uji sitotoksik ekstrak alga spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/cover_yuvika...

19
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis TERHADAP SEL KANKER LEUKEMIA P-388 DAN SEL KANKER PAYUDARA T47D SKRIPSI Untuk memenuhi sebagian persyaratan Mencapai Derajat Sarjana S-1 Diajukan oleh: YUVIKA NURMARETA 1008010085 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO PURWOKERTO 2014

Upload: vannga

Post on 01-May-2019

225 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

1

UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis

TERHADAP SEL KANKER LEUKEMIA P-388

DAN SEL KANKER PAYUDARA T47D

SKRIPSI

Untuk memenuhi sebagian persyaratan

Mencapai Derajat Sarjana S-1

Diajukan oleh:

YUVIKA NURMARETA

1008010085

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

PURWOKERTO

2014

Page 2: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

2

UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis

TERHADAP SEL KANKER LEUKEMIA P-388

DAN SEL KANKER PAYUDARA T47D

SKRIPSI

Untuk memenuhi sebagian persyaratan

Mencapai Derajat Sarjana S-1

Diajukan oleh:

YUVIKA NURMARETA

1008010085

Kepada

Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Purwokerto

Purwokerto

2014

i

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 3: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

3

ii

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 4: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

4

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 5: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

5

iv

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 6: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

6

INTISARI

YUVIKA NURMARETA. Uji Sitotoksik Ekstrak Alga Spirulina platensis

terhadap Sel Kanker Leukemia P-388 dan Sel Kanker Payudara T47D.

Di bawah bimbingan Asmiyenti Djaliasrin Djalil dan Wiranti Sri Rahayu.

Latar Belakang: Masalah penyakit kanker di Indonesia tercatat setiap tahunnya

sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita penyakit

ini ditemukan dalam keadaan stadium yang sudah lanjut. Pencarian sumber obat

baru untuk menghasilkan senyawa antikanker dari berbagai sumber terus

dilakukan. Salah satu sumber yang dapat digunakan yaitu berasal dari biota laut.

Alga Spirulina platensis merupakan jenis mikroalga yang kaya akan sumber

nutrisi dan ekstraknya potensial sebagai antioksidan, antimikroba, antivirus,

antiinflamasi dan antitumor. Ekstrak alga Spirulina platensis diketahui

mengandung pigmen-pigmen seperti fikosianin, klorofil a dan karotenoid yang

memiliki potensi sebagai agen antikanker.

Tujuan Penelitian: Mengungkap potensi alga Spirulina platensis dalam ekstrak

aseton sebagai antikanker apabila dibandingkan dalam ekstrak metanolnya

terutama terhadap sel murine leukemia P-388 dan akan dibandingkan dengan

potensi antikanker serta apoptosisnya dari alga Spirulina platensis dalam ekstrak

aseton terhadap sel kanker payudara T47D secara in vitro.

Metode Penelitian: Serbuk alga Spirulina platensis diekstraksi secara perkolasi

menggunakan penyari metanol dan ultrasonikasi menggunakan penyari aseton. Uji

potensi sitotoksiknya dilakukan terhadap sel murine leukemia P-388 dan sel

kanker payudara T47D menggunakan metode MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-

2,5-diphenyltetrazolium bromide). Uji apoptosisnya menggunakan metode double

staining dengan pengecatan acridine orange-ethidium bromide.

Hasil: Uji sitotoksik dari kedua ekstrak menunjukkan bahwa nilai IC50-nya tidak

aktif dalam menghambat pertumbuhan sel murine leukemia P-388. Nilai IC50

ekstrak metanol alga Spirulina platensis sebesar 90 µg/mL sedangkan ekstrak

asetonnya sebesar 64 µg/mL. Pada uji sitotoksik terhadap sel kanker payudara

T47D nilai IC50 ekstrak aseton alga Spirulina platensis sebesar 379 µg/mL. Hal ini

menunjukkan bahwa ekstrak aseton alga Spirulina platensis potensial dalam

menghambat pertumbuhan sel kanker payudara T47D. Hasil dari uji double

staning menunjukkan sel belum mengalami apoptosis pada tahap yang lengkap

seperti kondensasi kromatin dan pembentukan apoptotic body terhadap sel kanker

payudara T47D.

