.C.tuto6 de. 1:200 o mayo.\e6. con6ide..t11do6 co•o 6uge.6~i­vo6 de. e.n6e.'l~e.dad 'le.cie.~e. e.n ot'lo6 t'labajo6 de. 1•110 o lllll!fOJlU 1 39 J,

TABLA

ffEMOAGLUT7NACION INOlRECTA

GIWPOS POSITIVA Nf:GATillA TOTALES

FIEBRE TIFOIOEA 65 9 14

TES TI üOS SANCJS 4 10 14

Totatu 69 1'1 io

JX.2.- FlJACION EN SUPtRFJCIE I FS I

La .uatc.'lp'le.tac.ic1H de la6 rnue.6t.\46 • de. Lo6 pacie.n.Ce.6 -con c11,e..t•e.d11d aL hace..uc poJt dupt.icado • flto6.CJl6 una vaJtia­c.i.611 de. 10'; •e. to1116 et p.t<>rncd.i.o

u

TABLA 2

FJJACJON EN SUPERFJCJE

GIWPCIS PCISJTJVA NEGATIVA TOTALES

FIEBRE TJFOJflEA 7 75

TESTIGOS SANOS o 75 75

To~al.e.4 68 150

se con11lde.~a~on como po1>l~lva11 la4 mue4~~a4 que mo4-­~~a~on ~ 501 de &lJacldn o mayo~.

JX.3.- PRUEBA JNMUNOENZJMATJCA ( ELJSA I

Se con4lde.~a~on como po4~lvo4 lo4 4ue.~o4 que. mo4~~a­~on e.n La d.U.ucldn 1:400 o mayo~ una dl6e.~e.ncla e.n de.n•l-­dad dp~lca de. 501 o mayo~ e.n ~e.¿ac4dn a Lo• ~e.4~lgo4 po4l­~vo g ne.ga~luo de. cada placa ( 40 J. He.~n4nde.z g coL4. con4lde.~a ~ 1:300 como po4l~4uo4.

TABLA 3

ELJSA

GRUPOS POSJTJVA NEGATIVA TOTALES

FIEBRE T1 FOJflEA H 75

1 EST1G0$ SANOS 11 75

To~alu 61 13 150

1X.4.- PR~CJPJTACJUN EN CAPILAR ( PC 1

Se con6¿de~a~on co•o po6°Li.vo6 aqueLlo6 6ue~o6 que •o~ ~~a~on la p~e6enc¿a de 9~u•o6 y p~ec¿p¿~ac¿dn 6Óto d"-'an~e lo6 p~•~o6 JO 6egundo6 de6puC6 de habc~ hecho ta •ezcla_ del an.t.Cgeno y et 6uc~o p~obte.a.

TAlfLA 4

PRECJPJTACJUN EN CAPILAR

GRUPOS PUSJTil.'A NEGATIVA TOTALES

FJ EBRE l JFOJPEA 61 ' 7S

TESTIGOS SANOS o 7S 7S

To t;a.tc6 67 ISO

Lo6 ocho pacicn~c6 que •06~~a.~on la p~ueba. nega.t.é:va -y con cua.d~o ctlnico y ba.c~e~otdg¿co po6¿~¿vo 6e •ue6~~ª­a. continua.c¿6n en ~cta.c¿dn a lo6 ~e6utta.do6 obtenido6 en -La.6 p~ucba6 de HAl, ELJSA, y FS a.6l como to6 dla.6 de evol~ cidn a.pa.~cn~e de ta. cn4e~•eda.d en que 6e ~om6 ta •ue6~~a.

Ca.ao No. HAJ

6 1: 200

12 1:100

19 1:100

t 7 1: 200

n 1: too

ELlSA

l:IOO

1:800

1: 1600

1 :200

1: "ºº

FS

SOi

o

so

o 40

19

JO

r

1

f7

C1uo Ne. HA J El1SA Fs

3S 1: so 1: '°º u 5

36 l:SO 1: 200 o 7

6S 1:100 1 '"ºº 10 lf

A con~.inuac.i.6n ae •ue4.tJl4 en po11.ceft.t4j~ toa 11.e4ut.t4-do4 obten.ido.!> e.n .toda4 .taa pJLueb44 en JL'dac.id'n a au 4e.na.i­b.i.t.idad, e.ape.c.i6.ic.id4d, e4ic.ie11c.ia, et uato11. p'led.ictiuo paJLa una pJlue.ba poa~iva y paJLa una pJLueba 11e9a.tiva.

sen.i..ib.i.t.idad

VatoJL pJted.é.c.U.vo paJta una PJlueba

poai.tiva

Vato.Jt p11.ed.ic.t.ivo p4Jl4 u11a pJLueba

nega.tiva

HAJ

87

94

91

..

