uin syarif hidayatullah jakarta uji aktivitas...

UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA

UJI AKTIVITAS ANTIINFLAMASI EKSTRAK

RIMPANG TEMU GIRING (Curcuma heyneana Val.)

PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR Sparague

Dawley YANG DIINDUKSI KARAGENAN

SKRIPSI

Ridho Faiqyl Layaly

11141020000002

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH

JAKARTA

2018

i

UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA

UJI AKTIVITAS ANTIINFLAMASI EKSTRAK

RIMPANG TEMU GIRING (Curcuma heyneana Val.)

PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR Sparague

Dawley YANG DIINDUKSI KARAGENAN

SKRIPSI

Diajukan Sebagai Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi

Ridho Faiqyl Layaly

11141020000002

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH

JAKARTA

2018

ii UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

iii UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

iv UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

v UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

ABSTRAK

Nama : Ridho Faiqyl Layaly

Program Studi : Farmasi

Judul Skripsi : Uji Aktivitas Antiinflamasi Ekstrak Rimpang Temu

Giring (Curcuma heyneana Val.) Pada Tikus Putih Jantan

Galur Sparague Dawley yang Diinduksi Karagenan

Penelitian ini dilakukan untuk menguji aktivitas antiinflamasi secara in vivo ekstrak

etanol 70% rimpang temu giring (Curcuma heyneanea Val) menggunakan metode

udem buatan pada kaki telapak tikus dengan menginduksi karagenan. Kontrol negatif

diberikan suspensi NaCMC, kontrol postif diberikan natrium diklofenak dengan

dosis 5,14 mg/kgBB dan ekstrak etanol 70% rimpang temu giring dengan dosis 250

mg/kgBB 500 mg/kgBB, dan 750 mg/kgBB secara oral 1 jam sebelum diinduksi

karagenan. Dari hasil pengujian ektrak menunjukkan bahwa persentase inhibisi udem

maksimal berturut-turut adalah 60,1%, 70,9% dan 69,2% dari semua variasi dosis

pada penelitian ini, dosis efektif yang memiliki persentase inhibisi udem terbesar

yaitu dosis 500 mg/kgBB sebesar 70,9% pada jam ke 6, berdasarkan hasil analisa

statistik data persentase inhibisi udema ekstrak etanol temu giring menunjukkan

perbedaan yang bermakna ( ρ ≤ 0,05) dengan kontrol negatif.

Kata kunci : Rimpang Temu Giring, Curcuma Heyneana Val, antiinflmasi, karagenan

vi UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

ABSTRACT

Name Ridho Faiqyl Layaly

Mayor Pharmacy

Title Antiinflamatorry Effect Test of Rhizome Extract (Curcuma

heyneana Val.) In Carrageenan-induced White Male Sparague

Dawley Mice

The aim of study was to evaluate the in vivo antiinflamatory activity of 70% ethanolic

extract of rhizome Curcuma heyneana Val by using hind paw edema method with

carrragenan induksi. Suspension of NaCMC was used as negative control, Na

diclofenac at dose of 5,14 mg/kgBW used as positive control, and ethanol extract of

Curcuma heyneana with dose of 250 mg.kgBW, 500 mg/kgBW, 750 mg/kgBW was

administired orally 1 hour before the carrageenan induced. The result showed that

the maximal percent inhibition of pow edema was 60,1 %, 70.9% and 69.2% of all

dose variations, the effective dose have the largest percentage inhibition of paw

edema is a dose 500 mg/kgBW at 70.9% at 6 hours, based on the results of statistical

analysis, the percentage inhibition of edema of all the varians of dose ethanol extract

showed signifivcant difference ( ρ ≤ 0,05) with the negative control.

Keywords: Rhizome, Curcuma heyneana Val, Antiinflamatorry, carrageenan

vii UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

KATA PENGANTAR

Alhamdulillahirobbil’alamin, segala puji bagi Allah SWT atas segala nikmat

dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan

skripsi. Serta shalawat dan salam untuk baginda Nabi Muhammad SAW yang telah

membawa petunjuk bagi seluruh umat manusia, semoga kelak kita mendapatkan

syafaat beliau. Skripsi ini berjudul “uji aktifitas antiinflamasi ekstrak rimpang temu

giring (Curcuma heyneana Val.) pada tikus putih jantan galur Sparague Dawley

yang diinduksi karagenan” yang telah diajukan sebagai persyaratan untuk

memperoleh gelar Sarjana Farmasi Program Studi Farmasi FIK UIN Syarif

Hidayatullah Jakarta.

Dalam proses penelitian dan penyusunan skripsi ini penulis menyadari bahwa

penulisan skripsi ini tidak akan terselesaikan tanpa bantuan dari berbagai pihak. Oleh

karena itu, pada kesempatan ini perkenankan penulis menyampaikan rasa

terimakasih kepada:

1. Bapak Prof. Dr. Arief Sumantri, M. Kes selaku dekan Fakultas Ilmu

Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

2. Ibu Dr. Nurmeilis, M. Si., Apt selaku Ketua Program Studi Farmasi Fakultas

Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta

3. Bapak Yardi, Ph.D., Apt dan Ibu Ismiarni Komala, M. Sc. Ph.D, Apt. selaku

pembimbing yang memiliki andil besar dalam proses penelitian dan

penyelesaian skripsi ini.

4. Bapak dan ibu dosen Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan atas

ilmu yang telah diberikan kepada penulis.

5. Para staf karyawan dan laboran Program Studi Farmasi yang telah banyak

membantu selama berlangsungnya penelitian ini.

6. Bapak M. Yusfi Khalid, Ibu Herma Susilawati, Abror Murtadho, dan seluruh

keluarga besar yang selalu menjadi keluarga terhebat yang telah berjuang

keras membantu, mendo’akan dan mendukung penulis dengan sepenuh hati.

7. Nehta, Khoirunnisa, Nelly, Putri Nuzulia, Ayu rahmawati, Deki, Helmi,

Khairul Fadli, Suni, Firmansyah atas waktu yang diberikan serta

kebersamaannya dalam terwujudnya penelitian ini.

viii UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

8. Julius prabowo terima kasih atas segala bantuannya sebagai guru dan teman

dalam membantu penulis menyelesaikan penelitian ini.

9. Teman seperjuangan penelitian eksperimen 2014 terima kasih atas segala

bantuan dan semangat selama penelitian berlangsung.

10. Teman-teman Farmasi 2014 yang banyak membantu penulis selama masa

perkuliahan.

11. Teman-teman yang banyak membantu penulis selama masa perkuliahan.

12. Haka Asada, Fauziah, Maemunah terima kasih atas segala bantuan selama

penelitian berlangsung.

13. Serta kepada seluruh pihak yang telah membantu penulis selama penyusunan

skripsi ini yang namanya tidak dapat disebutkan satu persatu.

Penulis menyadari sepenuhnya bahwa skripsi ini masih memiliki banyak

kekurangan dan jauh dari kesempurnaan. Oleh karena itu, dengan segala kerendahan

hati penulis sangat mengharapkan kritik dan saran yang membangun demi

kesempurnaan skripsi ini.

Penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat dan dapat memberikan

sumbangan pengetahuan khususnya di Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu

Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta dan pembaca pada

umumnya.

Ciputat, 2018

Penulis

ix UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

x UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

DAFTAR ISI

HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS ............................................................... ii

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................................... iii

HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................................. iv

ABSTRAK ............................................................................................................................ v

ABSTRACT ......................................................................................................................... vi

KATA PENGANTAR ........................................................................................................ vii

HALAMAN PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI TUGAS AKHIR

UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIK .......................................................................... ix

DAFTAR ISI......................................................................................................................... x

DAFTAR TABEL ............................................................................................................. xiii

DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................................... xiv

BAB I ..................................................................................................................................... 1

PENDAHULUAN ................................................................................................................ 1

1.1. Latar Belakang ....................................................................................................... 1

1.2. Perumusan Masalah ............................................................................................... 4

1.3. Hipotesis ................................................................................................................ 4

1.4. Tujuan Penelitian ................................................................................................... 4

1.5. Manfaat Penelitian ................................................................................................. 4

BAB II ................................................................................................................................... 2

TINJAUAN PUSTAKA ....................................................................................................... 2

2.1. `Tanaman Temu Giring (Curcuma heyneana Val.) ............................................... 2

2.1.1. Klasifikasi ............................................................................................................ 2

2.1.2. Nama Lain ............................................................................................................ 2

2.1.3. Deskripsi Tanaman .............................................................................................. 2

2.1.4. Ekologi dan Penyebaran tanaman ........................................................................ 6

2.1.5. Kandungan Kimia ................................................................................................ 6

2.1.6. Khasiat ................................................................................................................. 8

2.2. Simplisia ..................................................................................................................... 8

2.3. Ekstrak ........................................................................................................................ 9

2.4. Ekstraksi .................................................................................................................... 10

2.4.1 Metode Ekstraksi................................................................................................ 10

xi UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.5. Inflamasi .............................................................................................................. 12

2.5.1 Definisi ............................................................................................................... 12

2.5.2 Tanda-Tanda inflamasi ...................................................................................... 12

2.5.3 Mekanisme Terjadinya Inflamasi ........................................................................ 13

2.5.4 Jenis Inflamasi ................................................................................................... 13

2.6. Obat-Obat Antiinflamasi ...................................................................................... 14

2.6.1. Antiinflamasi Steroid ......................................................................................... 14

2.6.2 Antiinflamasi Non Steroid ................................................................................. 14

2.6.3 Natrium diklofenak ............................................................................................ 15

2.7. Metode Uji Antiinflamasi .................................................................................... 16

2.8. Karagenan ............................................................................................................ 17

2.9. Tikus Galur Sparague Dawley ............................................................................. 18

BAB III ................................................................................................................................ 21

METODE PENELITIAN .................................................................................................. 21

3.1. Tempat dan waktu Penelitian ............................................................................... 21

3.2. Alat ....................................................................................................................... 21

3.3. Bahan ................................................................................................................... 21

3.3.1. Bahan Uji ........................................................................................................... 21

3.3.2. Bahan Kimia ...................................................................................................... 21

3.3.3. Hewan Uji .......................................................................................................... 22

3.4. Prosedur Kerja ..................................................................................................... 22

3.4.1. Pengujian Karakteristik Ekstrak ......................................................................... 22

3.4.2. Analisa Fitokimia Ekstrak .................................................................................. 22

3.4.3. Penyiapan Sediaan Uji ....................................................................................... 24

3.4.4. Uji Pendahuluan ................................................................................................. 25

3.4.5. Uji Efek Antiinflamasi ....................................................................................... 25

3.4.6. Analisis Data ...................................................................................................... 27

BAB 4………………………………………………………………………………….......29

HASIL DAN PEMBAHASAN………………………………………………………...…29

4.1. Hasil Penelitian......................................................................................................... 29