Kesimpulan: Ekstrak aseton dari alga Spirulina platensis dapat menghambat

pertumbuhan sel murine leukemia P-388 dengan aktivitas lebih tinggi dari pada

ekstrak metanolnya yang ditunjukkan dari nilai IC50 (inhibitory concentration).

Akan tetapi, nilai IC50 kedua ekstrak tersebut tidak aktif dalam menghambat

pertumbuhan sel murine leukemia P-388. Ekstrak aseton alga Spirulina platensis

dapat menghambat pertumbuhan sel kanker payudara T47D tetapi belum dapat

mendeteksi apoptosis dalam tahap yang lengkap seperti kondensasi kromatin dan

pembentukan apoptotic body.

Kata kunci: Alga Spirulina platensis, ekstrak, sel murine leukemia P-388, sel

kanker payudara T47D, sitotoksik, apoptosis.

v

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 7: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

7

ABSTRACT

YUVIKA NURMARETA. Cytotoxic Assay the Extract of Spirulina platensis

Cancer Cell Murine Leukemia P-388 and Breast Cancer Line T47D.

To be guided by Asmiyenti Djaliasrin Djalil and Wiranti Sri Rahayu.

Background: The incident of cancer disease in Indonesia every year recorded as

many as 100 new cases suffered by 100,000 residents. It was found in late

stadium. Anticancer drug discovery from various sources has been studied.

Marine natural product is one of the source can be used. Spirulina platensis is a

microalgae which rich of nutrients and has a potential extracts as an antioxidant,

antimicrobial, antiviral, anti-inflamantory and antitumor. It has been known that

Spirulina platensis contain on some pigmen such as phycocyanin, chlorophyll a

and carotenoids. Those have been reported have potential as anticancer agent. Objective: The aims of the research were to study cytotoxic activity of extract

Spirulina platensis especially the methanolic extract and aceton extract against

murine leukemia cancer cells P-388. It will be compared to cytotoxic and

apoptotic activity of aceton extract against breast cancer line T47D.

Methods: The Spirulina platensis powder was extracted with percolation method

by using methanol and ultrasonication method by using acetone. Cytotoxic assay

of the extract was tested in vitro against murine leukemia cancer cells P-388 and

breast cancer line T47D by using the MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-

diphenyltetrazolium bromide) method. Apoptotic assay was tested against breast

cancer line T47D by using the double staining test with acridine orange-ethidium

bromide.

Results: The result of cytotoxic assay against methanolic extract and aceton

extract showed that IC50 values of each extract are not active to inhibit the

proliferation of cancer cell murine leukemia P-388. IC50 of methanolic exctract

was found 90 μg/mL whereas IC50 for aceton extract was 64 μg/mL. Cytotoxic

assay against breast cancer line T47D showed that IC50 values of acetone extract

was found 379 μg/mL that mean the acetone extract of Spirulina platensis is

potential to inhibit the proliferation of breast cancer line T47D. From the double

staining test we were not identified some cell were suffering apoptotic in the

complete stage such as chromatin condensation and apoptotic body formation

against breast cancer line T47D.

Conclution: The acetone extract can inhibit the proliferation of cancer cell murine

leukemia P-388 with a higher activity than the methanolic extract of Spirulina

platensis which indicated by the value of IC50 (Inhibitory Concentration). But

over all, IC50 values of each extract are not active to inhibit the proliferation of

cancer cell murine leukemia P-388. The aceton extract can also inhibit the

proliferation of breast cancer line T47D but we were not identified some cell were

suffering apoptotic in the complete stage such as chromatin condensation and

apoptotic body formation.

