Egyes anyagforgalmi és szaporodásbiológiai Egyes anyagforgalmi és szaporodásbiológiai paraméterek összefüggésének vizsgálata paraméterek összefüggésének vizsgálata

laboratóriumi diagnosztikai módszerekkel laboratóriumi diagnosztikai módszerekkel tejtermelő szarvasmarha állományokbantejtermelő szarvasmarha állományokban

Tóth FruzsinaTóth Fruzsina

A A tejtermeltejtermelőőkk (25-26 ezer gazda és gazdaság) (25-26 ezer gazda és gazdaság) 3 %3 % - -a, az ország tejhasznosítású tehénállományának 70 %-t jelenti,a, az ország tejhasznosítású tehénállományának 70 %-t jelenti, az ország éves tejtermelésének az ország éves tejtermelésének ~~ 83 %83 % - -át át termeli termeli

( ~1,610 milliárd kg)( ~1,610 milliárd kg)

1999 janu1999 január 1. - 2003 október 31.ár 1. - 2003 október 31. a tehenek létszáma kb. 50 ezerrel csökkent (a tehenek létszáma kb. 50 ezerrel csökkent (223 ezer223 ezer tehén tehén),), az összesített tejtermelés pedig 80 millió literrel nőtt. az összesített tejtermelés pedig 80 millió literrel nőtt. a tejtermelés átlagosan eléri a tehenenkénti a tejtermelés átlagosan eléri a tehenenkénti 75007500 litert. litert.

A tejtermelés helyzete MagyarországonA tejtermelés helyzete Magyarországon(Mészáros, 2003)(Mészáros, 2003)

A magas tejtermelés következményeiA magas tejtermelés következményei

Az állatok igényeinek minél tökéletesebb kielégítéséhez minélAz állatok igényeinek minél tökéletesebb kielégítéséhez minéljobban ismernünk kell az egyes egyedek élettani állapotátjobban ismernünk kell az egyes egyedek élettani állapotát(anyagforgalom, szaporodásbiológia, tejtermelés).(anyagforgalom, szaporodásbiológia, tejtermelés).

Fokozottabb igény a takarmányellátottság iránt. Ennek Fokozottabb igény a takarmányellátottság iránt. Ennek kielégítése nehéz, mert csoportokat takarmányozunk, de kielégítése nehéz, mert csoportokat takarmányozunk, de egyedeket termékenyítünk, ezért ismernünk kell az egyes egyedeket termékenyítünk, ezért ismernünk kell az egyes egyedek reakcióit egyedek reakcióit

Az elégtelen takarmányozás fertilitási problémákat okoz: az Az elégtelen takarmányozás fertilitási problémákat okoz: az ivari működés elégtelensége, vemhesülési eredmények ivari működés elégtelensége, vemhesülési eredmények romlásaromlása

A tejtermelés növekedése a szaporodási potenciál romlásával A tejtermelés növekedése a szaporodási potenciál romlásával járjár a két ellés közötti idő (KI) (2003): a két ellés közötti idő (KI) (2003): 429429 napnap egy vemhesülésre eső termékenyítések száma (TI) (2003): egy vemhesülésre eső termékenyítések száma (TI) (2003):

3.483.48..

A vizsgálatok céljaA vizsgálatok célja Olyan anyagforgalmi folyamatokra illetve ezek zavaraira Olyan anyagforgalmi folyamatokra illetve ezek zavaraira

jellemző vérszérum ill. vérplazma paraméterek vizsgálata, jellemző vérszérum ill. vérplazma paraméterek vizsgálata, amelyek statisztikai módszerekkel összefüggésbe hozhatók a amelyek statisztikai módszerekkel összefüggésbe hozhatók a korai (30-36 napos) vemhesség vizsgálatok során nyert korai (30-36 napos) vemhesség vizsgálatok során nyert adatokkal, illetve a petefészek működést jellemző szérum adatokkal, illetve a petefészek működést jellemző szérum progeszteron szintekkel. progeszteron szintekkel.