4.1.1. Rimpang Temu Giring........................................................................................29

4.1.2. Determinasi Tanaman ........................................................................................ 29

4.1.3. Pembuatan Simplisia...........................................................................................29

4.1.4. Ekstraksi..............................................................................................................29

xii UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

4.1.5. Penapisan Fitokimia ..................................................................................... 30

4.1.6. Parameter Spesifik ....................................................................................... 31

4.1.7. Uji Pendahuluan Dosis Ekstrak Rimpang Temu Giring ................................... 31

4.1.8 Analisa Data Statistik .......................................................................................... 40

BAB 4 .................................................................................................................................. 43

KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................................................... 43

5.1 Kesimpulan ............................................................................................................ 43

5.2 Saran ...................................................................................................................... 43

DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................................... 44

xiii UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

DAFTAR TABEL

Tabel 3.1 Kelompok Perlakuan Uji Antiinflamasi ............................................... 26

Tabel 4.1 Hasil Penapisan Fitokimia Ekstrak Etanol 70% Rimpang Temu

Giring .................................................................................................................... 30

Tabel 4.2 Hasil Penapisan Fitokimia Parameter Spesifik ..................................... 31

Tabel 4.3 Rata-rata Volume Udema Telapak Kaki tikus Setelah Diinduksi

Karagenan Pada Masing-masing Perlakuan ......................................................... 35

Tabel 4.4 Rata-rata Persentase Udema Telapak Kaki Tikus Setelah Diinduksi

Karagenan pada Masing-masing Perlakuan ......................................................... 36

Tabel 4.5 Rata-rata Persentase Inhibisi Udema Pada Telapak Kaki Tikus Pada

Masing-masing Perlakuan .................................................................................... 37

Tabel 4.6 Rata-rata Persentase Inhibisi Udema pada Telapak Kaki Tikus Pada

Masing-masing Perlakuan .................................................................................... 39

xiv UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 Alur pembuatan ekstrak etanol 70% temu giring ................................ 47

Lampiran 2 Alur kerja uji antiinflamasi .................................................................. 48

Lampiran 3 Konversi dosis hewan berdasarkan BSA ............................................. 49

Lampiran 4 Rumus Perhitungan Penentuan Jumlah Hewan Uji ............................. 50

Lampiran 5 Perhitungan dosis natrium diklofenak ................................................. 51

Lampiran 6 Hasil determinasi Rimpang Temu Giring (Curcuma heyneana Val.) . 52

Lampiran 7 Dokumentasi Pembuatan Ekstrak Rimpang Temu Giring (Curcuma

heyneana Val).......................................................................................................... 53

Lampiran 8 Dokumentasi Uji Penapisan Fitokimia Rimpang Temu Giring

(Curcuma heyneana Val)......................................................................................... 54

Lampiran 9 Keterangan Lolos Kaji Etik ................................................................. 56

Lampiran 10 Perhitungan dosis skrining ekstrak etanol 70% rimpang temu giring 57

Lampiran 11 Dosis Uji Antiinflamasi Ekstrak Rimpang Temu Giring ................. 59

Lampiran 12 Hasil Uji pendahuluan Ekstrak Etanol 70% Rimpang temu Giring . 61

Lampiran 13 Hasil Uji Antiinflamasi ..................................................................... 64

Lampiran 14 Hasil Statistik Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Rimpang Temu Giring

dengan Metode Udema pada Telapak Kaki ........................................................... 68

1

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

BAB I

PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Inflamasi merupakan respon biologis dari jaringan vaskuler atas adanya

bahaya seperti patogen, kerusakan sel atau iritasi. Ini adalah usaha perlindungan

diri organisme untuk menghilangkan rangsangan penyebab luka atau inisiasi proses

penyembuhan jaringan, jika inflamasi tidak ada maka luka dan infeksi tidak akan

sembuh dan akan mengalami kerusakan yang lebih parah. Inflamasi yang tidak

terkontrol juga dapat menyebabkan penyakit, seperti demam, atherosclerosis, dan

reumathoid artritis (Gard, 2001). Inflamasi adalah reaksi sistemik atau lokal dari

jaringan dan mikrosirkulasi terhadap gangguan patogen. Reaksi ini ditandai dengan

elaborasi mediator-mediator inflamasi serta pergerakan cairan dan leukosit dari

pembuluh darah ke dalam jaringan ekstravaskular. Respon inflamasi bertujuan

untuk melokalisasi dan mengeliminasi sel-sel yang terinfeksi, partikel asing,

mikroorganisme, dan antigen sehingga jaringan dapat kembali pada struktur dan

fungsi normal (Rubin, 2011).

Dewasa ini, banyak sekali obat yang digunakan dalam pengobatan

peradangan atau udema. Obat antiinflamasi steroid maupun non steroid misalnya,

memiliki banyak efek samping jika tidak digunakan dengan cara yang baik.

Penggunaan jangka panjang misalnya dapat menyebabkan berbagai macam

penyakit, diantaranya adalah tukak lambung, osteoporosis, bahkan bisa

memperberat penyakit diabetes militus, mudah terkena infeksi dan lemah otot,

sedangkan obat antiinflamasi non steroid sendiri misalnya dapat menyebabkan

tukak lambung atau sakit pada usus yang disertai dengan anemia akibat kehilangan

darah, serta bisa juga menyebabkan gangguan ginjal (Tjay, 2007). Oleh karena itu

perlu alternatif dari bahan alam yang bisa mengurangi efek samping obat atau obat

yang memiliki reaksi yang tidak diinginkan.

2


Tanaman jahe merupakan salah satu tumbuhan yang namanya disebut dalam

Al-Quran yang bunyinya sebagai berikut;

نُْوَقُسيَ ََ َالَيبَهَن َاَهجْاَيف َافيَ َاسَُأف اَهَيف

“Di dalam surga itu mereka diberi minum segelas (minuman) yang

campurannya adalah jahe.“ (QS: Al Insan (76 ) : 17 )

Diriwayatkan dari Ibnu Abbas tentang ayat diatas, bahwa “Kenikmatan-

kenikmatan yang telah disebutkan Allah dalam al Qur’an adalah yang namanya kita

kenal. Misalnya dia menyebutkan “minuman segar di campur zanjabil”, zanjabil

adalah nama untuk jahe, yaitu tanaman akar–akaran yang aromanya sangat disukai

oleh orang Arab (Faqih Imani, 2006).

Kemudian dalam kitab hadits juga disebutkan bahwa diriwayatkan dari Abu

Sa’id Al Khudri dia menceritakan “Raja Romawi pernah menghadiahkan kepada

Rasulullah Shallallahu ‘Alaihi Wassallam satu karung jahe. Beliau memberikan

kepada setiap orang satu potong untuk dimakan dan aku juga mendapatkan satu

potong untuk kumakan.” (HR: Abu Nuaim). Hadits tersebut juga menceritakan

bagaimana jahe merupakan tanaman yang aromanya disukai oleh orang Arab.

Temu giring (Curcuma heyneane) merupakan tanaman yang satu familia

dengan jahe, oleh karena itu tentunya komponen-komponen yang terkandung

mempunyai kesamaan dengan temu giring. Salah satu manfaat dari jahe adalah

sebagai antiinflamasi (DepKes RI, 1978), dengan demikian temu giring besar

kemungkinan memiliki efek yang sama, hal inilah yang menjadi salah satu landasan

peneliti untuk mencari bahan alam yang digunakan sebagai obat-obatan khususnya

obat antiinflamasi.

Temu giring banyak ditemukan tumbuh liar di hutan-hutan kecil atau ladang

dekat rumah penduduk terutama dikawasan Jawa Timur (Muhlisah, 2000).

Rimpang temu giring mengandung senyawa kurkumin yang dapat memberikan

warna kuning, minyak atsiri 0,8-3%, amilum, damar, lemak, tannin, saponin dan

flavonoid (Santoso, 2008). Dalam referensi yang lain juga ditemukan bahwa temu

3


giring ini mengandung minyak atsiri, kurkumin, tannin, saponin, flavonoid dan pati

(Wijayakusuma, 2002).

Dalam penelitian terdahulu menunjukkan bahwa temu giring memiliki

potensi sebagai antiinflamasi, dalam penelitian tersebut juga ditemukan tipe

sesquiterpen seperti germakron, dihidrokurdion, isokurkuminol, kurkumino,

kurkumanolid A dan B, zerumbon, dan oxykurkuminol, dimana aktivitas senyawa

tersebut menunjukkan antiinflamasi, antikanker dan memblok kanal Ca2+ (Aspollah

Sukari et al., 2010). Kemudian berdasarkan literatur lain, dimana telah mengisolasi

senyawa sesquiterpen yaitu zedoarondiol dari temu giring yang memiliki efek

sebagai antiinflamasi dengan mekanisme penghambatan iNOS, COX-2 dan sitokin

pro-inflamasi (Cho et al., 2009).

Pada familia Zingiberaceae sendiri terdapat hampir keseluruhan familia ini

mengandung zerumbon dimana zerumbon merupakan metabolit sekunder golongan

seskuiterpen monosiklik yang memiliki mekanisme kerja mirip dengan piroksikam,

sehingga potensial dalam menghambat inflamasi (M. N. Somchit, 2012), selain itu

pada familia yang sama diketahui bahwa familia Zingiberaceae memiliki aktivitas

antiinflamasi berdasarkan uji in vivo dengan menggunakan tikus sebagai

permodelan yang diketahui bahwa aktivitasnya melalui penghambatan enzim COX-

2 (Honmore et al., 2016). Oleh karena itu berdasarkan aktivitas biologisnya peneliti

ingin menggunakan ekstrak etanol 70% temu giring untuk diujikan kepada tikus

jantan yang di induksikan karagenan pada telapak kaki tikus jantan tersebut.

Sehubungan dengan sampai saat ini belum ditemukan jurnal terbaru yang

membahas aktivitas antiinflamasi dari ekstrak temu giring, maka dilakukan

penelitian untuk menguji aktivitas antiinflamasi dari temu giring yang dijadikan

sebagai salah satu pilihan dalam pengobatan antiinflamasi dan memiliki aktivitas

sebagai antiinflamasi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek antiinflamasi

ekstrak temu giring pada tikus jantan yang diinduksikan karagenan, ditinjau dari

penurunan volume udem, persentase penghambatnya dan nilai inhibisinya.

4


1.2. Perumusan Masalah

Apakah ekstrak etanol 70% rimpang temu giring memiliki efek

antiinflamasi pada tikus yang diinduksikan karagenan?

1.3. Hipotesis

Ekstrak etanol 70% rimpang temu giring memiliki efek antiinflamasi pada

pada tikus yang diinduksikan karagenan.

1.4. Tujuan Penelitian

Penelitian ini bertujuan untuk menguji efek antiinflamasi ekstrak etanol

70% rimpang temu giring terhadap penghambatan edema pada tikus yang

diinduksikan karagenan.

1.5. Manfaat Penelitian

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi dan menambah

wawasan tentang aktivitas ekstrak Temu giring, yang dapat dijadikan sebagai salah

satu alternatif untuk pengobatan antiinflamasi.

5 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1. `Tanaman Temu Giring (Curcuma heyneana Val.)