Keywords: Spirulina platensis, extract, murine leukemia cancer cells P-388,

breast cancer line T47D, cytotoxic, apoptotic.

vi

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 8: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

8

MOTTO

“BE MYSELF”

Inspirasiku,

“Ketika perjuanganmu tak dihargai, Allah sedang mengajarimu apa arti ketulusan. Ketika hatimu sedang disakiti seseorang, Allah sedang mengajarimu apa arti memaafkan. Ketika badanmu sungguh letih dan melelahkan, Allah sedang mengajarimu apa arti kesungguhan”

“Janganlah kegelisahanmu itu hanya untuk mencapai yang belum kau miliki. Gelisahlah jika engkau belum bermanfaat bagi sesamamu” (Mario Teguh)

Man Jadda wa Jadda,

Man Shabara Zhafira,

Man Shara Ala Darbi Wasshhala.

vii

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 9: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

9

PERSEMBAHAN

Dengan Nama Allah Yang Maha Pengasih Lagi Maha Penyayang. Skripsi ini akan penulis persembahkan untuk:

1. Bapak dan Ibu tercinta yang selama ini telah memberikan kasih sayang

yang begitu besar dan senantiasa memberikan usaha berupa dukungan

dari segala aspek serta doa yang selalu dipanjatkan untuk mengiringi

perjalanan hidup anak-anaknya. Terima kasih untuk semuanya.

2. Adik-adikku tersayang the Y’s family, Yolanda Monica Febrina dan

Yulia Della Paramitha yang selalu mendukung dan setia mendengarkan

keluh kesah kakaknya. Terima kasih telah menyayangi kakak kalian

selama ini.

3. Saudara-saudaraku Keluarga Besar Harun dan Keluarga Besar Multejo,

terima kasih untuk dukungan dan doa yang selalu dipanjatkan untukku.

4. Dosen pembimbingku (Ibu Asmiyenti dan Ibu Yayu) yang selama ini

dengan sabar membimbingku, terima kasih.

5. Dosen dan Staf Karyawan Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Purwokerto.

6. Sahabat-sahabatku tersayang Member MENKHA (Rika, Hanna,

Rizkiandinny, Gilang dan Fahma), Meylina, Dwi Rina, Annisa Ismi, Dian

Frilya, Anjar, Unggun, Rahman, Suhri, Supriyadi, Ita, Agung, Zaenita,

Rekan Karmila Kos (Desi, Kartika, Aan, Puspitasari, Alfi dan Tika), Adi

Wb., Nurul Maulaniah, Rifqi Balfas, Sally, Lukman Hakim dan Mega

Kartikasari yang telah memberikan banyak pelajaran semangat

organisasi serta semua sahabatku yang tak dapat disebutkan satu per

satu disini, terimakasih telah mewarnai perjalanan hidup ini. Tak lupa

untuk kakak-kakakku Mega Cahya Purnami, Irwan Indra Lesmana dan

Andika Budiman, terima kasih untuk nasehat, semangat dan

dukungannya selama ini.

7. Almamaterku Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

viii

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 10: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

10

KATA PENGANTAR

Bismillahirrohmaannirrohiim..

Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT yang telah memberikan

rahmat dan karunia-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian skripsi

dengan judul “Uji Sitotoksik Ekstrak Alga Spirulina platensis terhadap Sel

Kanker Leukemia P-388 dan Sel Kanker Payudara T47D”. Skripsi ini disusun

untuk memenuhi syarat dalam memperoleh gelar sarjana S-1 di Fakultas Farmasi

Muhammadiyah Purwokerto.

Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dari berbagai pihak, penulis tidak

dapat menyelesaikan tugas ini dengan baik. Oleh karena itu, pada kesempatan ini

penulis mengucapkan terima kasih kepada:

1. Drs. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H. selaku Rektor Universitas

Muhammadiyah Purwokerto

2. Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si.,Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi

3. Dr. Asmiyenti Djaliasrin Djalil, M.Si. selaku dosen pembimbing I dan yang

Wiranti Sri Rahayu, M.Si.,Apt. selaku dosen pembimbing II telah

memberikan arahan, masukan dan bimbingan dalam penyusunan skripsi ini.