FS

90

'ºº 'IS

100

91

ELJSA PC .. 94 'ºº

100

u to

X.- COMENTARIOS

la 4eacci4n de Widal que. ae utiliza d&6de llt'~ t.iene. un valo4 liai.eado en LA '4eb4& ti6oidec. le 6&4olosl• en -oca6.ione6 aguda p~o en ot~•• puede con6undi4. Un eatudio_ en 1961 del Publ.ic ffec~k labo4ato4f Se4vicc, •ue6t4• que ~6Lo 1UI de. po~cdo4e6 conocido• tie.nen anticu&4po6 coftt4• antlgeno Ui a un .U:tulo de 1:5 o M46 1 41 J. U""cnte l• &pide.ala de. Abe..4dee.n en fOJ ca6o6 con,i4MAdc6 po4 cutt.ivo, e.n 151 no Ae. de.tecta4on anticue~po6 Anti • H • en LA e.n6e~ •e.dad aguda ni d~ante 6u 6e.gu.iaé.ento de.L IJI con con6i4•~ ci6n bacte.~ot49ica g 401 no de644~otta~on •nticu&4po6 anti • O •, un• au6e.nci4 de anticue~po6 anti • Vi • e.n cuatqu.ie~ e.6tcdo de L• evotucion y 66Lo e.n 91 del total de paci~ftte.6 6e p~oduj~on anti• V.i • 1 43 ).

No hag con6Cn6o e.n L• l.i.te.~atu~• p•~• Widct &n &L 46-pe.cto de c~te~io diagn46tico, e.n •uckc6 oca6ione.4 no e.6 -e.6pe.cl6ico, no e.6ta b.ie.n e6tanda~zado g p4e6ent4 di6icut­tcde.6 e.n ta int~p4e.taci6n 1 44, 45 J.

Gutie.~4ez y cota. e.ncoftt4•~on en 117 caao6 con co•p4o bcci4n bccte.1Liot69icc: 90.11 con t.c.tulo6 pc~• •O • 1:160

o mago~ea, 1.4i t.c.tuloa •eno4e6 y 1.11 pe.~•iat&nt&•e.ftte n~ 9ctivo6. Pa~c • H • 111 .. go4 de. 1:160, 11.91 m&n04 de 1:160 g 5.11 aegctiuo6. Ea L• p4i•e~• 4e .. aa d& &votue.i.6n_ cpa4e.nte 14. r 1 te~• aivete.• de. 1: ·uo o ••fo4&6 .,._ • o • g e.t 6JI pCl.\4 • H •. lo• tltulo• pe.4 .. ne.ci&4on 6.úl ca•bio6 du4ante. &p4oa.i••d .. e.ate. doce. 6&••••6, pa4& di6aúlaé..t e.n tc6 t4e.6 6e .. na6 6iguie.ftte6. En lo• cc6o6 de. p&46•4•ci6n -to• t.c.tuto• de.• O• di6..C:nuge.4on 1 46 ). «u•&t& &ncu&nt4c en 100 ni~o• con 'ie.b4e. ti,oide.a co•p4obad• bacte.4iot4gic~ •ente. g JO •46 p&4,o4ado6: 711 con tltulo6 de. l•I'• o .. ,~

f9

"&• pa"a Widat, 1J &n et ca•o d& to• p~'º"ado• 711 pa~a • U • 1J ffl Pª"ª " H •. Con•id&-'ª que ta P*u&b« d& Widat no &6 6&KCitta ya que "&qui&"&• .. ..et•~ un cultivo d& S. trp~i &• 6a•t S, uig.C:ta" ta P"t•&•c~ de to• aiü!g&•o•_ • O • 1J • H • en 'º" .. adecuada pjl-'41 ta aglu~naci6n, ade­~ La tect~a de ta ~eacc.C:6• •o &4 ift•tdiata 1 47 J. Po" c•to• •ot.C:uo• no 6& .C:nctuy6 &• et e.6tud.c:o, to mi••o que la agt~.C:naci6n en placa, con6ide"ada como •odi,icaci6n del -W.C:dat. V& uitti~ co•pa~4 la aglut.iltac.C:4n en placa COft c~o 4...C.Cgeno6 obtenido• dt di6~tllte.6 tabo"Ato~.C:o4 en-­con~ando una '"ª" u~.C:abitidad Pº" d.l'~&nte• P-'octd.c:mie~ to6 dt Manu,ac.t~a ( fl J,