2.1.1. Klasifikasi

Klasifikasi tumbuhan Temu giring ( Curcuma heyneana Val) adalah sebagai

berikut:

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Subdivisi : Angiospermae

Kelas : Monocotyledonae

Ordo : Zingiberales

Famili : Zingiberaceae

Genus : Curcuma

Spesies : Curcuma Heyneana (BPOM RI, 2000).

2.1.2. Nama Lain

Temu giring merupakan tanaman yang tempat pertumbuhan utamanya ada

di Pulau Jawa. Nama umum atau nama daerah adalah temu poh (Bali), temu giring

(Jawa) (DepKes RI, 1989).

2.1.3. Deskripsi Tanaman

Terna berbatang semu, tinggi sampai 2 m, rimpang terbentuk dengan

sempurna, bercabang ke segala arah, kuat, bila dipotong bagian dalamnya berwarna

putih dan ditengah berwarna kekuningan. Jumlah helaian daun tiap pohon antara 2

helai sampai 9 helai, bentuk lonjong sampai lanset, pangkal lancip sampai luncip,

berwarna hijau keunguan di bagian tengah, ukuran panjang 31 cm sampai 80 cm;

6


lebar 10 cm sampai 18 cm; tangkai daun lokos atau berbulu, panjang 43 cm sampai

80 cm, daun pelindung banyak tersusun saling menuttupi, bentuk bundar telur

sungsang sampai bundar elips, ujung sempit, perbungaan lateral, berupa bulir,

tangkai ramping dan berbulu, panjang sampai 37 cm; di bawah bulir terdapat sisik

yang bentuknya seperti pita, ujung tumpul dan berbulu halus, ukuran panjang 8 cm

sampai 12 cm, lebar 2 cm sampai 3 cm; di bagian pangkal perbungaan terdapat daun

yang mirip sisik jumlahnya 4 helai; bulir berbentuk slinder, biasanya melebar pada

bagian ujung, panjang 9 cm sampai 23 cm, lebar 4 cm sampai 6 cm; daun pelindung

banyak, terusun saling menutupi, bentuk bundar telur sungsang sampai bundar elip,

ujungnya sempit; kelopak bunga berbulu warna putih atau putih dengan warna

merah pada gigiya, ukuran 8 mm sampai 13 mm; panjang mahkota bunga 4,5 cm,

bentuk helaian bundar telur atau lonjong, ujungnya tumpul, warnanya putih atau

putih dengan merah muda dibagian ujungnya; bibir bunga bentuk bundar atau

bundar telur sungsang, warna kuning atau putih dengan warna kuning atau kuning

jeruk dibagian tengahnya dan kadang-kadang merah di bagian tepinya; tabung

berwarna putih atau putih kekuningan dan dibagian lehernya berwarna merah

terang atau merah kecoklatan, panjang tangkai sarinya 3 mm sampai 8 mm, lebar

2,5 mm sampai 4,5 mm; panjang kepala sari 6 mm, warna putih; panjang stiloides

3 mm sampai 7 mm. buah bulu, panjang 2 cm (DepKes RI, 1989)

2.1.4. Ekologi dan Penyebaran tanaman

Temu giring merupakan tumbuhan asli Indonesia, ditanam ataupun tumbuh

liar khususnya di Pulau Jawa. Tumbuh pada ketinggian 5 m sampai 750 m di tempat

yang sedikit ternaung (DepKes RI, 1989).

2.1.5. Kandungan Kimia

Kandungan kimia rimpang temu giring antara lain adalah minyak atsiri,

kurkumin, tannin, saponin, flavonoid dan pati (Wijayakusuma, 2002). Rimpang

temu giring juga mengandung senyawa kurkumin yang dapat memberi warna

kuning. Di samping itu, rimpang temu giring mengandung minyak atsiri 0,8-3%,

amilum, damar, lemak, tannin, saponin dan flavonoid (Santoso, 2008)

7


1. Minyak Atsiri

Minyak atsiri yang mudah menguap ini terdiri dari campuran zat menguap,

dengan komposisi dan titik didih yang berbeda-beda. Setiap subtansi yang bisa

menguap memiliki titik didih dan tekanan uap tertentu dan hal ini dipengaruhi oleh

suhu.

Minyak atsiri yang bagian utamanya terpenoid terdapat pada fraksi atsiri

tersuling uap. Zat inilah penyebab harum, wangi dan bau yang khas pada banyak

tumbuhan.

Kegunaan minyak atsiri sebagai bahan antiseptik internal atau eksternal.

Bahan analgesik, hemolitik, atau sebagai enzimatik, sedatif atau stimulant untuk

sakit perut. Minyak atsiri mempunyai sifat membius, merangsang dan memuakkan.

Disamping itu beberapa jenis minyak atsiri dapat digunakan sebagai obat cacing

atau sebagai fungisida maupun bakterisida.

2. Tanin

Tanin merupakan salah satu jenis senyawa yang termasuk golongan

polifenol. Senyawa tannin banyak dijumpai pada tumbuhan. Tannin memiliki

peranan biologis yang kompleks. Hal ini dikarenakan sifat tannin yang sangat

kompleks mulai dari pegendap protein hingga pengkhelat logam. Tannin juga dapat

berfungsi sebagai antioksidan biologis (Hagerman, A.E; Zhoa, Y; & Johnson,

1997).

3. Kurkumin

Kurkumin adalah senyawa aktif yang ditemukan pada kunir berupa

polifenol dengan rumus kimia C12H20O6. Kurkumin merupakan salah satu produk

senyawa metabolit sekunder dari tanaman kunyit dan temulawak. Senyawa ini

merupakan golongan karatenoid yaitu pigmen (zat warna) yang larut dalam lemak

berwarna kuning sampai merah. Kurkumin termasuk golongan senyawa polifenol

dengan struktur 1,7 bis (4’hidroksi-3 metoksifenol)-1,6 heptadien 3,5-dion.

8


4. Flavonoid

Flavonoid merupakan salah satu metabolit sekunder, kemungkinan adanya

dalam daun dipengaruhi oleh adanya proses fotosintesis sehingga daun muda

belum terlalu banyak mengandung flavonoid.

Flavonoid merupakan senyawa preduksi yang baik, menghambat banyak

reaksi oksidasi, baik secara enzim maupun non enzim. Flavonoid bertindak

sebagai penampung yang baik radikal hidroksi dan superoksida dengan demikian

melindungi lipid membran terhadap reaksi yang merusak.

Kegunaan senyawa flavonoid menunjukan aktivitas biologi yang beragam

diantaranya sebagai antivirus, antihistamin, diuretik, antiinflamasi, antimikroba

dan antioksidan (Dewick, 2002).

2.1.6. Khasiat

Secara tradisional rimpang temu giring mempunyai beberapa khasiat antara

lain sebagai obat luka, obat cacing, obat sakit perut, obat pelangsing, memperbaiki

warna kulit, obat untuk mengatasi perasaan tidak tenang atau cemas, jantung

berdebar-debar, haid tidak teratur, obat rematik, menambah nafsu makan,

meningkatkan stamina, menghaluskan kulit, obat jerawat, obat cacar air dan obat

batuk (Wijayakusuma, 2002). Rimpang temu giring sering digunakan untuk

campuran lulur guna memperhalus dan memperkuning kulit. Temu giring juga

digunakan dalam ramuan jamu, khususnya untuk calon pengantin wanita agar

mampu mencegah rasa lelah selama upacara pernikahan. Selain itu, temu giring

juga berkhasiat untuk obat cacingan pada anak-anak, disentri, luka, bau badan dan

campak (Santoso, 2008).

2.2. Simplisia

Simplisia adalah bahan alamiah yang digunakan sebagai obat yang belum

mengalami proses pengolahan apapun juga kecuali dinyatakan lain, berupa bahan

yang telah dikeringkan (DepKes RI, 2000) Simplisia dikategorikan menjadi 3

macam yaitu simplisia nabati, simplisia hewani dan simplisia pelican (mineral)

(DepKes RI, 1978).

9


Simplisia nabati ialah simplisia yang berupa tanaman utuh bagian tanaman

atau eksudat tanaman. Eksudat tanaman ialah isi sel yang secara spontan keluar dari

tanaman atau isi sel yang dengan cara tertentu dikeluarkan dari selnya, atau zat-zat

nabati lainnya yang dengan cara tertentu dipisahkan dari tanamannya dan belum

berupa zat kimia murni (DepKes RI, 1978).

Simplisa hewani ialah simplisia yang berupa hewan utuh, bagian hewan atau

zat-zat berguna yang dihasilkan oleh hewan dan belum berupa zat kimia murni

(DepKes RI, 1978). Simplisia pelican (mineral) ialah simplisia yang berupa bahan

pelican (mineral) yang belum diolah atau telah diolah dengan cara sederhana dan

belum berupa zat kimia murni (DepKes RI, 1978).

2.3. Ekstrak

Ekstrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan proses mengekstraksi

zat aktif dari simplisia nabati atau hewani dengan menggunakan pelarut yang sesuai

kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang

tersisa diperlakukan sedemikian sehingga memenuhi baku yang telah ditetapkan

(DepKes RI, 2000).

Adapun faktor yang menentukan pengaruh pada mutu ekstrak berdasarkan

factor biologi, faktor kimia, faktor kimia ini dibagi lagi menjadi 2 yaitu faktor

internal dan faktor eksternal (DepKes RI, 2000).

1. Faktor biologi

Mutu ekstrak dipengaruhi dari bahan asal (tumbuhan obat) dari segi

biologisnya secara khusus dipandang dari identitas jenis, lokasi tumbuhan asal,

periode permanen, penyiapan bahan, umur tumbuhan dan bagian yang digunakan.

2. Faktor kimia

Mutu ekstrak dipandang secara khusus dari kandungan kimianya, yaitu:

a. Faktor internal, seperti jenis senyawa aktif dalam bahan, komposisi kualitas

senyawa aktif, kadar total rata-rata senyawa aktif.

10


b. Faktor eksternal, seperti metode ekstraksi, perbandingan ukuran alat

ekstraksi, pelarut yang digunakan dalam ekstraksi, kandungan logam berat,

ukuran kekerasan, dan kekeringan bahan (DepKes RI, 2000).

2.4. Ekstraksi

Ekstraksi adalah pemisahan zat aktif dari tanaman atau hewan dengan

menggunakan pelarut yang selektif melalui prosedur standar. Produk yang di

peroleh merupakan campuran metabolit yang relatif kompleks dalam bentuk cair,

semipadat atau bubuk kering (setelah menghilangkan pelarut) yang dimaksudkan

untuk penggunaan oral atau eksternal. Pelarut berdifusi ke dalam bahan padat dan

melarutkan senyawa dengan polaritas yang sama. Efektivitas ekstraksi senyawa

aktif dari tumbuhan bergantung pada sifat bahan tanaman, asal tanaman, proses

ekstraksi, kelembapan (kadar air) dan ukuran partikel (Tiwari et al, 2011).

Dalam proses ekstraksi ada beberapa metode ekstraksi yang dikenal.