4. Suparman, M.Sc.,Apt. selaku dosen pembimbing akademik yang telah

memberikan arahan, bimbingan dan motivasi.

5. Seluruh dosen dan staf karyawan Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Purwokerto.

6. Prof. dr. H. Supargiyono, DTMH. S.U., Ph.D., Sp.ParK. yang telah

memberikan perkuliahan mengenai kultur sel kepada penulis, sehingga

penulis dapat memahami tentang penelitian ini lebih dari sebelumnya.

7. Ibu Juanna N. selaku teknisi laboratorium parasitologi kedokteran tropis

Fakultas Kedokteran UGM yang telah membantu dan dengan sabar

membimbing penulis selama penelitian berlangsung.

8. Kedua orang tua tercinta yang selama ini telah memberikan usaha berupa doa

dan dukungan dari segala aspek.

ix

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 11: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

11

9. Adik-adik tersayang, Yolanda Monica Febrina dan Yulia Della Paramitha

yang selalu mendukung dan setia mendengarkan keluh kesah kakaknya.

10. Sahabat-sahabat tersayang yang tak dapat disebutkan satu per satu disini,

terima kasih atas bantuan, doa dan dukungan kalian selama ini yang selama

ini telah mewarnai perjalanan hidup penulis.

11. Saudara-saudara tercinta Mega Cahya Purnami, Irwan Indra Lesmana, dan

Andika Budiman. Terima kasih untuk nasehat, semangat dan dukungan kalian

selama ini.

12. Semua pihak yang telah membantu yang tidak dapat penulis sebutkan satu-

persatu.

Penulis menyadari dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari kata sempurna,

untuk itu penulis sangat mengharapkan kritik dan saran yang membangun demi

perbaikan penelitian di masa mendatang.

Semoga Allah SWT senantiasa membalas amal kebaikan yang telah

Bapak/Ibu/Saudara berikan, dan harapan penulis semoga skripsi ini dapat

bermanfaat bagi penulis sendiri pada khususnya dan bagi semua pihak yang

membutuhkan.

Purwokerto, 11 Agustus 2014

Penulis,

Yuvika Nurmareta

x

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 12: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

12

RIWAYAT HIDUP

Nama : Yuvika Nurmareta

TTL : Banjarnegara, 31 Maret 1993

Orang Tua : Abner Alib Widodo (Ayah), Alin Ardi Haryanti (Ibu)

Pendidikan :

SD : SD N 1 Kalibening, tahun 1999 – 2004

SMP : SMP N 1 Kalibening, tahun 2004 – 2007

SMA : SMF Muhammadiyah Cirebon, tahun 2007 – 2010

S1 : Universitas Muhammadiyah Purwokerto, tahun 2010 – 2014

Kegiatan Ilmiah Mahasiswa

PKM-P (Program Kreativitas Mahasiswa - Penelitian) = Uji Efektivitas

Bawang Dayak (Eleutherine Palmifolia (L) Merr) sebagai Agen Ko-

Kemoterapi 5-Fluorouracil pada Sel Kanker T47D tahun 2013 (Anggota).

PKM-K (Program Kreativitas Mahasiswa - Kewirausahaan) = Milk Shake

Daun Katuk (Sauropus adrogynus (L) Merr) tahun 2013 (Anggota).

