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UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
TRABAJO DE TITULACIÓN
PREVIO A LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE:
MÉDICA VETERINARIA ZOOTECNISTA
TEMA
“PREVALENCIA DE LA LEPTOSPIROSIS EQUINA EN EL
HIPODROMO MIGUEL SALEM DIBO”
AUTORA
MARCIA ELIZABETH MEZA BERMEO
TUTOR ACADÉMICO
Dr. Amílcar Cárdenas Duque. MSc.
Guayaquil, Diciembre 2015
ii
CERTIFICACIÓN DE TUTORES
En calidad de tutores del trabajo de titulación:
CERTIFICAMOS
Que hemos analizado el trabajo de Titulación como requisito previo para optar por el
Título de Tercer Nivel de Médico(a) Veterinario(a) Zootecnista.
El trabajo de titulación se refiere a:
“PREVALENCIA DE LA LEPTOSPIROSIS EQUINA EN EL HIPODROMO
MIGUEL SALEM DIBO”
Presentado por:
Marcia Elizabeth Meza Bermeo Cédula # 092066319-2
TUTORES
_______________________ __________________________
Dr. Amílcar Cárdenas Duque. MSc. Dra. Patricia Cumbe Nacipucha, PhD
TUTOR ACADÉMICO TUTORA METODOLÓGICA
_________________________________ Blgo. Enrique Xavier Rodríguez Burnham. MSc
TUTOR DE ESTADÍSTICA
Guayaquil, Diciembre 2015
iii
“La responsabilidad del contenido de este Trabajo de Titulación, le corresponde
exclusivamente al autor(a); y el patrimonio intelectual de la misma a la Facultad de
Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad de Guayaquil”
Dr. Roberto Cassís Martínez, PhD.
RECTOR
Dra. María de Lourdes Salazar Mazamba, PhD.
DECANA
Abgdo. Evert Vidal Arteaga Ramírez
SECRETARIO
Dr. Amílcar Cardenas Duque. MSc.
TUTOR ACADÉMICO
v
“PREVALENCIA DE LA LEPTOSPIROSIS EQUINA EN EL HIPODROMO
MIGUEL SALEM DIBO”
MARCIA ELIZABETH MEZA BERMEO
TRABAJO DE TITULACIÓN
PREVIO A LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE:
MÉDICA VETERINARIA ZOOTECNISTA.
Los miembros del Tribunal de Sustentación designados por la Comisión Interna de la
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, damos por Aprobada la presente
investigación con la Nota de ---- ( ---- ), Equivalente a ----------------.
Dra. María de Lourdes Salazar Mazamba, PhD.
PRESIDENTA
Dra. Guadalupe García Moncayo. MSc Blgo. Xavier Rodríguez Burnham. MSc
EXAMINADORA PRINCIPAL EXAMINADOR PRINCIPAL
vi
DEDICATORIA
Dedico este proyecto de tesis principalmente a Dios porque ha estado conmigo en
cada paso que doy, guiándome, cuidándome y dándome fortaleza para continuar.
Con todo afecto a mis padres, quienes a lo largo de mi vida han velado por mi
bienestar y educación siendo mi apoyo en todo momento, depositando su entera
confianza en cada reto que se me presentaba sin dudar ni un solo momento en mi
inteligencia y capacidad.
A mi esposo e hijitos que son el motor de mi vida para seguir alcanzando mis logros.
vii
AGRADECIMIENTO
Mi agradecimiento total a Dios principalmente, ser supremo, que me ha dado la fe
y las fuerzas, para creer lo que me parecía imposible terminar, y que gracias a él lo he
logrado.
A mi Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia por darme la oportunidad de
estudiar y ser una profesional.
A mis Tutor de tesis por su paciencia y dedicación a este trabajo de tesis.
Mi agradecimiento a la Dra. María de Lourdes Salazar por su apoyo en guiarme en el
desarrollo de mi tesis.
De la misma manera mi agradecimento al Blgo. Xavier Rodríguez Burnham por su
ayuda, experiencia, conocimiento, y consejos ya que hizo posible que este trabajo de
tesis concluya.
viii
La perseverancia debería ser la
principal característica del ser
humano para alcanzar el éxito.
Marcia Meza Bermeo.
ix
ÍNDICE
INTRODUCCIÓN ....................................................................................................... 1
1.1. PROBLEMA ...................................................................................................... 3
1.2. OBJETO ............................................................................................................. 3
1.3. CAMPO DE ACCIÓN ....................................................................................... 3
1.4. OBJETIVOS ....................................................................................................... 4
1.4.1. OBJETIVO GENERAL ............................................................................... 4
1.4.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS ...................................................................... 4
1.5. VARIABLES ...................................................................................................... 5
1.5.1. Variables Independientes ............................................................................. 5
1.6. HIPÓTESIS ........................................................................................................ 5
II. REVISIÓN DE LITERATURA .............................................................................. 6
2.1. LEPTOSPIROSIS............................................................................................... 6
2.1.1. Definición y generalidades. ......................................................................... 6
2.1.2. Sinonimias. .................................................................................................. 6
2.1.3. Clasificación taxonómica. ............................................................................ 7
2.1.4. Morfología. .................................................................................................. 7
2.1.5. Patogenia. ..................................................................................................... 8
2.1.6. Especies susceptibles. .................................................................................. 8
2.1.7. Fuentes de infección y vías de transmisión. ................................................ 9
2.1.8. Período de incubación. ................................................................................. 9
2.1.9. Síntomas clínicos de Leptospira en los caballos. ...................................... 10
2.1.10. Diagnóstico. ............................................................................................. 10
2.1.11. Tratamiento. ............................................................................................. 11
2.1.12. Control y prevención de la enfermedad. .................................................. 11
III. MATERIALES Y MÉTODOS ............................................................................ 13
3.1. CARACTERÍSTICAS DEL ÁREA DE ESTUDIO......................................... 13
3.1.1. LOCALIZACIÓN DEL ÁREA DE ESTUDIO. ....................................... 13
3.1.2. UBICACIÓN GEOGRÁFICA Y POLÍTICA. .......................................... 13
3.1.3. CLIMATOLOGÍA. .................................................................................... 13
x
3.2. MATERIALES. ................................................................................................ 14