Beberapa metode ekstraksi dengan menggunakan pelarut dibagi menjadi dua cara,

yaitu cara panas dan cara dingin (DepKes RI, 2000). Ekstraksi cara dingin meliputi

maserasi dan perkolasi, sedangkan ekstraksi cara panas meliputi sokletasi, refluks,

dekokta, infusa dan digesti.

2.4.1 Metode Ekstraksi

Berbagai metode ekstraksi yang dapat dilakukan sebagai berikut:

A. Ektraksi Cara Dingin

1. Maserasi

Maserasi dilakukan dengan merendam serbuk halus atau kasar tanaman

obat dengan pelarut dalam wadah tertutup selama jangka waktu tertentu dengan

beberapa kali pengocokan sampai bahan larut terlarut. Metode ini paling sesuai

digunakan untuk senyawa yang termolabil (Tiwari et al, 2011).

2. Perkolasi

Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai terjadi

penyarian sempurna yang umumnya dilakukan pada temperatur kamar. Proses

11


perkolasi terdiri dari tahapan pengembangan bahan, perkolasi antara, perkolasi

sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak) secara terus menerus sampai

diperoleh ekstrak (perkolat) (DepKes RI, 2000). Perkolasi merupakan prosedur

yang paling sering digunakan untuk mengekstrak bahan aktif dalam pembuatan

tinktur dan ekstrak cair (Tiwari et al, 2011).

B. Ekstaksi Cara Panas

1. Sokletasi

Sokletasi adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru sehingga

terjadi ekstraksi yang berlangsung terus-menerus (kontinyu) dengan adanya

pendinginan balik. Pelarut yang digunakan jumlahnya ralatif konstan (Depkes RI,

2000). Sokletasi ini dibutuhkan jika senyawa yang diinginkan memiliki kelarutan

terbatas pada pelarut dan pengotornya tidak larut dengan pelarut. Metode ini tidak

dapat digunakan untuk senyawa termolabil karena pemanasan yang berkepanjangan

dapat menyebabkan degradasi senyawa (Tiwari et al, 2011).

2. Refluks

Refluks adalah ekstraksi menggunakan pelarut pada temperatur titik

didihnya selama waktu tertentu dengan adanya pendinginan balik. Jumlah pelarut

terbatas yang relatif konstan (DepKes RI, 2000).

3. Infusa

Infusa adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas air

(bejana infus tercelup dalam penangas air mendidih) dengan temperatur 96-980C

selama waktu tertentu (15-20 menit) (DepKes RI, 2000).

4. Dekok

Dekok adalah infus pada waktu yang lebih lama (≥30 menit) dengan

temperatur titik didih air (DepKes RI, 2000). Metode ini digunakan untuk ekstraksi

senyawa yang larut dalam air dan stabil dengan pemanasan (Tiwari et al, 2011).

12


5. Digesti

Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinyu) pada

temperatur yang lebih tinggi dari temperatur ruangan (kamar), secara umum

dilakukan pada temperatur 40-500C (DepKes RI, 2000).

2.5. Inflamasi

2.5.1 Definisi

Inflamasi adalah merupakan respon biologis dari jaringan vaskuler atas

adanya bahaya, seperti patogen, kerusakan sel, atau iritasi. Ini adalah usaha

perlindungan diri organisme untuk menghilangkan rangsangan penyebab luka atau

inisiasi proses penyembuhan jaringan, jika inflamasi tidak ada maka luka dan

infeksi tidak akan sembuh dan akan mengalami kerusakan yang lebih parah,

inflamasi yang tidak terkontrol juga dapat menyebabkan penyakit, seperti demam,

atherosclerosis, dan reumathoid artritis (Gard, 2001). Proses inflamasi ini juga

merupakan suatu mekanisme perlindungan dimana tubuh berusaha untuk

menetralisir dan membasmi agen-agen berbahaya pada tempat cedera dan untuk

mempersiapkan penyembuhan pada jaringan yang rusak (Kee, 1996).

2.5.2 Tanda-Tanda inflamasi

a. Kemerahan (Rubbor)

Kemerahan terjadi pada tahap pertama terjadinya inflamasi akibat pelebaran

pembuluh darah pada jaringan yang mengalami gangguan menyebabkan darah

berkumpul pada daerah terjadinya luka atau cedera akibat pelepasan mediator

tubuh. Histamin mendilatasi arteriol.

b. Pembengkakan ( Tumor)

Proses pembengkakan terjadi setelah kemerahana. Pembengkakan ini

terjadi karena adanya plasma merembes ke dalam jaringan interstisial pada tempat

cedera.

13


c. Panas (Kalor)

Tahap ketiga dari gejala inflamasi adalah timbulnya rasa panas pada daerah

yang cedera. Hal ini disebabkan bertambahnya penggumpalan darah dan mungkin

juga diakibatkan oleh pirogen yang mengganggu pusat pengatur panas pada

hipotalamus.

d. Nyeri (Dolor)

Tahap terakhir terjadinya inflamasi adalah timbulnya rasa nyeri yang

disebabkan oleh pembengkakan dan pelepasan mediator mediator seperti

bradikinin, prostaglandin (Kee, 1996);(Pringgoutomo, 2000).

2.5.3 Mekanisme Terjadinya Inflamasi

Proses inflamasi terjadi awalnya dimulai dari stimulus yang akan

mengakibatkan kerusakan sel, sebagai reaksi atas kerusakan sel tersebut maka sel

tersebut akan mengaktifkan enzim fosfolipase untuk mengubah fosfolipid menjadi

asam arakidonat, kemudian asam arakidonat tersebut akan diaktifkan oleh beberapa

enzim diantaranya adalah enzim lipoksigenase dan enzim siklooksigenase, kedua

enzim ini akan mengakibatkan enzim arakidonat ini menjadi tidak stabil

(hidroperoksid dan endopeoksid) yang selanjutnya dimetabolisme menjadi

prostaglandin, prostasiklin, tromboksan, dan leukotrin yang bertanggung jawab

terhadap gejala peradangan dan rasa nyeri (Katzung, 2006).

2.5.4 Jenis Inflamasi

Jenis inflamasi sendiri dibagi menjadi 2 jenis, yaitu:

1. Inflamasi Akut

Pada inflamasi akut berlangsung singkat beberapa menit hingga beberapa

hari, dengan gambaran utama eksudasi cairan dan protein plasma serta emigrasi sel

leukosit terutama neutrophil. Tanda-tanda pokok peradangan akut berupa

kemerahan (rubbor), panas (kalor), nyeri (dolor) dan pembengkakan (tumor)

(Pringgoutomo, 2000).

14


2. Inflamasi Kronik

Inflamasi kronik terjadi bila penyembuhan pada radang akut tidak

sempurna, bila penyebabnya jelas menetap atau bila penyebab ringan dan timbul

berulang-ulang. Dapat pula diakibatkan oleh reaksi imunologik. Radang

berlangsung lama (berminggu-minggu sampai berbulan-bulan). Radang kronik di

tandai dengan lebih ditemukan sel limfosit, sel plasma, dan makrofag. Dan biasanya

disertai dengan pembentukan sel granulasi yang menghasilkan fibrosis. Contoh

inflamasi kronik adalah inflamasi akibat tuberkolosis (Pringgoutomo, 2000).

2.6. Obat-Obat Antiinflamasi

2.6.1. Antiinflamasi Steroid

Efek anti radang antiinflamasi steroid berhubungan dengan kemampuannya

untuk merangsang biosintesa protein lipomodulin yang dapat menghambat kerja

enzimatik fosfolipase sehingga mencegah pelepasan mediator nyeri seperti asam

arakidonat dan metabolitnya seperti prostaglandin, leukotrin, tromboksan dan

prostasiklin.

Obat golongan ini dapat memblokir jalur siklooksigenase dan lipoksigenase

sedangkan antiinflamasi non steroid (AINS) hanya memblokir siklooksigenase.

Oleh karena itu efeknya lebih baik dibandingkan dengan AINS, namun efek

sampingnya lebih berbahaya pada dosis tinggi dan penggunaanya lama (Tjay,

2007). Contoh obat antiinflamasi steroid yaitu hidrokortison, deksametason, dan

prednisone.

2.6.2 Antiinflamasi Non Steroid

AINS merupakan obat yang secara luas digunakan sebagai terapi penyakit

yang berkaitan dengan proses inflamasi. Selain memiliki efek antipiretik dan

analgesik. Mekanisme kerja golongan obat ini dengan menghambat enzim

siklooksigenase sehingga konversi asam arakidonat menjadi PGG2/PGH

(endoperoksid) terganggu. Setiap obat menghambat siklooksigenase dengan

kekuatan dan selektivitas yang berbeda, contoh obat AINS ini yaitu parasetamol,

aspirin, metampiron/antalgin, asam mafenamat, dan ibuprofen.

15


2.6.3 Natrium diklofenak

Pemerian dari natrium diklofenak ini berupa serbuk kristal higroskopis,

berwarna putih hingga kekuningan, mudah larut dalam methanol, larut dalam

etanol, sedikit larut dalam air dan praktis tidak larut dalam kloroform dan eter

(Sweetman, 2009) namun dalam referensi lain dikatakan bahwa kelarutannya

sangat larut dalam air, mudah laut dalam metanol, dan sedikit laut dalam aseton

(British Pharmacopeia, 2009).

Natrium diklofenak sendiri merupakan obat antiinflamasi nonsteroid yang

mempunyai aktivitas analgesik, antipiretik, dan antiradang. Senyawa ini merupakan

inhibitor siklooksigenase dan merupakan derifat fenilasetat yang daya

antiradangnya paling kuat dengan efek samping yang kurang dibandingkan dengan

obat lainnya. Obat ini sering juga digunkan untuk segala macam nyeri (Tjay, 2007)

(Gilman, 2003) (Katzung, 2006) Mekanisme kerja dari diklofenak ini adalah

dengan menghambat enzim siklooksigenase yang berperan dalam menghambat

metabolisme asam arakidonat menjadi prostaglandin yang merupakan salah satu

mediator inflamasi. Diklofenak sendiri menghambat enzim COX-2 (Altman et al,

2015). Absorbsi obat ini dalam saluran cerna berlangsung cepat setelah pemberian

oral. Waktu paruh obat ini cukup singkat, yakni 1-2 jam. Pemberian bersama

makanan dapat memperlambat laju absorbsi, tetapi tidak dapat mengubah jumlah

yang diabsorbsi (Gilman, 2003) efek samping yang lazim terjadi ialah mual,

gastritis, eritema kulit, dan sakit kepala, perdarahan lambung, pemakaian obat ini

harus dengan hati-hati pada pasien tukak lambung. Peningkatan aktivitas enzim

aminotransferase hati dalam plasma terjadi pada sekitar 15% pasien dan umumnya

kembali normal (Gilman, 2003);(Gan, 2007).

Dosis orang dewasa 100-150 mg sehari terbagi dua atau 3 dosis (Gan, 2007)

atau 25-50 mg 3 kali sehari ((Tjay, 2007).