A vizsgálatok további célja annak megállapítása, hogy a A vizsgálatok további célja annak megállapítása, hogy a szaporodásbiológiai zavarok hátterében milyen kóros élettani szaporodásbiológiai zavarok hátterében milyen kóros élettani folyamatok, esetleg takarmányozási problémák állnak.folyamatok, esetleg takarmányozási problémák állnak.

A vizsgálatok során alkalmazott módszerekA vizsgálatok során alkalmazott módszerek

LaboratóriumiLaboratóriumi endokrinológiai és szerológiaiendokrinológiai és szerológiai

szérum PSPB kimutatásaszérum PSPB kimutatása szérum P4 kvantitatív vizsgálataszérum P4 kvantitatív vizsgálata

klinikai kémiaiklinikai kémiai Szérum P, Ca, karbamid, glükóz, Szérum P, Ca, karbamid, glükóz,

tg, koleszterin, összfehérje, tg, koleszterin, összfehérje, karotin, ALT, LDH, ASTkarotin, ALT, LDH, AST

Klinikai szaporodásbiológiaiKlinikai szaporodásbiológiai rektális ultrahangrektális ultrahang rektális palpációrektális palpáció

A vemhességi fehérje (PSPB) A vemhességi fehérje (PSPB)

kimutatásának biológiai hátterekimutatásának biológiai háttere

Szaporodásbiológiai Szaporodásbiológiai vizsgálatokvizsgálatok

PlacentaPlacenta mikrobolyhok mikrobolyhok

Caruncle

Cotyledon

placentaplacenta

méhméh

kétmagvú kétmagvú óriás sejtekóriás sejtek

PSPB PSPB az anyai az anyai keringésbenkeringésben

A PSPB festődése a placentómábanA PSPB festődése a placentómában

Anyai placenta (Caruncula)

magzati placenta (Cotyledon)

A PSPB első kimutatása a szérumban (nap) a A PSPB első kimutatása a szérumban (nap) a termékenyítés utántermékenyítés után

TehenekTehenek

számaszáma

BioPRYNBioPRYNPregnant Ruminant Yes/NoPregnant Ruminant Yes/No

ELISAELISA Vemhességi TesztVemhességi Teszt

BioTracking LLC

SAMPLES LOG(S)_____________________________

DATE ______________ ELISA PROTOCOL PLATE#________________ Signature_____________________

Write sample numbers OD and pregnancy status in respective wells:

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

A Buffer

B VHS

C VHS

D PCS

E 0.039

F 0.039

G 0.0195

H 0.0195

A gyakorlatban 30-36 nap (heti egy alkalom) között történnek a vizsgálatok

0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

1 5 9 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 69 73

A szérum vemhességi fehérje A szérum vemhességi fehérje koncentrációk értékelésekoncentrációk értékelése

O DO D

Cutoff+10 %: embrióvesztés 25-35 nap között?? PSPB felezési idő: 2-3 nap

Szérum progeszteron koncentrációSzérum progeszteron koncentrációvizsgálatvizsgálat

1. Ciklusdiagnosztika az 1. Ciklusdiagnosztika az üresüres állatok nemi működésének állatok nemi működésének nyomon követésére. nyomon követésére.

2. A feltételezett 2. A feltételezett embrionális veszteségekembrionális veszteségek vizsgálatára vizsgálatára (a határértékhez közeli szérum PSPB szint esetén). (a határértékhez közeli szérum PSPB szint esetén).

EREDMÉNYEKEREDMÉNYEK

Endokrinológia, szerológia és Endokrinológia, szerológia és klinikai szaporodásbiológiaklinikai szaporodásbiológia

A szérum progeszteron eredmények A szérum progeszteron eredmények diagnosztikai értékelése 1.diagnosztikai értékelése 1.

Ciklusdiagnosztika:Ciklusdiagnosztika:

Tapasztalataink szerint kiegyensúlyozott takarmányellátottság Tapasztalataink szerint kiegyensúlyozott takarmányellátottság esetében az üres tehenek 2/3-a ciklikus petefészek-működéssel esetében az üres tehenek 2/3-a ciklikus petefészek-működéssel bír, míg 1/3-a nem mutat sárgatest aktivitást. bír, míg 1/3-a nem mutat sárgatest aktivitást.

