UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN KOMBINASI EKSTRAK ETANOL

BUAH OYONG (Luffa acutangula (L.) Roxb.) DAN JAMUR TIRAM

(Pleurotus ostreatus) DENGAN METODE DPPH

(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl)

TUGAS AKHIR

Diajukan untuk memenuhi salah satu persyaratan

Memperoleh gelar Ahli Madya D3 Farmasi

Oleh :

DIANNE PARASWATI

NIM. M3512012

PROGRAM STUDI DIPLOMA 3 FARMASI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

SURAKARTA

2015

Uji Aktivitas Antioksidan Kombinasi Ekstrak Etanol Buah Oyong

(Luffa acutangula (L.) Roxb.) dan Jamur Tiram (Pleurotus ostreatus)dengan Metode DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl)

Dianne Paraswati Program Studi Diploma 3

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret

INTISARI

Antioksidan merupakan senyawa kimia yang dapat menyumbangkan satu atau lebih elektron (electron donor) kepada radikal bebas untuk menghambat reaksi radikal bebas. Buah oyong (Luffa acutangula (L.) Roxb.) dan jamur tiram (Pleurotus ostreatus) diduga berpotensi memiliki aktivitas antioksidan, namun aktivitas antioksidan ekstrak kombinasinya belum diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antioksidan kombinasi ekstrak etanol buah oyong (Luffa acutangula (L.) Roxb.) dan jamur tiram (Pleurotus ostreatus), nilai IC50dan nilai Combination Index (CI).

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium. Ekstrak etanol buah oyong (Luffa acutangula (L.) Roxb.) dan jamur tiram (Pleurotus ostreatus) diperkolasi dengan pelarut etanol 70%. Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl). Identifikasi kandungan fitokimia dan uji aktivitas antioksidan kualitatif dengan kromatografi lapis tipis (KLT). Uji aktivitas antioksidan kuantitatif dengan spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 516 nm dengan pembanding vitamin C. Hasil pengujian ekstrak buah oyong dan jamur tiram mengandung senyawa flavonoid, saponin, tanin, alkaloid dan terpenoid. Nilai CI dengan konsentrasi 1/4IC50:1/4IC50 yaitu 0,77, 1/2IC50:1/4IC50 yaitu 0,71, 1/4IC50:1/2IC50 yaitu 0,59, 1/2IC50:1/2IC50 yaitu 0,52. Kata kunci : Buah Oyong, Jamur Tiram, DPPH, IC50, Combination Index,

Antioksidan

Antioxidant Activity Test of Ethanolic Extract Combination of Oyong Fruit (Luffa acutangula (L.) Roxb.) and Oyster Mushroom (Pleurotus ostreatus)Using DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl) Method

Dianne Paraswati Diploma of Pharmacy,

Faculty of Mathematic and Sciences Sebelas Maret University

ABSTRACT

Antioxidant is chemical compound that can give one or more electron (electron donor) to free radical which can obstruct free radical reaction. Oyong fruit (Luffa acutangula (L.) Roxb.) and oyster mushrooms (Pleurotus ostreatus) were potential as antioxidant agent but the activity of its combination was unknown. The aim of this study was to know antioxidant activity of ethanolic extract of oyong fruit (Luffa acutangula (L.) Roxb.) and oyster mushrooms (Pleurotus ostreatus), IC50 value and Combination Index (CI) value.

This research was experimental laboratorium. The extraction using percolation method with ethanol 70 % as solvent. Antioxidant activity test using DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl) method. Identification of phythochemistry contains and the qualitative antioxidant activity had been done byThin Layer Chromatography (TLC). The quantitative antioxidant activity test had been done by ultraviolet visible spectrofotometric at maximum wavelenght of 516 nm with vitamin C as comparator.