3.2.1. Semovientes. .............................................................................................. 14
3.2.2. Materiales de campo. ................................................................................. 14
3.2.3. Materiales de laboratório. .......................................................................... 14
3.2.4. Reactivos. ................................................................................................... 16
3.2.5. Equipos. ..................................................................................................... 16
3.2.6. Materiales y equipos de oficina. ................................................................ 16
3.2.7. Personal. ..................................................................................................... 17
3.3. METODOLOGÍA DE TRABAJO. .................................................................. 17
3.3.1. Toma de muestra. ....................................................................................... 17
3.3.2. Duración del ensayo................................................................................... 18
3.3.3. Universo. ................................................................................................... 18
3.3.4. Tipo de investigación. ................................................................................ 18
3.3.5. Estadística Aplicada. .................................................................................. 19
3.3.6. Procedimientos de la investigación............................................................ 19
IV. RESULTADOS.................................................................................................... 21
4.1. DETERMINACION DE LA PREVALENCIA DE LEPTOSPIROSIS
EQUINA EN LOS CABALLOS DEL HIPÓDROMO MIGUEL SALEM DIBO. 21
4.2. Determinación de la presencia de leptospirosis en el Hipódromo Miguel Salem
Dibo por sexo y edad. .............................................................................................. 23
V. DISCUSIÓN.......................................................................................................... 26
VI. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES .................................................. 28
VII. RESUMEN ......................................................................................................... 30
VIII. SUMMARY ...................................................................................................... 31
IX. BIBLIOGRAFÍA ................................................................................................. 32
X. ANEXOS ............................................................................................................... 35
xi
ÍNDICE DE FIGURAS
FIGURA
# TÍTULO
PÁGINA
#
1 Determinación de la prevalencia de Leptospirosis equina
en los caballos del Hipódromo Miguel Salem Dibo. 21
2
Determinación de la prevalencia de Leptospirosis equina
respecto al sexo en los caballos del Hipódromo Miguel
Salem Dibo.
22
3
Determinación de la prevalencia de Leptospirosis equina
respecto a casos positivos por sexo en los caballos del
Hipódromo Miguel Salem Dibo.
23
4
Determinación de la prevalencia de Leptospirosis equina
respecto al porcentaje positivo y negativo de yeguas
infectadas del Hipódromo Miguel Salem Dibo. 24
5
Determinación de la prevalencia de Leptospirosis equina
respecto al porcentaje positivo y negativo de caballos
infectados del Hipódromo Miguel Salem Dibo.
25
xii
ÍNDICE DE ANEXOS
ANEXO
# TÍTULO
PÁGINA
#
I
Localización geográfica del Hipódromo Miguel Salem
Dibo.
35
II Especies de Leptospira. 36
III Hoja de campo. 37
IV Hoja de Laboratorio. 38
V Hoja de campo con los datos de los caballos. 39
VI Hoja de Laboratorio con los respectivos resultados de los
análisis. 40
VII Determinación de la prevalencia de Leptospira en el
Hipódromo Miguel Salem Dibo. 41
VIII Determinación de la prevalencia de Leptospira en el
Hipódromo Miguel Salem Dibo por sexo. 41
IX
Determinación de la prevalencia de Leptospira en el
Hipódromo Miguel Salem Dibo por casos positivos en
sexo.
41
X Cronograma para la realización del trabajo de titulación.
42
XI Fotos del Hipódromo Miguel Salem Dibo.
42
XII Informe de los resultados del laboratorio. 45
1
INTRODUCCIÓN
La Leptospirosis es una enfermedad infecciosa causada por una espiroqueta patógena,
del género Leptospira, especie L. interrogans de la cual se han identificado alrededor
de 200 serovares, que a su vez, se encuentran agrupados en 23 serogrupos (Odriozola,
2001). Por ello, cuando un caballo enfermo adquiere esta enfermedad se vuelve
inmune solamente al serovar que lo infectó más no a los otros restantes (O' Farrill-
Nieves, 2005).
Esta enfermedad es de distribución mundial, se encuentra tanto en climas tropicales
como en fríos y afecta tanto al hombre como a los animales siendo considerada la
zoonosis de mayor difusión (Odriozola, 2001). Factores como: precipitación,
temperatura, humedad relativa, pH, estructura y composición del suelo, favorecen a
su aparición; esto se observa sobre todo en países tropicales y subtropicales, pues
estos son los más afectados por tales condiciones climáticas (Sandow & Ramírez,
2005).
En el ecuador esta enfermedad es endémica siendo observada principalmente en
zonas rurales y urbanas.
Los casos de leptospirosis han sido detectados en la parroquia Eloy Alfaro, Los
Esteros y Manta, se encontraron casos de leptospira en personas que fueron
contagiados por la orina de ratas (Julio 2013).
2
La deficiencia de saneamiento ambiental, la presencia de basurales, la proliferación
de roedores (vectores), los establos en pésimas condiciones higiénicas, y los caballos
sin control sanitario, todo esto hace un escenario propicio para que se presente esta
enfermedad, y por ende ocasionar un grave problema de Salud Pública (Moral, y
otros, 2014).
Esta enfermedad es de gran relevancia para la Salud Pública, ya que “los animales
reservorios y hospederos accidentales eliminan el agente durante meses, años e
inclusive toda la vida, dependiendo de la especie animal y el serovar involucrado”
(Moral, y otros, 2014).
Este trabajo se realizó, con el fin de determinar la presencia o no de Leptospira en
caballos del Hipódromo Miguel Salem Dibo, como medida preventiva, sanitaria y de
importancia para la Salud Pública.
3
1.1. PROBLEMA
En la ciudad de Guayaquil no se ha hecho un previo análisis de la prevalencia de
Leptospira en equinos en el Hipódromo Miguel Salem Dibo.
Con este estudio veremos si existe leptospira en lo equinos ya que están en
contacto directo con las personas.
1.2. OBJETO
Confirmar la existencia de Leptospira en equinos que pertenecen al Hipódromo
Miguel Salem Dibo.
1.3. CAMPO DE ACCIÓN
Los equinos del Hipódromo Miguel Salem Dibo.