La p~utba d& hemoagtutinaci6n aldt &ft 'º~114 .C:nd~~&cta

to• t.c.tuto6 de antCgeno " O " ~&tacionado6 con el Widal, -6e tteua « cabo &n poco tie•po 1J no ~equit~e •«t&~iat co•­pl.C:cado. Lo6 t~abajo6 de Mete~ •o•t*ª"ºn que et t~at«•.C:&n­to dt S. tfpho4a, con cato~ t ftid"oit.ido de 4od.(o daba tu-9«-' a la t.C:be~ac.C:6n de una po"c.C:4n g"and& de t!p.C:do 1J 6u • ad•o~ci4n a to• gtobul.06 ~ojo6 1 49 ), Po6te~io~•tntt

Landy, Staub 1J Spaun cuanti,.C:ca"º" to• anti4ue*o6 Pº" •&-­d.C:o de ta atcal.C:n.C:zac.C:4n del pol.C:6ac«".C:do ad4o"b.C:do a to4 gtobuto• "ojo6, V.C:cha~ ob6t"uacion&6 •o•t~a•on tuid&n· c.C:a• conctu1J&nt&6 dt que et t.C:popot.C:•ac«~.C:do ~a et ~t•po~ 4abtt de ta• p•op.C:tdadt• agtutinant&6 e6ptc!6.C:c••. to que •o•t*6 ad&•«• una 4tn4.C:bit.C:dad f &4p&ci,.C:c.C:dad co•P•"able_ a una 6u6p~n4.C:4n c•tanda" dt s. tvpla.i 1 SO, SI 1.

La P•ueba dt Fijaci6n &n Sup&•,ici&, ha d&.a•t-'ado &• u• 9-'•• •d•c•o de utudio• ~" ut.C.lidad. Guti&*•tz 1J cot•. e•co11.t"ª"º" que de 10! &n,c•.a•, •ol&Mnt& u110, no de••**.! ll4 anticu&11po6 de•o•t*abt&4 po.t ta FS, LA inte~

•idad de l• 11eacci6n 'ut •&no• con ta edad. En et 991 de •

lo• e"''"•'"' liubo "" uutc:i• de a11t.C:cue•po6, y tu •tace.Lo-

JO

ne• negativa• en e¿ 96.11 en en,e4•o4 con ot4a4 6al•oneto-4i4. la 4eacci4n 'ue negativa en niño4 vacunado• cont4a tf áoidca y en ta 4Cp4oductivitidad di4e4enci44 •4iúma4 de -'º'· et -.i6•0 94upo de inve4ti9ado~e6 e6tabteci~o· que ta6 4eaccione6 det SS at 1001 e4an de vato4 dia9n46tico en meno4e4 de fS año4, det JO at SOi ha6ta to¡ cinco aio4 de edad, f det rs al rs1 en •eno4e4 de un año, ade.t4 una e•­peci4ic4dad •ejo4 que el Widat 1 Sf J. Kumate en 100 ca6o6 encont44 un 9JI pa4a ta FS y 721 pa4a et Widat, en JO ca--606 con pe~'o4ac44n ta FS 'ue po6itiva en un 101, el Widal 7fl p~a ··o" y 291 pa4a "H • 1 47 J. Muñoz en 100 ca4o6 encon.t~4 tambiCn 9SI pa4a FS en co•pa4ac.-l.4n al Widatr pa4a • O• S71 y p~a "H" 291 1 SJ J. 84andao en ~a6it, ta•­bitn encuen.t4a una .ayo4 4en6ibitidad y e6peci,icidad pa4a ta FS 1 S4 1.