The result show that extract of oyong fruit and oyster mushroom, both of them contained of flavonoids, saponins, tannins, alkaloids, and terpenoids. Concentration of CI value 1/4IC50:1/4IC50, 1/2IC50:1/4IC50, 1/4IC50:1/2IC50, 1/2IC50:1/2IC50was 1,52; 0,50; 0,72; and 0,22. Keywords : Oyong fruit, Oyster mushrooms, DPPH, IC50, Combination Index,

Antioxidant

MOTTO

Sebuah lilin masih akan menyala walaupun apinya diambil untuk menyalakan

seribu lilin lainnya. Kebahagiaan tidak akan pernah berkurang karena dibagi

( Siddarta Gautama )

Kamu tidak dapat mengajari seseorang apa pun, kamu hanya bisa

membantunya menemukan apa yang ada dalam dirinya sendiri

(Galileo Galilei)

Keberhasilan seseorang ditentukan oleh dirinya sendiri, orang lain tidak

mampu untuk menentukan keberhasilanmu, tetapi setidaknya kamu bisa

menjadi yang terbaik untuk dirimu sendiri dan berguna untuk orang lain

(Dianne Paraswati T)

PERSEMBAHAN

Tugas akhir ini kupersembahkan untuk ....

Papa dan Mama yang selalu memberikan semangat,

kasih sayang, dan dukungan serta doa-doanya

selama ini.

Ibu Anif Nur Artanti M.Sc.,Apt yang telah

memberikan motivasi, bimbingan, ilmu dan

pengalamannya.

dr. Wahyu Julianda yang selalu memberi semangat

dan memotivasiku dengan penuh kesabaran.

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah

melimpahkan rahmat dan karunia-Nya sehinggasaya dapat menyelesaikan Tugas

Akhir berjudul “Uji Aktivitas Antioksidan Kombinasi Ekstrak Etanol Buah Oyong

(Luffa acutangula (L.) Roxb.) dan Jamur Tiram (Pleurotus ostreatus) dengan

Metode DPPH (1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazyl)”dengan baik dan lancar.

Penyusunan Tugas Akhir merupakan salah satu syarat untuk dapat memperoleh

gelar Ahli Madya Farmasi di Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Dalam penulisan Tugas Akhir ini penulis

telah berusaha semaksimal mungkin untuk memberikan hasil yang terbaik.

Pelaksanaan tugas akhir ini tidak mungkin dapat terselesaikan jika tanpa adanya

bimbingan, dorongan, semangat, harapan dan motivasi serta bantuan baik moril

maupun materiil, dan do’a dari berbagai pihak. Penulis pada kesempatan ini

mengucapkan terima kasih kepada:

1. Prof. Ir. Ari Handono Ramelan, M.Sc. (Hons), Ph.D, selaku Dekan Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta.

2. Ibu Estu Retnaningtyas N., S.TP., M.Si selaku Ketua Program Studi D3 Farmasi

Universitas Sebelas Maret Surakarta.

3. Ibu Anif Nur Artanti, M.Sc., Apt selaku pembimbing Tugas Akhir atas segala

kesabaran dan keikhlasannya dalam memberikan arahan, bimbingan, dan saran.

4. Ibu Nestri Handayani, M.Si.,Apt selaku pembimbing akademik yang telah

memberikan motivasi, arahan, bimbingan, saran, motivasi dan ilmunya.

5. Yang terkasih Papa, dan Mamayang telah memberikan doa, penuh

dukungan dan semangat.

6. Sahabat- sahabat seperjuangan khususnya Diah Rakhmawati, Endhayanti

Oktovia, Esdha Titis, Naim Anggraita, Foury Christya, Wahyu Siamsiana,

Murni Ayut dan teman-teman sepenelitian yaitu Nissya Arienda, Astrid

Octaviani, Kartika Monikasari, Rika Triyoga, Suci, Yulfanah Diany dan

Farmasi 2012yang telah berbagi suka dan duka serta pengalaman selama

masa-masa kuliah.

7. dr. Wahyu Julianda yang telah memberikan semangat, dan memotivasiku

dengan kesabaran. Adikku Fajar Nur Hayati yang telah memotivasi.

8. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu, yang telah

membantu pelaksanaan dan penyusunan Tugas Akhir ini.

Penulis menyadari masih banyak kekurangan dalam penulisan

Tugas Akhir ini. Untuk itu penulis mengharapkan adanya kritik dan saran

yang membangun dari semua pihak untuk perbaikan sehingga akan

menjadi bahan pertimbangan dan masukan untuk penyusunan tugas-tugas

selanjutnya. Penulis berharap semoga Tugas Akhir ini dapat bermanfaat

bagi pembaca pada umumnya dan dapat menjadi bekal bagi penulis dalam

pengabdian Ahli Madya Farmasi di masyarakat pada khususnya.

Surakarta, 10 Juli 2015

Penulis

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL........................................................................................ i

HALAMAN PENGESAHAN.......................................................................... ii

HALAMAN PERNYATAAN......................................................................... iii

INTISARI......................................................................................................... iv

ABSTRACT...................................................................................................... v

HALAMAN MOTTO...................................................................................... vi

HALAMAN PERSEMBAHAN...................................................................... vii

KATA PENGANTAR .................................................................................... viii

DAFTAR ISI....................................................................................................

DAFTAR TABEL ...................................................................................................

DAFTAR GAMBAR.........................................................................................

DAFTAR LAMPIRAN.....................................................................................

DAFTAR SINGKATAN.........................................................................................

BAB 1 PENDAHULUAN .................................................................................

1.1. Latar Belakang.............................................................................................

1.2 Perumusan Masalah.....................................................................................

1.3. Tujuan Penelitian........................................................................................

1.4. Manfaat Penelitian.......................................................................................

ix

x

xi

xii

xiii

1

4

5

5

5

BAB 2 LANDASAN TEORI ....................................................................................

2.1. Tinjauan Pustaka................................................................................................

2.1.1 Tanaman Oyong..............................................................................................

2.1.1. Klasifikasi Tanaman Oyong.............................................................................

2.1.2. Nama lain Tanaman Oyong..............................................................................

2.1.3. Morfologi Tanaman Oyong.............................................................................

2.1.4. Kandungan Kimia Tanaman............................................................................

2.1.5. Khasiat............................................................................................................

2.2. Jamur Tiram.....................................................................................................

2.2.1. Klasifikasi Tanaman.........................................................................................

2.2.2. Morfologi Jamur Tiram.......................................................................................

2.2.3. Kandungan Kimia Jamur Tiram ........................................................................

2.2.4. Khasiat........................................................................................... .....................

2.3. Ekstrak dan Ekstraksi............................................................................................

2.3.1 Cara Dingin....................................................................................................

2.3.1.1 Maserasi.........................................................................................................

2.3.1.2 Perkolasi..........................................................................................................

2.4. Kromatografi.........................................................................................................

2.4.1. Kromatografi lapis tipis.....................................................................................

2.4.1.1. Fase diam.................................................................................................

2.4.1.2. Fase gerak.................................................................................................

2.4.1.3. Metode Deteksi...........................................................................................

ii

iii

v

vi

vii

1

4

5

5

6

5

7

11

12

12

12

13

13

14

14

14

15

15

8

8

9

9

9

9

10

11

7

7

8

2.5. Radikal Bebas.................................................................................................. 16

2.5.1. Mekanisme Kerja Terbentuknya Radikal Bebas..................................... 16

2.5.2 Mekanisme Pertahanan Tubuh................................................................. 19

2.6. Antioksidan..................................................................................................... 19

2.6.1. Jenis Antioksidan.................................................................................... 19

2.6.2. Sumber Antioksidan................................................................................

2.7 Uji Aktivitas Antioksidan.................................................................................

2.7.1 Penentuan aktivitas antioksidan dengan metode DPPH....................

2.7.2 Aktivitas Peredaman Radikal Superoksida..........................................

2.7.3 Aktivitas Penghambatan Radikal Hidroksil.........................................

2.7.4 Metode Kekuatan Pereduksi................................................................

2.7.5 Metode ABTS......................................................................................

2.7.6 Metode FRAP......................................................................................

2.8 Spektrofotometri UV- VIS................................................................................

2.2 Kerangka Pemikiran................................................................................................

2.3 Hipotesis..................................................................................................................