4
1.4. OBJETIVOS
1.4.1. OBJETIVO GENERAL
Determinar la prevalencia de leptospirosis equina en los caballos del
Hipódromo Miguel Salem Dibo.
1.4.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
1.4.2.1. Determinar la presencia de leptospirosis equina a través de pruebas de
micro-aglutinación en placas.
1.4.2.2. Determinar la presencia de leptospirosis en el Hipódromo Miguel Salem
Dibo por sexo y edad.
5
1.5. VARIABLES
1.5.1. Variables Independientes
Presencia de Leptospirosis.
1.6. HIPÓTESIS
1.6.1. Hi: Las muestras sanguíneas sacadas de los caballos del Hipódromo Miguel
Salem Dibo.
1.6.2. Ho: En los caballos del Hipódromo Miguel Salem Dibo, no presentaron casos
de leptospira.
6
II. REVISIÓN DE LITERATURA
2.1. LEPTOSPIROSIS.
2.1.1. Definición y generalidades.
La palabra Leptospira procede del griego leptos: delgado, y del latín spira:
espiral. La Leptospira es una espiroqueta, se caracteriza por tener una forma de
elipse flexible, de una longitud de 6 a 20 nanómetros y un diámetro de 0.1
nanómetros. Uno de los dos extremos tiene una forma típica de gancho. Es muy
difícil de observar con el microscopio óptico debido a su pequeño diámetro y a
la dificultad de colorear estos microorganismos, por ello es preciso un
microscopio de campo oscuro o de contraste de fases (Caro Valencia & Jaime
Silva, 2007), (Valdillo, 2003).
Según Valdillo (2003) dice que las Leptospira “son microorganismos aerobios
y quimiorganotrofos, es decir que utilizan fuentes de carbono y energía, largas
cadenas de ácidos grasos o largas cadenas de alcoholes grasos y no emplean
hidratos de carbono ni aminoácidos como fuente de energía”.
2.1.2. Sinonimias.
Ictericia infecciosa, fiebre de los pantanos, fiebre de los siete días, fiebre de los
arrozales o de los cañaverales, enfermedad de Weil, enfermedad de las
porquerizas, tifus canino, renguera, enfermedad de Stuttgar, enfermedad de las
ratas, orina roja de los terneros, fiebre canícola, ictericia espiroqueta, fiebre del
cieno, entre otras (Figueroa, 1984); (Boffil, y otros, 1988); (Benenson, 1992).
7
2.1.3. Clasificación taxonómica.
División: Procariotes
Clase: Schizomicete
Orden: Spirochaetales
Familia: Leptospiraceae
Género: Leptospira
Especies: L. interrogans, L. biflexa (Noguchi, 1917).
2.1.4. Morfología.
Las Leptospira se mueven de diferentes formas, éstas pueden ser progresivas,
giratorias, taladrasteis, ondulantes o desordenadas, y tienen una estructura en
espiral, la cual se caracteriza por tener alrededor de su eje axial volutas
primarias y secundarias, las cuales condicionan las sinuosidades de su cuerpo
(Arzumanian, 1970); (Cepero Rodríguez, Castillo Cuenca, Rodríguez Tabarez,
& Casanova Pérez, 2005); (Caro Valencia & Jaime Silva, 2007).
“Dependiendo de la forma y magnitud de las sinuosidades adoptan la forma de
las letras C, S, X y a veces de la cifra 8” (Cepero Rodríguez y otros, 2005);
(Caro Valencia & Jaime Silva, 2007).
El aspecto morfológico de las Leptospira es el mismo para todos los serovares,
es decir microorganismos Gram (-), helicoidales, con cuerpo protoplasmático,
los extremos del microorganismo están doblados en forma de ganchos, tienen
un axostilo insertado sub-terminalmente en cada extremo y una membrana que
los envuelve, miden de 7 a 10 y hasta 30 micras de longitud y de 0.2 a 0.3
micras de ancho (Figueroa, 1984).
8
2.1.5. Patogenia.
Las Leptospira penetran en el cuerpo por las membranas mucosas o cortes en la
piel, al consumir alimentos o agua contaminada, si tienen un número y
virulencia suficiente para vencer la resistencia del huésped, se multiplican y
producen una infección clínica generalizada o subclínica, con una marcada
fiebre de varios días que luego declina (etapa leptospirémica) (Blood,
Hernderson, & Radostits, 1982); (Boffil, y otros, 1988); (Delgado Monroy &
Vargas Orluela, 2006), la infección se localiza en el riñón, y es en ese momento
que los organismos aparecen en la orina y se depositan en el medio ambiente
con cada infección (etapa leptospirúrica); hay también tendencia a localizarse
en el útero gestante y en esta forma puede causar el aborto (Delgado Monroy &
Vargas Orluela, 2006). En la fase septicémica el animal puede ser asintomático
(frecuente en animales adultos), o puede haber casos clínicos con muerte
subsecuente de 1 a 7 días por la elaboración de algunos serotipos de
hemolisinas, induciendo la hemólisis grave, anoxia anémica con nefrosis
hemoglobinuria (más en animales jóvenes), fiebre que luego declina y
microorganismos en la orina (Cepero Rodríguez y otros, 2005).
2.1.6. Especies susceptibles.
La Leptospirosis es una enfermedad zoonótica mundial, en la cual muchas
especies son susceptibles, tales como: bovinos, equinos, cerdos, ovejas y
cabras; también afecta en mayor o menor grado a otros animales domésticos y
salvajes como: perros, gatos, venados, mofetas, mapaches, zarigüeyas,
musarañas, canguros, mangostas, murciélagos, peces, reptiles, ranas, conejos,
zorros, erizos, chacales, nonatos, ratas y ratones, lobos de mar, etc. (Polo Díaz,
2007); (Blood, Hernderson, & Radostits, 1982).
9
2.1.7. Fuentes de infección y vías de transmisión.
Bofill et al., (1988) adujeron que los roedores son la fuente originaria de la
infección; además, que como fuente primaria se establecen todas las especies
susceptibles con excepción del hombre, y como fuente secundaria la orina,
aguas contaminadas, alimentos, instalaciones, etc.; también se concede
importancia a los ectoparásitos. Las leptospiras pueden llegar al medio exterior
también con la leche, con el esperma y a través de artrópodos hematófagos;
otra fuente de infección es la transmisión por contacto con la sangre de
animales infectados (Malojov & Alejin, 1989).
