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  • UNIVERSIDADE DE SO PAULO

    FACULDADE DE FILOSOFIA, CINCIAS E LETRAS DE RIBEIRO PRETO

    DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA

    Hapltipos ligados ao cromossomo X na investigao de paternidade em casos incompletos

    Igor Caetano Dias Alcars

    Monografia apresentada ao Departamento de Biologia da

    Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto da

    Universidade de So Paulo, como parte das exigncias para a

    obteno do ttulo de Bacharel em Cincias Biolgicas.

    RIBEIRO PRETO SP

    2015

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    UNIVERSIDADE DE SO PAULO

    FACULDADE DE FILOSOFIA, CINCIAS E LETRAS DE RIBEIRO PRETO

    DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA

    Hapltipos ligados ao cromossomo X na investigao de paternidade em casos incompletos

    Igor Caetano Dias Alcars

    Monografia apresentada ao Departamento de Biologia da

    Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto da

    Universidade de So Paulo, como parte das exigncias para a

    obteno do ttulo de Bacharel em Cincias Biolgicas.

    Orientador: Aguinaldo Luiz Simes

    RIBEIRO PRETO SP

    2015

  • 3 / 5 1

    Autorizo a reproduo e divulgao total ou parcial deste trabalho, por qualquer meio convencional ou eletrnico, para fins de estudo e pesquisa, desde que citada a fonte.

    Alcars, Igor Caetano Dias

    Hapltipos ligados ao cromossomo X na investigao de paternidade em casos incompletos. Ribeiro Preto, 2015.

    50 p. : il.3 ; 30 cm

    Trabalho de Concluso de Curso, apresentada Faculdade de Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto/USP. rea de concentrao: Gentica.

    Orientador: Simes, Aguinaldo Luiz.

    1. X-STR. 2. Gentica de Populaes. 3. Paternidade. 4. Hapltipos. 5. Cromossomo X.

  • 4 / 5 1

    A todos meus professores de vida, por me ensinarem

    o prazer do conhecimento, a alegria de sorrir

    e a persistncia em lutar.

    Dedico.

  • 5 / 5 1

    SUMRIO AGRADECIMENTOS ........................................................................................................... 6

    RESUMO ............................................................................................................................... 7

    INTRODUO ...................................................................................................................... 9

    HIPTESE/OBJETIVOS ..................................................................................................... 11

    METODOLOGIA ................................................................................................................. 12

    Amostras ........................................................................................................................... 12

    Lcus analisados ............................................................................................................... 12

    Anlise laboratorial........................................................................................................... 14

    Extrao de DNA.......................................................................................................... 14

    Reao em Cadeia da Polimerase (Polymerase Chain Reaction - PCR) ..................... 14

    PAGE ............................................................................................................................ 14

    RESULTADOS .................................................................................................................... 15

    DISCUSSO ........................................................................................................................ 40

    CONCLUSO ...................................................................................................................... 41

    REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ................................................................................. 42

    ANEXO. PROTOCOLOS PARA ANLISE LABORATORIAL ...................................... 44

    Protocolo 1 EXTRAO DO DNA GENMICO ....................................................... 44

    Reagentes e solues .................................................................................................... 44

    Procedimentos .............................................................................................................. 44

    Protocolo 2 Reao em cadeia da polimerase ............................................................... 46

    Reagentes e solues .................................................................................................... 46

    Procedimento ................................................................................................................ 46

    Protocolo 3 Eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante .................................. 47

    Reagentes e solues .................................................................................................... 47

    Procedimento ................................................................................................................ 47

    Protocolo 4 Colorao com nitrato de prata .................................................................. 50

    Reagentes e solues .................................................................................................... 50

    Procedimento ................................................................................................................ 50

  • 6 / 5 1

    AGRADECIMENTOS

    Deus, por se fazer sempre presente em minha vida, seu amor incondicional e misericordioso

    me dando foras e condies para chegar at aqui mesmo em meio s turbulncias.

    Ao Prof. Dr. Aguinaldo Luiz Simes, pela orientao, amizade e parceria, desde o meu inocente

    terceiro ano da faculdade at as tensas vsperas de cada entrega de relatrio, seus

    conhecimentos transmitidos, compreenso e pacincia durante meu estgio.