16


2.7. Metode Uji Antiinflamasi

Beberapa metode uji antiinflamasi adalah sebagai berikut (Eo & Ms, 2012).

A). Induksi Karagenan

Pada metode ini tikus disuntikkan suspense karagenan 1% pada kakinya

secara subplantar untuk menginduksi terbentuknya udema. Senyawa uji diberikan

secara oral dan kemudian volume udema yang diukur dan dihitung persentase

inhibisi udema. Aktivitas senyawa uji dilihat dari kemampuannya menghambat

pembentukkan udema yang diinduksi pada kaki tikus.

B). Induksi xylen pada udema daun telinga

Pada metode ini tikus akan diinduksikan serotonin dengan mikropipet pada

kedua permukaan daun telinga kanannya satu jam setelah pemberian senyawa uji.

Telinga kiri digunakan sebagai kontrol. Ada dua parameter yang diukur pada

metode ini yaitu ketebalan dan bobot daun telinga tikus. Pengukuran ketebalan daun

telinga tikus dilakukan dengan menggunakan jangka sorong digital, sedangkan

untuk menentukan bobotnya, daun telinga tikus dipotong dan ditimbang kemudian

dibandingkan dengan kontrol.

C). Induksi Histamin

Metode induksi histamin hampir sama dengan metode induksi karagenan,

namun untuk menginduksi pembentukan udema tikus disuntikkan histamin 1%.

D) Induksi Serotonin

Pada metode ini tikus disuntikkan serotonin pada kakinya secara subpantar

untuk menginduksi terjadinya udema. Senyawa uji diberikan secara oral dan

kemudian volume udema diukur setiap 30 menit selama 3 jam. Aktivitas senyawa

uji dilihat dari kemampuannya menghambat pembentukan udema yang diinduksi

pada kaki tikus.

17


E) Induksi Formalin

Pada metode ini, inflamasi diinduksikan dengan menyuntikkan formalin 2%

pada kaki tikus secara subplantar. Ketebalan kaki tikus diukur sebelum dan sesudah

injeksi formalin. Pemberian senyawa uji dilakukan kontinyu selama 6 hari dan

udema diukur satu jam setelah pemberian senyawa setiap harinya.

2.8. Karagenan

Karagenan merupakan suatu hidrokoloid yang diperoleh melalui ekstrak

rumput laut merah kelas Rhodophyceae dengan air maupun alkali cair (Rowe,

Raymond C., 2009). Secara struktur karagenan adalah kompleks polisakarida yang

terbentuk dari monomer galaktosa yang terdiri dari tiga tipe yaitu lambda, kappa

dan iota (Morris, 2003).

Karagenan dikelompokkan berdasarkan posisi gugus sulfat dan ada atau

tidaknya anhidrogalaktosa. Karagenan tipe lambda merupakan polimer nongel yang

mengandung 35% ester sulfat dan mempunyai anhidrogalaktosa pada posisi 3 dan

6, sedangkan karagenan tipe iota merupakan suatu polimer gel yang mengandung

32 % ester sulfat dan mempunyai anhidrogalaktosa pada posisi yang sama.

Karagenan jenis kappa merupakan polimer gel kuat yang memiliki stuktur heliks

tersier yang menyebabkan pembentukkan gel. Karagenan kappa ini mengandung

ester sulfat 25% dan mempunyai anhidrogalaktosa pada posisi 3 dan 6 (Rowe,

Raymond C., 2009).

Respon inflamasi dapat diinduksi dengan berbagai macam metode, salah

satu metode uji antiinflamasi adalah metode dengan menggunakan karagenan.

Percobaan dengan metode karagenan ini sering digunakan untuk menguji aktivitas

antiinflamasi suatu obat (Rowe, Raymond C., 2009). Inflamasi yang terbentuk

dengan induksi karagenan berupa inflamasi akut dan nonimun (Morris, 2003).

Pemilihan karagenan sebagai agent penginduksi inflamasi berdasarkan pada

sifatnya yang antigenik dan tidak memberikan efek sistemik. Karagenan

menginduksi cedera sel sehingga melepaskan mediator yang mengawali proses

inflamasi. Setelah pelepasan mediator inflamasi akan terbentuk udema yang

18


mampu bertahan selama 5-6 jam dan berangsur-angsur pulih dalam waktu 24 jam

setelah injeksi (Hidayanti et al, 2008).

Pembentukan udema yang diinduksi oleh karagenan terjadi dalam dua fase

dan melibatkan beberapa mediator inflamasi (Necas, J. and Bartosikova, 2013).

Fase pertama terjadinya selama 3 jam setelah diinduksi karagenan yang ditandai

dengan terjadinya pelepasan mediator histamine, serotonin, bradikinin dan

peningkatan sintesis prostaglandin di sekitar jaringan yang luka. Fase kedua terjadi

mulai dari jam ketiga sampai jam kelima dan terjadi pelepasan prostaglandin,

protoase dan lisosom (Necas, J. and Bartosikova, 2013); (E.A, Asongalem; H.S,

Foye; S, Ekobo; T, 2004); (Silva G.N., 2005). Umumnya fase kedua ini sensitif

terhadap obat-obatan antiinflamasi (Onasanwo S.A., Fabiyi T.D., Ouwole F.S.,

2012).

2.9. Tikus Galur Sparague Dawley

Tikus merupakan hewan laboratorium yang banyak sekali digunakan dalam

penelitian dan percobaan antara lain untuk mempelajari pengaruh obat-obatan,

toksisitas, metabolism, embriologi, maupun dalam mempelajari tingkah laku

(Malole, M. B. M., 1989). Tikus putih atau yang dikenal dalam bahasa latin (Rattus

norvegicus) berasal dari Asia Tengah dan penggunaanya telah menyebar luas di

seluruh dunia (Malole, M. B. M., 1989).

Menurut Robinson (1979) Tikus putih ini memiliki taksonomi yang sebagai

berikut:

Kingdom : Animal

Filum : Chordata

Subfilum : Vertebrata (Craniata)

Kelas : Mamalia

Subkelas : Theria

Infrakelas : Eutharia

Ordo : Rodentia

Sub ordo : Myomorpha

19


SuperFamili : Muroidea

Famili : Muridae

Subfamili : Murinae

Genus : Rattus

Spesies : Rattus sp.

Tikus yang digunakan pada penelitian ini adalah tikus dengan galur Sprague

Dawley dengan ciri-ciri bertubuh panjang, berwarna putih, berkepala lebih sempit,

mata berwarna merah, telinga lebih tebal dan pendek dengan rambut halus dan ekor

lebih panjang dari badannya (Malole, M. B. M., 1989). Siklus hidup tikus Sprague

Dawley tidak jauh beda dengan tikus putih galur lainnya, yaitu jarang lebih dari 3

tahun. Berat badan pada umur 4 minggu dapat mencapai 35-40 gram dan setelah

dewasa rata-rata berat tikus antara 200-250 gram. Tikus jantan dewasa dapat

mencapai bobot badan 500 gram sedangkan tikus betina jarang lebih dari 350 gram

(Smith, J. W., 1988).

Kelebihan tikus Sprague Dawley sebagai hewan laborotarium adalah sangat

mudah ditangani, dapat ditinggal sendirian dalam kandang asal dapat mendengar

suara tikus lainnya dan berukuran cukup besar sehingga memudahkan pengamatan

(Smith, J. W., 1988).

Kebutuhan pakan bagi seekor tikus setiap harinya kurang lebih sebanyak

10% dari bobotnya jika pakan tersebut berupa pakan kering dan dapat ditingkatkan

sampai 15% dari bobot tubuhnya jika pakan yang dikonsumsi berupa pakan basah.

Kebutuhan minum seekor tikus setiap harinya kira-kira 15-30 mL air. Jumlah ini

dapat berkurang jika pakan yang dikonsumsi sudah banyak mengandung air (Smith,

J. W., 1988) rata-rata pemberian pakan harian untuk tikus Sparague Dawley selama

periode pertumbuhan dan reproduksi mendekati 15-20 gram untuk jantan dan 10-

15 gram untuk betina (Council, 1978).

Kandang yang digunakan untuk memelihara tikus berupa kotak yang terbuat

dari metal atau plastik. Tutup untuk kandang berupa kawat dengan ukuran lubang

1,6 cm2. Alas kandang terbuat dari guntingan kertas, serutan kayu, serbuk gergaji

20


atau tongkol jagung yang harus bersih, tidak beracun, tidak menyebabkan alergi

dan kering. Temperatur ideal kandang 18-27oC atau rata-rata 22oC dan kelembaban

relatif 40-70% (Malole, M. B. M., 1989).


BAB III

METODE PENELITIAN

3.1. Tempat dan waktu Penelitian

Penelitian ini dilakukan di laborotarium PNA dan Animal House FIKES

UIN Syarif Hidayatullah, berlangsung mulai dari Februari sampai dengan Agustus

2018.

3.2. Alat

Alat-alat yang digunakan antara lain blender, grinder seed, kapas, kertas

saring, evaporator, neraca analitik, pletismometer air raksa, hotplate, kandang

tikus, masker, sarung tangan, timbangan hewan, sonde, erlemeyer, gelas beker,

gelas ukur, tabung reaksi, batang pengaduk, spatula, kaca arloji, pipet tetes, label,

aluminium foil.

3.3. Bahan

3.3.1. Bahan Uji

Bahan utama yang digunakan pada penelitian ini adalah ekstrak etanol 70%

rimpang temu giring (Curcuma heyneana) yang diperoleh dari Balai Penelitian

Tanaman Rempah dan Obat (Balitro) pada bulan Agustus 2017 yang selanjutnya

dideterminasi di Herbarium Bogoriense (LIPI), Cibinong, Bogor.

3.3.2. Bahan Kimia

Penelitian ini akan menggunakan bahan kimia berupa karagenan sebagai

penginduksi udem, natrium diklorofenak sebagai pembanding, NaCl fisiologis

0,9%, aquades. Bahan penapisan fitokimia adalah etanol 70%, kloroform, asetat

anhidrat, asam sulfat, gelatin, pereaksi Mayer, pereaksi Dragendorf.

22


3.3.3. Hewan Uji

Hewan uji yang digunakan untuk penelitian adalah tikus jantan galur

Sparague Dawley (SD) dengan berat badan berkisar antara 170 -260 yang berumur

3-4 bulan diperoleh dari peternakan Institut Pertanian Bogor (IPB).

3.4. Prosedur Kerja

3.4.1. Pengujian Karakteristik Ekstrak

Uji parameter spesifik meliputi identitas dan organoleptis. Pada identitas

meliputi deskripsi tata nama (nama ekstrak, nama latin tumbuhan, bagian tumbuhan

yang digunakan, dan nama tumbuhan Indonesia). Pada organoleptis meliputi

deskripsi bentuk (padat, serbuk-kering, kental, cair dll), warna (kuning, coklat, dll),

dan bau (aromatik, tidak berbau, dll) menggunakan panca indera (Depkes RI, 2000).

3.4.2. Analisa Fitokimia Ekstrak

1) Uji Alkaloid

Ekstrak dilarutkan dengan larutan asam klorida encer, kemudian disaring.