BAB 3 METODE PENELITIAN.............................................................................

3.1. Jenis Penelitian....................................................................................................

3.1 Alat dan Bahan.....................................................................................................

3.1.1 Alat................................................................................................................

3.1.2 Bahan.................................................................................................

3.2 Waktu dan Tempat Penelitian.......................................................................

20

21

21

22

22

23

23

25

26

27

27

28

28

28

29

19

20

3.2.1. Waktu Penelitian.......................................................................

3.2.2. Tempat Penelitian......................................................................

3.3. Prosedur Penelitian............................................................................

3.3.1. Pengumpulan dan Pengelolaan sampel......................................

3.3.2. Determinasi Sampel...................................................................

3.3.3 Penyiapan Bahan........................................................................

3.3.4. Pembuatan Ekstrak......................................................................

3.3.5 Kontrol kualitas ekstrak..............................................................

3.3.6 Identifikasi Kandungan Kimia.....................................................

3.3.6.1. Uji Flavonoid...........................................................................

3.3.6.2. Uji Saponin................................................................................

3.3.6.3. Uji Tanin...................................................................................

3.3.6.4. Uji Antrakuinon.........................................................................

3.3.6.5. Uji Alkaloid...............................................................................

3.3.6.6. Uji Terpenoid...............................................................................

3.3.7. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak..................................................

3.3.7.1 Pembuatan Larutan DPPH...........................................................

3.3.7.2 Pembuatan Larutan Blanko.........................................................

3.3.7.3 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Pengukuran...........

3.3.7.4 Operating Time Larutan DPPH 0,004%.....................................

3.3.7.5 Pengujian Aktivitas Antioksidan terhadap Ekstrak dan Vitamin C

3.3.7.6 Pengujian Aktivitas Antioksidan.............................................

31

31

32

32

32

33

33

34

34

34

34

35

35

35

35

36

36

36

36

36

36

36

3.3.7.7 Pengukuran Serapan Sampel..................................................

3.3.8 Pembuatan Larutan Kombinasi Ekstrak..................................

3.3.9 Pengukuran Aktivitas Antioksidan Kombinasi Ekstrak..........

3.3.10. Uji Kualitatif Antioksidan......................................................

3.3.11 Analisa Data............................................................................

BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN ..................................................

4.4.1 Hasil Determinasi dan Tahap Ekstraksi.................................

4.1.2 Hasil Identifikasi Kandungan Kimia......................................

4.1.3 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak................................

4.1.3.1 Uji kualitatif antioksidan.....................................................

4.2 PEMBAHASAN.............................................................................

4.2.1 Determinasi Tanaman..............................................................

4.2.2 Preparasi Bahan.......................................................................

4.2.3 Perkolasi..................................................................................

4.2.4 Uji kuantitatif antioksidan menggunakan metode DPPH ....

4.2.4.1 Penentuan panjang gelombang maksimum DPPH...............

4.2.4.2 Penentuan Operating time ....................................................

4.2.4.3 Analisa Data Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Tunggal

Oyong dan Jamur Tiram.........................................................

4.2.4.4 Uji Aktivitas Antioksidan Kombinasi Oyong dan Jamur

Tiram......................................................................................

46

46

46

47

48

49

49

50

50

56

37

37

39

39

40

44

44

46

46

4.2.4.5 Uji Aktivitas Antioksidan Kombinasi Ekstrak Oyong dan

Jamur Tiram pada Aplikasi Persamaan Tunggal.................... 60

BAB 5 KESIMPULAN..................................................................... 63

5.1 Kesimpulan............................................................................. 63

5.2 Saran....................................................................................... 63

DAFTAR PUSTAKA........................................................................ 64

LAMPIRAN....................................................................................... 68

DAFTAR TABEL

Tabel I. Perbandingan Nilai IC50 Hasil Perhitungan dan Hasil SPSS

Probit.......................................................................................