Ha ez az arány eltolódik, ennek hátterében anyagforgalmi, Ha ez az arány eltolódik, ennek hátterében anyagforgalmi, takarmányozási problémák állhatnak.takarmányozási problémák állhatnak.

A szérum progeszteron eredmények A szérum progeszteron eredmények diagnosztikai értékelése 2.diagnosztikai értékelése 2.

(PSPB határérték + 10 %)(PSPB határérték + 10 %)

Progeszteron szérum koncentráció Feltételezett diagnózis< 2 ng/ml Valószínű embrióvesztés2 - 4 ng/ml Lehetséges embrióvesztés> 4 ng/ml Valószínű vemhes

A feltételezett és a tényleges magzati A feltételezett és a tényleges magzati veszteségek arányának alakulásaveszteségek arányának alakulása

szérum p4 feltételezett tényleges* üres vemhes koncentráció veszteség (db) veszteség (db) (%) (%)

<2 ng/ml 21 18 86 14,32-4 ng/ml 17 5 29 70,6>4 ng/ml 22 2 10 90

* Rektális palpációval megállapítva 60 nappal a termékenyítés után.

Embrionális és magzati veszteségek a Embrionális és magzati veszteségek a vemhesség 25 és 60. napja közöttvemhesség 25 és 60. napja között

15.54 %15.54 %118118Összes embrióvesztésÖsszes embrióvesztés (25-60 nap)(25-60 nap)

12.67%12.67%9393335-5-6060 nap nap kközöttiözötti eembrióvesztésmbrióvesztés

3.29 %3.29 %  252525-35 nap 25-35 nap kközöttiözötti embrióvesztés embrióvesztés

  759759A vizsgált vemhességek számaA vizsgált vemhességek száma

Az embrió- és magzatvesztések megoszlása a tejtermelés Az embrió- és magzatvesztések megoszlása a tejtermelés függvényében a vemhesség 25 és 60. napja közöttfüggvényében a vemhesség 25 és 60. napja között (r=0.93 P<0.001)

0.0

5.0

10.0

15.0

20.0

25.0

30.0

35.0

9 13.3 17.5 22.6 27.2 32.1 37.1 42 48.7tejtermelés kg

vesz

tesé

g %

Metabolikus (analitikai) Metabolikus (analitikai) vizsgálatokvizsgálatok

A vizsgálatok céljaA vizsgálatok célja

Alkalmasak-e a vemhességvizsgálatra beküldött minták az alábbi Alkalmasak-e a vemhességvizsgálatra beküldött minták az alábbi metabolikus paraméterek vizsgálatára: metabolikus paraméterek vizsgálatára:

P, Ca, karbamid, glükóz, tg, koleszterin, összfehérje, karotin, P, Ca, karbamid, glükóz, tg, koleszterin, összfehérje, karotin, ALT, LDH, AST ALT, LDH, AST

Eltérő mintakezelési protokollokat kontrolláltunk: Eltérő mintakezelési protokollokat kontrolláltunk:

Arra voltunk kíváncsiak, hogy a különböző tárolási Arra voltunk kíváncsiak, hogy a különböző tárolási körülmények (hőmérséklet, tárolási időtartam) befolyásolják-e körülmények (hőmérséklet, tárolási időtartam) befolyásolják-e a fenti paraméterek szérum koncentrációját illetve aktivitását?a fenti paraméterek szérum koncentrációját illetve aktivitását?