Según Malojov & Alejin (1989) deducen que la principal fuente de infección
de la enfermedad son los animales portadores aparentemente sanos, los cuales
eliminan la leptospira al medio, contaminando fuentes de agua, alimentos,
suelos, entre otros, ocasionando que animales y personas sanas entren en
contacto con este ambiente contaminado penetrando en el organismo de éstos a
través de la piel y las membranas mucosas, siendo esta la vía principal de
transmisión del agente de la leptospirosis.
2.1.8. Período de incubación.
Después de penetrar por la piel o por la mucosa, el microorganismo tiene un
periodo de incubación que varía entre 7 y 20 días, 12 días como promedio, en
el cual se multiplica rápidamente y se disemina en ciertos órganos (hígado,
riñones, pulmones, tracto reproductor: placenta) y líquido cefalorraquídeo;
después migra y puede aislarse en la sangre periférica durante varios días,
hasta que cese la fiebre. Seis días después iniciada la leptospiremia, se
observan anticuerpos en el torrente sanguíneo y a la bacteria en la orina
(Alfaro, Aranguren, & Clavijo, 2004).
10
2.1.9. Síntomas clínicos de Leptospira en los caballos.
Según Alfaro Coromoto y otros, (2004) dicen que en los caballos cuando se
produce la enfermedad de manera leve, se presenta con pirexia asociada con
anorexia; y que en los casos más severos la pirexia (39.5 a 40.5 °C) puede
estar acompañada con conjuntivitis, petequias en mucosa, hemoglobinuria,
ictericia, depresión y debilidad muscular; además, la forma aguda puede
ocasionar muerte de los neonatos infectados en útero y ocasionalmente
muertes en animales adultos. La oftalmia periódica es una de las
complicaciones de esta patología, este síndrome aparece entre 2 y 8 meses
después de la enfermedad aguda como una panoftalmia no purulenta con
preponderancia de uveítis con tendencia al desprendimiento, provocando
algunas veces ceguera total (Alfaro, Aranguren, & Clavijo, 2004).
“La infección de yeguas gestantes con leptospiras patógenas puede dar lugar a
abortos, muerte fetal, nacimiento de potros no viables y, rara vez, potros
viables. Los potros vivos pero no viables suelen ser prematuros. Los potros
que sobreviven a la infección intrauterina son generalmente débiles al nacer,
pero pueden recuperarse a través de cuidados intensivos de apoyo” (Villagrasa
Ferrer, 2014).
2.1.10. Diagnóstico.
Prueba de micro-aglutinación en placas (MAT): Es la técnica de más uso y
se utiliza como método de referencia para demostrar anticuerpos contra
Leptospiras; al aplicar esta técnica, diluciones seriadas de los sueros MAT se
ponen en contacto con iguales volúmenes de un buen crecimiento de
antígenos de Leptospiras vivas de diferentes serovariedad (Dammert, 2005).
11
Consiste en poner en contacto una suspensión ajustada de bacterias de cada
serovariedad de Leptospira con suero del paciente para detectar la presencia
de anticuerpos totales antileptospira; con MAT se conoce la serovariedad de
Leptospira que participa, lo que puede orientar hacia los posibles reservorios
implicados en la infección (Borbolla Sala, y otros, 2009).
2.1.11. Tratamiento.
Para tratar a equinos contra Leptospirosis, según Sandow & Ramírez (2005)
se utiliza:
Dihidriestreptomicina: 20 a 25 mg/kg./24h durante 4 a 6 días por vía
intramuscular.
Tetraciclina: 15 a 25 mg/kg./12h durante 4 a 6 días por vía
intramuscular.
Penicilina en caso agudo: 10000 a 20000UI/kg./12h durante 5 a 7 días
por vía intramuscular.
Corticosteriodes por vía parenteral en caso de oftalmia periódica en
equino.
Pomada de atropina en el equino 3 veces al día.
2.1.12. Control y prevención de la enfermedad.
Según García de la Peña (2014) nos da las siguientes medidas que debemos
tener en cuenta para el control y prevención de la enfermedad:
La aplicación de vacunas, para que este procedimiento sea efectivo las
bacterinas deberán estar integradas por serovariedades distintas, sobre
todo las más frecuentes de la zona en la que habitan los animales a
vacunar. Por otra parte las serovariedades que se encuentren presentes
en una bacterina de esta naturaleza, deben ser nativas, ya que si
proceden de otros países o regiones pueden ser serovariedades
12
distintas a las que se pretende proteger con la vacunación, en estas
condiciones las vacunas serían inefectivas. Las bacterinas que
actualmente se usan para la prevención de la Leptospirosis confieren
una buena inmunidad, sin embargo es necesario revacunar a los
animales cada 6 ó 12 meses, dependiendo de la frecuencia con la que
se presente la enfermedad en la zona.
Implementación de medidas sanitarias que contemplen el control y
erradicación de las ratas y ratones, esto no es fácil ya que la
reproducción de estos animales es muy alta, sin embargo se deben
mantener programas de control muy estrictos.
Higiene y desinfección de los locales de ordeño, se deben hacer
rellenos en terrenos bajos para evitar inundaciones por agua de lluvias
y que son una fuente de transmisión de la enfermedad a los animales
que allí se encuentran.
Se debe evitar que los animales tomen agua de charcos y lagunas
posiblemente contaminadas, por supuesto que los seres humanos
deberán tener cuidado de bañarse en ríos, lagunas y aguajes que
probablemente estén contaminados.
Se deben hacer estudios de los animales susceptibles en la zona para
diagnosticar la presencia de la enfermedad para que una vez que se
conozcan los datos relevantes, se tomen las medidas de prevención
necesarias para controlar la enfermedad.
Es necesario evitar el pastoreo conjunto de especies domésticas
distintas susceptibles a la enfermedad (García de la Peña, 2014).
