uji resistensi bakteri terhadap antibiotika menggunakan metode difusi
TRANSCRIPT
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
1/19
UJI RESISTENSI BAKTERI TERHADAP
ANTIBIOTIKA MENGGUNAKAN
METODE DIFUSI DANBIOAUTOGRAFI
Nama Kelompok:
Pramuditya. K (12613171)
Dian Noftasari (12613173)
Femmy rs!idina. " (1261317#)
$uliya %ka. & (12613176)'amida! ud!i. $ (12613177)
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
2/19
*+*$N
1.Dapat melakukan uji aktivitas antimikroba dengan
menggunakan metode difusi cara sumuran dan cakram kertas
(disk method).
2.Dapat melakukan analisis tentang sensitivitas atau resistensi
bakteri terhadap antibiotika.
3.Dapat melakukan uji bioautografi untuk mendeteksi bercak
atau komponen zat aktif sebagai antibakteri.
4.Dapat menentukan komponen zat aktif sebagai antibakteri.
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
3/19
D$,$- %-
,uatu or/anisme0 akteri dapat menimulkanresistensi ter!adap oat melalui sea yaitu:
1. Perke4ualian dari oat.
2. r/anisme0 akteri memiliki en5im perusak.3. akteri terseut men/amil en5im yan/
dapat memodifkasi oat.
#. -esistensi dalam entuk sekresi suatusustansi ole! akteri dalam umla!erlei!an dan merupakan metaolit yan/anta/onis a/i suatu oat.
. Perua!an materi /enetik di antara aktei.
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
4/19
etode paper disk
Paper disk diasa!i den/an disin8ektan kemudiandiletakkan pada lempen/an a/ar yan/ tela!diinokulasi. &empen/an a/ar dieramkan selama #9
am. +ika disin8ektan men/!amat pertumu!an
akteri maka akan terli!at daera! erni! sekelilin/4akram kertas. &uas daera! teran/ ini menadiukuran kekuatan daya kera disin8ektan
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
5/19
etode sumuran
edia $/ar ditanami akteri lalu diuat sumuranden/an diameter 6 mm. ,umuran dieri 2 lsupernatant 4airan kultur. &alu diinkuasi 19;2# amsu!u 37o< untuk kemudian diukur diameter 5ona
!amatnya. =ona !amat merupakan daera! yan/dapat men/!amat pertumu!an akteri sekali/usmenadi ukuran kekuatan oat
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
6/19
ioauto/raf
aantimikroanya dipinda!kan dari lapisan K& kemedium a/ar yan/ tela! diinokulasikan den/an
merata akteri ui yan/ peka. Dari !asil inkuasipada su!u dan >aktu tertentu akan terli!at 5ona!amatan di sekelilin/ spot dari K& yan/ tela!ditempelkan pada media a/ar. =ona !amatanditampakkan ole! akti?itas senya>a akti8 yan/
terdapat di dalam a!an yan/ diperiksa ter!adappertumu!an mikroor/anisme ui.
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
7/19
$&$ D$N $'$N
$lat:
$uto4la?e
atan/ pen/aduk.
luetip.
"elas piala 0 eker /lass "elas ukur
nkuator.
Kertas sarin/
&au %rlenmeyer
&aminar $ir Flo> (&$F) &u spiritus 0 unsen.
ikro pipet.
se ulat
?en
Pipet tetes.
Paper disk lank
Paper disk $ntiiotik
Petridis! 0 4a>an petri
Pinset
Pipa kapiler
Plat K& 24m @ 1A4m
-ak taun/ reaksi
,endok tanduk.
aun/ reaksi
*B o@
Cello> tip
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
8/19
a!an:
$ntiiotik , 2
$ntiiotik =
$Euadest steril
%til asetat
'e@ane
edia Nutrient a/ar
edia Nutrient rot!
Na
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
9/19
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
10/19
ebelum disamakan dengan standar* dilakukan peremajaan (diambil dengan ose
bulat)
$isamakan sampel uji mikroba dengan standar kekeruhan (+, #arland). $igunakan Na"l
steril.