Su iaitidad en e4tudio6 4e.itoep4de-4ot4gico6 ha 6ido -mani6ie6ta. Gut4e44ez encon~4= una 6e4opo4itividad de 9.61 en f9fSI 4ue4o6 p4oveftiente. de to• dive4404 e6tado4_ de ta Repdbtica Meiúcana, ta p4opo4c.i4n de individuo6 con aft.Licue-po4 4C4ico6 6e etev4 a pa-.t.i.\ det P~•e- quinque-­nio de ta vida Pª-'ª atcanz•- c.L•-u lllúma6 ent-e el 6e9u.!!. do y et cua~o quinquenio ( SS J. Muioz encuent-• en ISf -niño4 ho6pitatizado4 en ta Cd. de Mt•ico: 1.41 de po6iti-­vo6, de e.to•; f .41 con una int&"6idcd ~ima ' rs a rsl -de 'ijaci4n J, J.fl con inte1U.i.dad •&di• 1 JO a SOi de ,,_ jaci4n J, 2.41 con int&n4idad 6up~iO-' 1 SS e 751 1 f O.fl con int&n64dcd •«•4-a ( 10 e 1001 de •4Jcci4• J ( 56 J.

En f97S Cc-t44on de6c"46e u•c ttc•icc in•u•o&•zi.1--­~ica ( ELISA l PA-'~ ta det&cc.i6• f cuant4,4ccc.i4n de ant4-cu&-'Pº' en 4U&-'O hu•ano di-i9ido6 cont-• el cnt~seno • O • de s. trehi po4 •&dio de un co•ju9ado anti l9G unido a &•-

JI

z.i....a 1 16 ). E11 nue.6t"o pa~6 He. ... n411de.z !I cot6, han e.6ta11-daJt.é.zado ta ttc11ica !I co•pa ... ado co11 ta co...t-Ai11•1&11oe.te.ct ... !_

'o-e.6.i.6 1 CJEF J, W.i.dat !/ FS, e.n so 6ue. ... o6 po6ie.i.vo6 !I Jrs 6a~o6 d& pacie.RC&6 6ano6, e.nca&ll.t-an 1&114 .. ,o_ e.'4c.é.e.nc.i. .. p-&doatnando &n 6&Rll.i.b.i.t.i.dad la FS, e.n to6 •ano6 6& e.ncue.!!. t-a r.Jf COR .t.l.Cuto6 ha.ta 1:500 ( 17, 57 J.

Xl.- CONCl.USlONES

l.a '.i.e.b-& U'o.i.de.a con.tina& 6.i.e..ido u11 p.'l.obte..a de. 6a­lud ptlbl.i.ca e.n pa.i.6e.6 pob"e.6 -de. to6 tla•ado• e.11 de.6ª""º-­llo- Aé.e.n.t-46 e.11 ta. cornun.i.dade.6 110 6e. te.119• u11 cont"ot .._~

lac.i.onado con •e.dida4 6an.l.ta ... .i.a•• ap ... ove.cha-.ie.nto de. agua_ potable. !/ ade.cuada e.l.i.m.i.nac.i.611 de. e.xc ... e.ta6.

LA6 p.._ue.ba6 6e. ... ol4gica. actual~~. •ue.6~&11 a~11 de.,e.c­to6 ttcn.i.co6 que. hace.n .i.rnpo6.i.bte. e.l tte.va ... 6e. a cabo e.n pe.­que.ila6 pobtac.i.011u, tanto po.._ ta di,icuttad .i.nhe.lle.11te. de. -i116tata ... tabo ... ato ... .i.06 e.qu.i.pado6 ade.cuada•e.11te., co•o ta '~ ta de. pe. ... 60114t ttcn.i.carne.nte. plle.pa ... ado.

La6 p.._u&ba6 6e.llot4g.i.ca6 •e.nc.i.011ada. e.n e.te. t ... abajo , •ue.•t ... a11 an po-ce.11.taje. i•po~&nte. d& 6e.R6.i.b.l.t.i.dad !I e.6p&c~ 6.i.c.i.dad, d& e.ta6 ta que. •e.jo.._ to •a11.i.,.i.e.6ta &6 ta FS. S.i.11