13
III. MATERIALES Y MÉTODOS
3.1. CARACTERÍSTICAS DEL ÁREA DE ESTUDIO.
3.1.1. LOCALIZACIÓN DEL ÁREA DE ESTUDIO.
El presente trabajo de investigación se lo realizó en los caballos del hipódromo
Miguel Salem Dibo que está ubicado en el Km 10.5 de la Vía La Puntilla,
Cantón Samborondón de la provincia del Guayas.
3.1.2. UBICACIÓN GEOGRÁFICA Y POLÍTICA.
Región: Costa
Provincia: Guayas
Cantón: Samborondón
Población: 67 590 hab.
Parroquia urbana: La Puntilla
Coordenadas: Latitud: 2° 11′ 0″ S
Longitud: 79° 53′ 0″ W
Superficie: 252 km2
Altitud media: 8msnm.
3.1.3. CLIMATOLOGÍA.
Temperatura promedio: 25.4 °C a 31°C
Precipitación promedio anual: 1138 mm al año
Humedad relativa media: 71%
14
3.2. MATERIALES.
3.2.1. Semovientes.
13 caballos
3.2.2. Materiales de campo.
Mandil
Botas
Guantes
Cabos
Jeringas 20ml
Hielera
Hojas de registro
Esferográficos
Lápiz
Refrigerantes
Alcohol
Algodón
Cinta adhesiva de papel
Tablero
Gradilla de plástico
Cámara fotográfica
3.2.3. Materiales de laboratório.
Gradilla
Láminas portaobjetos
Tubos de ensayo
15
Mechero de Bunsen
Aza de platino
Guantes
Mascarillas
Cofias
Mandil manga larga
Fiola
Vaso de precipitación
Crisol de vidrio
Algodón
Papel de aluminio
Cinta de papel
Tapones de caucho
Tapones de gasa
Marcadores para rotular
Lápiz graso
Matraz de 1000 ml
Macropipeta
Micropipetas de 100 ul, 200 ul, 400 ul, 600 ul y 1000 ul
Placas para tubo
Placas de porcelana
Pipetas de 5 ml y 10 ml
Pipeta multicanal
Pipetas automáticas de 1000 y 100 landa
Pipeta serológica de vidrio 1,2, 5, y 10
Puntas plásticas amarillas para 200 landa
Puntas plásticas celestes para 1000 landa
Probeta 1000, 200, 100
Papel de despacho
16
Piola
3.2.4. Reactivos.
Alcohol
Agua destilada
Cepas de Leptospirosis
Cloro
Diluyente EMJH
Solución salina
Suero sanguíneo
3.2.5. Equipos.
Agitador de Vórtex
Agitador magnético para la preparación de la albúmina
Autoclave
Balanza analítica
Balanza digital
Bomba de vacío
Centrífuga
Esterilizador
Estufa aeróbica
Incubadora 37 grados
Máquina lavadora de cristalería
Refrigeradora a + 4°C
3.2.6. Materiales y equipos de oficina.
Cuaderno
17
Papel para impresión
Esferos
Lápiz
Borrador
Tijeras
Pen drive
Laptop
Impresora
Fotocopiadora
Cámara fotográfica
3.2.7. Personal.
Personal de laboratorio
Personal del hipódromo
Egresada
3.3. METODOLOGÍA DE TRABAJO.
3.3.1. Toma de muestra.
Se realizó el muestreo en 13 caballos del Hipódromo Miguel Salem Dibo, se
recogieron datos de cada animal en una hoja de campo, el muestreo se efectuó
a las 7:00 am antes de que los caballos desarrollen su entrenamiento, y con la
colaboración del criador, aplicando métodos de sujeción para inmovilizar al
animal.
Luego, se procedió a desinfectar el área del cuello del animal con algodón y
alcohol, se realizó una punción en la vena yugular con ayuda de una jeringa
(aguja 22) y se extrajo 10 cc de sangre.
18
En los tubos rotulados sujetos con una gradilla se colocó la sangre, sin
anticoagulante, con la ayuda de cinta adhesiva de papel se puso un número de
identificación para cada tubo, luego se los embaló, para ser colocados
adecuadamente en una caja térmica con una temperatura de 5 a 8 grados
centígrados.
Por último, inmediatamente se envió las muestras hacia el laboratorio. El
análisis de las muestras se llevó a cabo en el Instituto de Investigación de
Salud Pública INSPI.
3.3.2. Duración del ensayo.
El tiempo de duración de la muestra es de aproximadamente unas 3 horas
desde extraer la sangre del animal hasta llevarla al laboratorio. Todas las
muestras se recolectaros en el mes de octubre.
3.3.3. Universo.
Aspectos éticos y legales.
A los propietarios de los equinos se les informa que no existe riesgo alguno en
el caballo al sacar la muestra, ya que en su mayoría son caballos dóciles.
Los caballos que pertenecen al hipódromo Miguel Salem Dibo en el cantón
Samborondón de la provincia del Guayas, se les extrae la muestra de sangre
con fines de estudio siempre y cuando sus propietarios lo autoricen.
3.3.4. Tipo de investigación.
Se realizó trabajo de campo. El tipo de estudio fue descriptivo.
19
3.3.5. Estadística Aplicada.
Estadística Descriptiva.
Los datos serán evaluados mediante la fórmula
Prevalencia % = (# de animales positivos)___ X 100
(# de animales muestreados)
Para esta investigación se utilizaron 13 equinos a muestrear. Esta correcta
porque el tamaño de muestra está considerado dentro del estudio de caso.
3.3.6. Procedimientos de la investigación.
3.3.6.1. Prueba de micro-aglutinación en placas (MAT) para la detección de
Leptospira.
Se utilizó el procedimiento realizado por el Instituto Nacional de Salud
Pública e Investigación (INSPI), el cual fue el siguiente:
1. De la sangre obtenida, se adquirió el suero mediante la centrifugación,
el cual fue puesto en un tubo de ensayo, y por ende sostenido en una
gradilla.
2. Se colocó cuatro tubos de ensayo en la gradilla, para proceder a
realizar las diluciones correspondientes, a los que se les puso con la
ayuda de una pipeta de 5 ml el diluyente EMJH, el cual fue 0.8 ml para
el primer tubo de ensayo, 1.2 ml para el segundo, 1.8 ml para el
tercero, y 1.2 ml para el último tubo de ensayo.