$ituang media agar pada masingmasing petri* setelah suhu turun -60" ditambahkan 200 /mikroba uji. $ihomogenkan dengan ,ara menggoyangkan petri se,ara perlahan. alu ditunggu
sampai beku.
1ntuk metode sumuran* setelah media membeku dibuat sumuran sebanyak 4 lubang sumuran. ( 20
/l produk * 20 /l a5uadest murni* 20 /l ekstrak sirih merah 78* 9 20 /l ekstrak sirih merah0.!8)
1ntuk metode paper disk: kertas ,akram* setelah media membeku* ditempelkan 7 paper disk blank
dan paper disk antibiotik (digunakan pinset).
1ntuk metode bioautogra#i* setelah media membeku* ditempelkan plat ; pada media agar (bagianputih menghadap media)* di diamkan selama 30 menit kemudian di angkat plat ; dari media agar.
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
11/19
D$$ D$N '$,&
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
12/19
%D% ,**-$N
Terdapat zona hambatpada kontrol positif,
ekstrak daun sirih
merah ,!" dan 1"
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
13/19
%D% P$P%- D,K
Terdapat zona hambat
pada antibiotik # $%&T2!' dan tidak adan(a
zona hambat pada
antibiotik ) $*T+ !'
dan blanko.
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
14/19
$*"-$F
idak terdapat5ona !amat padamedia.
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
15/19
'asil K& *B 2# nm
erdapat 3 titikpemisa!an padaplat klt.
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
16/19
*B 366 nm
erdapat 2 titikpemisa!an padaplat klt.
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
17/19
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
18/19
P%$'$,$N
Pada siri! mera! didapat spot pada plat K& pada 2H #H dan 4mpada *B 2#nm sedan/kan pada *B 366 nm didapat spot 1 dan 4m den/an nilai -8 A.#167H A.6667 dan A.167 pada *B 2# nm danA.1667 dan A.9333 pada *B 366 (-8I '-801AA). ,edan/kan padaliteratur didapat -8 A9# dan A76. Dari !asil yan/ didapat tidaksesuai den/an literatur. Pada metode sumuran di/unakan antiiotik
(kontrol J) t>een (kontrol ;) ekstrak siri! mera! A.G dan ekstraksiri! mera! 1G. 'asil yan/ didapat yaitu terdapat 5ona !amat 19mm pada kontrol J 2A mm pada ekstrak A. G dan 21 mm padaekstrak 1G serta tidak terentuk 5ona !amat pada kontrol . Dari!asil dapat dili!at a!>a ekstrak siri! mera! 1G memiliki akti?itasantiakteri lei! aik daripada ekstrak siri! mera! A.G karena
men/!asilkan 5ona !amat lei! esar dari 5ona !amat ekstrak siri!mera! A.G. erdasar literatur minyak atsiri siri! mera! mampumen/!amat akteri S.aureus den/an konsentrasi minimal (K')A.2G(1#) K' ekstrak etanol siri! mera! 2.G 8raksi n;!e@ane 2AGdan 8raksi etil asetat 2.G. =ona !amat yan/ terentuk semakinlear den/an menin/katnya konsentrasi ekstrak.
-
7/24/2019 Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika Menggunakan Metode Difusi
19/19
K%,P*&$N
%kstrak daun siri! mera! A G sensiti8 ter!adapakteri den/an diameter !amat 2A mm danekstrak daun siri! mera! 1 G sensiti8 ter!adapakteri den/an diameter !amat 21 mm.
$ntiiotik , 2 (sul8ametoksa5ol) sensiti8ter!adap akteri S.aureus dan antiiotik S.aureusresisten ter!adap = (metronida5ole.
,enya>a yan/ memiliki akti?itas antiakteri yaitusenya>a triterpenoid La?onoid tannin minyakatsiri alkaloid dan senya>a 8enol pada daun siri!mera!.