c•ba ... 90, e.t p-obte.•a que. ha i•pe.dido u11a 1114!10- di,u6.i.6n de. ta p.._ue.b& ha •ido ta p.._e.6e.11c.i.a de. 'al6a6 11e.9&t.i.v&6 e.11 to6 lu9a"e.' de. ct.i.•& c4tido; po.._ ot.._o lado e.l pape.t u de. i•-­po..,taci611 !I 6& tie.ne. p.._obte.-., e.11 adqu.i."i"to. l.a ffAJ, e.6 -una e.xce.l&nte. p"ue.ba d.i.a91146t.i.ca, ade.cuada pa ... a tabo ... ato-­•io6 que. cue.nte.n co11: cult.i.vo6 de. S. t!tph.i., 9tobulo6 "ojo6 de. c•-11e."o, ce.nt.-i,uga !/ bailo co11 te.•pe. ... atu-• "e.gula.da, to que. 110 u ,acc:t de. te.11e.ll e.n labo..,ato•io6 de. pe.que.ila4 pobl!

elone6. La tlcnica de EL1SA. ha de•o6titado en ta p.tt.actica_ bueno6 ite6u.tta.do6 -6e tiefte co•o e6tudio de Jtutiaa e11 ta -Oivi6i6a de ln'e~otog!A del Ho6p~4l de Pedi<Lt.tt.~a del Cllll del 1USS. Sin e•ba.itgo, et co•to de l46 pta.c46 de pot.iu~­ite110 1J del 6ub6~atc -que 6011 de i•po.U:aci6n- 1J ta P-'ePA-t!. ci6n de lo6 conjugado•. hacen di'~ci.t ta ela.boitac.i6a de it~ tiaa ea pequeño6 taboitato~o6. Oe acue.1tdo con to• ite6ulta­do6, ta de.tecci6n de a.ftt.icueitpo6 ct46e JgG tiene ci~ta duven.taja., IJa que 6u p.1toducci611 co•o itupue•ta a ta agite­•i6n bacte.tt.iana, no u in•ed~a. to que da tug~ a '4l646 fte9divcu cuando et paciente .út9itue1 ea ta p~e~ o 6eg"!!. da •e•ana de evotuc.l4n de ta eft,eit•eda.d to que d.i.6~.úlu1Je -ta. 6en6ibil.idad. Lo6 t.Gtulo6 bajo• pueden .i•biticait6e a to6 .t.Gtulo& encon.t1tado6 eft et 9.11.upo con.t11.ot poll to que di!. rflinu1Je ta e6pec.l6.ic.ldad. La. detecc.l6n de ant.icue.1tpo6 cla•e lgG puede 6r.Jt de malJoll utilidad en r.6tud.lo6 epidr.•iot69.i­co6, e6pe1tando en un 6utwto que ta detr.cc.l4n de ant.lcuell-­po6 cl46e Jg~I, di6cie1tfta •ejoll et p11.obl.e•a en .t:o6 ca6o6 agudo6.

La. p1tec.ip.lta.c.ldn 11.11 ca.p.lla.tt., mo6tll.6 unct 611.n6.ibit..idad_ y e6pec.i6.lc.lda.d compa.11.abt.e a la6 dem4& pllueba.6, l.o que te da una g11.an i•po11.tanc.la. en utilidad ct.tn.ica.. El a.nttgeno -l.lo 6.l.t:.i::ado t.iene la ventaja dr. .tJtan6poittr., 6e ite6.titu11r. -r.n et •o•r.n.to de 6u u.t.lt.lza.ci4ft l.o que r.v.ita ~r.6go6 dr. con.taM.lnac.l4n. Su ca11.a.cte.ttl6.t.lca. de 11.e6puute1 • todo o ftCl­da. • a.de•46 de que 6ac.l.t:~a. 6u .l~teitp11.r.tac.l6n, a.hoitita un -tiempo val.lo&o al c.t:tn.lco paita. .ln.ic.la.11. un tita.ta.Miento ade­cuado. E• baitata.. Puede aeit de 911.a.n utilidad en el. •edio -1tuita.l en ca•o no &dto de p1t~blr.•a6 de 6ir.b1te ti6oidea ai6-tado&, ta•bién en ep.ldr.lllia6. E&tud.lo• p.1tel.l•.ina1te6 •ue6--­CllCln que (a p1tueb11 ta.•biln 6e puede ttevait a cabo en pta6-rN; poll •ed.lo de capilaite6 hepa.tt.i11.lzado6. to que 6.l•pt.l,.l­cn ta t€cnica., evitando: plitdida de tie•po,. 6ang11.e y •ole!_

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