3. Luego, se tomó 200 ul del suero del caballo, y se lo colocó en el
primer tubo de ensayo, completando 1 ml.
20
4. Una vez mezclado el diluyente con el suero, se quitó 200 ul para
ponerlo en el tercer tubo, y se hizo el mismo procedimiento de
homogenizar.
5. Pronto, se extrajo 600 ul del primer tubo, para ubicarlo en el segundo
tubo de ensayo y mezclarlo.
6. Del tercer tubo se extrajo 600 ul, y se realizó el mismo procedimiento.
7. Teniendo, como resultado las diluciones que correspondieron a 1:30
para el segundo tubo, 1:100 para el tercero, y 1:300 para el cuarto tubo
de ensayo.
8. Una vez hecha las diluciones se procedió a poner en las placas de
porcelana; primero enumerando las placas en forma vertical de
acuerdo al tipo de Leptospira.
9. En el cuarto hoyo de la placa, se agregó una gota del diluyente EMJH,
y se comenzó a colocar las diluciones en las placas a partir del tercer
hoyo con la dilución del cuarto tubo de ensayo, poniendo una gota de
la dilución en el tercer hoyo de todas las placas que pertenecen a ésa
muestra.
10. En el segundo hoyo se puso la muestra del tercer tubo de ensayo, y se
realizó el mismo procedimiento, colocando una gota por cada placa
más una gota del serotipo de Leptospira de acuerdo a la enumeración.
11. En el primer hoyo se colocó la muestra del segundo tubo de ensayo, y
se efectuó el mismo procedimiento, después se procedió a colocar una
gota de las cepas de Leptospira en los hoyos correspondientes a su
número.
12. Una vez terminado el procedimiento, se agitó con movimientos suaves
y se apiló las placas de acuerdo al nombre de cada paciente y se las
cubrió con otra placa.
13. Luego, se colocó encima una gasa mojada para mantener la humedad y
se dejó a temperatura ambiente por el lapso de una hora.
14. Transcurrido este tiempo, se procedió a observar en el microscopio de
campo oscuro.
21
IV. RESULTADOS
La presente investigación se realizó en muestras de sangre extraídas de la vena
yugular de 13 caballos del Hipódromo Miguel Salem Dibo. Las cuales fueron
enviadas para su posterior análisis al Instituto Nacional de Investigación en Salud
Pública (INSPI), teniendo como estudio identificar casos positivos o negativos de
Leptospirosis.
4.1. DETERMINACIÓN DE LA PREVALENCIA DE LEPTOSPIROSIS
EQUINA EN LOS CABALLOS DEL HIPÓDROMO MIGUEL SALEM DIBO.
En la presente investigación se estableció que la prevalencia de Leptospira en el
Hipódromo Miguel Salem Dibo del cantón Samborondón corresponde al 15,38% de
la población muestreada (Figura 1). (Anexo VII).
Fig. 1. Determinación de la prevalencia de Leptospirosis equina en los caballos del
Hipódromo Miguel Salem Dibo.
15,38
84,6
NÚMERO DE CASOS
POSITIVOS
NEGATIVOS
22
En cuanto a la prevalencia respecto a sexo de la población muestreada, tenemos que
del total de muestras el 30,76% correspondió a hembras y el 69,24% a machos.
(Figura 2).(Anexo X).
Fig. 2. Determinación de la prevalencia de Leptospirosis equina respecto al sexo en
los caballos del Hipódromo Miguel Salem Dibo.
Muestras por sexo
Hembras
Machos
30.76 %
69.24 %
23
4.2. DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE LEPTOSPIROSIS EN EL
HIPÓDROMO MIGUEL SALEM DIBO POR SEXO Y EDAD.
Mediante los resultados obtenidos queda en evidencia clara y notoria que la infección
por leptospira en los caballos muestreados es indiferente al sexo, así pues se
encontró el 7,69% que corresponde a la susceptibilidad para cada uno de los sexos
(Figura 3).(Anexo IX).
Fig. 3. Determinación de la prevalencia de Leptospirosis equina respecto a casos
positivos por sexo en los caballos del Hipódromo Miguel Salem Dibo.
7,69% 7,69%
Casos Positivos por sexo
hembra macho
24
Del total de hembras muestreadas se estableció la prevalencia de la enfermedad en un
25% que correspondió a una hembra de dos años. (Figura 4) (Anexo VIII).
Fig. 4. Determinación de la prevalencia de Leptospirosis equina respecto al
porcentaje positivo y negativo de caballos infectados del Hipódromo Miguel Salem
Dibo.
25%
75%
% Casos Hembras infectadas
positivo negativo
25
De la población de machos muestreados se estableció la prevalencia de la enfermedad
en un 11,11% que correspondió a un macho de seis años. (Figura 5) (Anexo VIII).
Fig. 5. Determinación de la prevalencia de Leptospirosis equina respecto al
porcentaje positivo y negativo de caballos infectados del Hipódromo Miguel Salem
Dibo.
26
V. DISCUSIÓN
En la presente investigación se estableció que la prevalencia de la Leptospira en el
Hipódromo Miguel Salem Dibo del cantón Samborondón corresponde a un 15,38 %
casos positivos y un 84.60 % casos negativos.
Ríos et.al., (2013) en Colombia realizaron un estudio de la Prevalencia de Leptospira
Spp en 42 equinos de la vereda Guatiguará del municipio de Piedecuesta Santander
mediante la prueba de Microaglutinación (MAT), tuvieron como resultado 28 casos
positivos para uno o más serovares, lo que representó una prevalencia del 66,7% para
la población muestreada; de un total de 11 machos y 31 hembras muestreadas, 9
(81,8%) y 19 (61,3%) respectivamente, resultaron positivos. En otro estudio,
Troncoso y et.al., (2013) extrajeron sangre de 55 equinos pertenecientes al Centro
Ecuestre de la Escuela Artillería de Linares, Región del Maule, en Chile
determinando una seropositividad general del 65,4% de Leptospira. En cambio, en
nuestro estudio sobre los caballos del Hipódromo Miguel Salem Dibo en el Ecuador
se presentó una prevalencia de 15,38 % casos positivos y un 84.60 % casos negativos.