A tárolási körülmények hatása a vizsgált A tárolási körülmények hatása a vizsgált metabolikus paraméterekremetabolikus paraméterekre

A referencia érték: a frissen centrifugált mintaA referencia érték: a frissen centrifugált minta Vizsgált tárolási körülmények: Vizsgált tárolási körülmények:

hűtve tárolás (+4 C) hűtve tárolás (+4 C) fagyasztás (-20 C)fagyasztás (-20 C)

Tárolási időtartam (1-35 nap)Tárolási időtartam (1-35 nap)

EREDMÉNYEKEREDMÉNYEK

Klinikai kémiai vizsgálatokKlinikai kémiai vizsgálatok

A tárolási körülmények hatása a vizsgált A tárolási körülmények hatása a vizsgált metabolikus paraméterekremetabolikus paraméterekre

A vérszérum glükóz, karotin, összfehérje és karbamid A vérszérum glükóz, karotin, összfehérje és karbamid koncentrációját nem befolyásolja szignifikáns mértékben a koncentrációját nem befolyásolja szignifikáns mértékben a hosszan tartó fagyasztva tárolás.hosszan tartó fagyasztva tárolás.

A P, Ca, koleszterin triglicerid és a májenzimek csak friss A P, Ca, koleszterin triglicerid és a májenzimek csak friss mintából vizsgálhatók. mintából vizsgálhatók.

AA májenzimek (AST, ALT, LDH) aktivitása a vérszérumban a májenzimek (AST, ALT, LDH) aktivitása a vérszérumban a laktáció korai szakaszában a nagy tejtermelés miatt kialakuló laktáció korai szakaszában a nagy tejtermelés miatt kialakuló negatív energia egyensúly (NEB) miatt kóros mértékű, ezért negatív energia egyensúly (NEB) miatt kóros mértékű, ezért nem jelző értékű.nem jelző értékű.

Tervezett vizsgálatokTervezett vizsgálatok

Olyan, a szérumból vizsgálható metabolikus paraméterek analízisét Olyan, a szérumból vizsgálható metabolikus paraméterek analízisét tervezzük, amelyek segítségünkre lehetnek annak eldöntésében, tervezzük, amelyek segítségünkre lehetnek annak eldöntésében, hogy a vemhes vagy üres, ciklikus petefészek-működésű vagy hogy a vemhes vagy üres, ciklikus petefészek-működésű vagy sárgatest aktivitással nem rendelkező egyedek metabolikus sárgatest aktivitással nem rendelkező egyedek metabolikus paraméterei között tapasztalható-e különbség? paraméterei között tapasztalható-e különbség? Ennek kórjelző Ennek kórjelző értéke is lehetne.értéke is lehetne.

A fenti kérdéseink tisztázására szolgál az eddig ebben a témában A fenti kérdéseink tisztázására szolgál az eddig ebben a témában elnyert két pályázat: elnyert két pályázat:

A korai embrionális és magzati veszteségek állategészségügyi A korai embrionális és magzati veszteségek állategészségügyi prevenciójának lehetőségei szarvasmarha állományokbanprevenciójának lehetőségei szarvasmarha állományokban (NKFP).(NKFP).

A szaporasági mutatók javítása okszerű takarmányozással tejelő A szaporasági mutatók javítása okszerű takarmányozással tejelő szarvasmarha állományokban (GAK).szarvasmarha állományokban (GAK).

PublikációkPublikációkKözlemények:Közlemények:

Sasser G., Gábor Gy., Sasser G., Gábor Gy., Tóth FTóth F.: Korai vemhesség diagnosztizálása ELISA teszt .: Korai vemhesség diagnosztizálása ELISA teszt segítségével szarvasmarhában és egyéb kérődzőkben. Állattenyésztés és segítségével szarvasmarhában és egyéb kérődzőkben. Állattenyésztés és Takarmányozás, 2004. 53. 2. 164-165Takarmányozás, 2004. 53. 2. 164-165

Gábor György, Gábor György, Tóth FruzsinaTóth Fruzsina, Garth Sasser, Szász Ferenc, Bárány Imre, Wölfling , Garth Sasser, Szász Ferenc, Bárány Imre, Wölfling Anna, Völgyi-Csík József: Két ellés közötti idő csökkentésének Anna, Völgyi-Csík József: Két ellés közötti idő csökkentésének

lehetőségei lehetőségei tejelő szarvasmarha állományban I. Korai vemhességvizsgálat a tejelő szarvasmarha állományban I. Korai vemhességvizsgálat a Biopryn Biopryn ELISA teszt segítségével. Magyar Állatorvosok Lapja, 2004. 126. 8. 459- ELISA teszt segítségével. Magyar Állatorvosok Lapja, 2004. 126. 8. 459- 464. 464.