Beasiswa

Beasiswa PPA (Peningkatan Prestasi Akademik) tahun 2012

Keanggotaan Organisasi

Anggota Departemen Pendidikan Badan Eksekutif Mahasiswa (BEM)

Fakultas Farmasi periode 2010 – 2011

Anggota UKM Taekwondo Universitas Muhammadiyah Purwokerto tahun

2010 – 2011

Anggota Departemen Pendidikan Badan Eksekutif Mahasiswa (BEM)

Fakultas Farmasi periode 2011 – 2012

Anggota Paduan Suara Universitas Muhammadiyah Purwokerto periode 2011

– 2012

Sekretaris Bidang Immawati Ikatan Mahasiswa Muhammadiyah (IMM)

Komisariat Fakultas Farmasi periode 2011 – 2012

Ketua Seminar Nasional Kesehatan “Menilik Visi Indonesia Sehat 2010:

Evaluasi dan Rekomendasi Menuju Masyarakat Indonesia Sehat” Ikatan

Mahasiswa Muhammadiyah (IMM) Komisariat Fakultas Farmasi periode

2011 – 2012

Ketua Dewan Mahasiswa Fakultas Farmasi periode 2012 – 2013

Pimpinan Redaksi FARMAKOPERS Ikatan Mahasiswa Muhammadiyah

(IMM) Komisariat Fakultas Farmasi periode 2012 – 2013

Sekretaris Up-Grading Dewan Mahasiswa Universitas Muhammadiyah

Purwokerto periode 2012 – 2013

Anggota Bidang Keislaman Ikatan Mahasiswa Muhammadiyah (IMM)

Komisariat Fakultas Farmasi periode 2013 – 2014

xi

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 13: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

13

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL .................................................................................... i

HALAMAN PERSETUJUAN ..................................................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN ...................................................................... iii

SURAT PERNYATAAN ............................................................................. iv

ABSTRAK .................................................................................................. v

MOTTO ....................................................................................................... vii

PERSEMBAHAN ........................................................................................ viii

KATA PENGANTAR ................................................................................. ix

RIWAYAT HIDUP ..................................................................................... xi

DAFTAR ISI ............................................................................................... xii

DAFTAR TABEL ........................................................................................ xiv

DAFTAR GAMBAR ................................................................................... xv

DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................ xvii

DAFTAR SINGKATAN ............................................................................. xviii

BAB I PENDAHULUAN .......................................................................... 1

A. Latar Belakang ........................................................................ 1

B. Rumusan Masalah ................................................................... 3

C. Tujuan Penelitian ..................................................................... 3

D. Manfaat Penelitian ................................................................... 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA .................................................................. 5

A. Alga Spirulina platensis ........................................................... 5

B. Klorofil a ................................................................................. 6

C. Ekstrak dan Ekstraksi .............................................................. 8

D. Kanker .................................................................................... 9

E. Kanker Leukemia .................................................................... 11

F. Kanker Payudara ..................................................................... 11

G. Sel Kanker T47D ..................................................................... 12

H. Sel Kanker P-388 .................................................................... 12

I. Apoptosis ................................................................................ 13

xii

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 14: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