En cuanto a la prevalencia respecto a sexo de la población muestreada, tenemos que
del total de muestras (13) el 30,76% correspondió a hembras (4) y el 69,24% a
machos (9). Con esto, podemos darnos cuenta que en nuestra investigación la
prevalencia de Leptospirosis fue menor en comparación con los otros estudios
mencionados.
En una investigación extendida de Milas y et.al., (2013) sobre la aparición y el
mantenimiento de Leptospira serovares Australis y Bratislava en animales
domésticos y salvajes en Croacia, en lo que respecta a los caballos evaluados, en sus
resultaron obtuvieron que la seroprevalencia más alta para los caballos se han
27
encontrado serovares Bratislava en 1093 (28,20%) muestras, serovares Pomona en
574 (14,81%) y serovares Australis en 479 (12,36%); siendo mayor porcentaje de
prevalencia que en nuestro presente estudio.
Castillo y et.al., (2007) en Cuba realizaron una investigación sobre la Prevalencia de
leptospirosis en equinos de tracción en la ciudad de Santa Clara en Cuba, utilizando
como método estadístico muestreo al azar (al igual que el presente estudio) de 390
caballos, de los cuales el 20% de los sueros fueron reactores positivos con títulos
máximos de 1/100 de Leptospira (interrogan), en cambio en el presente estudio el
porcentaje encontrado es menor.
En el trabajo realizado por Caro y et.al., (2007) sobre la prevalencia de Leptospira
spp en equinos c, identificaron una prevalencia significativa de Leptospira en un 40,4
%, teniendo un mayor porcentaje de casos positivos con respecto a la prevalencia de
los equinos del Hipódromo Miguel Salem Dibo (15,38%).
28
VI. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
De la presente investigación se concluye y se recomienda lo siguiente:
6.1. CONCLUSIONES
6.1.1. Se cumplió con los objetivos específicos propuestos, y se concluyó que
en el hipódromo Miguel Salem Dibo se encontró un 15,38% de casos de
leptospirosis en caballos de ambos sexos y de edades de 2 y 6 años durante el
mes de Octubre, en que se hizo la investigación.
6.1.2. En cuanto a la prevalencia respecto a sexo de la población muestreada,
tenemos que del total de muestras el 30,76% correspondió a hembras y el
69,24% a machos.
6.1.3. No hay diferencia porcentual de la presencia de leptospirosis entre machos
y hembras, pues se encontró el 7,69% que corresponde a la susceptibilidad para
cada uno de los sexos.
6.1.4. Se determinó que los equinos de 2 y 6 años fueron más susceptibles a la
enfermedad (15%).
6.1.5. De la población muestreada por edades se reparte en el 38% de equinos
que correspondió a 3 años, el 15% de animales muestreados fue de 2 y 6 años
para cada una de las edades mencionadas. El 8% de animales muestreados fue de
4, 5, 8 y 9 años para cada una de las edades.
29
6.2. RECOMENDACIONES
6.2.1. Tomar las medidas prevenciones y controles para evitar que los animales
se enfermen.
6.2.2. Concientizar a los nuevos dueños de los animales sobre el problema de
salud pública y animal de esta enfermedad.
6.2.3. Sensibilizar a la comunidad para que colaboren en el desarrollo de las
actividades de prevención y control de Leptospirosis.
6.2.4. Realizar campañas sobre prevención y control del hipódromo miguel
Salen Dibo.
6.2.5. Realizar estudios epidemiológicos anuales en el hipódromo Miguel Salen
Dibo para tener noción sobre la prevalencia de la enfermedad.
6.2.6. Realizar estudios para determinar que serogrupo o serovar se encuentra
presente en los animales del hipódromo.
6.2.7. Mantener el monitoreo constante sobre la presencia de la leptospira.
6.2.8. Hacer controles de laboratorio en los animales que ingresan al hipódromo.
6.2.9. Realizar de educación y socialización de todos los involucrados en el
proceso de crianza y manejo de los equinos del hipódromo.
30
VII. RESUMEN
El presente trabajo de investigación se realizó en el Hipódromo Miguel Salem Dibo,
ubicado en el Km 10.5 de la Vía La Puntilla, Cantón Samborondón de la Provincia
del Guayas, com una Temperatura promedio: 25.4 °C a 31°C y una altitud media
de 8 msnm, durante el mes de octubre del 2014.
De la población de equinos del Hipódromo Miguel Salem Dibo se realizó un
muestreo de 13 equinos, y se los analizó mediante el método estadístico descriptiva
porcentual dividiéndolos por edades y sexo. La prueba de laboratorio usada en los
animales muestreados fue la prueba de micro aglutinación de placas para lo que se
realizó el etiquetado respectivo para su confirmación de diagnóstico en el laboratorio
del Instituto Nacional de Investigación en Salud Pública, estableciéndose que la
prevalencia de Leptospira en el Hipódromo Miguel Salem Dibo es de un 15,38% de
casos positivos del total de la muestra, correspondiendo ésta a animales
comprendidos entre las edades de 2 a 6 años. Se estableció que un 7,69 %
correspondió para animales de 2 años y otro de 7,69 % para animales de 6 años, en
cuanto al sexo de la población muestreada se estableció que el 25% correspondió a
hembras y el 11,11% a machos.
Palabras claves: Caballos, Hipódromo Miguel Salem Dibo, serovar, Prueba de
micro aglutinación en placas, INSPI.
31
VIII. SUMMARY
The present work of investigation Michael Salem Dibo located in the Km carried out
in the Racetrack 10.5 of the Route The Tack, Canton Samborondón of the Province of
the Guayas, com an average Temperature: 25.4 °C to 31°C and one average altitude
of 8 msnm, during October, 2014.
Of the population of equine of the Racetrack Michael Salem Dibo carried out a
sampling of 13 equine ones, and they were analyzed by means of the statistical
method descriptive percentage dividing them by ages and sex. The laborator test used
in the sampled animals was the test of mike agglutination of plates for what the
respective labelling was realized for his confirmation of diagnosis in the laboratory of
the National Institute of Investigation in Public Health, Being established that
Leptospira's prevalencia in the Racetrack Michael Salem Dibo is 15,38 % of positive
cases of the total of the sample, corresponding this one to animals understood
between the ages of 2 to 6 years. It was found that 7,69 % corresponded for animals
of 2 years and other one of 7,69 % for animals of 6 years, as for the sex of the
sampled population it was found that 25 % corresponded to females and 11,11 % to
males.