    CNPq pelo apoio financeiro, aos professores membros da banca examinadora, Prof. Maura e

    Prof. Celso, por se fazerem tambm meus orientadores desde meus primeiros anos estagiando,

    e se mostrarem disponveis para avaliar este trabalho. Tambm a todos meus professores por

    quem desenvolvi grande admirao, Dalton, Bete, Annie, Eduardo, Maria Elena, Jesus, Aline,

    Mrcia, tambm Sheila e Suzi, e muitos outros. Vocs iluminaram meu futuro.

    Aos funcionrios do Departamento de Gentica, ao divertido Bloco B, as histrias da Edna e

    Bete, as risadas da R, o pessoal dos demais laboratrios, e todas as minhas companheiras de

    laboratrio que de alguma forma me auxiliaram ao longo do projeto, Marcela, Sabrina, Aline,

    Naty, Fernanda, Ayling, Las, Edilene, Vanessa e Polyana, principalmente minha colega de monografia Malu pelos momentos de descontrao e tenso coletiva.

    Em especial Cludia, Ana Lcia e Maria do Carmo, por me socorrerem nas horas de maior

    sufoco, me ajudarem em tudo que sempre pedi sem nunca reclamarem e pelas palavras de

    carinho, conforto e segurana nos momentos em que pensei desistir. Tambm a meu amigo

    Guilherme Jaccques pelas dicas, conselhos, artigos e motivaes na rea que escolhi seguir.

    Aos meus colegas de repblica Yoda, Pi, Suga, Bem-de-Vida e Bernah, por serem os melhores

    moradores com quem eu poderia me arrumar nesta graduao, aturarem meus barulhos

    acordado pela madrugada afora e terem sido uma segunda famlia em Ribeiro Preto nos

    momentos em que me senti s e desabrigado.

    USP e minha querida Fil, Atltica, CEB, Filormnica e repblica que ajudei a fundar,

    Cabrn, que me proporcionaram os melhores anos de esprito universitrio to sonhado. A todo

    o grupo da Natao e do Atletismo, em especial minha treinadora Fogs, pela energia e

    motivao que me deram.

    minha amada 48 turma da Bio pelos momentos de amizade, intrigas, desesperos em vsperas de provas e, principalmente, pelas risadas geradas no nosso estilo que fez de nossa turma nica.

    A todas as demais pessoas com quem trombei que de alguma forma colaboraram para facilitar

    minha vida ao longo da graduao. Agradeo tambm toda turma do Departamento de Qumica

    por me acolherem como um de vocs, aos meus veteranos, em especial Pde, Fralda e Matheus,

    e demais calouros que jamais esquecerei, assim como o apelido que aqui vesti com orgulho e

    carinho.

    Aos meus melhores amigos de Jaboticabal, Gui, Rogerinho, Breno, Barbra, Ana e Glucia,

    tambm Arthur, Bianca, Luza e LG, assim como meu irmo Matias, dentre outros tantos, que

    mesmo longe sempre estiveram presentes e me apoiando. Aos moleques da Confraria pela

    irmandade sem igual. Aos meus melhores irmos de classe Marcelo, Pepino, Muffin, Carona e

    Soc pelos momentos inesquecveis, brigas, risadas, choros, trabalhos, festas...! Sem vocs teria

    sido muito mais rdua a caminhada.

    minha famlia, avs, tios, primos, por serem meu porto seguro a cada fim de semana, e

    finalmente, aos meus pais Marcos e Zez que, depois de tantas discusses sobre o laboratrio, hoje podem ver o resultado de tanto esforo. Mesmo aos tropeos nestes cinco anos, eu nada

    seria nem aqui estaria se no fosse por cada lgrima, abrao e beijo de vocs em aceitar que

    estou crescendo. Tambm ao meu irmo Thiago, quem mais amo no mundo, meu heri e dolo.

    Por fim, vida e ao meu bom humor em sempre saber sorrir nos melhores e piores momentos.

  • 7 / 5 1

    RESUMO

    Quando se analisa a possibilidade de dois indivduos no aparentados serem compatveis

    com hiptese de parentesco, os STRs (Short Tanden Repeat) destacam-se por apresentarem