14

BAB III METODE PENELITIAN ............................................................... 14

A. Jenis dan Rancangan Penelitian ............................................... 14

B. Variabel Penelitian .................................................................. 14

C. Definisi Variabel Operasional .................................................. 15

D. Bahan dan Alat ......................................................................... 16

1. Bahan ................................................................................. 16

2. Alat ..................................................................................... 17

E. Cara Penelitian ........................................................................ 17

1. Waktu dan Tempat Penelitian ............................................. 17

2. Tahap-Tahap Penelitian ...................................................... 18

a. Pembuatan Ekstrak Metanol Alga Spirulina platensis ... 18

b. Pembuatan Ekstrak Aseton Alga Spirulina platensis .... 18

c. Uji Aktivitas Antikanker terhadap Sel Murine

Leukemia P-388 dengan Metode MTT Assay ................ 19

d. Uji Aktivitas Antikanker terhadap Sel Kanker

Payudara T47D dengan Metode MTT Assay .................. 22

e. Uji Apoptosis Ekstrak Aseton Alga Spirulina

platensis terhadap Sel Kanker Payudara T47D .............. 24

F. Analisis Data ........................................................................... 26

1. Uji Sitotoksik ...................................................................... 26

2. Uji Apoptosis ...................................................................... 26

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................... 27

A. Ekstrak Metanol Alga Spirulina platensis ................................ 28

B. Ekstrak Aseton Alga Spirulina platensis .................................. 35

C. Uji Aktivitas Antikanker terhadap Sel Kanker Payudara

T47D dengan Metode MTT Assay ............................................ 40

D. Hasil Uji Apoptosis Ekstrak Aseton Alga Spirulina platensis

terhadap Sel Kanker Payudara T47D ........................................ 53

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 58

A. Kesimpulan ............................................................................. 58

B. Saran ....................................................................................... 59

DAFTAR PUSTAKA .................................................................................. 60

LAMPIRAN ................................................................................................ 66

xiii

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 15: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

15

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

Tabel 1. Hasil uji MTT dari ekstrak metanol alga Spirulina platensis pada

sel murine leukemia P-388 ............................................................... 33

Tabel 2. Hasil uji MTT dari ekstrak aseton alga Spirulina platensis pada sel

murine leukemia P-388 .................................................................... 38

Tabel 3. Hasil uji MTT dari ekstrak aseton alga Spirulina platensis pada sel

kanker payudara T47D ..................................................................... 45

Tabel 4. Hasil uji MTT dari kontrol positif doxorubicin ................................. 49

xiv

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 16: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

16

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

Gambar 1. Spirulina platensis ...................................................................... 5

Gambar 2. Rumus struktur klorofil a dan klorofil b .................................... 7

Gambar 3. Tahap Pertumbuhan Kanker ..................................................... 10

Gambar 4. Ekstrak metanol alga Spirulina platensis .................................. 29

Gambar 5. Kurva hubungan antara nilai konsentrasi sampel (µg/mL)

dengan nilai rata-rata absorbansi dari hasil uji MTT ekstrak

metanol alga Spirulina platensis terhadap sel P-388 yang telah

dimasukkan ke dalam program Originlab 9.0 32-bit microcal

origin version 5.0 (Originlab Corporation USA) ....................... 34

Gambar 6. Ekstrak aseton alga Spirulina platensis ..................................... 37

Gambar 7. Kurva hubungan antara nilai konsentrasi sampel (µg/mL)

dengan nilai rata-rata absorbansi dari hasil uji MTT ekstrak

aseton alga Spirulina platensis terhadap sel P-388 yang telah

dimasukkan ke dalam program Originlab 9.0 32-bit microcal

origin version 5.0 (Originlab Corporation USA) ....................... 39

Gambar 8. Morfologi sel kanker payudara T47D ....................................... 41

Gambar 9. Efek paparan ekstrak aseton alga Spirulina platensis terhadap

morfologi sel T47D .................................................................. 43

Gambar 10. Reaksi reduksi MTT menjadi garam formazan .......................... 44

Gambar 11. Kristal formazan yang terbentuk setelah perlakuan dengan MTT

pada perlakuan ekstrak aseton alga Spirulina platensis ............. 45

Gambar 12. Kurva hubungan antara nilai konsentrasi sampel (µg/mL)

dengan nilai viabilitas (%) dari hasil uji MTT ekstrak aseton

alga Spirulina platensis terhadap sel T47D ............................... 48

Gambar 13. Efek paparan doxorubicin terhadap morfologi sel T47D ........... 49

Gambar 14. Kristal formazan yang terbentuk setelah perlakuan dengan MTT

pada perlakuan doxorubicin ...................................................... 50

xv

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 17: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

17

Gambar 15. Kurva hubungan antara nilai konsentrasi doxorubicin (µg/mL)

dengan nilai viabilitas (%) dari hasil uji MTT doxorubicin

terhadap sel T47D .................................................................... 52

Gambar 16. Efek paparan ekstrak aseton alga Spirulina platensis dan

doxorubicin terhadap apoptosis sel T47D dengan metode double

stainning menggunakan ethidium bromide-acrydine orange

(EB-AO) .................................................................................. 56

xvi

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 18: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