Filtrat yang dihasilkan dapat dilakukan pengujian dengan cara Tes Mayer dan Tes

Dragendroff (Tiwari et al, 2011).

a. Tes Mayer

Filtrat dimasukkan ke dalam tabung reaksi, lalu ditambahkan reagen mayer

(potassium mercuri iodide). Terbentuknya endapan warna kuning menunjukkan

adanya senyawa alkaloid.

b. Tes Dragendroff

Filtrat dimasukkan ke dalam tabung reaksi, lalu ditambahkan reagen

dragendroff (larutan potassium bismuth iodide). Terbentuknya endapan warna

merah menunjukkan adanya senyawa alkaloid.

2) Uji Saponin

Ekstrak di uji dengan tes Foam dengan melarutkan ekstrak ke dalam 2 ml

aquades di dalam tabung reaksi, kemudian larutan dikocok. Terbentuknya foam

23


tidak kurang dari 10 menit menunjukkan adanya senyawa saponin (Tiwari et al,

2011).

3) Uji Tanin

Sebanyak 0,5 gram ekstrak dididihkan dalam 10 ml air di dalam tabung reaksi

dan kemudian disaring. Ditambahkan beberapa tetes FeCl3 0,1% dan diamati. Jika

terjadi perubahan warna hijau kecokelatan atau biru kehitaman menunjukkan

adanya senyawa tanin (Ayoola, et al, 2008).

4) Uji Fenol

Ekstrak di uji dengan tes Ferric Chloride. Ekstrak ditambahkan 3–4 tetes

larutan FeCl3. Terbentuknya warna hitam kebiru-biruan menunjukkan adanya

senyawa fenol (Tiwari et al, 2011).

5) Uji Flavonoid

Ekstrak diletakkan di dalam plat tetes lalu ditambahkan beberapa tetes NaOH.

Terbentuknya kuning intens yang jika ditambahkan dengan larutan asam, warna

kuning akan memudar, hal ini menunjukkan adanya senyawa flavonoid (Tiwari et

al, 2011).

6) Uji Steroid dan Terpenoid

a. Tes Salkowski

Sejumlah ekstrak dilarutkan dalam kloroform dan disaring. Kemudian filtrat

ditambahkan beberapa tetes asam sulfat dan dikocok. Terbentuknya warna merah

kecokelatan mengindikasikan adanya senyawa terpenoid (Ayoola, et al, 2008).

b. Tes Lieberman Buchard

Sejumlah ekstrak dilarutkan dalam kloroform dan disaring, filtrat

ditambahkan beberapa tetes asam asetat anhidrat, kemudian dipanaskan dan

didinginkan. Selanjutnya larutan ditambahkan beberapa tetes asam sulfat.

Terbentuknya cincin cokelat mengindikasikan adanya senyawa steroid (Tiwari et

al, 2011).

24


3.4.3. Penyiapan Sediaan Uji

a. Proses Ekstraksi

Pembuatan ekstrak temu giring menggunakan ekstraksi cara dingin yaitu

dengan maserasi menggunakan etanol 70% sebagai pelarut, serbuk simplisia

kemudian dimaserasi dengan pelarut etanol 70% hingga terendam dalam wadah

gelap dan sesekali digoyang-goyangkan. Proses maserasi ini dapat diulang

(remaserasi) hingga menghasilkan maserat yang berwarna pucat (mendekati tidak

berwarna). Maserat yang diperoleh difiltrasi mngguanakan kertas saring dan kapas.

Filtrat dipekatkan menggunakan vacuum rotary evaporator hingga didapatkan

ekstrak kental.

Ekstrak kental yang diperoleh dihitung persentase (%) rendemen ekstrak

dengan rumus:

% Rendemen ekstrak = 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖𝑝𝑒𝑟𝑜𝑙𝑒ℎ

𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑠𝑒𝑟𝑏𝑢𝑘 𝑠𝑖𝑚𝑝𝑙𝑖𝑠𝑖𝑎 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘𝑠𝑖 x 100%

b. Pembuatan Suspensi NaCMC 0,5% b/v (Kontrol Negatif)

Na CMC ditimbang sebanyak 0,25 gram lalu dikembangkan dengan 5 mL

aquades hangat (600C). Na CMC yang telah mengembang, digerus secara konstan

sampai terbentuk massa gel kemudian ditambahkan aquades secara perlahan hingga

50 mL. (perhitungan secara detail dapat dilihat pada lampiran 5).

c. Pembuatan Suspensi Natrium Diklofenak

Untuk dosis 5,14 mg/ 200 gram

Natrium diklofenak ditimbang sebanyak 10,28 mg, digerus perlahan dalam

lumpang hingga halus lalu ditambahkan 10 ml Na CMC 0,5% di aduk hingga

homogen lalu ditambahkan sampai batas volumenya, yaitu 20 mL. (perhitungan

secara detail dapat di lihat pada lampiran 4).

d. Pembuatan Suspensi Ekstrak Etanol 70% Rimpang Temu Giring

Ekstrak etanol rimpang temu giring dibuat dalam sediaan suspense Na CMC

0,5% dengan variasi dosis pendahuluan 10 mg/Kg BB, 100 mg/Kg BB, 1000 mg/Kg

25


BB. Ekstrak yang telah ditimbang untuk masing-masing dosis didispersikan dalam

3 mL suspensi Na CMC 0,5% yang telah dibuat sebelumnya lalu diaduk hingga

homogen dan ditambahkan sampai 6 mL, sediaan uji diberikan secara oral

menggunakan sonde. (Perhitungan secara detail dapat di lihat di lampiran 5).

e. Pembuatan Suspensi Karagenan 1%

Sebanyak 100 mg karagenan ditimbang lalu disuspensikan dalam 10 ml

larutan NaCl fisiologis 0,9% yang sebelumnya telah dipanaskan pada suhu 500C,

pengadukan dilakukan di atas hot plate menggunakan magnetic stirrer hingga

homogen.

3.4.4. Uji Pendahuluan

Uji pendahuluan dilakukan untuk mendapatkan dosis yang sesuai atau

mencari dosis yang efeknya dapat menghambat udema yang optimal pada hewan

uji. Uji dilakukan dengan menggunakan 8 ekor tikus yang menjadi dalam 4

kelompok yaitu kelompok kontrol negatif, dosis rendah (10 mg/kg BB), dosis

sedang (100 mg/kg BB), dosis tinggi (1000 mg/kg BB) dan udem dibuat dengan

menginjeksikan karagenan 1% sebanyak 0,2 ml. Masing-masing kelompok terdiri

dari dua tikus. Uji pendahuluan prosedurnya sama dengan uji efek antiinflamasi.

3.4.5. Uji Efek Antiinflamasi

a. Penyiapan Hewan Percobaan

Sebelum digunakan tikus diadaptasikan dengan lingkungan penelitian

selama ± tiga sampai empat minggu, semua tikus dipelihara dalam kondisi yang

sama, diberikan makanan berupa pellet dan air minum. Sebelum percobaan, tikus

dipuasakan selama ±18 jam dengan tetap diberi minum ad libitum.

Pada penelitian ini dilakukan pengelompokan secara acak, jumlah

keseluruhan tikus yang digunakan adalah 38 ekor tikus yang terbagi menjadi 6

kelompok. Masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor tikus sesuai dengan

General Guidelines for Methodologies on Research and Evaluation of Traditional

Medicine (WHO, 2000) dan dilebihkan 1 ekor tikus setiap kelompoknya. Rincian

kelompok perlakuan antiinflamasi dapat dilihat pada tabel 3.1.

26


Tabel 3.1 : kelompok perlakuan uji antiinflamasi

No Kelompok Jumlah pengulangan Perlakuan

1 Normal 5 Tanpa perlakuan

2 Kontrol negatif 5 Diberikan suspensi Na CMC 0,5 %

3 Kontrol Positif 5 Diberikan Na diklofenak dosis 5,14 mg/kg

BB dalam Na CMC 0,5 %

4 Dosis 1 5 Diberikan ekstrak temu giring (menunggu

dosis skrining) diberikan suspensi Na CMC

0,5%



0,5%



0,5%

Keterangan : Masing-masing kelompok di induksikan karagenan 1% sebanyak 0,2 ml kecuali

kelompok normal

b. Uji Aktivitas Antiinflamasi dengan Menggunakan Metode induksi Kara

genan Pada Telapak Kaki Tikus (Rustam, E., Atmasari, I., 2007).

1. Tikus dipuasakan sekitar ± 18 jam sebelum percobaan, namun air

minum tetap diberikan

2. Tikus dikelompokkan menjadi 6 kelompok secara acak masing-masing

kelompok terdiri dari 6 ekor tikus, kemudian ditimbang dan diberi kode

tertentu pada masing-masing tikus

3. Pada awal penelitian tikus diberikan tanda dengan spidol sebatas mata

kaki supaya ketika diukur batas kaki tikus ketika dimasukkan ke dalam

air raksa semua sama

4. Volume awal kaki tikus diukur sebelum diberi perlakuan dan dinyatakan

sebagai volume kaki dasar (Vo)

5. Kelompok kontrol negatif diberikan aquades 1 ml, kelompok kontrol

positif yang diberikan Na-diklorofenak dosis 5,14 mg/kg BB dan 3

27


kelompok uji dengan ekstrak di berikan sesuai dosis yag telah

ditentukan. (semua kelompok uji diberikan menggunakan rute oral).

6. Satu jam kemudian semua tikus di suntikan suspensi karagenan 1% pada

telapak kaki tikus sebanyak 0,2 ml. penyuntikan karagenan dilakukan

secara subplantar. Sebelum penyuntikan telapak kaki tikus dibersihkan

dengan menggunakan etanol 70%.

7. Setelah satu jam disuntikkan karagenan, volume kaki tikus di ukur

dengan menggunakan alat pletismometer setiap 1 jam sampai dengan

jam ke 6 dan dinyatakan sebagai volume akhir (Vo).

8. Dihitung persen udem dan persen inhibisi udem pada telapak kaki tikus.

3.4.6. Analisis Data

A). Persentase udem dan inhibisi udem

Analisa data yang dilakukan adalah dengan menghitung persen udem dan

inhibisi udem (Rustam et al. 2007, Utami et al. 2011, Swathy dan Kumar.,2010)

Keterangan :

Vt = Volume telapak kaki tikus tiap kelompok pada waktu t

Vo = Volume telapak kaki tikus tiap kelompok sebelum diberikan perlakuan apapun

Keterangan

a = Persentase udem pada kelompok negatif

b = Persentase udem pada kelompok perlakuan

B). Pengelolaan Data Statistik

Analisa data yang diperoleh akan diolah secara statistik dengan

menggunakan aplikasi analisis statistik. Pada analisa data ini dilakukan uji

Kolmogorov Smirnov untuk melihat normalitas data dan Uji Levene untuk melihat

homogenitas data. Jika data terdistribusi normal dan homogen maka akan

28


dilanjutkan dengan Analisa Varians (ANOVA) satu arah dengan taraf kepercayaan

95%. Apabila terdapat perbedaan bermakna, maka akan dilakukan uji Beda Nyata

Terkecil (BNT) /Least Significant Different (LSD) untuk melihat perbedaan antar

tiap kelompok perlakuan. Jika data tidak terdistribusi normal maupun homogen

maka dilanjutkan dengan Uji Kruskal Wallis untuk mengetahui adanya perbedaan.