Gábor György, Gábor György, Tóth FruzsinaTóth Fruzsina, Szász Ferenc, Petró Tamás, Györkös István: Két , Szász Ferenc, Petró Tamás, Györkös István: Két ellés közötti idő csökkentésének lehetőségei tejelő szarvasmarha ellés közötti idő csökkentésének lehetőségei tejelő szarvasmarha állományban II. Ivarzás indukciós és ovuláció szinkronizálási eljárások. állományban II. Ivarzás indukciós és ovuláció szinkronizálási eljárások. Magyar Állatorvosok Lapja, 2004. 126. 11. 658-663. Magyar Állatorvosok Lapja, 2004. 126. 11. 658-663.

Fruzsina Tóth, György Gábor, Fan Huang, Garth R. Sasser: Prediction of the Fruzsina Tóth, György Gábor, Fan Huang, Garth R. Sasser: Prediction of the embryonic loss by Pregnancy-Specific Protein B (PSPB) ELISA test in dairy embryonic loss by Pregnancy-Specific Protein B (PSPB) ELISA test in dairy cattle. Biology of Reproduction, 2004. 258. SI 152. cattle. Biology of Reproduction, 2004. 258. SI 152.

György Gábor, György Gábor, Fruzsina TóthFruzsina Tóth and Miklós Mézes: Preliminary comparison of luteal and Miklós Mézes: Preliminary comparison of luteal cavity size with some serum metabolic parameters in dairy cows. Biology cavity size with some serum metabolic parameters in dairy cows. Biology

of of Reproduction, 2004. 790. SI 274.Reproduction, 2004. 790. SI 274.

Nemzetközi konferencia kiadványokban:Nemzetközi konferencia kiadványokban:

György Gábor, György Gábor, Fruzsina TóthFruzsina Tóth, Ferenc Szász: Pregnancy Specific Protein B , Ferenc Szász: Pregnancy Specific Protein B in Bull Fertility Analysis. In: Abstract book of 4th Biannual in Bull Fertility Analysis. In: Abstract book of 4th Biannual

Meeting Meeting Association for Applied Animal Andrology (AAAA), pp. 16-17., Association for Applied Animal Andrology (AAAA), pp. 16-17., 7-8 7-8 August 2004.Porto Seguro, BrazilAugust 2004.Porto Seguro, Brazil

F. Tóth, G. Gábor, F. Szász, Fan Huang and R.G. Sasser: Early pregnancy F. Tóth, G. Gábor, F. Szász, Fan Huang and R.G. Sasser: Early pregnancy detection by BIOPRYNdetection by BIOPRYNTMTM ELISA test in dairy cattle. In: Abstract ELISA test in dairy cattle. In: Abstract book of the 15 book of the 15 thth International Congress on Animal Reproduction, International Congress on Animal Reproduction,

Vol. Vol. 1. 73., 9-12 August 2004. Porto Seguro, Brazil1. 73., 9-12 August 2004. Porto Seguro, Brazil G. Gábor, G. Gábor, F. TóthF. Tóth and F. Szász: Influence of synchronized ovulation and and F. Szász: Influence of synchronized ovulation and

pre-synchronization on pregnancy rates used timed AI in lactating pre-synchronization on pregnancy rates used timed AI in lactating dairy cows. In: Abstract book of the 15 dairy cows. In: Abstract book of the 15 thth International Congress International Congress

on on Animal Reproduction, Vol. 2., 338., 9-12 August 2004. Porto Animal Reproduction, Vol. 2., 338., 9-12 August 2004. Porto Seguro, Seguro, BrazilBrazil

Köszönöm a figyelmet!Köszönöm a figyelmet!