18

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

Lampiran A. Tahapan Penelitian .................................................................... 67

Lampiran B. Tahapan Pembuatan Ekstrak Metanol Sebuk Alga Spirulina

platensis dan Perhitungan Rendemen Ekstrak Metanol Alga

Spirulina platensis ..................................................................... 68

Lampiran C. Tahapan Pembuatan Ekstrak Aseton Sebuk Alga Spirulina

platensis dan Perhitungan Rendemen Ekstrak Aseton Alga

Spirulina platensis ..................................................................... 69

Lampiran D. Skema Uji Aktivitas Antikanker terhadap Sel Murine

Leukemia P-388 dengan Metode MTT Assay ............................ 70

Lampiran E. Gambar Hasil Uji Aktivitas Antikanker terhadap Sel Kanker

Payudara T47D dengan Metode MTT Assay .............................. 75

Lampiran F. Perhitungan Seri Konsentrasi Sampel alga Spirulina platensis

untuk Uji Sitotoksik Sel Kanker Payudara T47D ....................... 77

Lampiran G. Perhitungan (%) Viabilitas dengan Waktu Inkubasi Sel Kanker

Payudara T47D ......................................................................... 80

Lampiran H. Perhitungan IC50 ekstrak alga Spirulina platensis (waktu

inkubasi 24 jam) dengan Metode Probit Menggunakan

Program SPSS 16.0 for windows ................................................ 82

Lampiran I. Perhitungan Seri Konsentrasi Doxorubicin untuk Uji Sitotoksik

Sel Kanker Payudara T47D ......................................................... 87

Lampiran J. Perhitungan IC50 Doxorubicin (waktu inkubasi 24 jam) dengan

Metode Probit Menggunakan Program SPSS 16.0 for windows .... 90

Lampiran K. Perhitungan Seri Konsentrasi Sampel alga Spirulina platensis

untuk Uji Kematian Sel Kanker Payudara T47D .......................... 94

Lampiran L. Perhitungan Seri Konsentrasi Doxorubicin untuk Uji Kematian

Sel Kanker Payudara T47D ......................................................... 95

xvii

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014

Page 19: UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ALGA Spirulina platensis …repository.ump.ac.id/483/1/COVER_YUVIKA NURMARETA_FARMASI'14.pdf · sebanyak 100 kasus baru terjadi diantara 100.000 penduduk. Penderita

19

DAFTAR SINGKATAN

AIF (Apoptotic Inducing Factor)

ALL (Acute Lymphocytic (or Lymphoblastic) Leukemia)

AML (Acute Myeloid Leukemia)

BSLT (Brine Shrimp Lethality Test)

Ca-SP (Calcium Spirulan)

CLL (Chronic Lymphocytic Leukemia)

CML (Chronic Myeloid Leukemia)

COX-2 (Cyclooxygenase–2)

DCT (Division of Cancer Treatment)

DMSO (Dimetil Sulfoksida)

EB-AO (Ethidium Bromide - Acrydine Orange)

ELISA (Enzym-linked Immunosorbent Assay)

FBS (Fetal Bovine Serum)

GLA (Gamma Linoleic Acid)

HVMV (Human Cytomegalovirus)

HSV-1 (Herpes simplex type I)

IC50 (Inhibition concentration 50)

LAF (Luminar Air Flow)

MTT (3-(4,5-dimethythiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide)

NCI (National Cancer Institute)

NK (Natural Killer)

O.D (Optical Density)

PBS (Phosphate Buffer Saline)

PDT (Fotodinamika Terapi Kanker)

RPMI (Roswell Park Memorial Institute)

SDS (Sodium Dudecyl Sulphate)

SIRS (Sistem Informasi Rumah Sakit)

SOD (Superoksida Dismutase)

xviii

Uji Sitotoksik Ekstrak..., Yuvika Nurmareta, Farmasi UMP, 2014