Apabila terdapat perbedaan bermakna, dilakukan uji Mann Whitney untuk melihat

perbedaan antar tiap kelompok perlakuan (Dahlan, 2012).


BAB 4

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1. Hasil Penelitian

4.1.1. Rimpang Temu Giring

4.1.2. Determinasi Tanaman

Determinasi tumbuhan rimpang temu giring untuk kajian ini dilakukan di

Herbarium Bogoriense Bidang Botani, Puslit Biologi, LIPI, Cibinong, Bogor pada

tanggal 22 Desember 2017 dengan hasil determinasi membuktikan bahwa

tumbuhan yang digunakan yaitu tumbuhan Curcuma heyneana Val dengan famili

Zingiberaceae (Lampiran 6).

4.1.3. Pembuatan Simplisia

Sebanyak 10 kg rimpang temu giring segar yang diperoleh dari Balai

Penelitian Tanaman Rempah dan Obat (Balitro). Rimpang tersebut kemudian

disortasi, dicuci, dikering-anginkan, dan dihaluskan hingga diperoleh 1,6 kg serbuk

simplisia. Serbuk diekstraksi dengan metode maserasi. Prinsip dari metode ini

adalah mengekstraksi zat aktif dari tanaman dengan cara merendam serbuk

simplisia menggunakan pelarut atau cairan penyari yang sesuai pada suhu kamar

dan terlindung dari cahaya (Depkes RI, 2000).

4.1.4. Ekstraksi

Metode maserasi dipilih karena lebih tepat dibanding metode ekstraksi lain,

tanpa menggunakan panas sehingga faktor kerusakan pada zat aktif mampu

diminimalkan, pengerjaannya yang mudah, dan peralatannya sederhana. Maserasi

dilakukan beberapa kali pengadukan pada suhu ruang dengan menggunakan pelarut

etanol 70% hingga dihasilkan maserat yang berwarna lebih bening dibandingkan

maserat awal. Pelarut yang digunakan adalah etanol 70% karena dapat menarik

secara optimal senyawa mayor yaitu flavanoid yang bersifat polar, dan kemampuan

30


dalam menarik senyawa polar yang sama dengan metanol serta lebih aman

dibandingkan dengan pelarut metanol yang bersifat toksik (pertimbangan

keamanan ke hewan uji), selain itu, etanol 70% bersifat tidak toksik dan dapat

meminimalisasi pertumbuhan mikroorganisme selama ekstraksi (Depkes RI, 2000).

Selanjutnya, maserat yang diperoleh kemudian dipekatkan menggunakan

vacuum rotary evaporator agar terjadi pemisahan antara zat aktif dengan pelarut

berdasarkan perbedaan titik didihnya. Proses pemekatan menggunakan suhu rendah

yakni kurang lebih 380C agar tidak merusak kandungan zat aktif. Ekstraksi rimpang

temu giring menghasilkan ekstrak kental sebanyak 129,5 gram. Kemudian

dilakukan perhitungan persen rendemen sehingga didapatkan hasil yaitu sebesar

8,12 %.

4.1.5. Penapisan Fitokimia

Penapisan fitokimia dilakukan untuk mengetahui kandungan metabolit

sekunder yang terdapat dalam sampel. Hasil penapisan fitokimia yang dilakukan dapat

dilihat pada tabel berikut :

Tabel 4.1 Hasil penapisan fitokimia ekstrak etanol 70% rimpang temu giring

Identifikasi Metode Hasil Keterangan

Alkaloid Uji Meyer Tidak ada endapan putih. Negatif

alkaloid

Uji alkaloid Draggendorff Ada endapan coklat

kemerahan.

Flavonoid Alkaline reagent test Warna lebih pekat dari

sebelumnya

Positif

Flavonoid

Fenol Penambahan FeCl3 10% Tidak terbentuk warna

biru kehitaman

Negatif Fenol

Saponin Foam test Terbentuk busa yang

stabil

Positif saponin

Steroid/Triterpenoid Lieberm ann-Burchard Terbentuk cincin violet Positif

Terpenoid

Tannin Penambahan FeCl 0,1% Terbentuk warna hijau

kecokelatan

Positif Tannin

31


Berdasarkan hasil penapisan fitokimia (Tabel 4.1), ekstrak etanol 70%

rimpang temu giring positif mengandung senyawa alkaloid, terpenoid, tannin, dan

flavonoid. Berdasarkan buku Ragam dan Khasiat Tanaman Obat yang ditulis oleh

Santoso, dijelaskan bahwa rimpang temu giring (Curcuma heyneane) mengandung

senyawa kurkumin yang dapat memberikan warna kuning, minyak atsiri 0,8-3%,

amilum, damar, lemak, tannin, saponin dan flavonoid. Hal ini sesuai dengan uji

fitokimia yang diujikan.

4.1.6. Parameter Spesifik

Parameter spesifik merupakan proses standardisasi yang dilakukan untuk

menjamin mutu ekstrak. Parameter spesifik ekstrak yang dilakukan pada penelitian ini

yaitu identifikasi organoleptis meliputi bentuk, warna, dan bau yang menjadi karakter

spesifik ekstrak.

Tabel 4.2. Hasil Pengujian Parameter Spesifik

No Parameter Hasil

1 Identitas ekstrak

Nama latin tumbuhan

Nama Indonesia

Bagian tumbuhan yang digunakan

: Curcuma heyneana Val

: Temu Giring

: Rimpang

2 Organoleptis

Warna

Bentuk

Bau

Rasa

: kuning kecoklatan

: beruas-ruas

: Khas

: agak pedas, tebal

4.1.7. Uji Pendahuluan Dosis Ekstrak Rimpang Temu Giring

Inflamasi merupakan respon biologis dari jaringan vaskuler atas adanya

bahaya seperti patogen, kerusakan sel atau iritasi. Ini adalah usaha perlindungan

diri organisme untuk menghilangkan rangsangan penyebab luka atau inisiasi proses

penyembuhan jaringan, jika inflamasi tidak ada maka luka dan infeksi tidak akan

sembuh dan akan mengalami kerusakan yang lebih parah. Inflamasi yang tidak

32


terkontrol juga dapat menyebabkan penyakit, seperti demam, atherosclerosis, dan

reumathoid artritis (Gard, 2001). Penggunaan karagenan sebagai mediator

penginduksi karena karagenan ini merupakan senyawa iritan yang menginduksi

terjadinya cedera sel melalui pelepasan mediator yang mengawali proses inflamasi.

Pada saat terjadi pelepasan mediator inflamasi akan mengakibatkan terjadinya

udem dan bertahan beberapa jam. Inflamasi yang diinduksi karagenan ini ditandai

dengan pembengkakan, peningkatan rasa sakit dan sintesis prostaglandin hingga 4-

5 kali. Udem yang disebabkan induksi karagenan bertahan selama 6 jam dan

berangsur-angsur berkurang dalam waktu 24 jam (Taufiq et al,2008., Utami et al,

2011).

Pada penelitian antiinflamasi ini udema dibuat dengan cara menginduksi

telapak kaki tikus dengan suspensi karagenan 1% dengan volume penyuntikan 0,2

ml, pemilihan volume penyuntikan berdasarkan penelitian sebelumnya dimana

karagenan 0,2 mL signifikan (P0,05), induksi karagenan 1% 0,2 mL dapat menyebabkan udema lebih

lama dibandingkan terhadap kontrol negatif yang diberi NaCl 0,9% (Oktiwilianti,

Yurniarni, & Choesrina, 2015). Penelitian ini dilakukan selama 6 jam dan setiap

jam dilakukan pengukuran dengan menggunakan alat pletismometer air raksa yang

mempunyai ketelitian 0,01 ml dengan ketelitian tersebut diharapkan dapat

membaca ukuran dari udema dengan skala terkecil. kemudian karagenan yang

disuntikkan sudah bisa menunjukan terbentuknya pembengkakan dan udema yang

dapat teramati dengan jelas. Pada proses pengukuran volume udema dengan

menggunakan alat pletismometer dapat dipengaruhi oleh beberapa faktor,

diantaranya mengkondisikan hewan uji, pemberian batas yang jelas dengan spidol

pada mata kaki tikus, volume air raksa setiap penggunaan harus sama, kaki tikus

harus tercelup sempurna sampai tanda batas, dan adanya gelembung yang

mengakibatkan alatnya tidak bekerja sempurna dalam pengukuran.

Hewan uji yang digunakan adalah tikus putih jantan galur Sparague Dawley

dengan berat badan berkisar 170-270 gram dengan usia berkisar 3-4 bulan.

Pemilihan jenis kelamin jantan pada tikus agar tidak mempengaruhi hasil uji karena

dalam jurnal dikatakan bahwa tikus betina terdapat lebih banyak hormon estrogen

yang dapat meningkatkan inflamasi melalui mediator kimia (bradikinin) (Green et

33


al, 1999 dalam Ira sukaina, 2013) oleh karena itu dikhawatirkan hormon tersebut

akan mempengaruhi besarnya udema yang ditimbulkan pada telapak kaki tikus.

Sebelum dilakukan proses pengujian dilakukan proses aklimatisasi terlebih dahulu

selama ± 4 minggu agar hewan bisa beradaptasi dengan lingkungan.

Pada percobaan pendahuluan yang dilakukan ini bertujuan untuk mencari

dosis yang memiliki efek antiinflamasi dengan cara menghambat pembentukan

udem secara efektif terhadap hewan uji. Percobaan ini dilakukan pada 8 ekor tikus

yang dibagi menjadi 4 kelompok yaitu kelompok kontrol negatif, dosis rendah (10

mg/kgBB), dosis sedang (100 mg/kgBB) dan dosis tinggi (1000 mg/kgBB). Adapun

hasil pengukuran yang didapat adalah sebagai berikut

Gambar 1. Grafik Pengukuran Volume Udema Dosis Skrining

Pada grafik rata-rata volume udema kaki tikus diatas terlihat bahwa

kelompok kelompok yang diberikan induksi karagenan yaitu kelompok kontrol

negatif, dosis 10 mg/kg, dosis 100 mg/kg, dan 1000 mg/kg mengalami perubahan

volume udema kaki tikus. Kemudian setelah mendapatkan nilai rata-rata volume

udema maka dilakukan perhitungan untuk mendapatkan nilai persentase udema,

adapaun nilai dari hasil persentase udema adalah sebagai berikut

0

0,01

0,02

0,03

0,04

0,05

0,06

0,07

0 1 2 3 4 5 6Rer

ata

volu

me

ud

ema

(ml)

waktu (Jam)

Rerata pengukuran volume udema

kontrol negatif

dosis 10 mg/kg

dosis 100 mg/kg

dosis 1000 mg/kg

34


Gambar 2. Grafik Hubungan Persentase Udema Dengan Waktu

Dari grafik diatas terlihat kontrol negatif memiliki nilai persentase paling

besar dimana udema yang dihasilkan terus meningkat dan menurun di jam keenam,

hal ini membuktikan bahwa pemberian Na CMC tidak menghambat udema pada

kelompok kontrol.