Keywords: Horses, Hippodrome Miguel Salem Dibo, serovar, micro agglutination
plates, INSPI.
32
IX. BIBLIOGRAFÍA
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35
X. ANEXOS
ANEXO I. Localización geográfica del Hipódromo Miguel Salem Dibo.
Google maps (2015)
36
ANEXO II. Especies de Leptospira.
Patógenas Saprofitas
L. interrogans
L. borgpetersenii
L. noguchii
L. santarosai
L. alexanderi
L. kirschneri
L. meyeri
L. fainei
L. Weilii
L. inadai
L. biflexa
L. wolbachii
L. parva
Obtenido de: Marisol Castillo Hernández (2014)
37
ANEXO III. Hoja de campo.
Elaborado por la autora.
HOJA DE CAMPO
Lugar Hipódromo Miguel Salem Dibo
Raza Caballo Pura Sangre
Fecha de muestra # Muestra Nombre Edad Sexo
38
ANEXO IV. Hoja de Laboratorio.
HOJA DE LABORATORIO
Lugar Hipódromo Miguel Salem Dibo
Ciudad Guayaquil
Raza Caballo Pura Sangre MAT(LEPTOSPIRA)
Fecha de muestra # muestra Nombre Edad Sexo RESULTADOS
Elaborado por la autora.
39
ANEXO V. Hoja de campo con los datos de los caballos.
HOJA DE CAMPO
Lugar Hipódromo Miguel Salem Dibo
Raza Caballo Pura Sangre Fecha de
muestra # muestra Nombre Edad/Años Sexo
02-Oct-14 1 Presley boy 6 M
02-Oct-14 2 Bien Parada 3 H
02-Oct-14 3 Gambini 8 M
02-Oct-14 4 Mash 3 M
02-Oct-14 5 Picolowat 5 M
02-Oct-14 6 Ponte Pilas 3 M
02-Oct-14 7 Espirulina 3 H
02-Oct-14 8 Víctor Manuel 3 M
02-Oct-14 9 Kelly 2 H
02-Oct-14 10 Mano Santa 9 H
02-Oct-14 11 Romántico 2 M
02-Oct-14 12 Apasionado 4 M
02-Oct-14 13 Tordillo 6 M
Meza Bermeo, M.E. 2015. Trabajo de Titulación.
40
ANEXO VI. Hoja de Laboratorio con los respectivos resultados de los análisis.
HOJA DE LABORATORIO
Lugar Hipódromo Miguel Salem Dibo
Ciudad Guayaquil
Raza Caballo Pura
Sangre
MAT(LEPTOSPIRA)
Fecha de
muestra #
muestra
Nombre Edad/Años Sexo RESULTADOS
02-Oct-14 1 Presley boy 6 M NEGATIVO
02-Oct-14 2 Bien Parada 3 H NEGATIVO
02-Oct-14 3 Gambini 8 M NEGATIVO
02-Oct-14 4 Mash 3 M NEGATIVO
02-Oct-14 5 Picolowat 5 M NEGATIVO
02-Oct-14 6 Ponte Pilas 3 M NEGATIVO
02-Oct-14 7 Espirulina 3 H NEGATIVO
02-Oct-14 8 Victor
Manuel
3 M NEGATIVO
02-Oct-14 9 Kelly 2 H POSITIVO
02-Oct-14 10 Mano Santa 9 H NEGATIVO
02-Oct-14 11 Romántico 2 M NEGATIVO
02-Oct-14 12 Apasionado 4 M NEGATIVO
02-Oct-14 13 Tordillo 6 M POSITIVO
Meza Bermeo, M.E. 2015. Trabajo de Titulación.
41
ANEXO VII. Determinación de la prevalencia de Leptospira en el
Hipódromo Miguel Salem Dibo.
# DE CASOS POSITIVOS % NEGATIVOS %
13
2
15,38
11
84,6
ANEXO VIII. Determinación de la prevalencia de Leptospira en el Hipódromo
Miguel Salem Dibo por sexo.
SEXO # CASOS M. POSITIVOS %
HEMBRA 4 1 25
MACHO 9 1 11,11
ANEXO IX. Determinación de la prevalencia de Leptospira en el Hipódromo
Miguel Salem Dibo por casos positivos en sexo.
SEXO TOTAL POSITIVOS %
HEMBRA 13 1 7,69
MACHO 13 1 7,69
ANEXO X. Determinación de la prevalencia de Leptospira en el Hipódromo
Miguel Salem Dibo respecto al sexo en los caballos.
SEXO TOTAL TAMANO POB. %
HEMBRA 4 13 30,76
MACHO 9 13 69,24
42
ANEXO XI. Cronograma para la realización del trabajo de titulación.
ACTIVIDADES O ETAPAS DURACIÓN (MESES)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
1. Diseño del trabajo de titulación.
2. Establecer contactos con directivos.
3. Recolección de la información. Observación de
campo.
Fuentes primarias.
Fuentes secundarias.
4. Elaborar Marco Teórico.
5. Procesar los datos. (Codificación y tabulación).
6. Tratamiento matemático y estadístico de los
datos exp.
7. Análisis e interpretación de los resultados.
8. Redacción preliminar.
9. Elaborar informe final.
10. Entregar informe final.
ANEXO XII. Fotos del Hipódromo Miguel Salem Dibo.
Foto # 1. Equinos del Hipódromo Miguel Salem Dibo Macho de 4 años.
43
Foto # 2. Equino del Hipódromo Miguel Salem Dibo Macho de 5 años.
Foto # 3. Equino preparándolo para la toma de muestras.
44
Foto # 4. Sitio de la extracción de sangre de los caballo en la yugular.
Foto # 5. Situación de inyección en la yugular del equino.
Meza Bermeo, M.E. 2015. Trabajo de Titulación.
45
ANEXO XII. Informe de los resultados del laboratorio.
Meza Bermeo, M.E. 2015. Trabajo de Titulación.
46
Meza Bermeo, M.E. 2015. Trabajo de Titulación.