Tabel II. Konsentrasi Kombinasi Pada Ekstrak Oyong dan Jamur

Tiram.......................................................................................

Tabel III. Konsentrasi Kombinasi Ekstrak Oyong, dan Jamur Tiram

pada aplikasi persamaan tunggal..............................................

Tabel IV. Interpretasi Sifat Senyawa Ekstrak...........................................

55

56

60

61

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Buah Oyong (Luffa acutangula (L.)Roxb.).....................................

Gambar 2. Jamur Tiram (Pleurotus ostreatus)..................................................

Gambar 3. Mekanisme Antioksidan.................................................................

Gambar 4. Ekstrak Etanol Buah Oyong...........................................................

Gambar 5. Ekstrak Etanol Jamur Tiram............................................................

Gambar 6. Hasil Uji Identifikasi Kimia Ekstrak Buah Oyong.........................

Gambar 7. Hasil Uji Identifikasi Kimia Ekstrak Jamur Tiram.........................

Gambar 8. Reaksi Reduksi DPPH oleh Senyawa Antioksidan

Hasil Uji Kualitatif Antioksidan.....................................................

Gambar 9. Kurva Regresi Linier Ekstrak Jamur Tiram dan Buah Oyong........

Gambar 1 Kurva Regresi Linier vitamin C......................................................

Gambar 1 Aktivitas Antioksidan Ekstrak Tunggal Oyong dan Jamur Tiram,

Kombinasi Ekstrak Oyong dan Jamur Tiram dibandingkan dengan

Vitamin C Tunggal.........................................................................

Combination index Ekstrak Oyong dan Jamur Tiram....................

7

9

19

36

37

38

39

42

43

49

51

55

58

Gambar 1.

Gambar 2.

Gambar 3.

Gambar 4.

Gambar 5.

Gambar 6.

Gambar 7.

Gambar 8.

Gambar 9.

Gambar 10.

Gambar 11.

Gambar 12.

Gambar 13.

DAFTAR LAMPIRAN

Lam Determinasi Sampel Ekstrak Buah Oyong

(Luffa acutangula (L.) Roxb)...................................................

Perhitungan Hasil Ekstraksi Buah Oyong.........................

Determinasi Sampel Ekstrak Jamur Tiram........................................

Perhitungan Hasil Ekstraksi Jamur Tiram...........................................

LampPenentuan Panjang Gelombang (Skrining Lamda Maksimum)....

LampGrafik Absorbansi DPPH 0,004% terhadap varian waktu.................

LampAbsorbansi DPPH 0,004% terhadap varian waktu.............................

LampPerhitungan % Inhibisi Ekstrak Oyong, Jamur tiram dan

Vitamin C...............................................................................................

LampHasil Analisis SPSS Regresi Linier Probit Ekstrak

Buah Oyong, Jamur Tiram, dan Vitamin C.........................................

Perhitungan Konsentrasi Kombinasi Ekstrak Oyong dan Jamur

Tiram pada Aplikasi Persamaan Tunggal...........................................

Perhitungan nilai CI Kombinasi Ekstrak Oyong dan Jamur Tiram.......

Lampiran 1.

Lampiran 2.

Lampiran 3.

Lampiran 4.

Lampiran 5.

Lampiran 6.

Lampiran 7.

Lampiran 8

Lampiran 9.

Lampiran 10.

Lampiran 11

66

67

69

70

72

72

73

74

76

85

87

DAFTAR SINGKATAN

CI = Combination index

DPPH = 1,1 Difenil-2-Pikrilhidrazil

IC50 = Inhibitory Concenteration

KLT = Kromatografi Lapis Tipis

nm = nanometer

p.a. = pro analisis

PPM = parts per million

SOD = Superoksida Dismutase

SPSS = Statistical Product and Service Solution

UV = Ultraviolet

Vis = Visible