Gambar 3. Grafik Pengukuran Persentase Inhibisi Dengan Waktu

Berdasarkan hasil yang diperoleh pada jam ke 3 dosis 10 mg/kgBB memiliki

persentase inhibisi udem sebesar 56,247 %, pada dosis 100 mg/kgBB sebesar

71,865 % dan pada dosis 1000 mg/kgBB sebesar 78,212 %. Dari data persentase

udem dapat disimpulkan bahwa pada dosis 100 mg/kgBB dan 1000 mg/kgBB

memiliki efek antiinflamasi yang lebih optimal sehingga dosis uji selanjutnya yang

digunakan adalah dosis 250 mg/kgBB, 500 mg/kgBB, dan 750 mg/kgBB.

0

20

40

60

80

100

120

140

0 1 2 3 4 5 6rera

ta p

erse

nta

se u

dem

(m

l)

waktu (jam)

Persentase udema

kontrol negatif

dosis 10 mg/kg

dosis 100 mg/kg

dosis 1000 mg/kg

0

20

40

60

80

100

0 1 2 3 4 5 6

per

sen

tase

inh

ibis

i (m

l)

waktu (jam)

Rerata persentase inhibisi

kontrol negatif

dosis 10 mg/kg

dosis 100 mg/kg

dosis 1000 mg/kg

35


4.1.7 Uji Antiinflamasi Dosis Ekstrak Rimpang Temu Giring

Setelah mendapatkan hasil dari uji skrining dosis maka dilanjutkan dengan

uji antiinflamasi yang dimana menggunakan 6 kelompok dimana setiap kelompok

terdiri dari 5 dan dilebihkan 1 tikus sesuai dengan General Guidelines for

Methodologies on Research and Evaluation of Tradisional Medicine (WHO, 2000)

Adapun kelompoknya adalah kontrol negatif, kontrol positif, dosis 250

mg/kgBB, dosis 500 mg/kgBB dan dosis 750 mg/kgBB. Tujuan adanya kelompok

kontrol negatif untuk membuktikan bahwa penggunaan zat pembawa tidak

memberikan efek penghambatan serta menjadi tolak ukur udema yang ditimbulkan

oleh kareganan tanpa pemberian sampel uji dan juga menjadi pembanding dengan

kelompok kontrol yang lain. Na CMC digunakan sebagai bahan pembawa karena

Na CMC memiliki kelebihan diantaranya adalah kejernihan tinggi, suspensi yang

dihasilkan stabil, bersifat inert, untuk pengental, stabilisator, pembentuk gel dan

beberapa hal sebagai pengemulsi (Fardiaz, 1987). Penggunaan natrium diklofenak

sebagai kontrol positif juga karna daya absorbs cepat dilihat dari waktu paruhnya

1-2 jam (Gilman, 2003).Kontrol positif pada pengujian ini bertujuan sebagai

pembanding dengan kontrol uji.

4.3 Rata-rata volume udema telapak kaki tikus setelah diinduksi karagenan pada masing-

masing perlakuan

Keterangan. KP = Kelompok Perlakuan; KN = Kontrol Negatif; KP = Kontrol Positif;

D1 = Dosis 250 mg/kgBB; D2 = Dosis 500 mg/kgBB; D3 = Dosis 750 mg/kgBB

KP Rata-rata volume udema (ml) setiap 1 jam selama 6 jam (ml)

0 1 2 3 4 5 6

KN 0,03±0 0,06±0 0,07±0 0,07±0,004 0,08±0,004 0,08±0,004 0,08±0

KP 0,03±0,004 0,05±0,005 0,06±0 0,07±0,007 0,07±0,005 0,06±0,005 0,06±0,005

D1 0,03±0,008 0,05±0,005 0,06±0,008 0,06±0,008 0,06±0,008 0,06±0,008 0,06±0,008

D2 0,03±0,005 0,05±0,005 0,05±0,005 0,05±0,004 0,05±0,005 0,05±0,005 0,05±0,004

D3 0,04±0 0,05±0,005 0,05±0,008 0,06±0,01 0,06±0,013 0,06±0,013 0,07±0,01

36


Gambar 4. Grafik Pengukuran Volume Udema

Pada pengukuran udema pada telapak kaki tikus diperoleh nilai rata-rata

volume udema yang dimana menunjukan bahwa volume udema pada kontrol

negatif mengalami kenaikan terus menerus dari jam 1 sampai dengan jam ke 5 dan

menurun pada jam ke 6. Pada kontol positif volume udema mengalami kenaikan

pada jam ke 1 sampai jam ke 4 dan mulai menurun pada jam ke 5. Kemudian pada

kelompok uji pada dosis 250 mg/kgBB dan 500 mg/kgBB volume udema

meningkat dari jam ke 1 sampai dengan jam ke 5 dan menurun pada jam ke 6

sedangkan pada dosis 750 mg/kgBB peningkatan dari jam ke 1 sampai jam ke 6

(gambar 4).

4.4 Rata-rata persentase udema telapak kaki tikus setelah diinduksi karagenan pada

masing-masing perlakuan



KP Rata-rata pengukuran persentase udema setiap 1 jam selama 6 jam (ml)

0 1 2 3 4 5 6

KN 0±0 100±0 133,33±0 159,99±14,90 173,32±14,91 173,32±14,91 166,66±0

KP 0±0 76,66±22,36 90,00±22,36 199,99±18,25 139,99±27,88 114,99±26,61 101,66±20,72

D1 0±0 45,66±22,28 66,33±23,28 66,33±23,28 71,33±21,51 71,33±21,51 66,33±23,28

D2 0±0 51,66±17,07 51,66±17,07 51,66±17,07 58,33±27,63 53,33±31,51 48,33±34,05

D3 0±0 35,00±13,69 40,00±22,36 50,00±25,00 55,00±32,59 60,00±33,54 75,00±25,00

0

0,01

0,02

0,03

0,04

0,05

0,06

0,07

0,08

0,09

0 1 2 3 4 5 6

rera

ta v

olu

me

ud

ema

(ml)

waktu (jam)

Rerata pengukuran volume udema

kontrol negatif

kontrol positif

dosis 250 mg/kg

dosis 500 mg/kg

dosis 750 mg/kg

37


Gambar 5. Grafik Pengukuran Persentase Udema

Dari data pengukuran persentase udema dapat dilihat bahwa kontrol negatif

memiliki persentase udema terbesar dimana nilai terbesar pada jam ke 4 sedangkan

ketiga dosis uji terjadi penurunan, pada kelompok kontrol positif terjadi penurunan

dibandingkan dengan kontrol negatif hal ini membuktikan bahwa udema yang

terjadi karena induksi karagenan mengalami penurunan dibandingkan dengan

kontrol negatif tanpa diberikan obat ataupun ekstrak.

Dari data persentase udema ini dapat dihitung persentase inhibisi udema,

adapun rata-rata persentase inhibisi udema dan standar devisiasi sebagai berikut.

4.5 Rata-rata persentase inhibisi udema pada telapak kaki tikus pada masing-masing

perlakuan

KP

Rata-rata pengukuran persentase inhibisi udema setiap 1 jam

selama 6 jam (ml)

0 1 2 3 4 5 6

KN 0±0 0±0 0±0 0±0 0±0 0±0 0±0

KP 0±0 23,33±22,36 32,49±16,77 24,99±16,57 19,66±18,71 34,65±13,71 39,99±10,60

D1 0±0 54,33±22,28 50,24±17,46 57,94±15,80 57,99±14,40 58,69±13,02 60,19±13,97

D2 0±0 48,33±17,07 61,24±12,80 66,99±13,30 66,99±13,30 69,32±18,43 70,99±20,43

D3 0±0 65,00±13,69 66,99±16,77 69,24±14,13 68,99±16,35 64,49±20,79 54,99±15,00



0

50

100

150

200

0 1 2 3 4 5 6

rera

ta p

erse

nta

se u

dem

(m

l)

Waktu (jam)

Rerata persentase udema

kontrol negatif

kontrol positif

dosis 250 mg/kg

dosis 500 mg/kg

dosis 750 mg/kg

38


Gambar 6. Grafik Pengukuran Persentase Inhibisi Udema

Dari data tersebut dapat dilihat bahwa kontrol negatif menunjukkan tidak

terdapat penghambatan udema sedangkan nilai persentase udema dari waktu ke

waktu mengalami kenaikan hal ini membuktikan bahwa pemberian NaCMC 0,5%

tidak memberikan pengaruh dalam menurunkan udema dan penyembuhan udema

hanya tergantung dari respon alami hewan uji. Kemudian pada kelompok kontrol

positif hasil uji statistik menunjukkan kontrol positif memiliki perbedaan bermakna

(p

39


jauh dibandingkan kontrol positif, kemampuan menghambat kontrol positif lebih

rendah daripada ketiga dosis yang di uji, oleh karena itu dilakukan pengujian

kembali pada dosis yang lebih rendah lagi yaitu dosis 10 mg/kgBB untuk menjadi

tolak ukur dalam dosis terkecil yang efektif sebagai inflamasi, adapun hasil yang

diperoleh adalah

4.6 Rata-rata persentase inhibisi udema pada telapak kaki tikus pada masing-

masing perlakuan


D1 = Dosis 10 mg/kgBB; D2 = Dosis 250 mg/kgBB; D3 = Dosis 500 mg/kgBB; D4

= Dosis 750 mg/kgBB.

Gambar 7. Grafik Pengukuran Persentase Inhibisi Udema

Dari data yang didapatkan setelah penambahan dosis 10 mg/kgBB nilai

inhibisi masih lebih baik dibandingkan dengan kontrol positif dengan nilai inhibisi

KP Rata-rata pengukuran persentase inhibisi udema setiap 1 jam selama 6 jam

0 1 2 3 4 5 6

KN 0±0 0±0 0±0 0±0 0±0 0±0 0±0

KP 0±0 23,33±22,36 32,49±16,77 24,99±16,57 19,66±18,71 34,65±13,71 39,99±10,60

D1 0±0 26,67±14,91 39,99±13,70 41,99±4,47 50,99±19,49 57,33±10,11 60,00±7,94

D2 0±0 54,33±22,28 50,24±17,46 57,94±15,80 57,99±14,40 58,69±13,02 60,19±13,97

D3 0±0 48,33±17,07 61,24±12,80 66,99±13,03 66,99±13,03 69,32±18,43 70,99±20,43

D4 0±0 65,00±13,69 66,99±16,77 69,24±14,13 68,99±16,35 64,49±20,79 54,99±15,00

0

10

20

30

uin syarif hidayatullah jakarta uji aktivitas...

Documents